CN114129493B - 一种天麻免洗抑菌凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于抗菌消毒技术领域，具体涉及一种天麻免洗抑菌凝胶及其制备方法和应用。本发明提供的抑菌凝胶以天麻提取物为主体，通过合理控制连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁和精油的用量，各组分之间协同协同增效，具有极强的杀菌、抑菌作用。活性成分搭配辅料，无需添加乙醇和人工合成的香味，即可实现皮肤消毒，对皮肤温和无刺激，不易产生毒副作用。

Description

一种天麻免洗抑菌凝胶及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于抗菌消毒技术领域，具体涉及一种天麻抑菌凝胶及其制备方法和应用。

背景技术

人的群体生活难免会导致有害病菌的传播，接触性病毒会附着在身体表皮上危害人体的健康，适当的抑菌产品应用能够很好的阻断这一传播途径。

常规的抑菌、免洗凝胶或女性私部护理免洗产品、其配伍多以含量75％～95％乙醇、抑菌剂、香精、丙二醇等或某几个化学原料而完成产品组方，局部短时抑菌效果较好。但因含乙醇，伴随有强烈的刺鼻气味，易挥发，并且乙醇浓度较高，反复使用伤皮肤，容易引起皮肤瘙痒红肿等不良反应。

发明内容

本发明的目的在于提供一种天麻免洗抑菌凝胶，本发明提供的抑菌凝胶不含化学原料和乙醇，对皮肤温和无刺激，抑菌和保湿效果显著，持久性强。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种天麻免洗抑菌凝胶，以质量百分含量计，包括天麻提取物0.1～10％、连翘提取物0.5～10％、苦参提取物0.2～10％、芍药提取物0.1～10％、芦荟汁1～10％、精油0.03～1.5％、辅料1.3～13.2％和余量的水。

优选的，本发明所述天麻提取物为超声提取物；所述连翘提取物、苦参提取物和芍药提取物为醇提取物。

优选的，所述精油包括柠檬香茅叶精油、迷迭香精油和白千层精油中的一种或多种；当所述精油含有柠檬香茅叶精油时，所述柠檬香茅叶精油的质量为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％；当所述精油含有迷迭香精油时，所述迷迭香精油的质量为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％；当所述精油含有白千层精油时，所述白千层精油的质量为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％。

优选的，所述辅料包括增稠剂、增溶剂、抗氧化剂、pH调节剂和保湿剂；当所述辅料含增稠剂时，所述增稠剂的质量为抑菌凝胶总质量的0.1～0.6％；当所述辅料含增溶剂时，所述增溶剂的质量为抑菌凝胶总质量的0.1～2％；当所述辅料含抗氧化剂时，所述抗氧化剂的质量为抑菌凝胶总质量的0.1～0.6％；当所述辅料含pH调节剂时，所述pH调节剂的质量为抑菌凝胶总质量的0.5～5％；当所述辅料含保湿剂时，所述保湿剂的质量为抑菌凝胶总质量的0.5～5％。

优选的，所述增稠剂包括卡波姆；所述增溶剂包括氢化蓖麻油；所述抗氧化剂包括对羟基苯乙酮；所述pH调节剂包括三乙醇胺；所述保湿剂包括甘油。

本发明还提供了上述抑菌凝胶的制备方法，包括：将天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、精油、辅料和水混合，得到天麻免洗抑菌凝胶。

优选的，天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、精油、辅料和水混合包括以下步骤：

混合增稠剂、保湿剂和水，得第一预混液；

将抗氧化剂与第一预混液混合，得第二预混液；

将天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、第二预混液与pH调节剂混合，得第三预混液；

将精油、增溶剂与第三预混液混合乳化，得抑菌凝胶。

本发明还提供了前述技术方案所述抑菌凝胶在制备日用品中的应用。

本发明提供了一种天麻免洗抑菌凝胶，以质量百分含量计，包括天麻提取物0.1～10％、连翘提取物0.5～10％、苦参提取物0.2～10％、芍药提取物0.1～10％、芦荟汁1～10％、精油0.03～1.5％、辅料1.3～13.2％和余量的水。

