CN114057696B - 一种咔唑-嘧啶衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种咔唑-嘧啶衍生物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种咔唑‑嘧啶衍生物及其制备方法和应用。该衍生物具有通式I化合物的结构，其能够造成癌细胞线粒体功能紊乱、DNA损伤并导致染色体不稳定，并具有较好的抗肿瘤效果。

Description

一种咔唑-嘧啶衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于药物技术领域，尤其涉及一种咔唑-嘧啶衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
癌症是肿瘤是人类面对的重大疾病之一，而其中，癌症的侵袭和转移更是实体瘤患者发生肿瘤扩散和患者预后性差导致病人死亡的主要原因，但是目前抗肿瘤迁移的药物还十分欠缺，存在许多的问题与挑战。因此，具有良好抗肿瘤药物的发现一直是药物学家重要的研究方向，从而开发低毒副作用，高选择性、具有抗肿瘤增殖和迁移的高效抗肿瘤药物。
咔唑骨架是许多生物活性化合物的关键结构基序，包括合成和天然产物。含咔唑的小分子在药物化学中很受欢迎，因为它们表现出各种各样的生物活性。如抗菌、抗真菌、抗肿瘤、抗炎、抗组胺和神经保护活性。近年来，咔唑衍生物的一些结构被报道为小的抗癌分子，如LCY-2-CHO 35，Clausenamine A，玫瑰树碱(ellipticine),Xiamycin A等。这些咔唑衍生物结构的N9位置大多被H或烷基链取代。大部分的结构修饰仅限于A环的3个位置和B环的5、6、7个位置，而1个位置的H很少被替换和评价其生物活性。
线粒体是重要的细胞器，控制着细胞生存和死亡的多种信号通路。越来越多的证据表明，线粒体代谢和功能在肿瘤发生和癌症进展中是必不可少的，使线粒体和线粒体功能成为抗肿瘤治疗的可信靶点。线粒体通过调节ATP的产生和细胞凋亡，在维持细胞稳态中发挥重要作用，是细胞生存的关键调节器。虽然癌细胞通过代谢重编程和线粒体功能障碍实现了高水平的能量生产，但癌细胞中的线粒体仍然具有功能，并在细胞生存中发挥重要作用。因此，线粒体可能被认为是抗癌治疗的靶点。
染色体不稳定性(chromosome instability，简称CIN)推动癌症转移，它与预后不良、转移和治疗耐药性有关。CIN是由有丝分裂过程中染色体分离的错误导致的，导致染色体结构和数量异常。尽管CIN在人类癌症中普遍存在，但其在肿瘤进化中的作用是复杂且看似矛盾的。一方面，CIN和复杂的非整倍体与肿瘤衍生细胞系和临床环境中对抗肿瘤药物(例如紫杉醇)的抗性相关，转移性病变和循环肿瘤细胞表现出CIN和染色体拷贝数异质性增加的证据。相反，过量的CIN预示着卵巢癌、直肠癌和乳腺癌对顺铂和5-氟尿嘧啶(5-FU)等细胞毒性疗法的敏感性增强。染色体分离错误会带来许多细胞负担，包括遗传物质的丢失、DNA损伤信号的激活以及蛋白毒性应激，所有这些都会影响生存能力。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明第一个方面提出一种咔唑-嘧啶衍生物，该衍生物能够造成癌细胞线粒体功能紊乱、DNA损伤并导致癌细胞染色体不稳定，并具有较好的抗肿瘤效果。
本发明的第二个方面提出了一种上述咔唑-嘧啶衍生物的制备方法。
本发明的第三个方面提出了一种上述咔唑-嘧啶衍生物的应用。
根据本发明的第一个方面，提出了通式I化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶、前药：
其中，R1选自H、硝基、氰基、胺基、羟基、巯基、卤素、酯基、C1～C6直链或支链烷基、取代C1～C6直链或支链烷基、C3～C6的环烷烃基、取代C3～C6环烷烃基、C3～C10的芳香烃基、取代C3～C10芳香烃基、C3～C6杂环烃基或取代C3～C6杂环烃基；或者R1不存在；
R2选自C3～C6的环烷烃基、取代C3～C6环烷烃基、C3～C20的芳香烃基、取代C3～C20芳香烃基、C3～C6杂环烃基、取代C3～C6杂环烃基、C1～C6直链或支链烷基、取代C1～C6直链或支链烷基或H；
X1选自H、碳、氧、氮、硫、酯基、羰基或酰胺；或者X1不存在；
X2选自碳、氧、氮、硫、酯基、羰基或酰胺；
n1或n2独立选自0～4的任意自然数；
且当R1不存在，X1为H，n1为0时，不为C4～C6芳基羰基或取代C4～C6芳基羰基；
当为C1～C6烷氧羰基时，R1选自C3～C6的环烷烃基、取代C3～C6环烷烃基、C3～C10的芳香烃基、取代C3～C10芳香烃基、C3～C6杂环烃基或取代C3～C6杂环烃基。
在本发明的一些实施方式中，R1中，所述取代C1～C6直链或支链烷基可为C1～C6直链或支链烷氧基、C1～C6直链或支链胺基烷基、C1～C6直链或支链酰胺基烷基；优选的，所述取代C3～C6环烷烃基可为环丙基、环丁基、环戊基、环己基；优选的，所述取代C3～C10芳香烃基可为苯环或者卤代苯环；进一步优选的，所述取代C3～C10杂环烃基可为N、O、S取代的C3～C10杂环烃基；更进一步优选的，所述取代C3～C10杂环烃基中C3～C10杂环烃基可为吲哚环、噻吩环、呋喃环、苯并噻唑环、苯并呋喃环、喹啉环。
在本发明的一些优选的实施方式中，R1选自H、硝基、氰基、胺基、羟基、巯基、卤素、甲酸叔丁酯基、C1～C6直链或支链烷基、C1～C6直链或支链烷氧基、二甲胺、二乙胺、苯基、苄基、吡啶环、四氢吡咯环、吗啉环、哌啶环、噻吩环、呋喃环、哌嗪环。
在本发明的一些更优选的实施方式中，R2中，所述C3～C20杂环烃基选自噻吩环、呋喃环、哌嗪环、苯并C3～C6杂环；优选的，所述取代C3～C20芳香烃基可被一个或多个选自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C1～C4卤代烷基、卤素、氰基、羟基、氨基、巯基或酯基的取代基取代。
在本发明的一些更优选的实施方式中，当R1不存在，X1为H，n1为0时，不为C4～C6芳基羰基或取代C4～C6芳基羰基中，所述C4～C6芳基羰基苯环羰基、呋喃环羰基、噻吩环羰基。
在本发明的一些更优选的实施方式中，通式I化合物选自以下化合物：
根据本发明的第二个方面，提出了一种所述的通式I化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)当式I化合物中，R1不存在，n1为0且X1为H时，式I化合物的制备方法包括如下步骤：
