CN113834929A - 一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒,可用于快速检测人体是否已经因食品、花粉、尘螨、霉菌等产生了病变或者免疫耐受反应,检测方法简便、快速,检测结果准确、可靠,避免因过敏原对人体造成的各种变态反应性疾病,适用不同检测要求,成本低廉,结构简单,易于组装,适于大规模生产;可适用于全血检测,特别适用于婴幼儿及家庭自检;提供了一种可限流的免疫渗滤装置,目的是让液体仅从目标位置渗过,且减慢流速,提高检测灵敏度;提供了一种样本稀释液的配方,有利于全血样本的处理,使试验顺利进行;提供了一种全血滤膜,用于检测样本是全血时,利于过滤样本中的大颗粒物质,便于样本顺利通过硝酸纤维素膜。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于过敏原检测的检测装置。
具体地说,是涉及一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒。
背景技术
近年来,过敏患者日益增多,过敏症发病率也呈逐年上升趋势,据报道占世界人口总数的22%的人都有不同程度的过敏症状。在过敏反应中,有90%以上是由八类食物引起的,分别是蛋类、花生、乳类、黄豆、小麦、树果仁(坚果类)、贝类(包括甲壳类和软体动物)、鱼等。食物过敏是指当人体摄入某种特定的食物后在体内发生的一种特异性免疫反应。食物过敏划分为IgE介导的超敏反应和细胞介导的超敏反应(非IgE介导的超敏反应),大多数的食物过敏都是由IgE介导的。IgE介导的过敏反应是过敏原刺激抗体的淋巴结、肝、脾等器官的单核吞噬系统,触发浆细胞反应产生特异性IgE(sIgE)抗体。其次是吸入性过敏原,如花粉、柳絮、尘螨、动物皮屑等;还有接触式过敏原,如霉菌(点青霉、交链孢霉、烟曲霉、分枝孢霉、白色念珠菌)、紫外线、辐射等。
IgE介导的过敏反应的过敏原检测在临床上可以通过皮肤试验及各种体外检测方法,如放射性过敏原吸附检测(RAST)、免疫印迹(IS)及酶免疫分析(EIA)等,结合病史、病症的问诊来确定致敏的过敏原。体外检测是测定血液样本中的IgE,特别是过敏原特异性IgE(sIgE)抗体浓度。但是,上述检测方式均存在缺陷:放射性过敏原吸附检测具有核素污染,需配备仪器及专业人员操作;酶免疫分析中有多种检测结合酶的方法,常用的ELISA法操作时间较长,且每孔只能检测一种过敏原,效率低成本较高;免疫印迹法灵敏度较高,可实现多通量检测,但其操作繁琐,时间也较长;化学发光法灵敏度高,可实现全自动操作,但需配套仪器,无法实现床旁检测,即随检随测。
发明内容
本发明的目的在于克服上述传统技术的不足之处,提供一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒。
本发明的目的是通过以下技术措施来达到的:一种用于过敏原检测的检测膜条,包括硝酸纤维素膜,其特征在于:所述硝酸纤维素膜上包被有若干组质控线和检测线;所述质控线包被有羊抗鼠抗体,羊抗鼠抗体的包被浓度为1~3 mg/mL,过敏原蛋白抗原包被形成所述检测线,所述过敏原蛋白抗原的包被浓度为0.1~3 mg/mL。
本发明还公开了一种用于过敏原检测的检测卡,其特征在于:检测卡包括密封扣合的上盖和下盖,所述上盖和所述下盖之间设有容纳腔,所述容纳腔内依次放置上面所述的检测膜条、免疫渗滤限流装置,所述检测膜条靠近所述上盖,所述免疫渗滤限流装置靠近所述下盖,且所述上盖上设有加样孔;
所述免疫渗滤限流装置包括导流层、限流层和吸水层;所述限流层上设有若干个限流孔,每个所述限流孔分别与每组所述质控线和所述检测线的位置相对应,所述限流层为不渗水材料层,且所述限流层的双面均涂布有黏性胶;所述导流层为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸或擦镜纸;所述吸水层为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸或擦镜纸。
本发明还公开了一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:包括上面所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、荧光标记物、洗涤液。
作为一种改进,一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:包括上面所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、酶标记物、TMB显色底物液、终止液、洗涤液。
作为进一步的改进,还包括样本稀释液,以及安装在所述检测卡上的全血过滤构件,所述全血过滤构件包括构件本体,所述构件本体上设有卡座,所述卡座可与所述上盖固定连接,所述卡座上设有通孔,所述通孔位于所述加样孔的上方,所述通孔上设有全血滤膜。
作为进一步的改进,所述抗人IgE抗体标记物为经抗体标记物稀释液稀释的生物素标记鼠抗人IgE抗体标记物,所述抗体标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种;所述抗体标记物稀释液包括保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记物活性的糖类,所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高标记物活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护抗体标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为PC300;
所述抗体标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
作为进一步的改进,所述荧光标记物为经荧光标记物稀释液稀释的链酶亲和素荧光标记物,所述荧光标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种,所述荧光标记物稀释液包括有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护所述荧光标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述荧光标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
作为进一步的改进,所述洗涤液为PBS、Tris、CBS中的一种;包括便于液体渗滤、改善膜面底色的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通、吐温中的一种;能有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类,所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护洗涤液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述洗涤液浓度为10-100mM;所述表面活性剂的浓度为0.1%-5%,所述蛋白的浓度为0.05%-3%;所述糖类的浓度为1%-10%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
作为进一步的改进,所述样本稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种;所述样本稀释液包括具有裂解作用的裂解成分,所述裂解成分为SDS、NaNO2中的一种;便于样本渗滤的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通、吐温中的一种;保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;保护样本稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述样本稀释液浓度为10-100mM,所述裂解成分的浓度为1-4M;所述表面活性剂的浓度为0.01%-5%;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
作为进一步的改进,所述酶标记物为经酶标记物稀释液稀释的链酶亲和素-酶标记物,所述酶标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种,所述酶标记物稀释液包括有效保护酶标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护所述酶标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为PC300;
所述酶标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
由于采用了上述技术方案,与现有技术相比,本发明的优点是:
第一:本发明可用于快速检测人体是否已经因食品、花粉、尘螨、霉菌等产生了病变或者免疫耐受反应,检测方法简便、快速,检测结果准确、可靠,避免因过敏原对人体造成的各种变态反应性疾病,适用不同检测要求,成本低廉,结构简单,易于组装,适于大规模生产;
第二:本发明可适用于全血检测,特别适用于婴幼儿及家庭自检;
第三:本发明提供了一种可限流的免疫渗滤限流装置,目的是让液体仅从目标位置渗过,且减慢流速,提高检测灵敏度;
第四:本发明提供了一种样本稀释液的配方,有利于全血样本的处理,使试验顺利进行;
第五:本发明提供了一种全血滤膜,用于检测样本是全血时,利于过滤样本中的大颗粒物质,便于样本顺利通过硝酸纤维素膜;
第六:本发明中应用生物素-亲和素来标记抗体、荧光,利于反应过程中信号的放大,提高灵敏度,便于定量检测;
第七:本发明中应用生物素-亲和素来标记抗体、酶,利于反应过程中信号的放大,提高灵敏度,便于定性检测。
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步说明。
附图说明
附图1是本发明所述检测卡的结构示意图;
附图2是附图1中A-A向剖视图;
附图3是本发明所述检测卡与所述全血过滤构件的结构示意图;
附图4是附图3中A-A向剖视图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的设备或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
在本发明中,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“设置”、“连接”、“固定”、“旋接”等术语应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或成一体;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系,除非另有明确的限定,对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
实施例一:
一种用于过敏原检测的检测膜条,包括硝酸纤维素膜,所述硝酸纤维素膜上包被有8组质控线和检测线;每条所述质控线包被有羊抗鼠抗体,羊抗鼠抗体的包被浓度为3mg/mL,过敏原蛋白抗原包被形成所述检测线,两种过敏原蛋白抗原包被形成一条检测线,所述过敏原蛋白抗原的包被浓度为3mg/mL;
所述过敏原蛋白抗原包括:奶类过敏蛋白抗原、肉类过敏蛋白抗原、蛋类过敏蛋白抗原、坚果类过敏蛋白抗原、谷物类过敏蛋白抗原、豆类过敏蛋白抗原、水果类过敏蛋白抗原、水产类过敏蛋白抗原、蟑螂类过敏蛋白抗原、霉菌类过敏蛋白抗原、花粉类过敏蛋白抗原、吸入性螨虫类过敏原蛋白抗原、动物类过敏原蛋白抗原。
所述奶类过敏原蛋白抗原包括:牛奶、羊奶;
所述肉类过敏原蛋白抗原包括:猪肉、牛肉、羊肉、驴肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉、火鸡肉;
所述蛋类过敏原蛋白抗原包括:家禽蛋白、家禽蛋黄;
所述坚果类过敏原蛋白抗原包括:杏仁、花生、核桃、榛子、开心果、腰果、巴西坚果、芝麻;
所述谷物类过敏原蛋白抗原包括:玉米、燕麦、小麦、荞麦、大麦、大米、小米;
所述豆类过敏原蛋白抗原包括:扁豆、黄豆、豌豆、蚕豆;
所述水果类过敏原蛋白抗原包括:菠萝、橙子、芒果、苹果、桃子、草莓、胡柚、柠檬;
所述水产类过敏原蛋白抗原包括:带鱼、黄鱼、比目鱼、三文鱼、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鲢鱼、虾、蟹、蚌、扇贝、牡蛎、黄鳝、鳗鱼;
所述蟑螂类过敏原蛋白抗原包括:德国小蠊、美洲大蠊;
所述霉菌类过敏原蛋白抗原包括:点青霉菌、多主枝孢霉菌、烟曲霉菌、交链孢霉、黑根霉菌、酿酒酵母菌、小麦黑粉菌、毛霉菌、黑孢霉菌;
所述花粉类过敏原蛋白抗原包括:桦树、枫树、构树、棕榈、葵树、榛树、柏树、松树、杉木、栗树、栎树、梧桐、杨树、柳树、桑树、榆树、艾蒿、豚草、藜草、车前草、白茅草、牛毛草、狗牙草、梯牧草、芦苇、葎草、苍耳、香蒲、莎车、芨芨草、向日葵;
所述吸入性螨虫类过敏原蛋白抗原包括:粉尘螨、屋尘螨;
所述动物类过敏原蛋白抗原包括:猫毛、狗毛、猫皮屑、狗皮屑。
所述过敏原蛋白抗原除了上述描述的以外也可以为其它的过敏原蛋白抗原。
实施例二:
与实施例一相同,不同之处在于:所述硝酸纤维素膜上包被有12组质控线和检测线;羊抗鼠抗体的包被浓度为1 mg/mL,一种过敏原蛋白抗原包被形成一条检测线,所述过敏原蛋白抗原的包被浓度为0.1mg/mL。
实施例三:
与实施例一相同,不同之处在于:所述硝酸纤维素膜上包被有10组质控线和检测线;羊抗鼠抗体的包被浓度为2 mg/mL,一种过敏原蛋白抗原包被形成两条检测线,所述过敏原蛋白抗原的包被浓度为1.5mg/mL。
当然,除了实施一、实施二和实施三,可以根据需要将所述硝酸纤维素膜上包被有不同组数量的质控线和检测线;选择需要的过敏原蛋白抗原包被形成检测线。
实施例四:
如附图1和附图2所示:一种用于过敏原检测的检测卡,检测卡包括密封扣合的上盖1和下盖2,所述上盖1和所述下盖2之间设有容纳腔3,所述容纳腔3内依次放置上面所述的检测膜条4、免疫渗滤限流装置5,所述检测膜条4靠近所述上盖1,所述免疫渗滤限流装置5靠近所述下盖2,且所述上盖1上设有加样孔11,所述加样孔11为贯通孔可以让待检测样本滴入到所述检测膜条4上,所述加样孔11位于所述上盖1的正中间位置;使用时水平放置且所述上盖1朝上。
所述免疫渗滤限流装置5包括导流层51、限流层52和吸水层53;吸水层53的长度大于限流层52的长度,限流层52的长度大于导流层51的长度;所述限流层52上设有12个限流孔521,每个所述限流孔521分别与每组所述质控线和所述检测线的位置相对应;当然所述限流孔521也可以其它数量,例如有8组质控线和所述检测线,则有相应的8个限流孔521,有10组质控线和所述检测线,则有相应的10个限流孔521;所述限流层52为不渗水材料层,且所述限流层52的双面均涂布有黏性胶,可以用方便贴制成;所述导流层51为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸,当然也可以为擦镜纸;所述吸水层53为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸,当然也可以为擦镜纸或绒毛浆或高分子树脂。
所述免疫渗滤限流装置5用于限制流速,目的是让液体仅从目标位置渗过,且减慢流速,提高检测灵敏度。
实施例五:
一种用于过敏原检测的检测试剂盒,包括上面所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、荧光标记物、洗涤液。
所述抗人IgE抗体标记物为经抗体标记物稀释液稀释的生物素标记鼠抗人IgE抗体标记物,所述抗体标记物稀释液为PBS,所述抗体标记物稀释液包括保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;高浓度的增加标记物活性的糖类,所述糖类为海藻糖;便于提高标记物活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG;保护抗体标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3。
所述抗体标记物稀释液浓度为100mM;所述蛋白的浓度为5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述荧光标记物为经荧光标记物稀释液稀释的链酶亲和素荧光标记物,所述荧光标记物稀释液为PBS,所述荧光标记物稀释液包括有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白,高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖,便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG,保护所述荧光标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3,
