发明内容
本发明的目的在于提供一种壮药血党干膏粉及其在制备抗炎镇痛药物中的应用。
本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的:
一种壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用,所述的壮药血党为紫金牛科植物九管血(Ardisia brevicaulis Diels)的干燥全株。
上述的壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用,所述药物包含壮药血党干膏粉单独或与其他药物组方制成的制剂;所述的药物制剂包含药剂学上的任何剂型。
所述的壮药血党干膏粉的提取方法,包括如下步骤:
(1)将壮药血党药材切碎,加入药材重量10倍量的水浸泡1h后,加热煮沸2h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;合并3次滤液,90℃浓缩至相对密度为1.05~1.25的浓缩药液;
(2)浓缩药液放冷至室温,边搅拌边缓慢加入体积浓度为90%~95%的乙醇,使浓缩药液醇沉至浓缩药液中乙醇的体积浓度为70%—75%,静置24h,过滤,收集醇沉滤液;再用体积浓度为70%~75%的乙醇洗涤沉淀3次,每次分别过滤,收集各次洗涤液,将3次洗涤液与上述收集醇沉滤液合并;
(3)用减压浓缩的气压为-0.05MPa,温度为70℃~80℃,进行减压蒸馏、浓缩回收乙醇,得相对密度为1.20~1.30浸膏;浸膏用真空度为-0.08MPa,温度为65℃~70℃,进行真空干燥,得干膏;干膏粉碎,过80目筛网得干膏粉。
上述提取方法中涉及的提取、过滤、浓缩、干燥、粉碎、过筛均为本领域的常规操作。
本发明以壮药血党干膏粉对二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀的影响,对小鼠棉球肉芽肿质量的影响;对热板法致小鼠疼痛的影响,对醋酸致小鼠疼痛扭体反应的影响为抗炎镇痛作用药效学指标,进行抗炎镇痛作用的药效学评价,通过药理试验研究,结果发现,壮药血党干膏粉具有明显的抗炎镇痛作用,可单独做为中药制剂,也可以与其他药物组方制成抗炎镇痛方面的药物。
本发明的有益效果是:
1、本发明采用水提醇沉法,壮药血党药材水提取后,将提取液浓缩至相对密度为1.05~1.25的浓缩药液,放冷至室温,边搅拌边缓慢加入体积浓度为90%~95%的乙醇,使浓缩药液醇沉至浓缩药液中乙醇的体积浓度为70%—75%,静置24h,进行醇沉,将淀粉、无机盐、蛋白质、多糖、果胶、树胶等部分杂质进行沉淀,过滤后除去,除去杂质进行精制,保留纯化药物有效成分,得醇沉滤液,再用体积浓度为70%~75% 的乙醇洗涤沉淀3次,以减少药物有效成分在沉淀中的包裹损失,每次分别过滤,收集各次洗涤液,将3次洗涤液与上述醇沉滤液合并,进行减压蒸馏回收乙醇,浓缩至相对密度为1.20~1.30的浸膏;对浸膏进行真空干燥,得干膏;干膏粉碎,过80目筛网得壮药血党干膏粉。
2、本发明首次公开了壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用。本发明通过药理试验研究,结果显示,壮药血党干膏粉能明显降低二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀度,明显降低小鼠棉球肉芽肿质量;明显提高小鼠热板痛阈值,明显减少醋酸致小鼠疼痛扭体反应次数,表明壮药血党干膏粉具有明显抗炎镇痛作用,可用于制备抗炎镇痛药物方面的应用。
具体实施方式
为了更好地说明本发明的技术方案,下面用实施例的形式提供壮药血党干膏粉的提取方法及其抗炎镇痛药理试验结果,说明其在中医药壮药技术领域的用途。
实施例1
一种壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用,所述的壮药血党为紫金牛科植物九管血(Ardisia brevicaulis Diels)的干燥全株。