本发明提供的抑菌凝胶通过合理控制天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁和精油的用量，各组分之间协同增效，具有极强的杀菌、抑菌作用。中草药成分搭配辅料，无需添加乙醇和人工合成的香味，即可实现皮肤消毒，对皮肤温和无刺激，不易产生毒副作用，同时具有保湿护肤的功效。

进一步的，本发明天麻提取物为超声提取物，保留了活性成分，结合连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁和精油，增强了抑菌效果，对大肠杆菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌都具有良好的杀灭作用，灭菌对数值均可达99.9％以上。

本发明提供的抑菌凝胶可直接添加至洗手液、洗发水和沐浴露等日用品中，补充皮肤水分，让皮肤长效保湿。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为蛋白浓度与吸光值的对应关系；

图2为抑菌凝胶样品原液，置温度54℃、相对湿度85％的恒温恒湿箱0天以及14天后，样品颜色无变化。

具体实施方式

本发明提供了一种连翘免洗抑菌凝胶，按以质量百分含量计，包括包括天麻提取物0.1～10％、连翘提取物0.5～10％、苦参提取物0.2～10％、芍药提取物0.1～10％、芦荟汁1～10％、精油0.03～1.5％、辅料1.3～13.2％和余量的水。

以质量百分含量计，本发明提供的抑菌凝胶包括天麻提取物0.1～10％，优选为1～10％，进一步优选为2％。本发明所述天麻提取物优选为鲜天麻提取物。在本发明中，天麻具有息风止痉，平抑肝阳，祛风通络的功效。主治肝风内动，惊痫抽搐，眩晕，头痛，肢体麻木，手足不遂，风湿痹痛等；天麻中含量较高的主要成分是天麻甙(gastrodin)，也称天麻素，初生球茎含有一种抗真菌蛋白以及几丁质酶(chitnase)，β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)，还含有具增强免疫作用的天麻多糖以及多种微量元素。所述天麻提取物，含有大量活性寡糖与肽类物质，具有良好的抑菌效果。

以所述天麻的质量百分含量为基准，本发明提供的抑菌凝胶包括连翘提取物0.5～10％，优选为1～10％，进一步优选为5％。本发明所述连翘优选为贯叶连翘。在本发明中，所述贯叶连翘味苦、辛、性平，可清热解毒，调经止血，含有挥发油及连翘苷酯等多种活性成分，具有良好的抑菌效果。

以所述天麻的质量百分含量为基准，本发明提供的抑菌凝胶包括苦参提取物0.2～10％，优选为1～10％，进一步优选为2％。在本发明中，所述苦参根含苦参碱(matrine)和金雀花碱(cytisine)等，入药有清热利湿，抗菌消炎，健胃驱虫之效，常用作治疗皮肤瘙痒以所述天麻的质量百分含量为基准，本发明提供的抑菌凝胶包括芍药提取物0.1～10％，优选为1～10％，进一步优选为2％。在本发明中，所述芍药具有清热凉血，活血祛瘀的功效。主治温毒发斑，血热吐衄，目赤肿痛，痈肿疮疡，肝郁胁痛，经闭痛经，癥瘕腹痛，跌打损伤。

在本发明中，所述天麻提取物优选为超声提取物，进一步优选为将天麻研磨成细粉与水混合后进行超声提取。本发明所述天麻以超声提取，并未破坏天麻活性成分，很好的保留了天麻中活性寡糖与肽类物质，增强了抑菌效果。所述超声提取过程中，功率优选为2000～3500W，进一步优选为3000W；温度优选为20～27℃，进一步优选为25℃；提取时间优选为24～40min，进一步优选为30min；天麻与水的质量体积比优选为5g：200mL～10g：500mL，进一步优选为5g：200mL。天麻细粉的粒径优选为100目～200目，进一步优选为200目。

