CN113712945A - 4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用及抗肿瘤组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了4‑氯‑3‑乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用及抗肿瘤组合物,属于肿瘤治疗技术领域。4‑氯‑3‑乙基苯酚与化疗药物如顺铂、紫珊酮、5‑氟尿嘧啶、阿霉素联合用药,能显著提高耐药性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,降低抗肿瘤药物使用剂量,从而提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效应,降低化疗药物对机体正常细胞的毒副作用,为肿瘤尤其是耐药性肿瘤的治疗提供了新的途径和手段。
Description
技术领域
本发明涉及肿瘤治疗技术领域,具体涉及4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用及抗肿瘤组合物。
背景技术
恶性肿瘤是一种危害人类健康的重大疾病,药物化疗是目前消灭肿瘤细胞最重要的手段之一,但这些药物基本都有细胞毒性,在杀伤肿瘤细胞的同时对正常组织器官有损害或毒性作用;此外,肿瘤细胞耐药性获得也是目前导致化疗失败的主要原因。据报道,肿瘤每年导致全世界超过六百万人死亡,全球每年新增一千万病例中,超过50%发生于发展中国家。虽然肿瘤治疗的方法和技术有所发展,但是仅有不到一半的肿瘤对化疗敏感,超过的一半肿瘤能对化疗药物产生耐药,而一旦产生耐药,现有的医疗手段将无能为力。肿瘤化疗产生的耐药性已成为其治疗失败最常见而又难以解决的问题。
肿瘤耐药性形成机制为一种多步骤、多基因和多因素综合作用的结果,主要包括肿瘤细胞DNA拓扑异构酶的抑制、谷胱甘肽转移酶的提高、药物外排转运体表达增加或活性增强、抗凋亡信号通路激活或抗凋亡基因过表达等。而目前临床上获批使用的增敏剂,如维拉帕米等,副毒作用较大,因此,寻找高效、低毒的在抗肿瘤药物增敏剂具有重要的意义。4-氯-3-乙基苯酚为白色至浅澄色的结晶固体,它是肌浆网Ca2+通道兰尼碱受体的一种特异性激动剂。4-氯-3-乙基苯酚作为肿瘤治疗的增敏剂的应用国内外尚未有见报道。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种兰尼碱受体激动剂4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用,4-氯-3-乙基苯酚英文名为4-Chloro-3-fluorophenol,CAS number:14143-32-9,分子量:156.61,分子式为ClC6H3(C2H5)OH,结构式如图1所示,能提高耐药性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,降低抗肿瘤药物使用剂量,从而提高化疗药物的杀癌细胞效应。本发明的目的之二在于提供一种药物组合物,包含化疗药物和增敏剂,所述增敏剂为4-氯-3-乙基苯酚。本发明的目的之三在于提供所述药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:
1、4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用。
优选的,所述4-氯-3-乙基苯酚还包括4-氯-3-乙基苯酚在药学上可接受的盐类,溶剂化物和可水解酯类。
优选的,所述肿瘤为胃癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、脑癌、肝癌、皮肤癌和肺癌中的任意一种或者多种。
优选的,所述肿瘤为对阿霉素耐药的乳腺癌。
优选的,所述化疗药物为顺铂、紫珊酮、5-氟尿嘧啶、阿霉素中的任意一种或者多种。
2、一种药物组合物,包含化疗药物和增敏剂,所述增敏剂为4-氯-3-乙基苯酚。
优选的,所述4-氯-3-乙基苯酚还包括4-氯-3-乙基苯酚在药学上可接受的盐类,溶剂化物和可水解酯类。
优选的,所述化疗药物为顺铂、紫珊酮、5-氟尿嘧啶、阿霉素中的任意一种或者多种。
3、所述药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
优选的,所述肿瘤为胃癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、脑癌、肝癌、皮肤癌和肺癌中的任意一种或者多种。
本发明的有益效果在于:本发明提供了兰尼碱受体激动剂4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的新用途,其与化疗药物如顺铂、紫珊酮、5-氟尿嘧啶、阿霉素联合用药,能显著提高耐药性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,降低抗肿瘤药物使用剂量,从而提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效应,降低化疗药物对机体正常细胞的毒副作用,为肿瘤尤其是耐药性肿瘤的治疗提供了新的途径和手段。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚,本发明提供如下附图进行说明:
图1为4-氯-3-乙基苯酚化学结构式;
图2为4-氯-3-乙基苯酚对于顺铂在人胃癌非耐药细胞MKN45裸鼠体内成瘤模型的抑制效果;
图3为4-氯-3-乙基苯酚对于5-氟尿嘧啶在人结肠癌非耐药细胞HT29裸鼠体内成瘤模型的抑制效果;
图4为4-氯-3-乙基苯酚对于阿霉素在人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR裸鼠体内成瘤模型的抑制效果。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明,以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施,但所举实施例不作为对本发明的限定。
本发明中4-氯-3-乙基苯酚购自美国Sigma公司(货号:279552);顺铂、5-氟尿嘧啶和阿霉素均购自美国MCE公司(货号分别为:HY-17394、HY-90006和HY-15142);DMEM、PRMI-1640基础培养基、胎牛血清(FBS)购自美国Hyclone公司;CCK8检测试剂盒购自中国碧云天公司(货号:C0038)。
实施例1、4-氯-3-乙基苯酚对于顺铂在人胃癌非耐药细胞MKN45细胞毒性作用的影响
取对数生长期的人胃癌非耐药细胞MKN45用含10%FBS的PRMI-1640培养基调整细胞浓度至5×104个/mL,接种于96孔细胞培养板中,100μL/孔,置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养12h,然后在各孔中加入生理盐水、不同浓度4-氯-3-乙基苯酚、不同浓度顺铂、不同浓度顺铂+低中高浓度4-氯-3-乙基苯酚。加药后继续培养48小时后,在各孔中加入10μL的CCK8溶液(5mg/mL),继续培养4小时,经微量混合振荡器振荡10分钟后,全自动酶联免疫检测仪于570nm处测定吸光度值,计算抑制率和IC50,结果如表1所示。
表1、4-氯-3-乙基苯酚对于顺铂在人胃癌非耐药细胞MKN45细胞毒性作用的影响。
实施例2、4-氯-3-乙基苯酚对于5-氟尿嘧啶在人结肠癌非耐药细胞HT29细胞毒性作用的影响
取对数生长期的人结肠癌非耐药细胞HT29用含10%FBS的PRMI-1640培养基调整细胞浓度至5×104个/mL,接种于96孔细胞培养板中,100μL/孔,置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养12h,然后在各孔中加入生理盐水、不同浓度4-氯-3-乙基苯酚、不同浓度5-氟尿嘧啶、不同浓度5-氟尿嘧啶+低中高浓度4-氯-3-乙基苯酚。加药后继续培养48小时后,在各孔中加入10μL的CCK8溶液(5mg/mL),继续培养4小时,经微量混合振荡器振荡10分钟后,全自动酶联免疫检测仪于570nm处测定吸光度值,计算抑制率和IC50,结果如表2所示。
表2、4-氯-3-乙基苯酚对于5-氟尿嘧啶在人结肠癌非耐药细胞HT29细胞毒性作用的影响。
实施例3、4-氯-3-乙基苯酚逆转人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR对阿霉素耐药作用
取对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7/ADR用含10%FBS的DMEM培养基调整细胞浓度至5×104个/mL,接种于96孔细胞培养板中,100μL/孔,置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养12h,然后在各孔中加入生理盐水、不同浓度4-氯-3-乙基苯酚、不同浓度阿霉素、不同浓度阿霉素+低中高浓度4-氯-3-乙基苯酚。加药后继续培养48小时后,在各孔中加入10μL的CCK8溶液(5mg/mL),继续培养4小时,经微量混合振荡器振荡10分钟后,全自动酶联免疫检测仪于570nm处测定吸光度值,计算抑制率和IC50,结果如表3所示。
表3、4-氯-3-乙基苯酚逆转人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR对阿霉素耐药作用。
实施例4、4-氯-3-乙基苯酚对于顺铂在人胃癌非耐药细胞MKN45裸鼠体内成瘤模型的抑制作用
体内抗肿瘤实验:按8×106个细胞每只将对数期人胃癌非耐药细胞MKN45接种于体重18-22g,周龄5-8周的雌性BABL/c裸鼠腋下。观察测量,当移植瘤长至50~100mm3时,将裸鼠随机分为以下四组:①对照组:0.2mL/kg/day,腹腔注射生理盐水;②4-氯-3-乙基苯酚单用组:10mg/kg/day,腹腔注射;③顺铂单用组:2mg/kg/day,腹腔注射;④4-氯-3-乙基苯酚和顺铂联用组:4-氯-3-乙基苯酚10mg/kg/day+顺铂2mg/kg/day,腹腔注射。连续给药21天,每三天测量记录裸鼠的体重和瘤体积。最后一天给药结束24h后,处死裸鼠,将移植瘤剥离称重记录。
各组的裸鼠的体重和瘤体积变化折线图和最终各组的瘤重柱形图如图2所示,最终结果表明,在整个过程中②组裸鼠的体重没有明显变化,说明4-氯-3-乙基苯酚对裸鼠没有毒性;瘤体积的增长,联用组明显要慢于对照组以及两个单用组;最终的瘤重数据显示,②组的瘤重与对照组相比没有明显变化,③组的瘤重降低约35.86%,而4-氯-3-乙基苯酚和顺铂联用的④组的瘤重相对于对照组下降了58.36%。因此,4-氯-3-乙基苯酚在无毒的情况下,明显增强肿瘤细胞对顺铂的敏感性,使其发挥更好的抗肿瘤效果。
实施例5、4-氯-3-乙基苯酚对于5-氟尿嘧啶在人结肠癌非耐药细胞HT29裸鼠体内成瘤模型的抑制作用
体内抗肿瘤实验:按8×106个细胞每只将对数期人结肠癌非耐药细胞HT29接种于体重18-22g,周龄5-8周的雌性BABL/c裸鼠腋下。观察测量,当移植瘤长至50~100mm3时,将裸鼠随机分为以下四组:①对照组:0.2mL/kg/day,腹腔注射生理盐水;②4-氯-3-乙基苯酚单用组:10mg/kg/day,腹腔注射;③5-氟尿嘧啶单用组:20mg/kg/day,腹腔注射;④4-氯-3-乙基苯酚和5-氟尿嘧啶联用组:4-氯-3-乙基苯酚10mg/kg/day+5-氟尿嘧啶20mg/kg/day,腹腔注射。连续给药21天,每三天测量记录裸鼠的体重和瘤体积。最后一天给药结束24h后,处死裸鼠,将移植瘤剥离称重记录。
各组的裸鼠的体重和瘤体积变化折线图和最终各组的瘤重柱形图如图3所示,最终结果表明,在整个过程中②组裸鼠的体重没有明显变化,说明4-氯-3-乙基苯酚对裸鼠没有毒性;瘤体积的增长,联用组明显要慢于对照组以及两个单用组;最终的瘤重数据显示,②组的瘤重与对照组相比没有明显变化,③组的瘤重降低约29.35%,而4-氯-3-乙基苯酚和顺铂联用的④组的瘤重相对于对照组下降了45.77%。因此,4-氯-3-乙基苯酚在无毒的情况下,明显增强肿瘤细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性,使其发挥更好的抗肿瘤效果。
实施例6、4-氯-3-乙基苯酚对于阿霉素在人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR裸鼠体内成瘤模型的抑制作用
体内抗肿瘤实验:按8×106个细胞每只将对数期人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR接种于体重18-22g,周龄5-8周的雌性BABL/c裸鼠腋下。观察测量,当移植瘤长至50~100mm3时,将裸鼠随机分为以下四组:①对照组:0.2mL/kg/day,腹腔注射生理盐水;②4-氯-3-乙基苯酚单用组:10mg/kg/day,腹腔注射;③阿霉素单用组:5mg/kg/3day,腹腔注射;④4-氯-3-乙基苯酚和阿霉素联用组:4-氯-3-乙基苯酚10mg/kg/day+阿霉素5mg/kg/3day,腹腔注射。连续给药21天,每三天测量记录裸鼠的体重和瘤体积。最后一天给药结束24h后,处死裸鼠,将移植瘤剥离称重记录。
各组的裸鼠的体重和瘤体积变化折线图和最终各组的瘤重柱形图如图4所示,最终结果表明,在整个过程中②组裸鼠的体重没有明显变化,说明4-氯-3-乙基苯酚对裸鼠没有毒性;瘤体积的增长,联用组明显要慢于对照组以及两个单用组;最终的瘤重数据显示,②组的瘤重与对照组相比没有明显变化,③组的瘤重降低约36.18%,而4-氯-3-乙基苯酚和阿霉素联用的④组的瘤重相对于对照组下降了62.59%。因此,4-氯-3-乙基苯酚在无毒的情况下,明显增强肿瘤耐药细胞株对阿霉素的敏感性,使其发挥更好的抗肿瘤效果。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例,本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换,均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
Claims (10)
1.4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用,其特征在于:所述4-氯-3-乙基苯酚还包括4-氯-3-乙基苯酚在药学上可接受的盐类,溶剂化物或可水解酯类。
3.根据权利要求1所述的4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用,其特征在于:所述肿瘤为胃癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、脑癌、肝癌、皮肤癌和肺癌中的任意一种或者多种。
4.根据权利要求1所述的4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用,其特征在于:所述肿瘤为对阿霉素耐药的乳腺癌。
5.根据权利要求1所述的4-氯-3-乙基苯酚在制备肿瘤化疗药物增敏剂中的应用,其特征在于:所述化疗药物为顺铂、紫珊酮、5-氟尿嘧啶、阿霉素中的任意一种或者多种。
6.一种药物组合物,包含化疗药物和增敏剂,其特征在于,所述增敏剂为4-氯-3-乙基苯酚。
7.根据权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述4-氯-3-乙基苯酚还包括4-氯-3-乙基苯酚在药学上可接受的盐类,溶剂化物或可水解酯类。
8.根据权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述化疗药物为顺铂、紫珊酮、5-氟尿嘧啶、阿霉素中的任意一种或者多种。
9.权利要求6~8任一项所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于,所述肿瘤为胃癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、脑癌、肝癌、皮肤癌和肺癌中的任意一种或者多种。
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GR01 | Patent grant | ||
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