CN114058369B - 基于苯乙烯噁唑酮类化合物的荧光探针及其生物应用 - Google Patents

基于苯乙烯噁唑酮类化合物的荧光探针及其生物应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了基于苯乙烯噁唑酮类化合物的荧光探针及其生物应用。具体地，本发明提供的了一种式A化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，它们在制备用于荧光成像的荧光试剂中的用途。本发明提供的化合物具有更大斯托克斯位移、良好的亲脂性、更低的毒性，因此十分适于作为荧光探针应用于荧光成像领域。

Description

基于苯乙烯噁唑酮类化合物的荧光探针及其生物应用
技术领域
本发明属于荧光成像领域，具体涉及一种基于苯乙烯噁唑酮类的荧光探针及其生物应用。
背景技术
中枢神经系统是人体神经系统中的主体部分，它参与人体运动、学习与记忆、认知与情绪、意识与精神、衰老等生理功能。脑部神经元功能紊乱与很多疾病密切相关，如阿尔兹海默症、帕金森病、脑肿瘤、脑卒中、抑郁症、精神分裂症等，但大部分中枢神经疾病发病机制暂时未下定论。因此了解中枢神经系统内分子水平、细胞水平、细胞间的变化过程，以及变化过程在中枢功能控制系统内的整合作用能帮助研究人员探究脑部正常生理功能及脑部疾病的发生发展。目前在脑部成像中，常用正电子发射断层扫描成像(PET)和磁共振成像(MRI)两种方式，但是，在某些情况下，这两种方式容易导致组织损伤。而随着光谱仪器的迅速发展，借助于荧光探针的生物医学成像越来越受到人们的关注。
然而现有的有机小分子荧光探针由于其斯托克斯位移小，导致其对样品激发光的散射光敏感，信噪比低，使得检测灵敏度下降。尤其是能够用于脑部成像的荧光探针十分有限，因为用于脑部成像的小分子荧光探针通常需要克服血脑屏障的作用，能够穿透血脑屏障的化合物一般要求脂溶性较好，毒性低，药代动力学性质较好。然而一些能穿透血脑屏障的近红外探针由于分子量大(>600Da)，影响被连接分子的药代动力学性质，导致局部探针浓度过高而产生毒性。
综上所述，本领域迫切需要开发对研究中枢神经系统的生理过程具有重要意义的一类具有较大的斯托克斯位移、良好的亲脂性、低毒性的新小分子荧光探针。
发明内容
本发明的目的就是提供一类具有较大的斯托克斯位移、良好的亲脂性、低毒性的新小分子荧光探针。
在本发明的第一方面中，提供了一种式A化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物在制备用于荧光成像的荧光试剂中的用途
其中，
B环为5至6元杂芳环或苯环；其中，所述5至6元杂芳基具有1、2或3个N杂原子；
表示顺式构型或反式构型；
n＝0、1、2或3(较佳地，n＝0或1)；
R1表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组的基团：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基(-OH)、C1-6烷氧基(-O-C1-6烷基)、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基(-CN)、硝基(-NO2)、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基(-SH)、-S-C1-6烷基、磺酰基(-S(O)2H)、氨基磺酰基(-S(O)2NH2)和-S(O)2-C1-6烷基；或者，当R1表示位于苯环上相邻碳原子上的2个基团时，R1以及与其所连接的2个碳原子共同形成C3-8环烷基、4-8元杂环基、苯基或5-10元杂芳基(即可为并环或稠合结构)；并且R1还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
A环为C6-14芳环或5-14元杂芳环(较佳地，5-10元杂芳环)；其中，所述杂芳环为含一个或多个(1、2或3个)选自O、S和N的杂原子的杂芳环(较佳地，所述杂芳环为含一个或多个(1、2或3个)N杂原子的杂芳环)；并且A还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
R10表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基、-S-C1-6烷基、磺酰基、氨基磺酰基、C6-10苯基、5-10元杂芳基、-S(O)2-C1-6烷基、-C0-10亚烷基-三苯基膦、-O-C0-10亚烷基-三苯基膦、-S-C0-10亚烷基-三苯基膦；或者，相邻的2个R10和与它们相连的原子共同形成6-20元碳环或6-20元杂环；并且R10还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
Ra和Rb各自独立地选自下组：H、和C1-6烷基；或者，Ra和Rb和与其相连的N原子共同形成5-7元饱和氮杂环(较佳地，所述的氮杂环仅含一个氮原子)；
R各自独立地选自下组：卤素、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C1-6烷氧基、任选取代的C3-8环烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C2-6炔基、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的-NH(C1-6烷基)、任选取代的-N(C1-6烷基)2(如二甲基氨基、二乙基氨基)、羟基、C1-6羟烷基(如羟甲基)、C1-6卤代烷基(如三氟甲基)、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和-S(O)2-C1-6烷基；
除非特别说明，所述的取代是指基团中一个或多个氢被选自下组的取代基所取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、三氟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和C1-C4取代的磺酰基。
在另一优选例中，B环为苯环。
在另一优选例中，所述的式A化合物如式I所示
在另一优选例中，所述的C1-6卤代烷基包括：三氟甲基。
在另一优选例中，所述的C1-6羟烷基包括：羟甲基(-CH2OH)。
在另一优选例中，所述的C6-14芳基或5-14元杂芳基包括单环或多环(如稠环)。
在另一优选例中，所述的-NRaRb选自下组：氨基、-NH(C1-6烷基)、或-N(C1-6烷基)2(如二甲基氨基、二乙基氨基)。
在另一优选例中，所述的C6-14芳基选自下组：苯基、萘基、和菲基。
在另一优选例中，所述的5-14元杂芳基为衍生自选自下组的环的基团：
在另一优选例中，所述的衍生是指环上失去一个氢从而形成的基团。
在另一优选例中，如式Ia、Ib、Ic、Id或Ie所示；
其中，*代表与式I化合物中的其他部分连接的位置；R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与R10相同。
在另一优选例中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9分别表示一个或多个(较佳地，1、2、3或4个)各自独立地选自下组的基团：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基、-S-C1-6烷基、磺酰基、氨基磺酰基、-S(O)2-C1-6烷基、-C0-10亚烷基-三苯基膦、-O-C0-10亚烷基-三苯基膦、-S-C0-10亚烷基-三苯基膦；并且R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9还任选地被一个或多个R所取代。
在另一优选例中，R1表示1、2或3个各自独立地选自下组的基团：卤素、氨基(-NH2)、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷氧基和氰基。
在另一优选例中，当R1表示1个卤素基团时，R1位于苯基与化合物其他部分连接的位置的邻位或间位。
在另一优选例中，当R1表示1个选自下组的基团：氰基、氨基(-NH2)、-NH(C1-6烷基)和-N(C1-6烷基)2时，R1位于苯基与化合物其他部分连接的位置的对位(4位)。
在另一优选例中，R1表示2或3个C1-6烷氧基。
在另一优选例中，R1位于苯基与化合物其他部分连接的位置的的对位(4位)。
在另一优选例中，为
在另一优选例中，R1为-N(C1-6烷基)2；最佳地，R1选自下组：二甲基氨基、和二乙基氨基。
在另一优选例中，为且R1为-N(C1-6烷基)2。
在另一优选例中，所述的盐是指三苯基膦盐。
在另一优选例中，所述的盐是指季铵盐。
在另一优选例中，所述的化合物如式Ia所示
在另一优选例中，所述的式A化合物如式Ib所示
在另一优选例中，所述的式A化合物如式Ic所示
在另一优选例中，n、A环、R1、R10、R、Ra和Rb各自独立地为本申请实施例和表A或表B中具体化合物相应的基团。
在另一优选例中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9各自独立地为本申请实施例和表A或表B中具体化合物相应的基团。
在另一优选例中，所述的式A化合物为选自表B的化合物。
在另一优选例中，所述的式A化合物为选自表A的化合物：
表A
在本发明的第二方面中，提供了一种化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其中，所述的化合物为式A化合物
