CN113952498B - 一种中药多组分液体愈创敷料及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药多组分液体愈创敷料及制备方法，包括白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连的中药组合物的提取物，并以白芨胶作为成膜剂制备得到，可用于各类机械性的皮肤损伤、慢性感染创面、下肢溃疡、糖尿病足溃疡等创伤的愈创敷料，本申请以白芨胶作为新型成膜材料，代替现有化学成膜剂，无毒无刺激，具有可降解，能够消炎止血、快速成膜、保护伤口等优点，并且中药组合物按照“君、臣、佐、使”原则进行组合，各药协同增效，增强杀菌止痛、消肿生肌效果，同时工艺路线具有合理性、科学性及可靠性。

Description

一种中药多组分液体愈创敷料及制备方法

技术领域

本发明涉及医用敷料技术领域，具体为一种中药多组分液体愈创敷料及制备方法。

背景技术

皮肤创面的治疗护理是外科整形修复学术界一直关注的研究热点之一。各种原因导致的皮肤创伤，使得皮肤的完整性受损，从而出现疼痛、渗血渗液、电解质及蛋白质丢失、细菌入侵等一系列生理病理问题。学界普遍认为，具有优异性能的主动型敷料是皮肤创面治疗的主要手段之一。敷料可以作为皮肤的替代物，起到暂时的皮肤屏障功能，避免外界微生物的侵袭，防止创面遭受二次损伤；同时还能营造一个适合创面修复的微湿、微酸、低氧的微环境，从而保证皮肤创面的更好更快愈合。

目前现有的敷料大多采用化学合成成膜材料，但是化学合成的成膜材料存在功能单一，气味刺鼻，易产生刺痛感等缺点，另外三七复方的中药方具有止血、消毒等功效，但是如果直接将中药磨粉敷于患处，不仅用量大而且维持性不好，所以如何将中药剂型进行改进，提高中药有效利用率，避免其使用麻烦，易污染伤口等缺点是目前中药敷料的发展方向。

白芨是一种中药，此品表面灰白色或黄白色，有数圈同心环节和棕色点状须根痕，上面有突起的茎痕，下面有连接另一块茎的痕迹。质坚硬，不易折断，断面类白色，角质样。气微，味苦，嚼之有黏性。

白芨药材中含有的化学成分主要是多糖类、联苄类和菲类及其衍生物，如丁香树脂酚、β-谷甾醇、没食子酸等。其他成分还包括：甾类、萜类、酯类、醚类等化合物。白芨具有止血作用、抗菌作用以及促进伤口愈合作用。

本申请的团队在对现有新型保湿敷料进行调查与文献阅读后，从其材质与功效等方面出发，实验筛选出中药提取物白芨胶作为新型成膜剂，进一步进行多功能中药医用敷料及剂型的研发设计，着力于研发出兼具保护性与治疗性的白芨胶新型液体敷料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药多组分液体愈创敷料及制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种中药多组分液体愈创敷料，包括以下组分：中药组合物的提取物、作为成膜剂的白芨胶、蒸馏水、乙醇；其中所述中药组合物包括：白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连；

其中白芨为兰科植物白芨的干燥块茎，味苦、甘、涩，微寒。归肺、肝、胃经，补肺，具有收敛止血，清热湿，消肿生肌的功效。

三七主要含有的化学成分是皂苷类，也是其发挥药理药效作用的主要活性成分。除此之外，三七中含有的化学成分中还包括挥发油、三七素、黄酮类成分、甾醇成分、聚炔醇类成分、糖类成分、氨基酸成分、有机酸及无机盐等成分。并且三七具有止血作用、镇痛作用以及抗炎作用。临床上使用的三七饮片、三七伤药片等均具有较好的抗炎效果，运用于各种运动创伤、风湿免疫疾病等的治疗

紫珠味苦、涩、药性平，树叶含有一种称之为黄酮类缩合鞣质的止血成分，具有止血、散淤、消炎、抑菌作用的功能。

蒲黄为多年生草本，根茎匍匐状，须根多，叶狭长线形，夏季顶生穗状花序，长圆柱形，褐色，果穗圆柱状。它分布于我国南北各地，资源非常丰富，生于沼池、水边及浅沼泽中。蒲黄以粉细、质轻、色鲜黄、滑腻感强者为佳。目前供临床入药的有长苞香蒲、宽叶香蒲、狭叶香蒲及蒙古香蒲等。蒲黄是临床常用中药，有多种药理作用。