所述荧光标记物稀释液浓度为100mM;所述蛋白的浓度为5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述洗涤液为PBS,包括便于液体渗滤、改善膜面底色的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通;能有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;高浓度的增加标记抗体活性的糖类,所述糖类为海藻糖;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG;保护洗涤液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3;
所述洗涤液浓度为100mM;所述表面活性剂的浓度为5%,所述蛋白的浓度为3%;所述糖类的浓度为10%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
除了本实施例中的上述描述外,所述抗体标记物稀释液当然也可以为Tris或者CBS替代PBS,所述荧光标记物稀释液可以为Tris或者CBS,所述洗涤液可以为Tris或者CBS,与PBS的效果相同;所述蛋白也可以为BSA;所述糖类也可以为蔗糖或者葡聚糖;所述大分子聚合物也可以为PVP或者PVA;所述防腐剂可以为PC300;所述表面活性剂为当然也可以为吐温,与实施例中的成分的效果等同。
实施例六:
与实施例五相同,不同之处在于:
所述抗体标记物稀释液浓度为10mM;所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
所述荧光标记物稀释液浓度为10mM;所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
所述洗涤液浓度为10mM;所述表面活性剂的浓度为0.1%,所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例七:
与实施例五相同,不同之处在于:
所述抗体标记物稀释液浓度为50mM;所述蛋白的浓度为2.5%;所述糖类的浓度为3%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
所述荧光标记物稀释液浓度为50mM;所述蛋白的浓度为2.5%;所述糖类的浓度为3%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
所述洗涤液浓度为50mM;所述表面活性剂的浓度为2.5%,所述蛋白的浓度为1.5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例五、实施例六或者实施例七的检测方法为:
待检测样本为血清或血浆,将待测样本加入到装有抗人IgE抗体标记物的容器中,拧紧盖子上下颠倒混匀3-4次后,形成一抗-二抗复合物,然后将液体全部加入到加样孔11中,在渗滤的作用下液体透过硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上的抗原与液体中的一抗-二抗复合物结合形成抗原-一抗-二抗复合物,再加入荧光标记物,待液体完全渗入后,再滴加洗涤液于加样孔11中,待液体完全渗入后测试结果。复合物的荧光抗体信号与IgE抗体的浓度成正比,经荧光分析仪分析后可计算出样本中IgE抗体的浓度。
实施例八:
如附图3和附图4所示:
与实施例五相同,不同之处在于:
还包括样本稀释液,以及安装在所述检测卡上的全血过滤构件6。
所述样本稀释液为PBS;所述样本稀释液包括具有裂解作用的裂解成分,所述裂解成分为SDS;便于样本渗滤的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通;保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;保护样本稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3;
所述样本稀释液浓度为100mM,所述裂解成分的浓度为4M;所述表面活性剂的浓度为5%;所述蛋白的浓度为5%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述全血过滤构件6包括构件本体61,所述构件本体61的一侧设有便于取放的手持部62,所述构件本体61上设有卡座63,所述卡座63的形状与所述上盖1的形状相配合,所述卡座63卡在加样孔11内与所述上盖1固定连接,所述卡座63上设有通孔64,所述通孔64位于所述加样孔11的上方,所述卡座63的底部涂有双面胶,所述卡座63的底部粘贴有全血滤膜65,将所述通孔64上设有全血滤膜65。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
除了本实施例中的上述描述外,所述样本稀释液也可以为Tris或CBS;所述裂解成分为也可以为NaNO2,所述表面活性剂也可以为吐温;所述蛋白也可以为BSA;所述防腐剂也可以为PC300,与实施例中的成分的效果等同。
实施例九:
与实施例八相同,不同之处在于:
所述样本稀释液浓度为10mM,所述裂解成分的浓度为1M;所述表面活性剂的浓度为0.01%;所述蛋白的浓度为0.05%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例十:
与实施例八相同,不同之处在于:
所述样本稀释液浓度为50mM,所述裂解成分的浓度为3M;所述表面活性剂的浓度为2.5%;所述蛋白的浓度为2.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例八、实施例九或实施例十的检测方法为:
待检测样本为全血,用采血针扎破手指取血适量,滴入到装有样本稀释液的容器中,拧紧盖子颠倒3-4次后备用。将全血过滤构件6紧扣于加样孔11的上方,滴加洗涤液于全血过滤构件6的全血滤膜65上,待液体完全渗入后,将稀释好的全血样本倒到全血滤膜65上,在渗滤的作用下液体透过全血滤膜65到达硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上的抗原与待测样本中的抗体结合形成抗原-抗体复合物,待液体完全渗入后,再加入抗人IgE抗体标记物,形成抗原-抗体-二抗复合物,待液体完全渗入后将荧光标记物加入到加样孔11中,待液体完全渗入后,再滴加洗涤液于加样孔11中,待液体完全渗入后测试结果。复合物的荧光抗体信号与IgE抗体的浓度成正比,经荧光分析仪分析后可计算出样本中IgE抗体的浓度。
实施例十一:
一种用于过敏原检测的检测试剂盒,包括上面所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、酶标记物、TMB显色底物液、终止液、洗涤液。
所述抗人IgE抗体标记物为经抗体标记物稀释液稀释的生物素标记鼠抗人IgE抗体标记物,所述抗体标记物稀释液为PBS;所述抗体标记物稀释液包括保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;高浓度的增加标记物活性的糖类,所述糖类为海藻糖;便于提高标记物活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG;保护抗体标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3。
所述抗体标记物稀释液浓度为100mM;所述蛋白的浓度为5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述酶标记物为经酶标记物稀释液稀释的链酶亲和素-酶标记物,所述酶标记物稀释液为PBS,所述酶标记物稀释液包括有效保护酶标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG;保护所述酶标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为PC300;
所述酶标记物稀释液浓度为100mM;所述蛋白的浓度为5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述TMB显色底物液的是采用商品化的TMB显色剂。
所述终止液的可以用1M的硫酸。
所述洗涤液为PBS;包括便于液体渗滤、改善膜面底色的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通;能有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;高浓度的增加标记抗体活性的糖类,所述糖类为海藻糖;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG;保护洗涤液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3;
所述洗涤液浓度为100mM;所述表面活性剂的浓度为5%,所述蛋白的浓度为3%;所述糖类的浓度为10%;所述大分子聚合物的浓度为3%;所述防腐剂的浓度为2%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
除了本实施例中的上述描述外,所述抗体标记物稀释液也可以为Tris或者CBS;所述酶标记物稀释液也可以为Tris或CBS,所述洗涤液也可以为Tris或者CBS;所述蛋白也可以为BSA;所述糖类也可以为蔗糖或者葡聚糖;所述大分子聚合物也可以为PVP或者PVA;所述表面活性剂也可以为吐温;所述防腐剂也可以为PC300,与实施例中的成分的效果等同。
实施例十二:
与实施例十一相同,不同之处在于:
所述抗体标记物稀释液浓度为10mM;所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
所述酶标记物稀释液浓度为10mM;所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
所述洗涤液浓度为10mM;所述表面活性剂的浓度为0.1%,所述蛋白的浓度为0.05%;所述糖类的浓度为1%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例十三:
与实施例十一相同,不同之处在于:
所述抗体标记物稀释液浓度为50mM;所述蛋白的浓度为2.5%;所述糖类的浓度为3%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
所述酶标记物稀释液浓度为50mM;所述蛋白的浓度为2.5%;所述糖类的浓度为3%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
所述洗涤液浓度为50mM;所述表面活性剂的浓度为2.5%,所述蛋白的浓度为1.5%;所述糖类的浓度为5%;所述大分子聚合物的浓度为1.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例十一、实施例十二、实施例十三的检测方法为:
待检测样本为血清或血浆,将待测样本加入到装有抗人IgE抗体标记物的容器中,拧紧盖子上下颠倒混匀3-4次后,形成一抗-二抗复合物,然后将液体全部加入到加样孔11中,在渗滤的作用下液体透过硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上的抗原与液体中的一抗-二抗复合物结合形成抗原-一抗-二抗复合物,再加入亲和素-酶,待液体完全渗入后,再滴加洗涤液于加样孔11中,待液体完全渗入后加入TMB显色底物液,5min后加入终止液终止反应。根据硝酸纤维素膜上显示的颜色的深浅结合所对应颜色的比色卡来半定量判断样本中特异性 IgE 的浓度,反应结果可肉眼直接观察。
实施例十四:
与实施例十一相同,不同之处在于:还包括样本稀释液,以及安装在所述检测卡上的全血过滤构件6。
所述样本稀释液为PBS;所述样本稀释液包括具有裂解作用的裂解成分,所述裂解成分为NaNO2;便于样本渗滤的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通;保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白;保护样本稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3;
所述样本稀释液浓度为100mM,所述裂解成分的浓度为4M;所述表面活性剂的浓度为5%;所述蛋白的浓度为5%;所述防腐剂的浓度为2%。
所述全血过滤构件6包括构件本体61,所述构件本体61的一侧设有便于取放的手持部62,所述构件本体61上设有卡座63,所述卡座63的形状与所述上盖1的形状相配合,所述卡座63卡在加样孔11内与所述上盖1固定连接,所述卡座63上设有通孔64,所述通孔64位于所述加样孔11的上方,所述卡座63的底部涂有双面胶,所述卡座63的底部粘贴有全血滤膜65,将所述通孔64上设有全血滤膜65。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
除了本实施例中的上述描述外,所述样本稀释液也可以为Tris或者CBS;所述裂解成分也可以为NaNO2;所述表面活性剂也可以为吐温;所述蛋白也可以为BSA;所述防腐剂也可以为PC300,与实施例中的成分的效果等同。
实施例十五:
与实施例十四相同,不同之处在于:
所述样本稀释液浓度为10mM,所述裂解成分的浓度为1M;所述表面活性剂的浓度为0.01%;所述蛋白的浓度为0.05%;所述防腐剂的浓度为0.05%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例十六:
与实施例十四相同,不同之处在于:
所述样本稀释液浓度为50mM,所述裂解成分的浓度为3M;所述表面活性剂的浓度为2.5%;所述蛋白的浓度为2.5%;所述防腐剂的浓度为1%。
采用本实施例提供的检测试剂盒进行检测,对57例过敏患者(2-18岁的32人,18-70岁的25人)抽取血液进行检测(粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉),与上市试剂对比的结果如下:
过敏原 | 粉尘螨 | 牛奶 | 蟑螂 | 虾/蟹 | 芒果 | 霉菌组合 | 蛋黄/蛋白 | 黄柳/杨树等花粉 |
本发明阳性检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
上市试剂检出率 | 21 | 9 | 6 | 11 | 2 | 7 | 5 | 5 |
比较上表的检测结果可见,本发明提供的检测方法检测灵敏度较高,大部分患者对多种过敏原过敏,粉尘螨、牛奶、蛋黄/蛋白、虾/蟹、芒果、霉菌组合、蟑螂、黄柳/杨树等花粉的IgE抗体的检出情况基本相当。
实施例十四、实施例十五和实施例十六的检测方法:
待检测样本为全血,用采血针扎破手指取血适量,滴入到装有样本稀释液的容器中,拧紧盖子颠倒3-4次后备用。将全血过滤构件紧扣于加样孔11的上方,滴加洗涤液于全血过滤构件的全血滤膜上,待液体完全渗入后,将稀释好的全血样本倒到全血滤膜上,在渗滤的作用下液体透过全血滤膜到达硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上的抗原与待测样本中的抗体结合形成抗原-抗体复合物,待液体完全渗入后,再加入抗人IgE抗体标记物,形成抗原-抗体-二抗复合物,待液体完全渗入后将亲和素-酶加入到加样孔11中,待液体完全渗入后再滴加洗涤液于加样孔11中,待液体完全渗入后加入TMB显色底物液,5min后加入终止液终止反应。根据硝酸纤维素膜上显示的颜色的深浅结合所对应颜色的比色卡来半定量判断样本中特异性 IgE 的浓度,反应结果可肉眼直接观察。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种用于过敏原检测的检测膜条,包括硝酸纤维素膜,其特征在于:所述硝酸纤维素膜上包被有若干组质控线和检测线;所述质控线包被有羊抗鼠抗体,羊抗鼠抗体的包被浓度为1~3 mg/mL,过敏原蛋白抗原包被形成所述检测线,所述过敏原蛋白抗原的包被浓度为0.1~3 mg/mL。
2.一种用于过敏原检测的检测卡,其特征在于:检测卡包括密封扣合的上盖和下盖,所述上盖和所述下盖之间设有容纳腔,所述容纳腔内依次放置权利要求1所述的检测膜条、免疫渗滤限流装置,所述检测膜条靠近所述上盖,所述免疫渗滤限流装置靠近所述下盖,且所述上盖上设有加样孔;
所述免疫渗滤限流装置包括导流层、限流层和吸水层;所述限流层上设有若干个限流孔,每个所述限流孔分别与每组所述质控线和所述检测线的位置相对应,所述限流层为不渗水材料层,且所述限流层的双面均涂布有黏性胶;所述导流层为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸或擦镜纸;所述吸水层为可吸水材料层,所述可吸水材料层为吸水纸或擦镜纸。
3.一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求2所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、荧光标记物、洗涤液。
4.一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求2所述的检测卡、抗人IgE抗体标记物、酶标记物、TMB显色底物液、终止液、洗涤液。
5.如权利要求3或4所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:还包括样本稀释液,以及安装在所述检测卡上的全血过滤构件,所述全血过滤构件包括构件本体,所述构件本体上设有卡座,所述卡座可与所述上盖固定连接,所述卡座上设有通孔,所述通孔位于所述加样孔的上方,所述通孔上设有全血滤膜。
6.如权利要求3或4所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:所述抗人IgE抗体标记物为经抗体标记物稀释液稀释的生物素标记鼠抗人IgE抗体标记物,所述抗体标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种;所述抗体标记物稀释液包括保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记物活性的糖类,所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高标记物活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护抗体标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为PC300;
所述抗体标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
7.如权利要求3所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:所述荧光标记物为经荧光标记物稀释液稀释的链酶亲和素荧光标记物,所述荧光标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种,所述荧光标记物稀释液包括有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护所述荧光标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述荧光标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
8.如权利要求3或4所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:所述洗涤液为PBS、Tris、CBS中的一种;包括便于液体渗滤、改善膜面底色的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通、吐温中的一种;能有效保护荧光标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类,所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护洗涤液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述洗涤液浓度为10-100mM;所述表面活性剂的浓度为0.1%-5%,所述蛋白的浓度为0.05%-3%;所述糖类的浓度为1%-10%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
9.如权利要求5所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:所述样本稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种;所述样本稀释液包括具有裂解作用的裂解成分,所述裂解成分为SDS、NaNO2中的一种;便于样本渗滤的表面活性剂,所述表面活性剂为曲拉通、吐温中的一种;保护抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;保护样本稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为NaN3、PC300中的一种;
所述样本稀释液浓度为10-100mM,所述裂解成分的浓度为1-4M;所述表面活性剂的浓度为0.01%-5%;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
10.如权利要求4所述的一种用于过敏原检测的检测试剂盒,其特征在于:所述酶标记物为经酶标记物稀释液稀释的链酶亲和素-酶标记物,所述酶标记物稀释液为PBS、Tris、CBS中的一种,所述酶标记物稀释液包括有效保护酶标记物抗体活性的蛋白,所述蛋白为酪蛋白、BSA中的一种;高浓度的增加标记抗体活性的糖类;所述糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的一种;便于提高抗体活性的大分子聚合物,所述大分子聚合物为PEG、PVP、PVA中的一种;保护所述酶标记物稀释液稳定性的防腐剂,所述防腐剂为PC300;
所述酶标记物稀释液浓度为10-100mM;所述蛋白的浓度为0.05%-5%;所述糖类的浓度为1%-5%;所述大分子聚合物的浓度为0.1%-3%;所述防腐剂的浓度为0.05%-2%。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111134950.XA CN113834929A (zh) | 2021-09-27 | 2021-09-27 | 一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111134950.XA CN113834929A (zh) | 2021-09-27 | 2021-09-27 | 一种用于过敏原检测的检测膜条、检测卡以及检测试剂盒 |
Publications (1)
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