其中，
B环为5至6元杂芳环或苯环；其中，所述5至6元杂芳基具有1、2或3个N杂原子；
表示顺式构型或反式构型；
n＝0、1、2或3(较佳地，n＝0或1)；
R1表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组的基团：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基(-OH)、C1-6烷氧基(-O-C1-6烷基)、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基(-CN)、硝基(-NO2)、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基(-SH)、-S-C1-6烷基、磺酰基(-S(O)2H)、氨基磺酰基(-S(O)2NH2)和-S(O)2-C1-6烷基；或者，当R1表示位于苯环上相邻碳原子上的2个基团时，R1以及与其所连接的2个碳原子共同形成C3-8环烷基、4-8元杂环基、苯基或5-10元杂芳基(即可为并环或稠合结构)；并且R1还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
A环为C6-14芳环或5-14元杂芳环(较佳地，5-10元杂芳环)；其中，所述杂芳环为含一个或多个(1、2或3个)选自O、S和N的杂原子的杂芳环(较佳地，所述杂芳环为含一个或多个(1、2或3个)N杂原子的杂芳环)；并且A还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
R10表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基、-S-C1-6烷基、磺酰基、氨基磺酰基、-S(O)2-C1-6烷基、C6-10苯基、5-10元杂芳基、-C0-10亚烷基-三苯基膦、-O-C0-10亚烷基-三苯基膦、-S-C0-10亚烷基-三苯基膦；或者，相邻的2个R10和与它们相连的原子共同形成6-20元碳环或6-20元杂环；并且R10还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；
Ra和Rb各自独立地选自下组：H、和C1-6烷基；或者，Ra和Rb和与其相连的N原子共同形成5-7元饱和氮杂环；
R各自独立地选自下组：卤素、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C1-6烷氧基、任选取代的C3-8环烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C2-6炔基、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的-NH(C1-6烷基)、任选取代的-N(C1-6烷基)2(如二甲基氨基、二乙基氨基)、羟基、C1-6羟烷基(如羟甲基)、C1-6卤代烷基(如三氟甲基)、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和-S(O)2-C1-6烷基；
除非特别说明，所述的取代是指基团中一个或多个氢被选自下组的取代基所取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、三氟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和C1-C4取代的磺酰基；
附加条件是所述的化合物不为下述化合物：
在另一优选例中，所述的式A化合物如第一方面中定义。
在另一优选例中，所述的化合物选自表A中除化合物5和15以外的化合物。
在本发明的第三方面中，提供了一种制备式A化合物的方法，所述的方法为方法1或方法2或方法3；
I)当所述式A化合物如式Ia所示时，所述的方法为方法1；
其中，所述方法1包括步骤：
(1.1)在惰性溶剂中，使式1-1化合物与式1-2化合物反应，从而得到所述的式A化合物；
其中，R1和R2如第一方面中定义；
II)当所述化合物如式Ib所示时，所述的方法为方法2或方法3；
方法2：
其中，所述的方法2包括步骤：
(2.1)在惰性溶剂中，使式2-5化合物与式2-6化合物反应，从而得到所述的式A化合物；
其中，n、R1、R10和A环如第一方面中定义；
方法3：
其中，所述的方法3包括步骤：
(3.1)在惰性溶剂中，使式2-5化合物与式3-6化合物反应，从而得到式Ib-1化合物；和
(3.2)任选地对式Ib-1化合物中的R11基团进行修饰，从而得到所述的式I化合物；
其中，n、R1、R10和A环如第一方面中定义；
R11的定义同R10或R11为经修饰后形成R10的基团(较佳地，R11为经修饰后形成R10的基团)。
在另一优选例中，所述经修饰后形成R10的基团选自下组：-C0-10亚烷基-X、-O-C0-10亚烷基-X和-S-C0-10亚烷基-X；其中X为卤素(较佳地，为F、Cl、Br或I)。
在另一优选例中，R11表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基、-S-C1-6烷基、磺酰基、氨基磺酰基、-S(O)2-C1-6烷基、-C0-10亚烷基-X、-O-C0-10亚烷基-X和-S-C0-10亚烷基-X；或者，相邻的2个R11和与它们相连的原子共同形成6-20元碳环或6-20元杂环；并且R11还任选地被一个或多个(如1、2或3个)R取代基所取代；其中，X、Ra和Rb如前定义。
在另一优选例中，所述的惰性溶剂包括：二氯甲烷、四氢呋喃、二氯乙烷、甲苯，或其组合。
在本发明的第四方面中，提供了一种偶联物，所述的偶联物为由由式A化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物与靶向物质连接形成的偶联物；其中，其中，所述的式A化合物如第一方面中定义；所述的靶向物质是指能够靶向需要被成像的目标的物质。
在另一优选例中，所述靶向物质是指通过结合需要被成像的目标中存在的靶蛋白从而能够靶向需要被成像的目标的物质。
在另一优选例中，所述的连接为共价连接。
在另一优选例中，所述的偶联物如Fluo-Tar所示；其中，Fluo表示衍生自式A化合物的荧光部分，Tar表示衍生自靶向物质的靶向部分。
在本发明的第五方面中，提供了一种组合物，所述的组合物包括：(i)式A化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，所述的式A化合物如第一方面中定义；
或者如第四方面所述的偶联物；
和(ii)药学上或检测学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述的组合物为检测组合物、或荧光成像组合物。
在本发明的第六方面中，提供了式A化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，或者或者如第四方面所述的荧光探针，或者如第五方面所述的组合物的用途，所述的用途包括：
(i)在体外成像和成像分析中的应用；
(ii)制备用于对脑组织和/或神经元进行成像的检测试剂；
(iii)制备用于肿瘤细胞靶向及其成像分析的试剂；和/或
(iv)制备在体的病理检测从而鉴别病变与正常组织的试剂；
其中，所述的式A化合物如第一方面中定义。
在本发明的第七方面中，提供了一种检测试剂盒，
所述的试剂盒包括：a.一种或多种式A化合物或其盐，或其顺反异构体或它们的混合物；和b.任选的靶向物质；其中，式A化合物如第一方面中定义，所述的靶向物质是指能够靶向需要被成像的目标的物质；或者，
所述的试剂盒包括：如第四方面所述的偶联物。
在本发明的第八方面中，提供了一种细胞成像的方法，所述的方法包括步骤：在式A化合物或其盐，或其顺反异构体或它们的混合物或在如第四方面所述的荧光探针的存在下，孵育待成像的细胞，通过光谱仪器获得所述细胞的荧光成像图
其中，所述的式A化合物如第一方面中定义。
在另一优选例中，所述的光谱仪器包括荧光显微镜。
在另一优选例中，所述的方法是体外非治疗性的。
在本发明的第九方面中，提供了一种体内成像的方法，所述的方法包括步骤：
(i)向需要的对象施用如第一方面或第二方面所述的化合物或其盐，或其顺反异构体或它们的混合物，或者如第四方面所述的偶联物，或者如第五方面所述的组合物；和
(ii)使用仪器进行成像。
在另一优选例中，所述的检测对象为人或非人哺乳动物(较佳地，包括非人灵长目动物或啮齿类动物如大鼠或小鼠)。
在另一优选例中，所述的体内成像是实时成像或静态成像。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了实施例3的化合物(5μM)与Hela细胞共孵30分钟的荧光成像图。
图2显示了实施例3的化合物与线粒体特异性探针与Hela细胞共孵的荧光成像共聚焦图。(a)表示线粒体特异性探针Mitotracker Green成像结果；(b)表示实施例3成像结果；(c)是a和b的叠加图；(d)是a中单个细胞放大图；(e)是b中单个细胞放大图；(f)是d和e的叠加图；(g)是f中实施例3和线粒体特异性探针染色结果的共区域化分析图。
图3显示了小鼠静脉注射实施例35的化合物活体成像分析和实施例39对颅内神经元成像，(a)显示了15min后即发现探针穿过血脑屏障进入小鼠颅内；(b)显示了2h后处死小鼠，取脏器进行生物分布分析，可发现探针主要聚集在脑部和胆囊；(c)表示对b中脏器的生物分布定量分析；(d)显示了使用内窥镜共聚焦显微镜系统，在小鼠脑部进行打孔，通过孔洞进行成像，观察到探针实施例39的化合物穿过血脑屏障的过程，并对颅内神经元进行成像。