蒲黄化学成分有甾类、黄酮类、氨基酸类、多糖类、无机成分及其他成分组成。具有促凝血、化瘀止痛作用并对心血管系统具有双向调节作用。

川芎，别名芎藭、生川军、香果，为伞形科阿米芹族藁本属。多年生草本，高40～60cm，具有浓烈香气。茎直立，茎下部叶具柄，叶片轮廓卵状三角形，复伞形花序顶生或侧生。川芎辛温香燥，走而不守，既能行散，上行可达巅顶；又入血分，下行可达血海，常用于活血行气，祛风止痛之证。川芎因其有效化学成分及药用价值广而备受关注，并广泛应用于医学、化学和药理学研究中。在抗炎、镇痛、抗血栓形成、促血管舒张、抗哮喘、抗呼吸抑制、抗纤维化、抗阻塞性疾病及抗肿瘤等方面也因其化学成分及药理作用发挥出一定功效

鼠妇通经、利水、解毒、止痛。主症瘕、疟母、血瘀经闭、小便不通、惊风撮口、牙齿疼痛、鹅口诸疮，从鼠妇中分离得到的3-甲基4，8-二羟基呋喃香豆素，对革兰氏阳性菌、枯草芽孢杆菌、革兰氏阴性菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌具有较弱的广谱抗菌活性。

黄连是毛茛科多年生草本植物，其化学成分主要包括生物碱类、木脂素类、黄酮类、酸性成分等，其临床用途日益广泛，对多种疾病的治疗均有很大价值，可通过不同的途径和作用靶点起到保护心脑血管、抗肿瘤、降血糖、抗病原微生物、抗炎以及改善消化系统等药理作用。

优选的，所述敷料组分还包括甘油、戊二醛，其中戊二醛作为交联剂，甘油作为增塑剂和保湿剂有利于增强液体敷料的成形性和保湿性能。

优选的，所述敷料组分还紫草油，紫草油有杀菌、消毒作用，并有挥发性，可以缩短成膜时间，同时降低创面感染的概率。

一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，

D1，取制备好的白芨胶加入乙醇、蒸馏水充分搅拌混合；

D2，加入甘油，充分搅拌混合；

D3，加入中药组合物的提取物，充分搅拌混合；

D4，加入戊二醛，充分搅拌混合；

D5，铺膜然后在零下20度环境维持24h；

D6，真空液化35h，按规格打包密封。

优选的，所述白芨胶通过以下步骤制备：

M1，取预处理所得白芨粉末置于容器中，保鲜膜封口，放入超声清洗机中超声波提取，抽滤，重复3次，合并抽滤得到的滤液；

M2，将上步所得的滤液，放入圆底烧瓶中旋转蒸发，温度为80℃，转速80r/min，浓缩至黏稠，得到初步浓缩液；

M3，用Sevag法去除浓缩液中的游离蛋白，加入氯仿－正丁醇混合液，剧烈震荡后静置30min使反应充分，然后6000r/min离心5min，重复6次，弃沉淀，合并上清液；

