CN113827583B - 杨梅醇的用途 - Google Patents

杨梅醇的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN113827583B
CN113827583B CN202111353857.8A CN202111353857A CN113827583B CN 113827583 B CN113827583 B CN 113827583B CN 202111353857 A CN202111353857 A CN 202111353857A CN 113827583 B CN113827583 B CN 113827583B
Authority
CN
China
Prior art keywords
myricetin
application
pdgf
phosphorylation
cyclic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111353857.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113827583A (zh
Inventor
黄恺
陈敏
梁明露
樊思源
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology
Original Assignee
Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology filed Critical Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology
Priority to CN202111353857.8A priority Critical patent/CN113827583B/zh
Publication of CN113827583A publication Critical patent/CN113827583A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113827583B publication Critical patent/CN113827583B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/075—Ethers or acetals
    • A61K31/085—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon
    • A61K31/09—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon having two or more such linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于医药领域，具体公开了杨梅醇的用途。杨梅醇在制备抑制PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达制剂中的应用。杨梅醇在制备抑制平滑肌表型转换制剂中的应用。杨梅醇在制备防治平滑肌表型转换诱发的疾病中的应用。杨梅醇在制备防治心血管疾病药物中的应用。杨梅醇在制备抑制PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达制剂中的应用。杨梅醇在制备抑制PDGF‑BB引起的细胞增殖制剂中的应用。本发明公开杨梅醇对PDGFRβ有抑制作用，因此杨梅醇可以抑制平滑肌表型转换，从而预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。

Description

杨梅醇的用途
技术领域
本发明属于医药领域，尤其涉及杨梅醇的用途。
背景技术
杨梅醇，英文名称为Myricanol。别名Myrical；(9R)-16,17-Dimethoxytricyclo[12.3.1.12,6]nonadeca-1(18),2,4,6(19),14,16-hexaene-3,9,15-triol。其分子量为358.43，分子式为C21H26O5，CAS号为33606-81-4。结构式为如图1中A所示。
杨梅醇(Myricanol)是从杨梅中分离得到的一种二芳基庚烷醇(二芳基庚烷醇至少还包括图1中B、C所示)，是一种AMP活化蛋白激酶(AMPK)激活物，对AMPKγ亚基具有高亲和力。在目前已有的研究中杨梅醇及其衍生物在体外对A54、HL-60及HepG2等肿瘤细胞具有明显的抑制作用，诱导ROS依赖性线粒体介导的癌细胞凋亡。杨梅醇及其衍生物可减轻氧化应激诱导的心肌细胞毒性。同时，杨梅醇通过sirtuin 1依赖的机制挽救地塞米松诱导的肌肉功能障碍。因此上述药物均被应用于肿瘤相关的研究中。
血管平滑肌细胞(VSMC)的表型可分为分化程度较高的收缩型和分化程度较低的分泌型，这两种表型代表了共存于血管壁内一系列不同表现型的两个极端类型，且表达不同的基因和蛋白。正常成人动脉血管的VSMC以收缩型为主，其主要功能是维持血管的弹性和收缩血管。收缩型VSMC增殖、迁移能力差或无，胞体呈梭形或带状，含大量肌丝和结构蛋白；而分泌型VSMC主要存在于胚胎中期血管和病理血管中，其主要功能是增殖、迁移入内膜以及合成细胞外基质蛋白。
