CN114028329A - 含有联合抑菌剂的滴眼液制剂和包含其的产品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及滴眼液制剂和包含该滴眼液制剂的滴眼液制剂产品。所述滴眼液制剂包含珍珠液，联合抑菌剂和水，以及任选的冰片，渗透压调节剂，粘弹剂，pH调节剂，有机溶剂等。所述联合抑菌剂包含两种或更多种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂的组合，优选对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，或对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯的组合，或对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，最优选对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合。所述滴眼液制剂产品包含包装所述滴眼液制剂的容器，所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由添加了诸如聚碳化二亚胺的抗水解剂的诸如聚对苯二甲酸乙二醇酯的热塑性材料制备。

Description

含有联合抑菌剂的滴眼液制剂和包含其的产品

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及眼用制剂和包含其的产品。特别地，本发明涉及含有抑菌剂的眼用制剂，尤其是含有联合抑菌剂和珍珠液的滴眼液制剂，以及包含其的产品。

背景技术

作为眼用制剂的珍珠明目滴眼液是一种缓解视疲劳的非处方中药，主药成分包含珍珠液和冰片。珍珠液是由珍珠粉经提取或水解而得的。珍珠液中富含多种氨基酸和小分子多肽及微量元素。由于珍珠液易染菌，贮存不当易发生降解，并且微生物的污染和繁殖会使得存在于珍珠液中的氨基酸和多肽发生降解，并对使用者造成危害，因此需要在含有珍珠液的滴眼液制剂中包含适当的抑菌剂，以避免在滴眼液的正常贮存或使用过程中发生微生物的污染和繁殖。

眼用制剂中常用抑菌剂包括季铵盐类抑菌剂(例如苯扎溴铵、苯扎氯铵等)、有机汞类抑菌剂(例如硫柳汞、醋酸苯汞等)、醇类抑菌剂(例如三氯叔丁醇、苯甲醇等)、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂(例如羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯等)、有机酸或其盐类抑菌剂(例如山梨酸、醋酸氯已定等)或其它类似物。

已经发现，季铵盐类抑菌剂与所述滴眼液制剂中的成分相容性不佳，易产生乳白色细小沉淀；有机汞类抑菌剂毒性较大；醇类抑菌剂抑菌效力较差；诸如醋酸氯已定的有机酸盐类抑菌剂属于低效抑菌剂，单独使用时需要较高的浓度才能达到理想的效果，而眼用制剂应尽量减少抑菌剂的用量，避免抑菌剂对眼部造成损伤。

市售的珍珠明目滴眼液所用的抑菌剂通常是单独的对羟基苯甲酸乙酯(简称羟苯乙酯)。沈佳特等人在《珍珠明目滴眼液抑菌效力评价》(中国药师，2015年，第6期，第894-896页)一文中报道了对市售的7家企业各1批的珍珠明目滴眼液产品进行抑菌效力检查及抑菌剂含量测定的结果。这7家企业的珍珠明目滴眼液使用的抑菌剂均为单独的对羟基苯甲酸乙酯，然而在各个产品中使用的抑菌剂的含量差异较大，含量范围为从0.44mg/ml到0.55mg/ml之间不等。沈佳特等人除发现其中1家企业生产的产品的抑菌效力不符合《中国药典》(2010年版)I类产品的判断标准外，其它6家企业的产品均符合相关规定。然而，尽管在这些产品中，所述羟苯乙酯的含量均在质量标准规定范围内，但它们各自发挥的抑菌效力存在较大差异，这提示了所述抑菌效力可能不仅与所使用的抑菌剂种类及含量有关，同时还可能与制剂中存在的其它成分或包装制剂的材料等多种因素有关。

在pH值为约3.0至约6.0的范围内，羟苯乙酯的水溶液在室温下可保持稳定达4年之久，分解率不超过10％，然而在pH值达到8.0或以上时，羟苯乙酯迅速水解，室温下放置60天水解率超过约10％。

通常在珍珠明目滴眼液制剂中，溶液的pH值在5.0至7.0范围内。然而，受到制剂中其它成分的影响，羟苯乙酯在此条件下也表现出不稳定的性质，易发生分解。例如，在珍珠明目滴眼液的稳定性考察期间，羟苯乙酯含量会降低，影响对产品抑菌的效力，使得多肽缺少抑菌剂的保护，更易发生降解，有效成分降低，严重影响产品质量。

发明内容

本发明要解决的技术问题

本发明的目的就是要针对现有技术中珍珠明目滴眼液中抑菌剂抑菌效力不足，稳定性考察期间易发生降解的问题，提供一种含有珍珠液和特定抑菌剂的滴眼液制剂。所述特定抑菌剂能够满足对所述含珍珠液的滴眼液制剂抑菌的效力要求，从而避免微生物污染带来的多肽降解。另外，本发明还要提供一种滴眼液制剂产品，该产品能够进一步降低所述特定抑菌剂的降解，保证抑菌剂含量在稳定性考察期间保持稳定，从而更好地减少滴眼液制剂中多肽的降解。

解决技术问题的技术方案

为了解决所述技术问题，本发明提供以下技术方案：

方案1：一种滴眼液制剂，其包含：

珍珠液；

联合抑菌剂，其包含两种或更多种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂的组合，优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，或者优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯的组合，或者优选包含对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，最优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合；和