M4，将上清液置于圆底烧瓶，旋转蒸发至黏稠，温度为40℃，转速80r/min，得到浓缩液；

M5，向浓缩液中加入3倍体积的95％乙醇，析出大量白色絮状沉淀，静置过夜，使沉淀完全，抽滤后将沉淀物置于烘干箱60℃中真空干燥，即得白芨胶；

优选的，所述中药组合物的提取物通过以下步骤制备：

S1，取处方量药材白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连置于容器中；

S2，向容器中加入八倍重量的70％的乙醇，回流提纯2次，每次2h；

S3，合并2次提取液，静置过滤，取滤液，蒸发浓缩得到中药组合物的提取物的浓缩药液。

优选的，所述超声波提取的提取温度为80℃，频率为100Hz，每次30min。

优选的，步骤M3中，浓缩液、氯仿、正丁醇的比例控制为25∶5∶1。

优选的，所述浓缩药液的浓度1.9g生药/ml。

优选的，所述白芨胶通过以下步骤制备：

N1，取预处理所得白芨粉末加水，在水浴中摇床浸提，

N2，过滤取上清液，并加活性炭、硅藻土进行抽滤，取滤液；

N3，滤液浓缩至原体积1/3；

N4，乙醇醇提后离心干燥，获得白芨胶。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本申请的敷料不仅具备新型保湿敷料的优点又具有主动促进创面愈合功能，可用于各类机械性的皮肤损伤、慢性感染创面、下肢溃疡、糖尿病足溃疡等创伤，本申请通过提取中药白芨中的天然多糖高分子化合物白芨胶作为新型成膜材料，代替现有化学成膜剂，无毒无刺激，可降解，能够消炎止血、快速成膜、保护伤口，而且本申请的中药组合物的提取物是以“三七复方”为基础，按照传统组方原理“君、臣、佐、使”原则进行组合而成的中药复方，对金黄色葡萄球菌的生长有较好的抑制作用，并且全方各药协同增效，增强杀菌止痛、消肿生肌效果；另外本申请还给出了制备的工艺路线和最佳配比条件，利于敷料后期产业化的需求。

附图说明

图1为SDS-PAGE电泳实验结果图；

图2为不同药材浓度的抑菌作用汇总图；

图3为大鼠术后3天各组伤口大体情况；

图4为大鼠术后7天各组伤口大体情况；

图5为大鼠术后14天各组伤口大体情况。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

采用超声波提取法对白芨胶进行提取制备。具体制备的过程为将白芨块茎烘箱内干燥2h，粉碎，然后将白芨粉末置于锥形瓶中，保鲜膜封口，放入超声清洗机中超声波提取。提取温度为80℃，频率为100Hz，每次30min，抽滤，重复3次，合并抽滤得到的滤液。将上步所得的滤液，放入圆底烧瓶中以温度为80℃，转速80r/min条件旋转蒸发，浓缩至黏稠，得到初步浓缩液。用Sevag法去除浓缩液中的游离蛋白，加入氯仿－正丁醇混合液(浓缩液∶氯仿∶正丁醇＝25∶5∶1)，剧烈震荡后静置30min使反应充分，然后6000r/min离心5min，重复6次，弃沉淀，合并上清液。将上清液置于圆底烧瓶，旋转蒸发至黏稠。温度为40℃，转速80r/min，得到浓缩液，向浓缩液中加入3倍体积的95％乙醇，析出大量白色絮状沉淀，静置过夜，使沉淀完全。抽滤后将沉淀物置于烘干箱60℃中真空干燥，即得白芨胶。

中药组合物的提取物的制备

本申请的中药组合物为白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连，按照“君、臣、佐、使”原则进行配伍，其中三七、紫珠草为方中君药，对主病或主证具有主要的治疗作用，两者共奏“散淤止血、消肿定痛”之功效。白芨、蒲黄、川芎为方中臣药，白芨具有收敛止血、消肿生肌的功效；川芎则具有活血行气、祛风止痛、抗血小板凝聚以及体外抗血栓之功效；鼠妇有破瘀消症、通经、利水、解毒止血的作用；黄连具有清热燥湿，泻火解毒之用。二者是为佐药，加强君臣药止血定痛、消肿祛淤、化腐生肌之功效。全方各药互相协助，互有所长，协同增效，共奏活血祛淤、消炎镇痛、化腐生肌之功效，是治疗皮肤伤口创面的良药。

中药组合物的提取物，关系到产品的质量及疗效，本申请在广泛査阅文献和咨询专家的基础上，选择复方药材中君药三七的主要活性成分人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁的含量提取率以及复方的浸膏得率等三个指标共同评价筛选复方的提取次数、乙醇倍数、乙醇浓度以及提取时间。为了获得最佳的工艺路线配比，通过对乙醇浓度，乙醇倍数，提取时间为考察因素，每个因素拟3个水平，选用L7(34)正交表，对中药组分的提取条件进行筛选。