在本发明中，所述连翘提取物、苦参提取物和芍药提取物优选为醇提取物。本发明以乙醇提取，提高连翘，苦参和芍药的提取率，很好地保留了各药材活性成分；提取过程中乙醇的浓度优选为50％～80％，进一步优选为50％。本发明所述中药与乙醇的质量比优选为1:(3～5)，进一步优选为1:3；本发明乙醇提取时提取温度优选为80～90℃；乙醇提取时间优选为2～3h，进一步优选为2h。本发明优选依次对所述连翘、苦参和芍药进行提取，得到连翘提取物、苦参提取物和芍药提取物。本发明依次对所述连翘、苦参和芍药进行提取，可以避免因溶质的溶解达到饱和而导致提取不完全的问题。

在本发明中所述天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物按质量比为1～10：1～10：1～10：1～10进行复配，进一步优选为质量比2:5:2:2。

以所述天麻的质量百分含量为基准，本发明提供的抑菌凝胶包括芦荟汁1～10％，优选为2～5％，进一步优选为2％。在本发明中，所述芦荟汁富含天然生理水、矿物质和木质素，除抑菌作用外，还具有极强的渗透性，如海绵吸水般直达皮肤最深层，直接补充皮肤所需水分。

以所述天麻的质量百分含量为基准，本发明提供的抑菌凝胶包括精油0.03～1.5％，优选为柠檬香茅叶精油、迷迭香精油和白千层精油中的一种或多种。当所述精油含有柠檬香茅叶精油时，所述柠檬香茅叶精油的质量优选为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％，进一步优选为0.1％；当所述精油含有迷迭香精油时，所述迷迭香精油的质量优选为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％，进一步优选为0.15％；当所述精油含有白千层精油时，所述白千层精油的质量优选为抑菌凝胶总质量的0.01～0.5％，进一步优选为0.15％。本发明所述精油进一步优选为柠檬香茅叶精油、迷迭香精油和白千层精油的混合物。所述柠檬香茅叶精油、迷迭香精油和白千层精油的质量比优选为2:3:3。在本发明中，所述精油性质温和无刺激，同样发挥了香味剂的作用，且不易产生毒副作用，适用范围广。

本发明通过对天麻、连翘、苦参和芍药活性成分进行提取，很好地保留了各药材活性，稳定性好。配以芦荟汁和精油，通过合理控量，使各组分相互协同作用，对大肠杆菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌都具有良好的杀灭作用，灭菌对数值均可达99.9％以上，且不易产生毒副作用。

本发明提供的抑菌凝胶还包括增稠剂、增溶剂、抗氧化剂、pH调节剂和保湿剂等辅料。在本发明中，当所述辅料含增稠剂时，以所述天麻提取物的质量百分含量为基准，所述增稠剂为0.1～0.6％，优选为0.4％；本发明所述增稠剂优选为卡波姆。在本发明中，所述卡波姆除作为增稠剂外，也可作为凝胶剂和乳化稳定剂使用。

在本发明中，当所述辅料含增溶剂时，以所述天麻提取物的质量百分含量为基准，所述增溶剂为0.1～2％，优选为1.2％；本发明所述增溶剂优选为氢化蓖麻油。在本发明中，所述氢化蓖麻油除作为增溶剂外，也可作为乳化剂使用。

在本发明中，所述精油和氢化蓖麻油的质量比优选为1:3，使精油和氢化蓖麻油充分溶解。

在本发明中，当所述辅料含抗氧化剂时，以所述天麻提取物的质量百分含量为基准，所述抗氧化剂为0.1～0.6％，进一步优选为0.3％。本发明所述抗氧化剂优选为对羟基苯乙酮。

在本发明中，当所述辅料含pH调节剂时，以所述连翘提取物的质量百分含量为基准，所述pH调节剂为0.5～5％，进一步优选为0.5％。本发明所述pH调节剂优选为三乙醇胺。

在本发明中，当所述辅料含保湿剂时，以所述天麻提取物的质量百分含量为基准，所述保湿剂为0.5～15％，进一步优选为2％。本发明所述保湿剂优选为甘油。

在本发明中，所述增稠剂、pH调节剂和保湿剂的质量比为1～6：5～50：5～50，优选为1～4：5～30：5～30。

本发明所述水优选为纯化水；本发明对纯化水的来源没有特殊要求。

本发明抑菌凝胶中所含天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁和精油，在增稠剂、增溶剂、抗氧化剂、pH调节剂和保湿剂的共同作用下，不必添加人工合成的香味剂和乙醇，即可在没有水的条件下进行皮肤消毒，并且温和无刺激，广泛适用于人类群体。

