CN113646291A - 异型单分散聚乙二醇衍生物的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明是提供一种异型单分散聚乙二醇的制备方法，其包括：实施式(2)的化合物和式(3)的化合物之间的亲核取代反应使得满足式(F1)的要求以获得式(4)的化合物的步骤(A)；在10℃以下的温度条件下实施式(5)的化合物向式(4)的化合物的迈克尔加成反应以获得式(6)的化合物的步骤(B)；脱三苯甲基化或者脱苄基化式(6)的化合物以获得包含式(7)的化合物的反应产物的步骤(C)；从反应产物纯化式(7)的化合物的步骤(D)；式(7)的化合物与邻苯二甲酰亚胺反应并进行脱邻苯二甲酰亚胺化以获得式(8)的化合物的步骤(E)；式(8)的化合物经历酸水解处理以获得式(1)表示的化合物的步骤(F)。

Description

异型单分散聚乙二醇衍生物的制备方法
技术领域
本发明涉及一种待用于药物用途的异型单分散聚乙二醇的制备方法。
背景技术
近年来，在制药领域，抗体药物偶联物(Antibody-Drug Conjugate：ADC)已经投入实际使用并引起高度关注，在抗体药物偶联物中药物与抗体通过连接体结合，并且抗体药物偶联物可将药物主动携带至抗原呈递细胞(Toxins,March 2011,p.848-883(非专利文献1)，J.Med.Chem.,2011,54,p.3606-3623(非专利文献2)。
一种已经作为用于该ADC的连接体材料而使用的材料是异型单分散聚乙二醇。异型单分散聚乙二醇是以在两末端具有不同官能团的异型聚乙二醇作为主要组分并具有规定的分子量的单分散聚乙二醇。
在上述ADC中，以异型单分散聚乙二醇为连接体，并且抗体和药物分别地结合至其各末端。因此，当在异型单分散聚乙二醇中作为杂质存在两末端具有相同官能团的化合物(同型聚乙二醇等)时，形成其中两种抗体结合的化合物或者其中两种药物结合的化合物。其中两个抗体结合的化合物因为没有结合药物所以没有作为ADC的作用，并且其中两个药物结合的化合物因为没有结合抗体而被携带至抗原呈递细胞以外的位点并且该化合物会导致副作用。此外，同样在包含具有与具有目标官能团的异型单分散聚乙二醇的情况不同的组合的官能团的另一种异型化合物作为杂质的情况下，形成缺少目标抗体和药物中的一者的化合物，从而发生与上述相同的问题。因此，从药物的用途和效果的角度来看，重要的是异型单分散聚乙二醇仅包含一种高纯度的在两个末端具有彼此不同的官能团的异型单分散聚乙二醇。
此外，为了提高上述ADC的效果，尝试使用其中多种药物与抗体结合的ADC。在生产该ADC时，使用质谱仪或HPLC确认结合的药物的数量。因此，当作为连接体材料使用的异型单分散聚乙二醇中存在乙二醇链长不同的化合物时，在制造中会产生难以确认的问题。此外，当乙二醇链长不同的化合物作为杂质存在时，由于在制造ADC时要添加的等量的抗体或药物变得不明确，所以存在需要过度使用昂贵的抗体或药物的问题，并且由于乙二醇链长不同的化合物在申请医药产品时被视为与主要药物不同的化合物，所以存在进一步需要化合物的鉴定、执行各种测试、允许量的评估等的问题。因此，作为异型单分散聚乙二醇，重要的是仅包含一种高纯度的具有相同乙二醇链长的聚乙二醇。
如上所述，作为用作ADC的连接体材料而使用的异型单分散聚乙二醇，已经期望包含，特别以高纯度包含作为在两端具有不同官能团的异型聚乙二醇作为主要组分并且其中异型聚乙二醇之间乙二醇链长相同的化合物。
在各末端分别具有氨基和羧基作为官能团的异型单分散聚乙二醇可以原样用作ADC的连接体，并且此外，通过使用这种化合物作为原材料的官能团转化而获得的异型单分散聚乙二醇还能够用作ADC的连接体。
在制造异型单分散聚乙二醇时，需要有效地进行末端官能化。作为末端官能化步骤，专利文献1和2公开了在单甲氧基聚乙二醇的末端引入羧基的方法。在专利文献1中，单甲氧基聚乙二醇与丙烯腈进行迈克尔加成反应，腈在浓盐酸条件下转化为酰胺，并且酰胺在氢氧化钾水溶液条件下水解，从而实现转化为羧基。然而，在这种强酸或强碱条件下，通过迈克尔加成反应的逆反应形成具有羟基而不是羧基的化合物和通过乙二醇链的断裂而形成具有短乙二醇链长的化合物，使得纯度和产率下降。在专利文献2中，单甲氧基聚乙二醇和丙烯酸叔丁酯在三氟乙酸条件下进行迈克尔加成反应并转化为羧基。但是，在文献公开的方法中，丙烯酸叔丁酯的引入率低至70％以下，并且存在末端具有羟基的化合物残留的问题。
此外，作为引入氨基的方法，在专利文献3中，在具有末端乙烯基的八乙二醇衍生物中，乙烯基通过臭氧氧化转化为醛基，并且然后通过在氯化铵溶液中与氰基硼化钠发生还原胺化反应而转化为氨基。但是，从臭氧氧化形成爆炸性过氧化物和氰基硼化钠的毒性来看，在工业生产中存在问题。在专利文献4中，八乙二醇衍生物的羟基与甲苯磺酰氯反应以引入甲苯磺酰基，所得物与邻苯二甲酰亚胺钾反应将其转化为邻苯二甲酰亚胺基，其通过使用一水合肼的去保护反应而转化为氨基。这种加布里埃尔胺合成(Gabriel aminesynthesis)是氨基转化的一般方法，但为了引入氨基，需要将诸如甲苯磺酰基的离去基团暂时引入羟基的步骤。在这样的反应步骤中，残留的未反应原材料的存在和反应副产物的形成是不可避免的，并且通常反应步骤越多，则目标化合物的产率就越低。
此外，非专利文献3公开了一种乙二醇链长为8并且一端具有4,4'-二甲氧基三苯甲基并且另一端具有羟基的化合物的合成方法，其中该化合物中两末端互不相同。部分合成路线由下式表示：
DmtrO-(CH2CH2O)4-Ts+HO-(CH2CH2O)4-H
→DmtrO-(CH2CH2O)8-H+DmtrO-(CH2CH2O)12-Dmtr
其中，Dmtr代表4，4'-二甲氧基三苯甲基，
并且描述了在通过一端甲苯磺酰体和四乙二醇之间1:1反应获得八聚体的一端Dmtr体时，通过一端甲苯磺酰体和四乙二醇之间2:1反应形成十二聚体的两端Dmtr体。
然而，当使用包含在两末端具有Dmtr基团的化合物的混合物合成在两个末端分别具有氨基和羧基的异型聚乙二醇时，作为杂质形成在两末端具有氨基的化合物或在两末端具有羧基的化合物。因此，当含有这种杂质的异型单分散聚乙二醇用于生产ADC时，会形成两种药物结合或两种抗体结合的化合物，这会导致作为药物的有效性降低。
作为两末端具有不同官能团的异型聚乙二醇的制备方法，专利文献3记载了在一端具有氨基保护基团的三乙烯乙二醇衍生物和在末端具有羧基保护基团的乙烯乙二醇衍生物偶联并且在各末端进行去保护，以获得在各末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇。然而，在这些已经引入了各个保护基团的聚乙二醇衍生物之间的偶联中，其中之一被过度使用，并且因此成本增加。
此外，专利文献4中记载了使用在一端具有离去基团且在另一端具有羟基的异型单分散聚乙二醇作为中间体以高纯度获得具有氨基和羟基的异型单分散聚乙二醇，作为中间体的异型单分散聚乙二醇通过使用可容易商购的四乙二醇作为起始材料连续合成而制备。
但是，在该制备方法中，在重复连续合成直至获得目标乙二醇链长之后，为了从一端具有保护基团并且在另一端具有羟基的异型单分散聚乙二醇中去除在两末端具有保护基团的单分散聚乙二醇杂质，将羟基暂时转化为甲苯磺酰基。如上所述，加入的此类反应步骤越多，目标化合物的产率就越低。因此，工业生产还存在进一步改进的空间。
现有技术文件
专利文献
专利文献1：美国专利No.5672622
专利文献2：JP-T-2007-538111
(本文所述的术语“JP-T”是指公布的PCT专利申请的日文翻译)
专利文献3：WO 9201474
专利文献4：JP-A-2017-14371
非专利文献
非专利文献1：Toxins,2011,March,p.848-883
非专利文献2：J.Med.Chem.,2011,54,p.3606-3623
非专利文献3：Polym.Chem.,2014,5,p.694-697
发明内容
本发明要解决的问题
本发明的目的是提供一种能够以高产率工业地制造在药物应用中使用的异型单分散聚乙二醇衍生物的制备方法。
解决问题的方法
作为为了实现上述目的的深入研究的结果，本发明人已经建立了具有下列构成的异型单分散聚乙二醇衍生物的制备方法。
由此，本发明如下。
(1)一种式(1)所表示的异型单分散聚乙二醇的制备方法，该方法包括下列步骤(A)、(B)、(C)、(D)、(E)和(F)：
Figure BDA0003288057530000051
其中，在式(1)中，a表示6至12的整数，
步骤(A)：实施式(2)的化合物和式(3)的化合物之间的亲核取代反应使得满足式(F1)的要求以获得式(4)的化合物的步骤：
Figure BDA0003288057530000052
其中，在式(2)中，b表示3至9的整数，
Figure BDA0003288057530000053
其中，在式(3)中，L表示甲磺酰基或者甲苯磺酰基，R1表示三苯甲基或者苄基，并且c表示3至9的整数，
6≤b+c≤12 (F1)
Figure BDA0003288057530000061
其中，在式(4)中，R1表示三苯甲基或者苄基并且a表示6至12的整数；
步骤(B)：在10℃以下的温度条件下实施式(5)的化合物向所述步骤(A)获得的式(4)的化合物的迈克尔加成反应以获得式(6)的化合物的步骤，
Figure BDA0003288057530000062
其中，在式(5)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，
Figure BDA0003288057530000063
其中，在式(6)中，R1表示三苯甲基或者苄基，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，并且a表示6至12的整数；
步骤(C)：脱三苯甲基化或者脱苄基化所述步骤(B)中获得的式(6)的化合物以获得包含式(7)的化合物的反应产物的步骤，
Figure BDA0003288057530000064
其中，在式(7)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示6至12的整数；
步骤(D)：从所述步骤(C)获得的反应产物纯化式(7)的化合物的步骤；
步骤(E)：所述步骤(D)中获得的式(7)的化合物与邻苯二甲酰亚胺反应并进行脱邻苯二甲酰亚
胺化以获得式(8)的化合物的步骤，
Figure BDA0003288057530000071
其中，在式(8)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示6至12的整数；以及
步骤(F)：所述步骤(E)中获得的式(8)的化合物经历酸水解处理以获得式(1)表示的化合物的步骤。
(2)根据(1)所述的方法，其中，在所述步骤(D)中使用二氯甲烷或者氯仿来纯化式(7)的化合物。
(3)根据(1)或(2)所述的方法，其中在所述步骤(D)中，使用水或者无机盐浓度为10重量％以下的水溶液来纯化式(7)的化合物。
(4)根据(1)至(3)中任一项所述的方法，其中所述步骤(D)包括在1℃至25℃下的清洗步骤。
(5)一种式(1)所表示的异型单分散聚乙二醇的制备方法，该方法包括下列步骤(A)、(B)、(C)、(E)、(F)和(G)：
Figure BDA0003288057530000072
其中，在式(1)中，a表示13至40的整数，
步骤(A)：实施式(2)的化合物和式(3)的化合物之间的亲核取代反应使得满足式(F1)的要求以获得式(4)的化合物的步骤：
Figure BDA0003288057530000073
其中，在式(2)中，b表示3至37的整数，
Figure BDA0003288057530000081
其中，在式(3)中，L表示甲磺酰基或者甲苯磺酰基，R1表示三苯甲基或者苄基，并且c表示3至37的整数，
13≤b+c≤40 (F1)
Figure BDA0003288057530000082
其中，在式(4)中，R1表示三苯甲基或者苄基并且a表示13至40的整数；
步骤(B)：在10℃以下的温度条件下实施式(5)的化合物向所述步骤(A)获得的式(4)的化合物的迈克尔加成反应以获得式(6)的化合物的步骤，
Figure BDA0003288057530000083
其中，在式(5)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，
Figure BDA0003288057530000084
其中，在式(6)中，R1表示三苯甲基或者苄基，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，并且a表示13至40的整数；
步骤(C)：脱三苯甲基化或者脱苄基化所述步骤(B)中获得的化合物以获得式(7)的化合物的步骤，
Figure BDA0003288057530000085
其中，在式(7)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示13至40的整数；
步骤(E)：所述步骤(C)中获得的式(7)的化合物与邻苯二甲酰亚胺反应并进行脱邻苯二甲酰亚胺化以获得式(8)的化合物的步骤，
Figure BDA0003288057530000091
其中，在式(8)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示13至40的整数；
步骤(F)：所述步骤(E)中获得的式(8)的化合物经历酸水解处理以包含获得式(1)表示的化合物的反应产物的步骤；以及
步骤(G)：从所述步骤(F)获得的反应产物纯化式(1)的化合物的步骤。
(6)根据(5)所述的方法，其中所述步骤(G)中待用于纯化的有机溶剂是二氯甲烷或者氯仿。
(7)根据(5)或(6)所述的方法，其中所述步骤(G)中待用于纯化的水溶液为pH8以上的碱性水溶液。
(8)根据(1)至(7)中任一项所述的方法，其中所述步骤(B)中式(5)的化合物的R2为异丙基或者叔丁基。
(9)根据(1)至(8)中任一项所述的方法，其中片状氢氧化钾或者粉状氢氧化钾用作所述步骤(B)中的碱。
发明效果
本发明是高纯度的在两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇的新颖制备方法。在该制备方法中，能够在步骤期间通过简单的液相分离萃取而不使用诸如柱层析法的纯化方法地制造高纯度的异型单分散聚乙二醇。此外，为了纯化在传统的链长延长步骤中作为副产物形成的具有特定分子量和不同链长的双末端受保护杂质，无需将羟基一次转化为甲苯磺酰基的步骤即可去除杂质。以这样的方式，由于步骤的数量比以往少，因此能够抑制导致产量减少的残留的未反应原料的存在和反应副产物的形成。因此，所述方法能够作为用于制备高纯度的在两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇的工业方法而提供。
具体实施方式
根据本发明的异型单分散聚乙二醇衍生物由下式(1)所表示。“单分散聚乙二醇”是包含90％以上的具有特定乙二醇链长的组分的化合物。
Figure BDA0003288057530000101
本发明的式(1)中的a为6至12或者13至40的整数，表示乙烯乙二醇的重复单元。从用作用于ADC的连接体的角度，a优选为6至12或者13至24的整数。
能够如下制造高纯度的在各个两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇。
(步骤(A))
根据本发明的步骤(A)是实施下式(2)表示的化合物之间的亲核取代反应的步骤：
HO-(CH2CH2O)b-H...(2)
以及下式(3)表示的化合物：
R1O-(CH2CH2O)c-L...(3)
以满足下式(F1)表示的要求：
6≤b+c≤12 or 13≤b+c≤40...(F1)
以获得下式(4)表示的化合物：
R1O-(CH2CH2O)a-H...(4)。
式(2)中的b表示3至9或者3至37的整数，并且优选为3至9或者10至21的整数。式(3)中的R1表示三苯甲基或者苄基，L表示甲磺酰基或者甲苯磺酰基，并且c表示3至9或者3至37的整数，并且优选为3至9或者10至21的整数。此外，式(2)中的b和式(3)中的c满足b+c＝6至12或者13至40，因此满足式(F1)表示的要求，并且优选为b+c＝6至12或者13至24。
作为式(2)表示的化合物和式(3)表示的化合物，能够使用可商购产品或者能够通过已知合成方法获得化合物。此外，作为由式(3)表示的化合物，利用通过甲磺酸化或甲苯磺酸化在步骤(A)中获得的式(4)表示的化合物而获得的化合物，能够合成具有长的乙二醇链长，即式(4)中的a的值大的化合物。
通过在碱存在下进行式(2)表示的化合物与式(3)表示的化合物之间的亲核取代反应，能够获得含有式(4)表示的化合物的反应混合物。在式(4)中，R1表示三苯甲基或者苄基，a表示6至12或者13至40的整数，并且优选为6至12或者13至24的整数。另外，式(4)中的R1和式(3)中的R1表示相同的取代基。反应混合物含有由下式(9)表示的化合物：
R1O-(CH2CH2O)d-R1...(9)
作为杂质。
在式(9)中，R1表示三苯甲基或者苄基，并且d表示3至80的整数。另外，式(9)中的R1和式(3)中的R1表示相同的取代基。
