CN114096159A - 植物性蛋白质混合物和营养组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物性蛋白质混合物，以及包含所述混合物的营养组合物和补充剂。

Description

植物性蛋白质混合物和营养组合物

技术领域

本发明涉及植物性蛋白质混合物，包含所述混合物的营养组合物和补充剂，以及使用其的方法。

背景技术

在自认为是绝对素食者、素食者或乳糖不耐受的主流消费者中以及在进行休养活动的个人和训练有素的运动员中，对植物性饮食的兴趣增加。

在饮食上，食用植物性蛋白质的共混物是一种常见的策略，以补偿单一植物蛋白质来源通常缺乏一种或多种必需氨基酸(eAA)。此外，已证明亮氨酸是负责肌肉蛋白合成(MPS)的餐后刺激的最有效的eAA。

蛋白质质量通常以蛋白质消化率校正氨基酸评分(Protein DigestibilityCorrected Amino Acid Score)(PDCAAS)进行计算，是指膳食蛋白质可以多好的程度匹配对氨基酸的需求，并且可预测蛋白质的利用水平(联合国粮食及农业组织(FAO Rome)，2013年)。PDCAAS取决于蛋白质的必需氨基酸分布和消化率。

蛋白质的消化率影响氨基酸在血液中出现的速率。可能影响蛋白质消化率的因素与食品基质有关，并且包括高水平的不溶性纤维和高浓度的抗营养因子，其内源性存在于或在食品制造过程中形成。因此，与植物蛋白质相比，通常缺乏这些因子的乳蛋白质通常为血液提供更快速和更大量的游离氨基酸。

蛋白质摄入后的量值或血氨基酸过多(hyperaminoacidemia)为用于刺激肌肉蛋白合成(MPS)——膳食蛋白质的关键生物学功能的重要决定因素。蛋白质的必需氨基酸组成涉及其刺激MPS的能力；在具有足够量的所有必需氨基酸的那些蛋白质中，具有刺激MPS的最佳能力。支链氨基酸(BCAA)异亮氨酸、缬氨酸和亮氨酸，由于它们在支持中发挥的作用而为一类独特的必需氨基酸。事实上，有数据表明，只有亮氨酸含量是蛋白质质量的直接指标，这是因为它涉及MPS。

补充蛋白质是运动员的普遍做法，所述运动员通常食用动物性蛋白质，例如基于其高消化率和有利的氨基酸分布而作为“黄金标准”的乳清蛋白质分离物(WPI)。然而，希望避免动物性产品的个人对具有相似合成代谢属性的蛋白质替代品感兴趣。通常，仅评估单一来源的植物蛋白质。

动物和人类研究表明，当亮氨酸水平匹配时，动物性蛋白质和植物性蛋白质具有相似的MPS效果。然而，植物性蛋白质来源通常具有比动物性蛋白质(>10％)更少的亮氨酸(～6-8％)。因此，为了匹配乳品的亮氨酸含量，植物性蛋白质必须以高剂量(～50-60g)食用。

研究发现高剂量的单一来源的蛋白质和动物性蛋白质的吸收相似，然而，优化以匹配动物蛋白质的消化率和质量的植物性蛋白质共混物可如何比较却知之甚少。此外，已发现单一来源的蛋白质水解产物具有优异的且分别与非水解植物性蛋白质和动物性蛋白质相似的消化和吸收。然而，优化以满足动物蛋白质的消化率的植物性共混物的水解物的消化率和吸收尚未进行研究。

共混的植物性蛋白质补充剂可商购获得(例如，Vega

蛋白质)，并且通常是多种植物性蛋白质、主要是豌豆蛋白质的组合。很少见到关于此类产品的生物利用度和EAA或亮氨酸血浆效果的信息。

因此，需要将具有高PDCAAS和与WPI相似的亮氨酸生物利用度的植物性蛋白质共混物配制为“完整”蛋白质选择，其对例如运动员、严格素食者、素食者等可能是有利的。这样的植物性蛋白质共混物的配制对于基于植物的(严格素食者、素食者或弹性素食者(flexitarian))运动员将是有利的。

