CN114225112A - 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 - Google Patents
一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114225112A CN114225112A CN202111385952.6A CN202111385952A CN114225112A CN 114225112 A CN114225112 A CN 114225112A CN 202111385952 A CN202111385952 A CN 202111385952A CN 114225112 A CN114225112 A CN 114225112A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- cleaning
- collagen
- hours
- cerebrospinal fluid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 title claims abstract description 24
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 59
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 49
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract description 47
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 41
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 34
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 33
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 31
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims abstract description 29
- 238000007605 air drying Methods 0.000 claims abstract description 17
- 108090000270 Ficain Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 14
- POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N ficin Chemical compound FI=CI=N POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 235000019836 ficin Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000003475 lamination Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 101
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 230000008439 repair process Effects 0.000 claims description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 8
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 7
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 4
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 3
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 2
- RKTYLMNFRDHKIL-UHFFFAOYSA-N copper;5,10,15,20-tetraphenylporphyrin-22,24-diide Chemical group [Cu+2].C1=CC(C(=C2C=CC([N-]2)=C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(N=2)=C(C=2C=CC=CC=2)C2=CC=C3[N-]2)C=2C=CC=CC=2)=NC1=C3C1=CC=CC=C1 RKTYLMNFRDHKIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001877 deodorizing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/24—Collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
Abstract
本发明公开了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，属于生物科技技术领域，包括如下步骤将原料进行清洗、漂白、脱脂和消味；将原料放入无花果蛋白酶溶液中酶解；将原料加入过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤；采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡；胶原溶解后放置搅拌桶搅拌；使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液；取过滤后的少量胶原小样，配制所需要的浓度的固含量，搅拌均匀待用；胶原溶液离心后倒入不锈容器，振荡平整，置入超净台上风干形成膜状；待前一次的胶原干燥后，重复风干步骤1‑5次，形成生物复合膜；待2‑5次次风干层积完成后，使用氨水中和清洗至中性；将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡过滤后清洗至中性；干燥，分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
Description
技术领域
本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种脑脊液隔离修复膜的制备方法。
背景技术
在脑科手术中，常常需要对脑(脊)液进行缝合隔离修复，在缝合生物膜的外科临床手术中，常常需要使用修复膜进行缝合处理，而目前的人工生物膜的韧性和强度均难以满足手术需求，给手术带来困难，为此我们提出一种脑脊液隔离修复膜的制备方法用于解决上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，包括如下步骤：
S1、前处理
S101、除杂：将原料使用纯化水浸泡，清洗去除杂质(毛质和脂肪)，清洗；
S102、分解色素：将原料放入漂白液中浸泡24-48小时，分解色素后过滤清洗；
