CN113952461A - 一种仿中性粒细胞纳米递药系统及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种仿中性粒细胞纳米递药系统，所述纳米递药系统具有磷脂双分子层结构，由刺激因子刺激后的激活态中性粒细胞膜和磷脂分子交互融合后制备得到，粒径为100～300nm。本发明还还公开了仿中性粒细胞纳米递药系统的制备方法和应用。该具有“膜‑膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统，充分结合了脂质体和细胞载体的优势而规避了各自存在的缺点，利用脂质体装载药物克服细胞载体载药困难的缺点，利用激活态中性粒细胞膜赋予了脂质体主动靶向的能力，两者结合有利于实现药物向炎症部位的精准递送，改善治疗效果的同时减轻毒副作用，具有广大的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及细胞仿生药物递送体系构建领域，具体涉及一种仿中性粒细胞纳米递药系统及其制备方法和应用。
背景技术
炎症相关疾病，如恶性肿瘤、细菌感染等，是威胁人类健康的一个重要因素。对于炎症相关疾病的治疗，当前临床上仍以系统性药物治疗为主。然而，由于缺乏对病灶的特异性识别，系统性药物治疗较易引起全身性毒副作用；且分布于病灶部位的药物浓度如低于治疗限则易造成耐药性的产生，会对以恶性肿瘤、细菌感染为代表的炎症相关疾病的后续治疗造成巨大的困难。因此，实现药物向病灶的有效递送是提高炎症相关疾病治疗效果，降低药物毒副作用的有效途径。
迄今为止，通过各种手段构建的药物递送载体不胜枚举。其中，由于具有较好的生物相容性、可修饰性以及对炎症部位具有被动靶向等优点，脂质体已成为药物递送载体研究中经久不衰的焦点。然而，脂质体在体内循环中易被快速清除，且其被动靶向效率主要依赖于其自身的尺寸效应，靶向效果有待进一步提高。如公开号为CN111920768A的中国专利公开了一种包载分子靶向药物的脂质体及其在制备治疗肿瘤药物中的用途。本发明的分子靶向药物脂质体由分子靶向药物、脂质体成分如磷脂、胆固醇、mPEG-DSPE和/或靶向分子修饰的PEG-DSPE等组成。该发明通过主动或被动载药方式将分子靶向药物包载入脂质体内水相或磷脂双分子层制备而成，可实现对肿瘤靶向递药，显著增强分子靶向药物抗肿瘤尤其是抗脑部肿瘤的效果。进一步所述分子靶向药物脂质体与药学上可接受的药用成分和/或稀释剂的组合制成各种剂型，用于靶向治疗肿瘤，具有潜在临床应用价值。
近年来，研究者们在探寻或设计高效、安全的疾病靶向载体时，关注到一些细胞在体内具有对炎性组织的特异性趋向作用，如间充质干细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。其中，中性粒细胞占白细胞的60-70％，是外周血循环和免疫系统中含量最丰富的白细胞。中性粒细胞表面的趋化因子受体能够与炎症部位微环境中的趋化因子特异性结合，从而实现向炎症部位的主动富集。以这些细胞作为载体可携载药物用于对炎症相关疾病的靶向治疗。如公开号为CN104225609A的中国专利公开了一种炎症靶向的中性粒细胞递药系统及其应用。所述的递药系统由中性粒细胞以及以直接或间接地方式载到中性粒细胞内或表面的治疗性物质或者检测性物质组成。该发明将中性粒细胞作为药物的载体，能够将药物主动靶向到炎症部位，提高药物在炎症部位的浓度。到达炎症部位的中性粒细胞在细胞因子的刺激下，异常激活，快速解体以“天网”形式死亡，有利于将所荷载的药物快速释放到靶部位，提高治疗效果，降低毒副作用。然而，细胞载体在制备、载药、储存等环节要求较高，且其载药量相对较低，整体成本较高。此外，由于细胞载体仍具有一定活性，在体内循环中可能存在一定的安全隐患。
因此，如何进一步提高递药系统的治疗效果是目前本领域亟需解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种仿中性粒细胞纳米递药系统及其制备方法和应用，该仿中性粒细胞纳米递药系统可克服细胞载体存在的载药困难，且具有类似中性粒细胞向炎症部位的特异性分布特性，从而避免药物在全身的非特异性分布可能造成的不良反应，提高药物对炎症相关疾病的靶向治疗效果。
本发明提出的技术方案为：
一种仿中性粒细胞纳米递药系统(具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统)，具有磷脂双分子层结构，由刺激因子刺激后的激活态中性粒细胞膜和磷脂分子交互融合后制备得到。
优选的，所述纳米递药系统的粒径为100～300nm；
上述技术方案中，具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统由脂质体的类膜与经刺激因子刺激后的激活态中性粒细胞膜交互融合形成，利用了两种膜成分的相容性来将两者融合，具有向炎症部位靶向递送药物的作用。所构建的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统充分结合了两个成分的优势：一方面，脂质体结构能够克服细胞载体载药困难，提高载药量；另一方面，经刺激因子刺激后的激活态中性粒细胞膜保留了中性粒细胞向炎症趋向的主要功能蛋白，赋予整个递药系统具有类似中性粒细胞的炎症趋向特性。
优选的，所述刺激因子选自脂多糖、肿瘤坏死因子-α、趋化因子CXCL2、转化生长因子-β、干扰素-β、干扰素-γ、粒细胞巨噬细胞刺激因子中的一种或多种。
优选的，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或多种。
本发明还提供一种如上述的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备方法，包括如下步骤：
1)将磷脂溶于乙醇或氯仿，采用薄膜分散法或逆向蒸发法制备脂质体。
2)从小鼠骨髓或血液中提取中性粒细胞，在体外经刺激因子刺激后得到激活态中性粒细胞。
3)对步骤2)中得到的激活态中性粒细胞采用反复冻融法并通过离心得到激活态中性粒细胞膜。
4)将步骤1)中得到的脂质体与步骤3)中得到激活态中性粒细胞膜混合，采用超声法使两者交互融合，得到具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。
优选的，所述步骤1)中薄膜分散法或逆向蒸发法可以采用现有的方法，根据需要携载的药物的亲疏水性选择合适的方法以保证载药量。
优选的，所述步骤2)中提取中性粒细胞的具体过程：收集小鼠骨髓或中间血沉棕黄层，用200目细胞筛过滤，经红细胞裂解液裂解后，采用Percoll密度梯度分离法进行分离纯化，收集78％与65％界面处及78％上层部分，PBS洗涤重悬后，即得中性粒细胞。进一步优选，Percoll密度梯度分离法的离心速度为1600g，离心时间为30min，离心温度为室温。
优选的，所述步骤2)中在体外用刺激因子刺激中性粒细胞具体过程：将分离得到的中性粒细胞分散于RPMI.1640培养基中，加入刺激因子，调整其浓度为10～1000μg/107个细胞，于37℃条件下刺激3～12h后，用磷酸缓冲液洗涤3次，即得到激活态中性粒细胞。不同刺激因子对应的刺激浓度不同，且刺激时间过短不利于激活中性粒细胞，而刺激时间过长有可能影响细胞活性。
优选的，所述步骤3)中收集激活态中性粒细胞膜的具体过程：将激活态中性粒细胞放入液氮中30～60s后置于37℃水浴中5min复融，如此反复3次后，转移至玻璃匀浆器于冰上匀浆10～100次。随后，将匀浆液离心(20000g，30min，4℃)，弃去沉淀后将上清液再次离心(100000g，30min，4℃)并收集沉淀，即得到激活态中性粒细胞膜。
优选的，步骤4)所述脂质体与激活态中性粒细胞膜的混合比例为1:0.1～2(磷脂：蛋白，质量比)。激活态中性粒细胞膜的含量会直接影响具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的靶向能力，且不同混合比对递药系统的粒径和电位均有一定影响，会间接影响其靶向能力。进一步优选的，脂质体与激活态中性粒细胞膜的混合比例为1:0.5(磷脂：蛋白，质量比)。
优选的，步骤4)所述超声法超声功率为60～200W，每工作3s，休息2s，总工作时间为1～6min。超声功率和时长会影响具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统中两种膜成分的融合程度、粒径大小以及产品的稳定性。进一步优选的，超声功率为100W，总工作时间为3min。
本发明还提供一种如上述的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统在炎症相关疾病药物靶向递送中的应用。由于其具有类似中性粒细胞的炎症趋向特性，因而可以用于实现对炎症相关疾病的药物靶向递送，提高治疗效果，降低相应毒副作用。
优选的，所述炎症相关疾病为原发性肿瘤、转移瘤、脊髓损伤、糖尿病足、细菌感染、关节炎中的一种。
同现有技术相比，本发明的有益效果体现在：
(1)本发明利用了脂质体类膜和激活态中性粒细胞膜两种膜成分的相容性，构建了具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统，所涉及的制备方法简便，条件可控，具有良好的临床转化可能性。
(2)本发明中的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统，充分结合了脂质体和细胞载体的优势而规避了各自存在的缺点，利用脂质体装载药物克服细胞载体载药困难的缺点，利用激活态中性粒细胞膜赋予了脂质体主动靶向的能力，两者结合有利于实现药物向炎症部位的精准递送，改善治疗效果的同时减轻毒副作用，具有广大的应用前景。
附图说明
图1为实施例4中制备的不同比例的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的粒径和电位检测结果，其中a为粒径检测结果图，b为电位检测结果图。
图2为实施例4中制备的不同比例的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的脂质体类膜与激活态中性粒细胞膜的共定位结果图。
图3为实施例4中以1:0.5这一比例制备的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统表面总蛋白含量定性检测结果图。
图4为实施例4中以1:0.5这一比例制备的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统与同含量脂质体或中性粒细胞囊泡的粒径对比图。
图5为实施例4中以1:0.5这一比例制备的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统与同含量脂质体或中性粒细胞囊泡的电位对比图。
图6实施例4中以1:0.5这一比例制备的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的透射电镜图。
图7为应用例1中具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统在非小细胞肺癌皮下移植瘤模型上对肿瘤的靶向能力。
图8为应用例2中具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统在黑色素瘤肺转移动物模型上对肿瘤的靶向能力。
图9为应用例3中具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统对肺部金黄色葡萄球菌感染的靶向能力。
具体实施方式
下面结合具体实施例和说明书附图对本发明作进一步说明。
实施例1：激活态中性粒细胞的制备与收集
1)在无菌条件下，将ICR小鼠(6周龄)脱颈处死后分离其股骨和胫骨。随后暴露骨髓腔，使用一次性无菌带针注射器吸取新鲜RPMI.1640培养液反复冲洗骨髓腔，直至骨头呈白色半透明。冲洗完毕后，将冲洗液经200目细胞筛过滤并转移至离心管中，离心(1700rpm，5min)收集细胞。
2)加入3～5倍体积的红细胞裂解液，裂解1～2min后离心收集细胞，并用一定体积的磷酸缓冲液离心(1700rpm，3min)洗涤2次，最后加入2mL PBS重悬制成细胞悬液。采用Percoll不连续密度梯度离心法对中性粒细胞进行分离纯化。将Percoll原液用1.5M NaCl按体积比为9:1稀释得100％Percoll分离液，并用0.15M NaCl按比例稀释分别得到78％、65％和55％的Percoll分离液。取15mL离心管，用胎牛血清对其管壁进行润洗，依次将78％、65％和55％的Percoll分离液沿管壁加入到离心管中制备梯度。最后，将细胞悬液沿管壁缓加入到梯度上方。在室温下以1600g的转速离心30min后，收集78％与65％Percoll界面处及78％Percoll上层部分。加入适量体积PBS离心洗涤(1700rpm，3min)2次，计数后分散于RPMI.1640培养液中。
3)调整细胞浓度，加入脂多糖，使体系中最终浓度为浓度为100μg/107个细胞/mL，于37℃条件下刺激4h后。随后用磷酸缓冲液洗涤3次，即得到经脂多糖刺激的激活态中性粒细胞。
实施例2：激活态中性粒细胞的制备与收集
1)在无菌条件下，经眼静脉丛采血，用含EDTA的抗凝管收集小鼠血液。随后，将全血进行离心(3220g，5min，4℃)，取中间血沉棕黄层，用PBS稀释至2mL。
2)加入3～5倍体积的红细胞裂解液，裂解1～2min后离心收集细胞，并用一定体积的磷酸缓冲液离心(1700rpm，3min)洗涤2次，最后加入2mL PBS重悬制成细胞悬液。采用Percoll不连续密度梯度离心法对中性粒细胞进行分离纯化。将Percoll原液用1.5M NaCl按体积比为9:1稀释得100％Percoll分离液，并用0.15M NaCl按比例稀释分别得到78％、65％和55％的Percoll分离液。取15mL离心管，用胎牛血清对其管壁进行润洗，依次将78％、65％和55％的Percoll分离液沿管壁加入到离心管中制备梯度。最后，将细胞悬液沿管壁缓加入到梯度上方。在室温下以1600g的转速离心30min后，收集78％与65％Percoll界面处及78％Percoll上层部分。加入适量体积PBS离心洗涤(1700rpm，3min)2次，计数后分散于RPMI.1640培养液中。
3)调整细胞浓度，加入脂多糖，使体系中最终浓度为浓度为100μg/107个细胞/mL，于37℃条件下刺激4h后。随后用磷酸缓冲液洗涤3次，即得到经脂多糖刺激的激活态中性粒细胞。
实施例3：激活态中性粒细胞的制备与收集
1)在无菌条件下，将ICR小鼠(6周龄)脱颈处死后分离其股骨和胫骨。随后暴露骨髓腔，使用一次性无菌带针注射器吸取新鲜RPMI.1640培养液反复冲洗骨髓腔，直至骨头呈白色半透明。冲洗完毕后，将冲洗液经200目细胞筛过滤并转移至离心管中，离心(1700rpm，5min)收集细胞。
2)加入3～5倍体积的红细胞裂解液，裂解1～2min后离心收集细胞，并用一定体积的磷酸缓冲液离心(1700rpm，3min)洗涤2次，最后加入2mL PBS重悬制成细胞悬液。采用Percoll不连续密度梯度离心法对中性粒细胞进行分离纯化。将Percoll原液用1.5M NaCl按体积比为9:1稀释得100％Percoll分离液，并用0.15M NaCl按比例稀释分别得到78％、65％和55％的Percoll分离液。取15mL离心管，用胎牛血清对其管壁进行润洗，依次将78％、65％和55％的Percoll分离液沿管壁加入到离心管中制备梯度。最后，将细胞悬液沿管壁缓加入到梯度上方。在室温下以1600g的转速离心30min后，收集78％与65％Percoll界面处及78％Percoll上层部分。加入适量体积PBS离心洗涤(1700rpm，3min)2次，计数后分散于RPMI.1640培养液中。
3)调整细胞浓度，加入肿瘤坏死因子-α，使体系中最终浓度为浓度为10μg/107个细胞/mL，于37℃条件下刺激8h后。随后用磷酸缓冲液洗涤3次，即得到经肿瘤坏死因子-α刺激的激活态中性粒细胞。
实施例4：具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备与表征
1)将激活态中性粒细胞(按照实施例1制备得到)在液氮和37℃水浴中反复冻融3次，转移至玻璃匀浆器于冰上匀浆20次。随后，将匀浆液离心(20000g，25min，4℃)，弃去沉淀后将上清液再次离心(100000g，35min，4℃)并收集沉淀，即得激活态中性粒细胞膜，通过蛋白检测试剂盒测定其蛋白浓度。
2)称取大豆卵磷脂8.4mg，加入20mL无水乙醇完全溶解后，在30℃条件下进行旋蒸2h。随后，向其中加入一定体积的磷酸缓冲液。水浴超声片刻后，分别调节激活态中性粒细胞膜的浓度(以蛋白量为计)和大豆卵磷脂的浓度，以1:0、1:0.25、1:0.5、1:0.75和0:1的比例(大豆卵磷脂和细胞膜蛋白质量比)将两者进行混合。冰浴条件下对混合液进行探头超声整粒，超声功率为100W，工作3s、休息2s，总工作时间为3min，最终得到不同比例的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。
3)利用粒径电位测定仪对制备得到不同比例的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的粒径和Zeta电位进行检测，检测结果见图1。粒径范围为150～300nm，且随着细胞膜加入量的提高，粒径逐渐增加；电位呈负值，随着细胞膜比例的增大，电位绝对值逐渐增大。
4)用荧光染料DiO标记激活态中性粒细胞膜，用荧光染料DiD标记大豆卵磷脂，得到不同比例的经荧光标记的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。将其与A549细胞在37℃条件下共孵育2h后，用荧光染料DAPI对细胞核染色，通过激光扫描共聚焦显微镜观察脂质体类膜与激活态中性粒细胞膜的融合情况，观察结果见图2。当加入细胞膜的比例增加时，DiO与DiD的荧光共定位比例逐渐增加；当比例增加至1:0.5时，两者基本上能完全共定位。
5)选定1:0.5的比例，将激活态中性粒细胞膜、具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统和空白脂质体用十二烷基硫酸钠溶解，经PAGE凝胶电泳之后采用考马斯亮蓝染色法对膜蛋白的完整性进行表征，结果见图3。具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统能够完整保留中性粒细胞膜的膜蛋白成分，具有开发广泛应用的功能性基础。
6)选定1:0.5的比例，对脂质体、具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统和中性粒细胞膜囊泡的粒径和电位进行比较，并通过透射电镜对中性粒细胞膜嵌合仿生纳米递药系统的形貌特征进行观察，见图4-6。当投料比为1:0.5时，具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的粒径约为200nm，Zeta电位约为-9mV，具有明显的脂双层结构。
实施例5：具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备
1)将激活态中性粒细胞(按照实施例1制备得到)在液氮和37℃水浴中反复冻融3次，转移至玻璃匀浆器于冰上匀浆20次。随后，将匀浆液离心(20000g，25min，4℃)，弃去沉淀后将上清液再次离心(100000g，35min，4℃)并收集沉淀，即得激活态中性粒细胞膜，通过蛋白检测试剂盒测定其蛋白浓度。
2)称取蛋黄卵磷脂10mg，加入21mL氯仿完全溶解后，加入7mL水，经探头超声形成均匀稳定的乳剂后，在40℃下进行减压旋蒸至形成预脂质体，随后加入3mL磷酸缓冲液，继续旋蒸约30min，得到脂质体。随后，分别调节激活态中性粒细胞膜的浓度(以蛋白量为计)和大豆卵磷脂的浓度，以一定比例将两者进行混合。冰浴条件下对混合液进行探头超声整粒，超声功率为100W，工作3s、休息2s，总工作时间为3min，最终得到不同比例的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。
应用例1：具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统对炎症相关疾病的靶向作用
非小细胞肺癌皮下移植瘤模型：取BALB/c裸鼠(4-6周龄)，将1×107个A549细胞接种于裸鼠皮下，14天后选取皮下移植瘤生长情况和程度相近的裸鼠6只分成2组。
选用吲哚菁绿(ICG)作为模型药物，通过pH梯度法将其携载到具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统(实施例4中制备得到，比例为1:0.5)中。向构建成功的非小细胞肺癌皮下移植瘤模型裸鼠分别经尾静脉注射载有ICG的脂质体和具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。给药后第12、24和48h，将裸鼠麻醉后进行心脏灌流，取肿瘤组织，通过小动物活体成像系统观察荧光信号分布，实验结果如图7所示，在各个时间点，相较空白脂质体，具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统在肿瘤组织中的荧光信号均较强，说明其良好的靶向性。
应用例2：具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统对炎症相关疾病的靶向作用
黑色素瘤肺转移模型：取C57BL6小鼠(6周龄)，经尾静脉注射luc-B16F10细胞(2×105个/只)，第7天时进行生物发光成像检测，选取肺转移瘤生长情况和程度相近的6只小鼠分成2组。
选用吲哚菁绿(ICG)作为模型药物，通过pH梯度法将其携载到具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统(实施例4中制备得到，比例为1:0.5)中。向构建成功的黑色素瘤肺转移模型小鼠分别经尾静脉注射载有ICG的脂质体和具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。给药后第12、24h，将小鼠麻醉后进行心脏灌流，取肺部通过小动物活体成像系统观察荧光信号分布，实验结果如图8所示，在各个时间点，相较空白脂质体，具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统在肺部的荧光信号均较强，说明其良好的靶向性。应用例3：具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统对炎症相关疾病的靶向作用
金黄色葡萄球菌肺部感染模型：取C57BL6小鼠(6周龄)将小鼠麻醉后仰卧位固定，在颈部切开一道小口，经钝性分离暴露气管后，用注射器向气管内注射金黄色葡萄球菌菌液，随后将切口缝合，即得金黄色葡萄球菌肺部感染模型。
选用吲哚菁绿(ICG)作为模型药物，通过pH梯度法将其携载到具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统(实施例4中制备得到，比例为1:0.5)中。在构建模型后3h时，向构建成功的金黄色葡萄球菌肺部感染模型模型小鼠分别经尾静脉注射载有ICG的脂质体和具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统；同时选取健康小鼠分别经尾静脉注射载有ICG的具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统作为对照。给药后第24，将小鼠麻醉后进行心脏灌流，取肺部，通过小动物活体成像系统观察荧光信号分布，实验结果如图9所示。根据分布结果可知，在部细菌感染急性炎症期，具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统对肺部具有明显趋向性。
以上所述实施例对本发明的技术方案和有益效果进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改，补充和等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种仿中性粒细胞纳米递药系统，其特征在于，所述纳米递药系统具有磷脂双分子层结构，由刺激因子刺激后的激活态中性粒细胞膜和磷脂分子交互融合后制备得到。
2.根据权利要求1所述的仿中性粒细胞纳米递药系统，其特征在于，所述纳米递药系统的粒径为100～300nm。
3.根据权利要求1所述的仿中性粒细胞纳米递药系统，其特征在于，所述刺激因子选自脂多糖、肿瘤坏死因子-α、趋化因子CXCL2、转化生长因子-β、干扰素-β、干扰素-γ、粒细胞巨噬细胞刺激因子中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的仿中性粒细胞纳米递药系统，其特征在于，所述磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或多种。
5.一种制备权利要求1-4任一所述的仿中性粒细胞纳米递药系统的方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
1)将磷脂溶于乙醇或氯仿，采用薄膜分散法或逆向蒸发法制备脂质体；
2)从小鼠骨髓或血液中提取中性粒细胞，在体外经刺激因子刺激后得到激活态中性粒细胞；
3)对步骤2)中得到的激活态中性粒细胞采用反复冻融法并通过离心得到激活态中性粒细胞膜；
4)将步骤1)中得到的脂质体与步骤3)中得到激活态中性粒细胞膜混合，采用超声法使两者交互融合，得到具有“膜-膜”融合结构的仿中性粒细胞纳米递药系统。
6.根据权利要求5所述的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中提取中性粒细胞的具体过程：收集小鼠骨髓或中间血沉棕黄层，用200目细胞筛过滤，经红细胞裂解液裂解后，采用Percoll密度梯度分离法进行分离纯化，收集78％与65％界面处及78％上层部分，PBS洗涤重悬后，即得中性粒细胞；
所述步骤2)中在体外用刺激因子刺激中性粒细胞具体过程：将分离得到的中性粒细胞分散于RPMI.1640培养基中，加入刺激因子，调整其浓度为10～1000μg/107个细胞，于37℃条件下刺激3～12h后，用磷酸缓冲液洗涤3次，即得到激活态中性粒细胞。
7.根据权利要求5所述的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中收集激活态中性粒细胞膜的具体过程：将激活态中性粒细胞放入液氮中30～60s后置于37℃水浴中5min复融，如此反复3次后，转移至玻璃匀浆器于冰上匀浆10～100次；随后，将匀浆液离心(20000g，30min，4℃)，弃去沉淀后将上清液再次离心(100000g，30min，4℃)并收集沉淀，即得到激活态中性粒细胞膜。
8.根据权利要求5任一所述的仿中性粒细胞纳米递药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中脂质体与激活态中性粒细胞膜的混合比例为1:0.1～2，所述混合比例为磷脂与蛋白的质量比。
9.一种根据权利要求1-4任一所述的仿中性粒细胞纳米递药系统在制备治疗炎症相关疾病药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的仿中性粒细胞纳米递药系统的应用，其特征在于，所述炎症相关疾病为原发性肿瘤、转移瘤、脊髓损伤、糖尿病足、细菌感染、关节炎中的一种。
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