发明内容

本发明基于意外发现，即本文所述的植物性蛋白质混合物提供血浆亮氨酸的快速增加，其是与MPS餐后刺激相关的关键反应。

具体实施方式

如本文所用，术语“植物性的”应理解为意指不包含动物或动物源性(例如，哺乳动物的乳)物质的组合物或产品。

如本文所用，形容词“乳品”应理解为意指包含哺乳动物乳物质或由哺乳动物乳物质组成的组合物或产品，所述哺乳动物乳物质即可通过挤奶获得的乳汁分泌物。

如本文所用，术语“不含”应理解为意指优选不含给定物质但其中可能存在痕量给定物质或其污染物的组合物或产品。

如本文所用，术语“EAA”或“必需氨基酸”应理解为意指组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、苏氨酸和缬氨酸。

如本文所用，术语“BCAA”或“支链氨基酸”应理解为意指异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸。

如本文所用，术语“生物等效性的”应是指氨基酸血浆浓度等效性。

在本申请的上下文中，当提及本发明的“蛋白质混合物”、“蛋白质部分”或“蛋白质组合物”时，意指游离或任何结合形式的蛋白质、蛋白质类物质、肽和氨基酸的集合。因此，营养组合物的蛋白质部分是营养组合物中游离或以任何结合形式存在的所有蛋白质、蛋白质类物质、肽和氨基酸的总和。此外，措辞“蛋白质混合物”是指任何形式的蛋白质、蛋白质类物质、肽和氨基酸本身的集合，以及同时存在于另一基质中的蛋白质、蛋白质类物质、肽和氨基酸的集合，所述另一基质为例如水性基质，例如营养组合物。在后一种情况下，蛋白质混合物可称为该基质的蛋白质部分。

在本申请的上下文中，植物性蛋白质混合物优选基本上由完整的植物蛋白质类物质、特别是蛋白质组成。

在本申请的上下文中，措辞“植物”涉及植物来源的蛋白质，例如源自植物如胡萝卜、豌豆、鹰嘴豆(chickpea)、青豌豆、豇豆(cowpea)、紫花豌豆(field pea)、芸豆(kidneybean)、羽扇豆(lupine)、大米、大豆、油菜籽(canola)、汉麻、玉米蛋白、玉米(maize)、玉米(corn)、大麦、亚麻、亚麻籽和小麦。可以使用等效的措辞，例如“植物性的(vegetal)”、“植物性的(plant-based)”或“植物源性的(plant-derived)”。

在本申请的上下文中，术语“至少”还包括开放区间的起点。例如，“至少95.00％w/w”的量意指等于或大于95.00重量百分比的任何量。

在本申请的上下文中，术语“约”定义了所述值的正负10％的范围。例如，“约20重量％”的量意指18至22重量％范围内的任何量。

如本文所用，术语“蛋白质补充”应理解为意指通过膳食补充剂增加个体作为其饮食一部分而食用的蛋白质的量。

如本文所用，术语“膳食补充剂”应理解为意指旨在为了营养目的而在受试者的正常膳食之外摄入的产品。

如本文所用，术语“蛋白质补充剂”应理解为意指用于补充蛋白质的膳食补充剂。

出人意料地，发现具有高PDCAAS和亮氨酸含量的本发明的植物蛋白质混合物可以迅速吸收到血液中，以提供快速的血亮氨酸过多(hyperleucinemia)，其与蛋白质来源的合成代谢潜力有关。因此，根据一个实施方案，本发明的蛋白质混合物可用于制造用于膳食蛋白质补充的营养组合物。根据一个方面，蛋白质混合物包含50.0％-95.0％w/w的豆类(pulse)蛋白质，相对于总蛋白质含量计，5.0％-50.0％w/w的非豌豆植物蛋白质，相对于总蛋白质含量计，以及60.0％-25.0％w/w的必需氨基酸，相对于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的总和等于100重量％。

在本申请的上下文中，“非水解的”蛋白质等于“完整的”蛋白质，这意味着蛋白质尚未进行水解过程。然而，少量水解蛋白质可以存在于非水解蛋白质的来源中，或者可以在产品配制期间添加。根据另一个实施方案，完整的蛋白质可以仅具有5％或更低、优选3、2、1％或更低，更优选2％或更低的水解度(DH)。