S103、脱脂：将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂，过滤清洗；
S104、消味：将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味，过滤清洗；
S2、提取
S201、软化：将原料放入0.05-0.5％无花果蛋白酶溶液中酶解，于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出；
S202、清洗：将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1％的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤，并用清水清洗；
S203、溶解：采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时；
S204、搅拌：胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时，搅拌转速100-300R/min；
S205、提纯：使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液，去除未溶解好的胶原；
S206、定值：取过滤后的少量胶原小样，配制所需要的浓度的固含量，搅拌均匀待用；
S3、制膜
S301、风干：取步骤S206定值后的胶原溶液，配制固含量0.5-1.5％，搅拌均匀，胶原量500-2000g，离心后倒入不锈容器，振荡平整，置入超净台上风干形成膜状；
S302、层积复合：待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后，重复风干步骤1-5次，形成生物复合膜；
S303、酸碱中和：待2-5次次风干层积完成后，使用3-15％氨水中和3-12小时后，取生物复合膜清洗至中性、沥干；
S304、生物交联：将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时，过滤后清洗至中性；
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥，分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
优选的一种实施案例，步骤S102中，所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L，1-10％过氧化氢溶液，所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例，所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱，步骤S103中，所述异丙醇溶液的浓度为5-10％，所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例，步骤S104中，所述氯化钠溶液的浓度为1-5％，所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
优选的一种实施案例，步骤S201中，所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g)，具体酶解过程为：按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液，然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中，于37℃培养箱内进行搅拌，搅拌时间1-3小时，总培养时间20-24小时，最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时；。
优选的一种实施案例，步骤S203中，所述酸溶液为0.1-0.5％浓度的丙二酸和0.1-1mol/L浓度的醋酸中的一种，所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g)，步骤S205中，所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目，步骤S206中，60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
优选的一种实施案例，步骤S301中，所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器，风干温度为25-45℃，湿度为30-70％。
优选的一种实施案例，步骤S304中，生物交联具体过程为：选取复合膜质量的0.01-2％的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液，然后将复合膜加入交联剂溶液内，搅拌均匀，水浴加热35-60℃开始交联反应，反应2-10小时，再加入5-20％的氨水反应1-2小时，然后将复合膜取出，使用生理盐水清洗纯化，重复2-5次。
优选的一种实施案例，所述交联剂为酯类、醛类、多糖类和胺类中的一种，所述氨水与交联剂溶液的体积比为1：2。
本发明的有益效果在于：本发明通过将哺乳动物的皮或者肌腱进行分解色素，脱脂，消味处理，然后通过无花果蛋白酶溶液酶解，通过酸溶液溶解，过滤得到胶原溶液，通过对胶原溶液进行固含量定值，再通过风干、层层叠加，形成生物复合膜，最终通过交联处理和冷冻干燥，复合层1-5次，该方法优势在于可以形成高韧性、高强度的复合生物膜，适用于需要缝合生物膜的外科临床手术，解决了临床对生物膜缝合强度的要求，制备方法简单。
附图说明
图1为本发明实施例提供的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法的示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：如图1，本发明提供了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，包括如下步骤：
S1、前处理
S101、除杂：将原料使用纯化水浸泡，清洗去除杂质(毛质和脂肪)，清洗；
S102、分解色素：将原料放入漂白液中浸泡24-48小时，分解色素后过滤清洗；
S103、脱脂：将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂，过滤清洗；
S104、消味：将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味，过滤清洗；
S2、提取
S201、软化：将原料放入0.05-0.5％无花果蛋白酶溶液中酶解，于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出；
S202、清洗：将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1％的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤，并用清水清洗；
S203、溶解：采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时；
S204、搅拌：胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时，搅拌转速100-300R/min；
