CN114159439B - Dtq在制备高血压治疗药物中的用途及相关产品 - Google Patents

Abstract

本发明的提供DTQ在制备高血压治疗产品中的用途，其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

Description

DTQ在制备高血压治疗药物中的用途及相关产品

技术领域

本发明属于生物医药研究领域，具体涉及DTQ在制备高血压治疗药物中的用途及相关产品。

背景技术

高血压是我国常见重大慢性疾病之一，是引起心脑血管疾病最重要的危险因素。目前，我国高血压患病率高(23.2％)，即使知晓率和治疗率得到一定的提高，分别为46.9％和40.7％，但也仍不足一半，且控制率仅有15.3％。高血压的发病机制极其复杂，这也使得目前临床上五大类降压药物的治疗效果仍不尽人意，仍存在“天花板效应”，即使血压控制良好，仍存在心、脑、肾等靶器官损害，并最终导致患者死于这些靶器官损害。可见，提高高血压防治水平迫在眉睫，亟待寻找更加安全有效的防治手段和药物。

发明内容

为了克服现有技术中所存在的问题，本发明发现化合物DTQ具有抗高血压作用，但目前尚未见DTQ对高血压等心血管疾病影响的相关报道，有望研发程抗高血压的潜在治疗药物。本发明的目的在于提供DTQ在制备高血压治疗药物中的用途及相关产品。

为了实现上述目的以及其他相关目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面提供DTQ在制备高血压治疗产品中的用途，其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

本发明第二方面提供DTQ在制备具有以下一项或多项症状治疗产品中的用途：

(1)血管功能降低；

(2)血管增厚；

(3)心脏功能降低；

(4)心肌细胞肥大；

其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

本发明第三方面提供一种药物，其特征在于，所述药物中包括DTQ；所述药物具有以下一项或多项治疗功能：

(1)高血压；

(2)血管功能降低；

(3)血管增厚；

(4)心脏功能降低；

(5)心肌细胞肥大；

其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明首次发现DTQ可以应用在制备治疗高血压或高血压引起的心脏病变的药物中，治疗效果良好。为治疗高血压或高血压相关疾病提供了新的治疗途径。

附图说明

图1A DTQ对AngII刺激后小鼠收缩压的影响。

图1B DTQ对AngII刺激后小鼠舒张压的影响。

图1C DTQ对AngII刺激后小鼠平均动脉压的影响。

图1D DTQ对AngII刺激后小鼠体重的影响。

图2A DTQ对AngII刺激后小鼠腹主动脉脉冲波传播速度的影响的超声图。

图2B DTQ对AngII刺激后小鼠腹主动脉脉冲波传播速度的影响的统计分析图。

图2C DTQ对AngII刺激后小鼠腹主动脉脉血管壁厚度的影响的统计分析图。

图3DTQ对AngII刺激后小鼠腹主动脉病理形态的影响。

图4A DTQ对AngII刺激后小鼠心脏功能的影响的超声图(箭头：左室舒张/收缩末期内径)。

图4B DTQ对AngII刺激后小鼠心脏功能的影响的分析图(EF％)。

图4C DTQ对AngII刺激后小鼠心脏功能的影响的分析图(FS％)。

图5DTQ对AngII刺激后小鼠心脏病理形态的影响。

具体实施方式

在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或者按照各制造商所建议的条件。

当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。

除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技术及相关领域的常规技术。

本发明一实施例提供DTQ在制备高血压治疗产品中的用途，其中，DTQ的结构式如式

(I)所示：

其中，DTQ为产品的唯一有效成分或有效成分之一。

在一种实施方式中，所述高血压治疗产品为高血压治疗药物。

可选的，所述高血压治疗药物还包括药学上可接受的载体或辅料。

可选的，所述药物为注射用药物或口服药物。

本发明一实施例提供DTQ在制备具有以下一项或多项症状治疗产品中的用途：

(1)血管功能降低；

(2)血管增厚；

(3)心脏功能降低；

(4)心肌细胞肥大。

所述血管功能降低是指血管脉冲波传播速度升高，治疗血管功能降低是指降低血管脉冲波传播速度，所述降低血管脉冲波传播速度是指将作用对象的血管脉冲波传播速度接近或达到健康血管的速度。例如，以健康血管为基准，所述产品可以使作用对象的血管的血管脉冲传播速度恢复到健康血管的至少70％，80％，90％或100％。

