CN114166844A - 一种虫卵固定方法及观察方法 - Google Patents
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Abstract
本发明“一种虫卵固定方法及观察方法”属于生物技术领域。所述一种虫卵固定方法的特征是：将虫卵置于bouin氏固定液固定后转入碳酸锂溶液中处理。所述一种虫卵观察方法是在所述虫卵固定方法的基础上对虫卵固定后再用次氯酸钠处理。采用本发明的固定方法和观察方法可在虫卵发育期间，能够清楚的观察到虫卵各个时期胚胎的发育特征。所述方法能够有效的对蝗卵进行固定及外膜溶解，在固定及溶解时所需时间及操作步骤都有详细的诠释。相同研究条件下可模拟此方法进行观察，观察虫卵胚胎发育特征时可有效达到理想的观察状态。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种虫卵固定方法及观察方法。
背景技术
蝗虫一生中最为静止的时期为卵期，蝗卵被产入土中以后，自身无法躲避环境的不良作用力，环境的影响对蝗卵的孵化率能产生严重的影响。因此对蝗卵发育影响的各种因素不论是对发生的预测、预报方面和治理蝗灾方面都为极为重要的，因此蝗卵的发育在蝗虫生态学上占有重要地位。
不仅限于蝗卵，其它昆虫的虫卵的发育阶段的观察对于该种昆虫的研究、预测、预报、防治也意义重大。
然而，目前本领域尚未报道通过固定虫卵观察虫卵各个发育阶段的方法，也未提供一种行之有效的虫卵固定及观察方法。
发明内容
基于上述问题，本发明提供一种一种虫卵固定方法及观察方法，可获得完整、透明、清楚的各发育阶段的虫卵形态用于观察虫卵的发育特征。
本发明的技术方案如下：
一种虫卵固定方法，其特征在于，将虫卵置于bouin氏固定液固定后转入碳酸锂溶液中处理。
所述固定后的虫卵在转入碳酸锂溶液中处理之前需用70％的酒精清洗；
优选地，虫卵用碳酸锂溶液处理后再用70％的酒精清洗。
所述碳酸锂溶液为饱和的碳酸锂溶液；
优选地，虫卵在碳酸锂溶液中处理的时间为2-3分钟。
所述bouin氏固定液与虫卵体积比为1∶10；
优选地，所述固定的时间为18-24小时，优选24小时；
所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
所述bouin氏固定液为加热的bouin氏固定液；所述加热温度为70℃。
一种虫卵观察方法，其特征在于，采用所述的一种虫卵固定方法对虫卵固定后再用次氯酸钠处理。
所述次氯酸钠处理指根据虫卵的发育时间调整虫卵在次氯酸钠中的处理时间。
所述次氯酸钠浓度为10％。
发育1-6天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为1-3分钟；发育7-12天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为3-4分钟，发育13-16天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为4-5分钟。
用次氯酸钠处理后将虫卵清洗、保存、置于显微镜下观察；
所述清洗是指用生理盐水进行清洗，所述生理盐水浓度为氯化钠质量百分比70％-90％，优选75％；
所述保存指在酒精中保存，所述酒精浓度为,85％-95％优选90％酒精。
所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
本发明的目的是提供一种蝗卵固定及外膜溶解透明方法。通过bouin氏固定液将蝗卵进行固定并使用碳酸锂溶液去黄，然后根据蝗卵的发育时间调整次氯酸钠的用量，使蝗卵外膜溶解至透明，蝗卵胚胎外显，达到理想的观察状态。
本发明以宁夏典型草原上发生严重的白纹雏蝗Chorthippusalbonemus Cheng etTu的卵为研究对象，提供蝗卵在胚胎发育观察时的卵固定及外膜溶解的一种方法。蝗卵在土壤中经长时间越冬后蝗卵的形态会发生一系列的变化，为明确蝗卵的发育特征观察，卵外膜溶解透明是蝗卵胚胎外显的一种重要的方法。
本发明的有益效果包括：
本发明的提供一种蝗卵固定及外膜溶解透明方法。通过这一方法可使蝗卵外膜溶解至透明，使蝗卵胚胎外显，可以达到理想的观察状态，更为容易地观察蝗卵的发育特征。可以进一步实现对蝗卵发育影响的各种因素的分析、预测、对于治理蝗灾方面也具有极为重要的意义。
附图说明
图1为蝗卵原状，固定、溶解、未去黄的蝗卵以及固定、溶解、去黄、清洗后的蝗卵对比图。
图2为本发明的方法处理后同一发育期蝗卵，在次氯酸溶液中处理不同时长的对比图。
图3为采用本发明的虫卵观察方法观察到的各发育阶段的蝗卵形态照片。
具体实施方式
下面将结合具体的实施例和附图对本发明的技术方案进行进一步清楚、完整地描述，但并不以此限制本发明的保护范围。
试剂与耗材
试剂：bouin氏固定液，次氯酸钠，碳酸锂，无水乙醇，生理盐水，蒸馏水均为市售产品，均可商购获得，均为实验室分析纯级别。
所需工具：热水锅，镊子，试管，试管夹，胶头滴管，滤纸，均为市售产品，均可商购获得。
生物材料的来源
本发明实验例使用的蝗卵取自宁夏地区蝗虫发生地地表的土壤中。
第1组实施例、本发明的虫卵固定方法
本组实施例提供一种虫卵固定方法。本组所有实施例都具备如下共同特征：将虫卵置于bouin氏固定液固定后转入碳酸锂溶液中处理。
本发明首次提出将bouin氏固定液、碳酸锂用于固定虫卵，并获得较好的固定效果。但发明人发现用bouin氏固定液固定虫卵(蝗卵)后，虫卵会产生发黄的现象(黄化现象)，不利于后面的虫卵发育阶段的观察，因此，本发明进一步使用碳酸锂改善黄化现象，并获得较好的去黄化效果，如图1所示。
在进一步的实施例中，所述固定后的虫卵在转入碳酸锂溶液中处理之前需用70％的酒精清洗；
优选地，虫卵用碳酸锂溶液处理后再用70％的酒精清洗。
在一些具体的实施例中，所述碳酸锂溶液为饱和的碳酸锂溶液，具体浓度约为150g/L；
优选地，虫卵在碳酸锂溶液中处理的时间为2-3分钟。
在另一些实施例中，所述bouin氏固定液与蝗卵体积比为1∶10；蝗卵体积指：先确定卵囊的体积V，再统计卵囊中的卵粒数量N后，平均分配至各个卵粒中得出卵粒体积v＝V/N，蝗卵体积指用于固定的卵粒数量n与卵粒体积v的乘积。
优选地，所述固定的时间为18-24小时，优选24小时；
所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
在优选的实施例中，所述bouin氏固定液为加热的bouin氏固定液；所述加热温度为50℃-70℃。使用加热的bouin氏固定液固定虫卵可有效缩短固定时间，由原来的24小时可缩短至18-20小时。
所述bouin氏固定液具有本领域技术人员通常理解的常规技术含义。bouin氏固定液又称bouin`s固定液、Bouin氏液，可商购获得。bouin氏固定液通常为苦味酸饱和液1.22％、甲醛和冰醋酸按体积比15:5:1的混合液。
第2组实施例、本发明的虫卵观察方法
本组实施例提供一种虫卵观察方法。本组所有的实施例都具备如下共同特征：采用第1组实施例任一项所提供的一种虫卵固定方法对虫卵固定后再用次氯酸钠处理。
本发明首次提出用次氯酸钠溶解虫卵外膜使其透明利于观察。本发明用次氯酸钠处理固定后的虫卵可有效溶解虫卵的外膜使其整体变为透明，更利于虫卵观察。
在具体的实施例中，所述次氯酸钠处理指根据虫卵的发育时间调整虫卵在次氯酸钠中的处理时间。
所述次氯酸钠浓度为10％。
在更具体的实施例中，发育1-6天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为1-3分钟；发育7-12天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为3-4分钟，发育13-16天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为4-5分钟。
在进一步的实施例中，用次氯酸钠处理后将虫卵清洗、保存、置于显微镜下观察。本文中的保存指短暂保存，为后续步骤可完整观察同批次虫卵各个时期发育的形态。
所述清洗是指用生理盐水进行清洗，所述生理盐水浓度为氯化钠质量百分比70％-90％优选75％；
所述保存指在酒精中保存，所述酒精浓度为85％-95％优选90％酒精。
在一些实施例中，所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
实验例1、本发明固定方法及观察方法的实验操作
实验方法：
将收集的蝗卵分放于养虫盒中并置于25℃培养箱中培养，自培养箱放置的第一天起分早8点、晚20点两个时间段收集，分为两个时间段可全面观察蝗卵的发育特征，宁夏春季时间8点为太阳升起的时间,20点为太阳落下的时间。本专利研究白纹雏蝗卵所使用bouin氏固定液(苦味酸饱和液1.22％、甲醛和冰醋酸按15:5:1的比例混合而成)，将蝗卵从土中取出分散洗干净，收集后的蝗卵用bouin氏固定液固定24小时，固定液的体积与蝗卵体积比为1：10，在使用bouin氏固定液时也可先加热煮沸再去固定(提高温度可加速固定作用，温度不宜过高，过高会使蝗卵破裂，使胚胎流露于固定液中)。
固定结束后先使用70％的酒精溶液清洗一次，后转入饱和的碳酸锂溶液中，能够有效减轻蝗卵因固定而出现黄化的现象，继而再使用70％酒精清洗三次即可。
蝗卵共有两层卵膜，外层为绒毛膜(chorion)；内层为羊膜(amion)其次为羊膜腔(amniotic cavity)，羊膜腔是一个充满羊水的密闭的腔，胚胎浸于其中为胚胎提供一个发育所需的水环境。蝗卵外部覆盖着棕色、半透明的绒毛膜和外膜，外膜溶解时使用10％的次氯酸。
蝗卵发育1-6天，大多数蝗卵处于发育期及原头期两个时期(共四个阶段)，
I阶段：胚盘正在形成之中。
II阶段：胚胎地位在卵的后端卵孔区偏腹面的卵黄表面紧贴卵壳，解剖时极易随卵壳脱落。
III阶段：原头和原躯干形成，前者圆润后者狭长，其长度约为前者的两倍且与前者成直角，它是是沿着蝗卵的腹面延伸的。
IV阶段：胚胎可以分为原头、原颚、胸、腹四部分，原颚和胸部已有可见的分节现象(在这两个时期的四个阶段中胚胎四周的卵黄表面均可见由细胞所形成的微小白粒)。
以上阶段溶解时需1-3分钟左右，随着发育天数的增加置于次氯酸钠溶液中的时间可逐渐递加
发育7-12天时，多数蝗卵处于显节期及胚转期(共五个阶段)，