水。

方案2：根据方案1的滴眼液制剂，其中所述联合抑菌剂的总量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.0263重量％至约0.0892重量％，优选约0.0367重量％至约0.787重量％，更优选约0.0472重量％至约0.0682重量％，进一步优选约0.0500重量％至约0.0577重量％，最优选约0.0525重量％。

方案3：根据方案1或2的滴眼液制剂，其中所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，所述对羟基苯甲酸甲酯与所述对羟基苯甲酸丙酯的重量比例优选为约8:1至约0.5:1，优选约6:1至约1:1，更优选约4:1至约1.5:1，进一步优选约3:1至约2:1，最优选约2.5:1。

方案4：根据方案1至3中任一项的滴眼液制剂，其中所述珍珠液的多肽含量为不低于约1mg/mL，并且所述珍珠液的量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约1.8重量％至约2.2重量％，优选约2.0重量％。

方案5：根据方案1至4中任一项的滴眼液制剂，其中所述滴眼液制剂还包含冰片，所述冰片的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.08重量％至约0.12重量％，优选约0.1重量％。

方案6：根据方案1至5中任一项的滴眼液制剂，其中所述滴眼液制剂还包含以下成分中的一种或多种：

渗透压调节剂，其优选包含氯化钠，所述渗透压调节剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.5重量％至约0.7重量％，更优选约0.6重量％；

粘弹剂，其优选包含玻璃酸钠，所述粘弹剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.12重量％至约0.18重量％，优选约0.15重量％；

pH调节剂，所述pH调节剂的量优选使得所述滴眼液制剂的最终pH值为约4.0至约8.0，优选约5.0至约7.5，更优选约6.0至约7.0，最优选约6.5，所述pH调节剂优选包含盐酸或氢氧化钠；和

有机溶剂，其优选包含乙醇，所述有机溶剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.45重量％至约0.55重量％，优选约0.5重量％。

方案7：一种滴眼液制剂产品，其包含根据前述方案1至6中任一项的滴眼液制剂和用于包装所述滴眼液制剂的容器。

方案8：根据方案7的滴眼液制剂产品，其中所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由热塑性材料制备，所述热塑性材料优选包含聚对苯二甲酸乙二醇酯。

方案9：根据方案7或8的滴眼液制剂产品，其中所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由包含抗水解剂的热塑性材料制备，优选由包含抗水解剂的聚对苯二甲酸乙二醇酯热塑性材料制备，所述抗水解剂优选包含聚碳化二亚胺，所述抗水解剂的含量优选为基于所述热塑性材料计的约0.04重量％至约0.06重量％，更优选约0.05重量％。

本发明实现的技术效果

通过以上本发明的各个技术方案实现了本发明的目的，即本发明解决了现有技术珍珠明目滴眼液中传统抑菌剂的抑菌效力不足，在滴眼液稳定性考察期间和抑菌剂和/或多肽易发生降解的问题。

本发明的含有所述联合抑菌剂的滴眼液制剂能够达到《中国药典》(2020年版)规定的抑菌效力要求，并保持多肽含量的稳定性。

具体地，本发明与现有技术的技术方案相比，具有以下优势：

(1)本发明的滴眼液制剂具有至少类似，并且甚至提高的抑菌效力。通过在本发明的联合抑菌剂中按一定比例包含对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂，特别是对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，不仅能够满足滴眼液制剂的抑菌效力要求，而且它们与所述滴眼液制剂的其它成分相容性较好，使得滴眼液制剂在使用期间具有提高的安全性，能够有效阻止微生物生长繁殖，阻止微生物对多肽的降解作用；

(2)特别地，通过合理配置联合抑菌剂中对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的成分比例/浓度占比，使得滴眼液制剂在pH值为5.0至7.0的常规滴眼液的pH范围内，仍然保持很好的稳定性，相对于传统的对羟基苯甲酸乙酯抑菌剂，本发明的对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯组合抑菌剂具有更好的抑制降解的效果；

(3)使用对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂，包装于由包含聚碳化二亚胺的聚对苯二甲酸乙二醇酯热塑性材料制备的容器中，可尤其保持对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂含量的稳定，有效降低所述联合抑菌剂发生降解的倾向，保证抑菌剂在稳定性考察期间的含量符合要求。

发明详述

下文中，将详细描述本发明的各个方面。

在第一方面，本发明涉及一种滴眼液制剂，其包含珍珠液、联合抑菌剂和水。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中，所述珍珠液可以是本领域技术人员公知的珍珠液。在此，所述珍珠液例如可以通过商购获得，或者所述珍珠液可根据例如在“珍珠明目滴眼液质量标准”(WS3-B-3281-98-2017)中公开的方法容易地制备。

在一个优选的实施方案中，所使用的珍珠液中的多肽含量为不低于约1mg/mL。

在一个优选的实施方案中，所述珍珠液的用量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约1.8重量％至约2.2重量％，优选约2.0重量％。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中，所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂，即该联合抑菌剂包含两种或更多种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂的组合。在一些优选的实施方案中，所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合；或者，所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯的组合；或者，所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合。在一个特别优选的实施方案中，所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合。

