CN110089466A - 一种丰年虫卵高效去壳处理的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种丰年虫卵高效去壳处理的方法，使用淡水浸泡商品丰年虫卵，再用海水浸泡并充分曝气；然后将虫卵灭菌，置于次氯酸钠溶液中浸泡并充分曝气，虫卵变成橘红色时分离出卵壳，清洗虫卵去余氯，再置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡40‑60min，浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇，即可；本发明可对丰年虫卵去壳后进一步溶解卵膜的角蛋白，并且能保持胚胎的活性，让虫卵的胚胎充分裸露出来，显微镜下可以直接观察到丰年虫卵的前期胚胎发育，这对丰年虫在胚胎时期做家系选育有重要指导意义，也对于丰年虫卵无病原体高效稳定孵化，进而为鱼虾育苗和养殖提供充足优质的饵料，对水产繁育产业具有很好的推动作用和应用价值。

Description

一种丰年虫卵高效去壳处理的方法

技术领域

本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种丰年虫卵高效去壳处理的方法。

背景技术

目前，绝大多数水产动物育苗都需要动物性活饵，丰年虫是使用最广泛的一种。丰年虫卵是指由丰年虫所产生的休眠卵，世界上已经记载的丰年虫卵有100多个品系。丰年虫卵初孵的无节幼体具有大量的卵黄，并含有丰富的蛋白质和脂肪(蛋白质约含60％、脂肪约含20％)，其成体所含营养成份也很高，因此丰年虫是鱼、虾、蟹等苗期和养成期的优质高营养饵料。据报道，当前世界上85％以上的水产养殖动物的育苗都以丰年虫作为饵料的来源。

丰年虫卵壳富含铁脂蛋白，鱼虾幼苗无法消化，而且不同来源的丰年虫卵壳中还可能携带其培育环境中的细菌和寄生虫等病原生物，具有水平传播至水产苗种体内而患病的潜在风险，因此一般需要先孵化出丰年虫幼体，进行彻底的无病原体处理后，再将其幼体作为饵料投喂。但是在实际生产过程中，容易出现孵化后的卵壳和幼体不易彻底分离的问题，从而造成部分已孵化幼体随卵壳倒掉而损耗或卵壳和幼体一起被采食导致鱼虾幼苗肠梗阻和消化不良死亡。丰年虫卵去壳后，完全可以清除其所携带的病原体，裸露的被薄卵膜覆盖的胚胎直接投喂，也可以继续被孵化出幼体。由于没有卵壳，可以减少幼体破壳时的能量消耗，提高孵化效率和产量，也有利于保留更多营养。

目前丰年虫卵的孵化培育生产技术一直处于简单粗糙的低效式模式，导致虫卵的孵化率在行业中一直都在50-70％左右，而一般的24h孵化周期内孵化率较低，从而增加了生产成本，在鱼虾育苗中，丰年虫卵的费用往往占育苗场生产成本的50％-70％，甚至更高。通过我们高效去壳的方法，可以清除壳内携带的病原体，显著提高孵化率并使丰年虫幼体保留更多营养，同时还可以重新利用大量孵化率低的劣质卵或过期卵，降低育苗成本，对水产育苗场具有很强的应用推广价值。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种丰年虫卵高效去壳处理的方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵10-20min，充分分散丰年虫卵，随后用海水浸泡40-80min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于次氯酸钠溶液中浸泡5-10min并充分曝气，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在150-200目的网布上冲洗，再去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡40-60min，浸泡结束后再使用洁净海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在0-10℃的饱和食盐水中进行保存。

优选地，所述海水的盐度为28-30％。

优选地，所述步骤(2)中次氯酸钠溶液的有效氯浓度为4.25-6.25％。

优选地，所述步骤(2)中使用次氯酸钠溶液浸泡丰年虫卵时，每100g商品丰年虫卵使用500-700ml的次氯酸钠溶液浸泡。

优选地，所述步骤(4)中将丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡时，每100g去壳的丰年虫卵使用10-20ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡。

优选地，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为70-80％。

优选地，所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用40-70％乙醇回流提取2-3次，每次乙醇用量为紫草重量的4-10倍，提取时间为1-4小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为70-80％的含紫草素的乙醇溶液。

本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：

1、本发明先用次氯酸钠对经过海水浸泡且充分曝气的丰年虫卵进行去壳处理，去除余氯后再用紫草素的乙醇溶液浸泡虫卵，可以充分溶解卵膜的角蛋白，并且能保持胚胎的完整性和活性，让虫卵的胚胎裸露出来，与单纯使用洁净海水孵化的方法相比，单纯使用洁净海水孵化的丰年虫胚胎发育迟缓且不稳定，无法观察到卵壳内胚胎的早期发育。而本发明去壳处理方法得到的丰年虫卵，在显微镜下可观察到胚胎包裹在一层薄薄的胚膜下，从而使科研人员可以直接观察到丰年虫卵的前期发育，这对丰年虫卵在胚胎时期做家系选育有重要指导意义，也对丰年虫卵无病原体高效稳定孵化，进而为鱼虾育苗和养殖提供充足优质的饵料，对水产繁育产业具有很好的推动作用和应用价值。