蛋白质混合物

在第一方面，本发明提供了一种植物性蛋白质混合物，其具有高相对浓度的豆类蛋白质、非豌豆蛋白质，并且其中所述混合物具有高含量的必需氨基酸，相对于总蛋白质含量计。例如，在一个方面，植物性蛋白质包含：

a)50.0％-95.0％w/w的豆类蛋白质，相对于总蛋白质含量计；

a)5.0％-50.0％w/w的非豌豆植物蛋白质，相对于总蛋白质含量计；

以及60.0％-25.0％w/w的必需氨基酸，相对于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。在另一方面，植物性蛋白质包含50.0％-25.0％w/w的必需氨基酸，相对于总蛋白质含量计。

本发明的蛋白质混合物可包含大于25.0重量％的蛋白质，以混合物中的干物质重量计，且最高达95.0重量％的蛋白质，以混合物中的干物质重量计。根据本发明的各种实施方案，蛋白质混合物包含至少50.0重量％、优选至少60.0重量％、更优选至少70.0重量％、进一步优选至少80.0重量％的蛋白质，基于混合物中的干物质重量计。根据本发明的其他实施方案，蛋白质混合物包含约50.0重量％至约70.0重量％的蛋白质，基于混合物中的干物质重量计。在其他实施方案中，蛋白质混合物可包含其他组分，例如纤维。

豆类植物蛋白质

特别优选选自小扁豆(lentil)、鹰嘴豆、豌豆、菜豆及其组合的豆类。最优选选自以下的豆类：分裂豌豆(split pea)、紫花豌豆、干豌豆、小扁豆、鹰嘴豆、鹰嘴豆(garbanzobean)、鹰嘴豆(konda)、海军豆(navy bean)、白海军豆(white navy bean)、白豌豆(whitepea bean)、豌豆(pea bean)、豇豆、蚕豆(horse bean)、扁豆(haricot)、斑豆(pinotbean)、斑豆(mottled bean)、红小豆(small red bean)、墨西哥红豆(red Mexican bean)、芸豆、黑豆(black bean)、黑龟豆(black turtle bean)、蔓越莓豆(cranberry bean)、罗马诺豆(roman bean)、speckled sugar bean、利马豆(lima bean)、haba bean、棉豆(Madagascar bean)、绿豆(green gram)、绿豆(mung bean)、青豆(green bean)、黑吉豆(black gram)、印度黑豆(urad dal)、羽扇豆(lupin)及其组合。最优选豌豆蛋白质。技术人员可容易地从例如Roquette(Lestrem,France)——其销售由黄豌豆(yellow pea)(豌豆(Pisum sativum))获得的豌豆分离物，以及Cosucra Groupe Warcoing(Warcoing,Belgium)获得若干豌豆来源。其他豌豆蛋白质来源包括青豌豆、豇豆、鹰嘴豆和紫花豌豆。

根据另一个实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含50.0％-95.0％w/w的豆类蛋白质，特别是60.0％至90.0％w/w、优选70.0％至95.0％w/w、更优选80.0％至90.0％w/w的豆类蛋白质，相对于蛋白质混合物中的总蛋白质计。最优选所述蛋白质是豌豆蛋白质。根据本发明的其他实施方案，豆类蛋白质优选基本上为完整形式，如本文所定义的。

非豌豆植物蛋白质

本发明的植物性蛋白质混合物还包含第二非豌豆植物蛋白质。优选地，非豌豆蛋白质选自南瓜、椰子、向日葵、鹰嘴豆、大米及其组合。

更优选地，非豌豆蛋白质选自南瓜、椰子、向日葵及其组合。最优选地，非豌豆蛋白质包含南瓜蛋白质。根据本发明的实施方案，非豌豆蛋白质优选基本上为完整形式，如本文所定义的。

根据另一个实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含5.0％-50.0％w/w的非豌豆蛋白质，特别是40.0％至10.0％w/w、优选30.0％至5.0％、更优选20.0％至10.0％w/w的非豌豆蛋白质，相对于蛋白质混合物中的总蛋白质计。最优选地，所述蛋白质包含南瓜蛋白质。根据本发明的其他实施方案，非豌豆蛋白质优选基本上为完整形式，如本文所定义的。