所述的壮药血党干膏粉的提取方法,包括如下步骤:
(1)将壮药血党药材切碎,加入药材重量10倍量的水浸泡1h后,加热煮沸2h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;合并3次滤液,90℃浓缩至相对密度为1.05~1.25的浓缩药液;
(2)浓缩药液放冷至室温,边搅拌边缓慢加入体积浓度为90%的乙醇,使浓缩药液醇沉至浓缩药液中乙醇的体积浓度为70%,静置24h,过滤,收集醇沉滤液;再用体积浓度为70%的乙醇洗涤沉淀3次,每次分别过滤,收集各次洗涤液,将3次洗涤液与上述收集醇沉滤液合并;
(3)用减压浓缩的气压为-0.05MPa,温度为70℃,进行减压蒸馏、浓缩回收乙醇,得相对密度为1.20~1.30浸膏;浸膏用真空度为-0.08MPa,温度为65℃~70℃,进行真空干燥,得干膏;干膏粉碎,过80目筛网得干膏粉。
实施例2
一种壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用,所述的壮药血党为紫金牛科植物九管血(Ardisia brevicaulis Diels)的干燥全株。
所述的壮药血党干膏粉的提取方法,包括如下步骤:
(1)将壮药血党药材切碎,加入药材重量10倍量的水浸泡1h后,加热煮沸2h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;合并3次滤液,90℃浓缩至相对密度为1.05~1.25的浓缩药液;
(2)浓缩药液放冷至室温,边搅拌边缓慢加入体积浓度为92%的乙醇,使浓缩药液醇沉至浓缩药液中乙醇的体积浓度为73%,静置24h,过滤,收集醇沉滤液;再用体积浓度为73%的乙醇洗涤沉淀3次,每次分别过滤,收集各次洗涤液,将3次洗涤液与上述收集醇沉滤液合并;
(3)用减压浓缩的气压为-0.05MPa,温度为75℃,进行减压蒸馏、浓缩回收乙醇,得相对密度为1.20~1.30浸膏;浸膏用真空度为-0.08MPa,温度为65℃~70℃,进行真空干燥,得干膏;干膏粉碎,过80目筛网得干膏粉。
实施例3
一种壮药血党干膏粉在制备抗炎镇痛药物中的应用,所述的壮药血党为紫金牛科植物九管血(Ardisia brevicaulis Diels)的干燥全株。
所述的壮药血党干膏粉的提取方法,包括如下步骤:
(1)将壮药血党药材切碎,加入药材重量10倍量的水浸泡1h后,加热煮沸2h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;滤渣再加10倍量的水后加热煮沸1h,过滤;合并3次滤液,90℃浓缩至相对密度为1.05~1.25的浓缩药液;
(2)浓缩药液放冷至室温,边搅拌边缓慢加入体积浓度为95%的乙醇,使浓缩药液醇沉至浓缩药液中乙醇的体积浓度为75%,静置24h,过滤,收集醇沉滤液;再用体积浓度为75%的乙醇洗涤沉淀3次,每次分别过滤,收集各次洗涤液,将3次洗涤液与上述收集醇沉滤液合并;
(3)用减压浓缩的气压为-0.05MPa,温度为80℃,进行减压蒸馏、浓缩回收乙醇,得相对密度为1.20~1.30浸膏;浸膏用真空度为-0.08MPa,温度为65℃~70℃,进行真空干燥,得干膏;干膏粉碎,过80目筛网得干膏粉。
实施例4
壮药血党干膏粉抗炎镇痛作用的药理试验研究。
试验所用的壮药血党干膏粉是根据实施例3所述的壮药血党干膏粉的提取方法提取得到的。
1. 壮药血党干膏粉对二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀的影响(抗炎实验)。
选取体重18~22g的SPF级雄性健康昆明种小鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为模型对照组、阳性对照药阿司匹林组、壮药血党干膏粉高、中、低剂量组。各组小鼠每日灌胃给药一次,模型对照组给予等体积蒸馏水,连续7d,末次给药后1h,各组每只小鼠右耳廓内外两面均匀涂抹二甲苯0.1ml致炎,左耳不涂作对照。涂抹二甲苯30min后,小鼠颈椎脱臼法处死,剪下两耳廓,左右耳廓重叠对齐,用内径8㎜的打孔器,在同一部位凿取两圆耳片,于电子分析天平上称质量,以两耳片质量差值为炎症肿胀度,并计算肿胀抑制率。
肿胀抑制率=[(模型组肿胀度均值-给药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值 ]×100%
数据进行统计学t检验,结果见表1。
由表1可知,与模型对照组比较,壮药血党干膏粉高、中、低剂量组均能明显降低二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀度,表明壮药血党干膏粉具有明显抗炎作用。
2. 壮药血党干膏粉对小鼠棉球肉芽肿的影响(抗炎实验)。
选取体重18~22g的SPF级健康昆明种小鼠50只,随机分为5组,每组10只,雌雄各半,分别为模型对照组、阳性药阿司匹林组、壮药血党干膏粉高、中、低剂量组。各组小鼠用乙醚浅麻醉,在小鼠腹部右侧腹股沟处,用碘伏消毒,然后用手术剪刀切开0.5㎝长的小口,用眼科镊子将质量为10㎎的高压灭菌棉球从小切口植入皮下,缝合小鼠切口。术后次日各组小鼠开始给药,每日灌胃给药一次,模型对照组给予同体积蒸馏水,连续7d,末次给药后1h,小鼠颈椎脱臼法处死,打开原切口,取出棉球及肉芽组织,至60℃烘箱中恒温干燥12h,于电子分析天平上称质量,将称得的质量减去棉球原质量,即为肉芽肿质量,并计算小鼠肉芽肿抑制率。
肉芽肿抑制率=[(模型组肉芽肿质量均值-给药组肉芽肿质量均值)/模型组肉芽肿质量均值 ]×100%
数据进行统计学t检验,结果见表2。
由表2可知,与模型对照组比较,壮药血党干膏粉高、中、低剂量组均能明显降低小鼠棉球肉芽肿质量,表明壮药血党干膏粉具有明显的抗炎作用。
3. 壮药血党干膏粉对热板法致小鼠疼痛的影响(镇痛实验)。
选取体重18~22g的SPF级雌性健康昆明种小鼠,将小鼠置于温度55℃±0.5℃的YLS-6B型智能热板仪上,测定小鼠的痛阈值(小鼠接触热板至舔后足的时间),凡舔后足时间小于5秒(S)或大于30秒(S)及跳跃者弃之不用,选取合格小鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为模型对照组、阳性药阿司匹林组、壮药血党干膏粉高、中、低剂量组。各组小鼠给药前,按同法重复二次测定小鼠的正常痛阈值,每次间隔15min,取两次正常痛阈值平均值,作为该组小鼠给药前的痛阈值。各组小鼠每日灌胃给药一次,模型对照组给予同体积蒸馏水,连续7d,末次给药后30min,60min,120min按同法分别测定各组小鼠的痛阈值,痛阈值超过60秒(S)无反应以60秒(S)计。数据进行统计学t检验,结果见表3.
由表3可知,与给药前及模型对照组比较,壮药血党干膏粉高、中、低剂量组均能明显提高小鼠痛阈值,表明壮药血党干膏粉具有明显的镇痛作用。
4. 壮药血党干膏粉对醋酸致小鼠扭体反应的影响(镇痛实验)。
选取体重18~22g的SPF级健康昆明种小鼠50只,随机分为5组,每组10只,雌雄各半,分别为模型对照组、阳性药阿司匹林组、壮药血党干膏粉高、中、低剂量组。各组小鼠每日灌胃给药一次,模型对照组给予同体积蒸馏水,连续7d,末次给药后1h,各鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2 ml /只,观察记录15min内小鼠因疼痛出现扭体反应的次数,并计算疼痛抑制率。
疼痛抑制率=[(模型对照组扭体次数均值-给药组扭体次数均值)/模型对照组扭体次数均值 ]×100%
数据进行统计学t检验,结果见表4。
由表4可知,与模型对照组比较,壮药血党干膏粉高、中、低剂量组均能明显减少醋酸致小鼠疼痛扭体反应的次数,表明壮药血党干膏粉具有明显镇痛作用。
结果表明,壮药血党干膏粉能明显降低二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀度,明显降低小鼠棉球肉芽肿质量;明显提高小鼠热板痛阈值,明显减少醋酸致小鼠疼痛扭体反应次数,表明壮药血党干膏粉具有明显抗炎镇痛作用。