CN114223808A - 一种多菌种制备的南美白对虾饲料及制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及虾类饲料技术领域，尤其是一种多菌种制备的南美白对虾饲料及制备方法和应用，其制备方法包括以下步骤：(1)制备发酵基料；(2)制备发酵菌液：将植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌和其他菌种按照质量比1：1：2～8的比例复配制得发酵菌种，然后进行扩繁，将扩繁好的发酵菌种加入到浸泡池中进行稀释，得到发酵菌液；所述其他菌种为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌中的至少一种；(3)浸泡打包：将发酵基料在发酵菌液中浸泡后沥干、晾干打包；(4)发酵。本发明通过使用多种有益微生物共同发酵制备了一种长期具有多种活有益菌、有机酸的发酵饲料，作为全价饲料饲喂南美白对虾的同时兼具水质改善的作用。

Description

一种多菌种制备的南美白对虾饲料及制备方法和应用

技术领域

本发明涉及虾类饲料领域，具体领域为一种南美白对虾饲料及制备方法。

背景技术

南美白对虾，别名凡纳对虾，是广温广盐性热带虾类，原产于南太平洋岸的秘鲁、墨西哥、厄瓜多尔。它也是世界上养殖产量最高的对虾，2020年中国南美白对虾的年产量约为200万吨。

对虾肉中含有20％的蛋白质，是蛋白质含量很高的食品之一。虾和鱼肉禽肉相比，脂肪含量少，并且几乎不含作为能量来源的动物糖质，虾中的胆固醇含量较高，同时含有丰富的能降低人体血清胆固醇的牛磺酸；此外，还含有丰富的钾、碘、镁、磷等微量元素和维生素A等成分。

虾肉中含有非常丰富的镁元素，而这种元素对于心脏的活动有着非常重要的调节作用，能够很好的保护人体的心脑血管系统，而且能够有效的降低血液当中胆固醇的含量，更好的防止动脉硬化的出现，同时还能够扩张血管，有效的预防高血压以及一些心梗病症。

南美白对虾营养价值高，养殖过程中对虾对水质的要求也较高。尤其是在对虾养殖的中后期，随着饵料投喂量的增加，水中的残饵及对虾的排泄物量的相应地会增加，这给养殖过程中水质的调节增加相当大的压力。为了调节水质，在养殖过程中菌剂、有机酸等使用是普遍存在。

近两年，食品安全问题日趋得到重视，相关部门出台法律法规，减少动物养殖过程中具有危害化学品的使用。因此，开发具有调水功能的南美白对虾用发酵饲料是一种养殖过程中改善水质的可行性方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多菌种制备的南美白对虾饲料及制备方法和应用，通过使用多种有益微生物共同发酵制备了一种长期具有多种活有益菌、有机酸的发酵饲料，作为全价饲料饲喂南美白对虾的同时兼具水质改善的作用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备发酵基料

将20-30重量份的豆粕、10-20重量份的菜籽粕、10-20重量份的棉籽粕、10-15重量份的鱼粉、5-10重量份的面粉、8-10重量份的鱼粉、2-5重量份的磷酸二氢钙，粉碎后糊化，高温制粒，冷却后待用；

(2)制备发酵菌液

将植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌和其他菌种按照质量比1：1：0～8的比例复配制得发酵菌种，然后进行扩繁，将扩繁好的发酵菌种加入到浸泡池中进行稀释，得到发酵菌液；所述其他菌种为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌中的至少一种；

(3)浸泡打包

将步骤(1)中制粒好的发酵基料，均匀放置在浸泡匣中，将浸泡匣移至浸泡池中，浸泡在发酵菌液中，达到浸泡时间后，升起浸泡匣沥水，打开浸泡匣，二次晾干，待物料表面无明显水的痕迹后将其缓慢传送至打包机入口，进行打包；

(4)发酵

将打包好的物料堆积，放置恒温房间内，保持室内温度28度，发酵5-7天，pH降至5.0以下，得到南美白对虾饲料。

进一步的，所述发酵菌种与发酵基料的重量比为0.35-0.5：1000。

进一步的，所述步骤(2)中，按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌＝1:1的比例复配制得发酵菌种。