优选的混合物

根据本发明的实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含50.0％-95.0％w/w的豆类蛋白质，最优选豌豆蛋白质，5.0％-50.0％w/w的非豌豆植物蛋白质，基于总蛋白质含量计，以及60.0％-25.0％w/w(或50.0％-25.0％w/w)的必需氨基酸，相对于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。

根据本发明的实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含70.0％-95.0％w/w的豆类蛋白质，最优选豌豆蛋白质，5.0％-30.0％w/w的非豌豆植物蛋白质，基于总蛋白质含量计，以及60.0％-25.0％w/w(或50.0％-25.0％w/w)的必需氨基酸，基于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。

根据本发明的实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含80.0％-90.0％w/w的豆类蛋白质，最优选豌豆蛋白质，10.0％-20.0％w/w的非豌豆植物蛋白质，基于总蛋白质含量计，以及60.0％-25.0％w/w(或50.0％-25.0％w/w)的必需氨基酸，基于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。

上述植物性蛋白质混合物具有快速的氨基酸血液吸收特性，其Tmax与乳清蛋白质分离物相当，因此具有显著的合成代谢潜力。

氨基酸分布

本发明的植物性蛋白质混合物可包含60.0％-25.0％w/w、优选60.0％-40.0％w/w的必需氨基酸，基于总蛋白质含量，其中所述蛋白质的和等于100重量％。在其他实施方案中，本发明的植物性蛋白质混合物可包含50.0％-25.0％w/w、优选50.0％-40.0％w/w的必需氨基酸，基于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。根据本发明的替代实施方案，表1中提供了以毫克/克植物性蛋白质混合物中的固体计的必需氨基酸(“EAA”)分布。

根据本发明的其他实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含10.0％-25.0％、优选15.0％-20.0％w/w的支链氨基酸，基于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。

根据本发明的其他实施方案，本发明的植物性蛋白质混合物包含5.0％-15.0％w/w、优选7.0％-12.0％w/w的亮氨酸，基于总蛋白质含量计，其中所述蛋白质的和等于100重量％。

表1

氨基酸	mg/g
		组氨酸	10-30
异亮氨酸	30-50
		亮氨酸	50-150
赖氨酸	40-70
		甲硫氨酸	10-30
苯丙氨酸	80-100
		苏氨酸	20-40
色氨酸	1-30
		缬氨酸	30-50

蛋白质混合物的表征

本发明的蛋白质混合物及其质量通过以下方式进行表征：通过使用不同单个蛋白质来源的必需氨基酸含量、其消化率和联合国粮农组织和世界卫生组织蛋白质质量评估联合专家顾问会议(Joint FAO/WHO Expert Consultation on Protein QualityEvaluation)(1991年)氨基酸推荐作为参考来确定蛋白质消化率校正氨基酸评分(PDCAAS)。根据本发明的实施方案，蛋白质混合物的PDCAAS值为至少0.95，更优选至少0.96、0.97、0.98、0.99或1。

根据本发明的实施方案，本发明的蛋白质混合物通过确定从摄入混合物到峰值最大血浆亮氨酸浓度(“Tmax”)的时间进行表征。根据本发明的实施方案，蛋白质混合物的Tmax为30至120分钟、30至90分钟、30至60分钟或大约相当于乳清蛋白质分离物。

本发明的植物性蛋白质混合物可以增加植物性食品或饮料产品的蛋白质含量。因此，本发明提供了一种补充食品或饮料的营养价值的方法，该方法包括将本发明的蛋白质混合物混入所述食品或饮料中。

优选地，混合物基本上不改变食品或饮料的感官特性，所述感官特性为选自味道、质地、颜色及其组合中的一种或多种。

膳食补充剂组合物

出人意料地，本发明的植物性蛋白质混合物可以制备营养组合物，特别是具有长的保存限期的膳食补充剂组合物，更特别是蛋白质补充剂组合物。因此，本发明还涉及一种植物性蛋白质混合物，其用于制备营养组合物，特别是膳食补充剂组合物，特别是用作蛋白质补充剂组合物。