治疗血管增厚是指将作用对象的血管壁接近或达到健康血管的厚度。例如，以健康血管为基准，所述产品可以使作用对象的血管的血管壁的厚度不超过健康血管厚度的130％，120％，110％，100％。

治疗心脏功能降低是指提高心脏射血分数和左室缩短分数，所述提高心脏射血分数和左室缩短分数是指将作用对象的心脏射血分数和左室缩短分数接近或达到健康心脏的分数。例如，以健康心脏为基准，所述产品可以使作用对象的心脏的心脏射血分数和左室缩短分数恢复到健康心脏的至少70％，80％，90％或100％。

治疗心肌细胞肥大是指将作用对象的心肌细胞接近或达到健康大小。例如，以健康心肌细胞为基准，所述产品可以使作用对象的心肌细胞的大小不超过健康心肌细胞130％，120％，110％，100％。

可选的，所述血管功能降低、血管增厚、心脏功能降低或心肌细胞肥大是由高血压所致。

其中，DTQ为产品的唯一有效成分或有效成分之一。

在一种实施方式中，所述产品为高血压治疗药物。

可选的，所述高血压治疗药物还包括药学上可接受的载体或辅料。

可选的，所述药物为注射用药物或口服药物。

本发明一实施例提供一种药物，其特征在于，所述药物中包括DTQ；所述药物具有以下一项或多项治疗功能：

(1)高血压；

(2)血管功能降低；

(3)血管增厚；

(4)心脏功能降低；

(5)心肌细胞肥大。

DTQ为药物的唯一有效成分或有效成分之一。

可选的，所述血管功能降低、血管增厚、心脏功能降低或心肌细胞肥大是由高血压所致。

可选的，所述药物还包括药学上可接受的载体或辅料。

可选的，所述药物为注射用药物或口服药物。

“药学上可接受的”是指当分子本体和组合物适当地给予动物或人时，它们不会产生不利的、过敏的或其它不良反应。

“药学上可接受的载体或辅料”应当与所述有效成分相容，即能与其共混而不会在通常情况下大幅度降低药物的效果。可作为药学上可接受的载体或辅料的一些物质的具体例子是糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，如甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素；西黄蓍胶粉末；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，如Tween；润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等。这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。

本发明中，除非特别说明，药物剂型并无特别限定，可以被制成针剂、口服液、片剂、胶囊、滴丸、喷剂等剂型，可通过常规方法进行制备。药物剂型的选择应与给药方式相匹配。

进一步的，所述药物用于治疗对象体内高血压时，需要将有效剂量的所述的药物施用于对象中。采用该方法，所述高血压被抑制。

对象可以为哺乳动物。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或人。

实施例1

1材料

1.1实验动物

本实验采用SPF级C57BL/6雄性小鼠，体重23±2g。实验动物购买于上海斯莱克实验动物有限公司，实验动物使用许可证号：SCKY(沪)2017-0005。动物实验按照国家科技部于2006年发布的《实验动物治疗指南》进行。实验动物饲养于福建中医药大学实验动物中心SPF级实验室，自由活动进食、饮水，且室内通风光照充足，室温控制在(23±1)℃，相对湿度50-60％左右，12h光照/黑暗循环，保持饲养环境安静无打扰，小鼠经适应性喂养5-7天后用于实验。

1.2实验药物及主要试剂

Angiotensin II(Abcam,ab120183)；渗透微型泵(Alzet，2004D)；DTQ(Targetmol，F477-2035)；缬沙坦(Sigma，PHR315)伊红染色液(北京索莱宝科技有限公司，g1100)；苏木素染色液(北京索莱宝科技有限公司，g1140)；异氟烷(深圳市瑞沃德生命科技有限公司，970-00026-00)；多聚甲醛(福州飞净生物科技有限公司LA0427)，无水乙醇(西陇科学股份有限公司，1280340101602)，二甲苯(西陇科学股份有限公司，1430030101600)等化学试剂。

1.3实验主要仪器

移液器(美国瑞宁公司)；电子天平秤(上海奥豪斯仪器有限公司)；无创鼠尾血压计(美国Kent有限公司)；小动物超声成像系统Vevo2100(富士胶片投资有限公司)；吸入式小动物麻醉机(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)；病理切片机(德国莱卡公司)；石蜡包埋机(湖北孝感亚光医用电子技术有限公司)。