本发明还提供了上述技术方案所述抑菌凝胶的制备方法，包括：将天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁、精油、辅料和水混合，得到天麻免洗抑菌凝胶。在本发明中，所述天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、精油、芦荟汁、辅料和水的混合方式优选包括以下步骤：

混合增稠剂、保湿剂和水，得第一预混液；

将抗氧化剂与第一预混液混合，得第二预混液；

将天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁、第二预混液和pH调节剂混合，得第三预混液；

将精油、增溶剂与第三预混液混合乳化，得抑菌凝胶。

在本发明中，所述增稠剂、保湿剂和水的混合优选在乳化锅内混合；进一步优选将所述增稠剂、保湿剂和水按照增稠剂、保湿剂和水的顺序投入乳化锅，冷水分散并进行搅拌。在本发明中，所述冷水的温度优选为20～35℃，进一步优选为25℃；所述搅拌的速度优选为2000～3500rpm，进一步优选为2500rpm；所述搅拌的时间优选为40～60min，进一步优选为50min。在本发明中，增稠剂、保湿剂和水顺序加入，冷水分散和搅拌，可以使增稠剂、保湿剂和水充分水合，促进混合液的充分融合。

本发明优选在搅拌完成后，升高温度进行二次搅拌；所述温度优选为50～65℃，进一步优选为60℃；所述二次搅拌的速度优选为2000～3500rpm，进一步优选为2500rpm；二次搅拌的时间优选为30～60min，进一步优选为60min。

得第一预混液后，本发明优选将所述第一预混液的温度降至40～45℃以下，进一步优选为40℃以下时，混合所述抗氧化剂。在本发明中，所述抗氧化剂与第一预混液的混合的方式为搅拌混合；所述搅拌混合的时间优选为30～60min，进一步优选为30min。

得到第二预混液后，本发明优选将天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、第二预混液、芦荟汁和pH调节剂混合。在本发明中，所述混合在搅拌条件下进行；本发明优选在所述第二预混液中依次加入所述天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物和芦荟汁后搅拌混合再加入pH调节剂。本发明进一步优选将所述第二预混液的温度降至40～50℃，进一步优选为降至40℃时加入上述中药提取物和芦荟汁。在本发明中，上述中药提取物和芦荟汁在低温下添加，保护活性成分完整性。

本发明优选向中药提取物、芦荟汁与第二预混液的混合物中加入pH调节剂，得到第三预混液；在本发明中，所述第三预混液的pH值优选为4.5～6.5，进一步优选为5.59。

得到第三预混液后，本发明优选将精油、增溶剂与第三预混液混合乳化，得到抑菌凝胶；所述增溶剂能够促进精油与第三预混液溶解。本发明将柠檬香茅叶精油、迷迭香精油、白千层精油和氢化蓖麻油顺次添加至第三预混液中，在搅拌条件下混合增溶，得到精油增溶液。在本发明中，所述混合增溶优选在加热条件下进行；所述加热的温度优选为40～50℃，进一步优选为40℃。

本发明优选将精油增溶液添加至第三预混液中实现混合乳化；所述混合乳化优选在搅拌条件下进行；所述搅拌的时间优选为30～60min，进一步优选为30min。

本发明还提供了上述技术方案所述抑菌凝胶在抑菌日用品中的应用。利用本发明所述抑菌凝胶制备抑菌日用品时，可直接将所述抑菌凝胶添加至洗手液、洗发水和沐浴露等日用品中，补充皮肤水分，让皮肤长效保湿。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种天麻免洗抑菌凝胶及其制备方法和应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

以下实施例，如无特殊说明，所提及的百分含量均为相应组分在抑菌凝胶中所占质量的比例。

实施例1

分别将鲜天麻、小天麻、大天麻、干天麻研磨成100～200目(大小)细粉，精密称取天麻药材细粉5g，加入纯化水200mL，置于250mL容量瓶中，室温超声提取30min，定溶至250mL。3000转离心20min留上清，即得不同天麻提取物样品。