S205、提纯：使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液，去除未溶解好的胶原；
S206、定值：取过滤后的少量胶原小样，配制所需要的浓度的固含量，搅拌均匀待用；
S3、制膜
S301、风干：取步骤S206定值后的胶原溶液，配制固含量0.5-1.5％，搅拌均匀，胶原量500-2000g，离心后倒入不锈容器，振荡平整，置入超净台上风干形成膜状；
S302、层积复合：待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后，重复风干步骤1-5次，形成生物复合膜；
S303、酸碱中和：待2-5次次风干层积完成后，使用3-15％氨水中和3-12小时后，取生物复合膜清洗至中性、沥干；
S304、生物交联：将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时，过滤后清洗至中性；
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥，分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
进一步的，步骤S102中，所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L，1-10％过氧化氢溶液，所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S103中，所述异丙醇溶液的浓度为5-10％，所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S104中，所述氯化钠溶液的浓度为1-5％，所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S201中，所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g)，具体酶解过程为：按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液，然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中，于37℃培养箱内进行搅拌，搅拌时间1-3小时，总培养时间20-24小时，最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时；。
进一步的，步骤S203中，所述酸溶液为0.1-0.5％浓度的丙二酸，所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g)，步骤S205中，所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目，步骤S206中，60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
进一步的，步骤S301中，所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器，风干温度为25-45℃，湿度为30-70％。
进一步的，步骤S304中，生物交联具体过程为：选取复合膜质量的0.01-2％的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液，然后将复合膜加入交联剂溶液内，搅拌均匀，水浴加热35-60℃开始交联反应，反应2-10小时，再加入5-20％的氨水反应1-2小时，然后将复合膜取出，使用生理盐水清洗纯化，重复2-5次。
进一步的，所述交联剂为酯类，所述氨水与交联剂溶液的体积比为1：2。
实施例2：如图1，本发明提供了一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，包括如下步骤：
S1、前处理
S101、除杂：将原料使用纯化水浸泡，清洗去除杂质(毛质和脂肪)，清洗；
S102、分解色素：将原料放入漂白液中浸泡24-48小时，分解色素后过滤清洗；
S103、脱脂：将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂，过滤清洗；
S104、消味：将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味，过滤清洗；
S2、提取
S201、软化：将原料放入0.05-0.5％无花果蛋白酶溶液中酶解，于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出；
S202、清洗：将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1％的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤，并用清水清洗；
S203、溶解：采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时；
S204、搅拌：胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时，搅拌转速100-300R/min；
S205、提纯：使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液，去除未溶解好的胶原；
S206、定值：取过滤后的少量胶原小样，配制所需要的浓度的固含量，搅拌均匀待用；
S3、制膜
S301、风干：取步骤S206定值后的胶原溶液，配制固含量0.5-1.5％，搅拌均匀，胶原量500-2000g，离心后倒入不锈容器，振荡平整，置入超净台上风干形成膜状；
S302、层积复合：待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后，重复风干步骤1-5次，形成生物复合膜；
S303、酸碱中和：待2-5次次风干层积完成后，使用3-15％氨水中和3-12小时后，取生物复合膜清洗至中性、沥干；
S304、生物交联：将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时，过滤后清洗至中性；
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥，分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
进一步的，所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱，步骤S102中，所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L，1-10％过氧化氢溶液，所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S103中，所述异丙醇溶液的浓度为5-10％，所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S104中，所述氯化钠溶液的浓度为1-5％，所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
