CN114163519A - 一种单克隆抗体保护液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种单克隆抗体保护液及其制备方法，涉及生物材料制备技术领域。该单克隆抗体保护液及其制备方法，其组成为RPMI‑1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液、HEPES溶液、超纯水、杀菌溶液。包括以下步骤，S1.准备好RPMI‑1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液，并将其进行混匀，S2.称取1mo l/L的HEPES溶液，再取超纯水，将HEPES溶液溶于纯水中。普通的溶液在除菌时，前序步骤中溶液已经受到细菌的影响或存在除菌不完全的情况，增加银离子杀菌保证杀菌的时效性同时，可以抑制生产完成后产生细菌，并且对细胞不产生影响，在预过滤阶段进行过滤进行直径检测，可以利用多台设备进行同时预处理，避免在最终过滤时过滤速度慢，导致影响生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物材料制备技术领域，具体为一种单克隆抗体保护液及其制备方法。
背景技术
恶性肿瘤具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征，其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程。在全球范围内，肠癌是第三常见的恶性肿瘤，发病原因复杂，多与患者的饮食习惯以及潜在的遗传性疾病有关。目前肠癌的治疗手段包括外科手术，化疗，放疗以及靶向治疗。肠癌患者若在早期发现，诊断时肿瘤细胞仅局限在结肠内壁中，那么通过手术切除，治愈率较高。但是肿瘤细胞一旦发生转移就为肠癌的治疗增加了许多难度，严重影响患者的生存。因此寻找和鉴定早期诊断肠癌的分子标记物十分关键。当获得产生所需的单克隆抗体的杂交瘤细胞后，必须将一部分杂交瘤细胞保存，否则在连续传代的过程中，可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中，难免不发生污染以至于毁灭。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种单克隆抗体保护液及其制备方法，解决了无法进行有效杀菌，导致液体存在无法使用的情况，以及在过滤阶段效率低下，影响产品的制备。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种单克隆抗体保护液，其组成为RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液、HEPES溶液、超纯水、杀菌溶液。
优选的，一种单克隆抗体保护液的制备方法，包括以下步骤：
S1.准备好RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液，并将其进行混匀；
S2.称取1mol/L的HEPES溶液，再取超纯水，将HEPES溶液溶于纯水中；
S3.将S1步骤的溶液倒入S2中制备的溶液中搅拌，通过预过滤装置进行预过滤再进行过滤，所述预过滤装置的出口设置有外径检测仪。
S4.过滤完成后将溶液分装在4-5毫升的瓶中，并放置在4摄氏度的环境下保存。
优选的，所述RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液利用高速搅拌装置进行混匀，所述高速搅拌装置的转速在1000r/m。
优选的，所述RPMI-1640培养基原液为96毫升，所述L.G.溶液为1毫升、所述7.5％碳酸氢钠溶液为1毫升。
优选的，所述超纯水为100毫升，所述称取1mol/L的HEPES溶液为23.83g，杀菌溶液包括银离子与稀盐酸，所述L.G.溶液为L-谷氨酰胺溶液，所述HEPES溶液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液。
(三)有益效果
本发明提供了一种单克隆抗体保护液及其制备方法。具备以下有益效果：
1、该单克隆抗体保护液及其制备方法，普通的溶液在除菌时，前序步骤中溶液已经受到细菌的影响或存在除菌不完全的情况，增加银离子杀菌保证杀菌的时效性同时，可以抑制生产完成后产生细菌，并且对细胞不产生影响。
2、该单克隆抗体保护液及其制备方法，在预过滤阶段进行过滤进行直径检测，可以利用多台设备进行同时预处理，避免在最终过滤时过滤速度慢，导致影响生产。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：
本发明实施例提供一种单克隆抗体保护液，其组成为RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液、HEPES溶液、超纯水、杀菌溶液。
一种单克隆抗体保护液的制备方法，包括以下步骤：
S1.准备好RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液，并将其进行混匀；
S2.称取1mol/L的HEPES溶液，再取超纯水，将HEPES溶液溶于纯水中；
S3.将S1步骤的溶液倒入S2中制备的溶液中搅拌，通过预过滤装置进行预过滤再进行过滤，所述预过滤装置的出口设置有外径检测仪。
S4.过滤完成后将溶液分装在4-5毫升的瓶中，并放置在4摄氏度的环境下保存。
RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液利用高速搅拌装置进行混匀，高速搅拌装置的转速在1000r/m，RPMI-1640培养基原液为96毫升，L.G.溶液为1毫升、所述7.5％碳酸氢钠溶液为1毫升，超纯水为100毫升，称取1mol/L的HEPES溶液为23.83g，杀菌溶液包括银离子与稀盐酸，L.G.溶液为L-谷氨酰胺溶液，HEPES溶液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液。
实施例二：
本发明实施例提供一种单克隆抗体保护液，其组成为RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液、HEPES溶液、超纯水、杀菌溶液。
一种单克隆抗体保护液的制备方法，包括以下步骤：
S1.准备好RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液，并将其进行混匀；
S2.称取1mol/L的HEPES溶液，再取超纯水，将HEPES溶液溶于纯水中；
S3.将S1步骤的溶液倒入S2中制备的溶液中搅拌，通过预过滤装置进行预过滤再进行过滤，所述预过滤装置的出口设置有外径检测仪。
S4.过滤完成后将溶液分装在4-5毫升的瓶中，并放置在4摄氏度的环境下保存。
RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液利用高速搅拌装置进行混匀，高速搅拌装置的转速在1000r/m，RPMI-1640培养基原液为96毫升，L.G.溶液为2毫升、所述7.5％碳酸氢钠溶液为1毫升，超纯水为100毫升，称取1mol/L的HEPES溶液为23.83g，杀菌溶液包括银离子与稀盐酸，L.G.溶液为L-谷氨酰胺溶液，HEPES溶液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液。
| 样品 | L.G.溶液剂量(毫升) | 温度(℃) | 保存时间(天) |
| 实施例1 | 1 | 4 | 31 |
| 实施例2 | 2 | 4 | 35 |
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (5)
1.一种单克隆抗体保护液，其特征在于：其组成为RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液、HEPES溶液、超纯水、杀菌溶液。
2.一种单克隆抗体保护液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1.准备好RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液，并将其进行混匀；
S2.称取1mol/L的HEPES溶液，再取超纯水，将HEPES溶液溶于纯水中；
S3.将S1步骤的溶液倒入S2中制备的溶液中搅拌，通过预过滤装置进行预过滤再进行过滤，所述预过滤装置的出口设置有外径检测仪；
S4.过滤完成后将溶液分装在4-5毫升的瓶中，并放置在4摄氏度的环境下保存。
3.根据权利要求2所述的一种单克隆抗体保护液的制备方法，其特征在于：所述RPMI-1640培养基原液、L.G.溶液、7.5％碳酸氢钠溶液利用高速搅拌装置进行混匀，所述高速搅拌装置的转速在1000r/m。
4.根据权利要求2所述的一种单克隆抗体保护液的制备方法，其特征在于：所述RPMI-1640培养基原液为96毫升，所述L.G.溶液为1～2毫升、所述7.5％碳酸氢钠溶液为1毫升。
5.根据权利要求2所述的一种单克隆抗体保护液的制备方法，其特征在于：所述超纯水为100毫升，所述称取1mol/L的HEPES溶液为23.83g，所述杀菌溶液包括银离子与稀盐酸，所述L.G.溶液为L-谷氨酰胺溶液，所述HEPES溶液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220311 |
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