实施例2

1)依次称取100g连翘、100g苦参、100g芍药，分别至于3个5L圆底瓶中；

2)分别向3个圆底瓶中加入3L 50％～80％乙醇水溶液，65℃回流提取2h，过滤得提取液并回收乙醇；

3)分别向提取液中加入3～5％甘油助溶，定容至3L，得到连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物提取物备用。

实施例3

1)准确称量实施例1中天麻提取物2g；实施例2中连翘提取物5g、苦参提取物2g、芍药提取物2g备用；

2)将0.4g卡波姆、2g甘油、82.2g纯化水按顺序投入乳化锅里，冷水分散并高速搅拌，充分水合，开启升温系统恒温60℃搅拌60min；

3)降温至40℃以下加入0.3g对羟基苯乙酮，继续搅拌30min；

4)依次加入步骤1)得到的天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物和2g芦荟汁，继续搅拌30min后加入0.5g三乙醇胺；

5)将0.1g柠檬香茅叶精油，0.15g迷迭香精油，0.15g白千层精油，1.2g氢化蓖麻油按顺序混合，40℃加热，搅拌30min至完全透明，得到增溶好的精油组合物；

6)将增溶好的精油组合物投入乳化锅里，搅拌30min得植物抑菌凝胶。

实施例4

同实施例3，区别在于步骤1)准确称量实施例1中天麻提取物3g；实施例2中连翘提取物4g、苦参提取物2g、芍药提取物2g。

实施例5

同实施例3，区别在于步骤2)将0.3g卡波姆、3g甘油、81.3g纯化水按顺序投入乳化锅里，冷水分散并高速搅拌，充分水合，开启升温系统恒温60℃搅拌60min。

实施例6

同实施例3，区别在于步骤2)开启升温系统恒温80℃搅拌60min；

实施例7

同实施例3，区别在于步骤5)将0.2g柠檬香茅叶精油，0.1g白千层精油，0.1g氢化蓖麻油按顺序混合，40℃加热，搅拌30min至完全透明，得到增溶好的精油组合物；

对比例1

同实施例3，区别在于，不含天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁和精油，得到辅料混合物。

测试例1

天麻中蛋白含量检测实验

1)样品：分别称量等量的实施例1制备得到的不同天麻提取物样品，鲜天麻提取物作为1号样品、大天麻提取物、小天麻提取物和干天麻提取物依次为2～4号样品。

2)检测试剂：BCA试剂盒(碧云天)

3)BCA蛋白定量的主要原理：蛋白质在碱性条件下，可以将二价Cu²⁺离子还原成一价Cu⁺离子。产生的一价Cu⁺离子可以与BCA(Bicinchoninic acid)试剂结合，最终生成紫色的复合物。该复合物在562nm处有很强的吸收峰。复合物的多少与蛋白质的浓度呈接近的线性关系。

4)实验方法：

1.BCA工作液的配制：将5000μL的BCA试剂A与100μL的BCA试剂B混合，得到5100μL的BCA工作液。

2.BCA标准品的配制：将BCA标准品做系列稀释，分别得到如下9个不同浓度的标准品：2000μg/mL，1500μg/mL，1000μg/mL，500μg/mL，250μg/mL，125μg/mL，62.5μg/mL，31.25μg/mL，0μg/mL。

3.取BCA标准品和待测样品各25μL到96孔板孔内，向每孔中加入200μL的BCA工作液，盖上96孔板盖子，37℃孵育30min。

4.孵育完成后用酶标仪测562nm处的光吸收值。

5.根据BCA标准品的光吸收值(扣除空白孔的光吸收值即为最终的读数)，绘制标准曲线，结果如图1所示。

5)实验结果：

根据图1可以知晓蛋白浓度与吸光值的回归关系：y＝4.0888x+0.0733，R²＝0.9992。

依据标准曲线计算待测样品的蛋白浓度，不同天麻样品所含蛋白总量的结果。如下表1：

表1不同天麻样品中总蛋白含量

样品编号	产地	总蛋白含量
			1-1	云南昭通	6.93％
1-2	云南昭通	5.77％
			2	云南昭通	0.37％
3	云南昭通	0.52％
			4-1	云南昭通	0.66％
4-2	云南昭通	0.62％