2实验方法

2.1药物配制

称取适量DTQ粉末，根据小鼠平均体重分别按照5mg/kg/d，10mg/kg/d，20mg/kg/d的剂量溶解于相应体积的蒸馏水，配制后置于超声仪保持低温超声1h左右，储存于4℃冰箱备用。称取适量的缬沙坦(Val)粉末，根据小鼠体重按照10mg/kg/d的剂量溶解于相应体积的蒸馏水，配制后储存于4℃冰箱备用。

2.2动物分组及模型构建

雄性C57BL/6小鼠按照基础血压随机分为6组：Control组(n＝5)，AngII组(n＝5)，AngII+DTQ低剂量组(n＝5)，AngII+DTQ中剂量组(n＝5)，AngII+DTQ高剂量组(n＝5)，AngII+Val(n＝5)。手术前一天在超净台内，将渗透微型泵取出，分别给予AngII组、AngII+DTQ低剂量组、AngII+DTQ中剂量组、AngII+DTQ高剂量组、AngII+Val组的渗透微型泵注射200μl的AngII溶液(2.952mg/ml)，同时给予Control组的渗透微型泵注射注入200μl的生理盐水溶液，将所有渗透微型泵浸泡于生理盐水中于37℃细胞培养箱过夜。手术当天，手术台进行常规的消毒，将小鼠用异氟烷麻醉，俯卧位，头颈背部皮肤除毛，通过碘伏消毒，用剪刀剪开皮肤，钝性分离皮下组织，给予AngII组，AngII+DTQ低剂量组，AngII+DTQ中剂量组，AngII+DTQ高剂量组，AngII+Val组小鼠皮下植入预置的含有AngII的渗透微型泵，同时给予Control组小鼠皮下植入预置的含有生理盐水的渗透微型泵，缝合和消毒皮肤。埋泵第二天起分别给予AngII+DTQ低剂量组、AngII+DTQ中剂量组、AngII+DTQ高剂量组小鼠5mg/kg/d、10mg/kg/d、20mg/kg/d的DTQ灌胃，给予AngII+Val组小鼠10mg/kg/d的缬沙坦灌胃，Control组和AngII组给予等体积的蒸馏水灌胃，每天1次，一共干预4周。

2.3血压测量

本实验采用无创鼠尾动脉血压计监测各组小鼠血压改变。保持实验动物处于平静状态，然后将其装入束缚器中，将闭塞套装在鼠尾恰当的位置(松紧适当)，然后套入容积压力传感器(VPR)，确保鼠尾有一分部露出传感器，将小动物束缚器放置在加热板上，根据室内温度选择合适的加热档对鼠尾进行加热，并用一块黑色毛巾将小动物头部盖住并保证实验环境的安静，让其在黑暗状态下静息10min后，开始检测血压，闭塞套和VPR传感器循环充气与放气15次，设置电脑软件，测量15次取其平均值。通过该仪器测量小动物尾动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)以及平均动脉压(MBP)。

2.4腹主动脉脉冲波传导速度和厚度测量

使用Vevo 2100动物超声仪(VisualSonics，Toronto，Ontario，Canada)进行腹主动脉的脉冲波速度及血管厚度检测。小鼠经2％异氟烷吸入麻醉下仰卧位固定于生理信息监测台上维持麻醉浓度1.5-2％。用脱毛膏进行腹部脱毛，并在腹部、生理信息监测仪上涂抹适量耦合剂。将探头平行置于腹部正中处，应用B模式超声记录腹主动脉，另将探头垂直于腹部正中处，应用M模式超声记录近心端和远心端传导情况，测量腹主动脉血管长度和末梢延迟时间来计算小鼠脉冲传播速度，同时通过对超声结果进行血管厚度进行分析。

2.5超声心动图检测心功能

小鼠经异氟烷麻醉后，采用MS400C探头采集小鼠的胸骨旁长轴切面，进行B型取样，保存图像，并在长轴切面上，放大图像，并进行M型取样，保存图像。每只小鼠连续描计3个心动周期，通过测量结果进行心脏功能指标计算。

2.6 HE染色

取小鼠腹主动脉、心脏组织，置于4％多聚甲醛中固定24h后，采用梯度乙醇进行脱水处理，再将组织块置于二甲苯中透明，经浸腊之后对组织进行石蜡包埋。将组织切成4μm薄片，置于37℃烤箱中过夜，经二甲苯I、II透明和梯度乙醇再水化后，切片分别经苏木精溶液中染色1min和伊红溶液中染色10s。晾干后，样本经中性树胶封片，并通过显微镜观察组织的病理形态改变。

2.8统计学分析

首先对数据采用Shapiro-Wilk检验的方法分析是否符合正态分布，对正态分布的数据进行方差齐性检验。对于符合正态分布且方差齐性的数据，采用ANOVA多组比较。对于非正态分布或方差不齐的数据，采用Kruskal-Wallis检验。P<0.05被认为有统计学差异。所有的数据分析均在SPSS26.0中进行。

3实验结果

3.1 DTQ对AngII刺激小鼠血压的影响

无创血压计监测各组小鼠血压发现，与Control组相比，AngII组小鼠的收缩压(SBP；图1A)、舒张压(DBP；图1B)和平均动脉压(MBP；图1C)均显著升高，而DTQ低、中、高剂量和缬沙坦干预后三者均显著降低(图1A-C；*P<0.05，与Control组相比；#P<0.05，与AngII组相比)。同时，体重测量发现DTQ干预对小鼠未见明显影响(图1D)。

3.2 DTQ对AngII刺激小鼠腹主动脉脉冲波传播速度和厚度的影响

小鼠经AngII诱导和DTQ或Val干预4周后，采用小动物超声检测、分析各组小鼠脉冲波传播速度和血管厚度。如图2A-B所示，与Control组相比，AngII组小鼠腹主动脉脉冲波传播速度明显升高，而DTQ低、中、高剂量和Val小鼠脉冲波传播速度显著降低(*P<0.05，与Control相比；#P<0.05，与AngII组相比)与Control组相近；AngII组小鼠腹主动脉厚度明显增厚，而DTQ低、中、高剂量和Val干预后小鼠腹主动脉厚度显著降低(图2C；*P<0.05，与Control相比；#P<0.05，与AngII组相比)。

3.3 DTQ对AngII刺激小鼠腹主动脉病理形态的影响

采用HE观察DTQ对小鼠腹主动脉形态的改变。如图3所示，与Control相比，AngII组小鼠的腹主动脉具有一定程度增厚，而DTQ低、中、高剂量或缬沙坦干预后得到进一步缓解。

3.4 DTQ对AngII刺激小鼠心脏功能的影响

本研究通过小动物超声评估心脏功能改变情况。与Control组相比，AngII组小鼠心脏功能指标射血分数(Ejection fraction；EF)(图4A-B)和左室缩短分数(Fractionalshortening；FS)(图4A和图4C)均显著降低，而DTQ中、高剂量和缬沙坦干预后，二者均显著升高(*P<0.05，与Control相比；#P<0.05，与AngII组相比)。

3.5 DTQ对AngII刺激小鼠心脏病理形态的影响

本研究通过HE染色观察心脏组织的病理形态结构的改变。结果如图5所示，与Control组相比，AngII组心肌细胞排列整齐性改变，肥大的心肌细胞数量以及炎性细胞细胞数量增加，而DTQ低、中、高剂量和缬沙坦干预后，心肌组织病理形态改善，心肌细胞肥大现象改善，细胞与细胞之间的排列紊乱的现象改善，炎性细胞数浸润减少。

结论：

DTQ显著降低AngII模型小鼠血压、改善血管功能、缓解腹主动脉增厚和病理改变，同时具有改善高血压所致心脏功能降低和病理改变的作用。

Claims (5)

1.DTQ在制备高血压治疗药物中的用途，其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，DTQ为产品的唯一有效成分或有效成分之一。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述高血压治疗药物还包括药学上可接受的载体或辅料。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为注射用药物或口服药物。

5.DTQ在制备改善高血压所致的以下一项或多项症状的药物中的用途：

(1)血管功能降低；

(2)血管增厚；

(3)心脏功能降低；

(4)心肌细胞肥大；

其中，DTQ的结构式如式(I)所示：

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