正交实验结果见表1；浸膏得率的方差分析结果见表2；样品中人参皂苷Rg₁、Rb·浓度方差分析结果，见表3、表4。

表1醇提正交设计结果

表2浸膏得率方差分析结果

表3人参皂苷Rg₁方差分析结果

表4人参皂苷Rb₁方差分析结果

正交设计结果分析

(1)以浸膏得率为考察指标，由表1中极差R1值大小得知，各因素对浸膏得率影响程度大小的主次排序为B>C>A；表2浸膏得率方差分析结果得知：B因素的影响有显著性差异，A、C因素则无显著性影响，结合A、B、C三个因素各水平Ki均值的大小，以A₂B₁C₂为佳。

(2)以人参皂苷Rg₁为考察指标，由表1中极差R2值大小得知，各因素对人参皂苷Rg₁影响程度大小的主次排序为B>C>A；表3人参皂苷Rg₁方差分析结果得知，A、B、C三个因素均无显著性差异，结合A、B、C三个因素各水平Ki均值的大小，以A₃B₁C₃为佳。

(3)以人参皂苷Rb₁为考察指标，由表1中极差R3值大小显示，各因素对人参皂苷Rb1影响程度大小的主次排序为B>C>A，表4人参皂苷Rb₁方差分析结果表明，A、B、C三个因素均无显著性差异，结合A、B、C三个因素各水平Ki均值的大小，以A₂B₂C₃为佳。

基于上述三个指标最佳工艺条件的基础上，综合考量优选出A₂B₁C₃为最佳工艺，即加70％乙醇8倍量，提取2.0h，提取2次作为最优的工艺参数。

中药组合物的提取物按照如下过程进行

取白芨10g，三七15g、紫珠15g、蒲黄10g、川芎10g、鼠妇10g、黄连10g，加入70％的乙醇8倍量，连续提取2次，每次提取2h；合并两次提取液，滤过，浓缩至50mL，1.9g生药/mL即可。

为了验证中药组合物的提取物的抗菌有效性，以金黄色葡萄球菌作为指标物进行对比。

按2％接种量接种到含中药组合物的提取物浓度为1MIC营养肉汤液体培养基中，以不加药物为正常组。

在37℃，120r/min摇床培养。16h时取样品，离心机离心弃上清。收集菌体90mg，悬于40μL无菌水中，加入5×SDS上样缓冲液，混匀后在沸水浴中煮沸8min，离心，取上清液进行SDS-PAGE电泳。

SDS-PAGE电泳实验结果(如图1)。中药组合物的提取物的可溶性蛋白含量比正常组有明显变化。95000处与正常组相比中药组合物的提取物明显增加一条蛋白条带；130000～95000之间，正常组比中药组合物的提取物明显消失了一条蛋白条带，说明中药复方影响金黄色葡萄球菌菌体内的蛋白表达，显现出抑菌作用。

另外对比中药组合物的提取物和黄连的抗菌效果

(1)药液制备：取黄连100g，加入1L清水，然后以传统方式煎煮，取浓缩液100mL，确保每毫升药液中含生药1g，经高压灭菌处理后，放置于4℃的冰箱内保存，备用；再取等量的中药组合物的提取物备用。

(2)菌液制备：取琼脂平板分离培养24h后的MRSA菌落，将其放置于含有0.9％氯化钠液的试管中，矫正浓度为1.0×10⁸CFU/mL。

(3)抑菌效价(MIC)测定：以2倍梯度稀释法稀释药液，然后取2组无菌试管，每组各9支，用移液管取1mL营养肉汤置于第一组9支试管中，再用另一支移液管取1mL黄连药液(1g/mL)置于第1支试管中，混匀，然后从第1支试管中取1mL混匀液置于第2支试管中，依次类推，直至第7支试管，然后从第7支试管中取1mL混匀液舍去，此时第1支试管内浓度为0.5g/mL，第2支为0.25g/mL，第3支为0.125g/mL，第4支为0.063g/mL，第5支为0.032g/mL，第6支为0.016g/mL，第7支为0.008g/mL；然后，分别取MRSA菌液0.1mL置于第1～7支试管中，第8支试管内加入0.1mLMRSA液，但不加药液，作为对照组。对细菌在培养基中的生长情况进行观察；第9支试管中加入1mL中药液，混匀后再去除1mL，但第9支试管中不加细菌液，观察药液的变化情况。中药组合物的提取物的稀释方法与黄连相同。2种药液稀释后，均置于37℃孵箱中培养16～24h，然后观察MRSA的生长结果，其结果数据如图2所示。

结果判定：以菌液对照组(生长细菌，且液体呈混浊状)与药物对照组(不生长细菌，悬液清亮透明)为参照。

第1-7支试管内悬液混浊，为细菌生长，呈阳性以“+”表示，试管内悬液清亮为无细菌生长，呈阴性以“－”表示。

可以看出中药组合物的提取物抑菌效果明显强于黄连，在生药浓度0.500～0.063g/mL中均具有较强的抑菌作用，抑菌浓度为0.063g/mL；而黄连在0.500～0.250g/mL中无细菌生长，抑菌浓度为0.250g/mL。

本申请制备的中药多组分液体愈创敷料对大鼠创面愈合影响

按照上述的工艺路线制备得到白芨胶以及中药组合物的提取物的浓缩药液。然后以白芨胶：水：乙醇为1:3:1的比例取混合物30ml，充分搅拌加入甘油1ml、紫草油0.1ml充分搅拌混合，再加入中药组合物的提取物的浓缩液2ml，充分搅拌，加入1.5％的戊二醛0.7m充分搅拌混合，铺膜于90mm培养皿中，-20℃冰箱中彻底冷冻24h，真空液化35h即得到成品敷料。

成年Wistar大鼠30只(200-250g)，雌雄各半，于SPF级大鼠实验室适应性喂养3天。术前一天背部备皮，用3％的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(0.15mL/100g)，腹位固定于鼠板上，背部向上，碘伏消毒。参照付小兵在《几种用于创伤修复研究的动物模型》研究中的全层皮肤缺损法，于大鼠背部左右对称制作2个直径为2cm的圆形全层缺损创面，避开血管，深达浅筋膜，止血、包扎，待清醒后单笼饲养。

将大鼠随机分为3组：本申请制备的敷料组(10只)，无白芨胶的中药组合物的提取物组(10只)，空白自愈组(10只)。

给药方法

创面模型制成后，醋酸洗必泰溶液充分清洗消毒创面，无菌棉球擦干创面。本申请制备的敷料组大鼠创面贴敷自制的愈创敷料；无白芨胶的中药组合物的提取物组大鼠创面贴敷传统干性敷料纱布；空白自愈组贴敷传统干性敷料纱布，每四天换一次药。

观察指标及检测方法

将各组大鼠于术后每次换药时，观察各组大鼠创面渗出物、出血、创面感染迹象，创面肉芽组织生长等情况。

检测步骤及计算方法

造模后3、7、14天用数码相机给创面拍照，拍照时相机镜头与创面保持平行，镜面与创面之间的距离约20cm，在创面边缘约1cm处平行放置一刻度尺，拍照；然后同法在创面边缘放置一个1元硬币，拍照；照片存入电脑，记录日期及分组；利用Imagej软件测定刻度尺像素比例或Photoshop软件测定硬币像素比例，从而测岀创面面积。创面愈合率计算公式如下：

创面面积愈合率(％)＝(造模时创面面积-取材时创面面积)/造模时创面面积X100％创面组织学观察

各组大鼠分别于术后3d、7d、14d取创面新生肉芽组织部分，4％的多聚甲醛液固定，常规脱水、透明、石蜡包埋制片，切片厚度为4μm，进行HE染色，观察炎细胞浸润及坏死、纤维细胞及毛细血管增生、胶原纤维等情况，并进行形态学描述。

不同时间的创面影像图片如图3-5，其中由左至右分别为本申请制备的敷料组，无白芨胶的中药组合物的提取物组，空白自愈组。

釆用SPSS13.0统计学软件，对各组数据进行多样本均数比较的方差分析，采用LSD、S-N-K及Dunnett方法统计分析。计量资料采用均数加减标准差进行统计学描述，FV0.01为差异有统计学差异。

各组动物造模后，所有创面均有明显的渗出、创面组织水肿，个别大鼠伤口创面有渗血情观况。各组大鼠麻醉清醒后，精神状态、活跃程度和进食等均无异常情况，总体表现为精神不佳、活动量减少、摄食饮水减少，各组间大鼠总体情况均无明显差异。