在此需要说明的是，在本发明的滴眼液制剂中，所述联合抑菌剂任选还可以包含诸如三氯叔丁醇和/或苯氧乙醇等的多种其它类型抑菌剂。在一个最特别优选的实施方案中，所述联合抑菌剂仅由对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯组成。

本发明的发明人经研究发现，并非所有类型的抑菌剂均适合用于滴眼液制剂中。在本发明所述的滴眼液制剂中按特定比例包含所述对羟基苯甲酸酯类抑菌剂，能够有效抑制微生物细胞的呼吸酶系与传递酶系的活性，并破坏微生物的细胞膜机构，从而对真菌和细菌有广泛的抗菌作用，达到《中国药典》(2020年版)规定的抑菌效力要求。

在一个优选的实施方案中，所述联合抑菌剂的总量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.0263重量％至约0.0892重量％，优选约0.0367重量％至约0.787重量％，更优选约0.0472重量％至约0.0682重量％，进一步优选约0.0500重量％至约0.0577重量％，最优选约0.0525重量％。

在一个优选的实施方案中，在所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合的情况下，所述对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的重量比例为约8:1至约0.5:1，优选约6:1至约1:1，更优选约4:1至约1.5:1，进一步优选约3:1至约2:1，最优选约2.5:1。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中任选还可以包含冰片，所述冰片可以是本领域中常用的冰片，其可以是来源于天然的或合成的冰片。

在一个优选的实施方案中，所述冰片的量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.08重量％至约0.12重量％，优选约0.1重量％。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中，所述水优选可采用注射用水，蒸馏水或纯净水等，特别优选使用注射用水。所述水的量为使得所述滴眼液制剂中的其它成分的含量在所要求的范围内。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中，所述滴眼液制剂还任选包含以下成分中的一种或多种：

渗透压调节剂，其优选包含氯化钠，所述渗透压调节剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.5重量％至约0.7重量％，更优选约0.6重量％；

粘弹剂，其优选包含玻璃酸钠，所述粘弹剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.12重量％至约0.18重量％，优选约0.15重量％；

pH调节剂，所述pH调节剂的量优选使得所述滴眼液制剂基本上是中性的，例如其最终的pH值可以是约4.0至约8.0，优选约5.0至约7.5，更优选约6.0至约7.0，最优选约6.5，所述pH调节剂优选可使用盐酸或氢氧化钠；和

有机溶剂，其优选包含乙醇，所述有机溶剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.45重量％至约0.55重量％，优选约0.5重量％。

在上述本发明第一方面的滴眼液制剂中的珍珠液、联合抑菌剂、水和任选存在的冰片、渗透压调节剂、粘弹剂、pH调节剂和有机溶剂的重量含量优选总计为100重量％。

在一个优选的实施方案中，可以通过将本发明的滴眼液制剂所包含的各个成分按任何顺序混合在一起来制备本发明的滴眼液制剂。例如可以初始获得已经由珍珠液和部分水配制的溶液配制剂，再向其中添加所限定的抑菌剂和任选的冰片、渗透压调节剂、粘弹剂、pH调节剂和有机溶剂的固体或水溶液，最后再添加足量水而得到本发明的滴眼液制剂。

在第二方面，本发明还涉及一种滴眼液制剂产品，该产品包含如上文在本发明第一方面中阐述的滴眼液制剂和用于包装所述滴眼液制剂的容器。

在本发明第二方面的滴眼液制剂产品中，所述容器没有特别限制，其可以是现有技术中常用于包装滴眼液制剂的容器。

在一个优选的实施方案中，所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部是由热塑性材料制备的，特别是由聚对苯二甲酸乙二醇酯热塑性材料制备的。

在一个进一步优选的实施方案中，所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由包含抗水解剂的热塑性材料制备，优选由包含抗水解剂的聚对苯二甲酸乙二醇酯热塑性材料制备。

在此，所述抗水解剂优选例如包含聚碳化二亚胺。

在此，所述抗水解剂的含量优选为基于所述热塑性材料的重量计的约0.04重量％至约0.06重量％，更优选约0.05重量％。

在本发明第二方面的滴眼液制剂产品中使用的容器可进一步使本发明的联合抑菌剂含量在稳定性考察期间或使用期间保持稳定。不希望束缚于理论，所述容器的材料优选为添加了抗水解剂聚碳化二亚胺的聚对苯二甲酸乙二醇酯，此处所述抗水解剂不仅能够有效阻止所述容器材料中酯键的水解，同时据推测它还能有效阻止滴眼液制剂中酯键的水解，即阻止对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂的水解，从而保证联合抑菌剂含量在稳定性考察期间或有效期内保持稳定，减少多肽的降解，以保证滴眼液制剂的稳定性。

具体实施方式

下文将通过示例性实施例来具体说明本发明及其优点。对示例性实施例的描述仅仅是说明性的，其决不作为对本公开及其应用或使用的任何限制。本公开可以以许多不同的形式实现，不限于这里所述的实施例。提供这些实施例是为了使本公开透彻且完整，并且向本领域技术人员充分表达本公开的范围。应注意到：除非另有说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对布置、材料的组分、数字表达式和数值等应被解释为仅仅是示例性的，而不是作为限制。