能够在溶剂中进行亲核取代反应。溶剂不受特别限定，只要其是不与式(2)表示的化合物和式(3)表示的化合物反应的溶剂即可。具体地，能够使用诸如乙腈、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿等非质子极性溶剂及其混合溶剂，并且优选乙腈、二甲基甲酰胺。所用溶剂的量相对于式(3)表示的化合物的重量比通常为1至100倍，优选为2至50倍，更优选为3至30倍。当所用溶剂的量小于下限时，其中式(3)表示的化合物结合至式(2)表示的化合物的两末端的式(9)表示的化合物的量趋于增加，而当用量超过上限时，亲核取代反应的进展趋于减慢。
在亲核取代反应中，式(2)表示的化合物的用量通常为式(3)表示的化合物的摩尔比的1.1至50倍，优选5.0至30倍，更优选5.0至20倍。当式(2)表示的化合物的用量小于上述时，其中式(3)表示的化合物结合至式(2)表示的化合物的两末端的式(9)表示的化合物的量趋于增加，而当用量超过上限时，亲核取代反应的进展趋于减慢。
亲核取代反应中使用的碱只要反应进行即可，没有特别限定，具体而言为氢化钠、金属钠或叔丁醇钾，并且优选为氢化钠或金属钠。碱的用量相对于式(2)表示的化合物的摩尔比通常为1.1至10倍，优选为1.2至5倍。
反应温度因使用的溶剂等而异，但通常为0℃至100℃，优选为50℃至90℃。当反应温度低于下限时，反应可能减慢，而当反应温度超过上限时，由于温度过高，可能会发生副反应。反应时间因反应温度等条件而异，通常为0.2至48小时，优选为2至24小时。当反应时间短时，反应将不充分。
在步骤(A)中，包含通过这种亲核取代反应的式(4)表示的化合物和式(9)表示的化合物的反应混合物可以不经纯化地在步骤(B)中原样使用，或者可以在通过硅胶柱层析法、液相分离萃取处理、吸附处理等纯化上式(4)表示的化合物后使用。由式(9)表示的化合物能够不经纯化使用，因为它在下一步骤(B)的反应中不具有反应性，并且能够通过后述步骤中的纯化去除。
(步骤(B))
根据本发明的步骤(B)是在10℃以下的温度条件下实施下式(5)表示的化合物向由式(4)表示的化合物的迈克尔加成的步骤：
Figure BDA0003288057530000131
以获得式(6)表示的化合物：
Figure BDA0003288057530000132
式(5)中的R2表示具有1至6个碳原子的烃基。具体地，作为具有1至6个碳原子的烃基，可以提及甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、异丁基和仲丁基。从碱性条件下的稳定性的观点来看，R2优选为异丙基或叔丁基。从提高后述的纯化步骤的效率的观点考虑，R2进一步更优选为叔丁基。
进一步地，在式(6)中，R1表示三苯甲基或苄基，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，a表示6至12或13至40的整数，并且优选为表示6至12或13至24的整数。式(6)中的R1与式(4)中的R1为相同的取代基，且式(6)中的R2与式(5)中的R2为相同的取代基。
迈克尔加成反应能够在溶剂中进行。溶剂不受特别限定，只要其是不与式(4)表示的化合物和式(5)表示的化合物反应的溶剂即可。具体地，能够使用诸如四氢呋喃、乙腈、二氯甲烷、氯仿、甲苯等有机溶剂及其混合溶剂，并且优选为二氯甲烷和氯仿。所用溶剂的量相对于式(4)表示的化合物的重量比通常为1至100倍，优选为3至50倍，更优选为5至30倍。当溶剂的用量小于下限时，可能发生这样的过度反应，使得形成由式(5)表示的化合物与式(6)表示的化合物的进一步迈克尔加成反应获得的化合物，而当该量超过上限时，迈克尔加成反应的进展趋于减慢。
在迈克尔加成反应中，式(5)表示的化合物的用量通常为式(4)表示的化合物的摩尔比的1至50倍，优选1.5至25倍。当式(5)表示的化合物的量低于下限时，迈克尔加成反应可能无法完成，而当该量超过上限时，则有发生诸如形成式(5)表示的化合物的聚合体的副反应的风险。
作为迈克尔加成反应中使用的碱，只要反应进行即可，没有特别限定，但是具体而言，可以使用诸如氢氧化钠或者氢氧化钾等无机催化剂，并且优选氢氧化钾。从反应性的观点来看，更优选片状氢氧化钾或粉状氢氧化钾。碱催化剂的用量相对于式(4)表示的化合物的摩尔比通常为0.1至10倍，优选为0.1至5倍。
反应温度通常为10℃以下，优选为5℃以下。当反应温度超过上限时，可能发生形成由式(5)表示的化合物与式(6)表示的化合物的进一步迈克尔加成反应所得的化合物的这样的过度反应。反应时间因诸如反应温度、碱催化剂等的条件而异，但是通常为0.2至12小时，优选为0.5至6小时。
在步骤(B)中，含有通过这种迈克尔加成反应得到的式(6)表示的化合物和在步骤(A)中形成的式(9)表示的化合物的反应混合物可以在下一步骤(C)中不经纯化地原样使用，或者可以在通过硅胶柱层析法、液相分离萃取处理、吸附处理等纯化式(6)表示的化合物后使用。但是，在本发明中，由于可以在后述的步骤中进行纯化，因此反应混合物能够不经纯化地使用。
(步骤(C))
本发明的步骤(C)是将式(6)表示的化合物脱三苯甲基化或脱苄基化以获得式(7)表示的化合物的步骤：
Figure BDA0003288057530000151
当式(6)中的R1为三苯甲基时通过脱三苯甲基化或当R1为苄基时通过脱苄基化，能够获得含有式(7表示的化合物的反应产物。顺便提及，反应产物包含由下式(10)表示的化合物：
HO-(CH2CH2O)d-H...(10)
作为杂质，其是通过将步骤(A)中形成的式(9)表示的化合物脱三苯甲基化或脱苄基化而形成。在上式(10)中，d表示3至80的整数。
作为脱三苯甲基化和脱苄基化的方法，能够使用已知方法，并且例如，GRENE WUTS所著的《有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)》中记载的方法是有效的。当式(6)和(9)中的R1为三苯甲基时，能够通过在酸性条件下的转化反应、催化加氢等实现脱三苯甲基化。作为在酸性条件下的转化反应，只要在不分解目标化合物(7)的酸性条件下进行就没有问题。具体地，存在在甲醇溶剂中加入催化量的对甲苯磺酸一水合物以进行脱三苯甲基化反应的方法。
此外，作为通过催化加氢方法，存在加入催化量的钯/碳，在氢气气氛下，在甲醇溶剂中进行脱苄基化反应的方法。另一方面，当式(6)和(9)中的R2为苄基时，能够通过催化加氢实现脱苄基化。具体地，能够在氢气气氛下在甲醇溶剂中加入催化量的钯/碳来进行脱苄基化。
在步骤(C)中，通过这样的脱三苯甲基化或脱苄基化，能够获得含有式(7)表示的化合物和式(10)表示的化合物的反应混合物。该反应混合物可以不经纯化原样用于下一步骤(D)中，或者也可以在式(6)表示的化合物经硅胶柱层析法、液相分离萃取处理、吸附处理等或类似纯化之后使用。但是，在本发明中，由于可以在后述的步骤中进行纯化，因此混合物能够不经纯化地使用。
(步骤(D))
本发明的步骤(D)是纯化含有步骤(C)中获得的式(7)表示的化合物的反应产物的步骤，其中a具体为6至12的整数。该纯化步骤是去除在步骤(C)中作为杂质形成的由式(10)表示的化合物的步骤，并且从确定用于反应的试剂的合适量和抑制纯化步骤复杂化的角度来看，其作为在该步骤(D)中去除式(10)表示的杂质化合物的工业制备方法也是优选的。
由于在步骤(C)中作为杂质形成的由式(10)表示的化合物的两末端是羟基，与其中a为6至12的整数的由式(7)表示的化合物相比，产生极性差，使得式(10)的杂质只需要简单的液相分离萃取即可去除，无需硅胶层析纯化。另一方面，在a为13至40的整数的式(7)表示的化合物的情况下，与式(10)表示的杂质化合物的极性差变小，使得去除效率降低。
在步骤(D)中，其是将步骤(C)中获得的反应产物溶解在有机溶剂中并然后在25℃以下温度下用水或水溶液进行液相分离洗涤的步骤。有机溶剂包括二氯甲烷、氯仿和甲苯，并且从式(7)表示的化合物的溶解性的观点来看，二氯甲烷和氯仿是优选的。有机溶剂的用量与含有式(7)表示的化合物和式(10)表示的化合物的反应混合物的重量比通常为2至30倍，优选为3至20倍。当有机溶剂的用量低于下限时，式(7)表示的化合物可能溶解在水层中，而当用量超过上限时，式(10)表示的化合物可能会溶解在有机层中，并且液相分离洗涤效率降低。
用于洗涤的水或水溶液只要能够溶解式(10)表示的化合物就没有特别限定，但是具体而言，包括诸如离子交换水或者蒸馏水的水和诸如氯化钠和氯化钾的无机盐的水溶液。只要无机盐溶解在水溶液中无机盐的浓度就没有特别限定，但是优选为10重量％以下，更优选为5重量％以下。当水溶液中无机盐的浓度超过上限时，式(10)表示的化合物的洗涤效率降低。所使用的水或水溶液的量与含有式(7)表示的化合物和式(10)表示的化合物的反应混合物的重量比通常为2至30倍，优选3至20倍。当水或水溶液的用量低于下限时，式(10)表示的化合物的洗涤效率降低，而当用量超过上限时，式(7)表示的化合物可能溶解于水层，并且目标化合物的产量降低。
在步骤(D)中，有机溶剂与水或水溶液的比例通常使得有机溶剂/水或水溶液的重量比为0.2至3.5，优选1.0至3.5。
在步骤(D)中，洗涤温度为1至25℃，优选5至20℃。当温度低于下限时，水或水溶液固化，并且因此纯化变得困难，而当温度超过上限时，式(10)表示的化合物溶解在有机层中，并且去除趋向于困难。进行液相分离洗涤的次数没有特别限制，并且优选在通过TLC、MS测量等确认有机溶剂中所含的式(10)表示的化合物的同时进行多次液相分离洗涤。
在步骤(D)中，由于步骤(A)至(C)中形成的杂质能够通过简单的液相分离萃取处理而去除，所以不需要在每个步骤中通过硅胶层析法等进行纯化。获得的式(7)表示的化合物能够原样用于步骤(E)中，也可以在使用前通过结晶、吸附处理、硅胶层析法等处理进一步纯化。
(步骤(E))
本发明的步骤(E)是将步骤(C)或步骤(D)中获得的上述式(7)表示的化合物的羟基与邻苯二甲酰亚胺通过光延反应进行结合并用多价胺脱保护所得物以获得下式(8)表示的化合物的步骤：
Figure BDA0003288057530000171
当未进行步骤(D)的纯化步骤时(式(7)中的a为13至40的情况)，反应产物中含有下式(11)表示的化合物：
H2N-(CH2CH2O)d-1-CH2CH2-NH2...(11)
其作为杂质通过将步骤(C)中形成的式(10)表示的化合物与邻苯二甲酰亚胺结合并脱保护所得物而形成。在式(11)中，d表示3至80的整数。
步骤(E)中与邻苯二甲酰亚胺的反应能够在溶剂中进行。溶剂没有特别限制，只要它不与由式(7)表示的化合物和邻苯二甲酰亚胺反应即可。具体地，能够使用诸如二氯甲烷、氯仿、甲苯等的有机溶剂及其混合溶剂，并且优选二氯甲烷、氯仿。所用溶剂的量相对于式(7)表示的化合物的重量比通常为1至50倍，优选为3至30倍，更优选为5至20倍。
在步骤(E)中与邻苯二甲酰亚胺的反应中，邻苯二甲酰亚胺的用量通常为与式(7)表示的化合物的摩尔比为1.0至10倍，优选为1.3至5倍。当邻苯二甲酰亚胺的用量低于下限时，反应可能无法完成，而当用量超过上限时，未反应的邻苯二甲酰亚胺残留，并且因此，需要去除步骤，导致产量降低。
作为在步骤(E)中与邻苯二甲酰亚胺反应中使用的偶氮基试剂，可以提及1,1'-偶氮双(N,N-二甲基甲酰胺)、1,1'-(偶氮二羰基)二哌啶、偶氮羧酸二苄酯、偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二异丙酯、偶氮羧酸二甲酯、1,1'-偶氮双(N,N-二异丙基甲酰胺)、1,6-二甲基-1,5,7-六氢-1,4,6,7-四氮杂辛因-2,5-二酮等，并且优选偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二异丙酯，并且更优选偶氮二羧酸二异丙酯。偶氮系试剂的用量相对于式(7)表示的化合物的摩尔比通常为1.0至10倍，优选为1.1至5倍。作为要使用的膦系试剂，可以提及二环己基苯基膦、二乙基苯基膦、4-(二甲氨基)苯基二苯基膦、二苯基-2-吡啶基膦、异丙基二苯基膦、三异丁基膦、三正丁基膦、三叔丁基膦、三环己基膦、三正己基膦、三正辛基膦、三苯基膦等，并且优选三苯基膦。膦系试剂的使用量相对于式(7)表示的化合物的摩尔比通常为1.0至10倍，优选为1.3至5倍。
反应温度通常为0℃至100℃，优选为10℃至50℃。反应时间通常为10分钟至12小时，优选0.5至6小时。
在步骤(E)中的脱保护中，方法没有特别限制，只要在GREENE WUTS编写的《有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)》中描述的即可，但优选使用多价胺。
在步骤(E)中的脱保护中，所使用的溶剂包括二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇等，并且优选甲醇。所用溶剂的量相对于式(7)表示的化合物的重量比通常为1至50倍，优选为2至30倍，更优选为3至20倍。
在步骤(E)的脱保护中，所使用的多价胺包括一水合肼、乙二胺和乙二胺一水合物。多价胺的使用量相对于式(7)表示的化合物的摩尔比通常为1至50倍，优选为5至30倍。当多价胺的用量低于下限时，脱保护反应变得不充分。反应温度通常为10℃至80℃，优选为20℃至60℃。反应时间通常为0.5至24小时，优选为1.0至12小时。
在步骤(E)中，包含通过光延反应和脱保护获得的式(8)表示的化合物和式(11)表示的化合物的反应混合物可以不经纯化地在下一步骤(F)中原样使用，或者可以在通过硅胶柱层析法、液相分离萃取处理、吸附处理等纯化式(8)表示的化合物后使用。在本发明中，由于可以在后述的步骤中进行纯化，所以反应混合物能够不进行纯化而使用。
(步骤(F))
根据本发明的步骤(F)是将步骤(E)中获得的式(8)表示的反应产物进行酸水解处理以获得含有式(1)表示的化合物的异型单分散聚乙二醇的步骤。
水解处理能够在溶剂中进行。溶剂为诸如水、四氢呋喃、乙腈、氯仿、二氯甲烷等溶剂及其混合溶剂。优选水或二氯甲烷。所用溶剂的量相对于式(8)表示的化合物的重量比通常为0.5至50倍，优选为0.8至40倍，更优选为1至30倍。当溶剂用量低于下限时，反应溶液的粘度变高，搅拌效率可能降低，并且反应可能无法完成。另一方面，当该量超过上限时，反应进展趋于减慢。
在水解中使用酸催化剂。只要反应进行酸催化剂就没有特别限制，并且具体而言，是盐酸、磷酸、三氟乙酸等。从抑制副反应的观点考虑，优选盐酸。酸催化剂的用量根据所使用的酸催化剂的种类而不同，但是具体而言，在使用1M盐酸的情况下，相对于式(8)表示的化合物的重量比通常为0.5至10倍。
酸水解的反应温度因使用的酸催化剂而异，但通常为10至100℃。酸水解的反应时间因诸如反应温度的条件而异，通常为约0.5至12小时。
在步骤(F)中，通过这样的酸水解处理，能够获得含有式(1)表示的化合物和式(11)表示的化合物的反应混合物。由于该反应混合物能够在后述的步骤中纯化，所以能够不纯化地使用。
(步骤(G))
根据本发明的步骤(G)是纯化含有步骤(F)中获得的式(1)表示的化合物的反应混合物的步骤。只要式(1)中的a为6至12的整数的化合物在步骤(D)中纯化，则该步骤(G)不是必须进行，而是可以进行。然而，步骤(G)是其中式(1)中的a为13至40的整数的化合物所必需的纯化步骤。
在步骤(G)中，其是将步骤(F)中获得的反应产物溶解在水溶液中并然后在30℃以下用有机溶剂进行液相分离洗涤的步骤。水溶液是pH为8以上的碱性水溶液，并且具体而言，优选将pH调整为9至11的氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液。所使用的基本的或水溶液的量与含有式(1)表示的化合物和式(11)表示的化合物的反应混合物的重量比通常为2至30倍，优选为3至20倍。当碱性水溶液的用量低于下限时，式(1)表示的化合物可能溶解在有机溶剂中，而当用量超过上限时，液相分离洗涤效率可能降低。
洗涤中使用的有机溶剂只要能够溶解式(11)表示的杂质化合物就没有特别限定，但是具体而言，包括乙酸乙酯、甲苯、氯仿和二氯甲烷，并且从杂质的溶解度的角度来看，优选氯仿和二氯甲烷。有机溶剂的用量与含有式(8)表示的化合物和式(11)表示的化合物的反应混合物的重量比通常为2至30倍，优选为为3至20倍。当有机溶剂用量低于下限时，式(11)表示的化合物的去除效率降低，而当用量超过上限时，式(1)表示的化合物可能溶解有机层中，并且目标化合物的产量降低。
在步骤(G)中，有机溶剂与碱性水溶液的比率通常使得有机溶剂/碱性水溶液的重量比的值为0.2至3.0，优选为0.5至2.0。液相分离洗涤的次数没有特别限定，并且优选在通过TLC、MS测量等确认水溶液中所含的式(11)表示的化合物的同时进行多次液相分离洗涤。