由表1可知，不同天麻样品所含蛋白含量并不相同，鲜天麻总蛋白的含量明显高于其他天麻样品，说明鲜天麻的抑菌效果最好。

测试例2

抑菌实验1

1)取样：实施例1中干天麻提取物2g，作为1号样品；取对比例1中辅料混合物98g，作为空白基质(即对照)；

2)按照中国国家市场监督管理总局公布的方法制备载体；

3)制备好的载体使之分别浸透于样品1及空白基质(对照组)内，分别作用到20min时，用无菌镊子取出上述载体，分别移入含5.0mL PBS的试管内混匀，取样1.0mL，计算1号样品和对照组活菌菌落数，活菌计数结果如下表1：

表1 1号样品原液作用20min后试验菌落生长情况(CFU/mL)

注：所述片为实验用平板玻璃瓶

从表1中数据可以看出，1号样品的原液能够明显抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长，干天麻提取物对不同菌株的抑制效果不同，对白色念珠菌的杀灭率为40.44％，对金黄色葡萄球菌的杀灭率为42.40％，对大肠杆菌的杀灭率最高，为50％。

抑菌实验2

取实施例2中连翘提取物5g、苦参提取物2g、芍药提取物2g，以及实施例1中2g干天麻提取物，混合，作为2号样品；对比例2中辅料混合物83g，作为空白基质(即对照)。

测量方式同上，作用20min时，2号样品和对照组活菌菌落数计数结果如下表2：

表2 2号样品原液作用20min后试验菌落生长情况(CFU/mL)

注：所述片为实验用平板玻璃瓶

从表2中数据可以看出，2号样品的原液能够明显抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长，对不同菌株的抑制效果不同，大肠杆菌的和杀灭率高达100％，但是相比1号样品，作用相同时间时，不同中草药提取物，能够到的抑菌效果与单独的鲜天麻提取物作用效果相当，并无显著差异。

抑菌实验3

取实施例3抑菌凝胶1g，作为3号样品；测量方式同上，依次测量3号样品原液和对照组作用到2min、5min、10min、20min时，活菌菌落数，活菌计数结果如下表3～6：

表3 3号样品原液对白色念珠菌的抑菌结果

注：所述片为实验用平板玻璃瓶

从表4中数据可以看出，3号样品的原液对白色念珠菌的生长具有显著抑制作用。作用5min即可抑制99％以上白色念珠菌的生长，随着作用时间的延长，抑菌效果逐渐增强，持续20min后，抑制效果仍十分显著。说明本发明制备得到的抑菌凝胶对白色念珠菌的抑制效果好，并且抑菌持续时间长。

表4 3号样品原液对金黄色葡萄球菌的抑菌结果

注：所述片为实验用平板玻璃瓶

从表4中数据可以看出，3号样品的原液对金黄色葡萄球菌的生长具有显著抑制作用。作用5min抑制98％以上的金黄色葡萄球菌的生长，随着作用时间的延长，抑菌效果逐渐增强，持续20min后，抑制效果仍十分显著。说明本发明制备得到的抑菌凝胶对金黄色葡萄球菌的抑制效果好，并且抑菌持续时间长。

表5 3号样品原液对大肠杆菌的抑菌结果

注：所述片为实验用平板玻璃瓶

从表5中数据可以看出，3号样品的原液对大肠杆菌的生长具有显著抑制作用。作用2min即可抑制98％以上的大肠杆菌的生长，5min后抑制效果达到100％，持续作用20min后，抑制效果仍十分显著。说明本发明制备得到的抑菌凝胶对大肠杆菌的抑制效果好，并且抑菌持续时间长。

测试例3

处理方式同测试例2，混合完成后将3号样品原样密闭好，置于温度54℃、相对湿度85％的恒温恒湿箱中存放14天。

稳定性实验1

在温度为21.9℃～23.2℃，相对湿度为53％～57％的环境下，根据《一次性使用卫生用品卫生标准》GB 15979-2002附录C对3号样品的抑制白色念珠菌的稳定性能进行测试。具体的测试结果如表8和图2：