进一步的，步骤S201中，所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g)，具体酶解过程为：按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液，然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中，于37℃培养箱内进行搅拌，搅拌时间1-3小时，总培养时间20-24小时，最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时；。
进一步的，步骤S203中，所述酸溶液为0.1-1mol/L浓度的醋酸，所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g)，步骤S205中，所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目，步骤S206中，60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
进一步的，步骤S301中，所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器，风干温度为25-45℃，湿度为30-70％。
进一步的，步骤S304中，生物交联具体过程为：选取复合膜质量的0.01-2％的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液，然后将复合膜加入交联剂溶液内，搅拌均匀，水浴加热35-60℃开始交联反应，反应2-10小时，再加入5-20％的氨水反应1-2小时，然后将复合膜取出，使用生理盐水清洗纯化，重复2-5次。
进一步的，所述交联剂为多糖类，所述氨水与交联剂溶液的体积比为1：2。
综上所述，本发明通过将哺乳动物的皮或者肌腱进行分解色素，脱脂，消味处理，然后通过无花果蛋白酶溶液酶解，通过酸溶液溶解，过滤得到胶原溶液，通过对胶原溶液进行固含量定值，再通过风干、层层叠加，形成生物复合膜，最终通过交联处理和冷冻干燥，复合层1-5次，该方法优势在于可以形成高韧性、高强度的复合生物膜，适用于需要缝合生物膜的外科临床手术，解决了临床对生物膜缝合强度的要求，制备方法简单。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (9)
1.一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、前处理；S2、提取；S3、制膜；
所述S1包括：
S101、将原料使用纯化水浸泡，清洗去除杂质(毛质和脂肪)，清洗；
S102、将原料放入漂白液中浸泡24-48小时，分解色素后过滤清洗；
S103、将原料继续放入异丙醇溶液中浸泡6-12小时进行脱脂，过滤清洗；
S104、将原料放入氯化钠溶液中浸泡24-48小时进行消味，过滤清洗；
所述S2包括：
S201、将原料放入0.05-0.5％无花果蛋白酶溶液中酶解，于37℃恒温箱培养20-24小时后过滤取出；
S202、将过滤后的原料加入3000ml的0.1-1％的过氧化氢溶液中浸泡1h后过滤，并用清水清洗；
S203、采用酸溶液对酶解清洗后的原料进行浸泡15-24小时；
S204、胶原溶解后放置搅拌桶搅拌10-16小时，搅拌转速100-300R/min；
S205、使用不锈钢过滤器过滤胶原溶液，去除未溶解好的胶原；
S206、取过滤后的少量胶原小样，配制所需要的浓度的固含量，搅拌均匀待用；
所述S3包括：
S301、取步骤S206定值后的胶原溶液，配制固含量0.5-1.5％，搅拌均匀，胶原量500-2000g，离心后倒入不锈容器，振荡平整，置入超净台上风干形成膜状；
S302、待步骤S301中的超净台上的胶原干燥后，重复风干步骤1-5次，形成生物复合膜；
S303、待2-5次次风干层积完成后，使用3-15％氨水中和3-12小时后，取生物复合膜清洗至中性、沥干；
S304、将生物复合膜放入交联剂溶液内浸泡2-12小时，过滤后清洗至中性；
S305、采用真空冷冻干燥技术干燥，分切包装后得到脑脊液隔离修复膜。
2.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：所述原料为哺乳动物的皮或者肌腱，步骤S102中，所述漂白液含氢氧化钠体积分数0.01-0.05moL/L，1-10％过氧化氢溶液，所述漂白液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
3.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S103中，所述异丙醇溶液的浓度为5-10％，所述异丙醇溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
4.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S104中，所述氯化钠溶液的浓度为1-5％，所述氯化钠溶液与原料的体积质量比为5000mL/(1000-2000g)。
5.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S201中，所述无花果蛋白酶溶液与原料的体积质量比为500mL/(1000-2000g)，具体酶解过程为：按照配比将无花果蛋白酶溶液加入pH为7-8、浓度为0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液中形成酶解液，然后将步骤S1处理的原料置入酶解液中，于37℃培养箱内进行搅拌，搅拌时间1-3小时，总培养时间20-24小时，最后取出经蒸馏水清洗0.5-2小时。
6.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S203中，所述酸溶液为0.1-0.5％浓度的丙二酸和0.1-1mol/L浓度的醋酸中的一种，所述酸溶液与原料的体积质量比为10000mL/(500-1000g)，步骤S205中，所述不锈钢过滤器的过滤网目数30-60目，步骤S206中，60℃条件下烘干胶原溶液进行固含量配制。
7.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S301中，所述不锈容器为长40-50cm、宽40-50cm、高1-3cm的四方体容器，风干温度为25-45℃，湿度为30-70％。
8.如权利要求1所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：步骤S304中，生物交联具体过程为：选取复合膜质量的0.01-2％的交联剂混合蒸馏水至与复合膜重量相等形成交联剂溶液，然后将复合膜加入交联剂溶液内，搅拌均匀，水浴加热35-60℃开始交联反应，反应2-10小时，再加入5-20％的氨水反应1-2小时，然后将复合膜取出，使用生理盐水清洗纯化，重复2-5次。
9.如权利要求8所述的一种脑脊液隔离修复膜的制备方法，其特征在于：所述交联剂为酯类、醛类、多糖类和胺类中的一种，所述氨水与交联剂溶液的体积比为1：2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111385952.6A CN114225112A (zh) | 2021-11-22 | 2021-11-22 | 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111385952.6A CN114225112A (zh) | 2021-11-22 | 2021-11-22 | 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114225112A true CN114225112A (zh) | 2022-03-25 |