V阶段：胚胎地位已朝卵前端方向移动，原头已离开卵后端的范围，上唇和触角继续生长，原颚和胸部的附肢继续生长，腹部前端开始分节，胚胎外形细长。
VI阶段：胸部的附肢继续生长，原扣内凹明显；胸部较长腹部也已完全分节，在腹部最末节中央的原肛内凹也已形成。此时胚胎身体的部分是:原头、原颚、胸部、腹部(11节)。
VII阶段：各部分宽度增加，原头上唇底边内凹渐深，原口大部分被上颚遮蔽；胸部的附肢继续生长，并且有向后端延伸的趋势，上颚成块状下颚出现颚须，胸部附肢出现5节，与身体连接的为基节其次为股节、胫节、跗节、端节。
VIII阶段：形态发育完整，胚转开始，上颚在原头上的地位逐渐扩大，复眼位于头部两侧，并伴有红色的细条出现。
IX阶段:胚转完成，胚胎向卵前端生长，复眼红色色素增加，在膜外也能模糊的看到；胸部附肢继续生长。
此时位于绒毛膜下的胚胎浆膜开始在其整个外表面分泌一层厚而坚韧、透明的几丁质角质层。
蝗卵需在10％的次氯酸钠放置3-4分钟左右，此时加长溶解时间只是为了对外膜的充分溶解，短时间不会对几丁质角质层产生破坏，如果时间过长蝗卵则会失水皱缩。
发育13-16天的蝗卵处于显节期及胚熟期(共三个阶段)，X阶段：继续向卵前端生长，近乎到最前端，复眼红色加深，胸部附肢增大。XI阶段：占有全卵长度，胸部附肢分节，爪已形成。XII阶段：发育成熟，身体表面色素增加，各部位颜色加深，孵化并蜕皮。在10％的次氯酸钠中放置4-5分钟左右，此时蝗卵处于胚熟期，胚胎发育基本完成，在溶解时将卵翻滚可充分溶解，然后使用75％的生理盐水清洗。结束后可用90％的酒精保存，也可置于滤纸干燥后在显微镜下观察。
Claims (10)
1.一种虫卵固定方法，其特征在于，将虫卵置于bouin氏固定液固定后转入碳酸锂溶液中处理。
2.根据权利要求1所述的一种虫卵固定方法，其特征在于，所述固定后的虫卵在转入碳酸锂溶液中处理之前需用70％的酒精清洗；
和/或，虫卵用碳酸锂溶液处理后再用70％的酒精清洗。
3.根据权利要求1或2所述的一种虫卵固定方法，其特征在于，所述碳酸锂溶液为饱和的碳酸锂溶液；
和/或，虫卵在碳酸锂溶液中处理的时间为2-3分钟。
4.根据权利要求1所述的一种虫卵固定方法，其特征在于，所述bouin氏固定液与虫卵体积比为1∶10；
和/或，所述固定的时间为18-24小时，优选24小时；
所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
5.根据权利要求1或4所述的一种虫卵固定方法，其特征在于，所述bouin氏固定液为加热的bouin氏固定液；所述加热温度为70℃。
6.一种虫卵观察方法，其特征在于，采用权利要求1-5任一所述的一种虫卵固定方法对虫卵固定后再用次氯酸钠处理。
7.根据权利要求6所述的一种虫卵观察方法，其特征在于，所述次氯酸钠处理指根据虫卵的发育时间调整虫卵在次氯酸钠中的处理时间。
所述次氯酸钠浓度为10％。
8.根据权利要求7所述的一种虫卵观察方法，其特征在于，发育1-6天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为1-3分钟；发育7-12天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为3-4分钟，发育13-16天的虫卵在次氯酸钠中溶解时间为4-5分钟。
9.根据权利要求6所述的一种虫卵观察方法，其特征在于，用次氯酸钠处理后将虫卵清洗、保存、置于显微镜下观察
所述清洗是指用生理盐水进行清洗，所述生理盐水浓度为氯化钠质量百分比70％-90％，优选75％；
所述保存指在酒精中保存，所述酒精浓度为,85％-95％优选90％酒精。
10.根据权利要求6-9任一所述的一种虫卵观察方法，其特征在于，所述虫卵优选蝗卵；所述蝗卵为白纹雏蝗、短星翅蝗、日本菱蝗、亚洲小车蝗的蝗卵，优选白纹雏蝗的蝗卵。
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| CN202111419146.6A CN114166844A (zh) | 2021-11-26 | 2021-11-26 | 一种虫卵固定方法及观察方法 |
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| CN114166844A true CN114166844A (zh) | 2022-03-11 |
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| CN202111419146.6A Pending CN114166844A (zh) | 2021-11-26 | 2021-11-26 | 一种虫卵固定方法及观察方法 |
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Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4434180A (en) * | 1978-07-28 | 1984-02-28 | Visscher Saralee N | Insect control methods with abscisic acid |