使用的材料和仪器：

珍珠液：多肽含量约3.28mg/mL，实验室自制；

冰片：商购自ALADDIN INDUSTRIAL CORPORATION；

对羟基苯甲酸甲酯(羟苯甲酯)：分析纯，商购自ALADDIN INDUSTRIALCORPORATION；

对羟基苯甲酸乙酯(羟苯乙酯)：分析纯，商购自ALADDIN INDUSTRIALCORPORATION；

对羟基苯甲酸丙酯(羟苯丙酯)：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司；

三氯叔丁醇：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司；

苯氧乙醇：分析纯，商购自ALADDIN INDUSTRIAL CORPORATION；

氯化钠：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司；

玻璃酸钠：商购自ALADDIN INDUSTRIAL CORPORATION；

乙醇：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司；

盐酸：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司；

氢氧化钠：分析纯，商购自南京化学试剂股份有限公司。

在如下本发明的实施例或对比例中的“抑菌效力”考察是根据《中国药典》(2020年版)中通则1121“抑菌效力检查法”进行的。

根据《中国药典》(2020版)，在眼用制剂中，抑菌效力为“A”是指应达到的抑菌效力标准，在特殊情况下，如抑菌剂可能增加不良反应的风险，则至少应达到“B”的抑菌效力标准。

在如下本发明的实施例或对比例中的“氨基酸含量”是根据郑丽慧等人的《RP-HPLC法测定珍珠明目滴眼液中16种氨基酸的含量》(药物分析杂志，2015，35(11)，第2050-2056页)中公开的方法加以改进进行的。在本发明中，滴眼液制剂中多肽含量测定有干扰，将多肽水解后得到氨基酸，水解后的氨基酸可反映多肽含量，故在本发明中，在滴眼液制剂中的“多肽含量”可以相应的“氨基酸含量”计，二者在本发明情况下可互换使用。

在本发明中，所述“氨基酸含量”测定方法中包括的色谱条件如下：

色谱柱：Phenomenex Gemini C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；

柱温：43℃；

流动相A：0.1mol·L^-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH值为6.5)－乙腈(93∶7)，

流动相B：乙腈－水(4∶1)，

流动相流速：1mL·min^-1，

洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序见表1，

检测波长：254nm，

进样量：5μL。

表1：梯度洗脱程序

本发明的氨基酸含量测定方法中使用的测试样品是通过以下过程制备的：

取待测样品10mL于耐热压玻璃瓶中，加入90mL乙腈，混匀，静置30分钟，离心，取上清液，蒸干，加8mL水溶解，加8mL盐酸溶液(6mol/L)，混匀，密封，于150℃下水解1小时，冷却，转移至蒸发皿中蒸干，残渣加盐酸溶液(0.1mol/L)溶解并转移至2mL量瓶中，加盐酸溶液(0.1mol/L)定容至刻度，混匀，取200μL，置于EP管中，加入100μL三乙胺乙腈溶液(1mol/L)，加入100μL异硫氰酸苯酯乙腈溶液(0.1mol/L)，混匀，室温避光放置1小时，加入600μL正己烷，震荡，放置10分钟，取下层液，制得衍生化溶液，即得所述测试样品。

在如下本发明的实施例或对比例中的“冰片含量”测定方法是根据“珍珠明目滴眼液质量标准”(国家食品药品监督管理总局，标准编号WS3-B-3281-98-2017)进行的。

在如下本发明的实施例或对比例中，采用如下通用过程制备所述滴眼液制剂：

取适量珍珠液，均匀分散于适量氯化钠溶液中获得珍珠稀释液，将适量冰片和抑菌剂溶于适量乙醇水溶液后分散至所述珍珠稀释液中，任选用pH调节剂(视情况采用盐酸或氢氧化钠)将pH调节至约6.5，补水至约1000mL，过滤，即得所述滴眼液制剂。

实验1-1：考察不同类型抑菌剂对滴眼液制剂的抑菌效力和氨基酸含量的影响按照下表2中所示的量和组成以上文所述制备滴眼液制剂的通用过程制备本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂。

表2：本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂的组成和用量(重量％)

上述本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂的抑菌剂含量均满足所述“珍珠明目滴眼液质量标准”的要求；另外，冰片含量、pH值等也均满足要求。

将上述本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂按照《中国药典》(2020版)要求进行“抑菌效力”考察，并按照上述文献方法测定配制后的滴眼液制剂的“氨基酸含量”。结果见表3。

表3：本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂的抑菌效力及氨基酸含量测定结果

由上表3的结果可见，在抑菌剂总量一定的情况下(均为0.05重量％)：

本发明实施例1至3和对比例1至7的滴眼液制剂的氨基酸含量基本无差别，即配制了滴眼液制剂后，有无抑菌剂和抑菌剂种类不同对氨基酸含量基本无影响；

另外，具体地，对比例1的滴眼液制剂不含抑菌剂，其对细菌和真菌的抑菌效力均未达到标准B，不符合眼用制剂的抑菌效力要求，因此需要添加合适的抑菌剂才能使该滴眼液制剂达到眼用制剂的抑菌效力要求；

对比例6的滴眼液制剂采用的抑菌剂是苯氧乙醇，对细菌和真菌的作用都较弱，对细菌和真菌的抑菌效力均未达到标准B，不符合眼用制剂的抑菌效力要求；

对比例2和4的滴眼液制剂均采用单独一种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂(对比例2采用羟苯甲酯和对比例4采用羟苯丙酯作为抑菌剂)，这样的单独一种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂尽管对真菌的抑菌作用较强，并且抑菌效力达到了标准B，但其对细菌的抑菌作用较弱，抑菌效力未达到标准B，综合对细菌和真菌的抑菌效力的评价，不符合眼用制剂的抑菌效力要求；