根据本发明，能够在步骤期间通过简单的液相分离萃取而不使用诸如柱层析法的纯化方法地制造高纯度的异型单分散聚乙二醇。此外，为了纯化在传统的链长延长步骤中作为副产物形成的具有特定分子量和不同链长的双末端受保护杂质，无需将羟基一次转化为甲苯磺酰基的步骤即可去除杂质。以这样的方式，由于步骤的数量比以往少，因此能够抑制导致产量减少的残留的未反应原料的存在和反应副产物的形成。因此，方法能够提供具有良好产量的高纯度的在两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇的工业制备方法。
实施例
以下，将参考具体实例更详细地描述本发明，然而本发明不限于这些实例。
对于本发明中获得的单分散聚乙二醇的测量，在1H-NMR分析中使用由JEOL DatumCo.,Ltd.制造的JNM-ECP400或JNM-ECP600。5mmφ管用于测量，CDCl3或CDOD3为氘代溶剂，四甲基硅烷(TMS)为内标物。
由步骤(A)的制备方法获得的并且作为由上式(4)表示的化合物(R1为三苯甲基)的具有一端三苯甲基的单分散聚乙二醇包含作为由式(9)表示的化合物的具有两末端三苯甲基的单分散聚乙二醇杂质，其中a为8或12。尽管难以精确地定量含量，但具有一端三苯甲基的单分散聚乙二醇的羟基与甲磺酰氯反应，并且由所得化合物的1H-NMR测量结果，估测在每个步骤中包含的具有两末端三苯甲基的单分散聚乙二醇杂质的含量。
在各实施例的反应中，由于具有一端三苯甲基的单分散聚乙二醇的确切摩尔数不清楚，所以在所有量来自具有一端三苯甲基的单分散聚乙二醇的假设下，计算试剂当量。
(实施例1)
式(1)中a为8的化合物10的合成
Figure BDA0003288057530000221
(实施例1-1)
式(3)中a为4、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物4的合成
Figure BDA0003288057530000231
将四乙二醇1(3416g，17.6mol)和甲苯(3.7L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，在氮气气氛下全部溶解，然后在110℃至120℃下共沸脱水。在共沸脱水后，冷却混合物，加入三乙胺(736ml，5.3mol)、DMAP(54g，0.44mol)和三苯甲基氯(TrtCl，1226g，4.4mol)，并且在室温下搅拌混合物3小时。在3小时后，使用薄层色谱法(TLC)确认TrtCl消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(6.1L)，进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(6.1L)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(6.1L)洗涤一次，用饱和的氯化钠水溶液(6.1L)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物2的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物包含上述化合物3。
化合物2
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.4(1H，t，-C-(OCH2CH2)4-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
3.45-3.85(14H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)3-OH，包括化合物3衍生的一种)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2，包括化合物3衍生的一种)
产量：1687g
Figure BDA0003288057530000241
将含有化合物2(化合物2：1672g，小于3.83mol)的反应产物和甲苯(8.4L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(643ml，4.62mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(326mL，4.22mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物2消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(8.4L)，并且进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(8.4L)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(8.4L)洗涤一次，用饱和的氯化钠水溶液(8.4L)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物4的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物包含上述化合物3。
化合物4
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.98(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
3.45-3.85(12H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)2-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)，
4.33(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
产量：1942g
根据实施例1-1的化合物4的1H-NMR测量结果，确认含有约6.2mol％的量的化合物3。
基于δ3.23峰的化合物3含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
此外，实施例1-1获得的反应产物2包含约8.8wt％的量的化合物3。
(实施例1-2，步骤(A))
式(4)中a为8且R1为三苯甲基的化合物5的合成
Figure BDA0003288057530000251
将氢化钠(215g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(3.9L)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(2.1L)与用甲苯(1.8L)共沸脱水的四乙二醇1(3660g，18.8mol)混合，并且用2小时逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(2.1L)与包含化合物4(化合物4：1942g，小于3.77mol)的反应产物混合，并且用20分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至75℃并搅拌3小时。3小时后，用TLC确认化合物4消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将饱和的氯化铵水溶液(3.9L)和己烷(3L)加入到反应混合物溶液中并进行液相分离。减压浓缩已经去除了己烷层(上层)的下层，并且向残留物中加入甲苯(9.7L)。该甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(5.8L)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(9.7L)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物5的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得反应产物含有上述化合物3和6。
化合物4
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.52(1H，t，-C-(OCH2CH2)8-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
3.45-3.85(30H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)7-OH，包括化合物3和6衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
产量：2195g
(实施例1-3，步骤(B))
式(6)中a为8，R1为三苯甲基，并且R2为叔丁基的化合物7的合成
Figure BDA0003288057530000261
将含有化合物5(化合物5：2190g，小于3.58mol)的反应产物和二氯甲烷(11L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且全部在氮气气氛下溶解，然后加入粉状氢氧化钾(21g，0.37mol)。冷却至5℃后，逐滴加入丙烯酸叔丁酯(式(5)中R2为叔丁基的化合物，780mL，5.38mol)，并且混合物在5℃下反应1小时。反应之后，加入饱和的氯化铵水溶液(4.0L)并且进行液相分离。将有机层用饱和的氯化钠水溶液(5.5L)洗涤一次。减压浓缩有机层，以获得含有化合物4的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得反应产物含有上述化合物3和6。
化合物7
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.49(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
3.45-3.85(32H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
产量：2588g(产率：98％)
(实施例1-4，步骤(C)、(D))
式(7)中a为8且R2为叔丁基的化合物8的合成
Figure BDA0003288057530000271
将含有化合物7(化合物7：2588g，小于3.49mol)的反应产物和甲醇(12.9L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并在氮气气氛下全部溶解。此后，加入对甲苯磺酸一水合物(338g，1.78mol)和己烷(10L)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(6.5L)，并且搅拌混合物30分钟。在进行5次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物7、3和6消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(5.2L)。混合溶液用己烷(6.5L)洗涤一次以去除三苯甲基甲醚。将甲醇溶液减压浓缩以获得含有化合物8的粗产物。TLC分析和1H-NMR测量结果证实得到的粗产物含有上述化合物1和9。
接着，在粗产物中加入二氯甲烷(12.9L)，并且在10℃条件下将混合物用离子交换水(12.9L)洗涤三次并且用饱和的氯化钠水溶液(12.9L)洗涤1次。根据TLC分析，确认了化合物1和9的消失。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物8的纯化产物，为淡黄色透明液体。
化合物8
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.6(1H，t，H-(OCH2CH2)8-OCH2CH2-)，
3.45-3.85(34H，m，H-(OCH2CH2)8-OCH2CH2-)
产量：1229g(产率：71％)
(实施例1-5，步骤(E))
式(8)中a为8且R2为叔丁基的化合物9的合成
Figure BDA0003288057530000281
将化合物8(1229g，2.46mol)和二氯甲烷(4.9L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并在氮气气氛下全部溶解。然后，加入邻苯二甲酰亚胺(508g，3.45mol)、三苯基膦(906g，3.45mol)。在室温下搅拌30分钟后，逐滴加入用二氯甲烷(1.2L)稀释的偶氮二羧酸二异丙酯(599g，2.96mol)，并且搅拌混合物1小时。1小时后，TLC确认化合物8消失，减压下蒸馏去除溶剂，加入甲醇(5.4L)和乙二胺一水合物(2L，24.7mol)，并且在40℃下进行反应2小时。另外加入6N盐酸水溶液用于中和，减压下蒸馏去除溶剂，加入氯化钠和氯仿(6.1L)用于进行萃取，并且向该萃取液中加入饱和的氯化钠水溶液(6.2L)溶液，然后洗涤两次。向有机层加入1％磷酸二氢钠水溶液(6.2L)，并且混合物萃取三次。向萃取的水溶液加入氯仿(2.2L)和甲苯(4L)的混合溶剂，并且混合物洗涤7次。另外加入5N氢氧化钠水溶液用于中和后，加入氯化钠，用二氯甲烷(6.2L)进行萃取四次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物9，为淡黄色透明液体。
化合物9
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.1(2H，t，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-)，
3.45-3.85(32H，m，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-CH2CH2-)
产量：1149g(产率：94％)
(实施例1-6，步骤(F))
式(1)中a为8的化合物10的合成
Figure BDA0003288057530000291
将化合物9(850g，1.71mol)和1M盐酸(4.2L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且化合物溶解，然后在50℃至55℃搅拌1小时。冷却至15℃后，用10M氢氧化钠水溶液中和混合物，并且加入氯化钠和二氯甲烷(4.3L)，随后洗涤。此外，将该水层用二氯甲烷(4.3L)洗涤两次，用6M盐酸调整至pH 2，并且在减压下浓缩。加入二氯甲烷(2.6L)和乙醇(2.2L)，并且搅拌混合物并过滤，然后在减压下浓缩。然后，在重复加入二氯甲烷(2.6L)且在减压下浓缩的操作三次后，加入二氯甲烷(2.6L)以溶解所得物，并且过滤溶液。减压浓缩过滤物，以获得化合物10，为淡黄色透明液体。
化合物10
1H-NMR(CD3OD，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(2H，t，-CH2CH2-COOH)，
3.17(2H，t，H2N-CH2CH2O-)，
3.6-3.9(32H，m，-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-CH2CH2-)
产量：710g(产率：87％)
纯度：99.8％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵溶液＝15/85
流速：1.0mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：1mg/mL
注入量：50μL
(实施例2)
式(1)中a为12的化合物18的合成
Figure BDA0003288057530000311
(实施例2-1)
式(3)中a为8、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物11的合成
Figure BDA0003288057530000312
将含有化合物5(化合物5：841g，小于1.37mol)的反应产物和甲苯(4.2L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(267ml，1.92mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(128mL，1.65mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物5消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(4.2L)，并且进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(4.2L)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(4.2L)洗涤一次，用饱和的氯化钠水溶液(4.2L)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物11的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3和6。