| CN1749730A (zh) * | 2004-09-17 | 2006-03-22 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海水鲆鲽鱼类受精卵的组织切片方法 |
| CN101390510A (zh) * | 2008-11-12 | 2009-03-25 | 中国农业大学 | 一种直翅目昆虫整体连续切片的预处理方法 |
| CN101676387A (zh) * | 2008-09-19 | 2010-03-24 | 南阳师范学院 | 一种大量固定家蚕胚胎的方法 |
| CN102147337A (zh) * | 2011-01-13 | 2011-08-10 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种海洋贝类d形幼虫的石蜡切片方法 |
| CN105717032A (zh) * | 2016-03-15 | 2016-06-29 | 甘肃农业大学 | 一种蚜虫胚胎观察处理方法 |
| CN110089466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-06 | 广西壮族自治区水产科学研究院 | 一种丰年虫卵高效去壳处理的方法 |
| CN111066736A (zh) * | 2020-01-10 | 2020-04-28 | 沈阳农业大学 | 一种白蚁胚胎发育研究方法 |
-
2021
- 2021-11-26 CN CN202111419146.6A patent/CN114166844A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4434180A (en) * | 1978-07-28 | 1984-02-28 | Visscher Saralee N | Insect control methods with abscisic acid |
| CN1749730A (zh) * | 2004-09-17 | 2006-03-22 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海水鲆鲽鱼类受精卵的组织切片方法 |
| CN101676387A (zh) * | 2008-09-19 | 2010-03-24 | 南阳师范学院 | 一种大量固定家蚕胚胎的方法 |
| CN101390510A (zh) * | 2008-11-12 | 2009-03-25 | 中国农业大学 | 一种直翅目昆虫整体连续切片的预处理方法 |
| CN102147337A (zh) * | 2011-01-13 | 2011-08-10 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种海洋贝类d形幼虫的石蜡切片方法 |
| CN105717032A (zh) * | 2016-03-15 | 2016-06-29 | 甘肃农业大学 | 一种蚜虫胚胎观察处理方法 |
| CN110089466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-06 | 广西壮族自治区水产科学研究院 | 一种丰年虫卵高效去壳处理的方法 |
| CN111066736A (zh) * | 2020-01-10 | 2020-04-28 | 沈阳农业大学 | 一种白蚁胚胎发育研究方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| NAGAI, MOMOKO 等: "Extraction of DNA from human embryos after long-term preservation in formalin and Bouin\'s solutions", CONGENITAL ANOMALIES, vol. 56, no. 3, 3 December 2015 (2015-12-03), pages 112 - 118 * |
| 孟瑞朝: "组织病理标本制作法", 30 September 1955, 北京：人民卫生出版社, pages: 39 - 40 * |
| 王晓楠 等: "应用蛋白甘油液盖片法制作寄生虫卵玻片标本", 宁夏医科大学学报, vol. 41, no. 7, 31 July 2019 (2019-07-31), pages 747 - 749 * |
| 赵慧燕: "棉蚜体色变化的生态遗传学研究", 昆虫学报, vol. 36, no. 3, pages 282 - 289 * |
| 迪力拜尔·马合木提;田为真;吴小川;向志伟;王丹;陈建欢;: "解决牛带绦虫卵教学封片卵裂的实验探索", 新疆医科大学学报, vol. 32, no. 9, pages 1358 - 1359 * |
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