对比例5的滴眼液制剂采用的抑菌剂为三氯叔丁醇，对细菌的抑菌作用较强，并且抑菌效力达到了标准B，但对真菌的抑菌作用较弱，抑菌效力未达到标准B，未能达到眼用制剂的抑菌效力要求；

对比例7的滴眼液制剂使用非对羟基苯甲酸酯类的联合抑菌剂，即采用三氯叔丁醇和苯氧乙醇作为联合抑菌剂，对细菌的抑菌效力达到了标准B，对真菌的抑菌效力未达到标准B，综合对细菌和真菌的抑菌效力的评价，不符合眼用制剂的抑菌效力要求；

对比例3是根据现有技术制备的滴眼液制剂，其采用单独一种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂，即羟苯乙酯，对细菌的抑菌效力达到了标准B，对真菌的抑菌效力达到了标准A，符合眼用制剂的抑菌效力要求；

另外，本发明实施例2和3的滴眼液制剂均采用对羟基苯甲酸酯类的联合抑菌剂(对比例2采用羟苯甲酯联合羟苯乙酯作为抑菌剂，和实施例3采用羟苯乙酯联合羟苯丙酯作为抑菌剂)，这样的对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂，对细菌的抑菌作用比单一使用羟苯甲酯和羟苯乙酯提高，抑菌效力均达到了标准B。尽管本发明实施例2和3的滴眼液制剂对真菌的抑菌作用相比于对比例3未显示出明显提高，然而达到的抑菌效力仍保持不低于标准B。从对细菌和真菌的抑制作用的综合评价来说，本发明实施例2和3的滴眼液制剂基本符合眼用制剂的抑菌效力要求，然而，抑菌效力弱于实施例1和对比例3；

本发明实施例1的滴眼液制剂使用对羟基苯甲酸酯类的联合抑菌剂，即采用对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯作为联合抑菌剂，这样的联合抑菌剂对细菌的抑菌效力达到了标准B，对真菌的抑菌效力达到了标准A，即本发明实施例1的滴眼液制剂符合眼用制剂的抑菌效力要求。

从实验结果可知，本发明实施例1与对比例3的滴眼液制剂达到相同等级的抑菌效力，即对细菌的抑菌效力达到了标准B，对真菌的抑菌效力达到了标准A，它们都符合眼用制剂的抑菌效力要求。然而实验过程中，本发明实施例1与对比例3的滴眼液制剂所达到的具体抑菌效力的数值有差异，参见下表4。

表4：本发明实施例1和对比例3的滴眼液制剂的抑菌效力数值比较

由上表4的结果可见，本发明实施例1与对比例3的滴眼液制剂24小时(h)细菌数减少的lg值均大于1，7天(d)细菌数减少的lg值均大于3，14天至28天细菌数未增加，7天真菌数减少的lg值大于2，14天至28天真菌数未增加，符合眼用制剂抑菌效力要求；实施例1细菌和真菌28天未恢复生长，实施例1对试验菌有较好的抑制作用，对比例3真菌28天未恢复生长，金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌14天至28天仍有试验菌生长，实施例1对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑制作用优于对比例3。

综上所述，在抑菌剂含量相同的情况下，使用对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯联合抑菌剂的抑菌效力优于非对羟基苯甲酸酯类抑菌剂，优于单独使用一种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂，优于其它对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂。在未进行稳定性考察的条件下，它们对氨基酸含量基本无影响。

实验1-2：考察联合抑菌剂中对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的浓度比例对滴眼液制剂的抑菌效力和氨基酸含量的影响按照下表5中所示的量和组成以上文所述制备滴眼液制剂的通用过程制备本发明实施例4至8的滴眼液制剂。

表5：本发明实施例4至8的滴眼液制剂的组成和用量(重量％)

上述本发明实施例4至8的滴眼液制剂的抑菌剂含量均满足所述“珍珠明目滴眼液质量标准”的要求；另外，冰片含量、pH值等也均满足要求。

将上述本发明实施例4至8的滴眼液制剂按照《中国药典》(2020版)要求进行“抑菌效力”考察，并按照上述文献方法测定配制后的滴眼液制剂的“氨基酸含量”。测定结果见表6。

表6：本发明实施例4至8的滴眼液制剂的抑菌效力及氨基酸含量测定结果

由上表6的结果可见，在抑菌剂总量一定的情况下(均为0.0525重量％)：

本发明实施例4至8的滴眼液制剂的氨基酸含量基本无差别，即配制了滴眼液制剂后，在未进行稳定性考察的条件下，联合抑菌剂中对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的不同浓度比例对氨基酸含量基本无影响；

另外，具体地，在对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的浓度比例从约4:1(实施例4)变化到约3.5:1(实施例5)并且直到约3:1(实施例6)时，制备的滴眼液制剂的抑菌效力基本不变，对细菌的抑菌效力均达到标准B，对真菌的抑菌效力均达到标准A，这样的滴眼液制剂符合眼用制剂的抑菌效力要求；

