CN213275623U - 一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供了一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，包括微孔基板和试剂槽，所述试剂槽中放有缓冲液、封闭液、酶标抗体、人IgE标准品和显色液，所述微孔基板设置有x个微孔，所述微孔呈矩阵微阵列分布，所述呈矩阵微阵列分布的微孔设置有过敏原蛋白样品微孔、y个校准微孔、m个阳性质控微孔、n个阴性质控微孔，其中，0.05≤y/x≤0.08，n/x≤0.02≤m/x≤0.04。本实用新型的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

Description

一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒

技术领域

本实用新型涉及生化检查设备领域，具体涉及一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒。

背景技术

过敏性疾病是指由变态反应机制引起的疾病。过敏性疾病可以涉及人体各个系统，但以皮肤、呼吸道、消化道受累为最常见。引起过敏反应的物质被称为过敏原(allergen)，大多是天然物质，富含蛋白质。过敏原的类型有：食物过敏原、吸入过敏原、感染过敏原、药物过敏原等。食物过敏有鱼、虾、肉、牛奶和水果等；吸入过敏原有花粉、螨、动物皮毛和霉菌等；感染过敏原有病毒、细菌、真菌、寄生虫等；药物过敏原有青霉素、磺胺类、解热镇痛药等。

广义的过敏性疾病(hypersensitivity diseases)包括所有变态反应机制引起的疾病，但狭义上的变态反应，即allergy，常指由IgE介导的速发型(I型)变态反应。I型速发过敏反应，由IgE介导，反应在暴露于变应原后很快发生，一般不超过半小时，由肥大细胞和IgE介导。变应原进入体内，刺激单核吞噬系统，引起浆细胞反应，产生特异性IgE，与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的IgE受体桥联，使这些细胞处于致敏状态。当致敏的细胞再次暴露于致敏物质，则引起肥大细胞脱颗粒，释放介质，如组织胺、血清素、缓激肽及慢反应物质等，引起小血管扩张和通透性增加，平滑肌痉挛及腺体分泌增多。按变态反应所发生的部位不同，临床上可引起不同的疾病。若发生在皮肤粘膜处，则引起荨麻疹和各种皮炎；在呼吸道则引起咽喉部及声带充血水肿、过敏性鼻炎、支气管哮喘等；在消化道则引起过敏性胃肠炎；在全身小血管则引起过敏性休克。

世卫生组织(WHO)已将过敏性疾病列为21世纪重点研究和防治疾病。世界变态反应组织(WAO)基于对30个国家12亿人口中，22％患有IgE介导的过敏性疾病。近年随着环境因素、人们的饮食习惯等发生改变，过敏性疾病有上升的趋势。因此对过敏性疾病的诊断变得尤为重要，WHO推荐的“四位一体”的最佳治疗方案里首先就是避免过敏原，那么明确过敏原防止患者再次接触过敏原是过敏性疾病防治的重中之重。目前国际上公认的过敏原检测方法有两大类：1.过敏原体内检查法有皮内试验、点刺法、斑贴试验、激发试验(结膜试验、鼻粘膜试验、支气管试验、食物激发试验、药物激发试验)；缺点：具有损伤性、有一定的危险，不可能检测到所有过敏原。2.体外过敏原特异性IgE检测，由于其安全性，特异性好，即来即查，无需停药，尤其适用于小儿、症状较重的患者及晕针或者不愿意做皮试的患者现在被广泛使用。常用的检测方法主要为UniCAP变应原检测系统和ELISA等，其共同原理是将纯化的过敏原与固相载体结合，加入待检血清及参考血清，再与酶标记或荧光标记或同位素标记的抗IgE抗体反应，测定相应的底物颜色、荧光值或放射活性，计算血清中特异性IgE的含量达到定量，其共同缺点是、一次只能检测一次指标检测通量低、费时、价格昂贵、污染环境、所需样本量大、需要特殊仪器。