使N-(2-嘧啶基)咔唑在与式II化合物/>发生光催化反应，制得通式I化合物；
(2)除(1)外，当X2为酰胺，式I化合物的制备方法包括如下步骤：
使式III化合物与胺类化合物/>发生缩合反应制得式IV化合物/>或者使式V化合物/>与叠氮化合物/>发生催化反应制得式VI化合物/>
(3)除(1)和(2)外，式I化合物的制备方法包括如下步骤：
使式VII化合物与式VIII化合物/>进行催化反应，制得通式I化合物。
在本发明的一些实施方式中，使所述式VII化合物与醛类化合物/>反应后，在强碱下溶解搅拌制得所述式III化合物/>优选的，所述溶解采用的溶剂选自甲醇、乙醇的任意一种；更优选的，所述搅拌的温度为40℃～80℃，搅拌的时间为2h～6h。
在本发明的一些优选的实施方式中，使咔唑类衍生物式IX化合物在强碱作用下与2-卤代嘧啶发生取代反应，得到式V化合物/>
在本发明的一些优选的实施方式中，式II化合物中R3中可为H、卤素、氨基、羟基、巯基。在脱质子过程中，脱质子过程中，需要保护氨基、羟基、巯基等活泼氢，可采用形成酰胺键、酯键、肽键等手段。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述(1)中，所述光催化反应采用的催化剂包括钯催化剂、光催化剂；优选的，所述钯催化剂选自Pd(OAc)2、Pd(dppf)Cl2、PdCl2；进一步优选的，所述光催化剂选自Ru(bpy)3Cl2·6H2O、玫瑰红(Rose bengal)、曙红Y(Eosin Y)。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述胺类化合物中，R4为C1～C6烷烃支链或芳香基。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述(2)中，所述缩合反应采用的缩合剂为HATU(2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)；更优选的，所述缩合反应采用的溶剂为DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述(2)中，所述催化反应采用的催化剂为[Ru(p-cymene)Cl2]2(二氯(p-甲基异丙苯)钌(II)二聚体)和金属配合物；优选的，所述金属配合物选自AgSbF6、AgBF4、AgOTf；更优选的，所述催化反应的在弱碱条件下进行，[Ru(p-cymene)Cl2]2(二氯(p-甲基异丙苯)钌(II)二聚体)，金属配合物在弱碱条件下生成白色沉淀和金属配体；进一步优选的，所述催化反应的在弱碱条件下进行，所述弱碱选自NaOAc、KOAc、CsOAc的至少一种；进一步优选的，所述催化反应采用的溶剂为二氯乙烷、二氧六环、甲苯、二甲基亚砜、四氢呋喃的至少一种。
在本发明的一些更优选的实施方式中，所述(3)中，所述催化反应采用的催化剂为[Cp*Rh(CH3CN)3](SbF6)2；优选的，所述催化反应在弱酸条件下进行，所述弱酸选自(PhO)2POOH、PhCOOH、PivOH、p-NO2PhCOOH、p-TsOH的至少一种；更优选的，所述(3)中，所述催化反应的反应溶剂二氯乙烷、甲醇、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、甲苯、氯仿的至少一种。
根据本发明的第三个方面，提出了一种药物组合物，包括所述通式I化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药。
在本发明的一些实施方式中，可以将本发明的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶、前药与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过输注或推注，通过经上皮或皮肤粘膜(例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。
根据本发明的第四个方面，提出了一种所述的通式I化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶、前药或本发明的药物组合物在制备治疗或预防肿瘤药物中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述肿瘤为选自卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、肺腺癌、结肠癌、肝癌、白血病、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、皮肤癌、上皮细胞癌、前列腺癌、鼻咽癌、恶行胶质瘤、淋巴瘤或黑色素瘤中的至少一种。
本发明的＂溶剂合物”在常规意义上是指溶质(如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂(如水)组合形成的复合物。溶剂是指本领域的技术人员所知的或容易确定的溶剂。如果是水，则溶剂合物通常被称作水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。
本发明的“结晶”是指本发明所述的化合物形成的各种固体形态，包括晶型、无定形。
本发明的“异构体”包括化合物构型异构体、构象异构体和对映异构体。构型异体是指顺式或反式构型的顺反异构体；构象异构体是指由于单键旋转产生的立体异构体。
本发明的“前药”是指在生物体的生理条件下，由于与酶、胃酸等反应而转化成本发明的化合物，即通过酶的氧化、还原、水解等转化成本发明的化合物和/或通过胃酸等的水解反应等转化成本发明的化合物。
本发明的“药学可接受的盐”是指本发明的化合物与酸形成的药学上可接受的盐，所述的酸包括但不限于磷酸、硫酸、盐酸、氢溴酸、柠檬酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、琥珀酸、富马酸、醋酸、乳酸、硝酸等等。
本发明的“药物组合物”是指包含任何一种本文所述的化合物，包括异构体、前药、溶剂合物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种药学上可接受载体的混合物。
本发明的“药学上可接受的载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。
本发明的“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。
