CN114129599A - 蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用，涉及生物技术领域。通过探究试验发现，蚕蛹可以促进多种肠道益生菌的增殖，可以用于制备形成能够定向促进肠道益生菌增殖的产品，如粪菌移植用药剂，具有广阔的应用前景。此外，本发明还为临床应用提供科学依据，达到高效制备益生菌剂的目的。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用。
背景技术
蚕蛹(silkworm pupa)是鳞翅目、蚕蛾科昆虫蚕(Bombyx moil L.)的蛹。既是一种高营养的美食，同时也是传统中药材，《本草纲目》记载，其可治疗风寒及劳瘦、恶疮、小儿疳瘦等疾病，具有长肌退热、除蛔虫、止消渴等药用功效。蚕蛹对肠道益生菌的促进作用，目前未见相关报道。
双歧杆菌属(Bifidobacterium)是一种革兰氏阳性、不运动、细胞呈杆状、一端有时呈分叉状、严格厌氧的细菌属，广泛存在于人和动物的消化道、阴道和口腔等生境中。双歧杆菌属的细菌是人和动物肠道菌群的重要组成成员之一，一些双歧杆菌的菌株可以作为益生菌而用在食品、医药和饲料方面。
肠道微生物不仅在膳食和宿主之间起到了重要的桥梁作用，其本身以及代谢产物也能调节人体健康，因此肠道微生物与人体健康密切相关。比如上述双歧杆菌属，若该益生菌缺乏则势必会引起人体的菌群失调，影响人体健康。若能够开发定向促进双歧杆菌属(Bifidobacterium)增殖的食品、药物等，则对于人体健康会起到积极的作用。
此外，FMT(粪菌移植)作为一种新兴的医疗技术，为患者提供对其疾病有改善作用的健康菌群是最重要的一环。通过二代测序技术可以检测出患者的菌群情况，为精准FMT提供更高的需求。因此，定向增殖对患者有益的供体肠道细菌是未来FMT所亟需的技术，但是如何实现有益菌的定向增殖是关键环节。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用。
本发明的另一目的在于提供定向促进肠道益生菌增殖的产品，能够利用蚕蛹定向促进肠道益生菌增殖的特性，制备形成具备很好市场应用价值的产品。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明提供蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用。
在可选的实施方式中，肠道益生菌为多种益生菌组成的益生菌群，肠道益生菌包括Bifidobacterium、Lactobacillus、Lactococcus和Faecalibacterium。
在可选的实施方式中，肠道益生菌选自Bifidobacterium、Lactobacillus、Lactococcus和Faecalibacterium中的至少一种。
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在可选的实施方式中，肠道益生菌选自Bifidobacterium和Lactobacillus中的至少一种。
在可选的实施方式中，肠道益生菌为Bifidobacterium。
第二方面，本发明提供一种定向促进肠道益生菌增殖的产品，包括蚕蛹。
在可选的实施方式中，产品为益生菌补充剂。
在可选的实施方式中，产品为粪菌移植用药剂，粪菌移植用药剂的活性成分包括蚕蛹。
在可选的实施方式中，粪菌移植用药剂为菌液或胶囊。
本发明具有以下有益效果：发明人在长期的探索中发现蚕蛹可以促进多种肠道益生菌的增殖，可以用于制备形成能够定向促进肠道益生菌增殖的产品，如粪菌移植用药剂，具有广阔的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为利用蚕蛹干预前后的丰度对比图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
针对如何定向增殖对人体有益的供体肠道细菌，发明人进行了长期的探究实验，发现蚕蛹对于多种对人体非常重要的肠道益生菌具备显著的促进作用，有利于解决FMT技术中肠道益生菌定向增殖的关键问题。
本发明实施例提供蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用，利用蚕蛹可以定向促进肠道益生菌增殖的特性，将蚕蛹制备成具有市场应用价值的产品。
在一些实施例中，肠道益生菌为多种益生菌组成的益生菌群，肠道益生菌包括Bifidobacterium(双歧杆菌属)、Lactobacillus(乳杆菌属)、Lactococcus(乳球菌属)和Faecalibacterium。
在另外的实施例中，肠道益生菌选自Bifidobacterium、Lactobacillus、Lactococcus和Faecalibacterium中的至少一种，肠道益生菌可以为单一菌种也可以为组合菌种。
在优选的实施例中，肠道益生菌选自Bifidobacterium、Lactobacillus和Lactococcus中的至少一种。蚕蛹对Bifidobacterium、Lactobacillus和Lactococcus的促进效果要优于Faecalibacterium。
在更优选的实施例中，肠道益生菌选自Bifidobacterium和Lactobacillus中的至少一种。蚕蛹对Bifidobacterium和Lactobacillus的促进效果要优于Faecalibacterium和Lactococcus。
在最优选的实施例中，肠道益生菌为Bifidobacterium。发明人发现，蚕蛹对Bifidobacterium表现出异常突出的促进效果，可以特异性增殖Bifidobacterium。
本发明实施例提供一种定向促进肠道益生菌增殖的产品，包括蚕蛹，产品的形式不限，可以为一般的食品、保健品，也可以为药品。
在一些实施例中，该产品为益生菌补充剂，其可以配合其他的益生菌形成组合物的形式，一方面直接补充某种肠道益生菌，一方面可以利用蚕蛹定向促进一些肠道益生菌的增殖。
在一些实施例中，该产品为粪菌移植用药剂，其活性成分包括蚕蛹，可以将其用于FMT技术中，解决肠道益生菌定向增殖的关键问题。
在一些实施例中，粪菌移植用药剂为菌液或胶囊，药剂的具体剂型不限，可以根据需要选择常规的剂型即可。
下面结合探究实验，证明蚕蛹对肠道益生菌的作用。
发明人探究了蚕蛹对肠道益生菌的作用，为准确测试菌群丰度，在体外进行体内模拟实验，取一定含量的人体粪便作为肠道菌群的样品，测试蚕蛹对肠道益生菌的作用。具体如下：
(1)实验用PBS缓冲试剂配制
称取：KH2PO4 0.24g，Na2HPO4·12H2O 2.90g，NaCl 8.00g，KCl 0.20g，将称取的药品放入烧杯中，向烧杯中加入800mL去离子水，搅拌溶解，加入酸液或碱液调整溶液pH值为7.4左右。
将调节pH值后的溶液转移至1000mL容量瓶中，定容。将1000mL缓冲液用两个1000mL的瓶子盛放，防止盛放过满在高压灭菌是喷出。采用高压灭菌锅灭菌(121℃，15分钟)冷却后，存放于冰箱中。
(2)肠道微生物样品制备
称取10g粪便样品，取适量步骤(1)中的PBS缓冲液至离心管中，在振荡器上充分混匀。然后将完全混匀的样品平均分装至新50ml离心管中，每管再加适量PBS缓冲液。
把稀释好的样品依次通过20目、50目、100目、200目的滤网进行过滤，收集滤液至离心管中，将离心管放入离心机，配平，6000G，4℃离心15min，弃上清。将沉淀称量之后，以终浓度为5％用PBS溶液定容，得到肠道微生物样品。
(3)GAM培养基制备
称取60g改良GAM肉汤药品，倒入1000ml的烧杯中，量取800ml超纯水倒入烧杯中，搅拌溶解。将完全溶解的溶液转移至1000ml容量瓶，用去离子水定容。
将定容后的溶液倒入玻璃瓶中，用两个1000mL的瓶子盛放，防止盛放过满在高压灭菌是喷出。采用高压灭菌锅灭菌(使用液体程序，121℃，15分钟)，冷却。
(4)蚕蛹-GAM培养基制备
移取上述GAM培养基分装至玻璃管中，每管2ml，用黑色盖子放在瓶口上微掩。移取蚕蛹溶液(蚕蛹购于西安奥赛生物科技有限公司，形态为粉末状，蚕蛹原料的浓缩比为30:1，即用30公斤原料提取、浓缩成1公斤提取物，在使用时将原料用PBS缓冲液溶解至蚕蛹质量百分浓度为5％)加入上述装有GAM培养基的玻璃管中，每管2ml，作为试验组。同时，还设置有空白对照组，每组3个重复，具体如下：
试验组：2ml GAM培养基+2ml蚕蛹溶液+1mL PBS缓冲液；
空白对照组：2ml GAM培养基+3mL PBS缓冲液。
(5)干预试验
用84消毒液对厌氧箱传递箱消毒之后，将试验组和空白对照组中的玻璃管转移至厌氧箱传递箱中。放入厌氧箱后，拧松瓶盖，置换氧气12个小时。
将步骤(2)处理后得到的肠道微生物样品分别接种至试验组(蚕蛹-GAM培养基-PBS缓冲液)以及空白对照组(GAM培养基-PBS缓冲液)中，每管1ml。于厌氧箱中培养72小时后，观察菌群的生长状况，拍照留存。
分别将试验组样品和对照组样品，10000rpm，3min离心，弃上清，将沉淀用液氮处理，并送至武汉艾康健生物科技有限公司，分别测定试验组和对照组中的肠道菌群丰度，即不同肠道微生物在检测到的所有菌种中所占的百分比。其中，部分肠道菌群的丰度测定结果如表1所示。
表1不同处理组的肠道菌群丰度
对部分肠道菌群经蚕蛹干预前后的丰度变化进行显著性分析，结果如图1所示，其中**表示P＜0.01，即丰度变化有极显著差异；*表示P＜0.05，即丰度变化有显著差异。在蚕蛹的培养下：Bifidobacterium，有极其显著的升高；Lactobacillus，Lactococcus，Faecalibacterium，有显著变化。
综上所述，本发明提供蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用，通过体外模拟肠道环境，并以健康人体粪便中收集的肠道菌群作为样本，将蚕蛹应用到促进益生菌增殖发酵，为临床应用提供科学依据。可以用于制备形成能够定向促进肠道益生菌增殖的产品，如粪菌移植用药剂，具有广阔的应用前景。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肠道益生菌为多种益生菌组成的益生菌群，所述肠道益生菌包括Bifidobacterium、Lactobacillus、Lactococcus和Faecalibacterium。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肠道益生菌选自Bifidobacterium、Lactobacillus、Lactococcus和Faecalibacterium中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肠道益生菌选自Bifidobacterium、Lactobacillus和Lactococcus中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肠道益生菌选自Bifidobacterium和Lactobacillus中的至少一种。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肠道益生菌为Bifidobacterium。
7.一种定向促进肠道益生菌增殖的产品，其特征在于，包括蚕蛹。
8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于，所述产品为益生菌补充剂。
9.根据权利要求7所述的产品，其特征在于，所述产品为粪菌移植用药剂，所述粪菌移植用药剂的活性成分包括蚕蛹。
10.根据权利要求9所述的产品，其特征在于，所述粪菌移植用药剂为菌液或胶囊。
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| CN202111612935.1A CN114129599A (zh) | 2021-12-27 | 2021-12-27 | 蚕蛹在制备定向促进肠道益生菌增殖的产品中的应用 |
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| CN107223813A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-10-03 | 安徽省泾县丰瑞水产科技有限公司 | 一种用于鲟鱼仔鱼阶段的饲料 |
| CN108523112A (zh) * | 2018-03-16 | 2018-09-14 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种蚕蛹食品基料及其制备方法和应用 |
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2021
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Patent Citations (2)
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