CN114259455A - 一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，在每120 mL修复乳液配制中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1‑0.5%的外泌体（EVs）、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。本发明制备的MSC外泌体具有良好的皮肤穿透性，可以直接渗透到达到真皮层后改善局部再生微环境。因此，应用其制备的面部抗衰老修复乳液对面部皮肤具有润滑保湿、抗皱除纹的作用。
Description
技术领域
一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，属于美容护肤领域。
技术背景
皱纹是指皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹。其产生与皮肤成纤维细胞的数量与状态具有直接关系。这是因为随着年龄的增加，纤维细胞的数量与活性状态降低，其分泌的胶原蛋白、透明质酸、弹性纤维等物质减少，故而无法支撑皮肤的正常架构，进而形成产生皱痕。胞增值迁移及胶原沉积的过程中起到了至关重要的作用。EVs可以被成纤维细胞摄取，促进其迁移、增殖；并通过促进Ⅰ 型胶原和Ⅲ 型胶原合并，可以增加神经-钙黏素，增殖细胞核抗原和细胞周期蛋白D1的基因表达，以加速皮肤的修复和再生。
而目前干细胞外泌体修复皱纹产品，由于外泌体制备成本高，产率低、保存时间短、且大多EVs异体培养获取，容易产生过敏等问题，因而限制其应用。
发明内容
本发明目的在于提供一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液。
本发明再一目的在于，提供上述修复乳液的制备。
本发明目的通过以下步骤实现：一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，在每120 mL修复乳液配制中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1-0.5 %的外泌体（EVs）、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
较优的，使用的脐带源间充质干细胞、EVs纯度较高，具有较好的抗过敏、高度安全特性。
较优的，EVs进行冷冻干燥储存，不仅运输方便而且提升保存的稳定性。
本发明还提供了一种上述含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液的制备方法，包括下述步骤：
EVs的制备：采用无酚红DMEM培养基进行脐带源间充质干细胞（MSC）传代配培养，每3天更换培养基，同时收集上清液，细胞融合度达到50％～90％时，进行传代或冻存；在4℃下，将上清液500×g离心10 min，然后吸取上清， 10000×g 离心30 min，随后 120000×g离心90 min，除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体(EVs)，将获得的EVs进行冷冻干燥，4℃备用，使用时直接生理盐水重悬溶解，配制成一定质量分数的溶液；
修复乳液的配制：在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1-0.5 %的外泌体（EVs）、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。其中，外泌体（EVs）质量分数可以为0.1 %、0.2 %、0.3%、0.4 %或0.5 %。
本发明提供一种间充质干细胞来源提取物在面部抗衰老修复乳液中的制备方法及应用，应用EVs制备的面部抗衰老修复乳液对面部皮肤具有润滑保湿、抗皱除纹的作用，同时EVs对面部皮肤微环境的改善，促进紫外线损伤及老化的皮肤重新自我修复，达到再生复原的作用，同时对创伤后形成的疤痕也具有一定的修复作用，且自体来源的EVs无免疫排次性物质，具有较好的抗过敏、高度安全特性。本发明制备的MSC外泌体具有良好的皮肤穿透性，可以直接渗透到达到真皮层后改善局部再生微环境。因此，应用其制备的面部抗衰老修复乳液对面部皮肤具有润滑保湿、抗皱除纹的作用。
具体实施方式
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
实施例一：
一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，按下述步骤制备：
第一步：进行EVs制备：采用无酚红DMEM培养基进行MSC传代配培养， 每3天更换培养基，同时收集上清液，细胞融合度达到50％～90％时，进行传代或冻存；在4℃下，将上清液500×g离心10 min，然后吸取上清， 10000×g 离心30 min，随后 120000×g离心90min，除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体(EVs)；将获得的EVs进行冷冻干燥，4 ℃备用，使用时直接生理盐水重悬溶解，配制成一定质量分数的溶液；
第二步，修复乳液的配制：在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
使用本实施例修复乳液效果见表2，无红肿，抬头纹折痕微微变浅淡。
实施例二：
一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，第一步与“实施例一中第一步”相同，按下述步骤制备：
第二步中，修复乳液配制。在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.5 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
使用本实施例修复乳液效果见表2，抬头纹折痕明显变浅淡，恢复到等级二程度。
实施例三：
一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，第一步与“实施例一中第一步”相同，按下述步骤制备：
第二步中，修复乳液配制：在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.3 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
使用本实施例修复乳液效果见表2，皮肤饱满，美白润泽，不做表情时有小细微纹路，恢复到等级二程度。
实施例四：
一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，第一步与“实施例一中第一步”相同，按下述步骤制备：
第二步中，修复乳液配制：在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
使用本实施例修复乳液效果见表2，抬头纹明显消失，皮肤变得紧致、光泽，不做表情时无肉眼可见细纹，做表情才看见纹路，恢复到等级一程度。
为测试产品抗皱效果，选取人面部抬头纹改善效果为评价指标。选取20名抬头纹皱纹分级均为3级的志愿者为试验对象，每5人一组，将抗衰老修复用乳液涂抹自愿者面部，轻柔拍打30 min，连续使用20天
Ⅰ 组：按实施例一的修复乳液，由每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
II组：按实施例二的修复乳液，由120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.5 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子配制而成。
Ⅲ组：按实施例三的修复乳液，由120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.3 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子配制而成。
IV组：按实施例四的修复乳液，由120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1 %的EVs 、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子配制而成
由表2可见，在3级面部抬头纹实验者在使用本产品修复乳液后，抬头纹均出现改善情况，且随着配方中EVs质量分数的不断提升，抬头纹皱纹改善效果越好，表明脂肪源干细胞分泌的EVs的添加，能促进成纤维细胞的增殖能力、促进胶原蛋白的合成，能较好的改善面部皮肤皱纹问题。
Claims (4)
1.一种含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，其特征在于，在每120mL修复乳液配制中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1-0.5 %的外泌体（EVs）、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6 mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
2.根据权利要求1所述含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，其特征在于，使用的脐带源间充质干细胞、EVs纯度较高，具有较好的抗过敏、高度安全特性。
3.根据权利要求1所述含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液，其特征在于，EVs进行冷冻干燥储存。
4.一种根据权利要求1所述含有间充质干细胞来源提取物的面部抗衰老修复乳液的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
EVs的制备：采用无酚红DMEM培养基进行脐带源间充质干细胞（MSC）传代配培养， 每3天更换培养基，同时收集上清液，细胞融合度达到50％～90％时，进行传代或冻存；在4℃下，将上清液500×g离心10 min，然后，吸取上清， 10000×g 离心30 min，随后 120000×g离心90 min，除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体(EVs)；将获得的EVs进行冷冻干燥，4℃备用，使用时直接生理盐水重悬溶解，配制成一定质量分数的溶液；
修复乳液的配制：在每120 mL修复乳液中含100 mL的生理盐水溶液、质量分数为0.1-0.5 %的外泌体（EVs）、8 ml抗坏血酸磷酸酯钠、6mL透明质酸钠、 6 mL二甲氨基乙醇、5万单位人碱性成纤维细胞生长因子。
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| CN115089543A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-09-23 | 上海简巨医学生物工程有限公司 | 含有间充质干细胞来源提取物的舒缓液的制备方法 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20220401 |
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