Family
ID=80750353
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111385952.6A Pending CN114225112A (zh) | 2021-11-22 | 2021-11-22 | 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114225112A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107551324A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-01-09 | 北京华信佳音医疗科技发展有限责任公司 | 一种可缝合硬膜修补材料的制备及其应用 |
| WO2018090341A1 (zh) * | 2016-11-18 | 2018-05-24 | 深圳市成农生物材料有限公司 | 人工复合膜、制备方法及其应用 |
| CN111714705A (zh) * | 2020-06-12 | 2020-09-29 | 福建纽伯尔生物科技有限公司 | 一种可缝合生物膜、制备方法及应用 |
| CN112891609A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-04 | 蚌埠学院 | 一种以羊皮为原料的多孔材料及其制备方法、应用 |
| WO2021145791A1 (ru) * | 2020-01-16 | 2021-07-22 | Ефим Семенович ВАЙНЕРМАН | Сверхпрочная ультратонкая коллагеновая мембрана и способ ее получения |
| CN113384748A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-09-14 | 尚诚怡美(成都)生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白真皮植入剂及其制备方法 |
-
2021
- 2021-11-22 CN CN202111385952.6A patent/CN114225112A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018090341A1 (zh) * | 2016-11-18 | 2018-05-24 | 深圳市成农生物材料有限公司 | 人工复合膜、制备方法及其应用 |
| CN107551324A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-01-09 | 北京华信佳音医疗科技发展有限责任公司 | 一种可缝合硬膜修补材料的制备及其应用 |
| WO2021145791A1 (ru) * | 2020-01-16 | 2021-07-22 | Ефим Семенович ВАЙНЕРМАН | Сверхпрочная ультратонкая коллагеновая мембрана и способ ее получения |
| CN111714705A (zh) * | 2020-06-12 | 2020-09-29 | 福建纽伯尔生物科技有限公司 | 一种可缝合生物膜、制备方法及应用 |
| CN112891609A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-04 | 蚌埠学院 | 一种以羊皮为原料的多孔材料及其制备方法、应用 |
| CN113384748A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-09-14 | 尚诚怡美(成都)生物科技有限公司 | 一种胶原蛋白真皮植入剂及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103341214B (zh) | 一种丝素蛋白膜及其制备方法 | |
| CN101550199B (zh) | 一种从透明质酸发酵液中制备透明质酸钠的方法 | |
| CN102121133B (zh) | 无抗原猪真皮胶原纤维 | |
| CN102643357B (zh) | 利用废弃棉织物制备羧甲基纤维素钠的方法 | |
| CN112043866B (zh) | 一种鱼鳞片纯化处理制备膜材料的方法 | |
| CN112011502A (zh) | 一种猪骨骼肌卫星细胞高效分离和纯化的方法 | |
| CN110747159A (zh) | 一种小鼠或大鼠肾成纤维细胞分离及传代培养方法 | |
| CN107702955B (zh) | 一种石蜡切片的制备方法 | |
| CN111714705B (zh) | 一种可缝合生物膜、制备方法及应用 | |
| CN114225112A (zh) | 一种脑脊液隔离修复膜的制备方法 | |
| CN110101909B (zh) | 一种产品性能可控的脱细胞生物羊膜的制备方法 | |
| CN104140477A (zh) | 一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法 | |
| CN104341539A (zh) | 一种酶法结合膜技术一步制备精品肝素钠的方法 | |
| CN1654670A (zh) | 一种硫酸软骨素的制备方法 | |
| CN101445547A (zh) | 低温热溶制备高分子量鱼皮胶原蛋白的方法 | |
| CN114177354B (zh) | 一种天然陶瓷化骨的制备方法 | |
| CN107029293B (zh) | 一种引导骨再生心包胶原膜及其制备方法和用途 | |
| CN103724650B (zh) | 生物纤维素膜制造方法 | |
| CN1215169C (zh) | 玉米超氧化物歧化酶多酶的生产方法 | |
| CN1093634C (zh) | 快捷石蜡切片法 | |
| CN108785746B (zh) | 一种脱细胞猪小肠粘膜下层快速制备方法 | |
| WO2003046055A1 (de) | Verfahren zur behandlung von materialien biologischen ursprungs und kollagen- elastin-product | |
| CN104984396B (zh) | 有机‑无机核鞘结构复合生物材料的制备方法及产品 | |
| KR102416674B1 (ko) | 계면활성제를 이용한 갈조류로부터 알칼리-가용성 알긴산을 추출하는 방법 | |
| CN114177357A (zh) | 一种生物仿生人工皮的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20220325 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |