CN114225112A - 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,属于生物科技技术领域,包括如下步骤将原料进行清洗、漂白、脱脂和消味;将原料放入无花果蛋白酶溶液中酶解;将原料加入过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤;采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡;胶原溶解后放置搅拌桶搅拌;使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液;取过滤后的少量胶原小样,配制所需要的浓度的固含量,搅拌均匀待用;胶原溶液离心后倒入不锈容器,振荡平整,置入超净台上风干形成膜状;待前一次的胶原干燥后,重复风干步骤1‑5次,形成生物复合膜;待2‑5次次风干层积完成后,使用氨水中和清洗至中性;将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡过滤后清洗至中性;干燥,分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
Description
技术领域
本发明涉及生物科技技术领域,具体为一种脑脊液隔离修复膜的制备方法。
背景技术
在脑科手术中,常常需要对脑(脊)液进行缝合隔离修复,在缝合生物膜的外科临床手术中,常常需要使用修复膜进行缝合处理,而目前的人工生物膜的韧性和强度均难以满足手术需求,给手术带来困难,为此我们提出一种脑脊液隔离修复膜的制备方法用于解决上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,包括如下步骤:
S1、前处理
S101、除杂:将原料使用纯化水浸泡,清洗去除杂质(毛质和脂肪),清洗;
S102、分解色素:将原料放入漂白液中浸泡24-48小时,分解色素后过滤清洗;
S103、脱脂:将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂,过滤清洗;
S104、消味:将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味,过滤清洗;
S2、提取
S201、软化:将原料放入0.05-0.5%无花果蛋白酶溶液中酶解,于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出;
S202、清洗:将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1%的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤,并用清水清洗;
S203、溶解:采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时;
S204、搅拌:胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时,搅拌转速100-300R/min;
S205、提纯:使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液,去除未溶解好的胶原;
S206、定值:取过滤后的少量胶原小样,配制所需要的浓度的固含量,搅拌均匀待用;
S3、制膜
S301、风干:取步骤S206定值后的胶原溶液,配制固含量0.5-1.5%,搅拌均匀,胶原量500-2000g,离心后倒入不锈容器,振荡平整,置入超净台上风干形成膜状;
S302、层积复合:待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后,重复风干步骤1-5次,形成生物复合膜;
S303、酸碱中和:待2-5次次风干层积完成后,使用3-15%氨水中和3-12小时后,取生物复合膜清洗至中性、沥干;
S304、生物交联:将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时,过滤后清洗至中性;
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥,分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
优选的一种实施案例,步骤S102中,所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L,1-10%过氧化氢溶液,所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例,所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱,步骤S103中,所述异丙醇溶液的浓度为5-10%,所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例,步骤S104中,所述氯化钠溶液的浓度为1-5%,所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例,步骤S201中,所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g),具体酶解过程为:按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液,然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中,于37℃培养箱内进行搅拌,搅拌时间1-3小时,总培养时间20-24小时,最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时;。
优选的一种实施案例,步骤S203中,所述酸溶液为0.1-0.5%浓度的丙二酸和0.1-1mol/L浓度的醋酸中的一种,所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g),步骤S205中,所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目,步骤S206中,60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
优选的一种实施案例,步骤S301中,所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器,风干温度为25-45℃,湿度为30-70%。
优选的一种实施案例,步骤S304中,生物交联具体过程为:选取复合膜质量的0.01-2%的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液,然后将复合膜加入交联剂溶液内,搅拌均匀,水浴加热35-60℃开始交联反应,反应2-10小时,再加入5-20%的氨水反应1-2小时,然后将复合膜取出,使用生理盐水清洗纯化,重复2-5次。
优选的一种实施案例,所述交联剂为酯类、醛类、多糖类和胺类中的一种,所述氨水与交联剂溶液的体积比为1:2。
本发明的有益效果在于:本发明通过将哺乳动物的皮或者肌腱进行分解色素,脱脂,消味处理,然后通过无花果蛋白酶溶液酶解,通过酸溶液溶解,过滤得到胶原溶液,通过对胶原溶液进行固含量定值,再通过风干、层层叠加,形成生物复合膜,最终通过交联处理和冷冻干燥,复合层1-5次,该方法优势在于可以形成高韧性、高强度的复合生物膜,适用于需要缝合生物膜的外科临床手术,解决了临床对生物膜缝合强度的要求,制备方法简单。
附图说明
图1为本发明实施例提供的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法的示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:如图1,本发明提供了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,包括如下步骤:
S1、前处理
S101、除杂:将原料使用纯化水浸泡,清洗去除杂质(毛质和脂肪),清洗;
S102、分解色素:将原料放入漂白液中浸泡24-48小时,分解色素后过滤清洗;
S103、脱脂:将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂,过滤清洗;
S104、消味:将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味,过滤清洗;
S2、提取
S201、软化:将原料放入0.05-0.5%无花果蛋白酶溶液中酶解,于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出;
S202、清洗:将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1%的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤,并用清水清洗;
S203、溶解:采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时;
S204、搅拌:胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时,搅拌转速100-300R/min;
S205、提纯:使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液,去除未溶解好的胶原;
S206、定值:取过滤后的少量胶原小样,配制所需要的浓度的固含量,搅拌均匀待用;
S3、制膜
S301、风干:取步骤S206定值后的胶原溶液,配制固含量0.5-1.5%,搅拌均匀,胶原量500-2000g,离心后倒入不锈容器,振荡平整,置入超净台上风干形成膜状;
S302、层积复合:待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后,重复风干步骤1-5次,形成生物复合膜;
S303、酸碱中和:待2-5次次风干层积完成后,使用3-15%氨水中和3-12小时后,取生物复合膜清洗至中性、沥干;
S304、生物交联:将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时,过滤后清洗至中性;
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥,分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
进一步的,步骤S102中,所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L,1-10%过氧化氢溶液,所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的,步骤S103中,所述异丙醇溶液的浓度为5-10%,所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的,步骤S104中,所述氯化钠溶液的浓度为1-5%,所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
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进一步的,步骤S203中,所述酸溶液为0.1-0.5%浓度的丙二酸,所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g),步骤S205中,所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目,步骤S206中,60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
进一步的,步骤S301中,所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器,风干温度为25-45℃,湿度为30-70%。
进一步的,步骤S304中,生物交联具体过程为:选取复合膜质量的0.01-2%的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液,然后将复合膜加入交联剂溶液内,搅拌均匀,水浴加热35-60℃开始交联反应,反应2-10小时,再加入5-20%的氨水反应1-2小时,然后将复合膜取出,使用生理盐水清洗纯化,重复2-5次。
进一步的,所述交联剂为酯类,所述氨水与交联剂溶液的体积比为1:2。
实施例2:如图1,本发明提供了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,包括如下步骤:
S1、前处理
S101、除杂:将原料使用纯化水浸泡,清洗去除杂质(毛质和脂肪),清洗;
S102、分解色素:将原料放入漂白液中浸泡24-48小时,分解色素后过滤清洗;
S103、脱脂:将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂,过滤清洗;
S104、消味:将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味,过滤清洗;
S2、提取
S201、软化:将原料放入0.05-0.5%无花果蛋白酶溶液中酶解,于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出;
S202、清洗:将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1%的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤,并用清水清洗;
S203、溶解:采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时;
S204、搅拌:胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时,搅拌转速100-300R/min;
S205、提纯:使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液,去除未溶解好的胶原;
S206、定值:取过滤后的少量胶原小样,配制所需要的浓度的固含量,搅拌均匀待用;
S3、制膜
S301、风干:取步骤S206定值后的胶原溶液,配制固含量0.5-1.5%,搅拌均匀,胶原量500-2000g,离心后倒入不锈容器,振荡平整,置入超净台上风干形成膜状;
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S304、生物交联:将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时,过滤后清洗至中性;
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥,分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
进一步的,所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱,步骤S102中,所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L,1-10%过氧化氢溶液,所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的,步骤S103中,所述异丙醇溶液的浓度为5-10%,所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的,步骤S104中,所述氯化钠溶液的浓度为1-5%,所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的,步骤S201中,所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g),具体酶解过程为:按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液,然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中,于37℃培养箱内进行搅拌,搅拌时间1-3小时,总培养时间20-24小时,最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时;。
进一步的,步骤S203中,所述酸溶液为0.1-1mol/L浓度的醋酸,所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g),步骤S205中,所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目,步骤S206中,60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
进一步的,步骤S301中,所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器,风干温度为25-45℃,湿度为30-70%。
进一步的,步骤S304中,生物交联具体过程为:选取复合膜质量的0.01-2%的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液,然后将复合膜加入交联剂溶液内,搅拌均匀,水浴加热35-60℃开始交联反应,反应2-10小时,再加入5-20%的氨水反应1-2小时,然后将复合膜取出,使用生理盐水清洗纯化,重复2-5次。
进一步的,所述交联剂为多糖类,所述氨水与交联剂溶液的体积比为1:2。
综上所述,本发明通过将哺乳动物的皮或者肌腱进行分解色素,脱脂,消味处理,然后通过无花果蛋白酶溶液酶解,通过酸溶液溶解,过滤得到胶原溶液,通过对胶原溶液进行固含量定值,再通过风干、层层叠加,形成生物复合膜,最终通过交联处理和冷冻干燥,复合层1-5次,该方法优势在于可以形成高韧性、高强度的复合生物膜,适用于需要缝合生物膜的外科临床手术,解决了临床对生物膜缝合强度的要求,制备方法简单。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (9)
1.一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、前处理;S2、提取;S3、制膜;
所述S1包括:
S101、将原料使用纯化水浸泡,清洗去除杂质(毛质和脂肪),清洗;
S102、将原料放入漂白液中浸泡24-48小时,分解色素后过滤清洗;
S103、将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂,过滤清洗;
S104、将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味,过滤清洗;
所述S2包括:
S201、将原料放入0.05-0.5%无花果蛋白酶溶液中酶解,于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出;
S202、将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1%的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤,并用清水清洗;
S203、采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时;
S204、胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时,搅拌转速100-300R/min;
S205、使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液,去除未溶解好的胶原;
S206、取过滤后的少量胶原小样,配制所需要的浓度的固含量,搅拌均匀待用;
所述S3包括:
S301、取步骤S206定值后的胶原溶液,配制固含量0.5-1.5%,搅拌均匀,胶原量500-2000g,离心后倒入不锈容器,振荡平整,置入超净台上风干形成膜状;
S302、待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后,重复风干步骤1-5次,形成生物复合膜;
S303、待2-5次次风干层积完成后,使用3-15%氨水中和3-12小时后,取生物复合膜清洗至中性、沥干;
S304、将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时,过滤后清洗至中性;
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥,分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
2.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱,步骤S102中,所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L,1-10%过氧化氢溶液,所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
3.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S103中,所述异丙醇溶液的浓度为5-10%,所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
4.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S104中,所述氯化钠溶液的浓度为1-5%,所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
5.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S201中,所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g),具体酶解过程为:按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液,然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中,于37℃培养箱内进行搅拌,搅拌时间1-3小时,总培养时间20-24小时,最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时。
6.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S203中,所述酸溶液为0.1-0.5%浓度的丙二酸和0.1-1mol/L浓度的醋酸中的一种,所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g),步骤S205中,所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目,步骤S206中,60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
7.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S301中,所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器,风干温度为25-45℃,湿度为30-70%。
8.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:步骤S304中,生物交联具体过程为:选取复合膜质量的0.01-2%的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液,然后将复合膜加入交联剂溶液内,搅拌均匀,水浴加热35-60℃开始交联反应,反应2-10小时,再加入5-20%的氨水反应1-2小时,然后将复合膜取出,使用生理盐水清洗纯化,重复2-5次。
9.如权利要求8所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法,其特征在于:所述交联剂为酯类、醛类、多糖类和胺类中的一种,所述氨水与交联剂溶液的体积比为1:2。
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Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107551324A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-01-09 | 北京华信佳音医疗科技发展有限责任公司 | 一种可缝合硬膜修补材料的制备及其应用 |
WO2018090341A1 (zh) * | 2016-11-18 | 2018-05-24 | 深圳市成农生物材料有限公司 | 人工复合膜、制备方法及其应用 |
CN111714705A (zh) * | 2020-06-12 | 2020-09-29 | 福建纽伯尔生物科技有限公司 | 一种可缝合生物膜、制备方法及应用 |
CN112891609A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-04 | 蚌埠学院 | 一种以羊皮为原料的多孔材料及其制备方法、应用 |
WO2021145791A1 (ru) * | 2020-01-16 | 2021-07-22 | Ефим Семенович ВАЙНЕРМАН | Сверхпрочная ультратонкая коллагеновая мембрана и способ ее получения |
CN113384748A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-09-14 | 尚诚怡美(成都)生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白真皮植入剂及其制备方法 |
-
2021
- 2021-11-22 CN CN202111385952.6A patent/CN114225112A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018090341A1 (zh) * | 2016-11-18 | 2018-05-24 | 深圳市成农生物材料有限公司 | 人工复合膜、制备方法及其应用 |
CN107551324A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-01-09 | 北京华信佳音医疗科技发展有限责任公司 | 一种可缝合硬膜修补材料的制备及其应用 |
WO2021145791A1 (ru) * | 2020-01-16 | 2021-07-22 | Ефим Семенович ВАЙНЕРМАН | Сверхпрочная ультратонкая коллагеновая мембрана и способ ее получения |
CN111714705A (zh) * | 2020-06-12 | 2020-09-29 | 福建纽伯尔生物科技有限公司 | 一种可缝合生物膜、制备方法及应用 |
CN112891609A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-04 | 蚌埠学院 | 一种以羊皮为原料的多孔材料及其制备方法、应用 |
CN113384748A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-09-14 | 尚诚怡美(成都)生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白真皮植入剂及其制备方法 |
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