多重微阵列是上世纪九十年代的前沿技术，是一种“微型化”技术。微阵列是一种装置，将大量样本(核酸或者蛋白质等生物分子)附着或固定于适合的未反应基底表面(如聚丙烯、聚苯乙烯、环烯等塑料、硅树脂和玻璃)。如果基底表面相对平直，生物分子可以被“印刷”到表面上，使用含有生物分子作为“测定点位”的缓冲液印刷。将固定于基底表面上的已知位置的生物分子暴露于生物化学/化学试剂，用于检测、定性和定量分析。鉴于微阵列技术的高通量、微型化可同时检测几十项甚至数百项指标，大大提高了检测通量和检测效率且降低样本量，为特异性IgE的检测带来了重大的突破。但是，优于微阵列同时检测的样本数量较多，导致了准确定量偏差的扩大。

实用新型内容

本实用新型的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒。

为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案为：一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，所述试剂盒包括微孔基板和试剂槽，所述试剂槽中放有缓冲液、封闭液、酶标抗体、人IgE标准品和显色液，所述微孔基板设置有x个微孔，所述微孔呈矩阵微阵列分布，所述呈矩阵微阵列分布的微孔设置有过敏原蛋白样品微孔、y个校准微孔、m个阳性质控微孔、n个阴性质控微孔，其中，0.05≤y/x≤0.08，n/x≤0.02≤m/x≤0.04。

上述的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒通过设置微孔基板，并且在微孔基板设置样品微孔、校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔，实用新型人通过限定校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔与微孔基板的微孔总数的数量关系，发现0.05≤y/x≤0.08且n/x≤0.02≤m/x≤0.04时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

优选地，所述微孔基板符合以下条件，90≤x≤110。

上述的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒能够同时检测80多种过敏原特异性IgE，而且减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

优选地，所述微孔基板符合以下条件，0.06≤y/x≤0.07。

实用新型人通过研究发现，当微孔基板符合0.06≤y/x≤0.07时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

优选地，所述微孔基板符合以下条件，0.02≤m/x≤0.03。

优选地，所述呈矩阵微阵列分布的微孔的矩阵为a×b的矩阵，其中，90≤x＝a×b≤110，且-3≤a-b≤3。

实用新型人通过研究发现，当呈矩阵微阵列分布的微孔的矩阵为a×b的矩阵，其中，90≤x＝a×b≤110，且-3≤a-b≤3时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

优选地，0.5≤y/a≤0.8，0.2≤m/a≤0.4。

实用新型人通过研究发现，当微孔基板符合0.5≤y/a≤0.8，0.2≤m/a≤0.4时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

优选地，所述微孔基板符合以下条件，a＝10，b＝10，y＝6，m＝3，n＝1。

优选地，所述6个校准微孔中的IgE浓度依次为：校准点1为0.35IU/mL、校准点2为0.7IU/mL、校准点3为3.5IU/mL、校准点4为17.5IU/Ml、校准点5为50IU/mL、校准点6为100IU/mL；所述阳性质控微孔中的IgE浓度分别为2.0IU/mL、40IU/mL、80IU/mL，所述过敏原蛋白样品微孔中包被的过敏原蛋白的浓度为10mg/L，所述矩阵微孔中点样的直径为150～200微米。

优选地，所述过敏原蛋白样品微孔中包被有过敏原蛋白，所述过敏原蛋白包括食物过敏原蛋白和吸入过敏原蛋白，所述食物过敏原蛋白选自蛋白、蛋黄、牛奶、羊奶、酸奶、酪蛋白、荞麦、麦麸、玉米、大米、燕麦、小麦、虾、蟹、扇贝、鳕鱼、带鱼、鲈鱼、花生、大豆、板栗、芝麻、花生、榛子、杏仁、腰果、核桃、香蕉、芒果、桃子、奇异果、苹果、梨、樱桃、李子、葡萄、草莓、木瓜、柚子、橙子、柠檬、菠萝、哈密瓜、西瓜、甜瓜、椰子、橄榄、西兰花、茄子、苦瓜、黄瓜、甜椒、芦笋、菠菜、西红柿、西葫芦、胡萝卜、土豆、大蒜、红薯、萝卜、芹菜、洋葱、芋头、南瓜、蘑菇、卷心菜、竹笋、茴香、薄荷、香菜、香菜、青椒、肉桂、黑胡椒、腰豆、绿豆、红豆、嫩豌豆、扁豆、豇豆中的若干种，所述吸入过敏原蛋白选自猫毛皮屑、狗毛皮屑、豚草、葎草、蟑螂、屋尘螨、粉尘螨、杨树、柳树、柏树、榆树、梧桐、蒲公英、艾蒿、苦艾、烟草屑、蚊子、棉絮、花茅草花粉、果树草花粉、黑麦草花粉、草地羊茅草花粉、梯牧草花粉、小糠草花粉、草地早熟禾、点青霉、烟曲霉、交链孢霉、分枝孢菌、毛霉、根霉、白色链珠菌中的若干种。

优选地，所述封闭液为质量浓度4％的牛血清白蛋白-1XPBS；所述显色液为1-StepTMB；所述缓冲液为吐温20的TBST溶液；所述酶标抗体为HRP抗人IgE，HRP抗人IgE的浓度为0.8～1.6mg/L，所述微孔基板的材料为聚苯乙烯。

本实用新型的有益效果在于：本实用新型提供了一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，本实用新型的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒通过设置微孔基板，并且在微孔基板设置样品微孔、校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔，实用新型人通过限定校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔与微孔基板的微孔总数的数量关系，发现0.05≤y/x≤0.08且n/x≤0.02≤m/x≤0.04时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

附图说明

图1为本实用新型实施例的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒的微孔基板的结构示意图。

其中，1、微孔基板，2、校准微孔，3、阳性质控微孔，4、阴性质控微孔，5、过敏原蛋白样品微孔，6、微孔。

具体实施方式

为更好的说明本实用新型的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本实用新型作进一步说明。

实施例1

作为本实用新型实施例的一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，所述试剂盒包括微孔基板1和试剂槽，所述试剂槽中放有缓冲液、封闭液、酶标抗体、人IgE标准品和显色液，所述微孔基板1设置有x个微孔6，所述微孔6呈矩阵微阵列分布，所述呈矩阵微阵列分布的微孔6设置有过敏原蛋白样品微孔5、y个校准微孔2、m个阳性质控微孔3、n个阴性质控微孔4，其中，0.05≤y/x≤0.08，n/x≤0.02≤m/x≤0.04。

本实施例的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒通过设置微孔基板，并且在微孔基板设置样品微孔、校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔，实用新型人通过限定校准微孔、阳性质控微孔、阴性质控微孔与微孔基板的微孔总数的数量关系，发现0.05≤y/x≤0.08且n/x≤0.02≤m/x≤0.04时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

进一步地，所述微孔基板符合以下条件，90≤x≤110。同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒能够同时检测80多种过敏原特异性IgE，而且减小了试剂盒定量的偏差，改善了试剂盒定量的准确性。

进一步地，所述微孔基板符合以下条件，0.06≤y/x≤0.07。当微孔基板符合0.06≤y/x≤0.07时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

进一步地，所述微孔基板符合以下条件，0.02≤m/x≤0.03。

进一步地，所述呈矩阵微阵列分布的微孔的矩阵为a×b的矩阵，其中，90≤x＝a×b≤110，且-3≤a-b≤3。当呈矩阵微阵列分布的微孔的矩阵为a×b的矩阵，其中，90≤x＝a×b≤110，且-3≤a-b≤3时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

进一步地，0.5≤y/a≤0.8，0.2≤m/a≤0.4。当微孔基板符合0.5≤y/a≤0.8，0.2≤m/a≤0.4时，在保证尽量能够同时检测更多的样品的条件下，试剂盒定量的偏差更小。

进一步地，所述微孔基板符合以下条件，a＝10，b＝10，y＝6，m＝3，n＝1。

进一步地，所述6个校准微孔中的IgE浓度依次为：校准点1为0.35IU/mL、校准点2为0.7IU/mL、校准点3为3.5IU/mL、校准点4为17.5IU/Ml、校准点5为50IU/mL、校准点6为100IU/mL；所述阳性质控微孔中的IgE浓度分别为2.0IU/mL、40IU/mL、80IU/mL，所述过敏原蛋白样品微孔中包被的过敏原蛋白的浓度为10mg/L，所述矩阵微孔中点样的直径为150～200微米。

进一步地，所述过敏原蛋白样品微孔中包被有过敏原蛋白，所述过敏原蛋白包括食物过敏原蛋白和吸入过敏原蛋白，所述食物过敏原蛋白选自蛋白、蛋黄、牛奶、羊奶、酸奶、酪蛋白、荞麦、麦麸、玉米、大米、燕麦、小麦、虾、蟹、扇贝、鳕鱼、带鱼、鲈鱼、花生、大豆、板栗、芝麻、花生、榛子、杏仁、腰果、核桃、香蕉、芒果、桃子、奇异果、苹果、梨、樱桃、李子、葡萄、草莓、木瓜、柚子、橙子、柠檬、菠萝、哈密瓜、西瓜、甜瓜、椰子、橄榄、西兰花、茄子、苦瓜、黄瓜、甜椒、芦笋、菠菜、西红柿、西葫芦、胡萝卜、土豆、大蒜、红薯、萝卜、芹菜、洋葱、芋头、南瓜、蘑菇、卷心菜、竹笋、茴香、薄荷、香菜、香菜、青椒、肉桂、黑胡椒、腰豆、绿豆、红豆、嫩豌豆、扁豆、豇豆中的若干种，所述吸入过敏原蛋白选自猫毛皮屑、狗毛皮屑、豚草、葎草、蟑螂、屋尘螨、粉尘螨、杨树、柳树、柏树、榆树、梧桐、蒲公英、艾蒿、苦艾、烟草屑、蚊子、棉絮、花茅草花粉、果树草花粉、黑麦草花粉、草地羊茅草花粉、梯牧草花粉、小糠草花粉、草地早熟禾、点青霉、烟曲霉、交链孢霉、分枝孢菌、毛霉、根霉、白色链珠菌中的若干种。

进一步地，所述封闭液为质量浓度4％的牛血清白蛋白-1XPBS；所述显色液为1-Step TMB；所述缓冲液为吐温20的TBST溶液；所述酶标抗体为HRP抗人IgE，HRP抗人IgE的浓度为0.8～1.6mg/L，所述微孔基板的材料为聚苯乙烯。

进一步地，所述过敏原蛋白样品微孔包被的过敏原蛋白溶液的浓度为10mg/L，过敏原蛋白溶液的基质为30％的甘油-0.0015％TrionX-100的1XPBS，过敏原蛋白样品微孔中点样体积为30nL，点样的直径为150～200微米。

表1呈矩阵微阵列分布的微孔分布图

效果例1

样品及仪器

清洗缓冲液：含0.1％吐温20的TBST溶液(1×)，调pH为7.4；

封闭液：5％牛血清白蛋白(V)-1XPBS，pH 7.4；

酶标抗体工作液：HRP抗人IgE购自Abnova公司，货号PAB29741；首先将该标准品溶于1X的PBS溶液中，得到的浓度为1mg/ml的酶标母液。用含3％小牛血清的pH 7.40的1M PBS溶液将酶标母液稀释1000倍；得到终浓度为1.0mg/L的酶标抗体工作液；

人IgE标准品：将IgE(Abcam，ab65866)使用含30％甘油-0.0015％TrionX-100的1XPBS配制成五个不同浓度作为标准品溶液，其浓度分别是0.35IU/mL 0.7IU/mL、3.5IU/mL、17.5IU/Ml、50IU/mL、100IU/mL标准品经国际标准血清校准；

显色液：含0.48g/L TMB的柠檬酸缓冲液，(Thermo Scientific，货号是37574)；

分析仪：基于比色的CCD或CMOS分析仪。

分析样品：血浆或血清；

分析的生物指标：血液中的特异性IgE。

实验前，将所有试剂平衡至室温。

实施例1的同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒的检测方法包括以下步骤：

(1)量取10μl血清以1:10(v/v)的比例加入样本稀释液，摇匀，避免产生泡沫；

(2)取100μl稀释的血清样品加入微孔基板的微孔内，37℃恒温箱中孵育1小时，静置；

(3)弃去孔内反应液体；

(4)使用100μl清洗缓冲液(1×)洗涤微孔，重复6次，吸干残存液体；

(5)每个孔加入100μl酶标抗体工作液，孵育30～60分钟，静置；

(6)弃去孔内反应液，洗涤6次；

(7)加入TMB显色液100μl/孔，室温、避光条件下孵育30分钟，静置；

(8)分别用分析仪读数判定和试剂盒进行结果判定。

分析仪读数判定标准为：浓度小于0.35IU/mL为阴性或0级，浓度0.35～0.7IU/mL为阳性或1级，浓度0.7～3.5IU/mL为阳性或2级，浓度3.5～17.5IU/mL为阳性或3级，浓度17.5～50IU/mL为阳性或4级，浓度50～100IU/mL为阳性或5级，浓度大于100IU/mL为阳性或6级。

1、精密度测定

以猫毛皮屑，牛奶为例，从临床样品中分别选取阴性血清、弱阳性血清、中等阳性、强阳性血清，分别进行20次批内和批间测定，结果如表2(小麦)和表3(牛奶)所示。

表2实施例1的试剂盒对比猫毛皮屑特异性IgE精密度结果

表3牛奶特异性IgE精密度测定

由表2和表3中结果可知，实施例1的试剂盒具有良好的精密度。

2、定量限与线性范围

用人IgE标准品溶液进行稀释，配置得到标准曲线，进行点样，并进行检测。每个浓度的样本平行处理6个，分别检测一次；计算各浓度样本的平均值、RSD和回收率。

方法定量限的确定标准：RSD小于20％且回收率在85％～115％范围内的最低浓度点视为定量限浓度，即LOQ；线性范围的确定标准：RSD小于20％，回收率在85％～115％范围内，且以理论浓度比率与实际信号响应峰面积比率绘制成的回归曲线R2>0.98，即满足线性范围的要求。结果如表4和表5所示。

表4实施例1的试剂盒的定量线性结果

表5实施例1的试剂盒的定量限实验结果

由表4和表5，定量限LOQ为0.195IU/mL，线性范围为0.195～100IU/mL。

3、实施例1的试剂盒与对比试剂盒的对比结果

以中国江苏浩欧博生物医药股份有限公司的过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒(综合10项)作为对比试剂盒，与本实用新型的试剂盒分别测定猫毛皮屑特异性IgE和牛奶特异性IgE。

结果如表6、表7所示，猫毛皮屑特异性IgE测定结果：敏感度为83.9％(46/49)，特异度为102.2％(47/46)，准确度为93％(93/100)；阳性预测值为90％(46/50)，阴性预测值为94％(47/50)；牛奶特异性IgE测定结果：敏感度为96.1％(49/51)，特异度为98.0％(48/49)，准确度为97％(97/100)；阳性预测值为98％(49/50)，阴性预测值为96％(48/50)。

表6实施例1试剂盒与对比试剂盒对比结果(猫毛皮屑)

表7实施例1试剂盒与对比试剂盒对比结果(牛奶)

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非对本实用新型保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本实用新型作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本实用新型技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括微孔基板和试剂槽，所述试剂槽中放有缓冲液、封闭液、酶标抗体、人IgE标准品和显色液，所述微孔基板设置有x个微孔，所述微孔呈矩阵微阵列分布，所述呈矩阵微阵列分布的微孔设置有过敏原蛋白样品微孔、y个校准微孔、m个阳性质控微孔、n个阴性质控微孔，其中，0.05≤y/x≤0.08，n/x≤0.02≤m/x≤0.04。

2.根据权利要求1所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述微孔基板符合以下条件，90≤x≤110。

3.根据权利要求1或2所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述微孔基板符合以下条件，0.06≤y/x≤0.07。

4.根据权利要求3所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述微孔基板符合以下条件，0.02≤m/x≤0.03。

5.根据权利要求1所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述呈矩阵微阵列分布的微孔的矩阵为a×b的矩阵，其中，90≤x＝a×b≤110，且-3≤a-b≤3。

6.根据权利要求5所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述微孔基板符合以下条件，0.5≤y/a≤0.8，0.2≤m/a≤0.4。

7.根据权利要求6所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述微孔基板符合以下条件，a＝10，b＝10，y＝6，m＝3，n＝1。

8.根据权利要求7所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述6个校准微孔中的IgE浓度依次为：校准点1为0.35IU/mL、校准点2为0.7IU/mL、校准点3为3.5IU/mL、校准点4为17.5IU/Ml、校准点5为50IU/mL、校准点6为100IU/mL；所述阳性质控微孔中的IgE浓度分别为2.0IU/mL、40IU/mL、80IU/mL，所述过敏原蛋白样品微孔中包被的过敏原蛋白的浓度为10mg/L，所述矩阵微孔中点样的直径为150～200微米。

9.根据权利要求1所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述过敏原蛋白样品微孔中包被有过敏原蛋白，所述过敏原蛋白包括食物过敏原蛋白和吸入过敏原蛋白，所述食物过敏原蛋白选自蛋白、蛋黄、牛奶、羊奶、酸奶、酪蛋白、荞麦、麦麸、玉米、大米、燕麦、小麦、虾、蟹、扇贝、鳕鱼、带鱼、鲈鱼、花生、大豆、板栗、芝麻、花生、榛子、杏仁、腰果、核桃、香蕉、芒果、桃子、奇异果、苹果、梨、樱桃、李子、葡萄、草莓、木瓜、柚子、橙子、柠檬、菠萝、哈密瓜、西瓜、甜瓜、椰子、橄榄、西兰花、茄子、苦瓜、黄瓜、甜椒、芦笋、菠菜、西红柿、西葫芦、胡萝卜、土豆、大蒜、红薯、萝卜、芹菜、洋葱、芋头、南瓜、蘑菇、卷心菜、竹笋、茴香、薄荷、香菜、香菜、青椒、肉桂、黑胡椒、腰豆、绿豆、红豆、嫩豌豆、扁豆、豇豆中的若干种，所述吸入过敏原蛋白选自猫毛皮屑、狗毛皮屑、豚草、葎草、蟑螂、屋尘螨、粉尘螨、杨树、柳树、柏树、榆树、梧桐、蒲公英、艾蒿、苦艾、烟草屑、蚊子、棉絮、花茅草花粉、果树草花粉、黑麦草花粉、草地羊茅草花粉、梯牧草花粉、小糠草花粉、草地早熟禾、点青霉、烟曲霉、交链孢霉、分枝孢菌、毛霉、根霉、白色链珠菌中的若干种。

10.根据权利要求1所述同时检测多种过敏原特异性IgE的试剂盒，其特征在于，所述封闭液为质量浓度4％的牛血清白蛋白-1XPBS；所述显色液为1-Step TMB；所述缓冲液为吐温20的TBST溶液；所述酶标抗体为HRP抗人IgE，HRP抗人IgE的浓度为0.8～1.6mg/L，所述微孔基板的材料为聚苯乙烯。

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