术后3天，空白自愈组大鼠伤口创面渗液渗湿接纱布敷料，并粘连伤口创面组织，换药时渗血，创面整体干结，分泌物较少，创面中央可见轻微感染迹象，周围组织轻度水肿，创面未见新生肉芽组织；

无白芨胶的中药组合物的提取物组大鼠伤口创面有渗液，膜揭取容易，不粘连伤口创面，创面整体湿润，分泌物较多，周围组织水肿明显，创面可见轻微感染迹象，未见明显新生肉芽；

本申请制备的敷料组大鼠伤口创面渗液少，愈创敷料揭取容易，伤口创面轻度湿润，创面分泌物相对较少，周围组织轻度水肿，伤口创面有明显新生肉芽，大鼠伤口创面无感染迹象。见图3。

术后7天，空白自愈组大鼠伤口创面渗液相对减少，纱布敷料粘连伤口创面组织，换药时渗血，创面周围组织结痂明显，中央可见较多鲜红肉芽组织填充覆盖，创面大小有一定程度回缩；

无白芨胶的中药组合物的提取物组大鼠创面渗液较前显著减少，创面湿润，创面分泌物仍然较多，仍见感染迹象，中央可见较多鲜红肉芽组织填充，周围组织水肿仍较明显，创面面积回缩较空白组多；

本申请制备的敷料组大鼠创面相对较干结，不湿润，没有分泌物，创面组织呈暗红色，创面面积较前明显回缩，未见感染迹象。见图4。

术后14天，空白自愈组个别大鼠伤口创面快愈合，其余大鼠伤口创面仍未愈合，创面干净，鲜红肉芽组织完全填充创面，周围可见明显新生上皮，无感染迹象；

无白芨胶的中药组合物的提取物组大鼠个别尚未愈合，其余愈合，新生上皮已部分覆盖伤口创面组织；

本申请制备的敷料组大鼠伤口创面全部愈合，肉芽组织鲜红，新生上皮完全覆盖创面组织。见图5。

依据创面愈合率计算公式得到不同组的各组创面不同时间愈合率(％)

空白自愈组的3d、7d、14d的愈合率分别为32.42±2.88、55.48±3.37、87.61±0.92；

无白芨胶的中药组合物的提取物组的3d、7d、14d的愈合率分别为34.17±2.81、66.54±2.59*、96.00±0.88*；

本申请制备的敷料组的3d、7d、14d的愈合率分别为38.11±2.16、88.38±4.99*、99.47±0.38*。其中“*”表示与空白组对比，P<0.05。

由上述数据可知，造模后3天，三组大鼠创面愈合率的比较无显著性意义(P>0.05)；造模后7d、14d，无白芨胶的中药组合物的提取物组、本申请制备的敷料组大鼠创面愈合率与空白自愈组大鼠的创面愈合率比较均具有显著性差(P>0.05)，表明无药白芨胶和中药多组分愈创敷料均具有促进创面愈合的作用；而无白芨胶的中药组合物的提取物组与本申请制备的敷料组大鼠创面愈合率的比较亦有显著性差异(P>0.05)，表明本研究制备的中药多组分愈创敷料具有促进伤口创面愈合的功效。

另外通过光镜进行组织学观察得到如下结果：

第3天创面肉芽组织显微形态比较

(1)空白自愈组：表层有坏死组织，炎细胞浸润较少，以中性粒细胞、浆细胞、单核细胞等为主，细胞间质疏松水肿，未见明显的新生毛细血管和成纤维细胞增生。

(2)无白芨胶的中药组合物的提取物组：表层少见坏死组织，炎性细胞较少，以巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞为主，细胞间质较疏松，未见明显新生毛细血管和成纤维细胞增生。

(3)本申请制备的敷料组：炎性细胞少，以中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等为主，细胞间质较疏松，有少量新生纤维细胞增生。