本发明的“在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中的应用”是指可以抑制肿瘤的生长、发展和/或转移，主要向所需要的人或动物给治予治疗有效剂量的本发明的化合物以抑制、减慢或逆转受治疗者肿瘤的生长、发展或扩散。
本发明的有益效果为：本发明的通式I化合物可以有效导致肿瘤细胞线粒体功能紊乱、DNA损伤和染色体不稳定，从而诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞迁移，并抑制多种肿瘤细胞的生长，在与DNA损伤修复抑制剂联用过程中，有较好的协同作用，在制备抗肿瘤药物上有着广阔的应用空间。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
图1为本发明试验例1中不同化合物对A549细胞的细胞毒作用。
图2为本发明试验例1中不同浓度化合物B-13对大鼠正常肾细胞NRK-52E细胞的毒性作用。
图3为本发明试验例1中化合物C-1至C-18在10μM下对A549细胞的毒性作用。
图4为本发明试验例1中化合物C-1至C-18在10μM下对RKO细胞的毒性作用。
图5为本发明试验例1中化合物C-1至C-18在10μM下对SW480细胞的毒性作用。
图6为本发明试验例1中化合物C-1至C-18在10μM下对HepG2细胞的毒性作用。
图7为本发明试验例1中化合物C-1至C-18在10μM下对MM231细胞的毒性作用。
图8为本发明试验例1中不同化合物对不同肿瘤细胞的半效抑制浓度。
图9为本发明试验例2中不同浓度化合物C-11对肿瘤细胞的DNA损伤作用。
图10为本发明试验例4中不同化合物引起的癌细胞染色体不稳定结果。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例1：化合物C-1的合成
以50mg咔唑置于15mL耐压管中，通过14mg强碱氢氧化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体常温、无水、氩气保护条件下，化合物/>与420mg的/>在4mg的Pd(OAc)2、54mg的TBHP、3mg光催化剂Ru(bpy)3Cl2·6H2O在450nm蓝光波长条件下进行光反应24h，经过后处理，饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥，过柱，得到/>白色固体，产率30.2％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.53(d,J＝8.4Hz,1H),8.39(dd,J＝4.8,1.3Hz,2H),8.22(d,J＝7.9Hz,1H),8.12(d,J＝7.7Hz,1H),7.86–7.74(m,2H),7.58–7.45(m,2H),7.46–7.31(m,7H),6.98–6.85(m,3H),5.12(s,2H)；13C NMR(500MHz,Chloroform-d)δ194.14,162.22,158.17,157.63,140.19,136.39(d,J＝3.1Hz),132.21,130.88,128.82,128.37,127.67,127.46,127.28,127.07(d,J＝16.2Hz),125.27,122.58,122.22,121.71,119.90,117.37,114.49,114.40,70.25.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C30H22N3O2[M+H]+:456.1692；found:456.1707.
实施例2：化合物C-2的合成
合成方法与实施例1相同，但投入的醛为得到淡黄色液体，产率：25％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.71(d,J＝4.7Hz,2H),8.64(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(d,J＝7.7Hz,1H),8.07(d,J＝7.7Hz,1H),7.59–7.47(m,2H),7.39(t,J＝7.5Hz,2H),7.35–7.26(m,5H),7.11(t,J＝4.8Hz,1H),4.60(s,2H),4.53(s,2H)；13C NMR(400MHz,Chloroform-d)δ157.72,140.18,137.42,135.34,128.58,128.18,128.07,127.44,127.23,126.01(d,J＝25.6Hz),125.24,122.89(d,J＝4.6Hz),122.16,119.87,117.45,115.34,74.33,73.47.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C25H20N3O2[M+H]+:394.1531；found:394.1550.
实施例3：化合物C-3的合成
合成方法与实施例1相同，但投入的醛为得到白色固体，产率：22％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.52(d,J＝8.3Hz,1H),8.49(d,J＝4.7Hz,2H),8.20(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),8.10(d,J＝7.7Hz,1H),7.66–7.61(m,2H),7.58(d,J＝7.5Hz,1H),7.49(t,J＝7.8Hz,1H),7.44–7.35(m,2H),7.35–7.28(m,4H),7.12(dd,J＝10.8,7.6Hz,8H),6.98(t,J＝4.8Hz,1H),6.94–6.89(m,2H)；13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ193.89,158.33,157.68,151.65,146.72,140.20,136.44,131.41,130.21,129.70,127.63,127.19(d,J＝4.8Hz),126.92,125.97,125.26,124.65,122.52,122.16,121.73,119.89,119.75,117.41,114.36.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C35H25N4O[M+H]+:517.2001；found:517.2023.