当对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的浓度比例达到约2.5:1(实施例7)时，所述滴眼液制剂的抑菌效力明显优于其它比例，对细菌和真菌的抑菌效力都达到了A。这样的滴眼液制品很好地符合眼用制剂的抑菌效力要求；

当对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的浓度比例达到约2:1(实施例8)时，所述滴眼液制品的抑菌效力有所下降，对细菌的抑菌效力降到标准B，对真菌的抑菌效力保持A。这样的滴眼液制品也符合眼用制剂的抑菌效力要求。

综上所述，对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯最优抑菌效力比例为约2.5:1。

实验1-3：考察联合抑菌剂的总浓度对滴眼液制剂的抑菌效力和氨基酸含量的影响按照下表7中所示的量和组成以如上文所述制备滴眼液制剂的通用过程制备本发明实施例7、9-11以及对比例8的滴眼液制剂。

表7：本发明实施例7、9-11以及对比例8的滴眼液制剂的组成和用量(重量％)

上述本发明实施例7、9-11以及对比例8的滴眼液制剂的抑菌剂含量均满足所述“珍珠明目滴眼液质量标准”的要求；另外，冰片含量、pH值等也均满足要求。

将上述本发明实施例7、9-11以及对比例8的滴眼液制剂按照《中国药典》(2020版)要求进行“抑菌效力”考察，并按照上述文献方法测定配制后的滴眼液制剂的“氨基酸含量”。测定结果见表8。

表8：本发明实施例7、9-11以及对比例8的滴眼液制剂的抑菌效力及氨基酸含量测定结果

由上表8的结果可见，在使用的联合抑菌剂中的羟苯甲酯与羟苯乙酯的比例一定的情况下(均为2.5:1)：

对比例8和本发明实施例7和9-11的滴眼液制剂的氨基酸含量基本无差别，即配制了滴眼液制剂后，在未进行稳定性考察的条件下，联合抑菌剂中对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸丙酯的不同总浓度对氨基酸含量基本无影响；

另外，具体地，在对比例8中，联合抑菌剂总量仅为0.02625重量％，抑菌效力明显不足，尽管对真菌的抑菌效力达到标准B，但对细菌的抑菌效力未达到标准B，这样的滴眼液制剂不符合眼用制剂的抑菌效力要求；

在实施例9中，联合抑菌剂总量为0.042重量％，抑菌效力有所提高，对细菌的抑菌效力达到了标准B，对真菌的抑菌效力达到了标准A，这样的滴眼液制剂符合眼用制剂的抑菌效力要求；

在实施例7中，联合抑菌剂总量为0.0525重量％，对细菌和真菌的抑菌效力进一步提高，均达到了标准A，抑菌效力比较理想，这样的滴眼液制剂很好地符合眼用制剂的抑菌效力要求；

在实施例10和11中，联合抑菌剂总量分别为0.063重量％和0.07875重量％，对细菌和真菌的抑菌效力均达到了标准A，抑菌效力虽很好地满足要求，但是抑菌剂用量过多并无更多的益处，过多的抑菌剂反而会对眼部造成损害。

综上所述，在对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂总量达到0.0525重量％的情况下，即可获得满意的抑菌效力，因此对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯总量最优为约0.0525重量％。

通过上述实验1-1至实验1-3的结果，可得到如下结论：

1)在珍珠明目滴眼液中，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂的抑菌效力优于非对羟基苯甲酸酯类抑菌剂；

2)将两种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂联合使用，如使用对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯联合应用，达到的抑菌效力更优；

3)对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯联合抑菌剂的最佳用量为基于所述滴眼液制剂的总重量计的约0.0525重量％，二者最佳的重量比例为约2.5∶1。

实验2-1：考察包装本发明滴眼液制剂的容器对所述滴眼液制剂的抑菌效力的影响按照下表10中所示的联合抑菌剂的量以如上文所述制备滴眼液制剂的通用过程制备本发明的最佳滴眼液制剂(参见表10中的“0时”的滴眼液制剂)，其余组分含量与实施例7类似。

将配制的滴眼液制剂分别灌装于不同容器中，所述不同容器是由表9所示的不同包装材料制成的。

表9：制备不同包装容器所用的不同包装材料

	包装材料
		实施例12	高密度聚乙烯
实施例13	低密度聚乙烯
		实施例14	聚丙烯
实施例15	聚对苯二甲酸乙二醇酯

按照《中国药典》(2020版)中通则9001“原料药物与制剂稳定性试验指导原则”中公开的方法，于温度约40℃±2℃、湿度约25％±5％的条件下加速考察6个月，测定包装于所述不同容器中的本发明最佳滴眼液制剂在不同时间点(约1个月、2个月、3个月和6个月)时的氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量及冰片含量。结果参见表10中的实施例12至15。

表10：不同包装材料的容器对滴眼液制剂包含的抑菌剂、冰片和氨基酸含量的影响

由上表10的结果可见，各个实施例在加速6个月的考察过程中，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量、氨基酸含量、冰片含量都呈现出了不同程度的下降趋势。为直观比较，将加速6个月后的对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量、氨基酸含量、冰片含量结果与在0时的相应含量根据下式进行比较：