VSMC从收缩型向分泌型转换的过程称为VSMC的表型转换。研究表明丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、PI-3-K、环一磷酸腺苷(cAMP)这三种信号传导途径参与VSMC的表型转换，通过的受体包括VEGFR、血小板源性生长因子受体(PDGFR)等。VSMC的异常增殖和迁移是高血压、肺动脉高压等血管疾病发生发展的共同病理特征，同时也是引起血管损伤后再狭窄的重要原因，而VSMC表型转化在VSMC增殖和迁移过程中发挥了重要作用。
根据VSMC两种表型表达蛋白的不同可以找到表型转换时相应的标志物。其中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)在分泌型细胞中优势表达，是VSMC分化的早期特征性标志物。
目前应用于科研中的抑制血管损伤后再狭窄的药物有数种，其中最为常见的有：血管紧张素转换酶(简写为ACE)抑制剂螺普利和西拉普利，药物涂层支架(DES)使用的涂层药物[如抗栓剂(如肝素、水蛭素)、抗炎症药物、抗细胞增殖剂(如雷帕霉素、紫杉醇)]等。已有的研究表明杨梅醇可以通过诱导癌细胞凋亡，在肿瘤疾病中发挥治疗作用。
发明内容
针对上述问题，本发明提供环状二芳基庚烷醇的用途，主要解决二芳基庚烷醇尤其是杨梅醇及其衍生物现有用途的一些研究缺失，同时也弥补了平滑肌表型转化相关调节试剂种类上较少的不足。
为了解决上述问题，本发明采用如下技术方案：
环状二芳基庚烷醇在制备抑制物质磷酸化抑制剂中应用，其中，物质磷酸化至少为下述之一
PDGFRβ磷酸化、PLCγ磷酸化、Scr磷酸化；
和/或，环状二芳基庚烷醇在制备抑制PDGFRβ下游通路表达制剂中的应用。
一些方式中，所述环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
环状二芳基庚烷醇在制备抑制平滑肌表型转换制剂中的应用。
一些方式中，所述环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
一些方式中，所述平滑肌表型转换包括由收缩型向分泌型转换。
环状二芳基庚烷醇在制备防治平滑肌表型转换诱发的疾病中的应用；优选的，所述环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
环状二芳基庚烷醇在制备防治心血管疾病药物中的应用；优选的，所述环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物，所述心血管疾病包括血管损伤后再狭窄。
一些方式中，所述血管损伤后再狭窄包括PCI再狭窄、支架内再狭窄、旁路移植后再狭窄。
环状二芳基庚烷醇在制备抑制PDGF-BB引起的细胞增殖制剂中的应用；优选的，环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
环状二芳基庚烷醇在制备PDGF-BB诱导MMP2和/或MMP9表达水平增高作用的抑制剂中的应用；
优选的，环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
PDGFRβ磷酸化和/或PLCγ磷酸化和/或Scr磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达抑制剂，含有环状二芳基庚烷醇；
优选的，所述环状二芳基庚烷醇为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
本发明的有益效果是：
环状二芳基庚烷醇对PDGFRβ等有抑制作用，因此环状二芳基庚烷醇可以抑制平滑肌表型转换，从而预防和/或治疗血管损伤后再狭窄；为新药的制备提供了设计思路，其可以作为治疗平滑肌参与的相关疾病如血管再狭窄、肿瘤等疾病的药物而广泛应用。尤其是其中的杨梅醇及其衍生物针对部分机理具有更好的作用效果。同时其也可以针对其他有相关机理导致的病症进行治疗。
附图说明
图1为几种环状二芳基庚烷醇结构式；
图2中A为不同浓度的杨梅醇和载体(DMSO)利用油红-苏木精(HE)染色实验和马松(Masson)染色实验检测小鼠颈动脉损伤后的血管形态。第一列为假手术+载体处理组(Sham+Vehicle)，第二列为损伤+载体处理组(Injured+Vehicle)，第三列为损伤+杨梅醇处理组(Injured+Myricanol)；第一行为HE染色检测血管形态，第二行为Masson染色检测血管形态。图2中B为A中对应的平均内膜厚度统计图。图2中C为A中对应的新生内膜与中膜厚度比值的统计图；
图3中A为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予杨梅醇(3,10,30μM)和载体(DMSO)刺激，图中为不同浓度的杨梅醇利用Edu实验检测VSMC细胞增殖情况，其中第一列为载体处理组，第二列为PDGF-BB+载体处理组，第三列为PDGF-BB+3μM的杨梅醇处理组，第四列为PDGF-BB+10μM的杨梅醇处理组，第五列为PDGF-BB+30μM的杨梅醇处理组。图3中B为A中对应不同处理细胞增殖情况统计图。图3中C为A中对应不同处理细胞利用蛋白免疫印迹检测增殖有关蛋白(CCND1、CCNE1、PCNA、E2F1、p-Rb、Rb)、内参蛋白GAPDH表达变化情况及其增殖蛋白相对表达量的统计图；