优选地，本发明的营养组合物包含本发明的蛋白质混合物，所述蛋白质混合物占组合物总蛋白质的至少70.0％，优选至少80.0％，更优选至少90.0％，进一步优选至少95.0％，按重量计。

优选地，本发明的营养组合物包含本发明的蛋白质混合物，所述蛋白质混合物占组合物固体的至少50.0％，至少60.0％，优选至少70.0％，更优选至少80.0％，进一步优选至少85.0％，按重量计。

本发明的营养组合物可以具有任何物理形式，例如粉末形式、喷雾干燥形式、颗粒状形式或液体形式，并且它可以是溶液、悬浮液、分散体等。优选地，本发明的营养组合物为粉末形式。或者，营养组合物混合物是水性蛋白质混合物。

最优选地，对这种营养组合物进行灭菌或以其他方式进行热处理。

本发明的营养组合物优选具有蛋白质补充剂组合物的形式，由此单份或单剂可以满足使用者每日推荐的蛋白质摄入量的有效百分比。因此，本发明的营养组合物优选每份含有至少15、20、25、30、35、40、45、50或55克蛋白质。

优选地，营养组合物为可口服摄入的膳食补充剂组合物，并且它可以例如额外用在非医疗食品或正常膳食。优选地，营养组合物的推荐份量或剂量最高达约25、30、35、40、45、50、55、60或70克，以组合物中的固体重量计，其可以以单个单位或多个单位形式提供。

优选地，在容器如塑料桶、袋、囊等中包装、储存和提供营养组合物。在本领域中，已知多种这样的容器，例如500ml、1000ml、1500ml和5,000ml的容器。应当注意，任何合适的容器都可以用于包装、储存和提供本发明的营养组合物。

在本发明的一个实施方案中，组合物以即用型粉末形式提供并且可以在使用前在液体(例如水溶液或水)中重构或混合。可以摄入或口服给予本发明的组合物。例如，可以在罐、玻璃、瓶或其他饮用容器中提供本发明的组合物。因此，在本发明的一个实施方案中，本发明组合物呈粉末形式，并附有指示在水性组合物或水中溶解或重构以获得本发明的液体营养组合物的说明书。在本发明的一个实施方案中，本发明的液体营养肠内组合物因此可以通过将粉末优选在水性组合物、特别是水中溶解或重构而获得。

在本发明的一个实施方案中，将本发明的组合物包装。包装可以具有任何合适的形式，例如对于液体组合物，为块状纸盒，例如，可用吸管吸空；带有可拆盖的罐或塑料杯；例如用于80ml至200ml范围的瓶。另一种合适的包装模式是粉末在容器中，例如具有可拆盖的小袋或桶，任选地带有指示在水性组合物或水中溶解或重构的说明书。

优选地，本发明的蛋白质混合物、食品、饮料和营养组合物基本上不含谷物、谷朊、大豆、乳品及其组合。

膳食蛋白质补充

在第二方面，本发明提供了用于个体蛋白质补充的用途和方法，包括向个体给予本发明的营养组合物。根据本发明的组合物和方法的蛋白质补充可以提供合成代谢的肌肉益处。所述用途或方法优选是非治疗性的。

因此，本发明提供了用于增强肌肉蛋白质合成、从体育锻炼中恢复和/或锻炼后肌肉恢复的本发明蛋白质混合物、组合物和方法。本发明还提供了用于减少脂肪量、增加瘦体重、增加骨骼肌肥大、增加力量输出以及增加强度的蛋白质混合物、组合物和方法。或者，本发明还提供了用于增加膳食蛋白质摄入量，优选增加至推荐的每日蛋白质摄入量水平的蛋白质混合物、组合物和方法。

在其他实施方案中，本发明提供了通过给予本发明的蛋白质混合物、组合物和方法来增强肌肉蛋白质合成、从体育锻炼中恢复和/或运动后肌肉恢复的方法。在其他实施方案中，本发明提供了通过给予本发明的蛋白质混合物、组合物和方法来减少脂肪量、增加瘦体重、增加骨骼肌肥大、增加力量输出和/或增加强度的方法。或者，本发明提供了通过给予本发明的蛋白质混合物、组合物和方法来增加膳食蛋白质摄入量，优选增加至推荐的每日蛋白质摄入量水平的方法。