结果示于表11中。

表11：滴眼液制剂在加速6个月后与0时结果比较

由上表10和11的结果可见：

实施例12使用高密度聚乙烯包装材料，加速考察6月后，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂和氨基酸含量均有不同程度降低，与0时含量比较，对羟基苯甲酸甲酯含量下降至88.5％，对羟基苯甲酸丙酯含量下降至85.3％，氨基酸含量下降至89.9％，冰片含量下降至76.3％，这些指标仍符合相关质量标准。

实施例13使用低密度聚乙烯包装材料，加速考察6月后，对羟基苯甲酸甲酯含量下降至93.8％，对羟基苯甲酸丙酯含量下降至94.1％，氨基酸含量下降至89.5％，冰片含量在加速考察3个月后仍高于0.2mg/mL，但在加速考察6个月后已低于质量标准中冰片含量不低于0.2mg/mL的要求，显著下降至0时冰片含量的仅约27.5％。不希望束缚于理论，此处据推测可能由于冰片具有挥发性，易穿过低密度聚乙烯挥发出来，导致冰片含量降低，因此本发明的珍珠明目滴眼液包装材料不优选长期采用低密度聚乙烯材质。

实施例14使用聚丙烯包装材料，加速考察6月后，氨基酸含量下降至81.3％，冰片含量显著下降至71.0％，但是仍满足质量标准的不低于0.2mg/mL的要求，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量下降较多，与0时含量比较，对羟基苯甲酸甲酯含量下降至86.1％，对羟基苯甲酸丙酯含量下降至78.3％。不希望束缚于理论，此处可能是聚丙烯材质较易吸附对羟基苯甲酸酯类抑菌剂导致其下降较多。

实施例15使用聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料，加速考察6月后，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂和氨基酸含量仅略有降低，与0时含量比较，对羟基苯甲酸甲酯含量下降至95.5％，对羟基苯甲酸丙酯含量下降至96.2％，氨基酸含量下降至96.0％，冰片下降至96.5％。

综上所述，采用常用的包装材料，短时间内(对应于例如加速考察的3个月)对本发明的滴眼液制剂影响不大，但在加速考察6个月时，对羟基苯甲酸类抑菌剂都会有不同程度的降解，并且氨基酸含量和冰片含量也会降低。综合各项质量指标，使用聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料制备的容器更优选用于包装本发明的滴眼液制剂。

实验2-2：包装材料中添加剂对对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量的影响

按照下表13中所示的抑菌剂的量以如上文所述制备滴眼液制剂的通用过程制备本发明的最佳滴眼液制剂(参见表13中的“0时”的滴眼液制剂)，其余组分含量与实施例7类似。

将所述滴眼液制剂分别灌装于由聚对苯二甲酸乙二醇酯制成的不同容器中，所述不同容器是由表12所示的包含不同添加剂的聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料制成的。

表12：聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料中包含的不同添加剂(基于所述聚对苯二甲酸乙二醇酯的重量计)

	添加剂	添加量(重量％)	添加剂的作用
				实施例16	PET8M415105	4	色母
实施例17	抗氧剂1076	0.00005	抗氧剂
				实施例15	无	无	无
实施例18	聚碳化二亚胺	0.05	抗水解剂

按照《中国药典》(2020版)中通则9001“原料药物与制剂稳定性试验指导原则”中公开的方法，于温度约40℃±2℃、湿度约25％±5％的条件下加速考察6个月，测定包装于含有不同添加剂的聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料容器中的滴眼液制剂在不同时间点(约1个月、2个月、3个月和6个月)时的氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量及冰片含量。结果参见表13中的实施例16至18，在此，在上述实验2-1中所考察的实施例15的数据也被列出作为对比。

表13：聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料中不同添加物对抑菌剂及冰片和氨基酸含量的影响

由上表13的结果可见，

在加速6个月的考察过程中，实施例16添加色母、实施例17添加抗氧剂与实施例15无添加剂相比较，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量、氨基酸含量、冰片含量差异不大，基本保持一致，说明聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料中的色母和抗氧剂对抑菌剂含量、氨基酸含量和冰片含量没有影响；

实施例18中添加抗水解剂，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量、氨基酸含量与实施例15无添加物相比有明显提高，冰片含量基本一致，因此在聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料中加入抗水解剂，例如聚碳化二亚胺，可明显提高对羟基苯甲酸酯类联合抑菌剂含量及珍珠液中氨基酸含量。

不希望束缚于理论，聚碳化二亚胺具有累积的双键结构，可和多种含有活泼氢的化合物进行反应，常用于聚对苯二甲酸乙二醇酯的抗水解剂，聚对苯二甲酸乙二醇酯长期遇水或在潮湿环境中，聚酯链段会发生水解反应而断裂产生羧基，聚碳化二亚胺可与水解产生的羧基反应生成稳定的酰脲，从而抑制聚对苯二甲酸乙二醇酯的继续水解，提高包材的稳定性；同时，对羟基苯甲酸酯类抑菌剂中的酯键易水解产生羧基，可能与包材中的聚碳化二亚胺反应生成稳定的酰脲，从而间接阻止对羟基苯甲酸酯类抑菌剂酯键水解成羧基，提高抑菌剂含量，同时有利于氨基酸含量保持稳定。