实施例4：化合物C-4的合成
合成方法与实施例1相同，但投入的醛为得到无色粘稠液体，产率：50％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.78(d,J＝4.8Hz,2H),8.48(d,J＝8.3Hz,1H),8.19(d,J＝7.7Hz,1H),8.08(d,J＝7.6Hz,1H),7.69(d,J＝7.5Hz,1H),7.50(t,J＝7.8Hz,1H),7.40(q,J＝7.9Hz,2H),7.17(t,J＝4.8Hz,1H),2.93(ddd,J＝11.4,8.2,3.2Hz,1H),1.79–1.61(m,6H),1.31(d,J＝16.9Hz,2H),1.21–1.09(m,3H)；13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ158.13,140.68,135.95,127.32(d,J＝11.4Hz),126.96,125.17,122.92,122.72,122.09,119.91,117.58,114.53,48.91,29.26,26.13,25.96.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C23H22N3O[M+H]+:356.1743；found:356.1757.
实施例5：化合物C-5的合成
在圆底烧瓶中，在0℃下向CH2Cl2(6.0mL)中加入(180mg,0.45mmol)。然后将BBr3(2.7mL,1.0mol/L DCM)滴加到上述混合物中，在0℃下搅拌1h，在室温下搅拌2h，用TLC对反应进行检测。然后用甲醇稀释溶液。然后用EA提取3次。将有机相结合，用饱和盐水溶液洗涤。有机相在无水硫酸钠上干燥，然后真空浓缩。残渣经闪速柱层析(SiO2,4:1石油醚/乙酸乙酯洗脱)进一步纯化，得到所需无色胶状液体，产率：24％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),9.28(s,1H),8.51(d,J＝4.8Hz,2H),8.42(t,J＝4.5Hz,1H),8.32(dd,J＝14.8,8.0Hz,2H),7.52(t,J＝7.8Hz,1H),7.46(d,J＝4.6Hz,2H),7.42(t,J＝7.5Hz,1H),7.23(t,J＝4.8Hz,1H),7.15(d,J＝2.1Hz,1H),7.07(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),6.77(d,J＝8.2Hz,1H)；13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ193.06,158.18,157.22,150.25,144.78,139.30,135.77,128.56,127.23,127.06,126.81,125.74,124.17,122.69,122.30(d,J＝12.8Hz),121.42,120.35,118.33,116.41,115.01,113.34.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C23H16N3O3[M+H]+:382.1178；found:382.1186.
实施例6：化合物C-6的合成
100mg化合物溶解在2mL乙醇溶液中，滴加200μL NaOH(1.5M)，升温至60℃后，反应过夜。监测反应，待完全反应后，用EA和饱和食盐水萃取，旋干后过柱。得到无色油状液体，产率：50％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.78(d,J＝4.8Hz,1H),8.59–8.45(m,1H),8.22(dt,J＝7.7,1.0Hz,1H),8.08(dd,J＝7.7,1.2Hz,1H),7.92(dt,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.50(ddd,J＝8.4,7.2,1.3Hz,1H),7.45–7.34(m,1H),7.14(t,J＝4.8Hz,1H),5.28(s,0H)；13CNMR(126MHz,DMSO-d6)δ193.06,158.18,157.22,150.25,144.78,139.30,135.77,128.56,127.23,127.06,126.81,125.74,124.17,122.69,122.30(d,J＝12.8Hz),121.42,120.35,118.33,116.41,115.01,113.34.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C17H12N3O2[M+H]+:312.0751；found:312.0743.
实施例7：化合物C-7的合成
合成方法与实施例1相同，但投入的醛为得到白色固体，产率：37％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.60(d,J＝8.3Hz,1H),8.36(d,J＝4.8Hz,2H),8.25(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.12(d,J＝7.7Hz,1H),8.06(d,J＝8.3Hz,2H),7.90(d,J＝8.3Hz,2H),7.55–7.48(m,2H),7.43(t,J＝7.4Hz,2H),6.92(t,J＝4.8Hz,1H),3.94(s,3H)；13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ194.27,166.52,158.02,157.52,141.28,140.22,136.17,133.32,129.78,129.57,127.49,127.34,127.24,126.64,125.31,122.84,122.74,121.92,119.93,117.38,114.99,52.56.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C25H18N3O3[M+H]+:408.1338；found:408.1343.
实施例8：化合物C-8的合成
合成方法与实施例1相同，但投入的醛为得到白色固体，产率：31％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.61(d,J＝8.3Hz,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,2H),8.27(dd,J＝6.5,2.5Hz,1H),8.16(d,J＝1.7Hz,1H),8.13(d,J＝7.7Hz,1H),8.05(d,J＝7.9Hz,1H),7.79(d,J＝7.7Hz,1H),7.53(td,J＝7.7,2.6Hz,2H),7.48–7.37(m,3H),6.96(t,J＝4.8Hz,1H)；13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ192.62,157.92,157.48,140.20,138.88,136.03,135.37,133.85,133.34,129.39,127.64,127.44,127.10,125.86,125.26,123.02(d,J＝4.8Hz),122.02,119.99,118.17,117.44,115.14,112.88.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H15N4O[M+H]+:375.1226；found:375.1240.