第7天创面肉芽组织显微形态比较

(1)空白自愈组：炎性细胞增多，以巨噬细胞、淋巴细胞为主，可见少量成纤维细胞增生和新生毛细血管，细胞间质疏松。

(2)无白芨胶的中药组合物的提取物组：炎细胞减少，成纤维细胞增生较快，数量较多，细胞核大，可见较多毛细血管增生。

(3)本申请制备的敷料组：未见炎细胞，成纤维细胞增生明显，胶原纤维数量较多，可见较多毛细血管增生。

第14天创面肉芽组织显微形态比较

(1)空白自愈组：炎性细胞数量减少，成纤维细胞增多，胶原纤维增多，毛细血管增生，细胞间质仍疏松水肿。

(2)无白芨胶的中药组合物的提取物组：炎性细胞少，成纤维细胞增生明显，胶原纤维增多，排列较为紧密，毛血细胞增生较多，扩张充血。

(3)本申请制备的敷料组：无炎性细胞，胶原纤维呈束状排列，新生毛细血管多，扩张充血。

综上，本申请的一种中药多组分液体愈创敷料以白芨胶作为成膜材料，代替现有化学成膜剂，无毒无刺激，可降解，能够消炎止血、快速成膜、保护伤口，并且具有可降解、生物兼容性好、毒性低、可再生的优点，另外加入白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连的提取物，具有抗菌消炎、止血祛瘀、消肿定痛等功效。而且制备工艺的路线和参数具备严谨的科学性，无论是从工艺放大生产、成本控制还是提取效率而言，均具有合理性、科学性、可行性。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (6)

1.一种中药多组分液体愈创敷料，其特征在于，包括以下组分：中药组合物的提取物、成膜剂、甘油、戊二醛、紫草油、蒸馏水、乙醇,所述成膜剂为白芨胶；

其中所述中药组合物包括：

白芨 10g

三七 15g

紫珠 15g

蒲黄 10g

川芎 10g

鼠妇 10g

黄连 10g；

其中三七、紫珠草为方中君药，白芨、蒲黄、川芎为方中臣药，鼠妇、黄连为佐药。

2.根据权利要求1所述的一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，其特征在于，

D1，取制备好的白芨胶加入乙醇、蒸馏水充分搅拌混合；

D2，加入甘油、紫草油，充分搅拌混合；

D3，加入中药组合物的提取物，充分搅拌混合；

D4，加入戊二醛，充分搅拌混合；

D5，铺膜然后在零下20度环境维持24h；

D6，真空液化35h，按规格打包密封；

所述中药组合物的提取物通过以下步骤制备：

S1，取处方量药材白芨、三七、紫珠、蒲黄、川芎、鼠妇、黄连置于容器中；

S2，向容器中加入八倍重量的70%的乙醇，回流提纯2次，每次2h；

S3，合并2次提取液，静置过滤，取滤液，蒸发浓缩得到中药组合物的提取物的浓缩药液。

3.根据权利要求2所述的一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，其特征在于，所述白芨胶通过以下步骤制备：

M1，取预处理所得白芨粉末置于容器中，保鲜膜封口，超声波提取，抽滤，重复3次，合并抽滤得到的滤液；

M2，将上步所得的滤液，放入圆底烧瓶中旋转蒸发，温度为80℃，转速80r/min，浓缩至黏稠，得到初步浓缩液；

M3，用Sevag法去除初步浓缩液中的游离蛋白，加入氯仿－正丁醇混合液，剧烈震荡后静置30min使反应充分，然后6000r/min离心5min，重复6次，弃沉淀，合并上清液；

M4，将上清液置于圆底烧瓶，旋转蒸发至黏稠，温度为40℃，转速80r/min，得到浓缩液；

M5，向浓缩液中加入3倍体积的95%乙醇，析出大量白色絮状沉淀，静置过夜，使沉淀完全，抽滤后将沉淀物置于烘干箱60℃中真空干燥，即得白芨胶。

4.根据权利要求3所述的一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，其特征在于，所述超声波提取的提取温度为80℃，频率为100Hz，每次30min。

5.根据权利要求3所述的一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，其特征在于，步骤M3中，浓缩液、氯仿、正丁醇的比例控制为25∶5∶1。

6.根据权利要求2所述的一种中药多组分液体愈创敷料的制备方法，其特征在于，步骤S3中，浓缩药液的浓度1.9g生药/ml。

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