表7 3号样品原液稳定性实验结果

从表7中数据可以看出，植物抑菌凝胶样品原样置温度54℃、相对湿度85％的恒温恒湿箱14天后，作用5min即可抑制99％以上的白色念珠菌的生长，10min后抑制效果达到100％，持续作用20min后，对白色念珠菌的平均抑菌率仍为100.0％，说明本发明稳定性良好。

图2右侧为2020年10月27日制备的抑菌凝胶3样品原液，左侧为将右侧样品原液，置温度54℃、相对湿度85％的恒温恒湿箱14天后，颜色变化情况。由图1可以看出，相比54℃，85％相对湿度放置0天，放置14天(2020年11月10日)后的抑菌凝胶样品原样无颜色变化，稳定性良好。

稳定性实验2

用广泛pH试纸确定3号样品的pH范围：4.5～6.5

打开pH计，使之处于稳定状态，按使用说明是对pH计进行清洗，用pH＝6.86的混合磷酸盐缓冲液校正(定位)pH计，清洗电极擦干，用pH＝4.01的邻苯二甲酸氢钾进行二次校正(定位)，然后用蒸馏水清洗电极，用滤纸擦干电极，然后测3号样品pH值。重复2次，取均值。测试结果如下表9：

表8 3号样品原液pH测定结果

注：pH稳定范围4.5～6.5

从表8可以看出，3号植物抑菌凝胶样品原样置温度54℃、相对湿度85％的恒温恒湿箱14天后，pH值在存放之前3号样品的pH范围内，说明本发明抑菌凝胶稳定性良好。

测试例4

安全性实验1

测试样品同测试例3，在温度为25.2℃，相对湿度为54.0％的环境下，根据2015年版《化妆品安全技术规范》，利用万分之一天平(EBO2-03)和电感耦合等离子体质谱仪(EA01-01)，测定样品所含铅、砷和汞的浓度，测定结果如下表9：

表9 3号样品原液铅、砷和汞测定结果

注：铅的安全用量：<10mg/kg；砷的安全用量：<2mg/kg；汞的安全用量<1mg/kg。

从表9中可以得知，3号植物抑菌凝胶中铅的含量为<0.03mg/kg、砷的含量为0.0031mg/kg、汞的含量为<0.001mg/kg，在安全用量范围内，本发明抑菌凝胶使用安全。

安全性实验2

在温度为22.4℃，相对湿度为56.0％的环境下，根据《一次性使用卫生用品卫生标准》GB 15979-2002附录B，将3号样品的抑菌凝胶接种于营养琼脂培养基(批号∶1083841)、沙氏培养基(批号∶1083101)等培养基中，利用生化培养箱(EB29-01)；霉菌培养箱(EB30-01)；生物安全柜(EC18-01)，培养14天后检测培养基中细菌生长情况。具体检测结果如下表10：

表10 3号样品原液微生物测定结果

由表10可知，培养14天后，未检出任何微生物，本发明抑菌凝胶能够安全使用。

测试例5

皮肤刺激性实验

检测样品：3号样品原液

检测方法：白色新西兰兔3只(雄性2只，雌性1只；即为1～3号)，体重2.0kg-2.5kg，试验前24h将新西兰兔背部两侧的毛剪去，左右两侧去毛面积均约3cm×3cm，以左侧为涂药区，右侧为对照区。分别量取0.5mL受试物(涂药区涂覆4号样品原液，对照区涂以等量生理盐水)，直接滴入动物涂药区皮肤上，然后用一层无刺激塑料膜覆盖，再用无刺激胶布固定，敷贴时间为4h。在涂抹4h后，用温水清洗涂药区，除去残留物。每天涂抹一次，连续14d。在每次涂抹后24h观察皮肤局部反应，计算每天每只动物平均积分(刺激指数)(每天每只动物平均积分＝所有受试动物14d的红斑和水肿总积分/受试动物数×14)，并以《消毒技术规范》2002年版表2-12判定皮肤刺激强度。具体检测结果如下表11：