图4显示了实施例35的化合物代谢及毒性测试。(a)显示了静脉注射实施例35的化合物后，小鼠仰卧位荧光成像图片，探针从5min开始出现在膀胱中；(b)显示了小鼠通过尿液对实施例35的化合物进行排泄，EP管中为自然排尿状态下所取尿液；(c)显示了小鼠膀胱中探针信号的定量分析；(d)显示了实施例35的化合物细胞毒性测试。
图5显示了实施例39的化合物在小鼠肿瘤模型中活体成像的分析。(a)表示不同时间点小鼠头颈鳞癌(SAS)荧光成像图；(b)表示小鼠原位SAS肿瘤彩色图；(c)表示3T MRI对原位SAS肿瘤进行的T2成像图；(d)是荧光成像肿瘤对背景的比值柱状图，60min对比度约为3；(e)表示注射实施例39 48h后，取脏器进行病理分析，以脑、心脏、肠道、肾脏、肝、肺、脾脏、胃为代表的主要器官病理分析并未发现探针明显的毒性。
图6显示了实施例39的化合物配合共聚焦内窥镜成像，实现在体的病理检测，鉴别病变与正常组织。(a)表示使用共聚焦内窥镜对切下的SAS肿瘤组织进行成像，白光操作图；(b)表示共聚焦显微镜肿瘤组织荧光成像图；(c)表示肿瘤组织HE染色病理分析结果。
具体实施方式
本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现一类基于苯乙烯噁唑酮类的结构新颖的化合物(如式A或式I所示)，这些化合物具有优异的光学性质(如更大的斯托克斯位移)和更低的分子量，因此十分适合用作荧光探针，尤其是需要克服血脑屏障作用那些荧光探针。基于此，发明人完成了本发明。
术语
在本文中，除非特别说明，所用术语或缩写具有本领域技术人员所熟知的一般含义。
如本文所用，“卤素”指F、Cl、Br、和I。更佳地，卤原子选自F、Cl和Br。
除非另有表述，术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分A(例如烷氧基中的烷基部分等)是指具有指定碳原子数的直链或支链烃基(即，C1-6表示1-6个碳)。烷基的例子包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基等。在本发明中，优选的烷基为具有1-4个碳的那些烷基即C1-4烷基。
除非另有表述，术语"烷氧基"以其常规意义使用，指代经氧原子连接于分子的其余部分的那些烷基。例如，术语“C1-6烷氧基”是指经氧原子连接至分子其他部分的具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，非限制性地包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和丁氧基等。在本发明中，优选的烷氧基为具有1-4个碳的那些烷基即C1-4烷氧基。
除非另有表述，术语“C3-8环烷基”是指环上具有3至8个环碳原子的环状烷基，非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基和环癸基等。其他“环烷基”术语具有类似的含义。在本发明中，优选的环烷基为具有3、4、5或6个碳的那些环烷基如C3-6环烷氧基。
除非另有表述，术语“C2-6烯基”是指具有2至6个碳原子的含有一个或多个双键的直链或支链烃基(优选地，仅含一个双键)，非限制性地包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基和己烯基等。
除非另有表述，术语“C2-6炔基”是指具有2至6个碳原子的含有一个或多个三键的直链或支链烃基，非限制性地包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、异丁炔基、戊炔基和己炔基等。
除非另有表述，术语“亚烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指衍生自烷烃的二价基团，例如-CH2CH2CH2CH2-。在本发明中，烷基(或亚烷基)通常具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。在本文中亚烷基还可任选地被一个或多个常见取代基所取代如R取代基。
除非另有表述，术语“芳基”或“芳环”表示多不饱和的(通常芳香性)的烃基，其可以是单环或稠合在一起或共价连接的多环。在本文中芳基可以是单环的、双环或三环的。术语"杂芳基"或“杂芳环”是指含有一个或多个(如1、2、3、4、或5个)选自N、O和S的杂原子的芳基(或环)，其中氮和硫原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。在本文中，除非另有定义所述杂芳基为含5至14个环原子的杂芳基即5至14元杂芳基(较佳地，为5至10元杂芳基；如5元、6元、7元、8元、9元、或10元杂芳基)。杂芳基可通过杂原子连接于分子的其余部分。芳基的非限制性例子包括苯基、萘基、菲基和联苯基等，而杂芳基的非限制性例子包括吡啶基、吲哚基等等。在本文中以上芳基和杂芳基环系统还可任选地被一个或多个常见取代基(如R)所取代。
在一些实施例中，上述术语(如“烷基”、“亚烷基”、“芳基”和“杂芳基”)将包括指定基团的取代和未取代形式。示例性的取代基包括：卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2(如二甲基氨基、二乙基氨基)、羟基、C1-6羟烷基(如羟甲基)、C1-6卤代烷基(如三氟甲基)、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和-S(O)2-C1-6烷基。
除非另有表述，术语“杂原子”意在包括氧(O)、氮(N)和硫(S)。
除非另有表述，术语“碳环”或“碳环基”是指具有指定环原子数的(如6-20元碳环基是指含6到20个环原子的环)的饱和或至多含一个或两个双键的非芳香性的环。
除非另有表述，术语“杂环基”或“杂环”是指具有指定环原子数的(如4-8元杂环基是指含4到8个环原子的环)且含有至少一个(如1、2、或3)选自O、N、和S的杂原子的饱和或至多含一个双键的非芳香性的环。
除非另有表述，术语“氮杂环”是指含至少一个氮杂原子作为环原子的杂环。
如本文所用，术语“本发明化合物”指式A或式I所示的化合物。该术语还包括及式A或式I化合物的盐、异构体(如顺反异构体)或这些异构体的混合物。在本文中，术语“式A化合物”和“如式A所示的化合物”可以互换使用，是指如本发明第一方面所述的化合物，术语“式I化合物”和“如式I所示的化合物”可以互换使用，是指如本发明第二方面所述的化合物。
除非另有定义，在本文中，各缩写均具有本领域技术人员所熟知的含义，例如，Ph是指苯基、Me是指甲基。
除非另有表述，式I化合物的盐指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作荧光探针或成像试剂或显影剂的盐。例如，铵盐或三苯磷基盐。
荧光探针
荧光探针主要分为基因荧光探针和化学荧光探针，其中化学荧光探针又可分为有机小分子荧光探针、量子点荧光探针、高分子荧光探针等。小分子荧光探针由于其检测限低、灵敏度高、操作简便及易于制备等原因已被广泛应用于生命科学、分析化学、生物医学以及临床诊断等领域。常见的小分子探针包括荧光素及其衍生物、罗丹明类衍生物、香豆素类衍生物、菁类衍生物、二氟化硼-2-二吡咯甲烷(BODIPY)类衍生物等。然而目前大部分的荧光探针由于斯托克斯位移小，导致其对样品激发光的散射光敏感，信噪比低，使得检测灵敏度下降。
特别地，能够用于脑部成像的荧光探针十分有限，主要原因是用于脑部成像的小分子荧光探针通常需要克服血脑屏障的作用，能够穿透血脑屏障的化合物一般要求脂溶性较好，毒性低，药代动力学性质较好。然而一些能穿透血脑屏障的近红外探针由于分子量大(>600Da)，影响被连接分子的药代动力学性质，导致局部探针浓度过高产生毒性。
基于苯乙烯噁唑酮类的荧光探针
为了解决现有技术的不足，本发明的一个目的在于提供一类基于苯乙烯噁唑酮类的荧光探针。
典型地，所述的荧光探针包括式A化合物或其盐、或其顺反异构体或它们的混合物，或者所述的荧光探针为如式A化合物或其盐、或其顺反异构体或它们的混合物与靶向物质连接(如共价连接)形成的偶联物；
其中，各基团如前定义。
在一个具体实施方案中，本发明提供了式I化合物，或其盐、或其顺反异构体或它们的混合物
其中，n、R1、A环和R10各基团如第一方面中定义。
在另一个具体的实施方案中，式I中，
n为0～3的整数，优选0或1；
R1表示选自氢、卤素、C1-6直链或支链烃基、C1-6直链或支链烷氧基、C3-8直链或支链环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、甲基、三氟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和C1-C4取代的磺酰基的一个或多个(如1、2或3)基团；或当R1表示两个基团式，R1与其相邻的碳原子共同构成选自下组的基团：苯环(基)、5-10元的杂芳环(基)；
A环选自下组：苯环、5-10元芳杂环、和稠环芳烃(如萘基、菲基)；其中所述5-7元芳杂环含有1-3个选自氧、硫和氮的杂原子；
R10代表1～5个取代基，该取代基选自氢、卤素、C1-6直链或支链烃基、C1-6直链或支链烷氧基、C3-8直链或支链环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、三氟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基、C1-C4烷基取代的磺酰基、C6-10芳基和5-10元杂芳基；
R1、A环和R10还能任选地被一个或多个R取代基取代，R如前定义