优选地，在体育锻炼之前、期间和/或之后不久摄入所述营养组合物。因此，本发明提供了一种用于改善受试者的体育锻炼结果的方法，该方法包括在体育锻炼过程中和/或在体育锻炼之前或之后约15、30或45分钟内使受试者摄入本发明的营养组合物或给予受试者本发明的营养组合物。

剂量

优选地，营养组合物以含有至少15、20、25、30、35、40、45、50或55克蛋白质的剂量或份量提供，任选地每天至少一次或两次。

优选地，营养组合物以含有20.0至50.0克蛋白质、更优选20.0至40.0克蛋白质、最优选30-40克蛋白质的剂量或份量提供，所述份优选每天提供一次，或者每天两次或更多次。

优选地，营养组合物以含有1.0至20.0克必需氨基酸、更优选10.0至15.0克必需氨基酸的剂量或份量提供，所述份优选每天提供一次，或者每天两次或更多次。

优选地，营养组合物以含有1.0至10.0克支链氨基酸、更优选4.0至6.0克支链氨基酸的剂量或份量提供，所述份优选每天提供一次，或者每天两次或更多次。

优选地，营养组合物以含有1.0至5.0克亮氨酸、更优选2.0至3.5克亮氨酸的剂量或份量提供，所述份优选每天提供一次，或者每天两次或更多次。

根据本发明的实施方案，本发明的营养组合物以包含20.0至40.0克总蛋白质的最高达50克的剂量或份量提供，所述总蛋白质包含10.0至15.0克的必需氨基酸，2.0至7.0克的支链氨基酸和2.0至3.5克的亮氨酸。

根据本发明的实施方案，本发明的营养组合物以具有与指定量的乳清蛋白质分离物约相等的必需氨基酸生物等效性的剂量或份量提供，其中所述剂或份的以重量计的必需氨基酸含量是指定量的乳清蛋白质分离物的最高达1.5倍。

根据本发明的实施方案，本发明的营养组合物以具有与指定量的乳清蛋白质分离物约相等的支链氨基酸生物等效性的剂量或份量提供，其中所述剂或份的以重量计的支链氨基酸含量是所述指定量的乳清蛋白质分离物的最高达1.5倍。

根据本发明的实施方案，本发明的营养组合物以具有与指定量的乳清蛋白质约相等的亮氨酸生物等效性的剂量或份量提供，其中所述剂或份的以重量计的亮氨酸含量是所述指定量的乳清蛋白质分离物的最高达1.5倍，优选1.2至1.5倍，例如1.4倍。

作为示例性实施例，本发明的营养组合物可以以与具有12g EAA和2.63g亮氨酸的乳清蛋白分离物具有EAA和亮氨酸生物等效性的剂量或份量提供，其中所述剂量或份量包含48克总蛋白质，所述总蛋白质包含17克必需氨基酸，其中3.7克亮氨酸。

完整蛋白质

出人意料地，观察到完整蛋白质组显示出比水解测试组更高的氨基酸血液浓度水平的意外趋势。因此，优选蛋白质在所有蛋白质中都是基本上完整或非水解的形式。在一个实施方案中，本发明的植物性蛋白质混合物包含至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％w/w或更多的完整植物蛋白质，相对于蛋白质混合物中的总蛋白质计。

本发明将通过以下非限制性附图和实施例进一步说明。

附图说明

图1a示出了每个时间点4小时内的血液eAA平均值。图1b示出了如实施例1中所述的4小时内血液eAA iAUC的平均值和95％CI总和(nmol/mL)。通过使用梯形法则获得基线上方曲线下面积与时间(min)的关系。

图2a示出了每个时间点4小时内的血液eAA平均值。图2b示出了如实施例1中所述的4小时内血液eAA iAUC的平均值和95％CI总和(nmol/mL)。通过使用梯形法则获得基线上方曲线下面积与时间(min)的关系。

图3提供了如实施例1中所述的蛋白质补充剂制备过程的概述。

实施例

目标

发明人假设具有1.0PDCAAS的本发明的完全植物性蛋白质共混物与WPI具有生物等效性(在本研究中定义为相似的血液eAA反应)。

方法

研究(ClinicalTrial.gov no.NCT03673839)的主要目标是评估4小时内总血液eAA反应的生物等效性(iAUC)。次要目标是评估4小时内的生物等效性(iAUC)和亮氨酸动力学(Cmax和Tmax)。