2、发明人还使用本发明的去壳丰年虫卵进行孵化，没有了卵壳的束缚，丰年虫卵只有一层胚膜，更加容易孵化出无节幼体，孵化率和孵化速度都有了明显的提高，孵化率达到了95％以上，且24小时内的孵化率可达到48小时可孵化率的92％以上，不仅保证了丰年虫幼体的高营养，而且显著降低了鱼虾蟹育苗饵料成本。

3、本发明的丰年虫卵去壳处理方法操作相对简单，去壳效果稳定，可肉眼直接观察虫卵颜色变化确定去壳的程度，及时控制次氯酸钠溶液的浸泡时间，还可使用碘-淀粉溶液检测虫卵洗涤液中的氯含量，确保去壳后的虫卵无余氯；经过去壳的丰年虫卵，可直接投喂或快速孵化，还可在低温饱和食盐水中保存，能够满足将虫卵长途运输后快速孵化，对于偏远地区的养殖户和小养殖户来说可以大幅降低鱼虾养殖成本，去壳的丰年虫卵可避免鱼虾幼苗食用卵壳后出现消化道疾病导致死亡，进而提高鱼虾等育苗和养殖的经济效益。

附图说明

图1为本发明的丰年虫卵去壳处理方法得到的丰年虫卵；

图2为使用海水孵化得到的丰年虫卵。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。

实施例1

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵10min，充分分散丰年虫卵，随后用盐度为28％的海水浸泡80min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为4.25％的次氯酸钠溶液中浸泡10min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用500ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在150目的网布上冲洗，再用浓度为0.1％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡60min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为70％，每100g去壳的丰年虫卵使用10ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用洁净海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在0℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用40％乙醇回流提取2次，每次乙醇用量分别为紫草重量的10倍、4倍，每次提取时间分别为4小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为70％的紫草素的乙醇溶液。

实施例2

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵11min，充分分散丰年虫卵，随后用盐度为28.2％的海水浸泡75min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为4.45％的次氯酸钠溶液中浸泡9.5min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用520ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在160目的网布上冲洗，再用浓度为0.15％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡57min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为71％，每100g去壳的丰年虫卵使用11ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在1℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用43％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量分别为紫草重量的8倍、7倍、6倍，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为71％的紫草素的乙醇溶液。

实施例3

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵12min，分散丰年虫卵，随后用盐度为28.4％的海水浸泡72min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为4.65％的次氯酸钠溶液中浸泡9min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用530ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在170目的网布上冲洗，再用浓度为0.18％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡54min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为72％，每100g去壳的丰年虫卵使用12ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在2℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用46％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量分别为紫草重量的7倍、5倍、4倍，每次提取时间分别为3小时、1小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为72％的紫草素的乙醇溶液。

实施例4

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵14min，分散丰年虫卵，随后用盐度为28.7％的海水浸泡65min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为4.95％的次氯酸钠溶液中浸泡8.4min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用560ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在180目的网布上冲洗，再用浓度为0.12％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡50min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为73％，每100g去壳的丰年虫卵使用14ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在3℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用50％乙醇回流提取2次，每次乙醇用量分别为紫草重量的8倍、6倍，每次提取时间分别为3小时、2小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为73％的紫草素的乙醇溶液。

实施例5

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵15min，分散丰年虫卵，随后用盐度为29％的海水浸泡60min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为5.25％的次氯酸钠溶液中浸泡8min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用590ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在190目的网布上冲洗，再用浓度为0.14％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡48min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为74％，每100g去壳的丰年虫卵使用15ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在4℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用55％乙醇回流提取2次，每次乙醇用量分别为紫草重量的10倍、7倍，每次提取时间分别为3小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为74％的紫草素的乙醇溶液。

实施例6

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵16min，分散丰年虫卵，随后用盐度为29.3％的海水浸泡56min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为5.5％的次氯酸钠溶液中浸泡7.5min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用610ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在200目的网布上冲洗，再用浓度为0.15％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡46min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为75％，每100g去壳的丰年虫卵使用16ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在5℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用60％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量分别为紫草重量的10倍、7倍、6倍，每次提取时间分别为3小时、1小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为75％的紫草素的乙醇溶液。

实施例7

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵17min，分散丰年虫卵，随后用盐度为29.5％的海水浸泡54min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为5.7％的次氯酸钠溶液中浸泡7min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用630ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在200目的网布上冲洗，再用浓度为0.16％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡45min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为77％，每100g去壳的丰年虫卵使用17ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在7℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用62％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量分别为紫草重量的9倍、6倍、5倍，每次提取时间分别为2小时、1小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为77％的紫草素的乙醇溶液。