除非特别说明，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、C1-6直链或支链烃基、C1-6直链或支链烷氧基、C3-8直链或支链环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、三氟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基和C1-C4取代的磺酰基。
优选地，所述卤素为F、Cl或Br。
优选地，R1选自1-3个下组氢、卤素、氰基、二甲基胺、甲基、羟甲基。
在另一个具体的实施方案中，选自下组：
其中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9分别为1-4个选自下组的取代基：氢、卤素、C1-6直链或支链烃基、C1-6直链或支链烷氧基、氰基、氨基、二甲基胺、二乙基胺、羟基、羟甲基、羧基、巯基、磺酰基、氨基磺酰基，或两个相邻的上述基团与其相连的原子可共同构成选自下组的结构：取代或未取代的6-20元杂环，所述的杂环可任选地包括1、2、3或4个选自N、O或S中的杂原子。
在另一优选例中，R2选自1-4个下组取代基氢、卤素、氰基、甲基、羟甲基。
在另一优选例中，所述的式I化合物为选自表A或表B的化合物，或其盐，或其顺顺反异构体或这些异构体的混合物；
表B
优选地，所述的靶向物质是指能够靶向需要被成像的目标的物质。
优选地，所述靶向物质是指通过结合需要被成像的目标中存在的靶蛋白从而能够靶向需要被成像的目标的物质。一般地，所述靶向物质包括但不限于：靶蛋白的抑制剂(如靶蛋白的小分子抑制剂、多肽、核酸、抗体等)。
本发明的另一个目的在于提供一种如本发明第一方面所述的式I化合物或荧光探针用于选自下组的一个或多个方面的用途：(i)体外成像和成像分析中的应用；(ii)对脑组织，神经元进行成像；(iii)肿瘤细胞靶向及其成像分析；(iv)在体的病理检测，鉴别病变与正常组织。
在另一优选例中，所述的肿瘤，优选为选自下组的肿瘤：肺癌、胃癌、肝癌、肾癌、乳腺癌、胰腺癌、结直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、甲状腺癌、食道癌、头颈癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、急性骨髓性白血病等。
制备方法
本发明的另一个目的在于提供一种上述通式I所示的基于苯乙烯噁唑酮类的荧光探针的制备方法。
典型地，所述的方法为方案1(方法1)或方案2(方法2)或方案3
在另一个具体实施例中，当所述的式I化合物如式Ia所示，所述制备方法为方案1方案1：
其中，R1、R2和n如前定义。
优选地，方案1包括步骤：
在惰性溶剂中，使式1-1和式1-2化合物反应，从而获得式Ia化合物。
优选地，方案1以1-1和1-2为原料，在二氯甲烷为溶剂、三乙胺为碱、在二氯亚砜和空气的条件下氧化，一锅两步合成目标产物(即如式Ia所示的化合物)。
优选地，反应温度为0℃至回流温度如室温。
在另一个具体实施方案中，当所述的式I化合物如式Ib所示时，所述的制备方法为方案2：
方案2：
其中，n、R1、R10和A环如前定义。
优选地，所述的方案2包括步骤：
(2.1)在惰性溶剂中，使式2-5化合物与式2-6化合物反应，从而得到所述的式I化合物。
优选地，反应温度为0℃至回流温度如室温。
在另一个具体实施方案中，方案2如下所示：
其中，各基团如R1、R10和n的定义与式I化合物中的定义相同。
优选地，方案2包括步骤：
a)在惰性溶剂中，是式1-1化合物与式2-2化合物反应，从而形成式2-3化合物；
b)使2-3化合物在碱性条件下水解形成式2-4化合物；
c)使式2-4化合物与二环己基碳二亚胺反应从而形成式2-5化合物；和
d)使式2-5化合物和式2-6化合物反应，和任选地对R11基团进行修饰，从而得到如式Ia所示的式I化合物。
优选地，步骤a)为将2-2加入到溶有1-1的二氯甲烷溶液里室温反应过夜。
优选地，步骤b)为将2-3溶于甲醇和水的混合溶液中，加入氢氧化钠水溶液，室温反应过夜。
优选地，步骤c)为向2-4溶于二氯甲烷溶液中添加二环己基碳二亚胺，室温反应过夜。
优选地，步骤d)为将N,N-二异丙基乙胺加入到溶有2-5和2-6的二氯甲烷溶液室温反应1小时，和从而得到式I化合物。
在另一个具体实施方案中，当所述的式I化合物如式Ib所示时，所述的制备方法为方案3：
方案3：
其中，n、R1、R10和A环如前定义；R11如R10定义或者R11为经修饰后能够形成R10的基团。
优选地，所述的方案3包括步骤：
(3.1)在惰性溶剂中，使式2-5化合物与式3-6化合物反应，从而形成式Ib-1化合物；和(3.2)任选地对式Ib-1化合物中的R11进行修饰，从而得到所述的式I化合物。
优选地，所述经修饰后形成R10的基团选自下组：-C0-10亚烷基-X、-O-C0-10亚烷基-X和-S-C0-10亚烷基-X；其中X为卤素(较佳地，为F、Cl、Br或I)。
优选地，R11表示一个或多个(较佳地，1、2或3个)各自独立地选自下组：H、卤素(F、Cl、Br、I)、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基、硝基、-NRaRb、-COOH、-COO-C1-6烷基、巯基、-S-C1-6烷基、磺酰基、氨基磺酰基、-S(O)2-C1-6烷基。
本发明的主要优点包括：
(a)本发明的化合物具有更大的斯托克斯位移，不易受激发光的散射光的影响，从而用本发明化合物获得的结果信噪比更低，因此，本发明的荧光探针具备优异的检测灵敏度。
(b)本发明的化合物量子产率更高。
(c)本发明的化合物能够穿透血脑屏障。
(d)本发明的化合物分子量小(基本小于450Da)，不易影响连接分子的药代动力学性质，因此，毒性更低。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
实施例1 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸(100mg,0.52mmol)溶于二氯甲烷10mL中，加入二氯亚砜(76μL,1.05mmol)搅拌30分钟，蒸干后，加入二氯甲烷10mL和4-氰基苯丙氨酸(100mg,1.01mol)，滴加三乙胺(150μL,1.1mmol)，室温搅拌1小时，在反应液中滴加二氯亚砜(76μL,1.05mmol)，室温搅拌4小时。加入30mL饱和氯化铵溶液淬灭反应。随后，将反应体系用二氯甲烷萃取(3×15mL)，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩；残留物用Flash柱纯化得到紫红色固体，收率51％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.16(d,J＝8.4Hz,2H),7.75-7.70(m,3H),7.50(d,J＝9.0Hz,2H),6.99(s,1H),6.71(d,J＝8.7Hz,2H),6.56(d,J＝15.9Hz,1H),3.08(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.1,166.8,153.4,147.3,139.2,137.8,133.2,132.9,132.7,131.6,125.5,123.1,119.6,113.6,112.8,107.2,41.0.
实施例2 4-(4-氯苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成将4-氰基苯丙胺酸替换成4-氯苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率43％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.06(d,J＝8.1Hz,2H),7.66(d,J＝15.3Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),7.01(s,1H),6.70(d,J＝8.1Hz,2H),6.56(d,J＝15.6Hz,1H),3.07(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.6,164.6,152.2,145.1,136.4,134.5,133.0,132.5,130.3,129.1,126.8,111.9,106.9,40.1
实施例3 4-(3-氯苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-氰基苯丙胺酸替换成3-氯苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率38％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.20(s,1H),7.92-7.90(m,1H),7.66(d,J＝15.9Hz,1H),7.48(d,J＝9.0Hz,2H),7.37-7.35(m,2H),6.97(s,1H),6.91(d,J＝9.0Hz,2H),6.57(d,J＝16.2Hz,1H),3.06(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.5,164.9,152.2,145.3,135.7,135.2,134.7,130.3,130.1,129.9,126.2,122.3,111.8,106.8,40.1.