综上所述，添加抗水解剂聚碳化二亚胺的聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料对冰片、氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量影响最小，加速考察6月后，含量基本无变化；使用聚对苯二甲酸乙二醇酯包装材料的冰片、氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量略有下降；高密度聚乙烯、低密度聚乙烯、聚丙烯材质包材中的冰片、氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量下降较多，相对而言不宜长期作为珍珠明目滴眼液的包装材料。聚对苯二甲酸乙二醇酯可优选作为珍珠明目滴眼液的包装材料，更优选添加抗水解剂聚碳化二亚胺的聚对苯二甲酸乙二醇酯。

通过试验2-1和实验2-2的结果可得到如下结论：

(1)对羟基苯甲酸酯类抑菌剂在稳定性考察过程中含量变化与包装材料有关；

(2)使用聚对苯二甲酸乙二醇酯材质包装材料时，冰片、氨基酸含量、对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量在稳定性考察期间较为稳定，其中以添加抗水解剂聚碳化二亚胺的聚对苯二甲酸乙二醇酯更优，可保持对羟基苯甲酸酯类抑菌剂含量稳定，同时氨基酸含量、冰片含量保持较小的变化。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的主旨或基本特征的情况下，能够以其它的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其它实施方式。这些其它实施方式也涵盖在本发明的保护范围内。

还应当理解，以上所述的具体实施例仅用于解释本发明，本发明的保护范围并不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

本发明中使用的“含有”、“包括”或者“包含”等类似的词语意指在该词前的要素涵盖在该词后列举的要素，并不排除也涵盖其它要素的可能。本发明中使用的术语“约”具有本领域技术人员公知的含义，优选指该术语所修饰的数值在其±50％，±40％，±30％，±20％，±10％，±5％或±1％范围内。

本公开使用的所有术语(包括技术术语或者科学术语)与本公开所属领域的普通技术人员理解的含义相同，除非另外特别定义。还应当理解，在诸如通用词典中定义的术语应当被理解为具有与它们在相关技术的上下文中的含义相一致的含义，而不应用理想化或极度形式化的意义来解释，除非本文有明确地这样定义。

对于相关领域普通技术人员已知的技术、方法和设备可能不作为详细讨论，但在适当情况下，所述技术、方法和设备应当被视为说明书的一部分。

本发明说明书中引用的现有技术文献所公开的内容整体均通过引用并入本发明中，并且因此是本发明公开内容的一部分。

Claims (9)

1.一种滴眼液制剂，其包含：

珍珠液；

联合抑菌剂，其包含两种或更多种对羟基苯甲酸酯类抑菌剂的组合，优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，或者优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯的组合，或者优选包含对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，最优选包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合；和

水。

2.根据权利要求1的滴眼液制剂，其中所述联合抑菌剂的总量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.0263重量％至约0.0892重量％，优选约0.0367重量％至约0.787重量％，更优选约0.0472重量％至约0.0682重量％，进一步优选约0.0500重量％至约0.0577重量％，最优选约0.0525重量％。

3.根据权利要求1或2的滴眼液制剂，其中所述联合抑菌剂包含对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的组合，所述对羟基苯甲酸甲酯与所述对羟基苯甲酸丙酯的重量比例优选为约8:1至约0.5:1，优选约6:1至约1:1，更优选约4:1至约1.5:1，进一步优选约3:1至约2:1，最优选约2.5:1。

4.根据权利要求1或2的滴眼液制剂，其中所述珍珠液的多肽含量为不低于约1mg/mL，并且所述珍珠液的量为基于所述滴眼液制剂总重量计的约1.8重量％至约2.2重量％，优选约2.0重量％。

5.根据权利要求1或2的滴眼液制剂，其中所述滴眼液制剂还包含冰片，所述冰片的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.08重量％至约0.12重量％，优选约0.1重量％。

6.根据权利要求1或2的滴眼液制剂，其中所述滴眼液制剂还包含以下成分中的一种或多种：

渗透压调节剂，其优选包含氯化钠，所述渗透压调节剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.5重量％至约0.7重量％，更优选约0.6重量％；

粘弹剂，其优选包含玻璃酸钠，所述粘弹剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.12重量％至约0.18重量％，优选约0.15重量％；

pH调节剂，所述pH调节剂的量优选使得所述滴眼液制剂的最终pH值为约4.0至约8.0，优选约5.0至约7.5，更优选约6.0至约7.0，最优选约6.5，所述pH调节剂优选包含盐酸或氢氧化钠；和

有机溶剂，其优选包含乙醇，所述有机溶剂的量优选为基于所述滴眼液制剂总重量计的约0.45重量％至约0.55重量％，优选约0.5重量％。

7.一种滴眼液制剂产品，其包含根据前述权利要求1至6中任一项的滴眼液制剂和用于包装所述滴眼液制剂的容器。

8.根据权利要求7的滴眼液制剂产品，其中所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由热塑性材料制备，所述热塑性材料优选包含聚对苯二甲酸乙二醇酯。

9.根据权利要求7或8的滴眼液制剂产品，其中所述容器的至少与所述滴眼液制剂接触的面的一部分或全部由包含抗水解剂的热塑性材料制备，优选由包含抗水解剂的聚对苯二甲酸乙二醇酯热塑性材料制备，所述抗水解剂优选包含聚碳化二亚胺，所述抗水解剂的含量优选为基于所述热塑性材料的重量计的约0.04重量％至约0.06重量％，更优选约0.05重量％。