CN113950484A - 三特异性结合蛋白、其方法和用途 - Google Patents

三特异性结合蛋白、其方法和用途 Download PDF

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Abstract

本文提供了三特异性和/或三价结合蛋白，其包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，所述三个抗原结合位点特异性结合一种或多种靶蛋白，其中形成所述结合蛋白的第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域，并且其中第二对多肽拥有形成单一抗原结合位点的单一可变结构域。在一些实施方案中，所述结合蛋白包含结合CD28多肽的结合位点、结合CD3多肽的结合位点和结合第三多肽，如肿瘤靶蛋白的结合位点。本公开文本还涉及用于制备三特异性和/或三价结合蛋白的方法和此类结合蛋白的用途。

Description

三特异性结合蛋白、其方法和用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2019年4月9日提交的美国临时申请号62/831,572和2019年10月8日提交的欧洲申请号EP19306311.2的优先权，其各自的公开内容通过引用以其全文并入本文。
ASCII文本文件序列表的提交
将以下提交的ASCII文本文件的内容通过引用以其全文并入本文：计算机可读形式(CRF)的序列表(文件名：183952032040SEQLIST.TXT，记录日期：2020年4月6日，大小：526KB)。
技术领域
本公开文本涉及三特异性和/或三价结合蛋白，其包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，所述三个抗原结合位点特异性结合一种或多种靶蛋白，其中形成所述结合蛋白的第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域。本公开文本还涉及用于制备三特异性和/或三价结合蛋白的方法和此类结合蛋白的用途。
背景技术
基于单克隆抗体的生物治疗剂已成为新药开发的重要途径。单克隆抗体技术提供针对特定细胞群的特异性靶向、精确的信号传导递送和/或有效载荷，并且通过其Fc功能提供持久的生物学作用。抗体工程学方面的努力已允许开发将两种单克隆抗体的特异性相组合的双特异性抗体，以用于各种生物学应用，从而扩大了抗体药物开发的范围。新发现的具有改善的广度和效力的中和抗体可以为开发用于治疗复杂的疾病(如癌症、关节炎、和/或炎性障碍)的生物治疗剂提供更多选择。
免疫肿瘤学是一种有前途、新兴的用于癌症的疾病管理的治疗性方法。免疫系统是抵抗癌症发展和进展的第一道防线。现在有大量证据表明，T细胞能够在疾病的早期和晚期控制肿瘤生长并延长癌症患者的生存期。然而，对肿瘤具有特异性的T细胞可能在许多方面受到限制，从而妨碍其控制疾病。
作为人适应性免疫的一部分，T细胞免疫在控制病毒感染和癌症方面具有关键作用，可能消除感染细胞和恶性细胞，从而导致病毒感染的清除或癌症的治愈。在如疱疹病毒感染(HSV、CMV、EBV等)、HIV和HBV的慢性感染性疾病中，病毒通过包括免疫抑制、T细胞消耗和潜伏期建立在内的多种机制在人体内建立其持久性。然而，病毒感染通常诱导包括抗原特异性CD8 T细胞的病毒抗原特异性免疫，所述抗原特异性CD8 T细胞可以容易地识别感染细胞，用于通过细胞因子释放或细胞毒性T细胞(CTL)介导的杀伤过程来进行控制或杀伤。
因此，在体内和/或离体的病毒抗原特异性T细胞激活和/或扩增可以提供针对慢性病毒感染的治疗策略。
本文中引用的所有参考文献，包括专利申请、专利公开和UniProtKB/Swiss-Prot登录号均通过引用以其全文并入本文，如同每个单独的参考文献被具体地且单独地指出通过引用并入。
发明内容
为了满足这些和其他需求，本文提供了形成三个抗原结合位点的三特异性结合蛋白(例如，抗体)。这些结合蛋白可以特异性结合一种、两种或三种抗原靶标或靶蛋白，如CD28、CD3和肿瘤靶蛋白。一些肿瘤表达特异性抗原。例如，HER2扩增和过表达可以在乳腺癌的分子亚型中发现，并且还在胃癌、卵巢癌、肺癌和前列腺癌中发现。T细胞的最佳激活需要两个因素：1.抗原识别和2.共刺激。在使用本文所述的三特异性HER2/CD28xCD3三特异性结合蛋白的情况下，信号1由激动剂抗CD3结合位点提供，并且信号2由激动剂抗CD28结合位点提供。所述三特异性结合蛋白经由HER2、CD38或识别另一种肿瘤靶蛋白的结合位点将T细胞募集至肿瘤，并且经由抗CD3和CD28激活接合的T细胞。所产生的激活诱导所述免疫细胞对附近肿瘤细胞的杀伤潜力。此外，描述抗CD3结合位点具有与人CD3多肽的高亲和力结合并去除了潜在的生产不利因素(例如，脱酰胺化位点)。
本文进一步提供了抗CD38/CD28xCD3三特异性抗体，开发并评价了其在激活T细胞以及随后增殖和/或扩增抗原特异性T细胞方面的潜力。这些三特异性Ab可以有效地在体外扩增CD4和CD8效应和记忆群体，所述群体包括抗原特异性CD8 T中枢记忆细胞和效应记忆细胞。具体地，证明了CMV、EBV、HIV-1、流感特异性CD8中枢记忆细胞和效应记忆细胞的体外扩增。本文所述的抗CD38/CD28xCD3三特异性抗体通过接合CD3/CD28/CD38，从而提供刺激并扩增T细胞的信号传导途径来展现新颖特性，这可以提供治疗慢性感染性疾病(如HSV、CMV、EBV、HIV-1和HBV感染)的有效策略。
为了满足这些和其他需求，本文提供了结合CD38多肽(例如，人和食蟹猴CD38多肽)的结合蛋白，所述结合蛋白包括具有至少一个结合CD38多肽的抗原结合位点的单特异性、双特异性或三特异性结合蛋白。有利地，这些结合蛋白具有将T细胞募集到癌细胞附近，随后激活T细胞并促进经激活的T细胞通过颗粒酶/穿孔素机制杀伤相邻癌细胞的能力，从而提供了与抗CD38抗体如
Figure BDA0003386970950000031
(达雷木单抗(daratumumab))不同的抗肿瘤活性作用方式。此外，结合人和食蟹猴CD38多肽二者的能力使得可易于在临床前毒理学研究中测试结合蛋白，例如以评价其用于以后的临床应用的安全性概况。
在一些实施方案中，本文提供了结合蛋白，其包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成第三抗原结合位点。
在一些实施方案中，所述第一结合位点结合CD28多肽。在一些实施方案中，所述VH1结构域包含：含有GYTFTSYY(SEQ ID NO:49)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGNVNT(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TRSHYGLDWNFDV(SEQ ID NO:51)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL1结构域包含：含有QNIYVW(SEQ ID NO:52)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KAS(SEQ ID NO:53)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQGQTYPY(SEQID NO:54)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH1结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYYIHWVRQAPGQGLEWIGSIYPGNVNTNYAQKFQGRATLTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTRSHYGLDWNFDVWGKGTTVTVSS(SEQ ID NO:91)的氨基酸序列，并且/或者所述VL1结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQNIYVWLNWYQQKPGKAPKLLIYKASNLHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDIATYYCQQGQTYPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:92)的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述VL2结构域的CDR-L1序列包含选自以下的氨基酸序列：QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)、QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)、QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)和QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ IDNO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH2结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列，并且/或者所述VL2结构域包含选自以下的氨基酸序列：DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:96)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ IDNO:97)和DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:98)。在一些实施方案中，所述VH2结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)或QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYASSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:302)的氨基酸序列，并且/或者所述VL2结构域包含选自以下的氨基酸序列：DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:96)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:97)和DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:98)。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：含有SEQ ID NO:302的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ IDNO:96的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:97的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含抗原结合位点，所述抗原结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，所述第三抗原结合位点结合肿瘤靶蛋白。在一些实施方案中，所述肿瘤靶蛋白是CD38多肽(例如，人CD38多肽)。在一些实施方案中，所述肿瘤靶蛋白是HER2多肽(例如，人HER2多肽)。在一些实施方案中，本公开文本的肿瘤靶蛋白包括但不限于A2AR、APRIL、ATPDase、BAFF、BAFFR、BCMA、BlyS、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4(也称为VTCN1)、B7H5、B7H6、B7H7、B7RP1、B7-4、C3、C5、CCL2(也称为MCP-1)、CCL3(也称为MIP-1a)、CCL4(也称为MIP-1b)、CCL5(也称为RANTES)、CCL7(也称为MCP-3)、CCL8(也称为mcp-2)、CCL11(也称为嗜酸性粒细胞趋化因子)、CCL15(也称为MIP-1d)、CCL17(也称为TARC)、CCL19(也称为MIP-3b)、CCL20(也称为MIP-3a)、CCL21(也称为MIP-2)、CCL24(也称为MPIF-2/嗜酸性粒细胞趋化因子-2)、CCL25(也称为TECK)、CCL26(也称为嗜酸性粒细胞趋化因子-3)、CCR3、CCR4、CD3、CD19、CD20、CD23(也称为FCER2，IgE的受体)、CD24、CD27、CD28、CD38、CD39、CD40、CD70、CD80(也称为B7-1)、CD86(也称为B7-2)、CD122、CD137(也称为41BB)、CD137L、CD152(也称为CTLA4)、CD154(也称为CD40L)、CD160、CD272、CD273(也称为PDL2)、CD274(也称为PDL1)、CD275(也称为B7H2)、CD276(也称为B7H3)、CD278(也称为ICOS)、CD279(也称为PD-1)、CDH1(也称为E-钙粘蛋白)、壳多糖酶、CLEC9、CLEC91、CRTH2、CSF-1(也称为M-CSF)、CSF-2(也称为GM-CSF)、CSF-3(也称为GCSF)、CX3CL1(也称为SCYD1)、CXCL12(也称为SDF1)、CXCL13、CXCR3、DNGR-1、外核苷三磷酸二磷酸水解酶1、EGFR、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、Gi24、GITR、GITRL、GM-CSF、Her2、HHLA2、HMGB1、HVEM、ICOSLG、IDO、IFNα、IgE、IGF1R、IL2Rβ、IL1、IL1A、IL1B、IL1F10、IL2、IL4、IL4Ra、IL5、IL5R、IL6、IL7、IL7Ra、IL8、IL9、IL9R、IL10、rhIL10、IL12、IL13、IL13Ra1、IL13Ra2、IL15、IL17、IL17Rb(也称为IL25的受体)、IL18、IL22、IL23、IL25、IL27、IL33、IL35、ITGB4(也称为b4整联蛋白)、ITK、KIR、LAG3、LAMP1、瘦素、LPFS2、II类MHC、MUC-1、NCR3LG1、NKG2D、NTPD酶-1、OX40、OX40L、PD-1H、血小板受体、PROM1、S152、SISP1、SLC、SPG64、ST2(也称为IL33的受体)、STEAP2、Syk激酶、TACI、TDO、T14、TIGIT、TIM3、TLR、TLR2、TLR4、TLR5、TLR9、TMEF1、TNFa、TNFRSF7、Tp55、TREM1、TSLP(也称为IL7Ra的共受体)、TSLPR、TWEAK、VEGF、VISTA、Vstm3、WUCAM、和XCR1(也称为GPR5/CCXCR1)。在一些实施方案中，以上抗原靶标中的一种或多种是人抗原靶标。
在一些实施方案中，所述第三抗原结合位点结合人CD38多肽。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GYTFTSYA(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGQGGT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARTGGLRRAYFTY(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVSSYGQGF(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQNKEDPWT(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GYTLTEFS(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有FDPEDGET(SEQ IDNO:20)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TTGRFFDWF(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVISRF(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQDSNLPIT(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GYAFTTYL(SEQID NO:25)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有INPGSGST(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARYAYGY(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QNVGTA(SEQ ID NO:28)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:29)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQYSTYPFT(SEQ ID NO:30)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GYSFTNYA(SEQ ID NO:31)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有ISPYYGDT(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARRFEGFYYSMDY(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSLVHSNGNTY(SEQ ID NO:34)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有SQSTHVPLT(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARDPGLRYFDGGMDV(SEQ ID NO:39)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGISSY(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQLNSFPYT(SEQ ID NO:42)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARMFRGAFDY(SEQ IDNO:45)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGIRND(SEQ ID NO:46)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有LQDYIYYPT(SEQ ID NO:48)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYAMHWVKEAPGQRLEWIGYIYPGQGGTNYNQKFQGRATLTADTSASTAYMELSSLRSEDTAVYFCARTGGLRRAYFTYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:79)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIVLTQSPATLSLSPGERATISCRASQSVSSYGQGFMHWYQQKPGQPPRLLIYGASSRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISPLEPEDFAVYYCQQNKEDPWTFGGGTKLEIK(SEQ ID NO:80)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTEFSIHWVRQAPGQGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVIMTEDTSTDTAYMEMNSLRSEDTAIYYCTTGRFFDWFWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:81)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含EIILTQSPAILSLSPGERATLSCRASQSVISRFLSWYQVKPGLAPRLLIYGASTRATGIPVRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDCAVYYCQQDSNLPITFGQGTRLEIK(SEQ ID NO:82)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYAFTTYLVEWIRQRPGQGLEWMGVINPGSGSTNYAQKFQGRVTMTVDRSSTTAYMELSRLRSDDTAVYYCARYAYGYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:83)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNVGTAVAWYQQKPGKSPKQLIYSASNRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQQYSTYPFTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:84)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMYWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYHCARDPGLRYFDGGMDVWGQGTTVTVSS(SEQID NO:87)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIFAASTLHSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSFPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:88)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISGDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARMFRGAFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:89)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISGLQPEDSATYYCLQDYIYYPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:90)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTNYAVHWVRQAPGQGLEWMGVISPYYGDTTYAQKFQGRVTMTVDKSSSTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRFEGFYYSMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:85)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRPSQSLVHSNGNTYLNWYQQRPGQSPKLLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK(SEQID NO:86)的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列或与SEQID NO:156的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列或与SEQ ID NO:157的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:158的氨基酸序列或与SEQ ID NO:158的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:159的氨基酸序列或与SEQ ID NO:159的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ IDNO:160的氨基酸序列或与SEQ ID NO:160的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:161的氨基酸序列或与SEQ ID NO:161的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列或与SEQ ID NO:162的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列或与SEQ ID NO:163的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或与SEQ ID NO:164的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或与SEQ IDNO:165的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列或与SEQ ID NO:166的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列或与SEQ ID NO:167的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:168的氨基酸序列或与SEQ ID NO:168的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ IDNO:169的氨基酸序列或与SEQ ID NO:169的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:170的氨基酸序列或与SEQ ID NO:170的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:171的氨基酸序列或与SEQ IDNO:171的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列或与SEQ ID NO:172的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列或与SEQ ID NO:173的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列或与SEQID NO:174的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ IDNO:175的氨基酸序列或与SEQ ID NO:175的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列或与SEQ ID NO:176的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列或与SEQ ID NO:177的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQID NO:178的氨基酸序列或与SEQ ID NO:178的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:179的氨基酸序列或与SEQ ID NO:179的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:181的氨基酸序列或与SEQ ID NO:181的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列或与SEQ ID NO:182的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列或与SEQ ID NO:183的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列或与SEQ ID NO:184的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列或与SEQ ID NO:185的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列或与SEQ ID NO:186的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列或与SEQ ID NO:187的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQID NO:188的氨基酸序列或与SEQ ID NO:188的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述第三抗原结合位点结合人HER2多肽。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)或GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)、IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)或IYPTNAYT(SEQ IDNO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)、SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)或SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)或QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ IDNO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ IDNO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ IDNO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:73)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:74)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:75)或EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:76)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQID NO:73)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:75)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:74)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQID NO:77)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:76)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:100的氨基酸序列或与SEQID NO:100的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:101的氨基酸序列或与SEQ ID NO:101的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列或与SEQ ID NO:102的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列或与SEQ ID NO:103的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ IDNO:104的氨基酸序列或与SEQ ID NO:104的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列或与SEQ ID NO:105的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列或与SEQ ID NO:106的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列或与SEQ ID NO:107的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列或与SEQ ID NO:112的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列或与SEQ IDNO:113的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或与SEQ ID NO:114的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列或与SEQ ID NO:115的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列或与SEQ ID NO:116的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ IDNO:117的氨基酸序列或与SEQ ID NO:117的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:118的氨基酸序列或与SEQ ID NO:118的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:119的氨基酸序列或与SEQ IDNO:119的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:120的氨基酸序列或与SEQ ID NO:120的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:121的氨基酸序列或与SEQ ID NO:121的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列或与SEQID NO:122的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ IDNO:123的氨基酸序列或与SEQ ID NO:123的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列或与SEQ ID NO:124的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列或与SEQ ID NO:125的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQID NO:126的氨基酸序列或与SEQ ID NO:126的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列或与SEQ ID NO:127的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:128的氨基酸序列或与SEQ ID NO:128的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:129的氨基酸序列或与SEQ ID NO:129的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:130的氨基酸序列或与SEQ ID NO:130的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:131的氨基酸序列或与SEQ ID NO:131的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列或与SEQ ID NO:132的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列或与SEQ ID NO:133的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列或与SEQ ID NO:134的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQID NO:135的氨基酸序列或与SEQ ID NO:135的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列或与SEQ ID NO:136的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列或与SEQ ID NO:137的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQID NO:138的氨基酸序列或与SEQ ID NO:138的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:139的氨基酸序列或与SEQ ID NO:139的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:140的氨基酸序列或与SEQ ID NO:140的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:141的氨基酸序列或与SEQ ID NO:141的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列或与SEQ ID NO:142的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列或与SEQ ID NO:143的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列或与SEQ ID NO:144的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列或与SEQ ID NO:145的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列或与SEQ ID NO:146的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQID NO:147的氨基酸序列或与SEQ ID NO:147的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:148的氨基酸序列或与SEQ ID NO:148的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:149的氨基酸序列或与SEQ ID NO:149的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQID NO:150的氨基酸序列或与SEQ ID NO:150的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:151的氨基酸序列或与SEQ ID NO:151的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列或与SEQ ID NO:152的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列或与SEQ ID NO:153的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列或与SEQ ID NO:154的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列或与SEQ ID NO:155的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列或与SEQ ID NO:286的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列或与SEQ ID NO:287的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:288的氨基酸序列或与SEQ ID NO:288的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQID NO:289的氨基酸序列或与SEQ ID NO:289的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:290的氨基酸序列或与SEQ ID NO:290的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:291的氨基酸序列或与SEQ ID NO:291的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQID NO:292的氨基酸序列或与SEQ ID NO:292的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列或与SEQ ID NO:293的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列或与SEQ ID NO:294的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列或与SEQ ID NO:295的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列或与SEQ ID NO:296的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列或与SEQ ID NO:297的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一多肽链包含SEQ ID NO:298的氨基酸序列或与SEQ ID NO:298的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:299的氨基酸序列或与SEQ ID NO:299的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:300的氨基酸序列或与SEQ ID NO:300的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQID NO:301的氨基酸序列或与SEQ ID NO:301的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在可以与本文所述的任何其他实施方案组合的一些实施方案中，L1、L2、L3或L4中的至少一个独立地为0个氨基酸的长度。在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4各自独立地为零个氨基酸的长度或包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)和GGSGSSGSGG(SEQID NO:71)。在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4各自独立地包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)和GGSGSSGSGG(SEQ ID NO:71)。在一些实施方案中，L1包含序列GQPKAAP(SEQ ID NO:67)，L2包含序列TKGPS(SEQ ID NO:68)，L3包含序列S，并且L4包含序列RT。在一些实施方案中，L1、L2、L3或L4中的至少一个包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。
在可以与本文所述的任何其他实施方案组合的一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A和L235A。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置233-236的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是E233P、F234V、L235A和在236处的缺失。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P和R409K。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG1铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和329的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A、L235A和P329A。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG1铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置298、299和300的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S298N、T299A和Y300S。在一些实施方案中，所述第二多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V；并且其中所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W。在一些实施方案中，所述第二多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W；并且其中所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V。
在一些实施方案中，本文提供了分离的核酸分子，其包含编码以上任一实施方案的结合蛋白的核苷酸序列。在一些实施方案中，本文提供了表达载体，其包含以上任一实施方案的核酸分子。在一些实施方案中，本文提供了分离的宿主细胞，其包含以上任一实施方案的核酸分子或以上任一实施方案的表达载体。在一些实施方案中，所述宿主细胞是哺乳动物细胞或昆虫细胞。
在一些实施方案中，本文提供了药物组合物，其包含以上任一实施方案的结合蛋白和药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，本文提供了预防和/或治疗患者中的癌症的方法，所述方法包括向所述患者给予治疗有效量的以上任一实施方案的至少一种结合蛋白或药物组合物。在一些实施方案中，本文提供了根据以上任一实施方案的结合蛋白或药物组合物，用于在预防和/或治疗患者中的癌症的方法中使用，其中所述方法包括向所述患者给予治疗有效量的所述结合蛋白或药物组合物。在一些实施方案中，本文提供了根据以上任一实施方案的结合蛋白或药物组合物，用于在制造用于预防和/或治疗患者中的癌症的药物中使用。
在一些实施方案中，所述至少一种结合蛋白与化学治疗剂共给予。在一些实施方案中，所述患者是人。
在一些实施方案中，所述第三抗原结合位点结合人CD38多肽，并且其中来自个体或患者的癌细胞表达CD38。在一些实施方案中，癌症是多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症是急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或B细胞淋巴瘤。在一些实施方案中，在给予所述结合蛋白之前，所述患者已经在没有清除期的情况下用达雷木单抗进行治疗。
在一些实施方案中，所述第三抗原结合位点结合人HER2多肽，并且其中来自所述个体或患者的癌细胞表达HER2。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌或非小细胞肺癌(NSCLC)。
在一些实施方案中，本文提供了扩增病毒特异性记忆T细胞的方法，其包括使病毒特异性记忆T细胞与结合蛋白接触，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
在一些实施方案中，本文提供了包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链的结合蛋白，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点，用于在扩增病毒特异性记忆T细胞中使用。
在一些实施方案中，使所述病毒特异性记忆T细胞在体外或离体与所述结合蛋白接触。在一些实施方案中，使所述病毒特异性记忆T细胞与所述结合蛋白接触引起病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
在一些实施方案中，本文提供了扩增T细胞的方法，所述方法包括使T细胞在体外或离体与结合蛋白接触，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
在一些实施方案中，本文提供了包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链的结合蛋白，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点，用于在用于扩增T细胞的方法中使用。
在一些实施方案中，所述T细胞是记忆T细胞或效应T细胞。在一些实施方案中，所述T细胞在其细胞表面上表达嵌合抗原受体(CAR)或包含编码CAR的多核苷酸。
在一些实施方案中，本文提供了用于治疗慢性病毒感染的方法，所述方法包括向有需要的个体或患者给予有效量的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
在一些实施方案中，本文提供了包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链的结合蛋白，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列，并且其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点，所述结合蛋白用于在治疗慢性病毒感染的方法中使用，其中所述方法包括向有需要的个体或患者给予有效量的所述结合蛋白。
在一些实施方案中，所述个体或患者是人。在一些实施方案中，将所述结合蛋白以包含所述结合蛋白和药学上可接受的载体的药物配制品的形式给予至所述个体或患者。在一些实施方案中，所述结合蛋白的给予导致所述个体或患者中病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
在可以与本文所述的任何其他实施方案组合的一些实施方案中，所述记忆T细胞是CD8+或CD4+记忆T细胞。在一些实施方案中，所述记忆T细胞是中枢记忆T细胞(TCM)或效应记忆T细胞(TEM)。
在可以与本文所述的任何其他实施方案组合的一些实施方案中，所述病毒是人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒(HBV)、人乳头瘤病毒(HPV)、爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-barr virus)(EBV)、人泡沫病毒(HFV)、单纯疱疹病毒1(HSV-1)或单纯疱疹病毒2(HSV-2)。
在可以与本文所述的任何其他实施方案组合的一些实施方案中，所述CD28多肽是人CD28多肽，其中所述CD3多肽是人CD3多肽，并且其中所述CD38多肽是人CD38多肽。
在一些实施方案中，本文提供了载体系统，其包含编码以上任一实施方案的结合蛋白的第一、第二、第三和第四多肽链的一种或多种载体。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一多肽链的第一载体、编码结合蛋白的第二多肽链的第二载体、编码结合蛋白的第三多肽链的第三载体和编码结合蛋白的第四多肽链的第四载体。
在一些实施方案中，本文提供了试剂盒，其包括根据以上任一实施方案的结合蛋白的一种、两种、三种或四种多肽链。在一些实施方案中，所述试剂盒进一步包括根据本文所述，例如上述的任何方法或用途使用所述多肽链或结合蛋白的说明书。
在一些实施方案中，本文提供了试剂盒，其包括根据以上任一实施方案的一种、两种、三种或四种多核苷酸。在一些实施方案中，本文提供了多核苷酸的试剂盒，其包含多核苷酸的试剂盒中的一种、两种、三种或四种多核苷酸，所述多核苷酸包含：(a)包含SEQ IDNO:189的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:190的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:191的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:192的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(b)包含SEQ ID NO:193的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQID NO:194的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:195的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:196的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(c)包含SEQ ID NO:197的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:198的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:199的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:200的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(d)包含SEQ ID NO:201的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:202的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:203的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:204的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(e)包含SEQ ID NO:205的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:206的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ IDNO:207的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:208的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(f)包含SEQ ID NO:209的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:210的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:211的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQID NO:212的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(g)包含SEQ ID NO:213的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:214的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:215的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:216的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(h)包含SEQ ID NO:217的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:218的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:219的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:220的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(i)包含SEQ ID NO:221的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:222的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:223的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:224的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(j)包含SEQ ID NO:225的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:226的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:227的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:228的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(k)包含SEQ ID NO:229的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:230的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:231的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:232的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(l)包含SEQ IDNO:233的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:234的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:235的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:236的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(m)包含SEQ ID NO:237的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQID NO:238的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:239的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:240的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(n)包含SEQ ID NO:241的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:242的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:243的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:244的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(o)包含SEQ ID NO:245的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:246的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:247的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:248的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(p)包含SEQ ID NO:249的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:250的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ IDNO:251的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:252的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(q)包含SEQ ID NO:253的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:254的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:255的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQID NO:256的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(r)包含SEQ ID NO:257的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:258的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:259的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:260的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(s)包含SEQ ID NO:261的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:262的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:263的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:264的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(t)包含SEQ ID NO:265的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:266的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:267的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:268的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(u)包含SEQ ID NO:269的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:270的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:271的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:272的多核苷酸序列的第四多核苷酸；或(v)包含SEQ ID NO:273的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:274的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:275的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:276的多核苷酸序列的第四多核苷酸。
应当理解，本文中所描述的各种实施方案的一种、一些或全部特性都可以组合以形成本发明的其他实施方案。本发明的这些和其他方面对于本领域技术人员将变得清楚。本发明的这些和其他实施方案由随后的具体实施方式进行进一步描述。
附图说明
图1A提供了包含四条多肽链的三特异性结合蛋白的示意图，所述四条多肽链形成结合以下三种靶蛋白的三个抗原结合位点：CD28、CD3和HER2。第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域(VH1-VH2和VL2-VL1)，所述双重可变结构域形成识别CD3和CD28的两个抗原结合位点，并且第二对多肽拥有单一可变结构域(VH3和VL3)，所述单一可变结构域形成识别HER2的单一抗原结合位点。图1A中所示的三特异性结合蛋白使用具有“杵臼结构(knob-into-hole)”突变的恒定区，其中杵位于具有单一可变结构域的第二对多肽上。
图1B提供了使用所指示的抗HER2、抗CD3和抗CD28结合结构域的抗CD28/CD3/HER2三特异性抗体变体的结合亲和力的倍数变化(相对于亲本)。3233QQ至QEQ的突变(自上而下)是指引入抗CD3结合位点的VL结构域的残基32-35中的突变(由*指示)；其余的突变被引入曲妥珠单抗(trastuzumab)抗HER2结合位点的VH或VL结构域中(由#指示；根据Kabat编号)。对于抗HER2结合位点中的突变，将突变30Q引入VL结构域中，并且将其余突变引入VH结构域中。通过ELISA测量结合亲和力，并且所提供的值是相对于亲本三特异性抗体。
图1C提供了所指示三特异性抗体与人HER2、人CD28和CD3的结合的结合曲线，如通过ELISA确定的。
图1D提供了对于HER2/CD28xCD3三特异性抗体介导的T细胞激活和HER2+癌细胞杀伤的所提议作用机制。
图2A提供了包含四条多肽链的三特异性结合蛋白的示意图，所述四条多肽链形成结合以下三种靶蛋白的三个抗原结合位点：CD28、CD3和CD38。第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域(VH1-VH2和VL2-VL1)，所述双重可变结构域形成识别CD3和CD28的两个抗原结合位点，并且第二对多肽拥有单一可变结构域(VH3和VL3)，所述单一可变结构域形成识别CD38的单一抗原结合位点。图2A中所示的三特异性结合蛋白使用具有“杵臼结构”突变的IgG4恒定区，其中杵位于具有单一可变结构域的第二对多肽上。
图2B至图2E示出了如通过ELISA所测量，具有所指示抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体对靶抗原人CD38(图2B)、食蟹猴CD38(图2C)、人CD3(图2D)和人CD28(图2E)的结合亲和力。
图3示出了达雷木单抗和具有所指示抗CD38结合结构域的抗CD38单特异性抗体与CD38结合的SPR竞争测定。如果抗体识别CD38上与达雷木单抗所识别表位不同的表位，则所述抗体的注射导致SPR信号增加。如果抗体识别与达雷木单抗重叠的表位，则所述抗体的注射不会增加SPR信号。
图4A至图4B示出了具有所指示抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人多发性骨髓瘤NCI-H929细胞(CD38+/CD28+)的体外细胞杀伤活性。在5nM同种型对照抗体(图4A)或达雷木单抗(图4B)存在下进行测定。在达雷木单抗存在下，三特异性抗体继续展现出细胞杀伤活性。
图5A至图5B示出了具有所指示抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人淋巴瘤OCI-Ly19细胞(CD38+/CD28-)的体外细胞杀伤活性。在5nM同种型对照抗体(图5A)或达雷木单抗(图5B)存在下进行测定。达雷木单抗引起抗CD38/CD28xCD3三特异性抗体的细胞杀伤活性的降低。
图6A至图6J示出了对从CMV感染的供体D收集的PBMC中响应于具有所指示替代性抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体的体外T细胞亚组扩增的表征。使用缺乏CD38VH1抗CD38结合结构域的三特异性抗体作为阴性对照(ΔCD38VH1/ΔCD28sup xΔCD3mid IgG4 FALA)。在所指示的时间点(D3是指第3天；D7是指第7天)测量T细胞群体。在所指示的0.2nM和1nM浓度下测试所指示的三特异性抗体。使用流式细胞术来定量CMV特异性CD8+T细胞(图6A至图6B)、CMV特异性Tcm CD8+细胞(图6C至图6D)和CMV特异性Tem CD8+细胞(图6E至图6F)。此外，在所指示的时间点定量CMV特异性Tcm(图6G至图6H)和Tem(图6I至图6J)CD8+细胞的百分比。所有测试的三特异性抗体均以剂量反应方式以不同的效力和动力学促进了CMV特异性记忆CD8+T细胞的增殖。
图7A至图7J示出了对从CMV感染的供体E收集的PBMC中响应于具有所指示抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4FALA三特异性抗体的体外T细胞亚组扩增的表征。使用缺乏CD38VH1抗CD38结合结构域的三特异性抗体作为阴性对照(ΔCD38VH1/ΔCD28sup xΔCD3mid IgG4 FALA)。在图例中自上而下示出的抗体从左到右示出在图中。在所指示的时间点(D3是指第3天；D7是指第7天)测量T细胞群体。在所指示的0.2nM、1nM和2nM浓度下测试所指示的三特异性抗体。使用流式细胞术来定量CMV特异性CD8+T细胞(图7A至图7B)、CMV特异性Tcm CD8+细胞(图7C至图7D)和CMV特异性Tem CD8+细胞(图7E至图7F)。此外，在所指示的时间点定量CMV特异性Tcm(图7G至图7H)和Tem(图7I至图7J)CD8+细胞的百分比。所有测试的三特异性抗体均以剂量反应方式以不同的效力和动力学促进了CMV特异性记忆CD8+T细胞的增殖。
图8A至图8J示出了对从EBV感染的供体C收集的PBMC中响应于具有所指示替代性抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体的体外T细胞亚组扩增的表征。使用缺乏CD38VH1抗CD38结合结构域的三特异性抗体作为阴性对照(ΔCD38VH1/ΔCD28sup xΔCD3mid IgG4 FALA)。在所指示的时间点(D3是指第3天；D7是指第7天)测量T细胞群体。在所指示的0.2nM和1nM浓度下测试所指示的三特异性抗体。使用流式细胞术来定量EBV特异性CD8+T细胞(图8A至图8B)、CMV特异性Tcm CD8+细胞(图8C至图8D)和CMV特异性Tem CD8+细胞(图8E至图8F)。此外，在所指示的时间点定量EBV特异性Tcm(图8G至图8H)和Tem(图8I至图8J)CD8+细胞的百分比。所有测试的三特异性抗体均以剂量反应方式以不同的效力和动力学促进了CMV特异性记忆CD8+T细胞的增殖。