实施例4 4-(2-氯苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-氰基苯丙氨酸替换成2-氯苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率35％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.79(d,J＝8.4Hz,1H),7.67(d,J＝15.6Hz,1H),7.55-7.43(m,4H),7.37-7.30(m,2H),6.69(d,J＝8.4Hz,2H),6.56(d,J＝15.6Hz,1H),3.06(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.4,165.2,152.2,145.4,136.0,135.4,132.8,131.8,131.1,130.3,129.8,127.1,123.2,122.3,111.9,106.8,40.1
实施例5 4-苯亚甲基-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率42％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.12(d,J＝6.9Hz,2H),7.65(d,J＝15.9Hz,1H),7.50-7.42(m,5H),7.09(s,1H),6.71(d,J＝9.0Hz,2H),6.58(d,J＝15.9Hz,1H),3.06(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.9,164.3,152.0,144.6,134.1,133.9,131.9,130.5,130.2,128.8,128.7,122.4,111.9,107.1,40.1.
实施例6 4-(4-甲基苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率44％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.01(d,J＝8.1Hz,2H),7.61(d,J＝15.6Hz,1H),7.47(d,J＝9.0Hz,2H),7.25-7.23(m,2H),7.07(s,1H),6.69(d,J＝8.7Hz,2H),6.56(d,J＝15.9Hz,1H),3.04(s,6H),2.40(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.9,164.8,152.9,145.2,145.2,134.2,132.9,132.2,131.0,130.5,130.0,123.5,112.8,108.2,40.0,22.7.
实施例7 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率48％。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.10(d,J＝8.7Hz,2H),7.60(d,J＝15.6Hz,1H),7.47(d,J＝8.7Hz,2H),7.06(s,1H),6.97(d,J＝9.0Hz,2H),6.70(d,J＝8.7Hz,2H),6.56(d,J＝16.2Hz,1H),3.87(s,3H),3.05(s,6H)；13C NMR(CDCl3,100MHz):δ168.1,163.3,161.6,151.9,143.8,133.9,132.0,130.0,128.9,127.0,122.6,114.4,111.9,107.4,55.4,40.1.
实施例8 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-(4-甲氧基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲氧基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率46％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.10(d,J＝8.7Hz,2H),7.61(d,J＝15.9Hz,1H),7.52(d,J＝8.7Hz,2H),7.12(s,1H),6.95(t,J＝9.3Hz,4H),6.65(d,J＝15.9Hz,1H),3.87(s,3H),3.85(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.8,162.7,161.9,161.7,142.7,134.2,131.6,130.5,129.8,127.5,126.7,114.5,110.9,55.4.
实施例9 4-苯亚甲基-2-(4-甲氧基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲氧基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率43％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.13(d,J＝6.8Hz,2H),7.67(d,J＝16.0Hz,1H),7.55(d,J＝8.8Hz,2H),7.49-7.41(m,3H),7.17(s,1H),6.96(d,J＝8.8Hz,2H),6.69(d,J＝16.0Hz,1H),3.87(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.5,166.2,163.2,146.27,133.14,131.24,128.04,127.50,115.64,111.02,78.18,77.93,77.67,56.43.
实施例10 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-(4-甲氧基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲氧基肉桂酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率38％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.25(d,J＝8.4Hz,2H),7.78-7.73(m,3H),7.60(d,J＝8.8Hz,2H),7.10(s,1H),6.99(d,J＝8.8Hz,2H),6.71(d,J＝16.0Hz,1H),3.90(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.7,166.2,163.2,146.3,138.8,137.3,133.3,133.0,131.2,128.0,127.5,119.5,115.6,114.1,111.0,56.4.
实施例11 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-(4-甲基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率32％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.11(d,J＝9.0Hz,2H),7.64(d,J＝15.9Hz,1H),7.48(d,J＝8.1Hz,2H),7.24(d,J＝8.1Hz,2H),7.15(s,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,2H),6.76(d,J＝16.2Hz,1H),3.88(s,3H),2.39(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.7,163.5,163.0,144.0,142.1,135.3,132.9,132.5,132.0,130.7,129.0,127.6,115.4,113.3,56.4,22.5.
实施例12 4-苯亚甲基-2-(4-甲基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率30％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.13(d,J＝8.7Hz,2H),7.64(d,J＝16.2Hz,1H),7.59-7.57(m,1H),7.43-7.41(m,3H),7.16(s,1H),6.96(d,J＝8.7Hz,2H),6.77(d,J＝16.2Hz,1H),2.33(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.7,163.5,163.0,144.0,135.8,135.3,132.3,131.6,130.0,129.0,127.7,115.2,114.3,22.4.
实施例13 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-(4-甲基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-甲基肉桂酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率25％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.22(d,J＝8.4Hz,2H),7.74-7.69(m,4H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.25-7.23(m,1H),7.10(s,1H),6.78(d,J＝16.2Hz,1H),2.41(s,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ166.6,164.0,145.6,142.1,137.7,136.3,132.4,132.1,131.6,129.9,128.4,127.2,118.5,113.3,111.7,21.6.
实施例14 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-苯乙烯基噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率36％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.12(d,J＝8.7Hz,2H),7.67(d,J＝16.2Hz,1H),7.59-7.57(m,1H),7.43-7.41(m,3H),7.17(s,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,2H),6.81(d,J＝16.2Hz,1H),3.88(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.6,163.3,163.1,144.0,135.6,135.3,132.4,131.5,130.0,129.0,127.5,115.5,114.4,56.4.
实施例15 4-苯亚甲基-2-苯乙烯基噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率34％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.13(d,J＝7.2Hz,2H),7.70(d,J＝16.2Hz,1H),7.59-7.57(m,2H),7.47-7.43(m,6H),7.20(s,1H),6.83(d,J＝15.9Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.3,163.4,143.9,134.5,133.5,132.3,131.3,131.1,130.8,129.1,128.9,128.2,113.3.
实施例16 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成肉桂酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率36％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.21(d,J＝7.8Hz,2H),7.79-7.70(m,3H),7.61-7.58(m,2H),7.46-7.43(m,3H),7.11(s,1H),6.82(d,J＝16.2Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.4,165.8,146.5,138.6,137.1,135.2,133.3,133.1,132.2,130.1,129.3,128.5,119.4,114.4,113.7.
实施例17 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-(4-氯苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氯肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，按照类似实施例1的合成方法，通过柱层析法得到红色固体，收率34％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.11(d,J＝9.3Hz,2H),7.60(d,J＝16.5Hz,1H),7.51(d,J＝8.7Hz,2H),7.40(d,J＝8.7Hz,2H),7.18(s,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,2H),6.78(d,J＝16.5Hz,1H),3.88(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.4,163.2,163.0,142.3,137.4,135.4,134.1,132.8,132.2,130.3,130.1,127.5,115.5,115.0,56.4.
实施例18 4-苯亚甲基-2-(4-氯苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氯肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率29％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.13(d,J＝5.7Hz,2H),7.64(d,J＝15.9Hz,1H),7.53-7.38(m,7H),7.21(s,1H),6.79(d,J＝15.9Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.2,163.1,142.3,136.7,133.5,133.4,133.0,132.3,131.7,131.2,129.4,129.3,128.9,113.8.
实施例19 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-(4-氯苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氯肉桂酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率31％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.23(d,J＝8.4Hz,2H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.77-7.63(m,5H),7.55(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(t,J＝8.4Hz,3H),7.26(d,J＝12.4Hz,1H),7.13(d,J＝6.4Hz,1H),6.81(d,J＝16.2Hz,1H),6.29(d,J＝12.8Hz,1H)；13CNMR(126MHz,氯仿-d):δ167.3,164.9,143.1,139.2,136.4,134.5,133.4,132.9,130.3,129.1,119.8,117.4,115.0,114.5.
实施例20 4-(4-甲氧基苯亚甲基)-2-(4-氰基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氰基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成4-甲氧基苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率19％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.11(d,J＝8.7Hz,2H),7.71-7.57(m,5H),7.21(s,1H),6.97(d,J＝9.0Hz,2H)6.88(d,J＝16.2Hz,1H),3.88(s,3H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.1,163.5,162.4,141.0,139.8,135.6,133.9,133.7,132.0,129.2,127.3,119.3,117.9,115.6,114.3,56.4.
