CN111888370A - 一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医疗保健药品领域，尤其是一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，针对虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物在制备抗肝癌药物中的应用，现提出以下方案，所述的抗肝癌药物包括抑制肝癌细胞增殖和/或肿瘤生长的药物，所述药物为虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物，所述虾青素和人参皂苷Rg3（14mg）的质量比为：虾青素10～65份，人参皂苷Rg3 5～35份。本发明本发明在体外水平发现虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物对肝癌细胞的增殖具有显著的抑制作用，并首次通过动物实验进一步验证了虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物在体内可以显著肝癌细胞的增殖和成瘤能力，有效抑制肝癌的生长。对肿瘤治疗具有重要的现实意义。
Description
技术领域
本发明涉及医疗保健药品领域，尤其涉及一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物。
背景技术
全世界每年约有700万人死于癌症，是人类死亡的第二位原因，已成为全球关注的问题。其中肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)更是一种恶性程度高、浸润与转移性强、先天性耐药的常见恶性肿瘤之一，是世界第四大肿瘤相关死亡原因。
由于肝癌发病隐匿，生长迅速，预后极差，中位生存期仅3～6个月，对肝癌的治疗还没有有效治疗手段。临床治疗癌症比较常用的方法主要是手术切除和放化疗，但由于多数患者在确诊时已丧失手术时机，因此放化疗更是大部分患者所采用的治疗方式。到目前为止，FDA批准的抗肝癌药物极少，仅见索拉非尼(2007年)和瑞戈非尼(2017)，而且临床疗效仍很有限，目前肝癌患者5年生存率不到20％。另外，随着药物治疗期的延长，临床耐药性的也发展为常态，单药治疗已受限。因此，采用联合用药抑制肿瘤生长在临床上具有重要意义。联合用药能更有效地抑制癌症，从而更有效地治疗癌症患者。
Huh7，HepG2和Hep3B细胞系是常用于体外研究肝癌的理想肿瘤模型，故选择这三种细胞系作为本研究的一种肝癌细胞的细胞模型。
虾青素是一种类胡罗卜素，天然存在与虾蟹外壳、牡蛎、鲑鱼及雨声红球藻等生物中。虾青素分子式为C40H52O4。虾青素分子结构中有很长的共轭双健链，末端还有不饱和的酮基和羟基，具有较活泼的电子效应，能吸引自由基中未配对电子或向自由基提供电子，蓉儿清除自由基，具有抗氧化作用。虾青素在增强免疫、防治肿瘤、防治糖尿病、抗炎、预防心血管疾病、维护中枢神经系统健康等有重要作用。研究表明虾青素能明显抑制体外培养的肿瘤细胞的增殖，并呈剂量依赖性，可能与其抑制过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxysome prolifera-tor-activated receptor gamma，PPARγ）活化有关。虾青素也可以诱导乳腺癌、肝癌、结肠癌等多种癌细胞的凋亡。其促凋亡机制可能通过激活Erk/MAPK和 PI3K/Akt从而抑制NF-κB 和 Wnt/β-catenin信号通路有关。
人参皂苷就是从人参、西洋参、三七等五加科植物中提取而来的，于上个世纪60年被科学家们发现，其具有抗癌活性，现已广泛用于抗癌领域。目前，被科学家们发现的人参皂苷已经超过100余种，其中包含稀有人参皂苷60余种，Rg3就是其中最早被发现的一种。人参皂苷Rg3具有抑制肝癌血管形成及抑制肝癌复发和转移的功能，改善患者的生存质量。
因此利用拼合原理，将虾青素和人参皂苷Rg3设计合成组合物，为开发治疗肝癌的药物提供了一条新的思路。
发明内容
基于在肝癌治疗中随着药物治疗期的延长，临床耐药性的也发展为常态，单药治疗已受限的技术问题，本发明提出了一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物。
本发明提出的一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，所述的抗肝癌药物包括抑制肝癌细胞增殖和/或肿瘤生长的药物，所述药物为虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物，所述虾青素和人参皂苷Rg3（14mg）的质量比为：虾青素10～65份，人参皂苷Rg3 5～35份。
优选地，所述虾青素和人参皂苷Rg3（14mg）的质量比为：30 : 15。
优选地，所述肝癌细胞选用Huh7，HepG2和Hep3B细胞系。
优选地，所述抗肝癌药物可以采用本领域的常规方法制备成药物制剂。
优选地，所述药物制剂为注射剂。
本发明中的有益效果为：