图9A至图12示出了对从EBV感染的供体D收集的PBMC中响应于具有所指示替代性抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体的体外T细胞亚组扩增的表征。使用缺乏CD38VH1抗CD38结合结构域的三特异性抗体作为阴性对照(ΔCD38VH1/ΔCD28sup xΔCD3mid IgG4 FALA)。在所指示的时间点(D3是指第3天；D7是指第7天)测量T细胞群体。在所指示的0.2nM和1nM浓度下测试所指示的三特异性抗体。使用流式细胞术来定量EBV特异性CD8+T细胞(图9A至图9B)、EBV特异性Tcm CD8+细胞(图9C至图9D)和EBV特异性Tem CD8+细胞(图9E至图9F)。此外，在所指示的时间点定量EBV特异性Tcm(图9G至图10)和Tem(图11至图12)CD8+细胞的百分比。所有测试的三特异性抗体均以剂量反应方式以不同的效力和动力学促进了EBV特异性记忆CD8+T细胞的增殖。
图13A至图13D示出了在移植有体外扩增的人CD3+T细胞的携带ZR-75-1肿瘤的NSG小鼠中肿瘤体积(图13A)和体重(图13B)随时间(天)的变化。以所指示剂量用媒介物或Her2/CD28 x CD3三特异性抗体对10只小鼠的组进行治疗。箭头指示给予天数。肿瘤体积描绘为平均值±SEM，mm3。体重变化描绘为变化％，平均值±SEM。X轴显示植入ZR-75-1细胞后的天数。每个治疗组中的单独小鼠随时间的肿瘤体积(mm3)示出在图13C中。每个治疗组的肿瘤重量(mg)示出在图13D中。**＝p<0.001；***＝p<0.0003(双向ANOVA，对照相对于100和10ug/kg)。
图14A至图14C示出了Her2/CD28 x CD3三特异性抗体治疗对来自全血的T细胞的作用。图14A示出了通过流式细胞术对hCD45+、CD8+、CD4+和mCD45+细胞的分析。图14B示出了对照或Her2/CD28 x CD3三特异性抗体治疗(在所指示剂量下)对hCD45+、CD8+、CD4+和mCD45+细胞计数的作用。图14C示出了对照或Her2/CD28 x CD3三特异性抗体治疗(在所指示剂量下)对人细胞比率(CD4+/CD45+和CD8+/CD45+)的作用。对于图14B和图14C中所示的每个x轴参数，条件是(从左到右)：对照、100ug/kg三特异性抗体、10ug/kg三特异性抗体、1ug/kg三特异性抗体和0.1ug/kg三特异性抗体。图14B和图14C中所示的百分比基于对照样品相对于100ug/kg。
图15A至图15C示出了如通过免疫组织化学(IHC)所检查，Her2/CD28 x CD3三特异性抗体治疗对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的作用。箭头指示在ZR-75-1乳腺肿瘤中鉴定出的肿瘤浸润T细胞。上图是1X放大；下图是20X放大。在两组图像中，从左到右示出了人CD45、人CD4和人CD8的染色。示出了来自用媒介物对照(图15A)、100ug/kg三特异性抗体(图15B)或0.1ug/kg三特异性抗体(图15C)治疗的小鼠的肿瘤。
图16A至图16C示出了如通过IHC所测量，对Her2/CD28 x CD3三特异性抗体治疗对TIL的作用的定量。每个点表示来自单只小鼠的一个肿瘤；矩形表示组平均值；并且误差棒指示标准差。*＝p<0.05，与媒介物对照组相比(ANOVA)。示出了CD45+(图16A)、CD4+(图16B)或CD8+(图16C)细胞的数量。在图16C中，由于CD8 IHC载玻片中存在过多非特异性信号，使用$面积定量方法代替细胞计数算法用于CD8+细胞。
图17A至图17F示出了与在抗HER2臂和抗CD3臂的VL结构域中具有突变的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体(如表1中所示进行编号)相比，具有野生型曲妥珠单抗抗原结合结构域和在VL结构域中没有32/35QQ突变的抗CD3抗原结合结构域的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体(“ctl”)在人CD8+T细胞存在下对HER2+乳腺癌靶细胞的体外细胞裂解。描绘了针对具有不同HER2表达的细胞系的细胞杀伤活性：高HER2表达的HCC1954(图17A)、中等HER2表达的BT20(图17C)和低HER2表达的MDA-MD-231(图17E)。示出了描绘随抗体浓度变化的针对靶细胞HCC1954(图17B)、BT20(图17D)和MDA-MD-231(图17F)的细胞杀伤的图，比较了结合蛋白#2与ctl，或者比较结合蛋白#1和#5与ctl。
图18A和图18B总结了实验或对照Her2/CD28 x CD3三特异性抗体针对所指示的乳腺癌(图18A)或胃癌细胞系(图18B)的体外细胞杀伤的平均EC50(pM)。所指示的三特异性抗体的氨基酸序列提供于表1中。
具体实施方式
本公开文本提供了三特异性和/或三价结合蛋白，其包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，所述三个抗原结合位点与一种或多种靶蛋白特异性结合，其中形成所述结合蛋白的第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域。
一般定义
除非另有说明，否则如根据本公开文本所用，以下术语应理解为具有以下含义。除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数，并且复数术语应包括单数。
应理解，本文所述的公开文本的方面和实施方案包括“包含”方面和实施方案、“由方面和实施方案组成”以及“基本上由方面和实施方案组成”。
如本文所用术语“多核苷酸”是指长度为至少10个核苷酸的单链或双链核酸聚合物。在某些实施方案中，构成多核苷酸的核苷酸可以是核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸或者任一类型的核苷酸的修饰形式。此类修饰包括碱基修饰(如溴尿苷)、核糖修饰(如阿糖胞苷和2',3'-二脱氧核糖)以及核苷酸间连接修饰(如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯(phosphoroselenoate)、二硒代磷酸酯、硫代缩苯胺磷酸酯(phosphoroanilothioate)、缩苯胺磷酸酯(phoshoraniladate)和氨基磷酸酯(phosphoroamidate))。术语“多核苷酸”具体地包括单链和双链形式的DNA。
“分离的多核苷酸”是基因组、cDNA或合成来源的多核苷酸或其某种组合的多核苷酸，所述分离的多核苷酸：(1)不与在自然界中发现其所在的多核苷酸的全部或一部分缔合，(2)与在自然界中其并不连接的多核苷酸连接，或(3)在自然界中不作为更大序列的一部分存在。
“分离的多肽”是如下多肽，其：(1)不含通常与其一起被发现的至少一些其他多肽，(2)基本上不含来自相同来源(例如，来自相同物种)的其他多肽，(3)由来自不同物种的细胞表达，(4)已经从至少约50％的在自然界中与所述分离的多肽缔合的多核苷酸、脂质、碳水化合物或其他物质分离，(5)不与在自然界中与所述“分离的多肽”缔合的多肽的部分缔合(通过共价或非共价相互作用)，(6)与在自然界中不与所述分离的多肽缔合的多肽可操作地缔合(通过共价或非共价相互作用)，或(7)在自然界中不存在。这种分离的多肽可以由基因组DNA、cDNA、mRNA或其他RNA编码，具有合成来源，或其任何组合。优选地，分离的多肽基本上不含在其自然环境中发现的会干扰其应用(治疗、诊断、预防、研究或其他应用)的多肽或其他污染物。
天然存在的抗体通常包含四聚体。每种这样的四聚体通常由两个相同的多肽链对构成，每一对具有一条全长“轻”链(通常具有约25kDa的分子量)和一条全长“重”链(通常具有约50-70kDa的分子量)。如本文所用术语“重链”和“轻链”是指具有足以赋予对靶抗原的特异性的可变结构域序列的任何免疫球蛋白多肽。每条轻链和重链的氨基末端部分通常包括约100至110或更多个氨基酸的可变结构域，所述可变结构域通常负责抗原识别。每条链的羧基末端部分通常定义负责效应子功能的恒定结构域。因此，在天然存在的抗体中，全长重链免疫球蛋白多肽包括一个可变结构域(VH)和三个恒定结构域(CH1、CH2和CH3)，其中所述VH结构域位于多肽的氨基末端并且CH3结构域位于羧基末端，并且全长轻链免疫球蛋白多肽包括一个可变结构域(VL)和一个恒定结构域(CL)，其中所述VL结构域位于多肽的氨基末端并且所述CL结构域位于羧基末端。
通常将人轻链分类为κ和λ轻链，并且通常将人重链分类为μ、δ、γ、α或ε，并将抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。IgG具有几个亚类，包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。IgM具有多个亚类，包括但不限于IgM1和IgM2。将IgA类似地细分为多个亚类，包括但不限于IgA1和IgA2。在全长轻链和重链内，可变结构域和恒定结构域通常通过约12个或更多个氨基酸的“J”区接合，并且重链还包括约10个或更多个氨基酸的“D”区。参见例如，Fundamental Immunology(Paul,W.编辑,Raven Press,第2版,1989)，出于所有目的将所述文献通过引用以其全文并入。每个轻/重链对的可变区通常形成抗原结合位点。天然存在的抗体的可变结构域通常展现出通过三个高变区(也称为互补决定区或CDR)接合的相对保守的框架区(FR)的相同总体结构。来自每一对的两条链的CDR通常通过框架区对齐，这可以使得能够结合至特异性表位。从氨基末端到羧基末端，轻链和重链可变结构域二者通常均包含结构域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。
术语“CDR集”是指一组存在于能够结合抗原的单一可变区中的三个CDR。这些CDR的确切边界已经根据不同系统以不同方式加以定义。由Kabat所述的系统(Kabat等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes ofHealth,贝塞斯达(Bethesda),马里兰州(Md.)(1987)和(1991))不仅提供适用于抗体的任何可变区的明确残基编号系统，还提供定义三个CDR的准确残基边界。这些CDR可以被称为Kabat CDR。Chothia和同事(Chothia和Lesk,1987,J.Mol.Biol.196:901-17；Chothia等人,1989,Nature 342:877-83)发现，虽然在氨基酸序列水平上具有显著多样性，但是KabatCDR内的某些子部分采用几乎相同的肽骨架构象。这些子部分被命名为L1、L2和L3或H1、H2和H3，其中“L”和“H”分别指定轻链和重链区域。这些区域可以被称为Chothia CDR，它们具有与Kabat CDR重叠的边界。定义与Kabat CDR重叠的CDR的其他边界已由Padlan,1995,FASEB J.9:133-39；MacCallum,1996,J.Mol.Biol.262(5):732-45；以及Lefranc,2003,Dev.Comp.Immunol.27:55-77描述。仍有其他CDR边界定义可能不严格遵循本文系统之一，但仍然会与Kabat CDR重叠，不过鉴于特定残基或残基组或甚至整个CDR不显著影响抗原结合的预测或实验发现，所述其他CDR边界可能会被缩短或延长。本文所用方法可以利用根据这些系统中的任一种定义的CDR，但是某些实施方案使用Kabat或Chothia定义的CDR。使用氨基酸序列鉴定预测的CDR是本领域中熟知的，如在以下文献中：Martin,A.C.“Proteinsequence and structure analysis of antibody variable domains,”In AntibodyEngineering,第2卷.Kontermann R.,Dübel S.编辑Springer-Verlag,柏林(Berlin),第33-51页(2010)。还可以通过其他常规方法(例如，通过与其他重链和轻链可变区的已知氨基酸序列进行比较以确定具有序列超变性的区域)来检查重链和/或轻链可变结构域的氨基酸序列以鉴定CDR的序列。可以通过目测，或通过采用比对程序(如CLUSTAL程序套件中的一种)来比对已编号的序列，如以下文献中所述：Thompson,1994,Nucleic Acids Res.22:4673-80。便捷地使用分子模型来正确描绘框架和CDR区域，并由此校正基于序列的比对。
如本文所用术语“Fc”是指包含得自抗体消化或通过其他手段产生的非抗原结合片段的序列的分子，所述分子呈单体或多聚体形式，并且所述“Fc”可以含有铰链区。虽然天然Fc的原始免疫球蛋白来源优选地是人起源的，并且可以是任何免疫球蛋白，但是IgG1和IgG2是优选的。Fc分子由可以通过共价(即，二硫键)和非共价缔合连接成二聚体或多聚体形式的单体多肽构成。天然Fc分子的单体亚基之间的分子间二硫键的数量范围为1至4，这取决于类(例如，IgG、IgA和IgE)或亚类(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgA1和IgGA2)。Fc的一个例子是得自IgG的木瓜蛋白酶消化的二硫键合的二聚体。如本文所用术语“天然Fc”是单体、二聚体和多聚体形式通用的。
F(ab)片段通常包括一条轻链以及一条重链的VH和CH1结构域，其中F(ab)片段的VH-CH1重链部分无法与另一个重链多肽形成二硫键。如本文所用，F(ab)片段也可以包括含有被氨基酸接头隔开的两个可变结构域的一条轻链，以及含有被氨基酸接头隔开的两个可变结构域和一个CH1结构域的一条重链。
F(ab')片段通常包括一条轻链和含有更多恒定区的一条重链的一部分(在CH1与CH2结构域之间)，使得可以在两条重链之间形成链间二硫键以形成F(ab')2分子。
如本文所用，术语“结合蛋白”是指与至少一种靶抗原特异性地结合的非天然存在的(或重组的或工程化的)分子。除非另外指明，否则本公开文本的三特异性结合蛋白通常包含形成至少三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链具有由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链具有由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链具有由下式表示的结构：
VH3-CH1 [III]
并且第四多肽链具有由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；并且
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
并且其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对。
“重组”分子是已经通过重组手段制备、表达、产生或分离的分子。
本公开文本的一个实施方案提供了对介于一种与三种之间的靶抗原具有生物和免疫特异性的结合蛋白。本公开文本的另一个实施方案提供了核酸分子，所述核酸分子包含编码形成此类结合蛋白的多肽链的核苷酸序列。本公开文本的另一个实施方案提供了包含核酸分子的表达载体，所述核酸分子包含编码形成此类结合蛋白的多肽链的核苷酸序列。本公开文本的又另一个实施方案提供了宿主细胞，所述宿主细胞表达此类结合蛋白(即，包含编码形成此类结合蛋白的多肽链的核酸分子或载体)。
如本文所用术语“可交换性”是指在结合蛋白形式内并且在保持折叠和最终结合亲和力的情况下可变结构域的互换性。“完全可交换性”是指在维持结合蛋白的完全功能性(如通过结合亲和力的保持所证实)的同时，交换式I的多肽链或式II的多肽链中的VH1和VH2结构域二者的顺序，并且由此交换VL1和VL2结构域的顺序(即，颠倒所述顺序)的能力。另外，应注意，名称VH和VL仅是指结构域在呈最终形式的特定蛋白质链上的位置。例如，VH1和VH2可以衍生自亲代抗体中的VL1和VL2结构域并被置入结合蛋白中的VH1和VH2位置中。同样，VL1和VL2可以衍生自亲代抗体中的VH1和VH2结构域并被置于结合蛋白中的VH1和VH2位置中。因此，VH和VL名称是指目前的位置而不是在亲代抗体中的原始位置。VH和VL结构域因此是“可交换的”。
如本文所用术语“抗原”或“靶抗原”或“抗原靶标”是指分子或分子的一部分，所述分子或分子的一部分能够被结合蛋白结合，并且另外能够被用于动物中以产生能够与该抗原的表位结合的抗体。靶抗原可具有一个或多个表位。关于由结合蛋白识别的每种靶抗原，所述结合蛋白能够与识别所述靶抗原的完整抗体竞争。
术语“Her2”是指人表皮生长因子受体2，其是表皮生长因子受体家族的成员。
“CD3”是分化因子簇3多肽，并且是T细胞表面蛋白，其通常是T细胞受体(TCR)复合物的一部分。
“CD28”是分化簇28多肽，并且是T细胞表面蛋白，其提供共刺激信号用于T细胞激活和存活。
“CD38”是分化簇38多肽，并且是在许多免疫细胞的表面上发现的糖蛋白。
术语“T细胞接合器”是指针对宿主的免疫系统(更具体地针对T细胞的细胞毒活性)以及针对肿瘤靶蛋白的结合蛋白。
术语“单特异性结合蛋白”是指与一种抗原靶标特异性地结合的结合蛋白。
术语“单价结合蛋白”是指具有一个抗原结合位点的结合蛋白。
术语“双特异性结合蛋白”是指与两种不同抗原靶标特异性地结合的结合蛋白。
术语“二价结合蛋白”是指具有两个结合位点的结合蛋白。
术语“三特异性结合蛋白”是指与三种不同抗原靶标特异性地结合的结合蛋白。
术语“三价结合蛋白”是指具有三个结合位点的结合蛋白。在特定实施方案中，三价结合蛋白可以与一种抗原靶标结合。在其他实施方案中，三价结合蛋白可以与两种抗原靶标结合。在其他实施方案中，三价结合蛋白可以与三种抗原靶标结合。
“分离的”结合蛋白是已经鉴定并且从其天然环境的组分分离和/或回收的结合蛋白。其天然环境的污染物组分是会干扰结合蛋白的诊断或治疗应用的物质，并且可能包括酶、激素和其他蛋白质的或非蛋白质的溶质。在一些实施方案中，将结合蛋白纯化至：(1)如通过劳里法(Lowry method)所确定以重量计大于95％的抗体，并且最优选以重量计大于99％，(2)足以获得通过使用旋杯式序列分析仪所测的至少15个残基的N末端或内部氨基酸序列的程度，或(3)在还原或非还原条件下通过SDS-PAGE使用考马斯蓝或优选银染色，纯化至同质性。分离的结合蛋白包括重组细胞内的原位结合蛋白，因为结合蛋白的天然环境中的至少一种组分将不存在。
如本文所用，术语“基本上纯的”或“基本上纯化的”是指作为存在的主要种类(即，以摩尔计，其比组合物中的任何其他单独种类丰度更高)的化合物或种类。在一些实施方案中，基本上纯化的级分是如下组合物，在所述组合物中所述种类占存在的所有大分子种类的至少约50％(以摩尔计)。在其他实施方案中，基本上纯的组合物将包含组合物中存在的大于约80％、85％、90％、95％或99％的所有大分子种类。在仍其他实施方案中，将所述种类纯化至基本同质(通过常规检测方法不能检测到组合物中的污染物种类)，其中所述组合物基本上由单一大分子种类组成。
术语“表位”包括能够与免疫球蛋白或T细胞受体特异性地结合的任何决定簇、优选多肽决定簇。在某些实施方案中，表位决定簇包括分子的化学活性表面基团，如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基，并且在某些实施方案中，可以具有特定的三维结构特征和/或特定的电荷特征。表位是抗原中被抗体或结合蛋白结合的区域。在某些实施方案中，当结合蛋白在蛋白质和/或大分子的复杂混合物中优先识别其靶抗原时，称所述结合蛋白特异性地结合抗原。在一些实施方案中，当平衡解离常数≤10-8M时，更优选地在平衡解离常数≤10- 9M时，并且最优选地在解离常数≤10-10M时，称结合蛋白特异性地结合抗原。
结合蛋白的解离常数(KD)可以例如通过表面等离子体共振来确定。通常，表面等离子体共振分析通过表面等离子体共振(SPR)使用BIAcore系统(Pharmacia Biosensor；皮斯卡塔韦(Piscataway)，新泽西州(NJ))测量配体(生物传感器基质上的靶抗原)与分析物(溶液中的结合蛋白)之间的实时结合相互作用。表面等离子体分析也可以通过固定分析物(生物传感器基质上的结合蛋白)并呈递配体(靶抗原)来进行。如本文所用，术语“KD”是指特定结合蛋白与靶抗原之间的相互作用的解离常数。
如本文所用，术语“特异性结合”是指结合蛋白或其抗原结合片段以至少约1x10- 6M、1x10-7M、1x10-8M、1x10-9M、1x10-10M、1x10-11M、1x10-12M或更大的Kd与含有表位的抗原结合的能力，和/或以比所述结合蛋白或其抗原结合片段对非特异性抗原的亲和力大至少两倍的亲和力与表位结合的能力。
在一些实施方案中，本公开文本的抗原结合结构域和/或结合蛋白与人和食蟹猴CD38多肽(例如，CD38细胞外结构域、人CD38亚型A、人CD38亚型E和食蟹猴CD38)“交叉反应”。在对两种抗原的EC50在类似范围内时，与抗原1(Ag1)结合的结合蛋白与抗原2(Ag2)“交叉反应”。在本申请中，当Ag2的亲和力与Ag1的亲和力的比率等于或小于20时，与Ag1结合的结合蛋白与Ag2交叉反应，两种抗原的亲和力是用相同方法测量的。
如本文所用术语“接头”是指在免疫球蛋白结构域之间插入以为轻链和重链的结构域折叠成交叉双重可变区免疫球蛋白提供足够灵活性的一个或多个氨基酸残基。在序列水平上，接头分别是在可变结构域之间或可变结构域与恒定结构域之间的过渡处插入。因为免疫球蛋白结构域的大致大小已经被充分理解，所以可以鉴定结构域之间的过渡。结构域过渡的准确位置可以通过定位不形成二级结构元件(如β片层或α螺旋)的肽延伸段来确定，如通过实验数据所证实或者如通过建模或二级结构预测的技术可以假定。本文所述接头被称为L1，其位于轻链上VL2结构域的C末端与VL1结构域的N末端之间；以及L2，其位于轻链上VL1结构域的C末端与CL结构域的N末端之间。重链接头被称为L3，其位于VH1结构域的C末端与VH2结构域的N末端之间；以及L4，其位于VH2结构域的C末端与CH1结构域的N末端之间。
如本文所用，术语“载体”是指用于将编码信息转移至宿主细胞的任何分子(例如，核酸、质粒或病毒)。术语“载体”包括能够运输已经与其连接的另一个核酸的核酸分子。一种类型的载体是“质粒”，它是指可以将另外的DNA区段插入其中的环状双链DNA分子。另一种类型的载体是病毒载体，其中可以将另外的DNA区段插入病毒基因组中。某些载体能够在引入它们的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)。其他载体(例如，非附加型哺乳动物载体)可以在被引入宿主细胞中之后整合至宿主细胞的基因组中，并由此与宿主基因组一起复制。另外，某些载体能够引导与其可操作连接的基因的表达。此类载体在本文中被称为“重组表达载体”(或者简单地，“表达载体”)。一般来说，用于重组DNA技术中的表达载体通常呈质粒形式。术语“质粒”和“载体”在本文中可以互换使用，因为质粒是最常用的载体形式。然而，本公开文本意图包括发挥同等功能的其他形式的表达载体，如病毒载体(例如，复制缺陷性逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒)。
如本文所用短语“重组宿主细胞”(或“宿主细胞”)是指已经将重组表达载体引入其中的细胞。重组宿主细胞或宿主细胞意图不仅是指特定的受试者细胞，而且是指这种细胞的子代。因为后代中可能由于突变或环境影响而发生某些修饰，所以这种子代可能实际上与亲代细胞不同，但是此类细胞仍包括在如本文所用术语“宿主细胞”的范围内。众多种宿主细胞表达系统可以用于表达结合蛋白，所述表达系统包括细菌、酵母、杆状病毒和哺乳动物表达系统(以及噬菌体展示表达系统)。合适的细菌表达载体的例子是pUC19。为了重组表达结合蛋白，用携带编码结合蛋白多肽链的DNA片段的一种或多种重组表达载体转化或转染宿主细胞，使得在所述宿主细胞中表达所述多肽链并且优选地将所述多肽链分泌到培养所述宿主细胞的培养基中，可以从所述培养基回收所述结合蛋白。
如本文所用术语“转化”是指细胞的遗传特征的变化，并且当细胞被修饰而含有新DNA时，所述细胞已经被转化。例如，如果细胞从其天然状态进行遗传修饰，则所述细胞被转化。在转化后，转化DNA可以通过物理整合至细胞的染色体中与细胞的DNA重组，或者可以在不被复制的情况下短暂维持为附加型元件，或者可以作为质粒独立复制。当DNA随着细胞分裂进行复制时，认为细胞已经被稳定转化。如本文所用术语“转染”是指细胞摄取外来或外源DNA，并且当已经将外源DNA引入细胞膜内时，细胞已经被“转染”。多种转染技术是本领域中熟知的。此类技术可以用于将一种或多种外源DNA分子引入合适的宿主细胞中。
如本文所用并应用于对象的术语“天然存在的”是指以下事实：所述对象可以在自然界中发现并且尚未被人操纵。例如，可以从自然界中的来源分离并且尚未被人有意修饰的存在于生物体(包括病毒)中的多核苷酸或多肽是天然存在的。类似地，如本文所用的“非天然存在的”是指在自然界中没有发现或者已经被人进行结构修饰或合成的对象。
如本文所用，二十种常规氨基酸和它们的缩写遵循常规用法。二十种常规氨基酸的立体异构体(例如，d-氨基酸)；非天然氨基酸和类似物(如α-,α-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸和其他非常规氨基酸)也可以是结合蛋白多肽链的合适组分。非常规氨基酸的例子包括：4-羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸、ε-N,N,N-三甲基赖氨酸、ε-N-乙酰基赖氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-乙酰基丝氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、3-甲基组氨酸、5-羟赖氨酸、σ-N-甲基精氨酸以及其他类似氨基酸和亚氨基酸(例如，4-羟脯氨酸)。在本文所用的多肽表示法中，根据标准用法和惯例，左手方向是氨基末端方向并且右手方向是羧基末端方向。
可以基于常见侧链特性将天然存在的残基分为多个类别：
(1)疏水性的：Met、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Trp、Tyr、Pro；
(2)极性亲水性的：Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、His、Lys、Ser、Thr；
(3)脂肪族的：Ala、Gly、Ile、Leu、Val、Pro；
(4)脂肪族疏水性的：Ala、Ile、Leu、Val、Pro；
(5)中性亲水性的：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；
(6)酸性的：Asp、Glu；
(7)碱性的：His、Lys、Arg；
(8)影响链取向的残基：Gly、Pro；
(9)芳香族的：His、Trp、Tyr、Phe；和
(10)芳香族疏水性的：Phe、Trp、Tyr。
保守氨基酸取代可以涉及这些类别中一个类别的成员与同一类别中另一个成员的交换。非保守取代可以涉及这些类别中一个类别的成员与另一个类别的成员的交换。
技术人员将能够使用熟知的技术确定结合蛋白多肽链的合适变体。例如，本领域技术人员可以通过靶向被认为对活性不重要的区域来鉴定多肽链中可以在不破坏活性的情况下改变的合适区域。可替代地，本领域技术人员可以鉴定分子中在相似多肽之间保守的残基和部分。另外，即使可能对生物活性或对结构重要的区域也可以在不破坏生物活性的情况下或在不对多肽结构造成不良影响的情况下经历保守氨基酸取代。
如本文所用，术语“患者”包括人和动物受试者。
如本文所用术语“治疗”(“treatment”或“treat”)是指治疗性治疗和预防性(prophylactic)或预防性(preventative)措施二者。需要治疗的那些包括患有障碍的那些以及易患障碍的那些或要预防障碍的那些。在特定实施方案中，结合蛋白可以用于治疗患有癌症的人或易患癌症的人，或改善人受试者中的癌症。结合蛋白还可以用于预防人患者中的癌症。在特定实施方案中，癌症是多发性骨髓瘤、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、急性髓性白血病、淋巴瘤、乳腺癌如Her2+乳腺癌、生发中心B细胞淋巴瘤或B细胞急性成淋巴细胞性白血病。在其他实施方案中，结合蛋白可以用于治疗患有炎性障碍的人或易患炎性障碍的人，或改善人受试者中的炎性障碍。
如本文所用术语“药物组合物”或“治疗组合物”是指在适当给予至患者时能够诱导所需治疗效果的化合物或组合物。
如本文所用术语“药学上可接受的载体”或“生理上可接受的载体”是指适于实现或增强结合蛋白的递送的一种或多种配制材料。
术语“有效量”和“治疗有效量”在关于包含一种或多种结合蛋白的药物组合物使用时是指足以产生所需治疗结果的量或剂量。更具体地，治疗有效量是结合蛋白足以将与所治疗病症相关的一种或多种临床上定义的病理过程抑制一定时间段的量。有效量可以根据所用的特定结合蛋白而变化，并且还取决于与所治疗患者和障碍的严重程度相关的多种因素和状况。例如，如果要在体内给予结合蛋白，则所考虑的那些因素将包括如患者的年龄、体重和健康状况以及在临床前动物工作中获得的剂量反应曲线和毒性数据等因素。给定的药物组合物的有效量或治疗有效量的确定是本领域技术人员熟练掌握的。
本公开文本的一个实施方案提供包含药学上可接受的载体和治疗有效量的结合蛋白的药物组合物。
三特异性和/或三价结合蛋白
本公开文本的某些方面涉及三特异性和/或三价结合蛋白，其包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，所述三个抗原结合位点与一种或多种靶蛋白特异性结合，其中形成所述结合蛋白的第一对多肽拥有具有交叉取向的双重可变结构域并且其中形成所述结合蛋白的第二对多肽拥有单一可变结构域。本文所述的任何抗原结合蛋白的任何CDR或可变结构域可以用于本公开文本的三特异性结合蛋白中。
在一些实施方案中，所述三个抗原结合位点中的每一个结合不同靶标(例如，多肽抗原)。在一些实施方案中，所述三特异性结合蛋白包含形成所述三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对。
考虑到本文所述的任何抗原结合位点可以用于本公开文本的例如包含具有上述结构的四条多肽链的三特异性结合蛋白中。例如，在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成结合肿瘤靶蛋白的第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成结合肿瘤靶蛋白的第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。在一些实施方案中，本公开文本的三特异性结合蛋白包含形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点的VH1和VL1结构域对、形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点的VH2和VL2结构域对和形成结合HER2多肽的第三抗原结合位点的VH3和VL3结构域对。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白结合一种或多种肿瘤靶蛋白和一种或多种T细胞靶蛋白。在一些实施方案中，所述结合蛋白能够特异性结合一种肿瘤靶蛋白和单一T细胞靶蛋白上的两个不同表位。在一些实施方案中，所述结合蛋白能够特异性结合一种肿瘤靶蛋白和两种不同的T细胞靶蛋白(例如，CD28和CD3)。在一些实施方案中，所述结合蛋白的所述第一和第二多肽链形成特异性靶向两种T细胞靶蛋白的两个抗原结合位点，并且所述结合蛋白的所述第三和第四多肽链形成特异性结合肿瘤靶蛋白的抗原结合位点。在一些实施方案中，所述靶蛋白是CD38或HER2。另外的肿瘤靶蛋白是在下文提供。在一些实施方案中，所述一种或多种T细胞靶蛋白是CD3和CD28中的一种或多种。可用于本文所述的任何三特异性结合蛋白中的示例性和非限制性多肽提供于表1中。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列或与SEQ ID NO:156的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列或与SEQ ID NO:157的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:158的氨基酸序列或与SEQ ID NO:158的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:159的氨基酸序列或与SEQ ID NO:159的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:160的氨基酸序列或与SEQ ID NO:160的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:161的氨基酸序列或与SEQ ID NO:161的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:162的氨基酸序列或与SEQ ID NO:162的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列或与SEQ ID NO:163的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或与SEQ ID NO:164的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或与SEQ ID NO:165的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:166的氨基酸序列或与SEQ ID NO:166的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列或与SEQ ID NO:167的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:168的氨基酸序列或与SEQ ID NO:168的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:169的氨基酸序列或与SEQ ID NO:169的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:170的氨基酸序列或与SEQ ID NO:170的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:171的氨基酸序列或与SEQ ID NO:171的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列或与SEQ ID NO:172的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列或与SEQ ID NO:173的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:174的氨基酸序列或与SEQ ID NO:174的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列或与SEQ ID NO:175的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列或与SEQ ID NO:176的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列或与SEQ ID NO:177的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:178的氨基酸序列或与SEQ ID NO:178的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:179的氨基酸序列或与SEQ ID NO:179的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:181的氨基酸序列或与SEQ ID NO:181的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列或与SEQ ID NO:182的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:183的氨基酸序列或与SEQ ID NO:183的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列或与SEQ ID NO:184的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列或与SEQ ID NO:185的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列或与SEQ ID NO:186的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:187的氨基酸序列或与SEQ ID NO:187的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:188的氨基酸序列或与SEQ ID NO:188的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:100的氨基酸序列或与SEQ ID NO:100的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:101的氨基酸序列或与SEQ ID NO:101的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:102的氨基酸序列或与SEQ ID NO:102的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列或与SEQ ID NO:103的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列或与SEQ ID NO:104的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列或与SEQ ID NO:105的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:106的氨基酸序列或与SEQ ID NO:106的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列或与SEQ ID NO:107的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列或与SEQ ID NO:112的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列或与SEQ ID NO:113的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:114的氨基酸序列或与SEQ ID NO:114的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列或与SEQ ID NO:115的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列或与SEQ ID NO:116的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列或与SEQ ID NO:117的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:118的氨基酸序列或与SEQ ID NO:118的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:119的氨基酸序列或与SEQ ID NO:119的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:120的氨基酸序列或与SEQ ID NO:120的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:121的氨基酸序列或与SEQ ID NO:121的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:122的氨基酸序列或与SEQ ID NO:122的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列或与SEQ ID NO:123的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列或与SEQ ID NO:124的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列或与SEQ ID NO:125的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:126的氨基酸序列或与SEQ ID NO:126的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列或与SEQ ID NO:127的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:128的氨基酸序列或与SEQ ID NO:128的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:129的氨基酸序列或与SEQ ID NO:129的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:130的氨基酸序列或与SEQ ID NO:130的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:131的氨基酸序列或与SEQ ID NO:131的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列或与SEQ ID NO:132的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列或与SEQ ID NO:133的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:134的氨基酸序列或与SEQ ID NO:134的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列或与SEQ ID NO:135的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列或与SEQ ID NO:136的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列或与SEQ ID NO:137的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:138的氨基酸序列或与SEQ ID NO:138的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:139的氨基酸序列或与SEQ ID NO:139的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:140的氨基酸序列或与SEQ ID NO:140的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:141的氨基酸序列或与SEQ ID NO:141的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:142的氨基酸序列或与SEQ ID NO:142的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列或与SEQ ID NO:143的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列或与SEQ ID NO:144的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列或与SEQ ID NO:145的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:146的氨基酸序列或与SEQ ID NO:146的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:147的氨基酸序列或与SEQ ID NO:147的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:148的氨基酸序列或与SEQ ID NO:148的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:149的氨基酸序列或与SEQ ID NO:149的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:150的氨基酸序列或与SEQ ID NO:150的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:151的氨基酸序列或与SEQ ID NO:151的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列或与SEQ ID NO:152的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列或与SEQ ID NO:153的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:154的氨基酸序列或与SEQ ID NO:154的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列或与SEQ ID NO:155的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列或与SEQ ID NO:286的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列或与SEQ ID NO:287的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:288的氨基酸序列或与SEQ ID NO:288的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:289的氨基酸序列或与SEQ ID NO:289的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:290的氨基酸序列或与SEQ ID NO:290的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:291的氨基酸序列或与SEQ ID NO:291的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:292的氨基酸序列或与SEQ ID NO:292的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列或与SEQ ID NO:293的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列或与SEQ ID NO:294的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列或与SEQ ID NO:295的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:296的氨基酸序列或与SEQ ID NO:296的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列或与SEQ ID NO:297的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中所述第一多肽链包含SEQ ID NO:298的氨基酸序列或与SEQ ID NO:298的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:299的氨基酸序列或与SEQ ID NO:299的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ IDNO:300的氨基酸序列或与SEQ ID NO:300的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:301的氨基酸序列或与SEQ ID NO:301的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
抗CD38结合位点
本公开文本的某些方面涉及包含结合CD38多肽的抗原结合位点的结合蛋白。在一些实施方案中，CD38多肽是人CD38多肽，也称为ADPRC1。人CD38多肽是本领域中已知的，并且包括但不限于由NCBI登录号NP_001766.2表示的多肽或从NCBI基因ID号952产生的多肽。在一些实施方案中，所述抗原结合位点结合人CD38多肽、非人灵长类动物(例如，食蟹猴)CD38多肽或人CD38多肽和非人灵长类动物(例如，食蟹猴)CD38多肽。在一些实施方案中，包含结合CD38多肽的抗原结合位点的结合蛋白是单特异性和/或单价、双特异性和/或双价、三特异性和/或三价或多特异性和/或多价的。
在一些实施方案中，下文描述的抗CD38结合位点的任何CDR和/或可变结构域可以用于单特异性抗体中。
在其他实施方案中，下文所述的抗CD38结合位点的任何CDR和/或可变结构域可以用于包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白(例如，如上所述)的任何结合位点中。在某些实施方案中，包含结合CD38多肽的抗原结合位点的结合蛋白是如上所述的包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中VH3和VL3结构域对并形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
本文描述了示例性结合位点和结合蛋白的多种特征。例如，在一些实施方案中，抗CD38结合位点与人CD38(例如，人CD38亚型A和/或亚型E多肽)和食蟹猴CD38交叉反应。在一些实施方案中，包含抗CD38结合位点的结合蛋白诱导CD38+细胞的细胞凋亡。在一些实施方案中，包含抗CD38结合位点的结合蛋白将T细胞募集至CD38+细胞并任选地(例如，通过TCR刺激和/或共刺激)激活T细胞。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTFTSYA(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGQGGT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARTGGLRRAYFTY(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSVSSYGQGF(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQNKEDPWT(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTFTSYA(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGQGGT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARTGGLRRAYFTY(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSVSSYGQGF(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQNKEDPWT(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTLTEFS(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有FDPEDGET(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TTGRFFDWF(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSVISRF(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQDSNLPIT(SEQID NO:24)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTLTEFS(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有FDPEDGET(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TTGRFFDWF(SEQ IDNO:21)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSVISRF(SEQID NO:22)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQDSNLPIT(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYAFTTYL(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有INPGSGST(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARYAYGY(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QNVGTA(SEQ ID NO:28)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:29)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQYSTYPFT(SEQ IDNO:30)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYAFTTYL(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有INPGSGST(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARYAYGY(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QNVGTA(SEQ ID NO:28)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:29)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQYSTYPFT(SEQ ID NO:30)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYSFTNYA(SEQ ID NO:31)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有ISPYYGDT(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARRFEGFYYSMDY(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHSNGNTY(SEQ ID NO:34)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有SQSTHVPLT(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYSFTNYA(SEQ ID NO:31)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有ISPYYGDT(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARRFEGFYYSMDY(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHSNGNTY(SEQ ID NO:34)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有SQSTHVPLT(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARDPGLRYFDGGMDV(SEQ ID NO:39)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QGISSY(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQLNSFPYT(SEQID NO:42)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARDPGLRYFDGGMDV(SEQ ID NO:39)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QGISSY(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQLNSFPYT(SEQ ID NO:42)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARMFRGAFDY(SEQ ID NO:45)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QGIRND(SEQ ID NO:46)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有LQDYIYYPT(SEQID NO:48)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARMFRGAFDY(SEQ IDNO:45)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QGIRND(SEQID NO:46)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有LQDYIYYPT(SEQ ID NO:48)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYAMHWVKEAPGQRLEWIGYIYPGQGGTNYNQKFQGRATLTADTSASTAYMELSSLRSEDTAVYFCARTGGLRRAYFTYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:79)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVLTQSPATLSLSPGERATISCRASQSVSSYGQGFMHWYQQKPGQPPRLLIYGASSRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISPLEPEDFAVYYCQQNKEDPWTFGGGTKLEIK(SEQID NO:80)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQID NO:79的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:80的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:79的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:80的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTEFSIHWVRQAPGQGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVIMTEDTSTDTAYMEMNSLRSEDTAIYYCTTGRFFDWFWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:81)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与EIILTQSPAILSLSPGERATLSCRASQSVISRFLSWYQVKPGLAPRLLIYGASTRATGIPVRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDCAVYYCQQDSNLPITFGQGTRLEIK(SEQ ID NO:82)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:81的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:82的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ ID NO:81的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:82的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYAFTTYLVEWIRQRPGQGLEWMGVINPGSGSTNYAQKFQGRVTMTVDRSSTTAYMELSRLRSDDTAVYYCARYAYGYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:83)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNVGTAVAWYQQKPGKSPKQLIYSASNRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQQYSTYPFTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:84)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:83的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:84的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ ID NO:83的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:84的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMYWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYHCARDPGLRYFDGGMDVWGQGTTVTVSS(SEQ ID NO:87)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIFAASTLHSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSFPYTFGQGTKLEIK(SEQID NO:88)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQID NO:87的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:88的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:87的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:88的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISGDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARMFRGAFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:89)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISGLQPEDSATYYCLQDYIYYPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:90)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:89的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:90的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ ID NO:89的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:90的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTNYAVHWVRQAPGQGLEWMGVISPYYGDTTYAQKFQGRVTMTVDKSSSTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRFEGFYYSMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:85)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRPSQSLVHSNGNTYLNWYQQRPGQSPKLLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK(SEQID NO:86)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQID NO:85的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:86的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:85的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:86的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLQQSGPELVRPGTSVKVSCKASGYAFTTYLVEWIKQRPGQGLEWIGVINPGSGSTNYNEKFKGKATLTVDRSSTTAYMHLSGLTSDDSAVYFCARYAYGYWGQGTTLTVSS(SEQ ID NO:277)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQSQKFMSASVGDRVSITCKASQNVGTAVAWYQQQPGHSPKQLIYSASNRYTGVPDRFTGSGAGTDFTLTISNIQSEDLADYFCQQYSTYPFTFGSGTKLEIK(SEQ ID NO:278)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:277的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:278的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ IDNO:277的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:278的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，VH结构域和/或VL结构域是人源化的。
在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLLQSGAELVRPGVSVKISCTGSGYSFTNYAVHWVKQSHVKSLEWIGVISPYYGDTTYNQKFTGKATMTVDKSSSTAYMELARLTSEDSAIYFCARRFEGFYYSMDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO:279)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DVVMIQTPLSLPVSLGDQASISCRPSQSLVHSNGNTYLNWYLQRPGQSPK LLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYLCSQSTHVPL TFGSGTQLEIK(SEQ ID NO:280)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ ID NO:279的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:280的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD38的结合位点包含：含有SEQ ID NO:279的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:280的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，VH结构域和/或VL结构域是人源化的。
在以上任何实施方案的一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白。在一些实施方案中，所述三特异性结合蛋白包含结合CD38多肽的抗原结合位点、结合CD28多肽的抗原结合位点和结合CD3多肽的抗原结合位点。在一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白，其包含含有三个抗原结合位点的四条多肽，其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对(例如，如本文所述)。在一些实施方案中，上文所述的任何抗CD38抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH3和VL3并且形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。在一些实施方案中，VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，并且上文所述和/或表2中的任何抗CD38抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH3和VL3并且形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
示例性抗CD38抗原结合位点的序列提供于表2中。在一些实施方案中，本公开文本的包含抗CD38抗原结合位点的结合蛋白包含表2中描述的抗CD38抗体的1、2、3、4、5或全部6种CDR序列。在一些实施方案中，本公开文本的包含抗CD38抗原结合位点的结合蛋白包含表2中描述的抗CD38抗体的VH结构域序列和/或VL结构域序列。
表2.抗CD38结合蛋白序列。
Figure BDA0003386970950000641
Figure BDA0003386970950000651
Figure BDA0003386970950000661
Figure BDA0003386970950000671
Figure BDA0003386970950000681
本文进一步提供了包含上述的任何抗CD38 CDR和/或可变结构域的抗体(例如，单特异性抗体)。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含结合人CD38多肽的细胞外结构域和食蟹猴CD38多肽的细胞外结构域的抗原结合位点。用于确定抗原结合位点是否结合抗原的示例性测定描述于本文中并且是本领域中已知的，包括(但不限于)ELISA、SPR和流式细胞术测定。
抗HER2结合位点
本公开文本的某些方面涉及包含结合HER2多肽的抗原结合位点的结合蛋白。在一些实施方案中，HER2多肽是人HER2多肽，也称为NEU、NGL、ERBB2、TKR1、CD340、HER-2、MLN19和HER-2/neu。人HER2多肽是本领域中已知的，并且包括但不限于由NCBI登录号XP_024306411.1、XP_024306410.1、XP_024306409.1、NP_001276867.1、NP_001276866.1、NP_001276865.1、NP_001005862.1或NP_004439.2表示的多肽或从NCBI基因ID号2064产生的多肽。在一些实施方案中，包含结合HER2多肽的抗原结合位点的结合蛋白是单特异性和/或单价、双特异性和/或双价、三特异性和/或三价或多特异性和/或多价的。在一些实施方案中，包含结合HER2多肽的抗原结合位点的结合蛋白是如上所述的包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中VH3和VL3结构域配对以形成结合HER2多肽的第三抗原结合位点。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)或GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)、IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)或IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)、SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)或SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)或QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)或GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)、IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)或IYPTNAYT(SEQ IDNO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)、SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)或SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)或QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列、和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列、和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列、和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列、和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ IDNO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:73)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:74)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQID NO:75)或EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:76)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ IDNO:74、SEQ ID NO:75或SEQ ID NO:76的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77或SEQ ID NO:78的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:74、SEQ IDNO:75或SEQ ID NO:76的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77或SEQ ID NO:78的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:77)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:72的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:72的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:73)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:77)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:73的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:73的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:75)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:77)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:75的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:75的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:74)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:77)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:74的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:74的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:76)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:77)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:76的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:76的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:77的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:72)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ IDNO:78)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ IDNO:72的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:78的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合HER2的结合位点包含：含有SEQ ID NO:72的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:78的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，本公开文本的抗HER2抗原结合位点包含抗HER2抗体曲妥珠单抗的1、2、3、4、5或全部6种CDR序列、30R/55Q/102E、30R/56A/102S、30R/55Q/102S、30R/56A/102E或30Q。在一些实施方案中，本公开文本的抗HER2抗原结合位点包含抗HER2抗体曲妥珠单抗的VH结构域序列和/或VL结构域序列、30R/55Q/102E、30R/56A/102S、30R/55Q/102S、30R/56A/102E或30Q。
示例性抗HER2抗原结合位点的序列提供于表3中。在一些实施方案中，本公开文本的抗HER2抗原结合位点包含表3中描述的抗HER2抗体的1、2、3、4、5或全部6种CDR序列。在一些实施方案中，本公开文本的抗HER2抗原结合位点包含表3中描述的抗HER2抗体的VH结构域序列和/或VL结构域序列。
表3.抗HER2结合蛋白序列。
Figure BDA0003386970950000791
Figure BDA0003386970950000801
Figure BDA0003386970950000811
其他抗肿瘤靶结合位点
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含结合肿瘤靶蛋白的抗原结合位点。在一些实施方案中，所述肿瘤靶蛋白是CD38多肽(例如，人CD38多肽)。在一些实施方案中，所述肿瘤靶蛋白是HER2多肽(例如，人HER2多肽)。在一些实施方案中，本公开文本的肿瘤靶蛋白包括但不限于A2AR、APRIL、ATPDase、BAFF、BAFFR、BCMA、BlyS、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4(也称为VTCN1)、B7H5、B7H6、B7H7、B7RP1、B7-4、C3、C5、CCL2(也称为MCP-1)、CCL3(也称为MIP-1a)、CCL4(也称为MIP-1b)、CCL5(也称为RANTES)、CCL7(也称为MCP-3)、CCL8(也称为mcp-2)、CCL11(也称为嗜酸性粒细胞趋化因子)、CCL15(也称为MIP-1d)、CCL17(也称为TARC)、CCL19(也称为MIP-3b)、CCL20(也称为MIP-3a)、CCL21(也称为MIP-2)、CCL24(也称为MPIF-2/嗜酸性粒细胞趋化因子-2)、CCL25(也称为TECK)、CCL26(也称为嗜酸性粒细胞趋化因子-3)、CCR3、CCR4、CD3、CD19、CD20、CD23(也称为FCER2，IgE的受体)、CD24、CD27、CD28、CD38、CD39、CD40、CD70、CD80(也称为B7-1)、CD86(也称为B7-2)、CD122、CD137(也称为41BB)、CD137L、CD152(也称为CTLA4)、CD154(也称为CD40L)、CD160、CD272、CD273(也称为PDL2)、CD274(也称为PDL1)、CD275(也称为B7H2)、CD276(也称为B7H3)、CD278(也称为ICOS)、CD279(也称为PD-1)、CDH1(也称为E-钙粘蛋白)、壳多糖酶、CLEC9、CLEC91、CRTH2、CSF-1(也称为M-CSF)、CSF-2(也称为GM-CSF)、CSF-3(也称为GCSF)、CX3CL1(也称为SCYD1)、CXCL12(也称为SDF1)、CXCL13、CXCR3、DNGR-1、外核苷三磷酸二磷酸水解酶1、EGFR、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、Gi24、GITR、GITRL、GM-CSF、Her2、HHLA2、HMGB1、HVEM、ICOSLG、IDO、IFNα、IgE、IGF1R、IL2Rβ、IL1、IL1A、IL1B、IL1F10、IL2、IL4、IL4Ra、IL5、IL5R、IL6、IL7、IL7Ra、IL8、IL9、IL9R、IL10、rhIL10、IL12、IL13、IL13Ra1、IL13Ra2、IL15、IL17、IL17Rb(也称为IL25的受体)、IL18、IL22、IL23、IL25、IL27、IL33、IL35、ITGB4(也称为b4整联蛋白)、ITK、KIR、LAG3、LAMP1、瘦素、LPFS2、II类MHC、MUC-1、NCR3LG1、NKG2D、NTPD酶-1、OX40、OX40L、PD-1H、血小板受体、PROM1、S152、SISP1、SLC、SPG64、ST2(也称为IL33的受体)、STEAP2、Syk激酶、TACI、TDO、T14、TIGIT、TIM3、TLR、TLR2、TLR4、TLR5、TLR9、TMEF1、TNFa、TNFRSF7、Tp55、TREM1、TSLP(也称为IL7Ra的共受体)、TSLPR、TWEAK、VEGF、VISTA、Vstm3、WUCAM、和XCR1(也称为GPR5/CCXCR1)。在一些实施方案中，以上抗原靶标中的一种或多种是人抗原靶标。
抗CD28结合位点
本公开文本的某些方面涉及包含结合CD28多肽的抗原结合位点的结合蛋白。在一些实施方案中，CD28多肽是人CD28多肽，也称为Tp44。人CD28多肽是本领域中已知的，并且包括但不限于由NCBI登录号XP_011510499.1、XP_011510497.1、XP_011510496.1、NP_001230007.1、NP_001230006.1或NP_006130.1表示的多肽或从NCBI基因ID号940产生的多肽。在一些实施方案中，包含结合CD28多肽的抗原结合位点的结合蛋白是单特异性和/或单价、双特异性和/或双价、三特异性和/或三价或多特异性和/或多价的。在一些实施方案中，包含结合CD28多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白。在一些实施方案中，包含结合CD28多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，并且其中一个抗原结合位点结合CD3多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合CD38多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合HER2多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合肿瘤靶蛋白。
在一些实施方案中，结合CD28的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTFTSYY(SEQ ID NO:49)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGNVNT(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TRSHYGLDWNFDV(SEQ ID NO:51)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QNIYVW(SEQ ID NO:52)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KAS(SEQ ID NO:53)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQGQTYPY(SEQ IDNO:54)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD28的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GYTFTSYY(SEQ ID NO:49)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGNVNT(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TRSHYGLDWNFDV(SEQ IDNO:51)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QNIYVW(SEQID NO:52)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KAS(SEQ ID NO:53)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQGQTYPY(SEQ ID NO:54)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD28的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYYIHWVRQAPGQGLEWIGSIYPGNVNTNYAQKFQGRATLTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTRSHYGLDWNFDVWGKGTTVTVSS(SEQ ID NO:91)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQNIYVWLNWYQQKPGKAPKLLIYKASNLHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDIATYYCQQGQTYPYTFGQGTKLEIK(SEQ IDNO:92)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD28的结合位点包含：含有SEQ IDNO:91的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:92的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD28的结合位点包含：含有SEQ ID NO:91的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:92的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在以上任何实施方案的一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白。在一些实施方案中，所述三特异性结合蛋白包含结合肿瘤靶蛋白(包括但不限于CD38或HER2)的抗原结合位点、结合CD28多肽的抗原结合位点和结合CD3多肽的抗原结合位点。在一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白，其包含含有三个抗原结合位点的四条多肽，其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对(例如，如本文所述)。在一些实施方案中，上文所述的任何抗CD28抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH1和VL1并且形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点。在一些实施方案中，上文所述和/或表4中的任何抗CD28抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH1和VL1并且形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，并且VH3和VL3形成结合肿瘤靶蛋白(包括但不限于CD38或HER2)的第三抗原结合位点。
示例性抗CD28抗原结合位点的序列提供于表4中。在一些实施方案中，本公开文本的抗CD28抗原结合位点包含表4中描述的抗CD28抗体的1、2、3、4、5或全部6种CDR序列。在一些实施方案中，本公开文本的抗CD28抗原结合位点包含表4中描述的抗CD28抗体的VH结构域序列和/或VL结构域序列。
表4.抗CD28结合蛋白序列。
Figure BDA0003386970950000851
抗CD3结合位点
本公开文本的某些方面涉及包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白。在一些实施方案中，CD3多肽是人CD3多肽，包括CD3-δ(delta)(也称为T3D、IMD19和CD3-δ(DELTA))、CD3-ε(也称为T3E、IMD18和TCRE)和CD3-γ(gamma)(也称为T3G、IMD17和CD3-γ(GAMMA))。人CD3多肽是本领域中已知的，并且包括但不限于由NCBI登录号XP_006510029.1或NP_031674.1表示的多肽或从NCBI基因ID号915、916或917产生的多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是单特异性和/或单价、双特异性和/或双价、三特异性和/或三价或多特异性和/或多价的。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，并且其中一个抗原结合位点结合CD3多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合CD38多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合HER2多肽。在一些实施方案中，包含结合CD3多肽的抗原结合位点的结合蛋白是包含形成三个抗原结合位点的四条多肽的三特异性结合蛋白，其中一个抗原结合位点结合CD28多肽，其中一个抗原结合位点结合CD3多肽，并且其中一个抗原结合位点结合肿瘤靶蛋白。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，所述VL2结构域的CDR-L1序列包含选自以下的氨基酸序列：QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)、QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)、QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)和QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列；和抗体轻链可变(VL)结构域，其包含含有QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ IDNO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与选自DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:96)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:97)和DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:98)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有选自SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有选自SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQID NO:95)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ IDNO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQID NO:96)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ IDNO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:96的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:96的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQID NO:97)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ IDNO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:97的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:97的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQID NO:98)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ IDNO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:93的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：抗体重链可变(VH)结构域，其包含与QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYASSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:302)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列；和/或抗体轻链可变(VL)结构域，其包含与DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)的氨基酸序列至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQ ID NO:302的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和/或含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。在一些实施方案中，结合CD3的结合位点包含：含有SEQID NO:302的氨基酸序列的抗体重链可变(VH)结构域；和含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的抗体轻链可变(VL)结构域。
在以上任何实施方案的一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白。在一些实施方案中，所述三特异性结合蛋白包含结合肿瘤靶蛋白(包括但不限于CD38或HER2)的抗原结合位点、结合CD28多肽的抗原结合位点和结合CD3多肽的抗原结合位点。在一些实施方案中，所述结合蛋白是三特异性结合蛋白，其包含含有三个抗原结合位点的四条多肽，其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对(例如，如本文所述)。在一些实施方案中，上文所述的任何抗CD3抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH2和VL2并且形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点。在一些实施方案中，VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点，以上所述和/或表5中的任何抗CD3抗原结合位点的VH和VL结构域表示VH2和VL2并且形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，并且VH3和VL3形成结合肿瘤靶蛋白(包括但不限于CD38或HER2)的第三抗原结合位点。
示例性抗CD3抗原结合位点的序列提供于表5中。在一些实施方案中，本公开文本的抗CD3抗原结合位点包含表5中描述的抗CD3抗体的1、2、3、4、5或全部6种CDR序列。在一些实施方案中，本公开文本的抗CD3抗原结合位点包含表5中描述的抗CD3抗体的VH结构域序列和/或VL结构域序列。
表5.抗CD3结合蛋白序列。
Figure BDA0003386970950000931
Figure BDA0003386970950000941
Figure BDA0003386970950000951
接头
在一些实施方案中，接头L1、L2、L3和L4在无氨基酸(长度＝0)至约100个氨基酸的长度的范围内，或小于100、50、40、30、20或15个氨基酸或更小。接头还可以是10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个氨基酸的长度。一种结合蛋白中的L1、L2、L3和L4可以都具有相同氨基酸序列或者可以都具有不同氨基酸序列。
合适接头的例子包括例如GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ IDNO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)、GGSGSSGSGG(SEQ ID NO:71)和DKTHT(SEQ ID NO:66)，以及国际公开号WO2017/074878和WO2017/180913中披露的那些。上文列出的例子不意图以任何方式限制本公开文本的范围，并且已经显示包含选自以下的随机选择的氨基酸的接头在结合蛋白中是合适的：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、甘氨酸和脯氨酸。
接头中氨基酸残基的身份和序列可以根据接头中需要实现的二级结构元件的类型而变化。例如，甘氨酸、丝氨酸和丙氨酸对于具有最大柔性的接头是最佳的。如果需要刚性更强且延长的接头，则可使用甘氨酸、脯氨酸、苏氨酸和丝氨酸的一些组合。根据所需的特性，必要时可以将任何氨基酸残基与其他氨基酸残基的组合视为接头，以构建较大肽接头。
在一些实施方案中，L1的长度是L3的长度的至少两倍。在一些实施方案中，L2的长度是L4的长度的至少两倍。在一些实施方案中，L1的长度是L3的长度的至少两倍，并且L2的长度是L4的长度的至少两倍。在一些实施方案中，L1为3至12个氨基酸残基的长度，L2为3至14个氨基酸残基的长度，L3为1至8个氨基酸残基的长度，并且L4为1至3个氨基酸残基的长度。在一些实施方案中，L1为5至10个氨基酸残基的长度，L2为5至8个氨基酸残基的长度，L3为1至5个氨基酸残基的长度，并且L4为1至2个氨基酸残基的长度。在一些实施方案中，L1为7个氨基酸残基的长度，L2为5个氨基酸残基的长度，L3为1个氨基酸残基的长度，并且L4为2个氨基酸残基的长度。
在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4各自独立地为零个氨基酸的长度或包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)和GGSGSSGSGG(SEQ ID NO:71)。在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4各自独立地包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)和GGSGSSGSGG(SEQ ID NO:71)。在一些实施方案中，L1包含序列GQPKAAP(SEQ ID NO:67)，L2包含序列TKGPS(SEQ ID NO:68)，L3包含序列S，并且L4包含序列RT。
在一些实施方案中，L1、L2、L3或L4中的至少一个包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。在一些实施方案中，L1、L2、L3和L4包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。
Fc区域和恒定结构域
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含进一步包含与CH1连接的Fc区域的第二多肽链，所述Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含进一步包含与CH1连接的Fc区域的第三多肽链，所述Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含进一步包含与CH1连接的Fc区域的第二多肽链，所述Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；和进一步包含与CH1连接的Fc区域的第三多肽链，所述Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含全长抗体重链或含有Fc区域的多肽链。在一些实施方案中，Fc区域是人Fc区域，例如，人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc区域。在一些实施方案中，Fc区域包括抗体铰链、CH1、CH2、CH3以及任选的CH4结构域。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG1 Fc区域。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域。在一些实施方案中，Fc区域包含下文所述的一种或多种突变。在一些实施方案中，Fc区域是表4中示出的结合蛋白的重链多肽(例如，多肽2或3)之一的Fc区域。在一些实施方案中，重链恒定区是表4中示出的结合蛋白的重链多肽(例如，多肽2或3)之一的恒定区。在一些实施方案中，轻链恒定区是表4中示出的结合蛋白的轻链多肽(例如，多肽1或4)之一的恒定区。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包括一个或两个Fc变体。如本文所用术语“Fc变体”是指从天然Fc修饰但仍包含补救受体FcRn(新生儿Fc受体)的结合位点的分子或序列。示例性Fc变体及其与补救受体的相互作用是本领域中已知的。因此，术语“Fc变体”可以包含从非人天然Fc人源化的分子或序列。此外，天然Fc包含如下区域，所述区域因为提供本发明的抗体样结合蛋白不需要的结构特征或生物活性而可以被去除。因此，术语“Fc变体”包含缺少一个或多个天然Fc位点或残基或其中一个或多个Fc位点或残基已经被修饰的分子或序列，所述位点或残基影响或参与：(1)二硫键形成，(2)与所选宿主细胞的不相容性，(3)在所选宿主细胞中表达后的N末端异质性，(4)糖基化，(5)与补体的相互作用，(6)与除了补救受体以外的Fc受体的结合，或(7)抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白(例如，三特异性结合蛋白)包含第二多肽链上的“杵”突变和第三多肽链上的“臼”突变。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含第三多肽链上的“杵”突变和第二多肽链上的“臼”突变。在一些实施方案中，“杵”突变包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和/或366的位置处的一个或多个取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S354C、T366W、T366Y、S354C和T366W，或S354C和T366Y。在一些实施方案中，“杵”突变包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S354C和T366W。在一些实施方案中，“臼”突变包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置407以及任选的349、366和/或368的位置处的一个或多个取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是Y407V或Y407T以及任选的Y349C、T366S和/或L368A。在一些实施方案中，“臼”突变包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置366以及任选的354的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366W或T366Y以及任选的S354C；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置407以及任选的349、366和/或368的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y407V或Y407T以及任选的Y349C、T366S和/或L368A。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置407以及任选的349、366和/或368的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y407V或Y407T以及任选的Y349C、T366S和/或L368A；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置366以及任选的354的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366W或T366Y以及任选的S354C。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366W；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置366、368和/或407的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366S、L368A和/或Y407V。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4位置366、368和/或407的位置处的一个或多个氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366S、L368A和/或Y407V；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是T366W。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V。在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W。在一些实施方案中，第一和/或第二Fc区域是人IgG1 Fc区域。在一些实施方案中，第一和/或第二Fc区域是人IgG4 Fc区域。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、354、366和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、S354C、T366W和R409K；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、349、366、368、407和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、Y349C、T366S、L368A、Y407V和R409K。在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、349、366、368、407和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、Y349C、T366S、L368A、Y407V和R409K；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、354、366和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、S354C、T366W和R409K。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234、235、354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A、L235A、S354C和T366W；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234、235、349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A、L235A、Y349C、T366S、L368A和Y407V。在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234、235、349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A、L235A、Y349C、T366S、L368A和Y407V；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234、235、354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A、L235A、S354C和T366W。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含一个或多个突变以降低效应子功能，例如，Fc受体介导的抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)、补体依赖性细胞毒性(CDC)和/或抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。在一些实施方案中，所述第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；其中所述第一和所述第二Fc区域是人IgG1 Fc区域；并且其中所述第一和所述第二Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A和L235A。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的Fc区域是人IgG1 Fc区域，并且其中所述Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A和L235A。在一些实施方案中，所述第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；其中所述第一和所述第二Fc区域是人IgG1 Fc区域；并且其中所述第一和所述第二Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和329的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A、L235A和P329A。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的Fc区域是人IgG1 Fc区域，并且其中所述Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和329的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A、L235A和P329A。在一些实施方案中，所述第二和所述第三多肽链的Fc区域是人IgG4 Fc区域，并且所述Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A和L235A。在一些实施方案中，所述结合蛋白包含第二多肽链，所述第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；和第三多肽链，所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；并且其中所述第一和第二Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A和L235A。
在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、234、235、354、366和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、F234A、L235A、S354C、T366W和R409K；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、234、235、349、366、368、407和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、F234A、L235A、Y349C、T366S、L368A、Y407V和R409K。在一些实施方案中，第二多肽链进一步包含与CH1连接的第一Fc区域，其中所述第一Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第一Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、234、235、349、366、368、407和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、F234A、L235A、Y349C、T366S、L368A、Y407V和R409K；并且其中所述第三多肽链进一步包含与CH1连接的第二Fc区域，其中所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域，所述人IgG4 Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，其中所述第二Fc区域包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、234、235、354、366和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P、F234A、L235A、S354C、T366W和R409K。
在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含降低或消除FcγI和/或FcγII结合的一个或多个突变。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含降低或消除FcγI和/或FcγII结合但不影响FcRn结合的一个或多个突变。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228和/或409的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S228P和/或R409K。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234和/或235的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是F234A和/或L235A。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、234、235和/或409的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S228P、F234A、L235A和/或R409K。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置233-236的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是E233P、F234V、L235A和在236处的缺失。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG4 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228、233-236和/或409的取代处的氨基酸突变。在一些实施方案中，氨基酸突变是S228P；E233P、F234V、L235A和在236处的缺失；和/或R409K。
在一些实施方案中，Fc区域包含一个或多个突变，所述突变降低或消除Fc区域的Fc受体结合和/或效应子功能(例如，Fc受体介导的抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)、补体依赖性细胞毒性(CDC)和/或抗体依赖性细胞毒性(ADCC))。
在一些实施方案中，Fc区域是人IgG1 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和/或329的位置处的一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是L234A、L235A和/或P329A。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG1 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置298、299和/或300的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S298N、T299A和/或Y300S。
在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含一个或多个突变以改善例如IgG4的铰链区和/或二聚体界面的稳定性(参见例如，Spiess,C.等人(2013)J.Biol.Chem.288:26583-26593)。在一些实施方案中，突变包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228和409的位置处的取代，其中所述氨基酸取代是S228P和R409K。在一些实施方案中，所述结合蛋白包含进一步包含与CH1连接的第一Fc区域的第二多肽链，所述第一Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域，和进一步包含与CH1连接的第二Fc区域的第三多肽链，所述第二Fc区域包含免疫球蛋白铰链区以及CH2和CH3免疫球蛋白重链恒定结构域；其中所述第一和所述第二Fc区域是人IgG4 Fc区域；并且其中所述第一和所述第二Fc区域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P和R409K。在一些实施方案中，本公开文本的结合蛋白包含杵和臼突变以及用于改善稳定性的一个或多个突变。在一些实施方案中，第一和/或第二Fc区域是人IgG4 Fc区域。
在一些实施方案中，Fc区域是人IgG1 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和/或329的位置处的一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是L234A、L235A和/或P329A。在一些实施方案中，Fc区域是人IgG1 Fc区域，其包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置298、299和/或300的位置处的氨基酸取代。在一些实施方案中，氨基酸取代是S298N、T299A和/或Y300S。
核酸
本公开文本的其他方面涉及分离的核酸分子，其包含编码本文所述的任何结合蛋白的核苷酸序列。示例性且非限制性核酸序列提供于表5中。
本公开文本的其他方面涉及多核苷酸的试剂盒，所述多核苷酸例如编码如本文所述的结合蛋白的一种或多种多肽。在一些实施方案中，本公开文本的多核苷酸的试剂盒包含多核苷酸的试剂盒中的一种、两种、三种或四种多核苷酸，所述多核苷酸包含：(a)包含SEQ ID NO:189的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:190的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:191的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:192的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(b)包含SEQ ID NO:193的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:194的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:195的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:196的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(c)包含SEQ IDNO:197的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:198的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:199的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:200的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(d)包含SEQ ID NO:201的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQID NO:202的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:203的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:204的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(e)包含SEQ ID NO:205的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:206的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:207的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:208的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(f)包含SEQ ID NO:209的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:210的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:211的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:212的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(g)包含SEQ ID NO:213的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:214的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ IDNO:215的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:216的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(h)包含SEQ ID NO:217的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:218的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:219的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQID NO:220的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(i)包含SEQ ID NO:221的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:222的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:223的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:224的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(j)包含SEQ ID NO:225的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:226的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:227的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:228的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(k)包含SEQ ID NO:229的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:230的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:231的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:232的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(l)包含SEQ ID NO:233的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:234的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:235的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:236的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(m)包含SEQ ID NO:237的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:238的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:239的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:240的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(n)包含SEQ IDNO:241的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:242的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:243的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:244的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(o)包含SEQ ID NO:245的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQID NO:246的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:247的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:248的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(p)包含SEQ ID NO:249的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:250的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:251的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:252的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(q)包含SEQ ID NO:253的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:254的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:255的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:256的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(r)包含SEQ ID NO:257的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:258的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ IDNO:259的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:260的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(s)包含SEQ ID NO:261的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:262的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:263的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQID NO:264的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(t)包含SEQ ID NO:265的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:266的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:267的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:268的多核苷酸序列的第四多核苷酸；(u)包含SEQ ID NO:269的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:270的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:271的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:272的多核苷酸序列的第四多核苷酸；或(v)包含SEQ ID NO:273的多核苷酸序列的第一多核苷酸、包含SEQ ID NO:274的多核苷酸序列的第二多核苷酸、包含SEQ ID NO:275的多核苷酸序列的第三多核苷酸和包含SEQ ID NO:276的多核苷酸序列的第四多核苷酸。
本公开文本的其他方面涉及载体系统，其包含编码本文所述的任何结合蛋白的第一、第二、第三和第四多肽链的一种或多种载体。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一多肽链的第一载体、编码结合蛋白的第二多肽链的第二载体、编码结合蛋白的第三多肽链的第三载体和编码结合蛋白的第四多肽链的第四载体，如表6中的多核苷酸中所示。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一和第二多肽链的第一载体以及编码结合蛋白的第三和第四多肽链的第二载体。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一和第三多肽链的第一载体以及编码结合蛋白的第二和第四多肽链的第二载体。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一和第四多肽链的第一载体以及编码结合蛋白的第二和第三多肽链的第二载体。在一些实施方案中，载体系统包括编码结合蛋白的第一、第二、第三和第四多肽链的第一载体。载体系统的一种或多种载体可以是本文所述的任何载体。在一些实施方案中，所述一种或多种载体是表达载体。在一些实施方案中，第一、第二、第三和第四多核苷酸存在于一种或多种表达载体，例如一种、两种、三种、或四种表达载体上。
使用标准重组DNA方法构建编码形成结合蛋白的多肽的多核苷酸，将这些多核苷酸并入重组表达载体中，并将此类载体引入宿主细胞中。参见例如，Sambrook等人,2001,Molecular Cloning:A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory Press,第3版)。可以根据制造商的说明书来进行酶反应和纯化技术，如本领域通常所实现的或如本文所述。除非提供具体定义，否则关于本文所述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的术语以及本文所述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学的实验室程序和技术是本领域中熟知且常用的那些。类似地，常规技术可以用于化学合成、化学分析、药物制备、配制、递送和患者的治疗。
在一些实施方案中，分离的核酸与异源启动子可操作地连接，以指导编码结合蛋白的核酸序列的转录。启动子可以是指引导核酸的转录的核酸控制序列。在第一核酸序列被置于与第二核酸序列具有功能性关系的位置中时，第一核酸序列与第二核酸序列可操作地连接。例如，如果启动子影响编码序列的转录或表达，则所述启动子与结合蛋白的编码序列可操作地连接。启动子的例子可以包括但不限于从病毒(如多瘤病毒、鸡痘病毒、腺病毒(如腺病毒2)、牛乳头状瘤病毒、禽肉瘤病毒、巨细胞病毒、逆转录病毒、乙型肝炎病毒、猿猴病毒40(SV40)等)的基因组获得的启动子、异源真核启动子(如肌动蛋白启动子、免疫球蛋白启动子、热休克启动子等)、CAG启动子(Niwa等人,Gene 108(2):193-9,1991)、磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子、四环素诱导型启动子(Masui等人,Nucleic Acids Res.33:e43,2005)、lac系统、trp系统、tac系统、trc系统、噬菌体λ的主要操纵子和启动子区域、3-磷酸甘油酸激酶的启动子、酵母酸性磷酸酶的启动子和酵母α交配因子的启动子。编码本公开文本的结合蛋白的多核苷酸可以处于以下启动子的控制下：组成型启动子、诱导型启动子、或本文所述的任何其他合适的启动子、或本领域技术人员将易于识别的其他合适的启动子。
在一些实施方案中，将分离的核酸并入载体中。在一些实施方案中，载体是表达载体。表达载体可以包括与要表达的多核苷酸可操作地连接的一个或多个调控序列。术语“调控序列”包括启动子、增强子和其他表达控制元件(例如，多腺苷酸化信号)。合适的增强子的例子可以包括但不限于来自哺乳动物基因的增强子序列(如球蛋白、弹性蛋白酶、白蛋白、α-胎蛋白、胰岛素等)、和来自真核细胞病毒的增强子序列(如复制起点的后侧上的SV40增强子(bp 100-270)、巨细胞病毒早期启动子增强子、复制起点的后侧上的多瘤增强子、腺病毒增强子等)。合适的载体的例子可以包括例如质粒、粘粒、附加体、转座子和病毒载体(例如，腺病毒、痘苗病毒、辛德毕斯病毒(Sindbis-viral)、麻疹、疱疹病毒、慢病毒、逆转录病毒、腺相关病毒载体等)。表达载体可以用于转染宿主细胞，例如细菌细胞、酵母细胞、昆虫细胞和哺乳动物细胞。能够在宿主体内表达并复制的生物功能病毒和质粒DNA载体是本领域中已知的，并且可以用于转染感兴趣的任何细胞。
宿主细胞
本公开文本的其他方面涉及宿主细胞(例如，分离的宿主细胞)，其包含本文所述的一种或多种分离的多核苷酸、载体和/或载体系统。在一些实施方案中，本公开文本的分离的宿主细胞在体外培养。在一些实施方案中，宿主细胞是细菌细胞(例如，大肠杆菌(E.coli)细胞)。在一些实施方案中，宿主细胞是酵母细胞(例如，酿酒酵母(S.cerevisiae)细胞)。在一些实施方案中，宿主细胞是昆虫细胞。昆虫宿主细胞的例子可以包括例如果蝇属(Drosophila)细胞(例如，S2细胞)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞(例如，High FiveTM细胞)和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞(例如，Sf21或Sf9细胞)。在一些实施方案中，宿主细胞是哺乳动物细胞。哺乳动物宿主细胞的例子可以包括例如人胚肾细胞(例如，293细胞或亚克隆用于在悬浮培养物中生长的293细胞)、Expi293TM细胞、CHO细胞、幼仓鼠肾细胞(例如，BHK，ATCC CCL 10)、小鼠支持细胞(例如，TM4细胞)、猴肾细胞(例如，CV1ATCC CCL 70)、非洲绿猴肾细胞(例如，VERO-76，ATCC CRL-1587)、人宫颈癌细胞(例如，HELA，ATCC CCL 2)、犬肾细胞(例如，MDCK，ATCC CCL 34)、水牛鼠(buffalo rat)肝细胞(例如，BRL 3A，ATCC CRL 1442)、人肺细胞(例如，W138，ATCC CCL 75)、人肝细胞(例如，HepG2，HB 8065)、小鼠乳房肿瘤细胞(例如，MMT 060562，ATCC CCL51)、TRI细胞、MRC 5细胞、FS4细胞、人肝细胞瘤系(例如，Hep G2)和骨髓瘤细胞(例如，NS0和Sp2/0细胞)。
本公开文本的其他方面涉及产生本文所述的任何结合蛋白的方法。在一些实施方案中，所述方法包括：a)在使得宿主细胞表达结合蛋白的条件下培养包含分离的核酸、载体和/或载体系统(例如，本文所述的任何分离的核酸、载体和/或载体系统)的宿主细胞(例如，本文所述的任何宿主细胞)；以及b)从宿主细胞中分离结合蛋白。在表达蛋白质的条件下培养宿主细胞的方法是本领域普通技术人员所熟知的。从培养的宿主细胞中分离蛋白质的方法是本领域普通技术人员所熟知的，包括例如通过亲和色谱(例如，两步亲和色谱，包括蛋白A亲和色谱，随后是尺寸排阻色谱)。
药物组合物
包含结合蛋白的治疗或药物组合物在本公开文本的范围内。此类治疗或药物组合物可以包含与选择的适合于给予方式的药学上或生理上可接受的配制剂混合的治疗有效量的结合蛋白或结合蛋白-药物缀合物。
可接受的配制材料在所用剂量和浓度下对接受者无毒。
药物组合物可以含有用于改良、维持或保持例如组合物的pH、摩尔渗透压浓度、粘度、澄清度、颜色、等渗性、气味、无菌度、稳定性、溶解或释放速率、吸附或渗透的配制材料。合适的配制材料包括但不限于氨基酸(如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸)、抗微生物剂、抗氧化剂(如抗坏血酸、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠)、缓冲液(如硼酸盐、碳酸氢盐、Tris-HCl、柠檬酸盐、磷酸盐或其他有机酸)、膨胀剂(如甘露醇或甘氨酸)、螯合剂(如乙二胺四乙酸(EDTA))、络合剂(如咖啡因、聚乙烯吡咯烷酮、β-环糊精或羟丙基-β-环糊精)、填充剂、单糖、二糖和其他碳水化合物(如葡萄糖、甘露糖或糊精)、蛋白质(如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白)、着色剂、调味剂和稀释剂、乳化剂、亲水聚合物(如聚乙烯吡咯烷酮)、低分子量多肽、成盐抗衡离子(如钠)、防腐剂(如苯扎氯铵、苯甲酸、水杨酸、硫柳汞、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯己定、山梨酸或过氧化氢)、溶剂(如丙三醇、丙二醇或聚乙二醇)、糖醇(如甘露醇或山梨醇)、悬浮剂、表面活性剂或润湿剂(如普朗尼克(pluronics)；PEG；脱水山梨糖醇酯；聚山梨酯(如聚山梨酯20或聚山梨酯80)；曲拉通(triton)；氨丁三醇；卵磷脂；胆固醇或泰洛沙泊(tyloxapal))、稳定性增强剂(如蔗糖或山梨醇)、张力调节剂(如碱金属卤化物(例如氯化钠或氯化钾)或甘露醇山梨醇)、递送媒介物、稀释剂、赋形剂和/或药物佐剂(参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences(第18版,A.R.Gennaro编辑,Mack Publishing Company 1990)和其后续版本，所述文献出于任何目的通过引用并入本文)。
最佳药物组合物将由技术人员根据例如计划的给予途径、递送形式和所需剂量来决定。此类组合物可以影响结合蛋白的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。
药物组合物中的主要媒介物或载体在性质上可以是水性或非水性的。例如，适用于注射的媒介物或载体可以是水、生理盐水溶液或人工脑脊液，可能补充有用于肠胃外给予的组合物中常用的其他材料。中性缓冲盐水或与血清白蛋白混合的盐水是另外的示例性媒介物。其他示例性药物组合物包含约pH 7.0-8.5的Tris缓冲液或约pH 4.0-5.5的乙酸盐缓冲液，它们可以进一步包括山梨醇或合适的替代物。在本公开文本的一个实施方案中，结合蛋白组合物可以通过将具有所需纯度的所选组合物与任选配制剂以冻干饼或水溶液形式混合来制备用于储存。此外，可以使用适当赋形剂如蔗糖将结合蛋白配制为冻干物。
可以选择本公开文本的药物组合物用于肠胃外递送或皮下递送。可替代地，可以选择组合物用于吸入或用于经消化道递送，如口服。此类药学上可接受的组合物的制备在本领域的技术范围内。
配制组分是以给予位点可接受的浓度存在。例如，使用缓冲液将组合物维持在生理pH或略低的pH，通常在约5至约8的pH范围内。
当考虑肠胃外给予时，所用治疗组合物可以呈无热原的、肠胃外可接受的水溶液形式，其包含在药学上可接受的媒介物中的所需结合蛋白。特别适用于肠胃外注射的媒介物是无菌蒸馏水，其中将结合蛋白配制为适当保存的无菌等渗溶液。又另一种制备可以涉及用提供产物的受控或持续释放的试剂(如可注射微球、生物蚀解性颗粒、聚合化合物(如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠或脂质体)配制所需分子，然后可以将所述分子经由积存注射来递送。还可以使用透明质酸，并且这可以具有促进在循环中的持久的持续时间的作用。用于引入所需分子的其他合适的手段包括可植入的药物递送装置。
在一个实施方案中，可以将药物组合物配制用于吸入。例如，可以将结合蛋白配制为干粉用于吸入。也可以将结合蛋白吸入溶液用推进剂来配制用于气溶胶递送。在又另一个实施方案中，可以将溶液雾化。
还考虑到可以将某些配制品口服给予。在本公开文本的一个实施方案中，可以将以这种方式给予的结合蛋白用或不用在固体剂型(如片剂和胶囊)的混配中通常使用的那些载体来配制。例如，胶囊可以设计为在胃肠道中的某一点释放配制品的活性部分，在所述点处生物利用度最大化且前系统性降解最小化。可以包括另外的试剂以有利于结合蛋白的吸收。还可以采用稀释剂、调味剂、低熔点蜡、植物油、润滑剂、悬浮剂、片剂崩解剂和粘合剂。
另一种药物组合物可以包含与适合于制造片剂的无毒赋形剂混合的有效量的结合蛋白。通过将片剂溶解于无菌水或另一种适当媒介物中，可以以单位剂量形式制备溶液。合适的赋形剂包括但不限于惰性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠或碳酸氢钠、乳糖或磷酸钙；或者结合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；或者润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。
本公开文本的另外的药物组合物对于本领域技术人员将是明显的，所述药物组合物包括在持续或受控递送配制品中包含结合蛋白的配制品。用于配制多种其他持续或受控递送手段(如脂质体载体、生物蚀解性微粒或多孔珠和积存注射)的技术也是本领域技术人员已知的。持续释放制剂的另外的例子包括呈成型物品(例如薄膜)或微胶囊形式的半渗透性聚合物基质。持续释放基质可以包括聚酯、水凝胶、聚丙交酯、L-谷氨酸与γ乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)、乙烯乙酸乙烯酯或聚-D(-)-3-羟丁酸。持续释放组合物还可以包括脂质体，所述脂质体可以通过本领域中已知的几种方法中的任何方法来制备。
要用于体内给予的药物组合物通常必须是无菌的。这可以通过经无菌滤膜过滤来实现。在将组合物冻干的情况下，可以在冻干和重构之前或之后使用这种方法进行灭菌。用于肠胃外给予的组合物可以以冻干形式或溶液形式储存。此外，通常将肠胃外组合物置于具有无菌进入口的容器中，例如具有可由皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。
一旦已经配制药物组合物，就可以将其作为溶液、悬浮液、凝胶、乳液、固体或作为脱水或冻干粉末储存在无菌小瓶中。可以将此类配制品以即用形式或以需要在给予前重构的形式(例如，冻干)储存。
本公开文本还涵盖用于产生单一剂量给予单位的试剂盒。试剂盒可以各自含有具有干燥蛋白质的第一容器和具有水性配制品的第二容器二者。在本公开文本的范围内还包括含有单室和多室预填充注射器(例如，液体注射器和冻干剂注射器(lyosyringe))的试剂盒。
在治疗上采用的结合蛋白药物组合物的有效量将取决于例如治疗背景和目标。本领域技术人员将了解，治疗的适当剂量水平将因此部分根据以下而变化：所递送的分子、结合蛋白所用于的适应症、给予途径以及患者的体型(体重、体表或器官大小)和状况(年龄和一般健康状况)。因此，临床医师可以滴定剂量并改变给予途径以获得最佳治疗效果。
给药频率将取决于所用配制品中结合蛋白的药代动力学参数。通常，临床医师将给予组合物直至达到实现所需效果的剂量为止。因此，可以将组合物作为单一剂量、作为随时间的两次或更多次剂量(它们可以含有或不含等量的所需分子)或作为连续输注经由植入装置或导管来给予。适当剂量的进一步改进是由本领域普通技术人员以常规方式进行，并且在本领域普通技术人员常规进行的任务范围内。适当剂量可以通过使用适当的剂量反应数据来确定。
药物组合物的给予途径与已知方法一致，例如，口服；通过经静脉内、腹膜内、大脑内(脑实质内)、脑室内、肌内、眼内、动脉内、门静脉内或病灶内途径注射；通过持续释放系统；或者通过植入装置。在需要的情况下，组合物可以通过推注注射来给予，或者通过输注连续给予，或者通过植入装置来给予。
还可以将组合物通过已经使所需分子吸附或包封于其上的膜、海绵状物或其他适当材料的植入局部地给予。在使用植入装置的情况下，可以将所述装置植入任何合适的组织或器官中，并且所需分子的递送可以经由扩散、定时释放推注或连续给予来进行。
药物组合物可以用于预防和/或治疗HIV感染。药物组合物可以作为独立疗法使用或与标准抗逆转录病毒疗法组合使用。
本公开文本还涉及包括结合蛋白和可用于检测生物样品中的靶抗原水平的其他试剂的试剂盒。此类试剂可以包括可检测标记、封闭血清、阳性和阴性对照样品以及检测试剂。在一些实施方案中，所述试剂盒包括组合物，所述组合物包含本文所述的任何结合蛋白、多核苷酸、载体、载体系统和/或宿主细胞。在一些实施方案中，所述试剂盒包括容器以及在所述容器上或与所述容器相关联的标签或包装说明书。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、IV溶液袋等。所述容器可以由多种材料如玻璃或塑料制成。容器容纳本身或与另一种组合物组合地有效治疗、预防和/或诊断病症(例如，HIV感染)的组合物，并且可以具有无菌进入口(例如，容器可以是静脉输液袋或具有可由皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)。在一些实施方案中，标签或包装说明书指示，所述组合物用于预防、诊断和/或治疗所选病症。可替代地或另外地，所述制品或试剂盒可以进一步包括第二(或第三)容器，所述第二(或第三)容器含有药学上可接受的缓冲液，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液(Ringer's solution)和葡萄糖溶液。它可以进一步包括从商业和用户角度所需的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。
结合蛋白的方法和用途
病毒
本公开文本的某些方面涉及用于扩增病毒特异性记忆T细胞的方法。在一些实施方案中，所述方法包括使病毒特异性记忆T细胞与本公开文本的结合蛋白接触，所述结合蛋白是例如包含结合CD28多肽的第一抗原结合位点、结合CD3多肽的第二抗原结合位点和结合CD38多肽的第三抗原结合位点的三特异性结合蛋白。
在一些实施方案中，使所述病毒特异性记忆T细胞在体外或离体与所述结合蛋白接触。
在一些实施方案中，使所述病毒特异性记忆T细胞与所述结合蛋白接触引起病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
本公开文本的其他方面涉及扩增T细胞的方法。在一些实施方案中，所述方法包括使T细胞与本公开文本的结合蛋白接触，所述结合蛋白是例如包含结合CD28多肽的第一抗原结合位点、结合CD3多肽的第二抗原结合位点和结合CD38多肽的第三抗原结合位点的三特异性结合蛋白。
在一些实施方案中，所述T细胞是记忆T细胞或效应T细胞。
在一些实施方案中，所述T细胞在其细胞表面上表达嵌合抗原受体(CAR)或包含编码CAR的多核苷酸。
本公开文本的其他方面涉及例如在有需要的个体中治疗慢性病毒感染的方法。在一些实施方案中，所述方法包括向有需要的个体给予有效量的本公开文本的结合蛋白，所述结合蛋白是例如包含结合CD28多肽的第一抗原结合位点、结合CD3多肽的第二抗原结合位点和结合CD38多肽的第三抗原结合位点的三特异性结合蛋白。
在一些实施方案中，所述个体是人。
在一些实施方案中，将所述结合蛋白以包含所述结合蛋白和药学上可接受的载体的药物配制品的形式给予至所述个体。
在一些实施方案中，所述结合蛋白的给予导致所述个体中病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
在任何上述方法中，记忆T细胞可以是CD8+或CD4+记忆T细胞。在任何上述方法中，记忆T细胞可以是中枢记忆T细胞(TCM)或效应记忆T细胞(TEM)。
癌症
本公开文本的某些方面涉及用于预防和/或治疗患者中的癌症的方法。在一些实施方案中，所述方法包括向所述患者给予治疗有效量的本公开文本的结合蛋白或药物组合物。
在一些实施方案中，将本公开文本的结合蛋白给予至有需要的患者用于治疗或预防癌症。在一些实施方案中，本公开文本涉及预防和/或治疗增殖性疾病或障碍(例如，癌症)的方法。在一些实施方案中，所述方法包括向患者给予治疗有效量的本文所述的结合蛋白或与其相关的药物组合物中的至少一种。在一些实施方案中，本公开文本涉及本文所述的结合蛋白或与其相关的药物组合物中的至少一种用于预防和/或治疗有需要的患者中的增殖性疾病或障碍(例如癌症)的用途。在一些实施方案中，本公开文本涉及本文所述的结合蛋白或与其相关的药物组合物中的至少一种，用于在制造用于预防和/或治疗有需要的患者中的增殖性疾病或障碍(例如，癌症)的药物中使用。在一些实施方案中，所述患者是人。
在一些实施方案中，所述至少一种结合蛋白是与(或要与)一种或多种抗癌疗法(例如，本领域已知的任何抗癌疗法，如化学治疗剂或疗法)组合给予。在一些实施方案中，所述至少一种结合蛋白是在(或要在)一种或多种抗癌疗法之前给予。在一些实施方案中，所述至少一种结合蛋白是与(或要与)一种或多种抗癌疗法同时给予。在一些实施方案中，所述至少一种结合蛋白是在(或要在)一种或多种抗癌疗法之后给予。
在一些实施方案中，所述结合蛋白包含结合T细胞表面蛋白的一个或两个抗原结合位点和结合人HER2多肽的细胞外结构域的另一个抗原结合位点。在一些实施方案中，所述结合蛋白包含结合人HER2多肽的细胞外结构域的抗原结合位点、结合人CD28多肽的抗原结合位点和结合人CD3多肽的抗原结合位点。
在一些实施方案中，来自所述个体的癌细胞表达HER2。在一些实施方案中，基于癌症的细胞表达人HER2多肽选择患者用于治疗。本领域中已知适合用于检测癌细胞的HER2表达的测定包括但不限于免疫组织化学(IHC)和荧光原位杂交(FISH)测定。
在一些实施方案中，所述癌症(例如，HER2阳性癌症)是乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌或非小细胞肺癌(NSCLC)。
在一些实施方案中，所述结合蛋白包含结合T细胞表面蛋白的一个或两个抗原结合位点和结合人CD38多肽的细胞外结构域的另一个抗原结合位点。在一些实施方案中，所述结合蛋白包含结合人CD38多肽的细胞外结构域的抗原结合位点、结合人CD28多肽的抗原结合位点和结合人CD3多肽的抗原结合位点。
在一些实施方案中，来自所述个体的癌细胞表达CD38。在一些实施方案中，癌症的细胞在其细胞表面上表达人CD38亚型A多肽。在一些实施方案中，癌症的细胞在其细胞表面上表达人CD38亚型E多肽。在一些实施方案中，基于癌症的细胞在其细胞表面上表达人CD38亚型E多肽选择患者用于治疗。在一些实施方案中，癌细胞表达CD38和CD28。在一些实施方案中，癌细胞表达CD38但不表达CD28。
在一些实施方案中，癌症(例如，CD38阳性癌症)是多发性骨髓瘤、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、急性髓性白血病、淋巴瘤、乳腺癌如Her2+乳腺癌、前列腺癌、生发中心B细胞淋巴瘤或B细胞急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，所述癌症是多发性骨髓瘤。在某些实施方案中，所述癌症是急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或B细胞淋巴瘤。
在某些实施方案中，所述癌症是多发性骨髓瘤。已经测试了抗CD38抗体用于治疗多发性骨髓瘤如达雷木单抗。然而，虽然多发性骨髓瘤被认为是可治疗的，但几乎所有患者都不可避免地复发，导致难治性疾病的发展。在一些实施方案中，所述癌症是复发性或难治性多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，所述患者已经用先前多发性骨髓瘤治疗进行治疗。在一些实施方案中，将本公开文本的结合蛋白作为多发性骨髓瘤的第1线、第2线或第3线治疗给予至患者。不希望受理论的束缚，认为本公开文本的抗CD38x抗CD28x抗CD3结合蛋白可用于例如通过以下方式来治疗多发性骨髓瘤：经由抗CD38(或抗CD28/抗CD38)将T细胞募集至肿瘤细胞、经由抗CD3/抗CD28激活接合的T细胞和/或通过基于穿孔素/颗粒酶的机制杀伤肿瘤细胞。已报道CD28是用于多发性骨髓瘤的新型癌症标志物。参见Nair,J.R.等人(2011)J.Immunol.187:1243-1253。
本文所述的任何结合蛋白可以用于本公开文本的方法。
在本公开文本的任何方法的一些实施方案中，在给予所述结合蛋白之前，所述患者已经用达雷木单抗进行治疗。如本文所述，本公开文本提供了不与达雷木单抗竞争结合CD38的抗CD38结合蛋白和位点。不希望受理论的束缚，认为这是有利的，因为先前用达雷木单抗治疗的患者可以例如在治疗之前没有清除期的情况下用本公开文本的结合蛋白进行治疗。
所述结合蛋白可以用于检测和定量一种或多种靶抗原的任何已知的测定方法中，如竞争性结合测定、直接和间接夹心式测定、和免疫沉淀测定。所述结合蛋白将以适合于所用测定方法的亲和力结合所述一种或多种靶抗原。
在某些实施方案中，对于诊断应用，可以用可检测部分标记结合蛋白。可检测部分可以是能够直接或间接产生可检测信号的任何部分。例如，可检测部分可以是放射性同位素，如3H、14C、32P、35S、125I、99Tc、111In或67Ga；荧光或化学发光化合物，如异硫氰酸荧光素、罗丹明或萤光素；或者酶，如碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或辣根过氧化物酶。
所述结合蛋白也可以用于体内成像。可以将用可检测部分标记的结合蛋白给予至动物，优选地给予至血流中，并测定宿主中经标记的抗体的存在和位置。可以用在动物中通过核磁共振、放射学或本领域中已知的其他检测手段可检测的任何部分标记结合蛋白。
在某些实施方案中，对于临床或研究应用，可以将结合蛋白与细胞毒性剂缀合。与细胞毒性剂偶联的多种抗体(即，抗体-药物缀合物)已经用于将细胞毒性有效负载靶向特异性肿瘤细胞。将所述药剂与抗体缀合的细胞毒性剂和接头是本领域中已知的；参见例如，Parslow,A.C.等人(2016)Biomedicines 4:14和Kalim,M.等人(2017)DrugDes.Devel.Ther.11:2265-2276。
结合蛋白治疗组合物及其给予
包含结合蛋白的治疗或药物组合物在本公开文本的范围内。此类治疗或药物组合物可以包含与选择的适合于给予方式的药学上或生理上可接受的配制剂混合的治疗有效量的结合蛋白或结合蛋白-药物缀合物。这些药物组合物可以用于本文所述的任何方法和用途(例如，离体、体外和/或体内)。
可接受的配制材料优选地在所用剂量和浓度下对接受者无毒。
药物组合物可以含有用于改良、维持或保持例如组合物的pH、摩尔渗透压浓度、粘度、澄清度、颜色、等渗性、气味、无菌度、稳定性、溶解或释放速率、吸附或渗透的配制材料。合适的配制材料包括但不限于氨基酸(如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸)、抗微生物剂、抗氧化剂(如抗坏血酸、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠)、缓冲液(如硼酸盐、碳酸氢盐、Tris-HCl、柠檬酸盐、磷酸盐或其他有机酸)、膨胀剂(如甘露醇或甘氨酸)、螯合剂(如乙二胺四乙酸(EDTA))、络合剂(如咖啡因、聚乙烯吡咯烷酮、β-环糊精或羟丙基-β-环糊精)、填充剂、单糖、二糖和其他碳水化合物(如葡萄糖、甘露糖或糊精)、蛋白质(如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白)、着色剂、调味剂和稀释剂、乳化剂、亲水聚合物(如聚乙烯吡咯烷酮)、低分子量多肽、成盐抗衡离子(如钠)、防腐剂(如苯扎氯铵、苯甲酸、水杨酸、硫柳汞、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯己定、山梨酸或过氧化氢)、溶剂(如丙三醇、丙二醇或聚乙二醇)、糖醇(如甘露醇或山梨醇)、悬浮剂、表面活性剂或润湿剂(如普朗尼克；PEG；脱水山梨糖醇酯；聚山梨酯(如聚山梨酯20或聚山梨酯80)；曲拉通；氨丁三醇；卵磷脂；胆固醇或泰洛沙泊)、稳定性增强剂(如蔗糖或山梨醇)、张力调节剂(如碱金属卤化物(例如氯化钠或氯化钾)或甘露醇山梨醇)、递送媒介物、稀释剂、赋形剂和/或药物佐剂(参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences(第18版,A.R.Gennaro编辑,MackPublishing Company 1990)和其后续版本，所述文献出于任何目的通过引用并入本文)。
最佳药物组合物将由技术人员根据例如计划的给予途径、递送形式和所需剂量来决定。此类组合物可以影响结合蛋白的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。
药物组合物中的主要媒介物或载体在性质上可以是水性或非水性的。例如，适用于注射的媒介物或载体可以是水、生理盐水溶液或人工脑脊液，可能补充有用于肠胃外给予的组合物中常用的其他材料。中性缓冲盐水或与血清白蛋白混合的盐水是另外的示例性媒介物。其他示例性药物组合物包含约pH 7.0-8.5的Tris缓冲液或约pH 4.0-5.5的乙酸盐缓冲液，它们可以进一步包括山梨醇或合适的替代物。在本公开文本的一个实施方案中，结合蛋白组合物可以通过将具有所需纯度的所选组合物与任选配制剂以冻干饼或水溶液形式混合来制备用于储存。此外，可以使用适当赋形剂如蔗糖将结合蛋白配制为冻干物。
可以选择本公开文本的药物组合物用于肠胃外递送或皮下递送。可替代地，可以选择组合物用于吸入或用于经消化道递送，如口服。此类药学上可接受的组合物的制备在本领域的技术范围内。
配制组分是以给予位点可接受的浓度存在。例如，使用缓冲液将组合物维持在生理pH或略低的pH，通常在约5至约8的pH范围内。
当考虑肠胃外给予时，所用治疗组合物可以呈无热原的、肠胃外可接受的水溶液形式，其包含在药学上可接受的媒介物中的所需结合蛋白。特别适用于肠胃外注射的媒介物是无菌蒸馏水，其中将结合蛋白配制为适当保存的无菌等渗溶液。又另一种制备可以涉及用提供产物的受控或持续释放的试剂(如可注射微球、生物蚀解性颗粒、聚合化合物(如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠或脂质体)配制所需分子，然后可以将所述分子经由积存注射来递送。还可以使用透明质酸，并且这可以具有促进在循环中的持久的持续时间的作用。用于引入所需分子的其他合适的手段包括可植入的药物递送装置。
在一个实施方案中，可以将药物组合物配制用于吸入。例如，可以将结合蛋白配制为干粉用于吸入。也可以将结合蛋白吸入溶液用推进剂来配制用于气溶胶递送。在又另一个实施方案中，可以将溶液雾化。
还考虑到可以将某些配制品口服给予。在本公开文本的一个实施方案中，可以将以这种方式给予的结合蛋白用或不用在固体剂型(如片剂和胶囊)的混配中通常使用的那些载体来配制。例如，胶囊可以设计为在胃肠道中在生物利用度最大化且前系统性降解最小化时释放配制品的活性部分。可以包括另外的试剂以有利于结合蛋白的吸收。还可以采用稀释剂、调味剂、低熔点蜡、植物油、润滑剂、悬浮剂、片剂崩解剂和粘合剂。
另一种药物组合物可以包含与适合于制造片剂的无毒赋形剂混合的有效量的结合蛋白。通过将片剂溶解于无菌水或另一种适当媒介物中，可以以单位剂量形式制备溶液。合适的赋形剂包括但不限于惰性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠或碳酸氢钠、乳糖或磷酸钙；或者结合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；或者润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。
本公开文本的另外的药物组合物对于本领域技术人员将是明显的，所述药物组合物包括在持续或受控递送配制品中包含结合蛋白的配制品。用于配制多种其他持续或受控递送手段(如脂质体载体、生物蚀解性微粒或多孔珠和积存注射)的技术也是本领域技术人员已知的。持续释放制剂的另外的例子包括呈成型物品(例如薄膜)或微胶囊形式的半渗透性聚合物基质。持续释放基质可以包括聚酯、水凝胶、聚丙交酯、L-谷氨酸与γ乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)、乙烯乙酸乙烯酯或聚-D(-)-3-羟丁酸。持续释放组合物还可以包括脂质体，所述脂质体可以通过本领域中已知的几种方法中的任何方法来制备。
要用于体内给予的药物组合物通常必须是无菌的。这可以通过经无菌滤膜过滤来实现。在将组合物冻干的情况下，可以在冻干和重构之前或之后使用这种方法进行灭菌。用于肠胃外给予的组合物可以以冻干形式或溶液形式储存。此外，通常将肠胃外组合物置于具有无菌进入口的容器中，例如具有可由皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。
一旦已经配制药物组合物，就可以将其作为溶液、悬浮液、凝胶、乳液、固体或作为脱水或冻干粉末储存在无菌小瓶中。可以将此类配制品以即用形式或以需要在给予前重构的形式(例如，冻干)储存。
本公开文本还涉及包括结合蛋白和可用于检测生物样品中的靶抗原水平的其他试剂的试剂盒。此类试剂可以包括可检测标记、封闭血清、阳性和阴性对照样品以及检测试剂。在一些实施方案中，所述试剂盒包括组合物，所述组合物包含本文所述的任何结合蛋白、多核苷酸、载体、载体系统和/或宿主细胞。在一些实施方案中，所述试剂盒包括容器以及在所述容器上或与所述容器相连的标签或包装说明书。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、IV溶液袋等。所述容器可以由多种材料如玻璃或塑料制成。容器容纳本身或与另一种组合物组合地有效治疗、预防和/或诊断病症的组合物，并且可以具有无菌进入口(例如，容器可以是静脉输液袋或具有可由皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)。在一些实施方案中，标签或包装说明书指示，所述组合物用于预防、诊断和/或治疗所选病症。可替代地或另外地，所述制品或试剂盒可以进一步包括第二(或第三)容器，所述第二(或第三)容器含有药学上可接受的缓冲液，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。它可以进一步包括从商业和用户角度所需的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。
本公开文本还涵盖用于产生单一剂量给予单位的试剂盒。试剂盒可以各自含有具有干燥蛋白质的第一容器和具有水性配制品的第二容器二者。在本公开文本的范围内还包括含有单室和多室预填充注射器(例如，液体注射器和冻干剂注射器)的试剂盒。
在治疗上采用的结合蛋白药物组合物的有效量将取决于例如治疗背景和目标。本领域技术人员将了解，治疗的适当剂量水平将因此部分根据以下而变化：所递送的分子、结合蛋白所用于的适应症、给予途径以及患者的体型(体重、体表或器官大小)和状况(年龄和一般健康状况)。因此，临床医师可以滴定剂量并改变给予途径以获得最佳治疗效果。
给药频率将取决于所用配制品中结合蛋白的药代动力学参数。通常，临床医师将给予组合物直至达到实现所需效果的剂量为止。因此，可以将组合物作为单一剂量、作为随时间的两次或更多次剂量(它们可以含有或不含等量的所需分子)或作为连续输注经由植入装置或导管来给予。适当剂量的进一步改进是由本领域普通技术人员以常规方式进行，并且在本领域普通技术人员常规进行的任务范围内。适当剂量可以通过使用适当的剂量反应数据来确定。
药物组合物的给予途径与已知方法一致，例如，口服；通过经静脉内、腹膜内、大脑内(脑实质内)、脑室内、肌内、眼内、动脉内、门静脉内或病灶内途径注射；通过持续释放系统；或者通过植入装置。在需要的情况下，组合物可以通过推注注射来给予，或者通过输注连续给予，或者通过植入装置来给予。
还可以将组合物通过已经使所需分子吸附或包封于其上的膜、海绵状物或其他适当材料的植入局部地给予。在使用植入装置的情况下，可以将所述装置植入任何合适的组织或器官中，并且所需分子的递送可以经由扩散、定时释放推注或连续给予来进行。
表1.三特异性结合蛋白多肽序列
Figure BDA0003386970950001211
Figure BDA0003386970950001221
Figure BDA0003386970950001231
Figure BDA0003386970950001241
Figure BDA0003386970950001251
Figure BDA0003386970950001261
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表6.三特异性结合蛋白多核苷酸序列
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实施例
以下实施例说明本公开文本的具体实施方案，以及它们的各种用途。所述实施例仅出于解释性目的来陈述，并且不应被视为以任何方式限制本发明的范围。
实施例1：三特异性HER2/CD28xCD3抗体和变体抗CD3结合位点的开发
免疫肿瘤学是一种有前途、新兴的用于癌症的疾病管理的治疗性方法。免疫系统是抵抗癌症发展和进展的第一道防线。现在有大量证据表明，T细胞能够在疾病的早期和晚期控制肿瘤生长并延长癌症患者的生存期。然而，对肿瘤具有特异性的T细胞可能在许多方面受到限制，从而妨碍其控制疾病。
为了去除对不受控制的肿瘤诱导的T细胞的限制，以图1A中所描绘的三特异性抗体形式开发了新型抗体以特异性激活T细胞，从而接合表达HER2的癌细胞。这些新性三特异性抗体能够与以下三种靶标结合：HER2、CD3和CD28。抗HER2和抗CD3结合位点被进一步优化，以实现高亲和力结合和减少潜在的生产不利因素。
HER2扩增和过表达可以在乳腺癌的分子亚型中发现，并且还在胃癌、卵巢癌、肺癌和前列腺癌中发现。T细胞的最佳激活需要两个因素：(1)抗原识别和(2)共刺激。在使用本文所述的三特异性HER2/CD28xCD3三特异性结合蛋白的情况下，信号1由激动剂抗CD3结合位点提供，并且信号2由激动剂抗CD28结合位点提供(参见例如，图1D)。认为随后实施例中所述的三特异性抗体经由HER2将T细胞募集至肿瘤，并且通过与CD3和CD28结合来激活接合的T细胞。所产生的激活诱导所述免疫细胞对附近肿瘤细胞的杀伤潜力。
材料和方法
抗体的产生和表征
通过将表达质粒瞬时转染到Expi293细胞中产生三特异性抗体变体。转染后5天，收集来自转染细胞的上清液，在Nano Drop上通过280nm处的吸光度进行定量和归一化。通过ELISA确定上清液与相应抗原的结合，并将亲本HER2 WT tri Ab的吸光度设为1.0。通过将相应的吸光度除以亲本Ab的吸光度来计算其他变体的倍数变化。
使用蛋白A亲和纯化和之后的SEC纯化纯化三特异性抗体变体。通过ELISA确定纯化的抗体与相应抗原的结合。基于通过Graphpad Prism7生成的结合曲线确定EC50。
结果
产生在结合臂中具有若干个突变的三特异性Ab变体，以减轻潜在的生产不利因素(例如，脱酰胺化位点)。进行结合ELISA分析以评估所指示的三特异性抗体与以下三种靶标中的每一种的结合：HER2、CD3和CD28。在图1B中，将HER2/CD3xCD28三特异性抗体和所指示抗HER2或抗CD3变体与亲本三特异性抗体进行比较。将一些突变集(例如，32/33QQ和33/35QQ)引入抗CD3结合位点的VL结构域中导致与CD3的结合显著减少，而32/35QQ突变保留接近野生型的结合。MS肽分析显示，在CDR-L1(SEQ ID NO:63)中具有DNAQ突变的结合位点仍进行超过15％的脱酰胺化，而ENLQ(SEQ ID NO:281)、ENLF(SEQ ID NO:282)和ENLR(SEQ IDNO:283)导致少于5％的脱酰胺化。重要的是，这些变体还保留与CD3的结合。
此外，图1C中提供所指示抗体与人HER2、人CD28和CD3结合的结合曲线。所选的三特异性抗体变体的EC50值提供于表E中。
表E.对纯化的三特异性抗体进行结合ELISA测定，以确定它们对HER2、人CD3和人CD28的结合亲和力。
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不希望受理论的束缚，如图1D中所绘示，据信HER2/CD3/CD28三特异性抗体通过抗HER2和抗CD3/CD28臂将T细胞募集至癌细胞。此外，据信接合的T细胞通过抗CD28/CD3臂被激活。不希望受理论的束缚，据信杀伤癌细胞是通过T细胞介导的机制(例如，穿孔素、颗粒酶)发生的。不希望受理论的束缚，考虑到类似的机制可以通过取代识别其他肿瘤靶蛋白的抗原结合位点来允许杀伤其他类型的肿瘤。
实施例2：三特异性CD38/CD3xCD28抗体的开发
开发了三特性CD38/CD3xCD28抗体并且针对与CD38、CD3和CD28多肽的结合对其进行表征。
材料和方法
CD38/CD28xCD3三特异性抗体的产生
将一组抗CD38、抗CD3和抗CD28抗体以及人IgG4 Fc结构域用于以图2A中描绘的三特异性抗体形式产生CD38/CD28xCD3三特异性抗体。
三特异性结合蛋白是通过根据制造商的方案使用ExpiFectamineTM 293转染试剂盒(Thermo Fisher Scientific)将4种表达质粒瞬时转染至Expi293细胞中来产生。简单来说，将25％(w/w)的每种质粒稀释至Opti-MEM中，在室温(RT)下与预稀释的ExpiFectamine试剂混合20-30分钟，并添加至Expi293细胞(2.5x 106个细胞/ml)中。通常使用用于确定质粒最佳比率的转染优化以产生具有良好产量和纯度的三特异性结合蛋白。
在转染后4-5天，从转染的细胞收集上清液并通过0.45μm过滤装置(Nalgene)进行过滤。使用3步式程序纯化上清液中的三特异性结合蛋白。第一，使用蛋白A亲和纯化，并使用“IgG洗脱缓冲液”(Thermo Fisher Scientific)洗脱所结合的Ab。第二，将产物针对PBS(pH 7.4)透析过夜，其中2次更换PBS缓冲液。在下一步骤之前，通过0.45μm过滤装置(Nalgene)进行过滤来清除任何沉淀物。第三，使用尺寸排阻色谱(SEC)纯化(Hiload 16/600Superdex 200pg，或Hiload 26/600Superdex 200pg，GE Healthcare)去除聚集体和制剂中的不同种类。在还原性和非还原性SDS-PAGE上分析级分以鉴定含有单体三特异性结合蛋白的级分，然后合并所述级分。可以将纯化的抗体等分并在-80℃下长期储存。
ELISA结合测定
通过ELISA测量CD38/CD28xCD3 T细胞接合器与每种靶抗原的结合亲和力。简单来说，使用每种抗原涂布96孔免疫板(Thermo Fisher Scientific)在4℃下过夜，其中使用200ng/孔的PBS(pH 7.4)中的每种抗原。使用PBS中的5％脱脂乳+2％BSA将涂布的板在RT下封闭1小时，然后用PBS+0.25％Tween 20洗涤三次(Aqua Max 400，Molecular Devices)。制备抗体(三特异性和对照Ab)的连续稀释液并将其添加至ELISA板(100μl/孔，一式两份)上，在室温(RT)下孵育1小时，然后用PBS+0.25％Tween 20洗涤5次。洗涤后，将HRP缀合的第二抗人Fab(1:5000，目录号109-035-097，Jackson ImmunoResearch Inc)添加至每个孔并且在RT下孵育30分钟。在用PBS+0.25％Tween 20洗涤5次后，将100μl的TMB微孔过氧化物酶底物(KPL，盖瑟斯堡，马里兰州，美国)添加至每个孔。通过添加50μl 1M H2SO4终止反应，并使用SpectraMax M5(Molecular Devices)测量OD450，并使用SoftMax Pro6.3软件(Molecular Devices)进行分析。将最终数据传输至GraphPad Prism软件(GraphPadSoftware，加利福尼亚州，美国)，并绘图。使用相同软件计算EC50。
使用SPR测量三特异性抗体结合
使用人CD38-His抗原(Cambridge Biologics，剑桥，马萨诸塞州(MA))进行全面动力学分析。使用SPR技术在BIACORE 3000(GE Healthcare)上对纯化的抗体进行动力学表征。使用捕获测定，其利用所研究抗体的人IgG1特异性抗体捕获和取向。对于含有Fc的蛋白质构建体的捕获，使用人抗体捕获试剂盒(GE Healthcare)。对于His标记的抗原的捕获，使用抗His抗体捕获试剂盒(GE Healthcare)。使用标准程序在研究级CM5芯片(GE LifeSciences)上经由伯胺基团(11000RU)固定捕获抗体。以调节的RU值以10μL/min的流速捕获所分析的抗体，所述调节的RU值将导致通常30RU的最大分析物结合信号。针对三特异性抗体测量结合动力学。以30μl/min的流速使用测定缓冲液HBS EP(10mM HEPES，pH 7.4，150mMNaCl、3mM EDTA和0.005％表面活性剂P20)。用相应捕获试剂盒的再生溶液使芯片表面再生。在BIA评价程序包v4.1中使用不具有所捕获抗体的流动池作为参照和具有质量转移的1:1朗缪尔(Langmuir)结合模型分析并计算动力学参数。
达雷木单抗竞争结合测定
对于达雷木单抗竞争结合测定，将达雷木单抗胺偶联至CM5芯片的有源表面。将参照表面留空，并用于减去注射分子的任何非特异性结合。在达雷木单抗表面上注射重组CD38-His(Sino Biological，部件号10818-H08H)，然后注射测试抗体。如果单特异性抗CD38抗体识别CD38上与达雷木单抗所识别表位不同的表位，则所述抗体的注射导致SPR信号增加。如果抗体识别与达雷木单抗重叠的表位，则所述抗体的注射不会增加SPR信号。
结果
通过SPR确定具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQDKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人CD38的结合亲和力。所选的三特异性抗体的缔合速率常数(K缔合)、解离速率常数(K解离)和KD提供于表A中。所选的三特异性抗体显示出针对人CD38抗原的不同亲和力程度。
表A.通过SPR确定的具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人CD38的结合特征。
抗CD38结合结构域 k<sub>缔合</sub>(M<sup>-1</sup>s<sup>-1</sup>) k<sub>解离</sub>(s<sup>-1</sup>) K<sub>D</sub>(M)
CD38VH1 5.55E+05 1.58E-03 2.85E-09
CD38hhy992 1.35E+06 1.75E-04 1.29E-10
CD38hyb6284 7.85E+05 5.12E-04 6.52E-10
CD38hyb5739 9.80E+05 5.46E-03 5.57E-09
CD38hhy1195 1.27E+06 1.80E-02 1.42E-08
CD38hhy1370 3.76E+05 3.29E-04 8.76E-10
然后如上所述通过ELISA确定具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28supx CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人CD3、人CD28、人CD38和食蟹猴CD38的结合亲和力。如图2B-图2E中所示，具有替代性CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体显示出对人CD38(图2B)和食蟹猴CD38(图2C)的不同亲和力，但显示出对人CD3(图2D)和CD28(图2E)的类似亲和力。然后使用具有四参数对数曲线的可变斜率模型通过GraphPad Prism 7.02计算EC50值。将所选的三特异性抗体针对人CD3、人CD28、人CD38和食蟹猴CD38的的EC50值提供于表B中。对照抗体是人IgG4同种型对照。
表B.具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHTIgG4 FALA三特异性抗体针对人CD3、人CD28、人CD38和食蟹猴CD38的EC50值。
Figure BDA0003386970950002611
进行SPR竞争测定，以确定抗CD38抗体hhy6284、hhy992、hhy5379或hhy1195(以单特异性抗体形式测试)是否与达雷木单抗竞争结合CD38。在达雷木单抗(固定在SPR传感器芯片上)上注射CD38后，在达雷木单抗/CD38复合物上注射测试抗体(或达雷木单抗)。如图3中所示，注射Hyb6264、hhy992、Hyb5379和Hhy1195增加SPR信号，这表明这些抗体识别CD38上与达雷木单抗所识别表位不同的表位。如预期的那样，注射游离达雷木单抗(竞争性结合对照)不增加SPR信号。
将抗CD38抗体与人或食蟹猴CD38多肽的结合汇总于表B2中。
表B2.与人或食蟹猴CD38的抗CD38结合特征的汇总。
Figure BDA0003386970950002612
还在SPR测定中测试了抗CD38抗体与达雷木单抗的竞争性结合。对于达雷木单抗竞争结合测定，将达雷木单抗胺偶联至CM5芯片的有源表面。将参照表面留空，并用于减去注射分子的任何非特异性结合。在达雷木单抗表面上注射重组CD38-His(SinoBiological，部件号10818-H08H)，然后注射测试抗体。如果抗体识别CD38上与达雷木单抗所识别表位不同的表位，则所述抗体的注射将导致SPR信号增加。如果抗体识别与达雷木单抗重叠的表位，则所述抗体的注射将不会增加SPR信号。根据这些测定的结果，测试抗体hhy992、hyb6284、hhy1195和hhy1370不与达雷木单抗竞争。
实施例3：三特异性CD38/CD3xCD28抗体促进人多发性骨髓瘤和淋巴瘤肿瘤细胞的裂解。
使用人多发性骨髓瘤和淋巴瘤细胞，使用体外细胞裂解测定来确定三特异性CD38/CD3xCD28抗体是否具有抗肿瘤细胞活性。
材料和方法
使用人T细胞的针对肿瘤细胞的体外杀伤测定
将靶肿瘤细胞用膜染料PKH-26(Sigma)标记，并且在所指示浓度的三特异性或相关对照抗体存在下与人PBMC或作为效应细胞的富集的CD8 T细胞以10:1的E:T比率(E:T＝3:1，使用富集的CD8 T细胞)共培养24小时。通过Ficoll分离从正常人供体中分离出外周血单核细胞，并使用来自Miltenyi Biotech(加利福尼亚州圣地亚哥(San Diego,CA))的试剂盒富集自体CD8+或全T细胞。将靶细胞中的细胞裂解程度通过用LIVE/DEADTM可固定的紫色死细胞染色试剂盒(Life Technologies)染色进行确定，并且通过在LSRFortessa仪器(BDBiosciences)上运行样品，然后使用Flowjo软件(Treestar)进行分析，依据所标记靶细胞群中的死细胞数进行测量。
在达雷木单抗存在下使用人T细胞的针对肿瘤细胞的体外杀伤测定
将5nM达雷木单抗或同种型对照抗体与PKH-26标记的靶肿瘤细胞(105个细胞/孔)一起预孵育30分钟，然后添加所指示浓度的三特异性TCE和人PBMC(E:T＝10:1)。24小时后，将靶细胞中的细胞裂解程度通过用LIVE/DEADTM可固定的紫色死细胞染色试剂盒(LifeTechnologies)染色进行确定，并且通过在LSRFortessa仪器(BD Biosciences)上运行样品，然后使用Flowjo软件(Treestar)进行分析，依据所标记靶细胞群中的死细胞数进行测量。
结果
使用表达CD38和CD28二者的人多发性骨髓瘤细胞系NCI-H929，确定具有替代性抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体的体外细胞杀伤活性。所述测定是在5nM达雷木单抗或同种型对照抗体存在下(在测定期间存在)进行的。如图4A至图4B中所示，在达雷木单抗存在和不存在下，所有测试的三特异性抗体均以浓度依赖性方式导致细胞裂解。然后，在达雷木单抗存在和不存在下计算EC50值(表C)。具有CD38VH1或CD38hhy1370抗CD38结合结构域的三特异性抗体CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA的细胞杀伤活性被达雷木单抗降低，而在达雷木单抗存在下具有CD38hyb5739、CD38hyb6284或CD38hhy1195抗CD38结合结构域的三特异性抗体展现出细胞杀伤活性的3-8倍降低(表C)。
表C.在达雷木单抗存在下具有替代性抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人多发性骨髓瘤细胞系NCI-H929(CD38+/CD28+)的体外杀伤活性。
Figure BDA0003386970950002631
此外，使用表达CD38但不表达CD28的人淋巴瘤细胞系OCI-LY19，使用体外细胞裂解测定测量具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQ DKTHTIgG4 FALA三特异性抗体的细胞杀伤活性。所述测定是在5nM达雷木单抗或同种型对照抗体存在下(它们在测定期间存在)进行的。如图5A至图5B中所示，在达雷木单抗存在和不存在下，所有测试的三特异性均以浓度依赖性方式导致细胞裂解。然后，在达雷木单抗存在和不存在下计算EC50值(表D)。具有CD38VH1抗CD38结合结构域的CD38/CD28sup x CD3mid_ENLQDKTHT IgG4 FALA的细胞杀伤活性被达雷木单抗降低约24倍，而在达雷木单抗存在下具有CD38hhy992、CD38hyb5739、CD38hyb6284、CD38hhy1195或CD38hhy1370抗CD38结合结构域的三特异性抗体也展现出细胞杀伤活性的降低(表D)。
表D.在达雷木单抗存在下具有替代性抗CD38结合结构域的所选CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体针对人淋巴瘤细胞系OCI-LY19(CD38+/CD28-)的体外杀伤活性。
Figure BDA0003386970950002641
实施例4：CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进CMV特异性免疫应答
作为适应性免疫的一部分，T细胞免疫在控制病毒感染和癌症方面具有关键作用，可能消除感染细胞和恶性细胞，从而导致病毒感染的清除或癌症的治愈。在如疱疹病毒感染(HSV、CMV、EBV等)、HIV和HBV的慢性感染性疾病中，病毒通过包括免疫抑制、T细胞消耗和潜伏期建立在内的多种机制在人体内建立其持久性。然而，病毒感染通常诱导包括抗原特异性CD8T细胞的病毒抗原特异性免疫，所述抗原特异性CD8 T细胞可以容易地识别感染细胞，用于通过细胞因子释放或细胞毒性T细胞(CTL)介导的杀伤过程来进行控制或杀伤。因此，在体内和/或离体的病毒抗原特异性T细胞激活和/或扩增提供针对慢性病毒感染的治疗策略。
开发了抗CD38/CD28xCD3三特异性抗体并评价了其在激活T细胞以及促进抗原特异性T细胞的增殖和/或扩增方面的潜力。这些三特异性Ab可以有效地在体外扩增CD4和CD8效应和记忆群体，所述群体包括抗原特异性CD8T中枢记忆细胞和效应记忆细胞。具体地，证明了CMV和EBV特异性CD8中枢记忆细胞和效应记忆细胞的体外扩增。本文所述的抗CD38/CD28xCD3三特异性抗体通过接合CD3/CD28/CD38，从而提供刺激并扩增T细胞的信号传导途径来展现新颖特性，这可以提供治疗慢性感染性疾病(如HSV、CMV、EBV、HIV-1和HBV感染)的有效策略。
在该实施例中，确定CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进CMV特异性T细胞的激活和扩增的能力。
材料和方法
体外T细胞增殖测量
通过负向选择使用磁性全T细胞分离试剂盒(Miltenyi Biotec GmbH，德国)从人PBMC供体分离T细胞。通过制备无菌PBS中的抗体并分配50μL至每个孔中(350ng/孔)将抗体涂布至96孔细胞培养板上。然后将所述板在37℃下孵育至少2小时，然后用无菌PBS洗涤。将未接触的T细胞添加至抗体涂布的板(5x 105个细胞/mL)并在37℃下孵育多日。在第4天用新的细胞培养基将所述细胞传代至新鲜的抗体涂布板上。在使用7天孵育的某些实验中，在不更换至新鲜的抗体涂布板的情况下仅添加新鲜培养基。在特定时间点收集细胞并使用CountBrightTM计数珠来计算细胞数。
体外T细胞增殖测定和T细胞亚组确定
从由Research Blood Components,LLC(波士顿，马萨诸塞州)收集的健康人供体的血液分离外周血单核细胞。如上文先前所述将PBMC添加至抗体涂布的板(350ng/孔)(5x105个细胞/mL)，并在37℃下孵育3天和7天。在特定时间点收集细胞并通过流式细胞术分析T细胞亚组：幼稚(CCR7+CD45RO-)、Tcm(CCR7+CD45RO+)、Tem(CCR7-CD45RO+)、Tregs(CD4+Foxp3+CD25hi)。分别使用限制于PBMC供体的HLA/病毒肽(A*02:01/NLVPMVATV，SEQID NO:284)、(A*02:01/GLCTLVAML，SEQ ID NO:285)的荧光缀合的五聚体(ProImmune，牛津，英国)检测CMV pp65特异性和EBV BMLF特异性CD8+T细胞。PBMC是从HemaCare(范奈斯(Van Nuys)，加利福尼亚州)从具有已知CMV或EBV感染的供体获得的。使用来自对限制HLA类型呈阴性的供体的PMBC作为阴性对照。根据制造商的方案进行染色。
CMV特异性T细胞的定量
如上所指出，从已知感染CMV的人供体的血液分离外周血单核细胞(PBMC)并将其添加至含有三特异性抗体或对照抗体的板。将所述板在37℃下孵育。在指定时间点收集细胞并通过流式细胞术对其进行分析。
结果
使用从CMV感染的人供体D(图6A至图6J)和CMV感染的人供体E(图7A至图7J)分离的PBMC如上所述地测试具有替代性抗CD38结合结构域ΔVH1CD38(对照)、CD38VH1、CD38hhy992、CD38hyb5739、CD38hyb6284、CD38hhy1195和CD38hhy1370的CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体。在7天实验内，所有测试的CD38三特异性Ab以剂量反应方式以不同的效力和动力学激活CMV特异性T细胞并促进其增殖，从而导致CMV特异性CD8+T细胞(细胞数/孔)的增加(CMV供体D，图6A至图6B；CMV供体E，图7A至图7B)。此外，所有测试的CD38三特异性Ab促进CMV特异性中枢记忆(Tcm)(CMV供体D，图6C至图6D；CMV供体E，图7C至图7D)和效应记忆(Tem)CD8+T细胞(CMV供体D，图6E至图6F；CMV供体E，图7E至图7F)的扩增(细胞数/孔)，所述两种细胞在7天内均显著扩增。图6G至图6J(CMV供体D)和图7G至图7J(CMV供体E)提供了示出在上文所述的7天实验中的第0、3和7天CMV特异性Tcm和Tem细胞的百分比的时间进程。
总而言之，这些数据指示，CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进CMV特异性T细胞(如CMV特异性CD8+T细胞、CMV特异性效应记忆(Tem)CD8+T细胞和CMV特异性中枢记忆(Tcm)CD8+T细胞)的激活和扩增。
实施例5：CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进EBV特异性免疫应答
接着，确定CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)特异性T细胞的激活和扩增的能力。
材料和方法
EBV特异性T细胞的定量
如上所指出，从已知感染EBV的人供体的血液分离外周血单核细胞(PBMC)并将其添加至含有三特异性抗体或对照抗体的板。将所述板在37℃下孵育至多11天。在指定时间点收集细胞并通过流式细胞术对其进行分析。
结果
还使用从EBV感染的供体C(图8A至图8J)和EBV感染的供体D(图9A至图12)分离的PBMC如上所述地测试具有替代性抗CD38结合结构域ΔVH1CD38(对照)、CD38VH1、CD38hhy992、CD38hyb5739、CD38hyb6284、CD38hhy1195和CD38hhy1370的CD38/CD28sup xCD3mid_ENLQ DKTHT IgG4 FALA三特异性抗体。在7天实验内，所有测试的CD38三特异性Ab以剂量反应方式以不同的效力和动力学激活T细胞并促进EBV特异性T细胞的增殖，从而导致EBV特异性CD8+T细胞的增加(细胞数/孔)(EBV供体C，图8A至图8B；EBV供体D，图9A至图9B)。此外，所有测试的CD38三特异性Ab促进EBV特异性中枢记忆(Tcm)(EBV供体C，图8C至图8D；EBV供体D，图9C至图9D)和效应记忆(Tem)CD8+T细胞(EBV供体C，图8E至图8F；EBV供体D，图9E至图9F)的扩增(细胞数/孔)，所述两种细胞在7天内均显著扩增。图8G至图8J(EBV供体C)和图9G至图12(EBV供体D)提供了示出在上文所述的7天实验中的第0、3和7天EBV特异性Tcm和Tem细胞的百分比的时间进程。
总而言之，这些数据指示，CD38/CD28xCD3三特异性抗体促进EBV特异性T细胞(如EBV特异性CD8+T细胞、EBV特异性效应记忆(Tem)CD8+T细胞和EBV特异性中枢记忆(Tcm)CD8+T细胞)的激活和扩增。
实施例6：Her2/CD28 x CD3三特异性抗体在携带肿瘤的小鼠中的抗肿瘤作用
在该实施例中，在移植有体外扩增的T细胞的携带ZR-75-1肿瘤的Nod scidγ(NSG)小鼠模型中测试了Her2/CD28 x CD3三特异性抗体的抗肿瘤作用。
材料和方法
将NSG小鼠分为5组，每组10只小鼠。在第0天，将ZR-75-1人乳腺癌细胞以500万个细胞/小鼠用50％基质胶植入每只小鼠的乳腺脂肪垫中。在第17/18天，人CD3+T细胞的扩增开始。在第24天肿瘤为大约150mm3时进行小鼠的随机化。在第25天，以300μL/小鼠以1000万个细胞向所有小鼠移植体外扩增的人CD3+T细胞(1QW，1次IP注射)。
从第25天开始，使一组小鼠接受单独的媒介物剂量(8％w/v蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80、10mM组氨酸，pH 5.5)，而其他4组小鼠接受Her2/CD28 x CD3三特异性抗体，两者均为10mL/kg。接受三特异性抗体的组是以100、10、1或0.1μg/kg给药。以2个剂量(例如，第25和32天)静脉内1QW给予抗体或媒介物。在第38或39天收集血液和肿瘤组织。
结果
将Her2/CD28 x CD3三特异性抗体(来自表1的结合蛋白#2，对应于SEQ ID No:104-107)与媒介物对照针对在上述移植有体外扩增的人T细胞的NSG小鼠模型中对人乳腺肿瘤生长的作用进行了比较。用最高剂量(100ug/kg)的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体进行治疗导致最显著的肿瘤生长抑制和消退，但是10ug/kg剂量也显示出抗肿瘤作用(图13A和图13D)。没有观察到显著的体重减轻(图13B)。将每个三特异性抗体治疗组随时间的单独肿瘤体积提供于图13C中。
接下来，检查了三特异性抗体治疗对单独免疫细胞亚组的作用。通过流式细胞术来测量人CD45+、人CD8+和人CD4+细胞群体以及小鼠CD45+细胞(图14A至图14C)。最高剂量(100ug/kg)的三特异性抗体导致人CD4+细胞的耗竭，并且这种作用是剂量依赖性的(图14B和图14C)。人CD8+细胞的计数在很大程度上不受三特异性抗体给予的影响。
还通过针对人CD45、CD4和CD8的免疫组织化学(IHC)染色评估了三特异性抗体治疗对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的作用。使用H&E染色，来自低剂量组(1ug/kg或0.1ug/kg三特异性抗体)的肿瘤具有与媒介物对照组大体相当的尺寸。如图15A至图15C中所示，在接受低剂量的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体的组中，人TIL增加，但是在高剂量组中，人TIL是稀少的。还定量检查了IHC图像(图16A至图16C)。这些结果表明在较高的三特异性抗体剂量组(100ug/kg和10ug/kg)中CD45+和CD8+细胞显著减少。
与媒介物对照相比，来自高剂量三特异性抗体治疗组(100ug/kg或10ug/kg)的肿瘤的特征为稀少的TIL。在1ug/kg和0.1ug/kg三特异性抗体治疗组中观察到中等至大数量的CD45+、CD4+或CD8+人TIL。这些TIL主要存在于肿瘤边缘，但偶尔更深地延伸到肿瘤核心中。
总之，这些结果证实，以100ug/kg或10ug/kg使用2个静脉内剂量的靶向HER2、接合T细胞的三特异性抗体治疗移植有体外激活T细胞的携带ZR-75-1乳腺肿瘤的NSG小鼠，导致肿瘤体积显著减小，并且同时导致TIL显著减少。与媒介物对照相比，在1ug/kg三特异性抗体剂量下，TIL增加的趋势很小且不一致。
实施例7：Her2/CD28 x CD3三特异性抗体中的抗HER2和抗CD3抗原结合结构域序列对癌细胞杀伤的作用
该实施例描述了抗Her2和抗CD3可变结构域序列对靶细胞杀伤的作用。在该实施例中，将具有野生型曲妥珠单抗抗原结合结构域和在VL结构域中没有32/35QQ突变的抗CD3抗原结合结构域(参见实施例1)的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体(“对照”)与来自表1的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体#1-6(分别对应于SEQ ID No:100-103、104-107、286-289、290-293、294-297和298-301)进行比较。
材料和方法
使用磁珠分离试剂盒(Miltenyi Biotec)从健康供体的人PBMC中分离CD8+T细胞。将T细胞以3:1(效应子:靶标)比率用作针对表达各种水平的HER2的乳腺癌细胞系的效应细胞。将细胞与实验或对照三特异性抗体一起孵育2天，然后使用活力染料(Invitrogen)和PKH26靶细胞染色(Sigma)进行流式细胞术采集。对于每种三特异性Ab，根据2-3个PBMC供体计算出靶细胞裂解的平均EC50。
结果
针对以下三种HER2+乳腺癌靶细胞系的体外细胞裂解表征所有三特异性抗体：HCC1954、BT20和MDA-MB-231。如通过流式细胞术(至多约150,000个受体/细胞)、IHC(3+)或HercepTest HER2表达测定(3+)所评估，发现HCC1954乳腺癌细胞表达高水平的HER2(图17A)。如通过流式细胞术(约60,000个受体/细胞)、IHC(1+)或HercepTest HER2表达测定(1+)所评估，发现BT20乳腺癌细胞表达中等水平的HER2(图17C)。如通过流式细胞术(约9,000个受体/细胞)、IHC(0+)或HercepTest HER2表达测定(0)所评估，发现MDA-MD-231乳腺癌细胞表达低水平的HER2(图17E)。将靶向HCC1954、BT20或MDA-MB-231的细胞杀伤测定的结果分别示出在图17B、图17D和图17F中，比较了结合蛋白#2与对照，或结合蛋白#1和#5与对照。所述结果证实，具有抗HER2臂中的30R/55Q/102E突变以及抗CD3臂的VL结构域中的32/35QQ突变的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体显示出针对所有三个细胞系的改善的靶细胞杀伤，特别是在较低的抗体浓度下。
确定了靶向上述三种乳腺癌细胞系(HCC1954、BT20和MDA-MB-231)以及胃癌细胞系OE19(高HER2表达)和GSU(中等HER2表达)的所有三特异性抗体的体外细胞杀伤的平均EC50(pM)。一般来讲，具有抗HER2臂中和抗CD3臂的VL结构域中的突变的Her2/CD28 x CD3三特异性抗体显示出针对所有三种乳腺癌细胞系(图18A)和两种胃癌细胞系(图18B)的较低的EC50(以及因此优异的细胞杀伤)。这些结果证实，虽然所有三特异性抗体都能够诱导对HER2+细胞的细胞杀伤，但突变的三特异性抗体始终展示针对多种靶细胞类型的改善的细胞杀伤功效。
序列表
<110> 赛诺菲
<120> 三特异性结合蛋白、其方法和用途
<130> 18395-20320.40
<140> 尚未分配
<141> 同时随同提交
<150> EP 19306311.2
<151> 2019-10-08
<150> US 62/831,572
<151> 2019-04-09
<160> 302
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Gly Gly Ser Gly Ser Ser Gly Ser Gly Gly
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 72
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
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Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 73
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
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<223> 合成构建体
<400> 74
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
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65 70 75 80
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Ala Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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Ser Arg Trp Gly Gly Ser Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
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<223> 合成构建体
<400> 76
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 77
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
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<211> 107
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 78
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Gln Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
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<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 79
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Lys Glu Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
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Ala Arg Thr Gly Gly Leu Arg Arg Ala Tyr Phe Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 80
<211> 111
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 80
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Gln Gly Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
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Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Pro Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Lys
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 81
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 81
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Phe
20 25 30
Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Ile Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Thr Gly Arg Phe Phe Asp Trp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 82
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 82
Glu Ile Ile Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ile Ser Arg
20 25 30
Phe Leu Ser Trp Tyr Gln Val Lys Pro Gly Leu Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Val Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
65 70 75 80
Pro Glu Asp Cys Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Ser Asn Leu Pro
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Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 83
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 83
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Leu Val Glu Trp Ile Arg Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Arg Ser Ser Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Tyr Ala Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 84
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 84
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Gln Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Thr Tyr Pro Phe
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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<210> 85
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 85
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Ser Pro Tyr Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Arg Phe Glu Gly Phe Tyr Tyr Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 86
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 86
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Pro Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 87
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 87
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys
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Ala Arg Asp Pro Gly Leu Arg Tyr Phe Asp Gly Gly Met Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 88
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 88
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Ala Ala Ser Thr Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Phe Pro Tyr
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 89
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 89
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gly Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Met Phe Arg Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 90
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 90
Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro
65 70 75 80
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 91
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 91
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
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Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
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Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 92
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 92
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 93
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 93
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala
20 25 30
Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 94
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 94
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
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<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 95
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
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<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 96
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 97
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Phe Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
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Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 98
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Arg Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 99
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asp
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 100
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 100
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 101
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 101
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 102
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 102
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 103
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 103
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 104
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 104
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 105
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 105
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 106
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 106
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 107
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 107
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 108
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 108
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asp
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
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210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
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Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 109
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 109
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
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Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 110
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 110
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 111
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 111
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 112
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 112
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
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Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
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Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 113
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 113
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
370 375 380
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
465 470 475 480
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 114
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 114
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
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Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
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Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
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Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
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Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
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Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
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Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
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385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 115
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 115
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
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Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 116
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 116
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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50 55 60
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65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
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165 170 175
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195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
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225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
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260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 117
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 117
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
370 375 380
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
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Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
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Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
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Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 118
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 118
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Ser Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
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Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 119
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 119
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
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Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
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Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 120
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 120
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
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Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
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Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 121
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 121
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
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Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
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Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
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Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
465 470 475 480
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 122
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 122
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Ala Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Ser Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 123
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 123
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 124
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 124
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
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Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
180 185 190
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 125
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 125
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
370 375 380
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
465 470 475 480
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
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Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 126
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 126
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Ala Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
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<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 127
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 128
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 128
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
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Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
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100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
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Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
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Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
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<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 129
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
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Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
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Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
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405 410 415
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420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
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Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
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Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 130
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 130
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
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Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 131
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 131
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 132
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 132
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Asn Ala Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
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Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 133
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 133
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
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Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
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Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
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340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
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Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
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Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
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Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 134
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 134
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 135
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 135
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
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Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 136
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
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Asn Leu Arg Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
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100 105 110
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115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
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145 150 155 160
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325 330 335
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 137
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
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Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
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Gly
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<220>
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<400> 138
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<400> 139
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Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 140
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 140
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325 330 335
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 141
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
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245 250 255
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Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
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Gly
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<220>
<223> 合成构建体
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210
<210> 144
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 144
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Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
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<211> 577
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<400> 145
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
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Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
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<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 146
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
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420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
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<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 147
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 148
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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
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Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
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Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
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Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
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Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
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260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
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Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
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Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 149
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
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Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
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225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
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290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
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340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
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Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
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405 410 415
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420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
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Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 150
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 150
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
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65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
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Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
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Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
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Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
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<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 151
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
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Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 152
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 152
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
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Asn Leu Arg Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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100 105 110
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Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
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Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
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195 200 205
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Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
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245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
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275 280 285
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290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 153
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 153
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
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100 105 110
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195 200 205
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210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
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420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
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515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
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545 550 555 560
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565 570 575
Gly
<210> 154
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 154
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
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65 70 75 80
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85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
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130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 155
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 155
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 156
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 156
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
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Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
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Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 157
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 157
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
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115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
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Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
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Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
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210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
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Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
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Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
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420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
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Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
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Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
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Gly
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 158
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
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Gly Tyr Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
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100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
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195 200 205
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Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
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Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
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Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
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Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
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Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
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<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 159
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Gln Gly Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
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Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
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Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
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Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
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His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 160
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1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
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Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
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Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
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Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
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210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
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<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 161
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
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Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
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Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
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Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
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Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
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210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
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355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
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Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 162
<211> 442
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 162
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Phe
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245 250 255
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275 280 285
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290 295 300
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
305 310 315 320
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
325 330 335
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Gln Glu
340 345 350
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355 360 365
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
370 375 380
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
385 390 395 400
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
405 410 415
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
420 425 430
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435 440
<210> 163
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 163
Glu Ile Ile Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
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115 120 125
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130 135 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
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165 170 175
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Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 164
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 164
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
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Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
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210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
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Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
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Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
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Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 165
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Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
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Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
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Gly
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 166
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Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 167
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 168
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325 330 335
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 169
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
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Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
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Gly
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<213> 人工序列
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<223> 合成构建体
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Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
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Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 173
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 173
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
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275 280 285
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Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
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325 330 335
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370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 174
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 174
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Pro Gly Leu Arg Tyr Phe Asp Gly Gly Met Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 175
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 175
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Ala Ala Ser Thr Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 176
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 176
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 177
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 177
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 178
<211> 443
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 178
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gly Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Met Phe Arg Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Gln
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 179
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 179
Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Asp Tyr Ile Tyr Tyr Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 180
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<220>
<221> 变体
<222> 6
<223> Xaa = Glu或Gln
<220>
<221> 变体
<222> 8
<223> Xaa = Ala或Leu
<220>
<221> 变体
<222> 9
<223> Xaa = Gln、Arg或Phe
<400> 180
Gln Ser Leu Val His Xaa Asn Xaa Xaa Thr Tyr
1 5 10
<210> 181
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 181
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 182
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 182
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 183
<211> 440
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 183
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Leu Val Glu Trp Ile Arg Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Arg Ser Ser Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys
115 120 125
Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
130 135 140
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
180 185 190
Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
195 200 205
Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
225 230 235 240
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
245 250 255
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
260 265 270
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
275 280 285
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
290 295 300
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
305 310 315 320
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
325 330 335
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Gln Glu Glu Met
340 345 350
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
355 360 365
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
370 375 380
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
385 390 395 400
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val
405 410 415
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
420 425 430
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 184
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 184
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Gln Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Thr Tyr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 185
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 185
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Glu
20 25 30
Asn Leu Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
<210> 186
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 186
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 187
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 187
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Ser Pro Tyr Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Phe Glu Gly Phe Tyr Tyr Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 188
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 188
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Pro Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 189
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 189
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg caccagaacg cccagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 190
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 190
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 191
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 191
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caacatcaag gacacctaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggcaagg gactggaatg ggtggccaga atctacccca ccaacggcta caccagatac 180
gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcgccgaca ccagcaagaa caccgcctac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
ggcgacggct tctacgccat ggactattgg ggccagggca ccctcgtgac cgtgtctagt 360
gcgtcgacca agggcccatc ggtgttccct ctggcccctt gcagcagaag caccagcgaa 420
tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 192
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 192
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca ggacgtgaac accgccgtgg cctggtatca gcagaagcct 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctacagc gccagcttcc tgtacagcgg cgtgcccagc 180
agattcagcg gaagcagaag cggcaccgac ttcaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cactacacca ccccccccac atttggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 193
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 193
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg caccagaacg cccagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 194
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 194
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
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ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
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<210> 195
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 195
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<210> 196
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 196
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<220>
<223> 合成构建体
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<212> DNA
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<223> 合成构建体
<400> 198
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<213> 人工序列
<220>
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gcgtcgacca agggcccatc ggtgttccct ctggcccctt gcagcagaag caccagcgaa 420
tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 204
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 204
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 205
<211> 1014
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 205
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacaacaacg ccaacaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaagggcc agcccaaggc cgcccccgac 360
atccagatga cccagagccc cagcagcctg tctgccagcg tgggcgacag agtgaccatc 420
acctgtcagg ccagccagaa catctacgtg tggctgaact ggtatcagca gaagcccggc 480
aaggccccca agctgctgat ctacaaggcc agcaacctgc acaccggcgt gcccagcaga 540
ttttctggca gcggctccgg caccgacttc accctgacaa tcagctccct gcagcccgag 600
gacattgcca cctactactg ccagcagggc cagacctacc cctacacctt tggccagggc 660
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atcttcccac ctagcgacga gcagctgaag tccggcacag cctctgtcgt gtgcctgctg 780
aacaacttct acccccgcga ggccaaagtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 840
ggcaacagcc aggaaagcgt gaccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 900
agcaccctga cactgagcaa ggccgactac gagaagcaca aggtgtacgc ctgcgaagtg 960
acccaccagg gcctgtctag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgt 1014
<210> 206
<211> 1710
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 206
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
agccaggtgc agctggtgga atctggcggc ggagtggtgc agcctggcag aagcctgaga 420
ctgagctgtg ccgccagcgg cttcaccttc accaaggcct ggatgcactg ggtgcgccag 480
gcccctggaa agcagctgga atgggtggcc cagatcaagg acaagagcaa cagctacgcc 540
acctactacg ccgacagcgt gaagggccgg ttcaccatca gccgggacga cagcaagaac 600
accctgtacc tgcagatgaa cagcctgcgg gccgaggaca ccgccgtgta ctactgtcgg 660
ggcgtgtact atgccctgag ccccttcgat tactggggcc agggaaccct cgtgaccgtg 720
tctagtcgga ccgccagcac aaagggccca tcggtgttcc ctctggcccc ttgcagcaga 780
agcaccagcg aatctacagc cgccctgggc tgcctcgtga aggactactt tcccgagccc 840
gtgaccgtgt cctggaactc tggcgctctg acaagcggcg tgcacacctt tccagccgtg 900
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ggcaccaaga cctacacctg taacgtggac cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 1020
cgggtggaat ctaagtacgg ccctccctgc cctccttgcc cagcccctga agctgccggc 1080
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aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag ggcctgccca gctccatcga gaaaaccatc 1380
agcaaggcca agggccagcc ccgcgagcct caagtgtgta ccctgccccc tagccaggaa 1440
gagatgacca agaaccaggt gtccctgagc tgtgccgtga aaggcttcta ccccagcgac 1500
attgccgtgg aatgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1560
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acccagaagt ccctgtctct gtccctgggc 1710
<210> 207
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 207
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ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 208
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 208
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
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<210> 209
<211> 1014
<212> DNA
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 209
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<210> 210
<211> 1710
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 210
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
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<210> 211
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 211
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ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 212
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 212
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
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tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 213
<211> 1014
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 213
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacaacaacg ccaacaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaagggcc agcccaaggc cgcccccgac 360
atccagatga cccagagccc cagcagcctg tctgccagcg tgggcgacag agtgaccatc 420
acctgtcagg ccagccagaa catctacgtg tggctgaact ggtatcagca gaagcccggc 480
aaggccccca agctgctgat ctacaaggcc agcaacctgc acaccggcgt gcccagcaga 540
ttttctggca gcggctccgg caccgacttc accctgacaa tcagctccct gcagcccgag 600
gacattgcca cctactactg ccagcagggc cagacctacc cctacacctt tggccagggc 660
accaagctgg aaatcaagac caagggcccc agccgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc 720
atcttcccac ctagcgacga gcagctgaag tccggcacag cctctgtcgt gtgcctgctg 780
aacaacttct acccccgcga ggccaaagtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 840
ggcaacagcc aggaaagcgt gaccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 900
agcaccctga cactgagcaa ggccgactac gagaagcaca aggtgtacgc ctgcgaagtg 960
acccaccagg gcctgtctag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgt 1014
<210> 214
<211> 1710
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 214
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
agccaggtgc agctggtgga atctggcggc ggagtggtgc agcctggcag aagcctgaga 420
ctgagctgtg ccgccagcgg cttcaccttc accaaggcct ggatgcactg ggtgcgccag 480
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acctactacg ccgacagcgt gaagggccgg ttcaccatca gccgggacga cagcaagaac 600
accctgtacc tgcagatgaa cagcctgcgg gccgaggaca ccgccgtgta ctactgtcgg 660
ggcgtgtact atgccctgag ccccttcgat tactggggcc agggaaccct cgtgaccgtg 720
tctagtcgga ccgccagcac aaagggccca tcggtgttcc ctctggcccc ttgcagcaga 780
agcaccagcg aatctacagc cgccctgggc tgcctcgtga aggactactt tcccgagccc 840
gtgaccgtgt cctggaactc tggcgctctg acaagcggcg tgcacacctt tccagccgtg 900
ctccagagca gcggcctgta ctctctgagc agcgtcgtga cagtgcccag cagcagcctg 960
ggcaccaaga cctacacctg taacgtggac cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 1020
cgggtggaat ctaagtacgg ccctccctgc cctccttgcc cagcccctga agctgccggc 1080
ggaccctccg tgttcctgtt ccccccaaag cccaaggaca ccctgatgat cagccggacc 1140
cccgaagtga cctgcgtggt ggtggatgtg tcccaggaag atcccgaggt gcagttcaat 1200
tggtacgtgg acggcgtgga agtgcacaac gccaagacca agcccagaga ggaacagttc 1260
aacagcacct accgggtggt gtccgtgctg accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 1320
aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag ggcctgccca gctccatcga gaaaaccatc 1380
agcaaggcca agggccagcc ccgcgagcct caagtgtgta ccctgccccc tagccaggaa 1440
gagatgacca agaaccaggt gtccctgagc tgtgccgtga aaggcttcta ccccagcgac 1500
attgccgtgg aatgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1560
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acccagaagt ccctgtctct gtccctgggc 1710
<210> 215
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 215
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
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cctggcaagg gactggaatg ggtggccaga atctacccca ccaacgccta caccagatac 180
gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcgccgaca ccagcaagaa caccgcctac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
ggcgaaggct tctacgccat ggactattgg ggccagggca ccctcgtgac cgtgtctagt 360
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tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
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tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
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ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
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ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
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<210> 216
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 216
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
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cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
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<210> 217
<211> 1014
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 217
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atcttcccac ctagcgacga gcagctgaag tccggcacag cctctgtcgt gtgcctgctg 780
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acccaccagg gcctgtctag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgt 1014
<210> 218
<211> 1710
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 218
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
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<210> 219
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 219
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
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<210> 220
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 220
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<210> 221
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 221
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<210> 222
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 222
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cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
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tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
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gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 223
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 223
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caacatcaag gacacctaca tccactgggt gcgccaggcc 120
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gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcgccgaca ccagcaagaa caccgcctac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
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tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
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aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
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aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
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ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 224
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 224
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca ggacgtgaac accgccgtgg cctggtatca gcagaagcct 120
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agattcagcg gaagcagaag cggcaccgac ttcaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cactacacca ccccccccac atttggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
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ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
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ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 225
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 225
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
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tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
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caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
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ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 226
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 226
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
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<210> 227
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 227
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<210> 228
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 228
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<210> 229
<211> 1008
<212> DNA
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<220>
<223> 合成构建体
<400> 229
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<210> 230
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 230
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<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 231
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<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
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<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 233
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgttcaccta cctgagctgg 120
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agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
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atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 234
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 234
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 235
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 235
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caacatcaag gacacctaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggcaagg gactggaatg ggtggccaga atctacccca ccaacggcta caccagatac 180
gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcgccgaca ccagcaagaa caccgcctac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
ggcgacggct tctacgccat ggactattgg ggccagggca ccctcgtgac cgtgtctagt 360
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tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
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tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 236
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 236
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca ggacgtgaac accgccgtgg cctggtatca gcagaagcct 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctacagc gccagcttcc tgtacagcgg cgtgcccagc 180
agattcagcg gaagcagaag cggcaccgac ttcaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cactacacca ccccccccac atttggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 237
<211> 1014
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 237
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacaacaacg ccaacaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaagggcc agcccaaggc cgcccccgac 360
atccagatga cccagagccc cagcagcctg tctgccagcg tgggcgacag agtgaccatc 420
acctgtcagg ccagccagaa catctacgtg tggctgaact ggtatcagca gaagcccggc 480
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gacattgcca cctactactg ccagcagggc cagacctacc cctacacctt tggccagggc 660
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atcttcccac ctagcgacga gcagctgaag tccggcacag cctctgtcgt gtgcctgctg 780
aacaacttct acccccgcga ggccaaagtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 840
ggcaacagcc aggaaagcgt gaccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 900
agcaccctga cactgagcaa ggccgactac gagaagcaca aggtgtacgc ctgcgaagtg 960
acccaccagg gcctgtctag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgt 1014
<210> 238
<211> 1710
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 238
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
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acctactacg ccgacagcgt gaagggccgg ttcaccatca gccgggacga cagcaagaac 600
accctgtacc tgcagatgaa cagcctgcgg gccgaggaca ccgccgtgta ctactgtcgg 660
ggcgtgtact atgccctgag ccccttcgat tactggggcc agggaaccct cgtgaccgtg 720
tctagtcgga ccgccagcac aaagggccca tcggtgttcc ctctggcccc ttgcagcaga 780
agcaccagcg aatctacagc cgccctgggc tgcctcgtga aggactactt tcccgagccc 840
gtgaccgtgt cctggaactc tggcgctctg acaagcggcg tgcacacctt tccagccgtg 900
ctccagagca gcggcctgta ctctctgagc agcgtcgtga cagtgcccag cagcagcctg 960
ggcaccaaga cctacacctg taacgtggac cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 1020
cgggtggaat ctaagtacgg ccctccctgc cctccttgcc cagcccctga agctgccggc 1080
ggaccctccg tgttcctgtt ccccccaaag cccaaggaca ccctgatgat cagccggacc 1140
cccgaagtga cctgcgtggt ggtggatgtg tcccaggaag atcccgaggt gcagttcaat 1200
tggtacgtgg acggcgtgga agtgcacaac gccaagacca agcccagaga ggaacagttc 1260
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aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag ggcctgccca gctccatcga gaaaaccatc 1380
agcaaggcca agggccagcc ccgcgagcct caagtgtgta ccctgccccc tagccaggaa 1440
gagatgacca agaaccaggt gtccctgagc tgtgccgtga aaggcttcta ccccagcgac 1500
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acccagaagt ccctgtctct gtccctgggc 1710
<210> 239
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 239
gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caacatcaag gacacctaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggcaagg gactggaatg ggtggccaga atctacccca ccaacggcta caccagatac 180
gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcgccgaca ccagcaagaa caccgcctac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
ggcgacggct tctacgccat ggactattgg ggccagggca ccctcgtgac cgtgtctagt 360
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tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
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ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 240
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 240
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
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<210> 241
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 241
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
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ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
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<210> 242
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 242
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
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caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
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<210> 243
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 243
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ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtag tagatgggga 300
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aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
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ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 244
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 244
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca ggacgtgaac accgccgtgg cctggtatca gcagaagcct 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctacagc gccagcttcc tgtacagcgg cgtgcccagc 180
agattcagcg gaagcagaag cggcaccgac ttcaccctga ccatcagctc cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cactacacca ccccccccac atttggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 245
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 245
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgttcaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 246
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 246
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 247
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 247
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtcgtgaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctacgcca tgcactgggt caaagaggcc 120
cctggccaga gactggaatg gatcggctac atctaccccg gccagggcgg caccaactac 180
aaccagaagt tccagggcag agccaccctg accgccgata caagcgccag caccgcctac 240
atggaactga gcagcctgcg gagcgaggat accgccgtgt acttctgtgc cagaacaggc 300
ggcctgaggc gggcctactt tacctattgg ggccagggca ccctcgtgac cgtgtctagc 360
gctagcacaa agggcccatc ggtgttccct ctggcccctt gcagcagaag caccagcgaa 420
tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 248
<211> 654
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 248
gacatcgtgc tgacacagag ccctgccacc ctgtctctga gccctggcga gagagccacc 60
atcagctgta gagccagcca gagcgtgtcc agctacggcc agggcttcat gcactggtat 120
cagcagaagc ccggccagcc ccccagactg ctgatctatg gcgccagcag cagagccaca 180
ggcatccccg ccagattttc tggctctggc agcggcaccg acttcaccct gacaatcagc 240
cccctggaac ccgaggactt cgccgtgtac tactgccagc agaacaaaga ggacccctgg 300
accttcggcg gaggcaccaa gctggaaatc aagcgtacgg tggccgctcc cagcgtgttc 360
atcttcccac ctagcgacga gcagctgaag tccggcacag cctctgtcgt gtgcctgctg 420
aacaacttct acccccgcga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaatgc cctgcagagc 480
ggcaacagcc aggaaagcgt gaccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 540
agcaccctga ccctgtccaa ggccgattac gagaagcaca aggtgtacgc ctgcgaagtg 600
acccaccagg gcctgtctag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgc 654
<210> 249
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 249
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 250
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 250
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 251
<211> 1326
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 251
caggttcagc tggttcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg tgtccggcta caccctgacc gagttcagca tccactgggt ccgacaggct 120
ccaggacaag gcttggaatg gatgggcggc ttcgatcccg aggacggcga aacaatctac 180
gcccagaaat tccagggccg cgtgatcatg accgaggaca cctctaccga caccgcctac 240
atggaaatga acagcctgcg gagcgaggat accgccatct actactgtac caccggcaga 300
ttcttcgact ggttctgggg ccagggcacc ctggttacag tctcttctgc gtcgaccaag 360
ggcccatcgg tgttccctct ggccccttgc agcagaagca ccagcgaatc tacagccgcc 420
ctgggctgcc tcgtgaagga ctactttccc gagcccgtga ccgtgtcctg gaactctggc 480
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ctgagcagcg tcgtgacagt gcccagcagc agcctgggca ccaagaccta cacctgtaac 600
gtggaccaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagcggg tggaatctaa gtacggccct 660
ccctgccctc cttgcccagc ccctgaagct gccggcggac cctccgtgtt cctgttcccc 720
ccaaagccca aggacaccct gatgatcagc cggacccccg aagtgacctg cgtggtggtg 780
gatgtgtccc aggaagatcc cgaggtgcag ttcaattggt acgtggacgg cgtggaagtg 840
cacaacgcca agaccaagcc cagagaggaa cagttcaaca gcacctaccg ggtggtgtcc 900
gtgctgaccg tgctgcacca ggactggctg aacggcaaag agtacaagtg caaggtgtcc 960
aacaagggcc tgcccagctc catcgagaaa accatcagca aggccaaggg ccagccccgc 1020
gagcctcaag tgtataccct gcccccttgc caggaagaga tgaccaagaa ccaggtgtcc 1080
ctgtggtgtc tcgtgaaagg cttctacccc agcgacattg ccgtggaatg ggagagcaac 1140
ggccagcccg agaacaacta caagaccacc ccccctgtgc tggacagcga cggctcattc 1200
ttcctgtact ccaagctgac cgtggacaag agccggtggc aggaaggcaa cgtgttcagc 1260
tgctccgtga tgcacgaggc cctgcacaac cactacaccc agaagtccct gtctctgtcc 1320
ctgggc 1326
<210> 252
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 252
gagatcatcc tgacacagag ccccgccatc ctgtcactgt ctccaggcga aagagccaca 60
ctgagctgta gagccagcca gagcgtgatc agcagattcc tgagctggta tcaagtgaag 120
cccggactgg cccctcggct gttgatatat ggcgcctcta cacgcgccac aggcatccct 180
gttagatttt ctggcagcgg ctccggcacc gacttcagcc tgacaattag cagcctgcag 240
cctgaggact gcgccgtgta ctactgtcag caggacagca acctgcctat caccttcggc 300
cagggcacca gactggaaat caagcgtacg gtggccgctc ccagcgtgtt catcttccca 360
cctagcgacg agcagctgaa gtccggcaca gcctctgtcg tgtgcctgct gaacaacttc 420
tacccccgcg aggccaaagt gcagtggaag gtggacaacg ccctgcagag cggcaacagc 480
caggaaagcg tgaccgagca ggacagcaag gactccacct acagcctgag cagcaccctg 540
acactgagca aggccgacta cgagaagcac aaggtgtacg cctgcgaagt gacccaccag 600
ggcctgtcta gccccgtgac caagagcttc aaccggggcg agtgt 645
<210> 253
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 253
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 254
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 254
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 255
<211> 1320
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 255
caggttcagc tgcagcagtc tggccccgaa ctcgttagac ctggcacctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cgcctttacc acctacctgg tggaatggat caagcagagg 120
cctggacagg gcctcgagtg gatcggagtg atcaatcctg gcagcggcag caccaactac 180
aacgagaagt tcaagggcaa agccacactg accgtggaca gaagcagcac cacagcctac 240
atgcacctga gcggcctgac ctctgatgac agcgccgtgt acttctgcgc cagatacgcc 300
tatggctatt ggggccaggg cacaaccctg accgttagct ctgcgtcgac caagggccca 360
tcggtgttcc ctctggcccc ttgcagcaga agcaccagcg aatctacagc cgccctgggc 420
tgcctcgtga aggactactt tcccgagccc gtgaccgtgt cctggaactc tggcgctctg 480
acaagcggcg tgcacacctt tccagccgtg ctccagagca gcggcctgta ctctctgagc 540
agcgtcgtga cagtgcccag cagcagcctg ggcaccaaga cctacacctg taacgtggac 600
cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag cgggtggaat ctaagtacgg ccctccctgc 660
cctccttgcc cagcccctga agctgccggc ggaccctccg tgttcctgtt ccccccaaag 720
cccaaggaca ccctgatgat cagccggacc cccgaagtga cctgcgtggt ggtggatgtg 780
tcccaggaag atcccgaggt gcagttcaat tggtacgtgg acggcgtgga agtgcacaac 840
gccaagacca agcccagaga ggaacagttc aacagcacct accgggtggt gtccgtgctg 900
accgtgctgc accaggactg gctgaacggc aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag 960
ggcctgccca gctccatcga gaaaaccatc agcaaggcca agggccagcc ccgcgagcct 1020
caagtgtata ccctgccccc ttgccaggaa gagatgacca agaaccaggt gtccctgtgg 1080
tgtctcgtga aaggcttcta ccccagcgac attgccgtgg aatgggagag caacggccag 1140
cccgagaaca actacaagac caccccccct gtgctggaca gcgacggctc attcttcctg 1200
tactccaagc tgaccgtgga caagagccgg tggcaggaag gcaacgtgtt cagctgctcc 1260
gtgatgcacg aggccctgca caaccactac acccagaagt ccctgtctct gtccctgggc 1320
<210> 256
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 256
gacatcgtga tgacccagag ccagaaattc atgagcgcca gcgtgggcga cagagtgtcc 60
atcacatgta aagccagcca gaacgtgggc acagccgtgg cttggtatca gcagcagcct 120
ggccactctc ctaagcagct gatctacagc gccagcaaca gatacaccgg cgtgcccgat 180
agattcacag gatctggcgc cggaaccgac ttcaccctga ccatcagcaa catccagagc 240
gaggacctgg ccgactactt ctgccagcag tacagcacat accccttcac ctttggcagc 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 257
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 257
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 258
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 258
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 259
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 259
caggttcagc tgctgcagtc tggcgccgaa cttgtcagac ctggcgtgtc cgtgaagatc 60
agctgtacag gcagcggcta cagcttcacc aactacgccg tgcactgggt caagcagagc 120
cacgtgaagt ccctggaatg gatcggcgtg atcagcccct actacggcga caccacctac 180
aaccagaagt tcaccggcaa ggccaccatg accgtggaca agtctagcag caccgcctac 240
atggaactgg ccagactgac cagcgaggac agcgccatct acttttgcgc cagaagattc 300
gagggcttct actacagcat ggactactgg ggccagggca ccagcgtgac agtttcttct 360
gcgtcgacca agggcccatc ggtgttccct ctggcccctt gcagcagaag caccagcgaa 420
tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
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ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 260
<211> 657
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 260
gacgtggtca tgatccagac acctctgagc ctgcctgtgt ctctgggaga tcaggccagc 60
atcagctgca gacctagcca gtctctggtg cacagcaacg gcaacaccta cctgaactgg 120
tatctgcaga ggcccggaca gagccccaag ctgctgatct acaaggtgtc caagcggttc 180
agcggcgtgc ccgatagatt ttctggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatt 240
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ctgacctttg gcagcggaac ccagctggaa atcaagcgta cggtggccgc tcccagcgtg 360
ttcatcttcc cacctagcga cgagcagctg aagtccggca cagcctctgt cgtgtgcctg 420
ctgaacaact tctacccccg cgaggccaaa gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 480
agcggcaaca gccaggaaag cgtgaccgag caggacagca aggactccac ctacagcctg 540
agcagcaccc tgacactgag caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgaa 600
gtgacccacc agggcctgtc tagccccgtg accaagagct tcaaccgggg cgagtgt 657
<210> 261
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 261
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
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gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
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cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 262
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 262
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
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tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
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gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
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gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 263
<211> 1344
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 263
caggtgcagc tggtggaatc tggcggcgga gtggtgcagc ctggcagaag cctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc agctacggca tgtactgggt gcgccaggcc 120
cctggcaaag gcctggaatg ggtggccgtg atttggtacg acggcagcaa caagtactac 180
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ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac acagccgtgt atcactgcgc cagagatccc 300
ggcctgcggt actttgacgg cggcatggat gtgtggggcc agggcacaac cgtgaccgtg 360
tcatctgcgt cgaccaaggg cccatcggtg ttccctctgg ccccttgcag cagaagcacc 420
agcgaatcta cagccgccct gggctgcctc gtgaaggact actttcccga gcccgtgacc 480
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agcagcggcc tgtactctct gagcagcgtc gtgacagtgc ccagcagcag cctgggcacc 600
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gaatctaagt acggccctcc ctgccctcct tgcccagccc ctgaagctgc cggcggaccc 720
tccgtgttcc tgttcccccc aaagcccaag gacaccctga tgatcagccg gacccccgaa 780
gtgacctgcg tggtggtgga tgtgtcccag gaagatcccg aggtgcagtt caattggtac 840
gtggacggcg tggaagtgca caacgccaag accaagccca gagaggaaca gttcaacagc 900
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tacaagtgca aggtgtccaa caagggcctg cccagctcca tcgagaaaac catcagcaag 1020
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accaagaacc aggtgtccct gtggtgtctc gtgaaaggct tctaccccag cgacattgcc 1140
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gacagcgacg gctcattctt cctgtactcc aagctgaccg tggacaagag ccggtggcag 1260
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aagtccctgt ctctgtccct gggc 1344
<210> 264
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 264
gacatccagc tgacccagag ccccagcttt ctgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
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gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
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ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 265
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 265
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
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ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
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cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
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gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
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cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 266
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 266
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
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tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
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gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 267
<211> 1329
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 267
caggtgcagc tggtggaaag cggcggaggc gtggtgcagc ctggcaggtc tctgagactg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc agctacggaa tgcactgggt gcgccaggcc 120
cctggcaaag gactggaatg ggtggccgtg atttggtacg acggcagcaa caagtactac 180
gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agcggcgaca acagcaagaa caccctgtac 240
ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcgc cagaatgttc 300
agaggcgcct tcgactactg gggccagggc acactcgtga ccgtgtctag tgcgtcgacc 360
aagggcccat cggtgttccc tctggcccct tgcagcagaa gcaccagcga atctacagcc 420
gccctgggct gcctcgtgaa ggactacttt cccgagcccg tgaccgtgtc ctggaactct 480
ggcgctctga caagcggcgt gcacaccttt ccagccgtgc tccagagcag cggcctgtac 540
tctctgagca gcgtcgtgac agtgcccagc agcagcctgg gcaccaagac ctacacctgt 600
aacgtggacc acaagcccag caacaccaag gtggacaagc gggtggaatc taagtacggc 660
cctccctgcc ctccttgccc agcccctgaa gctgccggcg gaccctccgt gttcctgttc 720
cccccaaagc ccaaggacac cctgatgatc agccggaccc ccgaagtgac ctgcgtggtg 780
gtggatgtgt cccaggaaga tcccgaggtg cagttcaatt ggtacgtgga cggcgtggaa 840
gtgcacaacg ccaagaccaa gcccagagag gaacagttca acagcaccta ccgggtggtg 900
tccgtgctga ccgtgctgca ccaggactgg ctgaacggca aagagtacaa gtgcaaggtg 960
tccaacaagg gcctgcccag ctccatcgag aaaaccatca gcaaggccaa gggccagccc 1020
cgcgagcctc aagtgtatac cctgccccct tgccaggaag agatgaccaa gaaccaggtg 1080
tccctgtggt gtctcgtgaa aggcttctac cccagcgaca ttgccgtgga atgggagagc 1140
aacggccagc ccgagaacaa ctacaagacc accccccctg tgctggacag cgacggctca 1200
ttcttcctgt actccaagct gaccgtggac aagagccggt ggcaggaagg caacgtgttc 1260
agctgctccg tgatgcacga ggccctgcac aaccactaca cccagaagtc cctgtctctg 1320
tccctgggc 1329
<210> 268
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 268
gccatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgtctgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca gggcatccgg aacgacctgg gctggtatca gcagaagcct 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctacgcc gctagctctc tgcagtccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga caatctctgg cctgcagccc 240
gaggacagcg ccacctacta ctgtctgcaa gactacatct actaccccac cttcggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 269
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 269
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 270
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 270
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 271
<211> 1320
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 271
caggttcagc tggttcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg cctctggcta cgccttcacc acctacctgg tggaatggat cagacagagg 120
cctggacagg gcctcgaatg gatgggcgtg atcaatcctg gcagcggcag caccaattac 180
gcccagaaat tccagggcag agtgaccatg accgtggaca gaagcagcac caccgcctac 240
atggaactga gcagactgag aagcgacgac accgccgtgt actactgtgc cagatacgcc 300
tacggctatt ggggccaggg aaccctggtt accgttagct ctgcgtcgac caagggccca 360
tcggtgttcc ctctggcccc ttgcagcaga agcaccagcg aatctacagc cgccctgggc 420
tgcctcgtga aggactactt tcccgagccc gtgaccgtgt cctggaactc tggcgctctg 480
acaagcggcg tgcacacctt tccagccgtg ctccagagca gcggcctgta ctctctgagc 540
agcgtcgtga cagtgcccag cagcagcctg ggcaccaaga cctacacctg taacgtggac 600
cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag cgggtggaat ctaagtacgg ccctccctgc 660
cctccttgcc cagcccctga agctgccggc ggaccctccg tgttcctgtt ccccccaaag 720
cccaaggaca ccctgatgat cagccggacc cccgaagtga cctgcgtggt ggtggatgtg 780
tcccaggaag atcccgaggt gcagttcaat tggtacgtgg acggcgtgga agtgcacaac 840
gccaagacca agcccagaga ggaacagttc aacagcacct accgggtggt gtccgtgctg 900
accgtgctgc accaggactg gctgaacggc aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag 960
ggcctgccca gctccatcga gaaaaccatc agcaaggcca agggccagcc ccgcgagcct 1020
caagtgtata ccctgccccc ttgccaggaa gagatgacca agaaccaggt gtccctgtgg 1080
tgtctcgtga aaggcttcta ccccagcgac attgccgtgg aatgggagag caacggccag 1140
cccgagaaca actacaagac caccccccct gtgctggaca gcgacggctc attcttcctg 1200
tactccaagc tgaccgtgga caagagccgg tggcaggaag gcaacgtgtt cagctgctcc 1260
gtgatgcacg aggccctgca caaccactac acccagaagt ccctgtctct gtccctgggc 1320
<210> 272
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 272
gacatccaga tgacacagag ccctagcagc ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcca gaatgtggga acagccgtgg cctggtatca gcagaagcct 120
ggcaagagcc ccaagcagct gatctacagc gccagcaaca gatacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gcagcggctc tggcaccgac ttcaccctga ccatatctag cctgcagcct 240
gaggacctgg ccacctacta ctgtcagcag tacagcacat accccttcac cttcggccag 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccacct 360
agcgacgagc agctgaagtc cggcacagcc tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgcgagg ccaaagtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gaaagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgaca 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642
<210> 273
<211> 1008
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 273
gacatcgtga tgacccagac ccccctgagc ctgagcgtga cacctggaca gcctgccagc 60
atcagctgca agagcagcca gagcctggtg cacgagaacc tgcagaccta cctgagctgg 120
tatctgcaga agcccggcca gagcccccag tccctgatct acaaggtgtc caacagattc 180
agcggcgtgc ccgacagatt ctccggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatc 240
agccgggtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactattgtg gccagggcac ccagtacccc 300
ttcacctttg gcagcggcac caaggtggaa atcaaggaca aaacccatac cgacatccag 360
atgacccaga gccccagcag cctgtctgcc agcgtgggcg acagagtgac catcacctgt 420
caggccagcc agaacatcta cgtgtggctg aactggtatc agcagaagcc cggcaaggcc 480
cccaagctgc tgatctacaa ggccagcaac ctgcacaccg gcgtgcccag cagattttct 540
ggcagcggct ccggcaccga cttcaccctg acaatcagct ccctgcagcc cgaggacatt 600
gccacctact actgccagca gggccagacc tacccctaca cctttggcca gggcaccaag 660
ctggaaatca aggataagac ccacacccgt acggtggccg ctcccagcgt gttcatcttc 720
ccacctagcg acgagcagct gaagtccggc acagcctctg tcgtgtgcct gctgaacaac 780
ttctaccccc gcgaggccaa agtgcagtgg aaggtggaca acgccctgca gagcggcaac 840
agccaggaaa gcgtgaccga gcaggacagc aaggactcca cctacagcct gagcagcacc 900
ctgacactga gcaaggccga ctacgagaag cacaaggtgt acgcctgcga agtgacccac 960
cagggcctgt ctagccccgt gaccaagagc ttcaaccggg gcgagtgt 1008
<210> 274
<211> 1731
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 274
caggtgcagc tggtgcagtc tggcgccgag gtcgtgaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cacctttacc agctactaca tccactgggt gcgccaggcc 120
cctggacagg gactggaatg gatcggcagc atctaccccg gcaacgtgaa caccaactac 180
gcccagaagt tccagggcag agccaccctg accgtggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggaactga gccggctgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcac ccggtcccac 300
tacggcctgg attggaactt cgacgtgtgg ggcaagggca ccaccgtgac agtgtctagc 360
gacaaaaccc atacccaggt gcagctggtg gaatctggcg gcggagtggt gcagcctggc 420
agaagcctga gactgagctg tgccgccagc ggcttcacct tcaccaaggc ctggatgcac 480
tgggtgcgcc aggcccctgg aaagcagctg gaatgggtgg cccagatcaa ggacaagagc 540
aacagctacg ccacctacta cgccgacagc gtgaagggcc ggttcaccat cagccgggac 600
gacagcaaga acaccctgta cctgcagatg aacagcctgc gggccgagga caccgccgtg 660
tactactgtc ggggcgtgta ctatgccctg agccccttcg attactgggg ccagggaacc 720
ctcgtgaccg tgtctagtga taagacccac accgccagca caaagggccc atcggtgttc 780
cctctggccc cttgcagcag aagcaccagc gaatctacag ccgccctggg ctgcctcgtg 840
aaggactact ttcccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgctct gacaagcggc 900
gtgcacacct ttccagccgt gctccagagc agcggcctgt actctctgag cagcgtcgtg 960
acagtgccca gcagcagcct gggcaccaag acctacacct gtaacgtgga ccacaagccc 1020
agcaacacca aggtggacaa gcgggtggaa tctaagtacg gccctccctg ccctccttgc 1080
ccagcccctg aagctgccgg cggaccctcc gtgttcctgt tccccccaaa gcccaaggac 1140
accctgatga tcagccggac ccccgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccaggaa 1200
gatcccgagg tgcagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1260
aagcccagag aggaacagtt caacagcacc taccgggtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1320
caccaggact ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa gggcctgccc 1380
agctccatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgcgagcc tcaagtgtgt 1440
accctgcccc ctagccagga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgag ctgtgccgtg 1500
aaaggcttct accccagcga cattgccgtg gaatgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1560
aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct ggtgtccaag 1620
ctgaccgtgg acaagagccg gtggcaggaa ggcaacgtgt tcagctgctc cgtgatgcac 1680
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgtctc tgtccctggg c 1731
<210> 275
<211> 1338
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 275
caggttcagc tggttcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ctggcgcctc tgtgaaggtg 60
tcctgcaagg ccagcggcta cagcttcacc aattacgccg tgcactgggt ccgacaggct 120
ccaggacaag gactggaatg gatgggcgtg atcagcccct actacggcga taccacatac 180
gcccagaaat tccagggcag agtgaccatg accgtggaca agagcagcag caccgcctac 240
atggaactga gcagactgag aagcgacgac accgccgtgt actactgcgc cagaagattc 300
gagggcttct actacagcat ggactactgg ggccagggca ccctggttac agtctcttct 360
gcgtcgacca agggcccatc ggtgttccct ctggcccctt gcagcagaag caccagcgaa 420
tctacagccg ccctgggctg cctcgtgaag gactactttc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagccgtgct ccagagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtcgtgaca gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagcg ggtggaatct 660
aagtacggcc ctccctgccc tccttgccca gcccctgaag ctgccggcgg accctccgtg 720
ttcctgttcc ccccaaagcc caaggacacc ctgatgatca gccggacccc cgaagtgacc 780
tgcgtggtgg tggatgtgtc ccaggaagat cccgaggtgc agttcaattg gtacgtggac 840
ggcgtggaag tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg aacagttcaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaggg cctgcccagc tccatcgaga aaaccatcag caaggccaag 1020
ggccagcccc gcgagcctca agtgtatacc ctgccccctt gccaggaaga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgtggtg tctcgtgaaa ggcttctacc ccagcgacat tgccgtggaa 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200
gacggctcat tcttcctgta ctccaagctg accgtggaca agagccggtg gcaggaaggc 1260
aacgtgttca gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagtcc 1320
ctgtctctgt ccctgggc 1338
<210> 276
<211> 657
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 276
gacgtggtca tgacacagag ccctctgagc ctgcctgtga cactgggaca gcctgccagc 60
atcagctgta gacctagcca gagcctggtg cacagcaacg gcaacaccta cctgaactgg 120
tatcagcaga ggcccggaca gagccccaag ctgctgatct acaaggtgtc caagcggttc 180
agcggcgtgc ccgatagatt ttctggcagc ggctctggca ccgacttcac cctgaagatt 240
agcagagtgg aagccgagga cgtgggcgtg tactactgta gccagtctac ccacgtgcca 300
ctgacctttg gcggcggaac aaaggtggaa atcaagcgta cggtggccgc tcccagcgtg 360
ttcatcttcc cacctagcga cgagcagctg aagtccggca cagcctctgt cgtgtgcctg 420
ctgaacaact tctacccccg cgaggccaaa gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 480
agcggcaaca gccaggaaag cgtgaccgag caggacagca aggactccac ctacagcctg 540
agcagcaccc tgacactgag caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgaa 600
gtgacccacc agggcctgtc tagccccgtg accaagagct tcaaccgggg cgagtgt 657
<210> 277
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 277
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Leu Val Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Arg Ser Ser Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met His Leu Ser Gly Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 278
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 278
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly His Ser Pro Lys Gln Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Ile Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Thr Tyr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 279
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 279
Gln Val Gln Leu Leu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Val
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Thr Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Lys Gln Ser His Val Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Ser Pro Tyr Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Thr Gly Lys Ala Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ala Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Phe Glu Gly Phe Tyr Tyr Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 280
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 280
Asp Val Val Met Ile Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Pro Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Leu Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Gln Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 281
Glu Asn Leu Gln
1
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<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 282
Glu Asn Leu Phe
1
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<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 283
Glu Asn Leu Arg
1
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 284
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<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 285
Gly Leu Cys Thr Leu Val Ala Met Leu
1 5
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<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 286
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Asp Lys Thr His Thr Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln
130 135 140
Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
145 150 155 160
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro
165 170 175
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
180 185 190
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly
195 200 205
Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe
225 230 235 240
Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys
245 250 255
Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val
260 265 270
Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln
275 280 285
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser
290 295 300
Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His
305 310 315 320
Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
325 330 335
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<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 287
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
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Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
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Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 288
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 288
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Ala Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Ser Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 289
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 289
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 290
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 290
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
180 185 190
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 291
<211> 577
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 291
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Gln Val Gln
115 120 125
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His
145 150 155 160
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile
165 170 175
Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys
180 185 190
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
195 200 205
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
210 215 220
Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ala Ser Thr Lys Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
260 265 270
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
275 280 285
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
290 295 300
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
305 310 315 320
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
325 330 335
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
340 345 350
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
355 360 365
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
370 375 380
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
385 390 395 400
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
405 410 415
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
420 425 430
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
435 440 445
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
450 455 460
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
465 470 475 480
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
485 490 495
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
500 505 510
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
515 520 525
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp
530 535 540
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
545 550 555 560
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
565 570 575
Gly
<210> 292
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 292
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
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Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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65 70 75 80
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Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
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Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 293
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 293
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
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Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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165 170 175
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195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 294
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 294
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
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Asn Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
180 185 190
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 295
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 295
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
370 375 380
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
465 470 475 480
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 296
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 296
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 297
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 297
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 298
<211> 338
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 298
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Gln
20 25 30
Ser Ala Gln Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Ser Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
115 120 125
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala
130 135 140
Ser Gln Asn Ile Tyr Val Trp Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
145 150 155 160
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly
165 170 175
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
180 185 190
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
195 200 205
Gln Gly Gln Thr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
210 215 220
Ile Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val
245 250 255
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
260 265 270
Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr
275 280 285
Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr
290 295 300
Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val
305 310 315 320
Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly
325 330 335
Glu Cys
<210> 299
<211> 570
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 299
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser His Tyr Gly Leu Asp Trp Asn Phe Asp Val Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ser Gln Val Gln Leu Val Glu Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
130 135 140
Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala Trp Met His Trp Val Arg Gln
145 150 155 160
Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser
165 170 175
Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr
210 215 220
Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
225 230 235 240
Ser Ser Arg Thr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
245 250 255
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
260 265 270
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
290 295 300
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
305 310 315 320
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
325 330 335
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
340 345 350
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
355 360 365
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
370 375 380
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
385 390 395 400
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
405 410 415
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
420 425 430
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
435 440 445
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
450 455 460
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
465 470 475 480
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe
485 490 495
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
500 505 510
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
515 520 525
Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
530 535 540
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
545 550 555 560
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
565 570
<210> 300
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 300
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Arg Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Gln Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Glu Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 301
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 301
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 302
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 302
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Ala
20 25 30
Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gln Ile Lys Asp Lys Ser Asn Ser Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Ser
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Arg Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Ser Pro Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120

Claims (89)

1.一种结合蛋白，所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成第三抗原结合位点。
2.根据权利要求1所述的结合蛋白，其中所述第一结合位点结合CD28多肽。
3.根据权利要求2所述的结合蛋白，其中所述VH1结构域包含：含有GYTFTSYY(SEQ IDNO:49)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGNVNT(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TRSHYGLDWNFDV(SEQ ID NO:51)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL1结构域包含：含有QNIYVW(SEQ ID NO:52)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KAS(SEQ ID NO:53)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQGQTYPY(SEQ ID NO:54)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
4.根据权利要求3所述的结合蛋白，其中所述VH1结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYYIHWVRQAPGQGLEWIGSIYPGNVNTNYAQKFQGRATLTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTRSHYGLDWNFDVWGKGTTVTVSS(SEQ ID NO:91)的氨基酸序列，并且/或者所述VL1结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQNIYVWLNWYQQKPGKAPKLLIYKASNLHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDIATYYCQQGQTYPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:92)的氨基酸序列。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的结合蛋白，其中所述VL2结构域的CDR-L1序列包含选自以下的氨基酸序列：QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)、QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)、QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)和QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)。
6.根据权利要求5所述的结合蛋白，其中所述VH2结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)或QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYASSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:302)的氨基酸序列，并且/或者所述VL2结构域包含选自以下的氨基酸序列：DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:96)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ IDNO:97)和DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:98)。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的结合蛋白，其中所述第三抗原结合位点结合肿瘤靶蛋白。
8.根据权利要求1-6中任一项所述的结合蛋白，其中所述第三抗原结合位点结合人CD38多肽。
9.根据权利要求8所述的结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含：含有GYTFTSYA(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGQGGT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARTGGLRRAYFTY(SEQ IDNO:15)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVSSYGQGF(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQNKEDPWT(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(b)所述VH3结构域包含：含有GYTLTEFS(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有FDPEDGET(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TTGRFFDWF(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVISRF(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQDSNLPIT(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(c)所述VH3结构域包含：含有GYAFTTYL(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有INPGSGST(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARYAYGY(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QNVGTA(SEQ ID NO:28)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:29)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQYSTYPFT(SEQ ID NO:30)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(d)所述VH3结构域包含：含有GYSFTNYA(SEQ ID NO:31)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有ISPYYGDT(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARRFEGFYYSMDY(SEQ IDNO:33)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSLVHSNGNTY(SEQ IDNO:34)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有SQSTHVPLT(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(e)所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARDPGLRYFDGGMDV(SEQ IDNO:39)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGISSY(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQLNSFPYT(SEQ ID NO:42)的氨基酸序列的CDR-L3序列；或
(f)所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARMFRGAFDY(SEQ ID NO:45)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGIRND(SEQ ID NO:46)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有LQDYIYYPT(SEQ ID NO:48)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
10.根据权利要求9所述的结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYAMHWVKEAPGQRLEWIGYIYPGQGGTNYNQKFQGRATLTADTSASTAYMELSSLRSEDTAVYFCARTGGLRRAYFTYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:79)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIVLTQSPATLSLSPGERATISCRASQSVSSYGQGFMHWYQQKPGQPPRLLIYGASSRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISPLEPEDFAVYYCQQNKEDPWTFGGGTKLEIK(SEQ ID NO:80)的氨基酸序列；
(b)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTEFSIHWVRQAPGQGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVIMTEDTSTDTAYMEMNSLRSEDTAIYYCTTGRFFDWFWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:81)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含EIILTQSPAILSLSPGERATLSCRASQSVISRFLSWYQVKPGLAPRLLIYGASTRATGIPVRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDCAVYYCQQDSNLPITFGQGTRLEIK(SEQ IDNO:82)的氨基酸序列；
(c)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYAFTTYLVEWIRQRPGQGLEWMGVINPGSGSTNYAQKFQGRVTMTVDRSSTTAYMELSRLRSDDTAVYYCARYAYGYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:83)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNVGTAVAWYQQKPGKSPKQLIYSASNRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQQYSTYPFTFGQGTKLEIK(SEQ IDNO:84)的氨基酸序列；
(d)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTNYAVHWVRQAPGQGLEWMGVISPYYGDTTYAQKFQGRVTMTVDKSSSTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRFEGFYYSMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:85)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRPSQSLVHSNGNTYLNWYQQRPGQSPKLLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK(SEQ ID NO:86)的氨基酸序列；
(e)所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMYWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYHCARDPGLRYFDGGMDVWGQGTTVTVSS(SEQ IDNO:87)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIFAASTLHSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSFPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:88)的氨基酸序列；或
(f)所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISGDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARMFRGAFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:89)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISGLQPEDSATYYCLQDYIYYPTFGQGTKVEIK(SEQID NO:90)的氨基酸序列。
11.根据权利要求8所述的结合蛋白，其中：
(a)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列或与SEQ ID NO:156的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列或与SEQID NO:157的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:158的氨基酸序列或与SEQ ID NO:158的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:159的氨基酸序列或与SEQ ID NO:159的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(b)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:160的氨基酸序列或与SEQ ID NO:160的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:161的氨基酸序列或与SEQID NO:161的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列或与SEQ ID NO:162的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列或与SEQ ID NO:163的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(c)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或与SEQ ID NO:164的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或与SEQID NO:165的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列或与SEQ ID NO:166的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列或与SEQ ID NO:167的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(d)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:168的氨基酸序列或与SEQ ID NO:168的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:169的氨基酸序列或与SEQID NO:169的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:170的氨基酸序列或与SEQ ID NO:170的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:171的氨基酸序列或与SEQ ID NO:171的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(e)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列或与SEQ ID NO:172的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列或与SEQID NO:173的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列或与SEQ ID NO:174的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列或与SEQ ID NO:175的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(f)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列或与SEQ ID NO:176的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列或与SEQID NO:177的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:178的氨基酸序列或与SEQ ID NO:178的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:179的氨基酸序列或与SEQ ID NO:179的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(g)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:181的氨基酸序列或与SEQ ID NO:181的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列或与SEQID NO:182的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列或与SEQ ID NO:183的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列或与SEQ ID NO:184的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；或
(h)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列或与SEQ ID NO:185的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列或与SEQID NO:186的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列或与SEQ ID NO:187的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:188的氨基酸序列或与SEQ ID NO:188的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
12.根据权利要求1-7中任一项所述的结合蛋白，其中所述第三抗原结合位点结合人HER2多肽。
13.根据权利要求12所述的结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)或GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)、IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)或IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)、SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)或SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)或QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(b)所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(c)所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(d)所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(e)所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTQGYT(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGSGFYAMDY(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(f)所述VH3结构域包含：含有GFNIRDTY(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNAYT(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGEGFYAMDY(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVNTA(SEQ ID NO:
9)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列；或
(g)所述VH3结构域包含：含有GFNIKDTY(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPTNGYT(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有SRWGGDGFYAMDY(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QDVQTA(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQHYTTP(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
14.根据权利要求13所述的结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:72)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:73)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:74)、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:75)或EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:76)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列；
(b)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:72)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；
(c)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:73)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；
(d)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:75)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；
(e)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTQGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGSGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:74)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；
(f)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIRDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNAYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGEGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:76)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；或
(g)所述VH3结构域包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:72)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVQTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列。
15.根据权利要求12所述的结合蛋白，其中：
(a)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:100的氨基酸序列或与SEQ ID NO:100的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:101的氨基酸序列或与SEQID NO:101的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列或与SEQ ID NO:102的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列或与SEQ ID NO:103的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(b)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列或与SEQ ID NO:104的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列或与SEQID NO:105的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列或与SEQ ID NO:106的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列或与SEQ ID NO:107的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(c)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列或与SEQ ID NO:112的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列或与SEQID NO:113的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或与SEQ ID NO:114的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列或与SEQ ID NO:115的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(d)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列或与SEQ ID NO:116的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列或与SEQID NO:117的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:118的氨基酸序列或与SEQ ID NO:118的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:119的氨基酸序列或与SEQ ID NO:119的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(e)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:120的氨基酸序列或与SEQ ID NO:120的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:121的氨基酸序列或与SEQID NO:121的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列或与SEQ ID NO:122的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列或与SEQ ID NO:123的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(f)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列或与SEQ ID NO:124的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列或与SEQID NO:125的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:126的氨基酸序列或与SEQ ID NO:126的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列或与SEQ ID NO:127的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(g)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:128的氨基酸序列或与SEQ ID NO:128的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:129的氨基酸序列或与SEQID NO:129的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:130的氨基酸序列或与SEQ ID NO:130的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:131的氨基酸序列或与SEQ ID NO:131的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(h)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列或与SEQ ID NO:132的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列或与SEQID NO:133的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列或与SEQ ID NO:134的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列或与SEQ ID NO:135的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(i)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列或与SEQ ID NO:136的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列或与SEQID NO:137的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列或与SEQ ID NO:138的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:139的氨基酸序列或与SEQ ID NO:139的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(j)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:140的氨基酸序列或与SEQ ID NO:140的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:141的氨基酸序列或与SEQID NO:141的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列或与SEQ ID NO:142的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列或与SEQ ID NO:143的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(k)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列或与SEQ ID NO:144的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列或与SEQID NO:145的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列或与SEQ ID NO:146的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:147的氨基酸序列或与SEQ ID NO:147的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(l)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:148的氨基酸序列或与SEQ ID NO:148的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:149的氨基酸序列或与SEQID NO:149的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:150的氨基酸序列或与SEQ ID NO:150的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:151的氨基酸序列或与SEQ ID NO:151的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(m)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列或与SEQ ID NO:152的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列或与SEQID NO:153的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列或与SEQ ID NO:154的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列或与SEQ ID NO:155的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(n)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列或与SEQ ID NO:286的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列或与SEQID NO:287的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:288的氨基酸序列或与SEQ ID NO:288的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:289的氨基酸序列或与SEQ ID NO:289的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(o)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:290的氨基酸序列或与SEQ ID NO:290的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:291的氨基酸序列或与SEQID NO:291的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:292的氨基酸序列或与SEQ ID NO:292的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列或与SEQ ID NO:293的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(p)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列或与SEQ ID NO:294的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列或与SEQID NO:295的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列或与SEQ ID NO:296的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列或与SEQ ID NO:297的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；或
(q)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:298的氨基酸序列或与SEQ ID NO:298的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:299的氨基酸序列或与SEQID NO:299的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:300的氨基酸序列或与SEQ ID NO:300的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:301的氨基酸序列或与SEQ ID NO:301的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的结合蛋白，其中L1、L2、L3或L4中的至少一个独立地为0个氨基酸的长度。
17.根据权利要求1-15中任一项所述的结合蛋白，其中(a)L1、L2、L3和L4各自独立地为零个氨基酸的长度或包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ ID NO:67)和GGSGSSGSGG(SEQID NO:71)；或者(b)L1、L2、L3和L4各自独立地包含选自以下的序列：GGGGSGGGGS(SEQ IDNO:69)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:70)、S、RT、TKGPS(SEQ ID NO:68)、GQPKAAP(SEQ IDNO:67)和GGSGSSGSGG(SEQ ID NO:71)。
18.根据权利要求1-15中任一项所述的结合蛋白，其中L1包含序列GQPKAAP(SEQ ID NO:67)，L2包含序列TKGPS(SEQ ID NO:68)，L3包含序列S，并且L4包含序列RT。
19.根据权利要求1-15中任一项所述的结合蛋白，其中L1、L2、L3或L4中的至少一个包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。
20.根据权利要求19所述的结合蛋白，其中L1、L2、L3和L4包含序列DKTHT(SEQ ID NO:66)。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置234和235的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是F234A和L235A。
22.根据权利要求1-20中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置233-236的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是E233P、F234V、L235A和在236处的缺失。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG4铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG4的位置228和409的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S228P和R409K。
24.根据权利要求1-20中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG1铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置234、235和329的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是L234A、L235A和P329A。
25.根据权利要求1-20中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二和所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域是人IgG1铰链-CH2-CH3结构域，并且其中所述铰链-CH2-CH3结构域各自包含根据EU索引在对应于人IgG1的位置298、299和300的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S298N、T299A和Y300S。
26.根据权利要求1-25中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V；并且其中所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W。
27.根据权利要求1-25中任一项所述的结合蛋白，其中所述第二多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置354和366的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是S354C和T366W；并且其中所述第三多肽链的所述铰链-CH2-CH3结构域包含根据EU索引在对应于人IgG1或IgG4的位置349、366、368和407的位置处的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代是Y349C、T366S、L368A和Y407V。
28.一种分离的核酸分子，所述分离的核酸分子包含编码根据权利要求1-27中任一项所述的结合蛋白的核苷酸序列。
29.一种表达载体，所述表达载体包含根据权利要求28所述的核酸分子。
30.一种分离的宿主细胞，所述分离的宿主细胞包含根据权利要求28所述的核酸分子或根据权利要求29所述的表达载体。
31.根据权利要求30所述的分离的宿主细胞，其中所述宿主细胞是哺乳动物细胞或昆虫细胞。
32.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-27中任一项所述的结合蛋白和药学上可接受的载体。
33.一种预防和/或治疗患者中的癌症的方法，所述方法包括向所述患者给予治疗有效量的至少一种根据权利要求1-27中任一项所述的结合蛋白或根据权利要求32所述的药物组合物。
34.根据权利要求33所述的方法，其中所述至少一种结合蛋白与化学治疗剂共给予。
35.根据权利要求33或权利要求34所述的方法，其中所述患者是人。
36.根据权利要求33-35中任一项所述的方法，其中所述第三抗原结合位点结合人CD38多肽，并且其中来自所述患者的癌细胞表达CD38。
37.根据权利要求36所述的方法，其中所述癌症是多发性骨髓瘤。
38.根据权利要求36所述的方法，其中所述癌症是急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或B细胞淋巴瘤。
39.根据权利要求36-38中任一项所述的方法，其中，在给予所述结合蛋白之前，所述患者已经在没有清除期的情况下用达雷木单抗进行治疗。
40.根据权利要求33-35中任一项所述的方法，其中所述第三抗原结合位点结合人HER2多肽，并且其中来自所述患者的癌细胞表达HER2。
41.根据权利要求40所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌或非小细胞肺癌(NSCLC)。
42.根据权利要求7-27中任一项所述的结合蛋白或根据权利要求32所述的药物组合物，用于在预防和/或治疗患者的癌症中使用。
43.根据权利要求42所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述至少一种结合蛋白要与化学治疗剂共给予。
44.根据权利要求42或权利要求43所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述患者是人。
45.根据权利要求42-44中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述第三抗原结合位点结合人CD38多肽，并且其中来自所述患者的癌细胞表达CD38。
46.根据权利要求45所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述癌症是多发性骨髓瘤。
47.根据权利要求45所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述癌症是急性髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或B细胞淋巴瘤。
48.根据权利要求45-47中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中，在给予所述结合蛋白之前，所述患者已经在没有清除期的情况下用达雷木单抗进行治疗。
49.根据权利要求42-44中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述第三抗原结合位点结合人HER2多肽，并且其中来自所述患者的癌细胞表达HER2。
50.根据权利要求49所述的用于所述用途的结合蛋白或用于所述用途的组合物，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌或非小细胞肺癌(NSCLC)。
51.一种用于扩增T细胞的方法，所述方法包括使T细胞与结合蛋白接触，所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
52.根据权利要求51所述的方法，其中所述T细胞在其细胞表面上表达嵌合抗原受体(CAR)或包含编码CAR的多核苷酸。
53.根据权利要求51或权利要求52所述的方法，其中所述T细胞是记忆T细胞或效应T细胞。
54.一种用于扩增病毒特异性记忆T细胞的方法，所述方法包括使病毒特异性记忆T细胞与结合蛋白接触，所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
55.根据权利要求54所述的方法，其中使所述病毒特异性记忆T细胞在体外或离体与所述结合蛋白接触。
56.根据权利要求54或权利要求55所述的方法，其中使所述病毒特异性记忆T细胞与所述结合蛋白接触引起病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
57.一种用于治疗慢性病毒感染的方法，所述方法包括向有需要的患者给予有效量的结合蛋白，所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
58.根据权利要求57所述的方法，其中所述患者是人。
59.根据权利要求57或权利要求58所述的方法，其中将所述结合蛋白以包含所述结合蛋白和药学上可接受的载体的药物配制品给予至所述患者。
60.根据权利要求57-59中任一项所述的方法，其中给予所述结合蛋白导致所述患者中病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
61.根据权利要求53-56和60中任一项所述的方法，其中所述记忆T细胞是CD8+或CD4+记忆T细胞。
62.根据权利要求53-56、60和61中任一项所述的方法，其中所述记忆T细胞是中枢记忆T细胞(TCM)或效应记忆T细胞(TEM)。
63.根据权利要求54-62中任一项所述的方法，其中所述病毒是人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒(HBV)、人乳头瘤病毒(HPV)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)、人泡沫病毒(HFV)、单纯疱疹病毒1(HSV-1)或单纯疱疹病毒2(HSV-2)。
64.根据权利要求51-63中任一项所述的方法，其中所述CD28多肽是人CD28多肽，其中所述CD3多肽是人CD3多肽，并且其中所述CD38多肽是人CD38多肽。
65.一种用于在扩增T细胞中使用的结合蛋白，其中要使所述结合蛋白与T细胞接触，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
66.根据权利要求65所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述T细胞在其细胞表面上表达嵌合抗原受体(CAR)或包含编码CAR的多核苷酸。
67.根据权利要求65或权利要求66所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述T细胞是记忆T细胞或效应T细胞。
68.一种用于在扩增病毒特异性记忆T细胞中使用的结合蛋白，其中要使所述结合蛋白与病毒特异性记忆T细胞接触，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
69.根据权利要求68所述的用于所述用途的结合蛋白，其中要使所述病毒特异性记忆T细胞在体外或离体与所述结合蛋白接触。
70.根据权利要求68或权利要求69所述的用于所述用途的结合蛋白，其中使所述病毒特异性记忆T细胞与所述三特异性结合蛋白接触引起病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
71.一种用于在治疗慢性病毒感染中使用的结合蛋白，其中要将所述结合蛋白给予至有需要的患者，其中所述结合蛋白包含形成三个抗原结合位点的四条多肽链，其中第一多肽链包含由下式表示的结构：
VL2-L1-VL1-L2-CL [I]
并且第二多肽链包含由下式表示的结构：
VH1-L3-VH2-L4-CH1-铰链-CH2-CH3 [II]
并且第三多肽链包含由下式表示的结构：
VH3-CH1-铰链-CH2-CH3 [III]
并且第四多肽链包含由下式表示的结构：
VL3-CL [IV]
其中：
VL1是第一免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL2是第二免疫球蛋白轻链可变结构域；
VL3是第三免疫球蛋白轻链可变结构域；
VH1是第一免疫球蛋白重链可变结构域；
VH2是第二免疫球蛋白重链可变结构域；
VH3是第三免疫球蛋白重链可变结构域；
CL是免疫球蛋白轻链恒定结构域；
CH1是免疫球蛋白CH1重链恒定结构域；
CH2是免疫球蛋白CH2重链恒定结构域；
CH3是免疫球蛋白CH3重链恒定结构域；
铰链是连接所述CH1与CH2结构域的免疫球蛋白铰链区；并且
L1、L2、L3和L4是氨基酸接头；
其中所述式I的多肽和所述式II的多肽形成交叉轻链-重链对；并且
其中VH1和VL1形成结合CD28多肽的第一抗原结合位点；
其中VH2和VL2形成结合CD3多肽的第二抗原结合位点，其中所述VH2结构域包含：含有GFTFTKAW(SEQ ID NO:55)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IKDKSNSYAT(SEQ ID NO:56)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有RGVYYALSPFDY(SEQ ID NO:57)的氨基酸序列的CDR-H3序列，并且所述VL2结构域包含：含有其中X1为E或Q，X2为A或L且X3为Q、R或F的QSLVHX1NX2X3TY(SEQ ID NO:180)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:64)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有GQGTQYPFT(SEQ ID NO:65)的氨基酸序列的CDR-L3序列；并且
其中VH3和VL3形成结合CD38多肽的第三抗原结合位点。
72.根据权利要求71所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述患者是人。
73.根据权利要求71或权利要求72所述的用于所述用途的结合蛋白，其中要将所述结合蛋白以包含所述结合蛋白和药学上可接受的载体的药物配制品给予至所述患者。
74.根据权利要求71-73中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白，其中给予所述结合蛋白导致所述患者中病毒特异性记忆T细胞的激活和/或增殖。
75.根据权利要求67-70和74中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述记忆T细胞是CD8+或CD4+记忆T细胞。
76.根据权利要求67-70、74和75中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述记忆T细胞是中枢记忆T细胞(TCM)或效应记忆T细胞(TEM)。
77.根据权利要求68-76中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述病毒是人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒(HBV)、人乳头瘤病毒(HPV)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)、人泡沫病毒(HFV)、单纯疱疹病毒1(HSV-1)或单纯疱疹病毒2(HSV-2)。
78.根据权利要求65-77中任一项所述的用于所述用途的结合蛋白，其中所述CD28多肽是人CD28多肽，其中所述CD3多肽是人CD3多肽，并且其中所述CD38多肽是人CD38多肽。
79.根据权利要求51-78中任一项所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中所述VH1结构域包含：含有GYTFTSYY(SEQ ID NO:49)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGNVNT(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TRSHYGLDWNFDV(SEQ ID NO:51)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL1结构域包含：含有QNIYVW(SEQ ID NO:52)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KAS(SEQ ID NO:53)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQGQTYPY(SEQID NO:54)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
80.根据权利要求79所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中所述VH1结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYYIHWVRQAPGQGLEWIGSIYPGNVNTNYAQKFQGRATLTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTRSHYGLDWNFDVWGKGTTVTVSS(SEQ ID NO:91)的氨基酸序列，并且/或者所述VL1结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQNIYVWLNWYQQKPGKAPKLLIYKASNLHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDIATYYCQQGQTYPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:92)的氨基酸序列。
81.根据权利要求51-80中任一项所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中所述VL2结构域的CDR-L1序列包含选自以下的氨基酸序列：QSLVHQNAQTY(SEQ ID NO:59)、QSLVHENLQTY(SEQ ID NO:60)、QSLVHENLFTY(SEQ ID NO:61)和QSLVHENLRTY(SEQ ID NO:62)。
82.根据权利要求81所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中所述VH2结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)或QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFTKAWMHWVRQAPGKQLEWVAQIKDKSNSYATYYASSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCRGVYYALSPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:302)的氨基酸序列，并且/或者所述VL2结构域包含选自以下的氨基酸序列：DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHQNAQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:95)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLQTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:96)、DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLFTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ ID NO:97)和DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHENLRTYLSWYLQKPGQSPQSLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQGTQYPFTFGSGTKVEIK(SEQ IDNO:98)。
83.根据权利要求51-82中任一项所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含：含有GYTFTSYA(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IYPGQGGT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARTGGLRRAYFTY(SEQ IDNO:15)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVSSYGQGF(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQNKEDPWT(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(b)所述VH3结构域包含：含有GYTLTEFS(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有FDPEDGET(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有TTGRFFDWF(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSVISRF(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有GAS(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQDSNLPIT(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(c)所述VH3结构域包含：含有GYAFTTYL(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有INPGSGST(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARYAYGY(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QNVGTA(SEQ ID NO:28)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有SAS(SEQ ID NO:29)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQYSTYPFT(SEQ ID NO:30)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(d)所述VH3结构域包含：含有GYSFTNYA(SEQ ID NO:31)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有ISPYYGDT(SEQ ID NO:32)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARRFEGFYYSMDY(SEQ IDNO:33)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QSLVHSNGNTY(SEQ IDNO:34)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有KVS(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有SQSTHVPLT(SEQ ID NO:36)的氨基酸序列的CDR-L3序列；
(e)所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARDPGLRYFDGGMDV(SEQ IDNO:39)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGISSY(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有QQLNSFPYT(SEQ ID NO:42)的氨基酸序列的CDR-L3序列；或
(f)所述VH3结构域包含：含有GFTFSSYG(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列的CDR-H1序列、含有IWYDGSNK(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列的CDR-H2序列和含有ARMFRGAFDY(SEQ ID NO:45)的氨基酸序列的CDR-H3序列；并且所述VL3结构域包含：含有QGIRND(SEQ ID NO:46)的氨基酸序列的CDR-L1序列、含有AAS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列的CDR-L2序列和含有LQDYIYYPT(SEQ ID NO:48)的氨基酸序列的CDR-L3序列。
84.根据权利要求83所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中：
(a)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVVKPGASVKVSCKASGYTFTSYAMHWVKEAPGQRLEWIGYIYPGQGGTNYNQKFQGRATLTADTSASTAYMELSSLRSEDTAVYFCARTGGLRRAYFTYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:79)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIVLTQSPATLSLSPGERATISCRASQSVSSYGQGFMHWYQQKPGQPPRLLIYGASSRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISPLEPEDFAVYYCQQNKEDPWTFGGGTKLEIK(SEQ ID NO:80)的氨基酸序列；
(b)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTEFSIHWVRQAPGQGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVIMTEDTSTDTAYMEMNSLRSEDTAIYYCTTGRFFDWFWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:81)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含EIILTQSPAILSLSPGERATLSCRASQSVISRFLSWYQVKPGLAPRLLIYGASTRATGIPVRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDCAVYYCQQDSNLPITFGQGTRLEIK(SEQ IDNO:82)的氨基酸序列；
(c)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYAFTTYLVEWIRQRPGQGLEWMGVINPGSGSTNYAQKFQGRVTMTVDRSSTTAYMELSRLRSDDTAVYYCARYAYGYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:83)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQNVGTAVAWYQQKPGKSPKQLIYSASNRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQQYSTYPFTFGQGTKLEIK(SEQ IDNO:84)的氨基酸序列；
(d)所述VH3结构域包含QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTNYAVHWVRQAPGQGLEWMGVISPYYGDTTYAQKFQGRVTMTVDKSSSTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRFEGFYYSMDYWGQGTLVTVSS(SEQ IDNO:85)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRPSQSLVHSNGNTYLNWYQQRPGQSPKLLIYKVSKRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK(SEQ ID NO:86)的氨基酸序列；
(e)所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMYWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYHCARDPGLRYFDGGMDVWGQGTTVTVSS(SEQ IDNO:87)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIFAASTLHSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSFPYTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:88)的氨基酸序列；或
(f)所述VH3结构域包含QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISGDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARMFRGAFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:89)的氨基酸序列，并且/或者所述VL3结构域包含AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISGLQPEDSATYYCLQDYIYYPTFGQGTKVEIK(SEQID NO:90)的氨基酸序列。
85.根据权利要求51-82中任一项所述的用于所述用途的方法或结合蛋白，其中：
(a)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列或与SEQ ID NO:156的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列或与SEQID NO:157的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:158的氨基酸序列或与SEQ ID NO:158的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:159的氨基酸序列或与SEQ ID NO:159的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(b)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:160的氨基酸序列或与SEQ ID NO:160的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:161的氨基酸序列或与SEQID NO:161的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列或与SEQ ID NO:162的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列或与SEQ ID NO:163的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(c)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或与SEQ ID NO:164的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或与SEQID NO:165的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列或与SEQ ID NO:166的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列或与SEQ ID NO:167的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(d)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:168的氨基酸序列或与SEQ ID NO:168的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:169的氨基酸序列或与SEQID NO:169的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:170的氨基酸序列或与SEQ ID NO:170的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:171的氨基酸序列或与SEQ ID NO:171的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(e)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列或与SEQ ID NO:172的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列或与SEQID NO:173的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列或与SEQ ID NO:174的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列或与SEQ ID NO:175的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(f)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列或与SEQ ID NO:176的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列或与SEQID NO:177的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:178的氨基酸序列或与SEQ ID NO:178的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:179的氨基酸序列或与SEQ ID NO:179的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；
(g)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:181的氨基酸序列或与SEQ ID NO:181的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列或与SEQID NO:182的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列或与SEQ ID NO:183的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列或与SEQ ID NO:184的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；或
(h)所述第一多肽链包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列或与SEQ ID NO:185的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第二多肽链包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列或与SEQID NO:186的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；所述第三多肽链包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列或与SEQ ID NO:187的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列；并且所述第四多肽链包含SEQ ID NO:188的氨基酸序列或与SEQ ID NO:188的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
86.一种载体系统，所述载体系统包含编码根据权利要求1-27中任一项所述的结合蛋白的第一、第二、第三和第四多肽链的一种或多种载体。
87.根据权利要求86所述的载体系统，其中所述载体系统包括编码所述结合蛋白的所述第一多肽链的第一载体、编码所述结合蛋白的所述第二多肽链的第二载体、编码所述结合蛋白的所述第三多肽链的第三载体和编码所述结合蛋白的所述第四多肽链的第四载体。
88.一种多核苷酸的试剂盒，所述多核苷酸的试剂盒包括：
(a)含有SEQ ID NO:189的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:190的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:191的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:192的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(b)含有SEQ ID NO:193的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:194的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:195的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:196的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(c)含有SEQ ID NO:197的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:198的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:199的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:200的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(d)含有SEQ ID NO:201的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:202的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:203的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:204的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(e)含有SEQ ID NO:205的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:206的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:207的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:208的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(f)含有SEQ ID NO:209的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:210的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:211的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:212的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(g)含有SEQ ID NO:213的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:214的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:215的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:216的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(h)含有SEQ ID NO:217的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:218的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:219的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:220的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(i)含有SEQ ID NO:221的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:222的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:223的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:224的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(j)含有SEQ ID NO:225的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:226的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:227的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:228的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(k)含有SEQ ID NO:229的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:230的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:231的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:232的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(l)含有SEQ ID NO:233的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:234的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:235的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:236的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(m)含有SEQ ID NO:237的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:238的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:239的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:240的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(n)含有SEQ ID NO:241的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:242的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:243的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:244的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(o)含有SEQ ID NO:245的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:246的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:247的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:248的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(p)含有SEQ ID NO:249的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:250的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:251的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:252的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(q)含有SEQ ID NO:253的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:254的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:255的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:256的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(r)含有SEQ ID NO:257的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:258的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:259的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:260的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(s)含有SEQ ID NO:261的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:262的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:263的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:264的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(t)含有SEQ ID NO:265的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:266的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:267的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:268的多核苷酸序列的第四多核苷酸；
(u)含有SEQ ID NO:269的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:270的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:271的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:272的多核苷酸序列的第四多核苷酸；或
(v)含有SEQ ID NO:273的多核苷酸序列的第一多核苷酸、含有SEQ ID NO:274的多核苷酸序列的第二多核苷酸、含有SEQ ID NO:275的多核苷酸序列的第三多核苷酸和含有SEQID NO:276的多核苷酸序列的第四多核苷酸。
89.根据权利要求88所述的试剂盒，其中所述第一、第二、第三和第四多核苷酸存在于一种或多种表达载体上。
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US9200061B2 (en) * 2004-02-06 2015-12-01 Morpho Sys AG Generation and profiling of fully human HuCAL gold®-derived therapeutic antibodies specific for human CD3i
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
TWI803876B (zh) * 2011-03-28 2023-06-01 法商賽諾菲公司 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白
CA2996848C (en) * 2014-09-04 2021-01-05 Stemcell Technologies Inc. Soluble antibody complexes for t cell or nk cell activation and expansion
TW202130662A (zh) * 2015-01-23 2021-08-16 法商賽諾菲公司 特異性結合ｃｄ３及／或ｃｄ１２３之抗—ｃｄ３抗體，抗—ｃｄ１２３抗體及雙特異性抗體
AU2016280159A1 (en) * 2015-06-17 2017-12-07 Genentech, Inc. Anti-HER2 antibodies and methods of use
CN116675776A (zh) 2015-10-25 2023-09-01 赛诺菲 用于预防或治疗hiv感染的三特异性和/或三价结合蛋白
CR20180539A (es) 2016-04-13 2019-02-15 Sanofi Sa Proteínas de unión triespecíficas y/o trivalentes
US20230242876A1 (en) * 2016-12-30 2023-08-03 Shanghai Sinobio Biotech Co., Ltd. Bifunctional molecule and use thereof
JP7036909B2 (ja) * 2017-10-10 2022-03-15 サノフイ 抗ｃｄ３８抗体および使用方法
CN113166254A (zh) * 2018-10-09 2021-07-23 赛诺菲 三特异性抗cd38、抗cd28和抗cd3结合蛋白和用于治疗病毒感染的使用方法

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