化合物11
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
3.45-3.85(28H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)6-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
产量：945g
根据实施例2-1的化合物11的1H-NMR测量结果，确认化合物3和6的含量约为11mol％(化合物3：6mol％，化合物6：5mol％，粗略估计)。
基于δ3.23峰的化合物3和6含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
关于化合物3的含量，应用实施例1-1中计算的值。
此外，实施例2-1中使用的反应产物5含有约12.6wt％的量的化合物3和6。
(实施例2-2，步骤(A))
式(4)中a为12且R1为三苯甲基的化合物12的合成
Figure BDA0003288057530000321
将氢化钠(78g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(1.9L)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(940mL)与用甲苯(660mL)共沸脱水的四乙二醇1(1327g，6.83mol)混合，并且用2小时逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(940mL)与包含化合物11(化合物11：944g，小于1.37mol)的反应产物混合，并且用20分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至75℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物11消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将饱和的氯化铵水溶液(1.9L)和己烷(1.4L)加入到反应混合物溶液中并进行液相分离。减压浓缩已经去除了己烷层(上层)的下层，并且向残留物中加入甲苯(4.7L)。该甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(2.8L)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(4.7L)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物12的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物12
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(1H，t，-C-(OCH2CH2)12-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
3.45-3.85(46H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)11-OH，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
产量：1027g
(实施例2-3，步骤(B))
式(6)中a为12，R1为三苯甲基，并且R2为叔丁基的化合物14的合成
Figure BDA0003288057530000341
将含有化合物12(化合物12：200g，小于253mmol)的反应产物和二氯甲烷(1000mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且制品在氮气气氛下溶解，然后加入粉状氢氧化钾(1.4g，25mmol)。冷却至5℃后，逐滴加入丙烯酸叔丁酯(式(5)中R2为叔丁基的化合物，55mL，380mmol)，并且混合物在5℃下反应2小时。反应之后，加入饱和的氯化铵水溶液(400mL)并且进行液相分离。将有机层用饱和的氯化钠水溶液(600mL)洗涤一次。减压浓缩有机层，以获得含有化合物14的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物14
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.49(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
3.45-3.85(48H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)11-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
产量：226g(产率：97％)
(实施例2-4，步骤(C)、(D))
式(7)中a为12且R2为叔丁基的化合物15的合成
Figure BDA0003288057530000351
将含有化合物14(化合物14：226g，小于246mmol)的反应产物和甲醇(1.1L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并在氮气气氛下制品溶解。此后，加入对甲苯磺酸一水合物(23g，123mmol)和己烷(900mL)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(565mL)，并且搅拌混合物30分钟。在进行四次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物14、3、6和13消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(452mL)。混合溶液用己烷(565mL)洗涤一次以去除三苯甲基甲醚。将甲醇溶液减压浓缩以获得含有化合物15的粗产物。TLC分析和1H-NMR测量结果证实得到的粗产物含有上述化合物1、9和16。
接着，在粗产物中加入二氯甲烷(1.1L)，并且在10℃条件下将混合物用离子交换水(1.1L)洗涤三次并且用饱和的氯化钠水溶液(1.1L)洗涤1次。根据TLC分析，确认了化合物1、9和13的消失。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物15的纯化产物，为淡黄色透明液体。
化合物15
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.6(1H，t，H-(OCH2CH2)12-OCH2CH2-)，
3.45-3.85(50H，m，H-(OCH2CH2)12-OCH2CH2-)
产量：118g(产率：71％)
(实施例2-5，步骤(E))
式(8)中a为12且R2为叔丁基的化合物17的合成
Figure BDA0003288057530000361
将化合物15(117g，173mmol)和二氯甲烷(469mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并在氮气气氛下化合物溶解。然后，加入邻苯二甲酰亚胺(36g，245mmol)和三苯基膦(64g，244mmol)。在室温下搅拌30分钟后，逐滴加入用二氯甲烷(118mL)稀释的偶氮二羧酸二异丙酯(42g，208mmol)，并且搅拌混合物1小时。1小时后，TLC确认化合物15消失，减压下蒸馏去除溶剂，加入甲醇(518mL)和乙二胺一水合物(141mL，1.73mol)，并且在40℃下进行反应3小时。另外加入6N盐酸水溶液用于中和，减压下蒸馏去除溶剂，加入氯化钠和氯仿(585mL)用于萃取。将饱和的氯化钠水溶液(585mL)加入到所得物的萃取液中，并且进行两次洗涤。向有机层加入1％磷酸二氢钠水溶液(585mL)，并且混合物萃取四次。在向萃取的水溶液加入氯仿(293mL)和甲苯(293mL)的混合溶剂的同时,进行七次洗涤。另外加入5N氢氧化钠水溶液用于中和后，加入氯化钠，并且用二氯甲烷(590mL)进行萃取四次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物17，为淡黄色透明液体。
化合物17
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.1(2H，t，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-)，
3.45-3.85(48H，m，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH2CH2-)
产量：113g(产率：
97％)
(实施例2-6，步骤(F))
式(1)中a为12的化合物18的合成
Figure BDA0003288057530000371
将化合物17(50g，74mmol)和1M盐酸(250mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且化合物溶解，然后在50℃至55℃搅拌1小时。冷却至15℃后，用10M氢氧化钠水溶液中和混合物，并且加入氯化钠和二氯甲烷(250mL)用于洗涤。水层再次用二氯甲烷(250mL)洗涤一次，用6M盐酸调节至pH 2，并且用二氯甲烷(250mL)萃取四次。将回收的有机层混合并用硫酸钠脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物18，为淡黄色固体。
化合物18
1H-NMR(CD3OD，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(2H，t，-CH2CH2-COOH)，
3.17(2H，t，H2N-CH2CH2O-)，
3.6-3.9(48H，m，-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH2CH2-)
产量：44g(产率：91％)
纯度：99.8％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵溶液＝27.5/72.5
流速：1.0mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：2mg/mL
注入量：50μL
(实施例3)
式(1)中a为24的化合物40的合成
Figure BDA0003288057530000381
(实施例3-1)
式(3)中a为12、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物19的合成
Figure BDA0003288057530000382
将含有化合物12(化合物12：90g，小于0.11mol)的反应产物和甲苯(451mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(29ml，0.21mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(14mL，0.18mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物12消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(450mL)，并且进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(450mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(450mL)洗涤两次，用饱和的氯化钠水溶液(450mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物19的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物19
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
3.45-3.85(44H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)10-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
产量：96g
根据实施例3-1的化合物19的1H-NMR测量结果，确认化合物3、6和13的含量约为15mol％(化合物3：6mol％，化合物6：5mol％，化合物13：4mol％，粗略估计)。
基于δ3.23峰的化合物3、6和13的含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
关于化合物3和6的含量，应用实施例1-1中计算的值。
此外，实施例3-1中使用的反应产物12含有约15.9wt％的量的化合物3、6和13。
(实施例3-2，步骤(A))
式(4)中a为16且R1为三苯甲基的化合物20的合成
Figure BDA0003288057530000401
将氢化钠(6.3g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中。在氮气置换之后，加入MeCN(192mL)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(96mL)与用甲苯(53mL)共沸脱水的四乙二醇1(108g，0.56mol)混合，并且用30分钟逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(96mL)与包含化合物19(化合物19：96g，小于0.11mol)的反应产物混合，并且用15分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至75℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物19消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将饱和的氯化铵水溶液(170mL)和己烷(146mL)加入到反应混合物溶液中并进行液相分离。减压浓缩已经去除了己烷层(上层)的下层，并且向残留物中加入甲苯(481mL)。甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(260mL)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(480mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物20的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13和21。
化合物20
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.78(1H，b，-C-(OCH2CH2)16-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)
3.45-3.85(62H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)15-OH，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)
产量：103g
(实施例3-3)
式(3)中a为16、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物22的合成
Figure BDA0003288057530000411
将含有化合物20(化合物20：100g，小于0.10mol)的反应产物和甲苯(500mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(20ml，0.14mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(9.6mL，0.12mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物14消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(500mL)，并且进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(500mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(500mL)洗涤两次，用饱和的氯化钠水溶液(500mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物22的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13和21。