实施例21 4-苯亚甲基-2-(4-氰基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氰基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率18％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.15-8.12(m,2H),7.74-7.63(m,5H),7.48-7.46(m,3H),7.26(s,1H),6.91(d,J＝16.5Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ166.9,162.5,141.0,138.7,133.3,133.2,132.9,132.8,132.5,131.6,129.0,128.4,118.3,116.9,113.6.
实施例22 4-(4-氰基苯亚甲基)-2-(4-氰基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成4-氰基肉桂酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率22％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.76-7.68(m,8H),7.20(s,1H),6.92(d,J＝16.5Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.0,165.0,143.5,139.2,138.2,136.7,133.8,133.4,133.3,130.1,129.5,119.3,119.1,117.3,115.0,114.8.
实施例23 4-苯亚甲基-2-(2-氯苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成2-氯肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率24％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.15-8.09(m,2H),7.74-7.70(m,1H),7.48-7.44(m,4H),7.36-7.32(m,2H),7.24(s,1H),6.85(d,J＝15.9Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ168.1,164.1,140.4,136.1,134.4,133.6,133.3,133.0,132.4,132.2,131.3,129.9,128.4,128.2,116.7.
实施例24 4-苯亚甲基-2-(3-氯苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成2-氯肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率25％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.14-8.10(m,2H),7.62-7.55(m,2H),7.46-7.36(m,5H),7.21(s,1H),6.80(d,J＝15.9Hz,1H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.1,162.9,142.0,136.3,135.1,133.4,133.3,133.0,132.0,131.3,130.5,130.3,128.9,127.8,126.3,114.7.
实施例25 4-苯亚甲基-2-(3,4-二甲氧基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成3,4-二甲氧基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率28％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.11(d,J＝6.3Hz,2H),7.63(d,J＝15.9Hz,1H),7.45-7.43(m,3H),7.15-7.10(m,2H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(d,J＝16.2Hz,1H),3.93(s,6H)；13C NMR(126MHz,氯仿-d):δ167.4,163.6,151.6,149.4,143.8,133.6,132.1,130.9,130.4,128.9,127.6,123.2,111.1,110.9,109.3,56.0,55.9.
实施例26 4-苯亚甲基-2-(2,3,4-三甲氧基苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将4-二甲氨基肉桂酸替换成3,4,5-三甲氧基肉桂酸，4-氰基苯丙氨酸替换成苯丙氨酸，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例1，得到红色固体，收率32％。1H NMR(300MHz,氯仿-d):δ8.12(d,J＝7.2Hz,2H),7.90(d,J＝15.0Hz,1H),7.46-7.42(m,2H),7.34(d,J＝15.6Hz,2H),7.16(s,1H),6.82(d,J＝16.5Hz,1H),6.73(d,J＝10.2Hz,1H),3.97(s,3H),3.92(s,3H),3.89(s,3H)；13CNMR(126MHz,氯仿-d):δ168.6,165.0,157.0,154.4,143.3,140.0,134.8,133.1,131.8,131.2,129.8,124.3,122.9,122.6,112.9,108.7,62.4,61.8,57.0.
实施例27(Z)-4-(2-萘亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
(a)(E)-3-(4-(二甲基氨基)苯基)丙烯酰基)甘氨酸乙酯(式2-3)的合成
向化合物2-1(10.00g，52.29mmol)的50mL二氯甲烷中的溶液中加入2-2(7.30g，52.29mmol)，O-(7-氮苯并三氮唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯(18.91g，78.44mmol)和N,N-二异丙基乙胺(21.61mL，130.73mmol)，将反应液在室温下搅拌16小时至反应完全，加入饱和氯化钠水溶液，并用二氯甲烷萃取两次。收集的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。然后通过硅胶柱纯化，得到黄色固体，收率90％。
(b)(E)-3-(4-(二甲基氨基)苯基)丙烯酰基)甘氨酸(式2-4)的合成
向2-3(11.00g，39.81mmol)的20mL甲醇和10mL水的混合溶液中加入氢氧化锂(7.96g，199.03mmol)，并将该反应在室温搅拌过夜。反应完成后，将混合物真空浓缩并用水稀释。用1N盐酸将稀释溶液调节至中性。使用布氏漏斗过滤沉淀，并用乙醚洗涤，得到黄色固体，收率92％。
(c)(E)-2-(4-(二甲基氨基)苯乙烯基)噁唑-5-(4H)-酮(式2-5)的合成
向2-4(5.00g，20.14mmol)的30mL二氯甲烷中加入二环己基碳二亚胺(6.23g，30.21mmol)。反应在室温搅拌过夜，使用布氏漏斗过滤沉淀，并用冷乙醇洗涤沉淀物，得到橙色固体，收率69％。
向溶有2-5的30ml二氯甲烷溶液中加入2-萘醛(339.14mg，2.17mmol)和N,N-二异丙基乙胺(538.32μL，3.26mmol)。反应在室温搅拌1小时，加入氯化铵溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取2次，合并后的有机层用无水硫酸钠干燥，然后柱色谱纯化，得到红色固体，收率87％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.45(s,1H),8.41(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.95–7.91(m,1H),7.89(d,J＝8.7Hz,1H),7.87–7.83(m,1H),7.67(d,J＝15.9Hz,1H),7.55–7.53(m,1H),7.53–7.49(m,3H),7.25(s,1H),6.72(d,J＝8.7Hz,2H),6.64(d,J＝16.0Hz,1H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ168.1,164.4,152.2,144.7,134.5,134.3,133.4,133.3,132.0,130.3,129.2,128.9,128.7,127.9,127.9,127.8,126.7,122.8,112.1,107.5,40.3.
实施例28(Z)-4-(9-菲蒽亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成9-甲醛菲，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率76％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.13(s,1H),8.76(d,J＝9.7Hz,1H),8.68(d,J＝8.2Hz,1H),8.34(d,J＝9.8Hz,1H),8.09–8.05(m,1H),7.96(s,1H),7.74–7.67(m,4H),7.67–7.60(m,1H),7.56–7.48(m,2H),6.73(d,J＝8.9Hz,2H),6.67(d,J＝15.9Hz,1H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ167.9,165.1,152.1,144.9,135.5,133.3,131.5,131.4,130.7,130.7,130.4,128.5,128.4,127.4,127.1,127.0,124.6,123.9,123.4,122.7,112.4,107.7,40.5.
实施例29(Z)-4-(6-羟甲基-2-萘亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成6-甲氧基-2-萘甲醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率81％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.45–8.33(m,2H),7.80(dd,J＝22.7,8.7Hz,2H),7.65(d,J＝16.0Hz,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(s,1H),7.20–7.09(m,2H),6.73(d,J＝8.2Hz,2H),6.63(d,J＝15.9Hz,1H),3.95(s,3H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ168.2,163.9,159.5,159.5,151.9,144.2,135.9,133.5,133.3,130.9,130.2,129.8,129.5,128.9,128.7,127.5,119.5,112.3,107.8,106.1,55.6,40.5.
实施例30(Z)-4-(1-溴-2-萘亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成1-溴-2-萘甲醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到黑色固体，收率57％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.85(d,J＝8.7Hz,1H),8.41(d,J＝8.2Hz,1H),7.93(s,1H),7.85(t,J＝7.8Hz,2H),7.71(d,J＝16.0Hz,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,4H),7.19(s,2H),6.73(d,J＝16.0Hz,1H),3.13(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ167.7,145.5,136.0,135.8,135.3,135.0,134.7,134.1,134.0,132.7,132.2,130.5,128.7,128.3,128.2,127.9,127.8,127.3,112.1,107.2,40.3.
实施例31(Z)-4-((E)-3-苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率92％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.65–7.54(m,4H),7.50–7.45(m,2H),7.42–7.31(m,3H),7.06(d,J＝15.7Hz,1H),6.99(dd,J＝11.7,1.0Hz,1H),6.72(d,J＝8.5Hz,2H),6.54(d,J＝15.9Hz,1H),3.06(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ167.0,163.2,152.1,144.3,142.7,136.4,134.9,130.2,130.1,129.7,129.0,127.9,123.6,122.9,112.2,107.3,40.3.