参与者：该研究是一项急性、随机、双盲、交叉、4个周期×4个产品的Willian方设计研究。参与者是健康的成年男性，年龄为18-35岁，体重指数(BMI)介于18.5和29.9kg/m²之间。要求参与者具有不少于2年的自我报告的抗阻力训练经验，在过去6个月内进行2天/周，至少1hr/天的抗阻力训练。

访视：指示参与者在研究干预阶段之前的1天内戒除任何蛋白质补充剂。在每次研究访视之前，要求参与者食用一顿标准化的晚餐，然后进行至少12小时的通宵禁食。参与者按序列随机化，在每次研究访视时，参与者食用四种研究产品中的一种：三种植物性蛋白质共混物(测试)和WPI(对照)，均与水混合。三种植物性共混物中的一种是用蛋白酶处理的水解产物。

给予参与者研究饮料，并指示其在10分钟内饮用。在饮用产品前以及饮用研究饮料后15min、30min、1h、2h、3h和4h收集血样。通过超高效液相色谱法(UPLC)测量血液氨基酸。

统计：对4小时内的血液eAA iAUC的总和进行对数变换后，对序列、产品、周期和序列内参与者的固定效应项作为随机变量的重复测量ANOVA模型进行拟合，以评估生物等效性。逆转换LS-均值差异和90％CI(即测试与对照几何均值(GLS-均值)之比和相关的90％CI)。对于要证明的生物等效性，测试与对照GLS-均值之比的90％CI的整体必须位于该区域内(0.80至1.25)。

测试产品

有4种研究蛋白质补充剂测试产品，所有这些产品都是以单份小袋形式提供的粉状饮料混合物，可混合到12盎司的水中。研究产品由动物性蛋白质(对照)和植物性蛋白质(3种测试产品)在甜味剂体系(可可粉、调味剂、甜菊糖、黄原胶)中组成。对照产品为市售的乳清蛋白质分离物。对于该研究，购买该产品并将其重新包装到研究产品包装中。

所有三种植物性共混物包括：

(i)豌豆蛋白质“有机Puris豌豆870H”(PurisPea，Minneapolis，MN；蛋白质含量：80重量％)；和

(ii)南瓜蛋白质“有机未烤南瓜蛋白质”(Austrade Inc.,Palm Beach Gardens,FL；蛋白质含量：60重量％)。

共混物#3与共混物#1完全相同。但是，共混物#3为水解产物。

共混物#2除了豌豆和南瓜蛋白质之外还含有：

向日葵蛋白质“Helifor 55”(Austrade Inc.,Palm Beach Gardens,FL；蛋白质含量：55重量％)；和

椰子蛋白质“有机椰子蛋白质17”(Austrade Inc.,Palm Beach Gardens,FL；蛋白质含量：17重量％)。

表2提供了共混物其他细节，图3提供了蛋白质补充剂制备过程的概述。

所有研究产品均作为研究饮料；将33-34g研究产品(蛋白质混合物)与12盎司(360g)相同品牌的瓶装水在摇瓶中混合。所有研究产品在外观、包装和营养成分上均相似，以保持研究的双盲性质。

参与者在10分钟内饮用研究产品。

此外，在饮用研究饮料之后，还给予受试者50ml的水来冲洗瓶子并清洁口腔，以确保所有产品都被饮用。

研究产品在室温下储存。

表2

共混物1和3

每100g蛋白质粉混合物76g豌豆“有机Puris豌豆870H”——60.8g蛋白质(76×0.8)

每100g蛋白质粉混合物24g南瓜“有机未烤南瓜蛋白质”——14.4g蛋白质(24×0.6)。

因此，共混物1和3含有81％w/w的豆类蛋白质，相对于总蛋白质含量计，和19％w/w的非豌豆植物蛋白质，相对于总蛋白质含量计。

共混物2

每100g蛋白质粉混合物82g豌豆“有机Puris豌豆870H”——65.6g蛋白质(82×0.8)