化合物22
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)
3.45-3.85(60H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)14-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13和21衍生的那些)
产量：106g
(实施例3-4，步骤(A))
式(4)中a为20且R1为三苯甲基的化合物23的合成
Figure BDA0003288057530000421
将氢化钠(5.7g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(208mL)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(105mL)与用甲苯(48mL)共沸脱水的四乙二醇1(97g，0.50mol)混合，并且用30分钟逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(105mL)与包含化合物22(化合物22：109g，小于0.10mol)的反应产物混合，并且用15分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至75℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物22消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将饱和的氯化铵水溶液(190mL)和己烷(159mL)加入到反应混合物溶液中并进行液相分离。减压浓缩已经去除了己烷层(上层)的下层，并且向残留物中加入甲苯(524mL)。甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(285mL)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(520mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物23的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13、21和24。
化合物22
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.64(1H，b，-C-(OCH2CH2)20-OH)，
3.23(2H，t，(C-6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)
3.45-3.85(78H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)19-OH，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)
产量：109g
(实施例3-5)
式(3)中a为20、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物25的合成
Figure BDA0003288057530000431
将含有化合物23(化合物23：107g，小于0.094mol)的反应产物和甲苯(585mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(18ml，0.13mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(8.7mL，0.11mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物14消失，加入5％磷酸二氢钠水溶液(535mL)，并且进行液相分离。有机层用5％磷酸二氢钠水溶液(535mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(535mL)洗涤两次，用饱和的氯化钠水溶液(535mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物25的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13、21和24。
化合物25
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)
3.45-3.85(76H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)18-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21和24衍生的那些)
产量：113g
(实施例3-6，步骤(A))
式(4)中a为24且R1为三苯甲基的化合物26的合成
Figure BDA0003288057530000441
将氢化钠(5.2g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(221mL)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(111mL)与用甲苯(44mL)共沸脱水的四乙二醇1(88g，0.46mol)混合，并且用30分钟逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(111mL)与包含化合物25(化合物25：113g，小于0.092mol)的反应产物混合，并且用15分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至75℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物25消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将饱和的氯化铵水溶液(200mL)和己烷(168mL)加入到反应混合物溶液中并进行液相分离。减压浓缩已经去除了己烷层(上层)的下层，并且向残留物中加入甲苯(556mL)。甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(300mL)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(555mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物26的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13、21、24和27。
化合物26
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.66(1H，b，-C-(OCH2CH2)24-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)
3.45-3.85(94H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)23-OH，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)
产量：115g
(实施例3-7，步骤(B))
式(6)中a为24，R1为三苯甲基，并且R2为叔丁基的化合物28的合成
Figure BDA0003288057530000461
将含有化合物28(化合物28：5.02g，小于3.79mmol)的反应产物和二氯甲烷(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且制品在氮气气氛下溶解，然后加入粉状氢氧化钾(128mg，2.28mmol)。冷却至5℃后，逐滴加入丙烯酸叔丁酯(式(5)中R2为叔丁基的化合物，1.1mL，7.58mmol)，并且混合物在5℃下反应4小时。反应之后，加入饱和的氯化铵水溶液(10mL)并且进行液相分离。将有机层用饱和的氯化钠水溶液(15mL)洗涤一次。减压浓缩有机层，以获得含有化合物28的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6、13、21、24和27。
化合物28
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.49(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)，
3.45-3.85(96H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)23-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6、13、21、24和27衍生的那些)
产量：5.31g
(实施例3-8，步骤(C))
式(7)中a为24且R2为叔丁基的化合物29的合成
Figure BDA0003288057530000471
将含有化合物28(化合物28：5.01g，小于3.46mmol)的反应产物和甲醇(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并在氮气气氛下制品溶解。此后，加入对甲苯磺酸一水合物(329mg，1.72mmol)和己烷(20mL)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(13mL)，并且搅拌混合物30分钟。在进行四次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物28、3、6、13、21、24和27消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(11mL)。混合溶液用己烷(13mL)洗涤一次以去除三苯甲基甲醚。将甲醇溶液减压浓缩并且加入20％氯化钠水溶液(10mL)和二氯甲烷(10mL)，随后液相分离。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物29的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物1、9、16、30、31和32。
化合物29
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.7(1H，b，H-(OCH2CH2)24-OCH2CH2-)，
3.45-3.85(98H，m，H-(OCH2CH2)24-OCH2CH2-，包括化合物1、9、16、30、31和32衍生的那些)
产量：3.13g
(实施例3-9，步骤(E))
式(8)中a为24且R2为叔丁基的化合物33的合成
Figure BDA0003288057530000481
将含有化合物29(化合物29：3.00g，小于2.49mmol)的反应产物和二氯甲烷(12mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并在氮气气氛下制品溶解。然后，加入邻苯二甲酰亚胺(641mg，4.36mmol)和三苯基膦(1.14g，4.35mmol)。在室温下搅拌30分钟后，逐滴加入用二氯甲烷(3mL)稀释的偶氮二羧酸二异丙酯(756mg，3.74mmol)，并且搅拌混合物3小时。3小时后，通过TLC分析确认化合物29消失，减压下蒸馏去除溶剂，加入甲醇(13mL)和乙二胺一水合物(2mL，24.8mol)，并且在40℃下进行反应4小时。另外加入6N盐酸水溶液用于中和，减压下蒸馏去除溶剂，加入氯化钠和氯仿(15mL)用于进行萃取，并且在向该萃取液中加入饱和的氯化钠水溶液(15mL)溶液的同时，进行两次洗涤。向有机层加入1％磷酸二氢钠水溶液(15mL)，并且混合物萃取四次。在向萃取的水溶液加入氯仿(8mL)和甲苯(8mL)的混合溶剂的同时，进行七次洗涤。另外加入5N氢氧化钠水溶液用于中和后，加入氯化钠，用二氯甲烷(15mL)进行萃取四次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物33的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物34、35、36、37、38和39。
化合物33
1H-NMR(CDCl3，内标
TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.1(2H，t，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)23-)，
3.45-3.85(96H，m，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)23-CH2CH2-，包括化合物34、35、36、37、38和39衍生的那些)
产量：2.45g
(实施例3-10，步骤(F)、(G))
式(1)中a为24的化合物40的合成
Figure BDA0003288057530000491
将包含化合物33(化合物33：1.22g，小于1.00mmol)的反应产物和1M盐酸(6mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且制品溶解，然后在50℃至55℃搅拌2小时。2小时后，通过TLC确认化合物33消失。将混合物冷却至室温。
然后，将10M氢氧化钠水溶液加入到反应溶液中以将pH调整至10，并且在加入二氯甲烷(6mL)的同时，进行洗涤两次。溶液用6M盐酸调整至pH 2，并且加入氯化钠后，用二氯甲烷(6mL)进行萃取三次。将回收的有机层混合并用硫酸钠脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物40(1.16g)，为淡黄色固体。在向所得化合物40加入四氢呋喃(5mL)用于溶解后，溶液冷却至10℃并且加入冷却至10℃的己烷(24mL)以进行结晶。通过过滤收集晶体并用冷却至10℃的己烷(10mL)洗涤晶体。通过过滤收集晶体并真空干燥，以得到化合物40，为白色粉末晶体。
化合物40
1H-NMR(CD3OD，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(2H，t，-CH2CH2-COOH)，
3.17(2H，t，H2N-CH2CH2O-)，
3.6-3.9(96H，m，-CH2CH2O-(CH2CH2O)23-CH2CH2-)
产量：893mg
(实施例4)
为了计算在从包含实施例1-2中得到的化合物5的反应产物去除在两末端具有三苯甲基的化合物的含量时式(4)中R1为三苯甲基的化合物中a为8的化合物5的含量，进行化合物42的衍生。
式(3)中a为8、R1为三苯甲基且L为甲苯磺酰基的化合物41的合成
Figure BDA0003288057530000501
将含有化合物5(化合物5：5g，小于8.2mmol)的反应产物和二氯甲烷(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且产物在氮气气氛下溶解，加入三乙胺(1.2mL，8.6mmol)、4-二甲氨基吡啶(100mg，0.82mmol)和TsCl(1.4g，7.3mmol)，并且在室温下搅拌混合物4小时。4小时后，通过1H-NMR分析确认TsCl消失，加入1M盐酸水溶液(25mL)，并且进行液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(25mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(25mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(25mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物41的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得反应产物含有上述化合物3和6。
化合物41
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
3.45-3.85(28H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)6-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
4.16(2H，t，-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
产量：6.1g
在一端具有羟基并且在一端具有甲苯磺酰基的具有8个单元乙二醇链长的化合物42的合成
Figure BDA0003288057530000511
接着，将含有化合物42(化合物42：6.1g，小于8.0mmol)的反应产物和甲醇(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中。在氮气气氛下将化合物溶解后，加入对甲苯磺酸一水合物(0.78g，4.1mmol)和己烷(20mL)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(13mL)，并且搅拌混合物30分钟。在进行六次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物42、3和6消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(10mL)。混合溶液用己烷(13mL)洗涤两次以去除三苯甲基甲醚。将甲醇溶液减压浓缩，并且加入二氯甲烷(25mL)用于萃取。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物42，为淡黄色透明液体。
化合物42
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.73(1H，t，H-(OCH2CH2)8-)，
3.45-3.85(30H，m，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
产量：3.0g
纯度：99.7％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝50/50
流速：0.6mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：0.2mg/mL
注入量：40μL
纯度值是化合物43的峰值面积与在10到40分钟的保留时间内检测到的总峰值面积的比率。
(实施例5)
为了计算在从包含实施例2-2中得到的化合物12的反应产物去除在两末端具有三苯甲基的化合物的含量时式(4)中R1为三苯甲基的化合物中a为12的化合物12的含量，进行化合物44的衍生。
式(3)中a为12、R1为三苯甲基且L为甲苯磺酰基的化合物43的合成
Figure BDA0003288057530000531
将含有化合物12(化合物12：5g，小于6.3mmol)的反应产物和二氯甲烷(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且产物在氮气气氛下溶解，加入三乙胺(0.93mL，6.6mmol)、4-二甲氨基吡啶(77mg，0.63mmol)和TsCl(0.97g，5.4mmol)，并且在室温下搅拌混合物4小时。4小时后，通过1H-NMR分析确认TsCl消失，加入1M盐酸水溶液(25mL)，并且进行液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(25mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(25mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(25mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物43的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由TLC分析和1H-NMR测量结果证实所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物43
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
3.45-3.85(44H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)10-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
4.16(2H，t，-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
产量：6.1g
Figure BDA0003288057530000541
接着，将含有化合物43(化合物43：6.1g，小于6.5mmol)的反应产物和甲醇(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中。在氮气气氛下将化合物溶解后，加入对甲苯磺酸一水合物(0.60g，3.2mmol)和己烷(20mL)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(13mL)，并且搅拌混合物30分钟。在进行六次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物43、3、6和13消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(10mL)。混合溶液用己烷(13mL)洗涤两次以去除三苯甲基甲醚。将甲醇溶液减压浓缩并加入二氯甲烷(25mL)，随后被萃取。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物44，为淡黄色透明液体。
化合物44
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.73(1H，t，H-(OCH2CH2)8-)，
3.45-3.85(46H，m，-(OCH2CH2)11-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
产量：3.3g
纯度：99.7％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝55/45
流速：0.6mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：0.2mg/mL
注入量：40μL
纯度值是化合物44的峰值面积与在11到40分钟的保留时间内检测到的总峰值面积的比率。
(比较例1，用于经由甲苯磺酰化步骤获得化合物10的制备方法)式(1)中a为8的化合物10通过专利文献4描述的制备方法合成。
(比较例1-1)
式(3)中a为4、R1为三苯甲基且L为甲苯磺酰基的化合物41的合成
Figure BDA0003288057530000551
将四乙二醇1(200mL，1.15mol)和甲苯(50mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气气氛下溶解化合物并随后在110℃至120℃下共沸脱水。在共沸脱水后，冷却混合物，加入吡啶(18ml，0.22mol)和三苯甲基氯(TrtCl，40g，0.14mol)，并且在室温下搅拌混合物3小时。3小时后，使用TLC确认TrtCl消失，加入离子交换水(200mL)。向所得混合溶液加入甲苯(100mL)，进行液相分离，并且有机层用离子交换水(80mL)和饱和的氯化钠水溶液(20mL)的混合溶液洗涤一次，用1M盐酸水溶液(50mL)洗涤一次，并且用饱和的氯化钠水溶液(50mL)洗涤四次。将硫酸钠加入到获得的有机层中，干燥并过滤。向过滤物中加入甲苯(50mL)，并且共沸脱水三次，以得到含有化合物2的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3。
化合物2
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.4(1H，t，-C-(OCH2CH2)4-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
3.45-3.85(14H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)3-OH，包括化合物3衍生的一种)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
MS(ESI+)：化合物2 454.5[M+NH4]+，化合物3 696.9[M+NH4]+
产量：63.8g
Figure BDA0003288057530000571
接着，将含有化合物2(化合物2：62.8g，小于0.14mol)的反应产物和甲苯(314mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中。在氮气气氛下溶解后，加入三乙胺(24mL，0.17mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(12.2mL，0.16mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物2消失，加入1M盐酸水溶液(314mL)，随后液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(314mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(314mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(314mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物4的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3。
化合物4
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.98(3H，s，-O-CH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
3.45-3.85(12H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)2-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
4.33(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3衍生的一种)
MS(ESI+)：化合物4 532.4[M+NH4]+，化合物3 696.8[M+NH4]+
产量：70.4g
根据比较例1-1的化合物4的1H-NMR测量结果，确认含有约4.8mol％的量的化合物3。
基于δ3.23峰的化合物3含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
此外，比较例1-1获得的反应产物2包含约6.9wt％的量的化合物3。
(比较例1-2)
式(4)中a为8且R1为三苯甲基的化合物5的合成
Figure BDA0003288057530000581
将氢化钠(7.8g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(141mL)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(70mL)与用甲苯(107mL)共沸脱水的四乙二醇1(213g，1.10mol)混合，并且用30分钟逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(70mL)与包含化合物4(化合物4：70.4g，小于0.14mol)的反应产物混合，并且用15分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至80℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物4消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将反应混合物溶液减压浓缩，并且向残留物加入甲苯(352mL)。甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(352mL)洗涤两次并且用饱和的氯化钠水溶液(352mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物5的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得反应产物含有上述化合物3和6。
化合物5
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.52(1H，t，-C-(OCH2CH2)8-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
3.45-3.85(30H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)7-OH，包括化合物3和6衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
MS(ESI+)：化合物5 630.8[M+NH4]+，化合物3 696.8[M+NH4]+,化合物6 1048.4[M+NH4]+
产量：82.4g
(比较例1-3)
式(3)中a为8、R1为三苯甲基且L为甲苯磺酰基的化合物41的合成
Figure BDA0003288057530000591
将四氢呋喃(200mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应器中的含有化合物5(化合物5：77.8g，小于0.14mol)的反应产物中，并且产物在氮气气氛下溶解。然后，将溶液冷却至0℃。加入氢氧化钠水溶液(20g，0.5mol/60mL)，并且将混合物在0℃下搅拌20分钟。向反应混合物中滴加甲苯磺酰氯/四氢呋喃溶液(30g，0.16mnol/60mL)30分钟，并且混合物在0℃下搅拌1.5小时。1.5小时后，通过TLC确认化合物5消失后，在室温下搅拌混合物12.5小时，以使过量的甲苯磺酰氯消失。12.5小时后，通过TLC确认甲苯磺酰氯消失并且加入离子交换水(30mL)和乙醚(50mL)。混合物用饱和的碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤一次并用饱和的氯化钠水溶液(50mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后脱水。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物41的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3和6。
化合物41
MS(ESI+)：化合物41 785.2[M+NH4]+，化合物3 697.0[M+NH4]+,化合物6 1048.7[M+NH4]+
产量：86.1g(产率：88％)
(比较例1-4)
在一端具有羟基并且在一端具有甲苯磺酰基且具有8个单元的乙二醇链长的化合物42的合成
Figure BDA0003288057530000601
将含有化合物41(化合物41：85.6g，小于0.144mol)、甲醇(20mL)、钯碳(Pd/C，2g)的反应产物加入到装配有温度计、氮气入口和搅拌器的反应容器中，进行氢气置换，并且混合物在室温下搅拌18小时。18小时后，通过TLC确认化合物42消失，并且通过硅藻土过滤去除Pd/C。向过滤物中加入离子交换水(130mL)，并且过滤形成的三苯甲烷。由于过滤物中残留三苯甲烷，因此用己烷(100mL)洗涤五次以去除三苯甲烷。甲醇/离子交换水层减压浓缩以得到含有化合物41的粗产物。然后，在粗产物中加入二氯甲烷(120mL)并且在20℃条件下用离子交换水(100mL)洗涤混合物三次且用饱和的氯化钠水溶液(100mL)洗涤两次。将硫酸钠加入到有机层中，干燥并过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物42的纯化产物，为淡黄色透明液体。
化合物42
纯化产物
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.73(1H，t，H-(OCH2CH2)8-)，
3.45-3.85(30H，m，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
MS(ESI+)：化合物42 542.4[M+NH4]+
粗产物
MS(ESI+)：化合物42 542.4[M+NH4]+，化合物1 212.7[M+NH4]+，化合物9 564.5[M+NH4]+
产量：52.0g(产率：89％)
纯度：96.7％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝50/50，流速：0.6mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：0.2mg/mL
注入量：40μL
纯度值是化合物42的峰值面积与在10到40分钟的保留时间内检测到的总峰值面积的比率。
(比较例1-5)
在一端具有甲苯磺酰基并且在一端具有叔丁基酯基且具有8个单元的乙二醇链长的化合物45的合成
Figure BDA0003288057530000621
将化合物45(1.0g，1.91mmol)，丙烯酸叔丁酯(1.8mL,19mmol)和甲苯(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气气氛下溶解。此后，将混合物冷却至0℃，加入粉状氢氧化钾(53mg，0.9mmol)，并使混合物在0℃下反应1小时。反应后，加入离子交换水(20mL)并且进行液相分离。将有机层用饱和的氯化钠水溶液(20mL)洗涤一次。减压浓缩有机层，以获得化合物45，为淡黄色透明液体。
化合物45
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.45(9H，s，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.50(2H，t，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
3.45-3.85(32H，m，-CH2CH2-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.34(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
MS(ESI+)：化合物45 670.6[M+NH4]+
产量：1.06g(产率：85％)
(比较例1-6)
在一端具有邻苯二甲酰亚胺基并且在一端具有叔丁基酯基且具有8个单元的乙二醇链长的化合物46的合成
Figure BDA0003288057530000631
将化合物45(1.06g,1.60mmol)和乙腈(25mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且在氮气气氛下溶解化合物后，加入邻苯二甲酰亚胺钾盐(520mg，2.80mmol)，并且将混合物在80℃下搅拌8小时。通过NMR确认化合物45消失，并且浓缩反应溶液。加入二氯甲烷(7mL)并过滤固体份后，将过滤物用0.1M氢氧化钠水溶液(7mL)洗涤一次并且用饱和氯化钠水溶液(10mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物46，为淡黄色透明液体。
化合物46
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.45(9H，s，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
2.50(2H，t，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
3.45-3.85(32H，m，-CH2CH2-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-)，
3.90(2H，t，-OCH2CH2-邻苯二甲酰亚胺)，
7.71(2H，dd，-邻苯二甲酰亚胺)，
7.80(2H，dd，-邻苯二甲酰亚胺)
MS(ESI+)：化合物46 945.7[M+NH4]+
产量：965mg(产率：95％)
(比较例1-7)
式(8)中a为8且R2为叔丁基的化合物9的合成
Figure BDA0003288057530000632
将化合物46(510mg,0.80mmol)、乙醇(10mL)和一水合肼(334mg,6.70mmol)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在85℃下进行反应45分钟。冷却至室温后，为溶解析出的白色固体，加入12％碳酸钾水溶液(5mL)并且随后减压浓缩混合溶液。接着，加入离子交换水(3mL)，加入浓盐酸(0.6mL)将pH调整至3，并且过滤固体。过滤物用二氯甲烷洗涤三次且水层通过加入氯化钠而饱和。该水溶液用二氯甲烷萃取五次，并且有机层用硫酸钠脱水并过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物9，为淡黄色透明液体。
化合物9
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.1(2H，t，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-)，
3.45-3.85(32H，m，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-CH2CH2-)
产量：400mg(产率：99％)
(比较例1-8)
式(1)中a为8的化合物10的合成
Figure BDA0003288057530000641
将化合物9(400mg，0.80mmol)和1M盐酸(0.5mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中之后，化合物溶解并且然后混合物在55℃下搅拌5小时。冷却至15℃后，加入10M氢氧化钠水溶液以将pH调整至5。向通过水与甲苯(5mL)共沸脱水两次得到的固体加入二氯甲烷(10mL)，并且过滤混合物。减压浓缩过滤物，以获得化合物10，为淡黄色透明液体。
化合物10
1H-NMR(CD3OD，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(2H，t，-CH2CH2-COOH)，
3.17(2H，t，H2N-CH2CH2O-)，
3.6-3.9(32H，m，-CH2CH2O-(CH2CH2O)7-CH2CH2-)
产量：320mg(产率：83％)
纯度：95.6％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝15/85，
流速：1.0mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：1mg/mL
注入量：50μL
(比较例2，用于经由甲苯磺酰化步骤获得化合物18的制备方法)式(1)中a为12的化合物18通过专利文献4描述的制备方法合成。
(比较例2-1)
式(3)中a为8、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物11的合成
Figure BDA0003288057530000651
将含有化合物5(化合物5：72.7g，小于0.12mol)的反应产物和甲苯(350mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(20ml，0.14mol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(10mL，0.13mol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物5消失，加入1M盐酸水溶液(100mL)，并且进行液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(100mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(100mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物11的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3和6。
化合物11
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
3.45-3.85(28H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)6-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3和6衍生的那些)
MS(ESI+)：化合物11 708.3[M+NH4]+，化合物3 696.4[M+NH4]+,化合物6 1048.5[M+NH4]+
产量：80.1g
根据比较例2-1的化合物11的1H-NMR测量结果，确认化合物3和6的含量约为9.5mol％(化合物3：4.8mol％，化合物6：4.7mol％，粗略估计)。
基于δ3.23峰的化合物3和6含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
关于化合物3的含量，应用比较例1-1中计算的值。
此外，比较例2-1中使用的反应产物5含有约11.7wt％的量的化合物3和6。
(比较例2-2)
式(4)中a为12且R1为三苯甲基的化合物12的合成
Figure BDA0003288057530000671
将氢化钠(6.6g)放入装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气置换后，加入MeCN(200mL)并且混合物冷却至0℃。将MeCN(50mL)与用甲苯(50mL)共沸脱水的四乙二醇1(180g，0.93mol)混合，并且用30分钟逐滴加入该混合溶液。在逐滴加入完成后，将MeCN(50mL)与包含化合物11(化合物11：80.1g，小于0.12mol)的反应产物混合，并且用15分钟逐滴加入混合溶液。在逐滴加入完成后，将反应混合物加热至80℃并搅拌3小时。3小时后，用1H-NMR确认化合物11消失，并且使混合物冷却直至温度变为40℃以下。将反应混合物溶液减压浓缩，并且向残留物加入甲苯(200mL)。甲苯溶液用饱和的氯化铵水溶液(100mL)洗涤两次并且用饱和的氯化钠水溶液(100mL)洗涤三次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物12的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，由ESI-MS和1H-NMR测量证实所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物12
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(1H，t，-C-(OCH2CH2)12-OH)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
3.45-3.85(46H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)11-OH，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
MS(ESI+)：化合物12 806.4[M+NH4]+，化合物3 696.8[M+NH4]+,化合物6 1048.1[M+NH4]+,化合物13 1400.9[M+NH4]+
产量：85.4g
(比较例2-3)
式(3)中a为12、R1为三苯甲基且L为甲苯磺酰基的化合物43的合成
Figure BDA0003288057530000681
将含有化合物12(化合物12：57.3g，小于72.7mmol)的反应产物和二氯甲烷(280mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，产物在氮气气氛下溶解，加入三乙胺(10mL，73mol)、4-二甲氨基吡啶(888mg，7.27mmol)和TsCl(12.5g，65.5mmol)，并且在室温下搅拌混合物4.5小时。4.5小时后，通过1H-NMR分析确认TsCl消失，加入1M盐酸水溶液(150mL)，并且进行液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(150mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(150mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(150mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物43的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物43
MS(ESI+)：化合物43 960.3[M+NH4]+，化合物3 696.3[M+NH4]+,化合物6 1048.2[M+NH4]+,化合物13 1400.8[M+NH4]+
产量：69.1g(产率：101％)
(比较例2-4)
在一端具有羟基并且在一端和具有甲苯磺酰基的具有12个单元乙二醇链长的化合物44的合成
Figure BDA0003288057530000691
将含有化合物43(化合物43：69.1g，小于73.3mmol)的反应产物和甲醇(550L)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中。在氮气气氛下将化合物溶解后，加入对甲苯磺酸一水合物(6.97g，36.7mmol)和己烷(200mL)。在室温下搅拌30分钟后，移除己烷层，再次加入己烷(200mL)，并且搅拌混合物30分钟。在进行六次相同操作后，通过1H-NMR测量的结果确认化合物43、3、6和13消失，并且加入饱和的碳酸氢钠水溶液(200mL)。混合溶液用己烷(200mL)洗涤两次以去除三苯甲基甲醚。甲醇溶液减压浓缩，并且加入二氯甲烷(200mL)并且在20℃以下的条件下用离子交换水(200mL)洗涤混合物三次且用饱和的氯化钠水溶液(200mL)洗涤一次。向有机层加入硫酸镁以脱水，随后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物44，为淡黄色透明液体。
化合物44
纯化产物
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.73(1H，t，H-(OCH2CH2)8-)，
3.45-3.85(46H，m，-(OCH2CH2)11-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-(OCH2CH2)7-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.35(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
MS(ESI+)：化合物44 718.3[M+NH4]+
粗产物
MS(ESI+)：化合物44 718.3[M+NH4]+，化合物1 212.3[M+NH4]+,化合物9 564.5[M+NH4]+,化合物16 916.4[M+NH4]+
产量：30.3g(产率：59％)
纯度：94.9％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc.制造
检测器：RI
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝55/45
流速：0.6mL/分钟
柱温：40℃
样本浓度：0.2mg/mL
注入量：40μL
纯度值是化合物44的峰值面积与在11到40分钟的保留时间内检测到的总峰值面积的比率。
(比较例2-5)
在一端具有甲苯磺酰基并且在一端具有叔丁基酯基且具有12个单元的乙二醇链长的化合物47的合成
Figure BDA0003288057530000711
将化合物44(4.96g，7.08mmol)，丙烯酸叔丁酯(3.09mL,21.2mmol)和甲苯(100mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在氮气气氛下溶解。此后，将混合物冷却至0℃，随后加入粉状氢氧化钾(199mg，3.54mmol)，并使混合物在0℃下反应1小时。反应之后，加入饱和的氯化铵水溶液(50mL)并且进行液相分离。将有机层用饱和的氯化钠水溶液(50mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物47，为淡黄色透明液体。
化合物47
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.45(9H，s，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
2.45(3H，s，-OSO2-苯基-CH3)，
2.50(2H，t，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
3.45-3.85(48H，m，-CH2CH2-(OCH2CH2)11-OCH2CH2-)，
4.16(2H，t，-OCH2CH2-OSO2-苯基-CH3)，
7.34(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)，
7.80(2H，d，-OSO2-苯基-CH3)
MS(ESI+)：化合物47 847.0[M+NH4]+
产量：5.43g(产率：93％)
(比较例2-6)
在一端具有邻苯二甲酰亚胺基并且在一端具有叔丁基酯基且具有12个单元的乙二醇链长的化合物48的合成
Figure BDA0003288057530000721
将化合物47(5.43g,6.55mmol)和乙腈(45mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且在氮气气氛下溶解化合物后，加入邻苯二甲酰亚胺钾盐(1.58g，8.52mmol)，并且将混合物在80℃下搅拌18小时。通过NMR确认化合物48消失，并且浓缩反应溶液。向残留物加入二氯甲烷(50mL)并过滤固体后，将过滤物用0.1M氢氧化钠水溶液(50mL)洗涤一次并且用饱和的氯化钠水溶液(50mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物48，为淡黄色透明液体。
化合物48
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.45(9H，s，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
2.50(2H，t，(CH3)3C-O-CO-CH2CH2-)，
3.45-3.85(48H，m，-CH2CH2-(OCH2CH2)11-OCH2CH2-)，
3.90(2H，t，-OCH2CH2-邻苯二甲酰亚胺)，
7.71(2H，dd，-邻苯二甲酰亚胺)，
7.80(2H，dd，-邻苯二甲酰亚胺)
MS(ESI+)：化合物48 828.1[M+NH4]+
产量：4.26g(产率：81％)
(比较例2-7)
式(8)中a为12且R2为叔丁基的化合物17的合成
Figure BDA0003288057530000722
将化合物48(4.26g,5.30mmol)、乙醇(60mL)和一水合肼(3.86mL,79.5mmol)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中，并且在85℃下进行反应1小时。冷却至室温后，为溶解析出的白色固体，加入12％碳酸钾水溶液(5mL)并且随后减压浓缩混合溶液。向残留物加入离子交换水(20mL)，加入浓盐酸将pH调整至3，并且过滤固体。将氯化钠加入到过滤物中，用二氯甲烷(20mL)萃取两次。用硫酸钠脱水有机层并过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物17，为淡黄色透明液体。
化合物17
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
1.44(9H，s，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
2.50(2H，t，-CH2CH2-COO-C(CH3)3)，
3.1(2H，t，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-)，
3.45-3.85(48H，m，H2N-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH2CH2-)
产量：3.13g(产率：88％)
(比较例2-8)
式(1)中a为12的化合物18的合成
Figure BDA0003288057530000731
将化合物17(3.13g，4.65mmol)和1M盐酸(3mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中之后，化合物溶解并且然后混合物在55℃下搅拌2小时。冷却至15℃后，用离子交换水(5mL)稀释混合物，且用二氯甲烷(10mL)洗涤三次。向水层中加入2M氢氧化钠水溶液以将pH调整至9。水溶液用二氯甲烷(10mL)洗涤三次且通过加入氯化钠而饱和水层。该水溶液用氯仿(10mL)萃取三次，并且有机层用硫酸钠脱水并过滤。减压浓缩过滤物，以获得化合物18，为淡黄色透明液体。
化合物18
1H-NMR(CD3OD，内标TMS)；δ(ppm)：
2.56(2H，t，-CH2CH2-COOH)，
3.17(2H，t，H2N-CH2CH2O-)，
3.6-3.9(48H，m，-CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH2CH2-)
产量：2.32g(产率：76％)
纯度：98.0％(HPLC-RI)
用于纯度测量的HPLC测量条件如下所示。
装置：Waters Corporation制造的alliance，
柱：Inertsil ODS-3(柱尺寸：4.6mm×25cm，颗粒大小5μm)，由GL Science Inc制造，
检测器：RI,
展开溶剂：甲醇溶液/5mM醋酸铵＝27.5/72.5，
流速：1.0mL/分钟，
柱温：40℃
样本浓度：2mg/mL，
注入量：50μL
(比较例3)
比较例2-2得到的含有化合物12的反应产物中两末端具有三苯甲基的化合物3、6和13的含量的计算式
式(3)中a为12、R1为三苯甲基且L为甲磺酰基的化合物19的合成
Figure BDA0003288057530000751
将含有化合物12(化合物12：25g，小于317mmol)的反应产物和甲苯(125mL)加入到装配有温度计、氮气入口管和搅拌器的反应容器中并且产物在氮气气氛下溶解，然后加入三乙胺(5.3ml，38mmol)。在10℃下逐滴加入甲磺酰氯(2.7mL，35mmol)，并且混合物在室温下搅拌2小时。2小时后，通过TLC分析确认化合物12消失，加入1M盐酸水溶液(50mL)，并且进行液相分离。有机层用1M盐酸水溶液(50mL)洗涤一次，用饱和的碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤两次，并且用饱和的氯化钠水溶液(50mL)洗涤一次。向有机层中加入硫酸钠用于脱水，然后过滤。减压浓缩过滤物，以获得包含化合物19的反应产物，为淡黄色透明液体。此外，通过ESI-MS测量确认所得的反应产物含有上述化合物3、6和13。
化合物19
1H-NMR(CDCl3，内标TMS)；δ(ppm)：
3.07(3H，s，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
3.23(2H，t，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
3.45-3.85(44H，m，-OCH2CH2-(OCH2CH2)10-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)，
4.37(2H，t，-OCH2CH2-O-SO2CH3)，
7.21-7.47(15H，m，(C6H5)3C-OCH2CH2-，包括化合物3、6和13衍生的那些)
MS(ESI+)：化合物19 884.9[M+NH4]+，化合物3 696.8[M+NH4]+,化合物6 1049.4[M+NH4]+,化合物13 1401.3[M+NH4]+
产量：26g
根据比较例3的化合物19的1HNMR测量结果，确认化合物3、6和13的含量约为9.8mol％(化合物3：4.8mol％，化合物6：4.7mol％，化合物13：0.3mol％，粗略估计)。
基于δ3.23峰的化合物3、6和13的含量的计算式由以下式表示。
(((2-[δ4.32])/4H)/([δ4.32]/2H))×100(mol％)
关于化合物3和6的含量，应用比较例1-1和2-1中计算的值。
此外，比较例3中使用的反应产物12含有约9.7wt％的量的化合物3、6和13。
使用作为原材料的在两末端分别具有羟基和三苯甲基的异型单分散聚乙二醇的化合物5直到获得在两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇的化合物10的总产量的比较
表1示出在a为8或12的情况下从式(4)制造式(1)时的总产量。
[表1]
a的值 实施例 比较例
8 64％ 58％
12 72％ 34％
按照以下式计算总产率。
a＝8的情况：
(从化合物5到获得化合物10的各步骤中的产量相乘获得的值)×(a为8的化合物10的纯含量)/(a为8的化合物5的纯含量)
a＝12的情况：
(从化合物12到获得化合物18的各步骤中的产量相乘获得的值)×(a为12的化合物18的纯含量)/(a为12的化合物12的纯含量)
在确定总产量的式中，其中a为8的化合物5的纯含量是通过将从包含实施例1-2中获得的化合物5的反应产物的量减去在两末端具有三苯甲基的化合物3和6含量而获得的值乘以实施例4中获得的化合物42的纯度而获得的值。此外，其是通过将从包含比较例1-2中获得的化合物5的反应产物的量减去在两末端具有三苯甲基的化合物3和6含量而获得的值乘以比较例1-4中获得的化合物42的纯度而获得的值。
在确定总产量的式中，其中a为12的化合物12的纯含量是通过将从包含实施例2-2中获得的化合物12的反应产物的量减去在两末端具有三苯甲基的化合物3、6和13的含量而获得的值乘以实施例5中获得的化合物44的纯度而获得的值。此外，其是通过将从包含比较例2-2中获得的化合物5的反应产物的量减去在两末端具有三苯甲基的化合物3、6和13的含量而获得的值乘以比较例2-4中获得的化合物44的纯度而获得的值。
在确定总产量的式中，a为8的化合物10和a为12的化合物18的纯含量分别对应于HPLC确定的纯度。
在传统的制备方法中，将羟基暂时转化为甲苯磺酰基，以纯化在两末端包含三苯甲基的杂质，其链长不同且具有特定分子量，在链长延长步骤中作为副产物而形成。另一方面，通过无此步骤地去除杂质，步骤数比之前少，并且能够抑制可能导致产量减少的残留的未反应原材料的存在和反应副产物的形成，使得能够提高产量。
工业应用性
根据本发明，能够提供高纯度的在两末端分别具有氨基和羧基的异型单分散聚乙二醇的新颖制备方法。
虽然已经参考其具体实施例详细地描述了本发明，但对本领域技术人员显而易见的是，能够在不背离本发明的精神和范围的情况下，对本发明进行各种变化或修改。
本申请基于2019年3月29日提交的日本专利申请(日本专利申请号2019-065528)，该全文作为参考并入本申请。

Claims (9)

1.一种式(1)表示的异型单分散聚乙二醇的制备方法，该方法包括下列步骤(A)、(B)、(C)、(D)、(E)和(F)：
Figure FDA0003288057520000011
其中，在式(1)中，a表示6至12的整数，
步骤(A)：实施式(2)的化合物和式(3)的化合物之间的亲核取代反应，使得满足式(F1)的要求，以获得式(4)的化合物的步骤：
Figure FDA0003288057520000012
其中，在式(2)中，b表示3至9的整数，
Figure FDA0003288057520000013
其中，在式(3)中，L表示甲磺酰基或者甲苯磺酰基，R1表示三苯甲基或者苄基，并且c表示3至9的整数，
6≤b+c≤12 (F1)
Figure FDA0003288057520000014
其中，在式(4)中，R1表示三苯甲基或者苄基并且a表示6至12的整数；
步骤(B)：在10℃以下的温度条件下实施式(5)的化合物向所述步骤(A)获得的式(4)的化合物的迈克尔加成反应，以获得式(6)的化合物的步骤，
Figure FDA0003288057520000015
其中，在式(5)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，
Figure FDA0003288057520000021
其中，在式(6)中，R1表示三苯甲基或者苄基，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，并且a表示6至12的整数；
步骤(C)：脱三苯甲基化或者脱苄基化所述步骤(B)中获得的式(6)的化合物，以获得包含式(7)的化合物的反应产物的步骤，
Figure FDA0003288057520000022
其中，在式(7)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示6至12的整数；
步骤(D)：从所述步骤(C)获得的反应产物纯化式(7)的化合物的步骤；
步骤(E)：使所述步骤(D)中获得的式(7)的化合物与邻苯二甲酰亚胺反应并进行脱邻苯二甲酰亚胺化，以获得式(8)的化合物的步骤，
Figure FDA0003288057520000023
其中，在式(8)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示6至12的整数；以及
步骤(F)：使所述步骤(E)中获得的式(8)的化合物经历酸水解处理，以获得式(1)表示的化合物的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤(D)中使用二氯甲烷或者氯仿来纯化式(7)的化合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在所述步骤(D)中，使用水或者无机盐浓度为10重量％以下的水溶液来纯化式(7)的化合物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述步骤(D)包括在1℃至25℃下的清洗步骤。
5.一种式(1)表示的异型单分散聚乙二醇的制备方法，该方法包括下列步骤(A)、(B)、(C)、(E)、(F)和(G)：
Figure FDA0003288057520000031
其中，在式(1)中，a表示13至40的整数，
步骤(A)：实施式(2)的化合物和式(3)的化合物之间的亲核取代反应，使得满足式(F1)的要求，以获得式(4)的化合物的步骤：
Figure FDA0003288057520000032
其中，在式(2)中，b表示3至37的整数，
Figure FDA0003288057520000033
其中，在式(3)中，L表示甲磺酰基或者甲苯磺酰基，R1表示三苯甲基或者苄基，并且c表示3至37的整数，
13≤b+c≤40 (F1)
Figure FDA0003288057520000034
其中，在式(4)中，R1表示三苯甲基或者苄基并且a表示13至40的整数；
步骤(B)：在10℃以下的温度条件下实施式(5)的化合物向所述步骤(A)获得的式(4)的化合物的迈克尔加成反应，以获得式(6)的化合物的步骤，
Figure FDA0003288057520000041
其中，在式(5)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，
Figure FDA0003288057520000042
其中，在式(6)中，R1表示三苯甲基或者苄基，R2表示具有1至6个碳原子的烃基，并且a表示13至40的整数；
步骤(C)：脱三苯甲基化或者脱苄基化所述步骤(B)中获得的化合物，以获得式(7)的化合物的步骤，
Figure FDA0003288057520000043
其中，在式(7)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示13至40的整数；
步骤(E)：使所述步骤(C)中获得的式(7)的化合物与邻苯二甲酰亚胺反应并进行脱邻苯二甲酰亚胺化，以获得式(8)的化合物的步骤，
Figure FDA0003288057520000044
其中，在式(8)中，R2表示具有1至6个碳原子的烃基并且a表示13至40的整数；
步骤(F)：使所述步骤(E)中获得的式(8)的化合物经历酸水解处理，以获得包含式(1)表示的化合物的反应产物的步骤；以及
步骤(G)：从所述步骤(F)获得的反应产物纯化式(1)的化合物的步骤。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述步骤(G)中待用于纯化的有机溶剂是二氯甲烷或者氯仿。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述步骤(G)中待用于纯化的水溶液为pH8以上的碱性水溶液。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述步骤(B)中式(5)的化合物的R2为异丙基或者叔丁基。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中，片状氢氧化钾或者粉状氢氧化钾用作所述步骤(B)中的碱。
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