实施例32(Z)-4-((E)-3-对甲氧基苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成4-甲氧基肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率92％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.59(d,J＝15.9Hz,1H),7.54(d,J＝8.6Hz,2H),7.52–7.42(m,3H),7.05(s,1H),7.00(d,J＝11.0Hz,1H),6.91(d,J＝8.6Hz,2H),6.74(d,J＝8.3Hz,2H),6.55(d,J＝15.9Hz,1H),3.85(s,3H),3.06(s,6H).
实施例33(Z)-4-((E)-3-对氯苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成4-氯肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率86％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.63(d,J＝16.0Hz,1H),7.50(t,J＝9.1Hz,5H),7.35(d,J＝8.4Hz,2H),6.98(t,J＝13.4Hz,2H),6.77(d,J＝8.2Hz,2H),6.54(d,J＝15.9Hz,1H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ166.8,163.4,144.6,141.0,135.5,135.1,134.9,130.3,129.8,129.6,129.5,129.3,129.0,124.1,112.5,107.2,40.5.
实施例34(Z)-4-((E)-3-对氟苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成4-氟肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率88％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.61(d,J＝16.0Hz,1H),7.58–7.54(m,2H),7.54–7.48(m,1H),7.48–7.45(m,2H),7.07(t,J＝8.6Hz,2H),7.01(d,J＝15.6Hz,1H),6.96(dd,J＝11.6,1.1Hz,1H),6.72–6.67(m,2H),6.52(d,J＝15.9Hz,1H),3.06(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ166.7,163.5(d,J＝254.5Hz),163.1,162.4,151.9,144.3,141.1,134.7,132.5(d,J＝3.8Hz),130.1,129.7,129.5(d,J＝7.6Hz),123.2,116.0(d,J＝21.4Hz),112.2,107.1,40.3.
实施例35(Z)-4-((E)-3-(3,4-二甲氧基)苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成3,4-二甲氧基肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率91％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.60(d,J＝15.9Hz,1H),7.46(d,J＝9.0Hz,2H),7.43(d,J＝11.9Hz,1H),7.15(d,J＝2.0Hz,1H),7.12(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),7.04–7.00(m,1H),6.99(d,J＝5.6Hz,1H),6.87(d,J＝8.3Hz,1H),6.71(d,J＝8.7Hz,2H),6.54(d,J＝15.9Hz,1H),3.96(s,3H),3.93(s,3H),3.06(s,6H).
实施例36(Z)-4-((E)-3-对溴苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成4-溴肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到红色固体，收率79％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.63(d,J＝15.5Hz,1H),7.59–7.53(m,1H),7.50(t,J＝9.1Hz,4H),7.44(d,J＝8.3Hz,2H),6.98(d,J＝10.3Hz,1H),6.95(d,J＝6.4Hz,1H),6.76(d,J＝8.3Hz,2H),6.54(d,J＝15.9Hz,1H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ166.8,163.5,152.2,144.6,140.9,135.3,132.6,132.2,130.3,129.4,129.2,124.2,123.8,122.9,112.2,107.1,40.4.
实施例37(Z)-4-(2-吲哚亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成1H-吲哚-2-甲醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到黑色固体，收率65％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.51(s,1H),7.65(s,1H),7.62(d,J＝8.5Hz,1H),7.53–7.48(m,2H),7.46(dd,J＝8.3,1.1Hz,1H),7.30(ddd,J＝8.1,6.9,1.1Hz,1H),7.15(s,1H),7.12(ddd,J＝8.0,7.0,1.0Hz,1H),6.95(d,J＝1.6Hz,1H),6.71(d,J＝8.9Hz,2H),6.60(d,J＝15.9Hz,1H),3.07(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ166.8,163.0,152.2,144.4,139.2,134.2,131.8,130.3,128.3,125.7,122.8,122.1,120.7,118.3,112.5,112.2,111.7,107.1,40.3.
实施例38(Z)-4-(2-喹啉亚甲基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成喹啉-2-甲醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到黑色固体，收率68％。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.86(d,J＝8.6Hz,1H),8.23(d,J＝8.7Hz,1H),8.14–8.10(m,1H),7.82(s,1H),7.77–7.70(m,2H),7.58(s,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),7.43(s,1H),6.71(d,J＝8.9Hz,2H),6.61(d,J＝15.8Hz,1H),3.08(s,6H).13C NMR(126MHz,氯仿-d)δ167.4,165.9,153.9,152.5,148.7,146.2,137.9,136.3,130.7,130.0,130.0,128.2,127.8,127.6,123.8,122.5,112.1,106.8,40.2.
实施例39(Z)-4-(3-(6-三苯基膦)己氧基)对甲氧基苯基-2-亚烯丙基)-2-((E)-4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮的合成
将2-萘醛替换成3-甲氧基-4-(3-(6-溴)己氧基)肉桂醛，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例27，得到4-(3-(6-溴)己氧基)对甲氧基苯基-2-丙烯基)-2-(4-(二甲氨基)苯乙烯基)噁唑-5(4H)-酮，然后将其溶解在甲苯中，加入三苯基膦回流反应过夜，通过柱层析法得到黑色固体，收率43％。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.90–7.71(m,15H),7.60(d,J＝15.9Hz,1H),7.53–7.42(m,3H),7.24–7.06(m,3H),7.04–6.91(m,2H),6.77–6.71(m,2H),6.49(d,J＝15.9Hz,1H),4.05(t,J＝6.2Hz,2H),3.82(s,3H),3.49–3.35(m,2H),3.05(s,6H),1.85–1.51(m,8H).
测试例1苯乙烯噁唑酮类探针光学性质研究
测试方法：苯乙烯噁唑酮类探针吸收波长使用Agilent 8453UV光谱仪进行测定，使用20μM的水溶液。发射波长使用Jobin Yvon Fluoromax-3光谱仪进行测定，使用12μM的水溶液。量子产率使用Φx＝Φs(Fx/Fs)(As/Ax)公式进行计算。以罗丹明(Rhodamine)6G为对照品。同时对荧光素(Fluorescein)和Cy5.5进行检测，验证方法。
结果如表1所示，其中记载了苯乙烯噁唑酮类荧光探针的光学性质，包括吸收波长、发射波长、斯托克斯位移及荧光量子产量。
表1
结果显示该类苯乙烯噁唑酮类探针具有较好的荧光性质，大部分化合物都具有较好的荧光量子产率。本发明的大部分化合物的最高荧光发射波长大于600nm，优于部分商用的荧光探针，尤其是实施例30的化合物其最高发射波长甚至能够达到689nm。本发明的化合物具有优异的斯托克斯位移(Stokes位移)，尤其是本发明的优选化合物其具有显著优于现有商用荧光探针的斯托克斯位移(例如本发明的优选化合物具有>100nm的位移，甚至＞150nm的位移)，其中实施例30的化合物的斯托克斯位移甚至可以达到198nm，显著优于大部分商用的荧光探针甚至是大部分商用荧光探针的2倍以上。因此，本发明的化合物能够显著改善常见荧光探针诸如发射波长较短且斯托克斯位移的缺陷，从而减少生物体内荧光背景的干扰，提高信噪比，使得生物体内荧光成像效果更好。
测试例2实施例3与Hela细胞共聚焦成像