实施例8

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵18min，分散丰年虫卵，随后用盐度为29.7％的海水浸泡50min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为5.9％的次氯酸钠溶液中浸泡6.5min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用650ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在180目的网布上冲洗，再用浓度为0.1％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡43min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为78％，每100g去壳的丰年虫卵使用18ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在8℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用65％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量分别为紫草重量的8倍、6倍、4倍，每次提取时间分别为2小时、1.5小时、1小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为78％的紫草素的乙醇溶液。

实施例9

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵19min，分散丰年虫卵，随后用盐度为29.8％的海水浸泡45min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为6.15％的次氯酸钠溶液中浸泡6min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用680ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在170目的网布上冲洗，再用浓度为0.12％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡42min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为79％，每100g去壳的丰年虫卵使用19ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在9℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用68％乙醇回流提取2次，每次乙醇用量分别为紫草重量的7倍、5倍，每次提取时间分别为2小时、1.5小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为79％的紫草素的乙醇溶液。

实施例10

本发明的丰年虫卵的去壳处理方法，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵20min，分散丰年虫卵，随后用盐度为30％的海水浸泡40min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于有效氯浓度为6.25％的次氯酸钠溶液中浸泡5min并充分曝气，每100g商品丰年虫卵使用700ml的次氯酸钠溶液浸泡，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在150目的网布上冲洗，再用浓度为0.11％的硫代硫酸钠溶液浸泡丰年虫卵，去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡40min，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为80％，每100g去壳的丰年虫卵使用20ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡；浸泡结束后再使用海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在10℃的饱和食盐水中进行保存。

所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用70％乙醇回流提取2次，每次乙醇用量分别为紫草重量的8倍、4倍，每次提取时间分别为3小时、2小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为80％的紫草素的乙醇溶液。

为了验证本发明对丰年虫卵的去壳效果，发明人使用显微镜观察实施例1经过去壳处理的丰年虫卵，结果如图1所示。图2为使用海水浸泡同样时间的丰年虫卵，可看到单纯使用海水孵化的丰年虫胚胎发育不明显，无法观察到卵壳内胚胎的早期发育。从图1可以看到，经过去壳处理的丰年虫卵，可以观察到丰年虫早期胚胎的发育进程，这是因为使用次氯酸钠溶液将丰年虫卵的卵壳彻底去除，再使用紫草素的乙醇溶液浸泡虫卵，可以溶解卵膜的角蛋白，让胚胎只保留一层薄薄的胚膜，使胚胎露出来，从而使科研人员可以直接观察到丰年虫卵的前期发育，这对丰年虫卵在胚胎时期做家系选育有重要指导意义。发明人对实施例2-10的处理好的丰年虫卵进行显微镜观察，结果如实施例1的丰年虫卵一致，丰年虫卵均只保留一层薄薄的胚膜，均可直接观察到丰年虫卵的前期发育。此外，发明人还使用本发明实施例的去壳丰年虫卵进行孵化，没有了卵壳的束缚，丰年虫卵只有一层胚膜，更加容易孵化出无节幼体，孵化率和孵化速度都有了明显的提高，孵化率达到了95％以上，且24小时内的孵化率可达到48小时可孵化率的92％以上。

Claims (7)

1.一种丰年虫卵高效去壳处理的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)使用洁净淡水浸泡商品丰年虫卵10-20min，将丰年虫卵充分分散，随后用海水浸泡40-80min，并充分曝气，使丰年虫卵充分吸水膨胀，分离海水和丰年虫卵；

(2)将步骤(1)的丰年虫卵经过灭菌处理后置于次氯酸钠溶液中浸泡5-10min并充分曝气，观察黑褐色的丰年虫卵变为灰白色，最后变成橘红色时，分离出卵壳，使用净化处理的洁净海水冲洗丰年虫卵，得到去壳的丰年虫卵；

(3)将步骤(2)去壳的丰年虫卵立即放在150-200目的网布上冲洗，再去除丰年虫卵中残余的氯，然后用洁净淡水清洗干净；

(4)将步骤(3)去除氯味的丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡40-60min，浸泡结束后再使用洁净海水冲洗除去丰年虫卵残余的乙醇后即可用于孵化或直接投喂或在0-10℃的饱和食盐水中进行保存。

2.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述海水的盐度为28-30％。

3.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中次氯酸钠溶液的有效氯浓度为4.25-6.25％。

4.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中使用次氯酸钠溶液浸泡丰年虫卵时，每100g商品丰年虫卵使用500-700ml的次氯酸钠溶液浸泡。

5.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述步骤(4)中将丰年虫卵置于含紫草素的乙醇溶液中浸泡时，每100g去壳的丰年虫卵使用10-20ml的含紫草素的乙醇溶液浸泡。

6.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述含紫草素的乙醇溶液中乙醇的体积分数为70-80％。

7.根据权利要求1所述的丰年虫卵的去壳处理方法，其特征在于，所述含紫草素的乙醇溶液的制备方法如下：将紫草用40-70％乙醇回流提取2-3次，每次乙醇用量为紫草重量的4-10倍，提取时间为1-4小时，合并提取液，过滤，加入无水乙醇，调配得到乙醇体积分数为70-80％的含紫草素的乙醇溶液。