每100g蛋白质粉混合物4g南瓜“有机未烤南瓜蛋白质”——2.4g蛋白质(4×0.6)。

每100g蛋白质粉混合物11g向日葵“Helifor 55”——5.5g蛋白质(11×0.5)

每100g蛋白质粉混合物3g椰子“有机椰子蛋白质17”——0.51g蛋白质(3×0.17)

因此，共混物2含有89％w/w的豆类蛋白质，相对于总蛋白质含量计，和13％w/w的非豌豆植物蛋白质，相对于总蛋白质含量计。

结果

18名(每方案集)25.4±4.64岁(平均值±sd)、BMI为24.4±3.35kg/m²的男性完成了研究。对于主要结果，植物性蛋白质共混物4小时内的eAA iAUC总和与WPI不具有生物等效性，三个比值[90％CI]：共混物#1：0.66[0.58-0.76]；共混物#2：0.71[0.62-0.82]，共混物#3：0.60[0.52-0.69]，表明与WPI相比，植物性蛋白质共混物4小时内的eAA iAUC降低了～29％至40％。对于次要结果，植物性蛋白质共混物4小时内的亮氨酸iAUC总和与WPI不具有生物等效性，三个比值[90％CI]：共混物#1：0.66[0.59-0.73]；共混物#2：0.67[0.61-0.75]；共混物#3：0.62[0.56-0.69]。

植物性蛋白质共混物的亮氨酸Cmax与WPI不具有生物等效性：共混物#1 0.70[0.67-0.73]；共混物#2：0.72[0.68-0.75]，共混物#3：0.65[0.62-0.68]，表明与WPI相比，4小时内降低了～28％至35％。共混物#1和共混物#3的亮氨酸Tmax接近WPI(共混物#1：0.94[0.73-1.18]；共混物#2：1.56[1.28-1.92]；共混物#3：1.19[0.95-1.48])。

表3

*p-值<.001，与对照相比的测试LS-均值差异的配对学生t检验。

没有观察到与研究产品摄入相关的不良事件。

结论

这项研究代表了第一次人类研究，其中将与亮氨酸含量匹配的完全植物性蛋白质共混物(PDCAAS＝1.0)的血液eAA反应与乳清蛋白质进行比较。结果表明，三种植物性蛋白质共混物与WPI对照不具有生物等效性，如通过血液eAA数据所测量的。然而，植物性蛋白质共混物的亮氨酸动力学数据显示出比禁食水平增加了大约2倍。

此外，与WPI相比，在两种植物性蛋白质共混物(#1和#3)中观察到相似的亮氨酸Tmax数据。从生理学的角度来看，亮氨酸数据提供了快速的血亮氨酸过多的证据，这是与MPS餐后刺激相关的关键反应。

Claims (11)

1.一种植物性蛋白质混合物，其包含：

a)50.0％-95.0％w/w的豆类蛋白质

a)5.0％-50.0％w/w或更多的非豌豆植物蛋白质

基于总蛋白质含量计，以及60.0％-25.0％w/w的必需氨基酸，基于总蛋白质含量计。

2.根据权利要求1所述的混合物，其中所述混合物包含50.0％-25.0％w/w的必需氨基酸，基于总蛋白质含量计。

3.根据权利要求1所述的混合物，其中所述混合物包含至少5.0％-15.0％w/w的亮氨酸，基于总蛋白质含量计。

4.根据任一项前述权利要求所述的混合物，其PDCAAS为0.95或更高。

5.根据任一项前述权利要求所述的混合物，其基本上不含谷物、谷朊、大豆和/或乳物质。

6.根据任一项前述权利要求所述的混合物，其中豆类蛋白质为豌豆蛋白质。

7.根据任一项前述权利要求所述的混合物，其中所述蛋白质基本上为完整蛋白质。

8.根据任一项前述权利要求所述的混合物，其呈粉末状形式、喷雾干燥形式或颗粒形式。

9.一种用于个体的蛋白质补充的方法，包括向个体给予根据任一项前述权利要求所述的组合物。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述组合物在体育锻炼之前、期间和/或之后摄入。

11.一种用于改善受试者体育锻炼结果的方法，包括向受试者给予根据任一项前述权利要求所述的组合物。

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