测试方法：Hela细胞使用含有3μM苯乙烯噁唑酮类探针的培养液孵育30分钟，再使用pH7.4 1×PBS清洗3次，更换新的培养液后，使用20倍物镜的蔡司的荧光显微镜进行拍摄。共染色选用线粒体靶向的Mitotracker Green。
结果如图1和图2所示：图1中(a)显示了实施例3的化合物与Hela细胞共孵30分钟的荧光成像图；(b)显示了(a)部分的区域的放大图；图2中(a)显示了线粒体特异性探针Mitotracker Green成像结果；(b)显示了实施例3的化合物的成像结果；(c)显示了(a)和(b)的叠加图；(d)-(e)显示了单个细胞放大图；(f)显示了(d)和(e)的叠加图；(g)显示了(f)中实施例3的化合物和线粒体特异性探针染色结果的共区域化分析图；
结果表明，从细胞形态学上观察，30分钟内未发现实施例3的化合物对细胞有明显的毒性。图像表明实施例3具有良好的细胞透膜性，其染色区域在细胞胞质内，并未进入细胞核。将实施例3的化合物与线粒体特异性染料进行共区域化研究。结果表明，两者有较高的共区域化程度，表面实施例3的化合物主要聚集在线粒体内。
测试例3实施例35活体成像分析及实施例39对颅内神经元成像
测试方法：将实施例35的化合物(40mg/kg)通过尾静脉注射进小鼠体内，用IVISLumina XR III成像仪对小鼠在不同时间进行成像。激发波长选用500nm，收集波长选用650nm长通滤光片。为收集自然状态下小鼠排出的尿液，进行荧光定量分析。2h后处死小鼠，取小鼠脑，心脏，肠道，肾脏，肝，肺，脾脏，胃为代表的主要器官进行荧光成像生物分布分析(图3(a)-(c)和图4)。
将实施例39(40mg/kg)通过尾静脉注射进小鼠体内，用FIVE2(ViewnVivo)内窥镜共聚焦显微镜系统对小鼠颅内神经元进行实时成像(激发波长488nm，收集波长530nm)(图3(d))。
结果如图3和图4所示。图3中(a)显示了静脉注射实施例35的化合物1·5min后，探针穿过血脑屏障进入小鼠颅内；(b)2h后处死小鼠，取脏器进行生物分布分析，探针主要聚集在脑部和胆囊；(c)b中脏器的生物分布定量分析；(d)使用内窥镜共聚焦显微镜系统，在小鼠脑部进行打孔，通过孔洞进行成像，观察到探针实施例39穿过血脑屏障的过程，并对颅内神经元进行成像。图4中，(a)表示静脉注射实施例35后，小鼠仰卧位荧光成像图片，探针从5min开始出现在膀胱中；(b)小鼠通过尿液对实施例35进行排泄，EP管中为自然排尿状态下所取尿液；(c)小鼠膀胱中探针信号的定量分析；(d)实施例35的化合物细胞毒性测试。
结果显示，从活体分析上看，实施例35的化合物在15min即可穿过血脑屏障进入小鼠颅内。在处死小鼠后进行生物分布分析，可发现本发明的化合物主要聚集在脑部和胆囊。对实施例39的化合物进行通过内窥镜共聚焦显微镜系统，可以观察到实施例39的化合物穿过血脑屏障的过程，并可以对颅内神经元进行成像。综上所述，本发明的苯乙烯噁唑酮类荧光探针可以快速穿透血脑屏障而通过尿液快速从体内排出，并且对颅内脑组织具有较好的成像效果。
测试例4实施例39在小鼠肿瘤模型中活体成像分析
测试方法：将化合物39的化合物(40mg/kg)通过尾静脉注射进原位SAS口腔鳞癌小鼠体内，用IVIS Lumina XR III成像仪对小鼠在不同时间进行成像，注射48h后取小鼠脑、心脏、肠道、肾脏、肝、肺、脾脏、胃为代表的主要组织进行病理分析。
结果如图5所示，其中(a)显示了不同时间点小鼠头颈鳞癌(SAS)荧光成像图；(b)显示了小鼠原位SAS肿瘤彩色图；(c)显示了3T MRI对原位SAS肿瘤进行的T2成像图；(d)显示了荧光成像肿瘤对背景的比值柱状图，60min对比度约为3；(e)显示了注射实施例39的化合物48h后，以脑、心脏、肠道、肾脏、肝、肺、脾脏、胃为代表的主要器官的病理分析，其中并未发现探针明显的毒性。
结果显示实施例39的化合物在小鼠肿瘤模型中可以实现肿瘤部位的实时荧光成像并且对小鼠体内的主要脏器没有表现出明显毒性，说明本发明的探针存在潜在的荧光成像指导手术的应用前景，并具有较好的安全性。
测试例5实施例39对肿瘤组织的鉴别
测试方法：尾静脉注射实施例39的化合物，2小时后的发现荷瘤小鼠肿瘤部位荧光信号强度最高。马上进行荧光成像指导下的SAS肿瘤组织切除，对切除组织使用共聚焦内窥镜进行成像。同时取一部分肿瘤组织冷冻切片，制成约5μm厚的切片，进行H&E染色并显微成像。
结果如图6所示，可见使用实施例39的化合物配合共聚焦内窥镜成像，可以实现肿瘤组织的实时病理检测，可用于鉴别病变与正常组织。具体地，图6中(a)显示了使用共聚焦内窥镜对切下的SAS肿瘤组织进行成像，白光操作图；(b)显示了共聚焦显微镜肿瘤组织荧光成像图；(c)显示了肿瘤组织HE染色病理分析结果。
该结果显示HE染色结果与共聚焦内窥镜荧光成像结果一致，表明该探针可以配合共聚焦内窥镜进行荧光成像，实现在线的病理检测，快速区分病变与正常组织
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (16)

1.一种式Ic化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物在制备用于荧光成像的荧光试剂中的用途；
其中，
表示顺式构型或反式构型；
n=0或1；
如式I1a、I1b、I1c、I1d或I1e所示；
其中，*代表与式I化合物中的其他部分连接的位置；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9分别表示一个或多个各自独立地选自下组的基团：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、氰基、-S-C1-6烷基、-O-C0-10亚烷基-三苯基膦、-S-C0-10亚烷基-三苯基膦；
Ra和Rb各自独立地为甲基。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的C1-6卤代烷基包括：三氟甲基。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述C3-8环烷基选自下组：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，如式I1a、I1b、或I1d所示。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，如式I1a所示。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的式Ic化合物为选自表A的化合物；
。
7.一种化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，所述的化合物为式Ic化合物
其中，
表示顺式构型或反式构型；
n=0或1；
如式I1a、I1b、I1c、I1d或I1e所示；
其中，*代表与式I化合物中的其他部分连接的位置；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9分别表示一个或多个各自独立地选自下组的基团：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、羟基、C1-6烷氧基、氰基、-S-C1-6烷基、-O-C0-10亚烷基-三苯基膦、-S-C0-10亚烷基-三苯基膦；
Ra和Rb各自独立地为甲基；
附加条件是所述的化合物不为下述化合物：
8.如权利要求7所述的化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，所述的C1-6卤代烷基包括：三氟甲基。
9.如权利要求7所述的化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，所述C3-8环烷基选自下组：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
10.如权利要求7所述的化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，如式I1a、I1b、或I1d所示。
11. 如权利要求7所述的化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，如式I1a所示。
12.如权利要求7所述的化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，其特征在于，所述的化合物选自下表A1
。
13.一种偶联物，其特征在于，所述偶联物为由式Ic化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物与靶向物质连接形成的偶联物；
其中，所述的式Ic化合物如权利要求1中定义；所述的靶向物质是指能够靶向需要被成像的目标的物质。
14.一种组合物，其特征在于，所述的组合物包括：
(i) 式Ic化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，所述的式Ic化合物如权利要求7中定义；
或者如权利要求13所述的偶联物；
和(ii) 药学上或检测学上可接受的载体。
15.一种式Ic化合物或其药学上或检测学上可接受的盐，或其顺反异构体或它们的混合物，或者如权利要求13所述的偶联物，或者如权利要求14所述的组合物的用途，其特征在于，所述的用途包括：
(i) 在非治疗性体外成像和成像分析中的应用；
(ii) 制备用于对脑组织和/或神经元进行成像的试剂；
(iii) 制备用于肿瘤细胞靶向及其成像分析的试剂；和/或
(iv) 制备在体的病理检测从而鉴别病变与正常组织的试剂；
其中，所述的式Ic化合物如权利要求1中定义。
16.一种细胞成像的方法，所述的方法包括步骤：在式Ic化合物或其盐，或其顺反异构体或它们的混合物或在如权利要求13所述偶联物的存在下，孵育待成像的细胞，通过光谱仪器获得所述细胞的荧光成像图；
其中，所述的式Ic化合物如权利要求1中定义；并且所述的方法是体外非治疗性的。
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CAS RN：1189554-41-3;REGISTRY;STN Columbus;20091022;1 *
CAS RN：2220546-53-0等;REGISTRY;STN Columbus;1-68 *
Molecular Mimics of Classic P-Glycoprotein Inhibitors as Multidrug Resistance Suppressors and Their Synergistic Effect on Paclitaxel;Moustafa E. El-Araby等;PLOS ONE;第12卷(第1期);e0168938 *

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