或者按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌＝1:1:2～8的比例复配制得发酵菌种；

或者按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2～8的比例复配制得发酵菌种；

或者按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2:2的比例复配制得发酵菌种。

进一步的，所述步骤(2)中，发酵菌种与稀释水量的比例为0.35-0.5：380-450。

进一步的，所述步骤(3)中的浸泡时间为10-20min；沥水时间为10-15min。

进一步的，所述步骤(4)中的，堆积高度为6-8层。

进一步的，所述步骤(4)中，对恒温房间的物料温度进行每2h的监控记录，当温度到达45-47℃时，进行翻堆散热，再堆层发酵，如此持续进行，直到pH到达5.0以下。

生物发酵饲料是在人为的、可控制的条件下，以植物性农副产品为主要原料，通过微生物的代谢作用，降解部分多糖、蛋白质和脂肪等大分子，生成有机酸、可溶性多肽等小分子物质、形成营养丰富、适口性好、有益活菌含量高的生物饲料或饲料原料，从而使饲料变得营养丰富、易于吸收。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

本发明多菌种制备的南美白对虾饲料使用膨化全价料进行发酵，养殖过程中使用本发明饲料具有多种优势：

1)饲料中的益生菌、有机酸等功能性物质持续补充进对虾肠道，提高了饲料的转化利用率，改善了饲料营养吸收水平和适口性。

2)水质稳定。定期投喂发酵饲料，相当于向水体中持续补充益生菌和多糖，调节了水体碳氮平衡，稳定了水体菌相。

3)提高虾体抗病力。发酵饲料中的生物酶、抑菌活性肽、有机酸、酚类抗氧化活性物质、多维多矿等，具有强大的益生功能，提高了虾的免疫力。

4)降低水体中有害物质含量。水产养殖中，通常检测的氨氮是水体中铵根离子(NH⁴⁺) 和非离子氨(NH₃)的总称。氨氮在水体中会以上面的平衡关系进行转化。铵离子的毒性较弱，而非离子氨则具有较强的毒性。非离子氨非常容易透过细胞膜进入体内，导致血液中高铁血红蛋白升高，血液载氧量下降，进而表现出缺氧症状。同时非离子氨也会对鱼虾的神经系统造成破坏。即使是低浓度的氨氮，长期接触也会损害鳃组织，引起鳃小片弯曲、粘连或融合。而本发明的南美白对虾饲料中含有的部分种类的活菌具有代谢这些有害物质含量的功能。

因此，本发明的南美白对虾饲料是一种长期具有多种活有益菌、有机酸的发酵饲料，作为全价饲料饲喂南美白对虾的同时兼具水质改善的作用。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备发酵基料

将25重量份的豆粕、15重量份的菜籽粕、15重量份的棉籽粕、12重量份的鱼粉、8重量份的面粉、9重量份的鱼粉、3重量份的磷酸二氢钙，粉碎后糊化，高温制粒，冷却后待用；

(2)制备发酵菌液

将按照以下比例进行复配的发酵菌种进行扩繁，所述发酵菌种与发酵基料的重量比为 0.4：1000。其中，根据实际生产需要，发酵菌种与发酵基料的重量比控制在0.35-0.5：1000 均可满足要求。

菌株组合a为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌＝1:1；

菌株组合b为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌＝1:1:2；

菌株组合c为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌＝1:1:8；

菌株组合d为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2；

菌株组合e为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:8；

菌株组合f为植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2:2。

将扩繁好的发酵菌种加入到容积为4吨的浸泡池中进行稀释，得到发酵菌液；发酵菌种与稀释水量的比例为0.4：400。每批稀释量约1.6-2.0吨菌液。根据实际生产需要，发酵菌种与稀释水量的比例控制在0.35-0.5：380-450均可满足要求。

(3)浸泡打包

将步骤(1)中制粒好的发酵基料，每批称重400公斤分别均匀放置在三只浸泡匣子中(每批匣子约200公斤)，使用电动葫芦将三只固定好的浸泡匣升起移至容积为4吨的浸泡池中，浸泡在1.6-2.0吨的菌液中，浸泡10-20min，到达浸泡时间后，用电动葫芦将其升起沥水，沥水10-15min后，打开匣子，放入转动的传送皮带上进行二次晾干，物料表面无明显水的痕迹方可将其缓慢传送至打包机入口，进行打包。

(4)发酵

将已打包好的物料堆积6-8层高度，放置恒温房间内，保持室内温度28℃，发酵5-7天，pH降至5.0以下。

其中，对恒温房的物料温度要进行每2h的监控记录，当温度到达45-47℃时，必须进行翻堆散热，再堆层发酵，如此持续进行，直到pH到达5.0以下。

另外需要注意的是，在其他的变形实施例中，发酵基料的组分比例可在20-30重量份的豆粕、10-20重量份的菜籽粕、10-20重量份的棉籽粕、10-15重量份的鱼粉、5-10重量份的面粉、8-10重量份的鱼粉、2-5重量份的磷酸二氢钙中进行调整。根据实验证实，在此比例范围内进行组分加量调整对本发明效果并无负面影响，在此不再一一赘述各种配比下的实验过程。

实施例2

取发酵30d的实施例1制备的南美白对虾饲料，检测微生物菌群、pH值及酸溶蛋白含量。

微生物菌群数检测方法：

发酵过程中采用稀释涂布平板的方法检测30d后，发酵料中微生物的数量。

其中，植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌检测使用MRS培养基平板，培养基组成为(1L)：蛋白胨10.0g，牛肉粉5.0g，葡萄糖20.0g，酵母粉4.0g，乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，硫酸镁0.2g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸锰0.05g，吐温80 1ml，琼脂粉15.0g。灭菌条件，121℃15min。

芽孢杆菌(即枯草芽孢杆菌)使用营养琼脂培养基，培养基组成为(1L)：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂粉15.0g。灭菌条件，121℃20min。

酵母菌(即酿酒酵母菌)使用虎红培养基：培养基成分为(1L)：蛋白胨5.0g，磷酸二氢钾1.0g，葡萄糖10.0g，孟加拉红(虎红)0.033g，硫酸镁0.5g，琼脂18.5g，氯霉素 0.1g。

发酵饲料pH值检测方法：10g南美白对虾饲料，粉碎后加入40ml蒸馏水，静止30min，检测。

表1不同菌株组合发酵软颗粒饲料参数检测结果

注：同列数据后小写字母表示差异显著性(p<0.05)。

实施例3

1、改良水质的效果试验

取发酵60天的实施例1制备的南美白对虾饲料，将南美白对虾饲料：糖蜜：水按照1： 1：8＝的比例混合；20～25℃条件下培养18h，测定不同菌株组合处理的发酵料中微生物的含量。采集南美白对虾养殖池塘池水，每个处理添加水量100L，使用纯净水调节，其中试验用水COD含量为187mg/L，氨态氮浓度为0.43mg/L，后将发酵液按照1kg/亩·米加入到采集的养殖水体中，间歇曝气，保持溶氧水平在6mg/L处理12h后测定水体中的氨态氮水平。

表2饲料糖蜜发酵液中各种微生物的含量

使用南美白对虾饲料和糖蜜混合发酵，使用植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌发酵的发酵料能够产生大量的活菌，有利于快速调节水质。

表3实验水体中处理后氨态氮和COD的含量

菌株组合	氨态氮浓度(mg/L)	COD(mg/L)
			a	0.16d	134.3d
b	0.07c	89.5c
			c	0.08c	94.1c
d	0.16b	69.1b
			e	0.12b	74.3b
f	0.04a	48.4a

注：同列数据后小写字母表示差异显著性(p<0.05)。

2、实施例1制备的南美白对虾饲料的应用效果试验

选8个小棚池塘，每个池塘0.7亩，分为对照组和实验组，每组4个重复，放养密度相同和养殖条件一致，其中对照池塘饲喂南美白对虾配合饲料，实验组在配合饲料基础上添加20％的实施例1中6种处理方式下制备的产品，试验周期100天。