图4中A为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予杨梅醇(3,10,30μM)和载体(DMSO)刺激，图中为不同浓度的杨梅醇利用划痕实验检测VSMC细胞迁移情况。其中第一列为载体处理组，第二列为PDGF-BB+载体处理组，第三列为PDGF-BB+3μM的杨梅醇处理组，第四列为PDGF-BB+10μM的杨梅醇处理组，第三列为PDGF-BB+30μM的杨梅醇处理组。图4中B为A中对应不同处理细胞迁移情况统计图；
图5中A为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予杨梅醇(3,10,30μM)和载体(DMSO)刺激，图中为不同浓度的杨梅醇及载体后利用蛋白印迹实验检测迁移蛋白(MMP2、MMP9)的表达，VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，迁移蛋白表达上升；给予杨梅醇刺激后，迁移蛋白表达下降。图5中B为A中不同处理组迁移蛋白用内参蛋白GAPDH归一化后量化统计图；
图6为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予杨梅醇(3,10,30μM)和载体(DMSO)刺激，图6中右图为不同浓度的杨梅醇及载体后利用蛋白印迹实验检测蛋白PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平情况，VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平上升；给予杨梅醇刺激后，PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平下降。图6中右图为左图中不同处理组蛋白用内参蛋白GAPDH归一化后量化统计图。
具体实施方式
名词释义：
术语“环状二芳基庚烷醇”为由环状二芳基庚烷类化合物形成的醇类化合物。主要为环状二芳基庚烷类化合物部分位置被羟基取代或通过其他方式变成了羟基。其他化合物具有与环状核心结构(如图1中虚线框中结构)，且具有羟基时均应为环状二芳基庚烷醇。但如虚线框中有其他位置被羟基等取代时，只要不引起性质改变，等同于图中结构。
术语“杨梅醇衍生物”为与杨梅醇区别在于部分位置结构、官能团变化，但这些位置的结构、官能团变化保持杨梅醇衍生物依然与杨梅醇具有针对本发明涉及病症起到相同相近防治调节作用的衍生物。比如，如图1中，杨梅醇最外围部分官能团-OH或-CH3变化后形成的衍生物，只要针对本发明涉及病症具有调节作用，就应当在本发明范围内。在下述介绍的一些方面中，杨梅醇衍生物只要起到与杨梅醇针对相同病症治疗起到基本相同效果的均应等同在本发明范围内，当然，其中涉及的治疗机理也基本相同时直接落入相应权利要求范围内。
术语“防治”是指对患者进行的意图治愈、改善、稳定或预防疾病、病理状况或障碍的医疗管理。该术语包括积极治疗，即治疗特别指向疾病、病理状况或障碍的改善，并且还包括病因治疗，即治疗指向去除相关疾病、病理状况或障碍的病因。此外，该术语还包括姑息治疗，即为减轻症状而不是治愈疾病、病理状况或障碍而设计的治疗；预防性治疗，即旨在尽量最小化或者部分或完全抑制相关疾病、病理状况或障碍发展的治疗；和支持治疗，即用于补充指向相关疾病、病理状况或障碍的改善的另一种特定疗法的治疗。同时，在商业活动中，如果生产了含有与本发明相同组分的产品，产品说明书未记载与本发明相同相近用途，但其给出了将相应产品用于实现与本发明相同相近目的提示时，也应当视为应用。
前述名词定义作为参考释义，除有特殊说明外，其余可参考领域内一般意义理解。在没有反例的前提下，不做缩小型解释，也即，除存在反例证据的实例，其余均应落入范围内。
下面对本发明做进一步说明：
本部分第一方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备抑制物质磷酸化抑制剂中应用，其中，物质磷酸化至少为下述之一
PDGFRβ磷酸化、PLCγ磷酸化、Scr磷酸化；
和/或，环状二芳基庚烷醇在制备抑制PDGFRβ下游通路表达制剂中的应用。
所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
抑制PDGFRβ磷酸化的目的主要是为了使其保持正常水平，防止其异常变化导致病变。抑制PDGFRβ下游通路表达的目的也是为了使其保持正常水平，防止其异常变化导致病变。其中，本段所述正常水平在医学上表现为医学参考值，当表达超高时将其进行抑制降低。但是，如果是将其用于做某些极端用途时，也应当落入本发明范围内。比如在一些环境中需要控制PDGFRβ磷酸化极大降低、最大程度控制PDGFRβ下游通路表达时；又如，防止PDGFRβ磷酸化增高使其保持一定水平、PDGFRβ下游通路表达维持一定水平时。
部分方式中，所述抑制PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达制剂作用浓度为3μM-5mg/Kg。其中，作用浓度为以治疗为目的的使用，具体的浓度参数(含量指标)参考合规的药物中有效成分浓度，其可制成制剂或药物颗粒等，使用方式为口服或注射。
当其用于其他途径中时，也可直接添加于待调节物质中，比如在商业性研究实验中，将其作为PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达调节试剂使用时，可直接添加于相关细胞液中起到于本发明基础目的相同的，都应当在本发明范围内。
关于PLCγ磷酸化、Scr磷酸化具体说明参考前三段。
本部分第二方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备抑制平滑肌表型转换制剂中的应用。
环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
血管平滑肌细胞能否维持收缩表型是决定血管稳态和重构的关键环节。抑制平滑肌向其他表型不合理转换会引起一些病变。
部分方式中，所述平滑肌表型转换包括由收缩型向分泌型转换。通过环状二芳基庚烷醇尤其是杨梅醇抑制收缩型向分泌型转换转换。
本部分第三方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备防治平滑肌表型转换诱发的疾病中的应用。
所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
血管平滑肌异常增殖和迁移造成的表型转化在心脑血管疾病中起着关键作用是动脉粥样硬化、高血压、心衰、脑梗等疾病的重要病理过程之一。由此，针对平滑肌表型转换诱发的疾病，杨梅醇也能起到防治作用。其中，防治表示预防、治疗，预防和治疗在一些情况中可采用不同的作用浓度，也可采用相同或不同的用药方式。
本部分第四方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备防治心血管疾病药物中的应用；心血管疾病包括血管损伤后再狭窄、心血管狭窄等。
环状二芳基庚烷醇在制备防治血管损伤后再狭窄药物中的应用。
所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
部分方式中，所述血管损伤后再狭窄包括PCI再狭窄、支架内再狭窄、旁路移植后再狭窄等，以及其他具有相似致病机理的病症。
通过杨梅醇可以实现预防、治疗血管损伤后再狭窄疾病。如针对一些做了冠脉支架手术等患者，杨梅醇也能起到后续辅助治疗的作用，进一步起到防止血管再狭窄；类似于这类的辅助治疗制剂也应当在本发明的范围内。
当其作为防治心血管狭窄时，其表现为缓解甚至治疗心血管狭窄情况，一种方式中，通过调节平滑肌表型转换逐步使得狭窄心血管恢复正常状态。
更进一步，心血管疾病还包括高血压、动脉粥样硬化等。其中有多种心血管疾病具有相近的诱因，在治疗心血管疾病时，针对其他相近致病机理导致的心血管病症也应当在本发明范围内。
本部分第五方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备抑制PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达制剂中的应用。
所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
其中，杨梅醇衍生物表示与杨梅醇相比仅在部分官能团、碳链长度变化的化合物。
本部分第六方面公开：
环状二芳基庚烷醇在制备抑制PDGF-BB引起的细胞增殖制剂中的应用；
环状二芳基庚烷醇在制备PDGF-BB诱导MMP2和/或MMP9表达水平增高作用的抑制剂中的应用。
所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
本部分第七方面公开：
PDGFRβ磷酸化和/或PLCγ磷酸化和/或Scr磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达抑制剂，含有环状二芳基庚烷醇。所述环状二芳基庚烷醇在一些情况下为杨梅醇或杨梅醇衍生物。
在其他药物中含有前段抑制剂，也应当视为使用。含有该抑制剂的其他药物在用于治疗某些疾病时，只要抑制剂实际产生了与本发明相同作用的均应为等同治疗方案。
抑制剂为一种混合物，含有环状二芳基庚烷醇和其他药物；其中，环状二芳基庚烷醇在抑制剂中对相应机理的有效作用浓度为3μM-5mg/Kg。
抑制剂含有杨梅醇或其衍生物中至少一种。
其中之一，抑制剂含有有效成分杨梅醇以及其他辅助药物，由此形成一种新的针对PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达具有抑制作用的药剂组合物。
其中之二，抑制剂含有有效成分杨梅醇衍生物以及其他辅助药物，由此形成一种新的针对PDGFRβ磷酸化和/或PDGFRβ下游通路表达具有抑制作用的药剂组合物。
由此，使得杨梅醇或其衍生物与其他组分混合形成一种新的用于防治相关疾病的制剂、药物。
本部分第八方面结合具体的实验项目公开：
本部分实验测试使用的杨梅醇购自Chem Faces公司，型号CFN98430。分别采用下述步骤中的方法检测如下实验中VSMC的表型转换情况。
应用EdU细胞增殖实验检测VSMC细胞增殖情况，应用细胞划痕实验检测VSMC细胞迁移情况。检测方法参见Huang D,WangY,Wang L,Zhang F,Deng S,Wang R,Zhang Y,HuangK.Poly(ADP-ribose)polymerase 1 is indispensable for transforming growthfactor-βInduced Smad3 activation in vascular smooth muscle cell.PLoSOne.2011；6(10):e27123.具体过程如下：
EdU细胞增殖实验：将大鼠来源的原代细胞(VSMC)接种于96孔板中，分别使用不同浓度(3μM,10μM,30μM)的杨梅醇和载体DMSO处理细胞1h。1h后，以上四组处理用PDGF-BB(20ng/ml)刺激48h(对照组为等体积的DSMO)，EdU的掺入分析按照制造商的说明进行，结果用Olympus cellSens Entry拍摄。
细胞划痕实验：将VSMC接种于6孔板中，培养至80％密度。细胞单层用1ml的移液管尖端划伤。细胞与不同浓度的杨梅醇预孵育1h后，用PDGF-BB(20ng/ml)刺激48h(对照组为等体积的DSMO)，然后在含有体积浓度比为10％的胎牛血清的DMEM中培养。使用OlympuscellSens entry观察细胞，使用Image J程序测量伤口闭合率。
实验一
对C57BL/6小鼠行颈动脉结扎损伤诱导内膜增生或假手术后，分别腹腔注射杨梅醇(5mg/kg·d)和载体(DMSO)。14天后，老鼠被安乐死，对受伤的血管进行血管切除手术。用质量浓度为4％的甲醛固定石蜡包埋后，将血管切段。图2中A从左到右分别为假手术+载体处理组(Sham+Vehicle)，损伤+载体处理组(Injured+Vehicle)，损伤+杨梅醇处理组(Injured+Myricanol)，利用HE染色和Masson染色实验检测小鼠颈动脉结扎后的血管形态。结果如图2所示。其中图2中A第一行为HE染色检测血管形态，第二行为Masson染色检测血管形态。图2中B为A中对应的以上三组小鼠新生内膜平均厚度的统计图。图2中C为A中对应的以上三组小鼠新生内膜与中膜厚度比值的统计图。
由图2可知，与假手术+载体处理组相比，小鼠行颈动脉结扎后，颈动脉新生内膜厚度增长，即血管损伤导致血管平滑肌细胞过度增殖；而杨梅醇可抑制血管损伤导致的血管平滑肌细胞过度增殖。
实验二
VSMC细胞给予PDGF-BB(20ng/ml)处理后，分别给予不同浓度的杨梅醇(3μM,10μM,30μM)和载体DMSO刺激。图3为不同浓度的杨梅醇利用EdU实验检测VSMC细胞增殖情况。图3中A中第一列为载体处理组，第二列为PDGF-BB+载体处理组，第三列为PDGF-BB+3μM的杨梅醇处理组，第四列为PDGF-BB+10μM的杨梅醇处理组，第五列为PDGF-BB+30μM的杨梅醇处理组。图3中B为A中对应细胞增殖统计图。图3中C为A中对应处理利用蛋白免疫印迹检测增殖蛋白表达情况及量化统计图。由图3可知，PDGF-BB处理VSMC细胞后，EdU阳性的细胞增多，增殖蛋白表达上升；进一步用杨梅醇处理后，EdU阳性的细胞减少，增殖蛋白表达量下降；且随着杨梅醇浓度增大，EdU阳性的细胞量减少，增殖蛋白表达下降。综上，PDGF-BB处理VSMC细胞后，可促进VSMC细胞的增殖，而杨梅醇可抑制PDGF-BB引起的细胞增殖，且随着杨梅醇的浓度增大，抑制作用增强。
实验三
VSMC细胞给予PDGF-BB(20ng/ml)处理后，分别给予不同浓度的杨梅醇(3μM,10μM,30μM)和载体DMSO刺激，利用细胞划痕实验检测细胞迁移能力，结果如图4所示。图4中A中第一列为载体处理组，第二列为PDGF-BB+载体处理组，第三列为PDGF-BB+3μM的杨梅醇处理组，第四列为PDGF-BB+10μM的杨梅醇处理组，第五列为PDGF-BB+30μM的杨梅醇处理组。图4中B为A中对应处理组细胞迁移统计图。由图4可知，PDGF-BB促进细胞划痕的闭合率，而杨梅醇抑制了该促进作用，且随着杨梅醇浓度的增加，对细胞划痕的闭合的抑制作用增强。
实验四
VSMC细胞给予PDGF-BB(20ng/ml)处理后，分别给予不同浓度的杨梅醇(3μM,10μM,30μM)和载体DMSO进行刺激，收集细胞，提取蛋白后，利用蛋白印迹实验检测细胞迁移蛋白的表达(MMP2、MMP9)，结果如图5所示。由图5可知，杨梅醇抑制PDGF-BB诱导的迁移蛋白MMP2、MMP9的表达水平，且随着浓度增加，该抑制作用增强。
实验五
VSMC细胞给予PDGF-BB(20ng/ml)处理后，分别给予不同浓度的杨梅醇(3μM,10μM,30μM)和载体DMSO进行刺激，收集细胞，提取蛋白后，利用蛋白印迹实验检测PDGFRβ磷酸化水平情况后，结果如图6所示。由图6可知，VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平上升；进一步使用杨梅醇处理后，PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平下降，且随着杨梅醇浓度的增加，PDGFRβ、PLCγ、Scr磷酸化水平下降。因此，PDGF-BB促进了PDGFRβ、PLCγ、Scr的磷酸化，而杨梅醇抑制了PDGFRβ、PLCγ、Scr的磷酸化，且随着杨梅醇浓度的增加，该抑制作用加强。
综上实验结果可知，杨梅醇能够直接抑制VSMC的表型转换；同时，与其具有相同核心结构的衍生物也同样具有相应的抑制作用。
本领域的技术人员可以明确，在不脱离本发明的总体精神以及构思的情形下，可以做出对于以上实施例的各种变型。其均落入本发明的保护范围之内。本发明的保护方案以本发明所附的权利要求书为准。

Claims (2)

1.杨梅醇在制备防治心血管疾病药物中的应用，其中，所述心血管疾病为血管损伤后再狭窄或心血管狭窄。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述血管损伤后再狭窄为PCI再狭窄、支架内再狭窄、旁路移植后再狭窄中任一。
CN202111353857.8A 2021-11-16 2021-11-16 杨梅醇的用途 Active CN113827583B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111353857.8A CN113827583B (zh) 2021-11-16 2021-11-16 杨梅醇的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111353857.8A CN113827583B (zh) 2021-11-16 2021-11-16 杨梅醇的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113827583A CN113827583A (zh) 2021-12-24
CN113827583B true CN113827583B (zh) 2023-02-17

Family

ID=78971214

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111353857.8A Active CN113827583B (zh) 2021-11-16 2021-11-16 杨梅醇的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113827583B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552243A (zh) * 2012-02-29 2012-07-11 浙江省中医药研究院 杨梅醇和/或杨梅酮在制备抗肿瘤药物中的应用
CN105198714A (zh) * 2015-08-14 2015-12-30 浙江省中医药研究院 杨梅醇衍生物及其制备方法和应用
CN108434127A (zh) * 2018-06-14 2018-08-24 苏州沪云肿瘤研究中心股份有限公司 一种杨梅醇和/或杨梅酮在制备具有预防和/或治疗炎症性肠病的药物中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2871378B1 (fr) * 2004-06-15 2007-03-30 Seppic Sa Nouveau medicament a base de flavanois et de leurs derives et son utilisation pour obtenir un medicament destine a la prevention de la restenose et de la maladie atheromateuse chez les patients coronariens
US9598338B2 (en) * 2012-04-06 2017-03-21 University Of South Florida Myricanol derivatives and uses thereof for treatment of neurodegenerative diseases

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552243A (zh) * 2012-02-29 2012-07-11 浙江省中医药研究院 杨梅醇和/或杨梅酮在制备抗肿瘤药物中的应用
CN105198714A (zh) * 2015-08-14 2015-12-30 浙江省中医药研究院 杨梅醇衍生物及其制备方法和应用
CN108434127A (zh) * 2018-06-14 2018-08-24 苏州沪云肿瘤研究中心股份有限公司 一种杨梅醇和/或杨梅酮在制备具有预防和/或治疗炎症性肠病的药物中的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
3,5-Dimethoxy-4-hydroxy myricanol attenuated oxidative stress-induced toxicity on cardiomyoblast cells;Wang，Yl等;《Human & Experimental Toxicology》;20210930;第40卷(第9期);第1485-1495页 *
Protective effects of Myrica rubra flavonoids against hypoxia/reoxygenation-induced cardiomyocyte injury via the regulation of the PI3K/Akt/GSK3β pathway;Wang，min等;《International Journal of Molecular Medicine》;20191231;第43卷(第5期);第2133-2143页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113827583A (zh) 2021-12-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109069648B (zh) 胆汁淤积性和纤维化疾病的治疗方法
Wei et al. The IL-6/STAT3 pathway regulates adhesion molecules and cytoskeleton of endothelial cells in thromboangiitis obliterans
Li et al. Quercetin attenuates trauma-induced heterotopic ossification by tuning immune cell infiltration and related inflammatory insult
Chen et al. Pentoxifylline inhibits PDGF-induced proliferation of and TGF-β-stimulated collagen synthesis by vascular smooth muscle cells
JP2003501151A (ja) 動脈再狭窄治療用装置および化合物
Shin et al. Iron released from reactive microglia by noggin improves myelin repair in the ischemic brain
Morishita A scientific rationale for the CREST trial results: evidence for the mechanism of action of cilostazol in restenosis
Cai et al. MicroRNA-24 attenuates vascular remodeling in diabetic rats through PI3K/Akt signaling pathway
Kazmierczak et al. Prognostic usefulness of IL-6 and VEGF for the occurrence of changes in coronary arteries of patients with stable angina and implanted stents.
Yang et al. Intermittent hypoxia alleviates β-aminopropionitrile monofumarate induced thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice
Hirschberg et al. Cinaciguat prevents neointima formation after arterial injury by decreasing vascular smooth muscle cell migration and proliferation
Yoshimoto et al. Cilostazol may prevent cerebral vasospasm following subarachnoid hemorrhage
Zhou et al. Magnolol prevents ossified tendinopathy by inhibiting PGE2-induced osteogenic differentiation of TDSCs
CN113827583B (zh) 杨梅醇的用途
CN113908150A (zh) 茶黄素-3,3′-双没食子酸酯或其衍生物在平滑肌表型转化抑制剂中的用途
HEMM1NGSEN et al. Adaptive changes in cerebral blood flow and oxygen consumption during ethanol intoxication in the rat
CA2583576A1 (en) Chimera (double) decoy
CN112618544A (zh) 阿帕替尼作为平滑肌表型转化抑制剂的用途
Jaschke et al. Local cyclin‐dependent kinase inhibition by flavopiridol inhibits coronary artery smooth muscle cell proliferation and migration: Implications for the applicability on drug‐eluting stents to prevent neointima formation following vascular injury
CN113559244B (zh) Ctrp13脂肪因子的新用途
Fonseca et al. Chronic endothelial dysfunction after oversized coronary balloon angioplasty in pigs: a 12-week follow-up of coronary vasoreactivity in vivo and in vitro
Marco et al. Effect of aspirin and ticlopidine on plasma tissue factor levels in stable and unstable angina pectoris
CN114010635A (zh) 尼拉帕尼及其衍生物的新用途
Coats et al. Inhibition of non-Ras protein farnesylation reduces in-stent restenosis
KR100516026B1 (ko) 코디세핀을 유효성분으로 하는 혈관재협착 방지용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant