CN113754676B - 一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法。本发明所制备的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的含量占光果甘草总质量的10％以上，不仅克服了光甘草定自身不溶于水的理化性质的限制，本申请制得的具有高生物利用度的水溶性光甘草定在水中的最大溶解度可达73.9g/100mL，而且本申请制得的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的最大生物利用度为普通水溶性光甘草定的3倍左右。利用本申请的具有高生物利用度的水溶性水溶性光甘草定的制备方法，其制备工艺稳定，易于规模化生产，同时也扩展了光甘草定的应用范围。

Description

一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法
技术领域
本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法。
背景技术
决定人体皮肤肤色的主要因素是黑色素的含量和分布，而酪氨酸酶是黑色素形成过程中的关键性限速酶。目前对肌肤美白的研究和应用中，很多都是通过对酪氨酸酶的活性调控来抑制黑色素，最终达到美白效果。
自然界中的光果甘草为多年生草本植物，其植物体内含有的活性成分主要是三萜类、黄酮类、多糖类、氨基酸、生物碱和有机酸等化合物。经研究发现，光果甘草提取物既可以抑制酪氨酸酶的活性，将一部分酪氨酸酶从黑色素合成的催化环中带走，阻止底物与酪氨酸酶结合，从而达到抑制黑色素的合成；又可以抑制多巴色素互变和DHICA氧化酶的活性，具有与SOD(过氧化物歧化酶)和维生素E相似的清除氧自由基的能力，同时具有强抗氧化性，可以淡化色斑，是一种用于抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、防紫外线、防晒、美白亮肤和祛斑的优质化妆品添加物。
光甘草定是一种从光果甘草的根茎中提取的多酚类黄酮，约占光果甘草黄酮类成分的11％，在光果甘草中含量约为0.1％～0.3％。光甘草定常温下性质稳定，不仅具有降血脂、降血压和预防心血管疾病等重要的临床药理作用，而且在皮肤抗氧化和美白祛斑等方面也具有一定的价值，在皮肤保养和化妆品界备受关注。研究表明光甘草定可以降低B16鼠黑素瘤细胞中T1和T3酪氨酸酶及同工酶的活性，近来这也得到一些应用研究和临床疗效的证实，而且已经开发出了高档美白化妆品并推广上市。
由于光甘草定的非水溶性的特殊理化特性，以及人体皮肤组织结构所具有的独特屏障功能，使其透皮渗透及主动吸收受到明显影响和制约，大大降低了光甘草定本身应具有的生物学作用和临床疗效。为了进一步加强和完善光甘草定在美容化妆品中应用的科学性，提高光甘草定在皮肤美白祛斑及抗衰老方面的功效，已有研究者开展了对光甘草定的分离纯化研究，但往往忽视了光甘草定的水不溶性的理化特性，现有技术在如何改善光甘草定的溶解性以及皮肤吸收等方面缺乏系统研究。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提出一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，该制备方法制备的光甘草定克服了自身水不溶性的理化性质，提高了水溶性光甘草定的生物利用率，扩展了光甘草定的应用范围。
为了达到上述技术目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
本发明提出一种具有高生物利用度的水溶光甘草定的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，在温度为50-80℃条件下，将光果甘草的根和茎进行干燥，粉碎，过筛，得到光果甘草粉末；
步骤2，将该光果甘草粉末、黑胡椒粉和羟丙基-β-环糊精混合均匀，得到混合粉末；再加入醇溶液，分别进行多次的加热回流提取和减压精滤，得到混合滤液；具体包含以下子步骤：
步骤2.1，将该光果甘草粉末、黑胡椒粉和羟丙基-β-环糊精混合均匀，得到混合粉末，然后加入醇溶液，进行加热回流提取，减压精滤，得到分层滤液，该分层滤液的底层为滤渣；
步骤2.2，将该分层滤液中的滤渣取出，加入到醇溶液中，进行加热回流提取，再进行减压精滤，得到清滤液；
步骤2.3，将该分层滤液和清滤液混合均匀，得到混合滤液。
步骤3，将该混合滤液进行浓缩除醇、得到浓缩液，再向该浓缩液中加入冷水进行降温，减压精滤，得到第一滤液；
步骤4，将得到的第一滤液依次进行初次除杂，初次脱色，减压精滤，得到第二滤液；
步骤5、用大孔吸附树脂对该第二滤液进行二次除杂和二次脱色，浓缩，真空干燥，粉碎，过筛，得到具有高生物利用度的水溶性光甘草定。
优选的，在步骤1中，对光果甘草粉末进行过筛的筛网为60-80目，制得的光果甘草粉末的含水量不超过10％。
优选的，在步骤2中，黑胡椒粉的添加质量占所述混合粉末质量的0.02‰-1‰，羟丙基-β-环糊精的添加质量占所述混合粉末质量的1‰-2％。
优选的，在步骤2中，醇溶液为浓度为75％-95％的甲醇溶液或乙醇溶液；加热回流提取的温度为50-90℃；加热回流提取的时间为1-3小时；混合粉末与醇溶液的质量比为1：(5-50)。
优选的，在步骤3中，对混合液进行浓缩除醇的温度为50—80℃；加入冷水的温度为0-30℃，加入冷水的体积为该浓缩液体积的0.5-2倍。
优选的，在步骤4中，进行初次除杂和初次脱色的温度分别为30-70℃，进行初次除杂和初次脱色的时间分别为1-3小时。
优选的，在步骤4中，通过活性炭对第一滤液进行初次脱色，活性炭的质量占第一滤液总质量的0.5％-5％；通过聚合氯化铝对第一滤液进行初次除杂，聚合氯化铝的质量占第一滤液总质量的0.1％-1％。本发明主要是利用活性炭的物理吸附作用对第一滤液进行初次脱色，聚合氯化铝主要用于除去第一滤液中的杂质，例如酸性多糖等杂质成分。
优选的，在步骤5中，进行二次除杂和二次脱色的温度分别为30-70℃，进行二次除杂和二次脱色的时间分别为1-3小时。
优选的，在步骤5中，大孔吸附树脂的流出速度为1-6倍的柱体积，浓缩后的滤液的与浓缩后的滤液中水的比重为1.0-1.3。
优选的，在步骤5中，真空干燥的温度为40-70℃，真空干燥的时间为2-8小时。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明制备的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的含量占光果甘草总质量的10％以上，制备工艺稳定，易于规模化生产。
(2)本发明所制备的具有高生物利用度的水溶性光甘草定克服了自身不溶于水的理化性质，该水溶性光甘草定在水中的最大溶解度为73.9g/100mL，改善了光甘草定的溶解性，极大的扩展了光甘草定的应用范围。
(3)本发明所制备的具有高生物利用度的水溶性光甘草定，其最大生物利用度为普通光甘草定的3倍左右。
附图说明
图1为本发明具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法的流程图；
图2为本发明具有高生物利用度的水溶性光甘草定的经皮渗透试验测试图；
图3为一般方法制备的普通水溶性光甘草定的经皮渗透试验测试图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域的技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
典型实施例1
参照图1：一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、在60℃时，将光果甘草根和茎干燥至含水量为9.6％，粉粹过60目筛，得到光果甘草根粉末。
步骤2，首先，将1kg光果甘草根粉末、0.15g黑胡椒粉和10g羟丙基-β-环糊精混合均匀，得到混合粉末，加入体积为15L，浓度为75％的甲醇溶液，在70℃条件下加热回流提取1.5h，再进行减压精滤，得到分层滤液，该分层滤液的底层为滤渣；然后，将分层滤液中的滤渣取出，加入到体积为15L，浓度为75％的甲醇溶液中，在70℃条件下再次加热回流提取1.5h，再进行减压精滤，得到清滤液；最后，将得到的分层滤液和清滤液混合均匀，得到混合滤液。
步骤3，在50℃温度下，将所得混合滤液进行浓缩除醇，得到浓缩液，并向该浓缩液中加入20℃水进行降温，再进行减压精滤，得到第一滤液。
步骤4，向第一滤液中加1％活性炭和1％聚合氯化铝，然后在40℃条件下进行1小时的初次除杂和初次脱色，减压精滤，得第二滤液；活性炭用于初次脱色，聚合氯化铝用于初次除杂。
步骤5，将第二滤液以3倍柱体积的流速通过大孔吸附树脂，进行二次除杂和二次脱色，得到流出液；然后将该流出液在50℃条件下浓缩，得到的浓缩液的比重为1.2，然后将该浓缩液在50℃条件下进行真空干燥4小时，再粉碎过60目筛网，得到12.11g水溶性光甘草定。
典型实施例2
参照图1：一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，在60℃时，将光果甘草根和茎干燥至含水量为8.6％，粉碎过60目筛，得到光果甘草茎粉末。
步骤2，首先，将1kg光果甘草根粉末、0.12g黑胡椒粉和8.5g羟丙基-β-环糊精混合均匀，再加入体积为10L，浓度为95％的乙醇溶液，在70℃条件下加热回流提取2h，再进行减压精滤，得到分层滤液，该分层滤液的底层为滤渣；然后，将分层滤液中的滤渣取出，加入到体积为10L，浓度为95％的乙醇溶液中，在70℃条件下再次加热回流提取2h，再进行减压精滤，得清滤液；最后，将所得清滤液和分层滤液混合均匀，得到混合滤液。
步骤3，在50℃温度下，将所得混合滤液进行浓缩除醇，得到浓缩液，并向该浓缩液中加入20℃水中降温，再进行减压精滤，得到第一滤液。
步骤4，向第一滤液中加3％活性炭和0.5％聚合氯化铝，然后在50℃条件下进行2小时的初次除杂和初次脱色，减压精滤，得第二滤液；活性炭用于初次脱色，聚合氯化铝用于初次除杂。
步骤5，将第二滤液以2.5倍柱体积的流速通过大孔吸附树脂，进行二次除杂和二次脱色，得到流出液；然后将该流出液在50℃条件下浓缩，得到的浓缩液的比重为1.2，然后将该浓缩液在60℃条件下真空干燥6小时，再粉碎过60目筛，得10.50g水溶性光甘草。
对实施例1中所得的水溶性光甘草定进行测定，其中光甘草定含量为10.01％，水中最大溶解度为73.87g/100mL。
对实施例2中所得的水溶性光甘草定进行测定，其中光甘草定含量为12.39％，水中最大溶解度为73.90g/100mL。
为了测试本发明所制得的水溶性光甘草定的生物利用度，对所制得的水溶性光甘草定进行了经皮渗透试验：
试验仪器：YB-P6型智能透皮试验仪。
试验原理：该试验通过将制得的水溶性光甘草定通过皮肤渗透的体外试验来反映该水溶性光甘草定经过皮肤时，皮肤的吸收速度。具体是将剥离的皮肤夹在扩散池中，然后将制得的水溶性光甘草定至于池中，通过智能透皮试验仪来考察待测样本的透皮速率，通过测定不同时间段池中样品累积的渗透百分比，来描述其体外透皮行为。
本发明制得的水溶性光甘草定经YB-P6型智能透皮试验仪测试。试验仪显示的电压值，该电压值就是该透皮试验的皮肤吸收速率，用来直观反映本发明制得的光甘草定的生物利用度。本发明实施例1和实施例2得到的高生物利用度的水溶性光甘草定，结合图2和图3的对比可知：
参照图2，显示了利用本发明制得的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的经皮渗透试验测试结果，参照图3，显示了利用现有技术制得的普通水溶性光甘草定的经皮渗透试验测试结果，通过对比可以明显看出，该试验分别对本申请制得的具有高生物利用度的水溶性光甘草定和一般方法制得的水溶性光甘草定进行了8个小时的经皮渗透试验测试，大约在6分钟左右的时间，试验仪显示出一个压力峰值，即生物利用度最大值。本说明书中截取了这部分的图像，从图像中可以说明，通过两个测试结果出现的压力峰值的对比，可以分别反映各自的生物利用度。测试结果表明本发明制备的水溶性光甘草定通过测定其最大生物利用度是普通水溶性光甘草定的3倍左右。
虽然，本说明书中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1，在温度为50-80℃条件下，将光果甘草的根和茎进行干燥、粉碎、过筛，得到光果甘草粉末；
步骤2，将所述光果甘草粉末、黑胡椒粉和羟丙基-β-环糊精混合均匀，得到混合粉末；再加入醇溶液，分别进行多次的加热回流提取和减压精滤，得到混合滤液；
在步骤2中，所述黑胡椒粉的添加质量占所述混合粉末质量的0.02‰-1‰，所述羟丙基-β-环糊精的添加质量占所述混合粉末质量的1‰-2％；
步骤3，将所述混合滤液进行浓缩除醇，得到浓缩液，再向所述浓缩液中加入冷水进行降温，减压精滤，得到第一滤液；
步骤4，将所述第一滤液依次进行初次除杂，初次脱色，减压精滤，得到第二滤液；
步骤5、用大孔吸附树脂对所述第二滤液进行二次除杂和二次脱色，浓缩，真空干燥，粉碎，过筛，得到具有高生物利用度的水溶性光甘草定。
2.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：步骤2具体包括以下子步骤：
步骤2.1，将所述光果甘草粉末、黑胡椒粉和羟丙基-β-环糊精混合均匀，得到混合粉末，然后加入醇溶液，进行加热回流提取、减压精滤，得到分层滤液，该分层滤液的底层为滤渣；
步骤2.2，将所述分层滤液中的滤渣取出，加入到醇溶液中，进行加热回流提取，再进行减压精滤，得到清滤液；
步骤2.3，将所述分层滤液和清滤液混合均匀，得到混合滤液。
3.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤1中，对所述光果甘草粉末进行过筛的筛网为60-80目。
4.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤2中，所述醇溶液为甲醇溶液或乙醇溶液；所述加热回流提取的温度为50-90℃；所述加热回流提取的时间为1-3小时；所述混合粉末与醇溶液的质量比为1∶(5-50)。
5.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤3中，对所述混合滤液进行浓缩除醇的温度为50-80℃；加入的所述冷水的温度为0-30℃，加入的所述冷水的体积为所述浓缩液的体积的0.5-2倍。
6.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：
在步骤4中，进行所述初次除杂和初次脱色的温度分别为30-70℃，进行所述初次除杂和初次脱色的时间分别为1-3小时；
在步骤5中，进行所述二次除杂和二次脱色的温度分别为30-70℃，进行所述二次除杂和二次脱色的时间分别为1-3小时。
7.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤4中，通过活性炭对第一滤液进行所述初次脱色，所述活性炭的质量占第一滤液总质量的0.5％-5％；通过聚合氯化铝对第一滤液进行所述初次除杂，所述聚合氯化铝的质量占第一滤液总质量的0.1％-1％。
8.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤5中，所述浓缩后的滤液的比重为1.0-1.3。
9.根据权利要求1所述的具有高生物利用度的水溶性光甘草定的制备方法，其特征在于：在步骤5中，所述真空干燥的温度为40-70℃，所述真空干燥的时间为2-8小时。
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