表4

通过上述结果可以看出，应用实施例1的饲料，南美白对虾单棚产量可提高20％，产量最高可增加290斤，饵料系数降低17％，成活率提高11个百分点，投入品用量降低38％，节约500元/棚，肠炎发病率降低70％以上，表明该产品能有效预防肠炎，降低药品的使用量，提高生长性能，增加养殖经济效益。对虾肝胰腺能分泌消化液，促进饲料的消化，同时也是机体最重要的免疫器官，在转肝期或加料期由于生长速度加快，常常会造成肝胰腺损伤，分泌消化酶能力下降，本实施例产品能提高对虾肝胰腺蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，降低消化负担，保障肝胰腺健康。

通过水质检测发现，本产品能调控pH值，降低水体氨氮和亚硝酸盐含量，提高水体溶解氧含量，显著降低水体中致病菌弧菌的含量，改善水体环境，促进水体中残饵和粪便等有机物的转化，被对虾采食，从而降低饵料的摄入，还能节能减排，促进碳氮的重新利用，保护环境，增加养殖效益。

通过上述实验可以看出：

1)使用植物乳杆菌、酵母菌和芽孢杆菌多菌种混合发酵，发酵料中的微生物种类丰富，微生物菌群数量可以长时间保持在高数量水平，作为南美白对虾肠道有益菌群的补充来源，调节对虾肠道的微生态环境。本发明南美白对虾饲料中的有机酸能调节对虾肠道pH 值环境，保证对虾肠道健康。

2)发酵30d后酸溶蛋白的比例不同处理间具有差异，接种的芽孢杆菌和酵母菌具有促进酸溶蛋白的产生的作用。

3)以本发明南美白对虾饲料作为菌种，加入糖蜜和水培养后，培养液中含有大量有益活菌，能作为水体中有益菌补充来源，降低水体COD和氨氮浓度。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1.一种多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备发酵基料

将20-30重量份的豆粕、10-20重量份的菜籽粕、10-20重量份的棉籽粕、10-15重量份的鱼粉、5-10重量份的面粉、8-10重量份的鱼粉、2-5重量份的磷酸二氢钙，粉碎后糊化，高温制粒，冷却后待用；

(2)制备发酵菌液

将植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌和其他菌种按照质量比1：1：0～8的比例复配制得发酵菌种，然后进行扩繁，将扩繁好的发酵菌种加入到浸泡池中进行稀释，得到发酵菌液；所述其他菌种为枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌中的至少一种；

(3)浸泡打包

将步骤(1)中制粒好的发酵基料，均匀放置在浸泡匣中，将浸泡匣移至浸泡池中，浸泡在发酵菌液中，达到浸泡时间后，升起浸泡匣沥水，打开浸泡匣，二次晾干，待物料表面无明显水的痕迹后将其缓慢传送至打包机入口，进行打包；

(4)发酵

将打包好的物料堆积，放置恒温房间内，保持室内温度28度，发酵5-7天，pH降至5.0以下，得到南美白对虾饲料。

2.根据权利要求1所述的多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述发酵菌种与发酵基料的重量比为0.35-0.5：1000。

3.根据权利要求1所述的多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌＝1:1的比例复配制得发酵菌种。

4.根据权利要求1所述的多菌种制备南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌＝1:1:2～8的比例复配制得发酵菌种；

或者按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2～8的比例复配制得发酵菌种；

或者按照植物乳杆菌：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：酿酒酵母菌＝1:1:2:2的比例复配制得发酵菌种。

5.根据权利要求1所述的多菌种制备的南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，发酵菌种与稀释水量的比例为0.35-0.5：380-450。

6.根据权利要求1所述的多菌种制备的南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的浸泡时间为10-20min；沥水时间为10-15min。

7.根据权利要求1所述的多菌种制备的南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中的，堆积高度为6-8层。

8.根据权利要求1所述的多菌种制备的南美白对虾饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，对恒温房间的物料温度进行每2h的监控记录，当温度到达45-47℃时，进行翻堆散热，再堆层发酵，如此持续进行，直到pH到达5.0以下。

9.权利要求1-8所述制备方法制得的南美白对虾饲料。

10.权利要求9所述南美白对虾饲料在南美白对虾养殖中的应用。