表11 3号样品抑菌凝胶多次完整皮肤刺激实验结果

由表11可以看出，全部受试动物涂药区皮肤在染毒后14d观察期内均未见红斑、水肿及其它异常；受试动物对照区皮肤在观察期内均无异常现象。每天每只动物刺激反应的平均积分(刺激指数)为0。本发明抑菌凝胶对皮肤无刺激作用。

测试例6

乙醇含量测定实验

根据GB/T26373-2020《醇类消毒剂卫生要求》附录A，对4号样品抑菌凝胶进行乙醇检测，结果未检出乙醇。

测试例7

阴道粘膜刺激性实验

检测样品：3号样品原液

方法将6只雌性白色新西兰兔随机分为实验组和对照组，每组3只(实验组新西兰兔编号1、3、5；对照组新西兰兔编号2、4、6；)。将长度为8cm左右的钝头软管与2mL注射器连接，注满受试液(实验组为3号样品原液，对照区为等量生理盐水)备用。每只动物准备一套钝头软管与注射器。将动物仰面固定，暴露会阴和阴道口。将导管用受试液湿润后轻柔地插入阴道(4～5cm)，并用注射器缓慢注入2mL受试液，抽出导管，完成染毒。染毒后24h，采用气栓法处死动物，剖腹取出完整的阴道，纵向切开，肉眼观察是否有充血、水肿等表现。然后将阴道放入10％福尔马林溶液中固定24h以上，选取阴道两端和中央3个部位的组织制片，HE染色后，进行组织病理学检查，按《消毒技术规范》(2002年版)2.3.5中阴道黏膜刺激反应评分标准对阴道黏膜刺激反应进行评分。具体检测结果如下表12：

表12 3号样品原液阴道粘膜刺激性实验结果

从表12中可以得知，在阴道粘膜刺激性实验中，病理检查结果显示实验组受试动物阴道黏膜刺激指数为0.89。并且在实验过程中，对照组和实验组新西兰兔摄食、饮水、大小便、行为活动等均未见异常。染毒24h后两组动物分别处死后，肉眼观察实验组所有受试动物阴道粘膜基本完整，未见充血、水肿及其他异常表现；对照组所有受试动物阴道黏膜完整。本发明抑菌凝胶对实验动物阴道粘膜无明显刺激性。

由以上实施例可知本发明提供抑菌凝胶不仅不含乙醇，能够在没有水的条件下进行皮肤消毒；作用温和，对皮肤和阴道粘膜均无刺激，安全无毒副作用，具有保湿护肤之功效。

尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (4)

1.一种天麻免洗抑菌凝胶，其特征在于，以质量百分含量计，由天麻提取物2％、连翘提取物5％、苦参提取物2％、芍药提取物2％、卡波姆0.4％、甘油2％、羟基苯乙酮0.3％、三乙醇胺0.5％、氢化蓖麻油1.2％、芦荟汁2％、柠檬香茅叶精油0.1％、迷迭香精油0.15％、白千层精油0.15％和纯化水82.2％组成；

所述天麻提取物为鲜天麻提取物；

所述天麻提取物的制备方法为：将5g天麻研磨成细粉与200mL水混合后进行超声提取，定溶至250mL，3000转离心20min留上清，得所述天麻提取物；

所述超声提取的功率为2000～3500W，温度为20～27℃，时间为24～40min。

2.根据权利要求1所述的天麻免洗抑菌凝胶，其特征在于，所述连翘提取物、苦参提取物和芍药提取物为醇提取物。

3.权利要求1或2所述的天麻免洗抑菌凝胶的制备方法，其特征在于，包括：

混合所述卡波姆、甘油和纯化水，得第一预混液；

将所述羟基苯乙酮与所述第一预混液混合，得第二预混液；

将所述天麻提取物、连翘提取物、苦参提取物、芍药提取物、芦荟汁、第二预混液与所述三乙醇胺混合，得第三预混液；

将所述柠檬香茅叶精油、迷迭香精油、白千层精油、氢化蓖麻油与所述第三预混液混合乳化，得所述天麻免洗抑菌凝胶。

4.权利要求1或2所述的天麻免洗抑菌凝胶以及权利要求3所述的制备方法制备得到的天麻免洗抑菌凝胶在制备日用品中的应用。