通过细胞实验发现，虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物能诱导肝癌HepG2细胞凋亡，证实可诱导人肝癌细胞株凋亡。经动物实验验证，针对人肝癌HepG2细胞系，虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物具有良好的抗肿瘤作用。
附图说明
图1为实施例中ATSA+Rg3组合物的体外细胞毒性测试图；
图2为为实施例中ATSA+Rg3组合物的体内肿瘤清除能力测试图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例1体外细胞实验
本实施例采用不同浓度的虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物处理肝癌细胞Huh7、HepG2、Hep3B，在不同时间点通过luciferease实验检测细胞增殖情况。
1）实验材料
人参皂苷Rg3购自吉林亚泰药业有限公司(批号：050302)。上述药物以无菌生理盐水配置成所需要的浓度。人源性肝癌细胞系Huh7，HepG2和Hep3B细胞购自于ATCC；雌性裸鼠(balb/c-nu/nu)购自于南京大学模式动物研究所；DMEM培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素购自于美国Gibco；DMSO购自于美国sigma。
2）luciferase实验
以每孔180μL/1000个细胞的数量接种Huh7、HepG2和Hep3B细胞于96孔板中，隔夜细胞贴壁后，配制40μM虾青素和人参皂苷Rg3，按照不同的浓度梯度每孔加入20μL含虾青素和人参皂苷Rg3的培养基DMEM(Sigma,St Louis,MO,USA)，设置虾青素和人参皂苷Rg3工作液浓度分别为0、10、20和40μM的细胞处理组。于72h按照luciferase检查试剂盒说明书检测。
实施例2动物体内实验
1）小鼠肿瘤皮下瘤模型的构建
选取15只4～6周龄、雌性裸鼠(balb/c-nu/nu)，对照组5只和实验组10只，构建肿瘤皮下瘤模型。
a.每只裸鼠皮下注射5*106个肝癌细胞HepG2，细胞重悬于200μL无血清DMEM中。
b.用注射器对15只裸鼠进行皮下注射步骤(1)的重悬细胞。
2）虾青素和人参皂苷Rg3组合物处理
裸鼠皮下注射HepG2细胞一个月，瘤体体积达到100mm3左右，随机分组，给药。用无菌水配制储存浓度为60mg/mL的虾青素和人参皂苷Rg3，PBS稀释成工作液浓度，腹腔注射给药浓度为0mg/kg虾青素和0mg/kg人参皂苷Rg3，30mg/kg虾青素和15mg/kg人参皂苷Rg3，60mg/kg虾青素和30mg/kg的人参皂苷Rg3，每个浓度分别给药5只裸鼠，100μL/只，每周给药两次(即每隔3-4天给一次药)，定期测量裸鼠体重和瘤体体积。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变或变形，都包含在本发明的保护范围之内。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述的抗肝癌药物包括抑制肝癌细胞增殖和/或肿瘤生长的药物，所述药物为虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物，所述虾青素和人参皂苷Rg3（14mg）的质量比为：虾青素10～65份，人参皂苷Rg3 5～35份。
2.根据权利要求1所述的一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述虾青素和人参皂苷Rg3（14mg）的质量比为：30 : 15。
3.根据权利要求1所述的一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述肝癌细胞选用Huh7，HepG2和Hep3B细胞系。
4.根据权利要求1所述的一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述抗肝癌药物可以采用本领域的常规方法制备成药物制剂。
5.根据权利要求1所述的一种虾青素和人参皂苷Rg3联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述药物制剂为注射剂。
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|---|---|---|---|---|
| CN113082039A (zh) * | 2021-03-30 | 2021-07-09 | 香港浸会大学深圳研究院 | 一种用于治疗索拉菲尼耐药肿瘤的组合物及其应用 |
| CN115137831A (zh) * | 2022-06-22 | 2022-10-04 | 中国海洋大学 | 虾青素在制备抗血管生成药物增效剂中的应用以及一种药物组合物 |
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2020
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