实施例9：化合物C-9的合成
以50mg的5-氯吲哚置于15mL耐压管中，在冰水环境中，通过14mg强碱氢化钠的脱质子作用，升温至130℃，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体常温、无水、氩气保护条件下，化合物/>与/>(PhO)2POOH、催化剂[Cp*Rh(CH3CN)3](SbF6)在混合溶剂体积比CHCl3/DMF＝9:1，35℃进行反应20h，然后用DCM(20mL)稀释反应混合物，用盐水洗涤。再次用DCM萃取水相。有机层被混合，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过柱，得到白色固体，产率：20％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.61(d,J＝1.8Hz,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,2H),8.16(dd,J＝7.7,1.3Hz,1H),8.00(d,J＝8.3Hz,1H),7.51(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.46–7.39(m,2H),7.40–7.29(m,2H),7.26(s,1H),6.99(t,J＝4.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.1Hz,1H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ193.10,157.48,151.16,147.64,140.31,136.25,132.74,132.07,127.39,126.92,126.39,126.09,123.56,122.83,121.97,121.77,120.40,117.44,114.68,109.19,107.61,101.68.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H14N3O3Cl[M+H]+:428.0796；found:428.0795.
实施例10：化合物C-10的合成
以50mg的4-甲基吲哚置于15mL耐压管中，通过14mg强碱氢化钠的脱质子作用，升温至135℃，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体后续合成方法与实施例9相同，得到白色固体，产率：35％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.47(d,J＝4.8Hz,2H),8.35(dd,J＝7.9,1.4Hz,2H),7.52(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.39(ddd,J＝8.5,4.6,3.0Hz,2H),7.28(d,J＝1.7Hz,1H),7.20–7.15(m,1H),6.98(t,J＝4.8Hz,1H),6.77(d,J＝8.2Hz,1H),6.03(s,2H),2.93(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ192.35,157.98,157.54,151.01,147.56,140.07,136.27,132.84,132.21,127.38,126.60(d,J＝6.3Hz),126.28,125.96,124.72,124.18,123.16,121.28,117.34,111.30,109.12,107.56,101.62,21.08.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C25H17N3O3[M+H]+:408.1343；found:408.1338。
实施例11：化合物C-11的合成
以50mg的6-氯吲哚置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，升温至130℃，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体后续合成方法与实施例9相同，得到白色固体，产率：33％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.61(d,J＝1.8Hz,1H),8.44(d,J＝4.6Hz,2H),8.16(dd,J＝7.7,1.3Hz,1H),8.00(d,J＝8.3Hz,1H),7.51(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),7.46–7.31(m,4H),6.99(t,J＝4.7Hz,1H),6.80(d,J＝8.1Hz,1H),6.04(s,2H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ193.35,157.73,151.41,147.90,140.57,136.51,132.99,132.33,127.64,127.18,126.64,126.34,123.81,123.08,122.22,122.03,120.66,117.70,114.93,109.44,107.86,101.94.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H14N3O3Cl[M+H]+:428.0796；found:428.0776
实施例12：化合物C-12的合成
以50mg的5-溴吲哚置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体后续合成方法与实施例9相同，得到白色固体，产率：30％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.46(d,J＝8.9Hz,1H),8.42(d,J＝4.7Hz,2H),8.21(d,J＝2.0Hz,1H),8.15(dd,J＝7.7,1.3Hz,1H),7.60–7.56(m,1H),7.52(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.48–7.37(m,2H),7.35(d,J＝1.6Hz,1H),6.98(t,J＝4.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.1Hz,1H),6.05(s,2H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ193.21,157.39,151.17,147.64,138.61,136.30,132.06,129.72,127.81,126.90(d,J＝20.1Hz),126.42,125.65,122.43,122.14,121.70,117.35,116.06,115.40,109.21,107.61,101.69.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H14N3O3Br[M+H]+:472.0291；found:472.0276
实施例13：化合物C-13的合成
以50mg的5-硝基吲哚置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体后续合成方法与实施例9相同，得到白色固体，产率：10％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(d,J＝4.8Hz,2H),8.31–8.17(m,2H),7.54–7.36(m,3H),7.29(dd,J＝8.1,1.7Hz,1H),7.20–7.09(m,2H),6.97(d,J＝8.1Hz,1H),6.91(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),6.14(s,2H).13C NMR(101MHz,Chloroform-d)δ193.74,158.38,152.09,148.39,143.63(d,J＝3.6Hz),137.99,132.33,129.15,127.70,127.21,126.43,125.52,123.168,122.98,122.87,118.87,116.69,114.73,109.85,108.28,102.37.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H14N4O5[M+H]+:461.0856；found:461.0870
实施例14：化合物C-14的合成
以50mg的化合物在甲醇做溶剂、钯碳做催化、H2作为还原剂的体系中，通过常温条件下搅拌48h，得到产物C-14白色固体，产率：50％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.41(d,J＝8.8Hz,1H),8.37(dd,J＝4.8,0.9Hz,2H),8.08(dd,J＝7.7,1.2Hz,1H),7.43(dd,J＝19.9,2.0Hz,2H),7.36–7.31(m,2H),6.93–6.85(m,2H),6.77(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),6.03(d,J＝0.9Hz,2H).13C NMR(101MHz,Chloroform-d)δ193.73,158.31,152.04,148.35,143.64(d,J＝3.6Hz),137.96,132.33,129.15,127.70,127.21,126.34,125.52,123.16,122.98,122.87,118.87,116.69,114.73,109.85,108.28,102.37.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H16N4O3[M+H]+:409.1295；found:409.1298
实施例15：化合物C-15的合成
以50mg的5-氯吲哚置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体常温、无水、氩气保护条件下，化合物/>与/>(PhO)2POOH、催化剂[Cp*Rh(CH3CN)3](SbF6)在混合溶剂体积比CHCl3/DMF＝9:1，35℃进行反应20h，经过后处理，饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥，过柱，得到白色固体，产率：25％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.50(d,J＝8.9Hz,1H),8.39(d,J＝4.8Hz,2H),8.17(dd,J＝7.8,1.3Hz,1H),8.07(d,J＝2.2Hz,1H),7.55(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.51–7.34(m,4H),6.95(t,J＝4.8Hz,1H),6.84(d,J＝8.2Hz,1H),3.94(s,3H),3.88(s,3H).HRMS(ESI,m/z)calcd.for C25H18N3O3Cl[M+H]+:444.1109；found:444.1087
实施例16：化合物C-16的合成
以50mg的置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体/>常温、无水、氩气保护条件下，化合物/>与/>(PhO)2POOH、催化剂[Cp*Rh(CH3CN)3](SbF6)在混合溶剂体积比CHCl3/DMF＝9:1，35℃进行反应20h，经过后处理，饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥，过柱，得到白色固体，产率：20％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ10.02(s,1H),8.39(d,J＝4.8Hz,2H),8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.31–8.22(m,3H),7.98(d,J＝8.7Hz,2H),7.53–7.41(m,3H),6.98(t,J＝4.8Hz,1H),1.60(s,9H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ157.96,150.25,142.84,141.33,136.39,133.00,131.06,128.20,127.14,126.20,125.80,124.96,123.89,122.25,118.16,111.42,28.83.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C28H23N5O5[M+H]+:510.1772；found:510.1755
实施例17：化合物C-17的合成
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以50mg的置于15mL耐压管中，通过14mg的强碱氢化钠的脱质子作用，与41mg的2-氯嘧啶发生亲核取代反应，得到白色固体/>常温、无水、氩气保护条件下，化合物/>与/>(PhO)2POOH、催化剂[Cp*Rh(CH3CN)3](SbF6)在混合溶剂体积比CHCl3/DMF＝9:1，35℃进行反应20h，经过后处理，饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥，过柱，得到白色固体，产率：30％。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.97(d,J＝1.9Hz,1H),8.57(dd,J＝4.8,1.4Hz,2H),8.48(dd,J＝9.2,1.4Hz,1H),8.36(dt,J＝9.2,1.9Hz,1H),8.29(d,J＝7.8Hz,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.49(td,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.35(d,J＝5.0Hz,4H),7.10(dt,J＝5.7,2.8Hz,1H),5.02(s,2H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ166.55,158.18,157.87,143.70,143.18,137.72,135.27,129.43,128.44,128.35,128.21,126.01,124.63,123.94,120.07,118.39,116.16,113.75,66.61.HRMS(ESI,m/z)calcd.for C24H16N4O4[M+H]+:447.1070；found:447.1070
下列试验例中，采用的化合物除了上述实施例制得的化合物外，还包括以下化合物：
相对于本发明化合物，化合物A-1、A-2与本发明化合物的主要区别在于R2为脂肪链酯基，化合物B-13与化合物B-14与本发明化合物的主要区别在于R2为羰基芳基。
试验例1化合物生物安全性和对不同癌细胞的毒性作用
MTT实验方法：
1.胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，细胞计数调整其浓度至5-10×104个/mL。
2.将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，每孔加入100uL，这样待测细胞的密度为5000个孔(边缘孔用无菌PBS填充)。
3.将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养，至细胞单层铺满孔底(96孔平底板)，加入浓度梯度的药物。
4.在5％CO2，37℃下孵育48小时，倒置显微镜下观察药物的作用效果。
5.每孔加入10uLMTT溶液(5mg/mL，即0.5％MTT)，继续培养4h。
6.终止培养，用100uLDMSO溶解结晶，测定其吸光度值(OD值)
通过MTT实验对化合物对不同癌细胞的活力影响进行测试，检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。
不同化合物对A549细胞的细胞毒作用结果如图1所示，从图1可看出，通式I化合物中，当R2为脂肪链酯基时，所形成的化合物A-1、化合物A-2对A549细胞几乎没有细胞毒作用，细胞活力均大于50％，当R2为芳基羰基或者取代芳基羰基时，所形成的化合物B-13和B-14系列对A549细胞的毒性作用较强，细胞活力远小于50％。
筛选前述通式I化合物中对A549细胞的细胞毒作用较强的化合物B-13进行生物安全性测试，采用前述MTT实验测试不同浓度化合物B-13对大鼠正常肾细胞NRK-52E细胞的毒性作用，结果如图2所示。从图2可看出，当化合物B-13加入浓度为50μM时，对大鼠的正常肾细胞的抑制率也小于50％。
进一步，采用前述MTT实验测试实施例2至实施例18制得的化合物C-1至C-18对不同癌细胞的活力影响进行测试，化合物C-1至C-18在10μM下对A549细胞、RKO细胞、SW480细胞、HepG2细胞、MM231细胞的毒性作用结果分别对应如图3至图7所示。
从图3至图7可看出，本发明的化合物中，取代基R2为烷烃和环烷烃的毒性弱于苯环取代基，苯环与咔唑环之间连接的原子数在1～4之间，毒性相当，而当原子数超过4时，毒性减弱。当R2取代基的位阻过大时，影响化合物毒性。
更进一步，将10μM条件下，对细胞杀伤力较大的化合物C-17、化合物C-7、化合物C-1、化合物C-8、化合物C-3、化合物C-4用浓度梯度设置给药的方式，以细胞抑制率的结果为Y轴，进行拟合计算，得到化合物对A549细胞模型的IC50。对数生长期的细胞加入不同浓度的化合物，作用48h后，加入MTT，测定其吸光度。分别计算出抑制细胞生长50％时的化合物浓度，以IC50值表示。结果如图8和表1所示。
表1
从图8和表1可看出，化合物C-17和C-1对A549细胞的毒性最强。化合物C-3和C-4的对A549细胞的毒性较小。
试验例2化合物对癌细胞DNA损伤的作用
Western blot实验方法：
细胞培养：细胞记数，接种，培养在六孔板中，长至70％～80％后，加入化合物进行培养48h，取出，裂解，细胞被收集后，加入50μL细胞裂解液，提取上清总蛋白液。使用BCA法(蛋白质定量)检测总蛋白浓度，后变性蛋白样品，取相同质量的蛋白上样，SDS-PAGE胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离蛋白条带。根据目标蛋白计算分子量，将相应位置的电泳胶条带切下，湿转法将蛋白条带转到PVDF膜上。
配置TBST缓冲液：25mM NaCl，100mM Tris,0.2％吐温-20,pH 7.4，用TBST缓冲液溶解的5％脱脂奶粉溶液(w/v)封闭PVDF膜。分别相应用一抗和二抗孵育PVDF膜，TBST缓冲液漂洗适当次数后，使用SuperECL Plus超敏发光试剂盒显色成像。
测试对照组(加入与化合物相同体积的DMSO)与不同浓度化合物C-11对肿瘤细胞的DNA损伤作用，结果如图9所示，从图9可看出，y-H2AX是DNA损伤的标志物；P-ATR和P-ATM是激活DNA损伤修复的重要蛋白、P-chk1是DNA损伤修复的检查点。相对于对照组，化合物C-11处理的肿瘤细胞中DNA损伤相关蛋白表达量出现变化，DNA损伤修复通路相关蛋白的表达出现变化。可知，化合物C-11能够诱导肿瘤细胞DNA损伤和同源重组修复抑制，引起肿瘤细胞的死亡。
试验例3化合物对癌细胞线粒体的影响
细胞荧光成像实验方法：
1.胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，细胞计数调整其浓度至(5～10)×104个/mL；
2.将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，每孔加入2mL；
3.将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养，至细胞单层铺满孔底(6孔平底板)，加入一定浓度的药物；
4.在5％CO2，37℃下孵育48h，倒置显微镜下观察药物的作用效果；
5.加入线粒体染料JC-1，37度孵育半小时；
6.拍照：用激光共聚焦显微镜拍摄视野。
试验例4化合物对癌细胞染色体的影响
细胞荧光激光共聚焦显微镜实验方法(专用的dish或玻璃板底部的96孔板)
1.胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，细胞计数调整其浓度至2×104个/mL；
2.将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，每孔加入100uL，这样待测细胞的密度为2000个孔(边缘孔用无菌PBS填充)。
3.将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养，至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入一定浓度的药物。
4.在5％CO2，37℃下孵育48h，倒置显微镜下观察药物的作用效果；
5.固定细胞：倒掉培养基，100μL 4％多聚甲醛/孔，室温放置30min。
6.透化细胞：倒掉PBS，加PBST，50μL/孔；150μL 0.5％Triton X-100(用剩的要回收)加30mL PBS到加样槽，50μL/孔；37℃，20min；用PBS洗3次，一次100μL/孔
7.封闭：在37℃，5％BSA中孵育，30min；5％BSA＝20mL PBS+1g BSA
8.抗体孵育(WB的10～20倍浓度)
(1)孵一抗
20～30μL/孔，4℃，过夜
(2)从4℃冰箱取出，一抗回收，用PBS洗
100μL/孔，洗4次
(3)孵二抗，37℃，1h
二抗的初始浓度为1mg/mL，里面加有叠氮化钠来防菌，使用说明书上的推荐浓度是0.5～2μg/mL，本试验例使用的浓度是2μg/mL，即500μL 1％BSA+1μL二抗
(4)用PBS洗，100μL/孔，洗4次；
9.染色：50μL DAPI/孔0.5μg/mL；37℃，避光存放，15min；
10.拍照：用激光共聚焦显微镜拍摄视野。
对照组(加入与化合物相同体积的DMSO)和浓度均为1μM的化合物B-13、化合物B-14、化合物C-1和化合物C-15引起的癌细胞染色体不稳定结果如图10所示。从图10可看出，蓝色是细胞核的信号，绿色是y-微管蛋白的信号，相对于对照组，化合物B-13、化合物B-14、化合物C-1和化合物C-15均能通过诱导肿瘤细胞染色体不稳定，从而导致癌细胞在增殖分裂的过程不能正常进行，进而抑制癌细胞的正常生长和增殖。
试验例5化合物对癌细胞迁移的影响
RT-CA实验：
CIM-Plate装配
在下室的孔中用多道或单道移液器加入165uL培养基
将夹具连同下室沿逆时针旋转90度，将上室中传感器一面置于下室上，注意使上室和下室的孔对齐。听到卡扣卡入的声音。
在上室中加入30uL无血清培养基，轻拍板四周，使培养基分布均匀。
平衡检测板：
将检测板置于37℃，CO2浓度为5％的CO2培养箱平衡1h。
基线测量：
将平衡1h的检测板置于RTCA DP监测台上，开始step 1进行基线检测。
细胞悬液准备细胞接种：向CIM-Plate上室加入100μL不同浓度细胞悬液，使最终孔中细胞数量为40000个/每孔。
向每孔加入浓度梯度10.75μM、5.38μM、2.69μM、1.35μM、0.68μM、0.34μM、0.1％DMSO、0μM的实施例的化合物，上室和下室平行加入化合物。具体操作请参考RT-CA仪器使用的参考程序。
室温静置检测板：室温静置30min待细胞沉降。
开始实验：待细胞沉降后将CIM-Plate放回RTCA DP检测台，在系统自动扫描“ScanPlate”后，进行细胞迁移的实时动态检测(每15min检测一次，持续18h)
停止实验：细胞迁移达到18h后停止实验；分析细胞迁移CI曲线。
综上，本发明的化合物在引起癌细胞DNA损伤，促进肿瘤细胞染色体不稳定，抑制肿瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠直肠癌细胞株的三方面能力上对比化合物A-1、化合物A-2都得到了大大的改进。其中化合物B-13和化合物B-14可能是由于结构上的改造，各方面活性都得到提升，而化合物C-1至化合物C-17保留了化合物B-13和化合物B-14的芳基结构并且结构上的优化使其保留并增加了对癌细胞的抑制增殖和迁移活性。
上面对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (8)

1.通式I化合物或其药学上可接受的盐：
；
通式I化合物选自以下化合物：
、/>、/>、
、/>、/>、
、/>、/>、
、/>或/>。
2.一种如权利要求1所述的通式I化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）当式I化合物为C-1、C-7或C-8时，式I化合物的制备方法包括如下步骤：
使N-(2-嘧啶基)咔唑在与式II化合物/>发生光催化反应，制得通式I化合物；
式II化合物中R3中为H；
（2）当式I化合物为C-9、C11~C15或C17时，式I化合物的制备方法包括如下步骤：
使式VII化合物与式VIII化合物/>进行催化反应，制得通式I化合物；
（3）当式I化合物为C5时，式I化合物的制备方法包括如下步骤：在圆底烧瓶中，在0℃下向6.0 mL CH2Cl2中加入180 mg, 0.45 mmol ；然后将2.7 mL, 1.0 mol/L的BBr3的DCM溶液滴加到上述混合物中，在0℃下搅拌1 h，在室温下搅拌2 h，用TLC对反应进行检测；然后用甲醇稀释溶液；然后用EA提取3次；将有机相结合，用饱和盐水溶液洗涤；有机相在无水硫酸钠上干燥，然后真空浓缩；残渣经闪速SiO2柱层析4:1石油醚/乙酸乙酯洗脱进一步纯化，得到所需无色胶状液体；
（4）当式I化合物为C-6时，式I化合物的制备方法包括如下步骤：100 mg化合物溶解在2 mL乙醇溶液中，滴加200 μL 1.5 M 的NaOH，升温至60℃后，反应过夜；监测反应，待完全反应后，用EA和饱和食盐水萃取，旋干后过柱；得到无色油状液体。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述（1）中，所述光催化反应采用的催化剂包括钯催化剂、光催化剂；所述钯催化剂选自Pd(OAc)2、Pd（dppf）Cl2、PdCl2；所述光催化剂选自Ru(bpy)3Cl2·6H2O、玫瑰红、曙红Y。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述（2）中，所述催化反应采用的催化剂为[Cp*Rh(CH3CN）3](SbF6)2。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述（2）中，所述催化反应在弱酸条件下进行。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述（2）中，所述催化反应采用的溶剂选自二氯乙烷、甲醇、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、甲苯、氯仿的至少一种。
7.一种药物组合物，包括如权利要求1所述的通式I化合物或其药学可接受的盐。
8.一种如权利要求1所述的通式I化合物或其药学可接受的盐或如权利要求7所述的药物组合物在制备治疗或预防肿瘤药物中的应用；
通式I化合物为化合物C-1、C-5、C-7、C-8、C-9、C-11、C-12、C-15、C-17时，所述肿瘤为肺癌；
通式I化合物为化合物C-1、C-5、C-7、C-8、C-9、C-11、C-12、C-13、C-15、C-17时，所述肿瘤为结肠癌；
通式I化合物为化合物C-1、C-9、C-11、C-12、C-13、C-15时，所述肿瘤为直肠腺癌；
通式I化合物为化合物C-1、C-5、C-8、C-9、C-11、C-12、C-13、C-15、C-17时，所述肿瘤为肝癌；
通式I化合物为化合物C-1、C-5、C-6、C-8、C-9、C-13、C-14、C-15、C-17时，所述肿瘤为乳腺癌。
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