CN113633650A - 一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，稀有人参皂苷Compound K在益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品或其作为成分存在于组合物等中的应用。本发明发现稀有人参皂苷Compound K对Aβ42淀粉样蛋白形成的抑制效果好于β分泌酶抑制剂，从而可避免Aβ42淀粉样蛋白形成而影响智力。此外，稀有人参皂苷Compound K还具有一定的提高细胞活性的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物活性物质及其应用，尤其涉及一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷Compound K的应用，可应用于功能食品、保健品和生物医药制品等领域。
背景技术
稀有人参皂苷Compound K在天然人参和西洋参中是不存在或含量甚微的一种人参皂苷，随着人们对它的活性研究越来越广泛和深入，人们发现稀有人参皂苷Compound K在许多方面都体现了更好的生物活性，如：可诱导肿瘤细胞凋亡起到良好的抗肿瘤作用；作用于透明质酸合成酶促进透明质酸分泌从而起到良好的延缓皮肤干燥、抗皱纹等作用；以及抗过敏、抗炎、保肝等作用。
目前还尚未有关于稀有人参皂苷Compound K在神经退行疾病中的相关研究。
发明内容
为了解决上述技术所存在的不足之处，本发明提供了一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用。
为了解决以上技术问题，本发明采用的技术方案是：一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，稀有人参皂苷Compound K在益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等中的应用。
进一步地，稀有人参皂苷Compound K单独用于制备具有抑制Aβ42淀粉样蛋白产生的、益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品。
进一步地，稀有人参皂苷Compound K用于制备具有抑制Aβ42淀粉样蛋白产生的、益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品的组合物。
进一步地，稀有人参皂苷Compound K用于制备β分泌酶或γ分泌酶抑制剂及组合物。
本发明发现稀有人参皂苷Compound K具有抑制细胞产生Aβ42淀粉样蛋白的作用，避免Aβ42淀粉样蛋白形成导致智力减退和神经退行疾病的发病。此外，稀有人参皂苷Compound K还具有提高细胞活性的作用。
附图说明
图1为标准品Aβ42淀粉样蛋白的不同浓度下测定的OD450nm值而制作的标准曲线。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用。
本发明提供了稀有人参皂苷Compound K在益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病中的应用。
包括稀有人参皂苷Compound K用于制备抑制Aβ42淀粉样蛋白产生的、益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品或其组合物。以及稀有人参皂苷Compound K用于制备β分泌酶或γ分泌酶抑制剂及组合物。
其中，由稀有人参皂苷Compound K制备的具有抑制Aβ42淀粉样蛋白产生的、益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品或其组合物可为任何可接受的剂型形式，包括口服剂型形式和外给药剂型形式。口服剂型包括片剂、压片糖果、硬胶囊、软胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、缓释片、缓释胶囊、控释片以及控释胶囊等。外给药制剂包括水针、冻干粉针、无菌粉针以及输液等。
(一)人参皂苷Compound K对细胞活力的影响
材料准备：
取对数生长期的细胞，吸去细胞培养液，用0.25％胰酶37℃消化2-3分钟，加2mLDMEM培养液，制成单细胞悬液，显微镜下细胞计数后，用培养液调整细胞浓度至2.5×105个/mL，96孔细胞培养板每孔加入200μL细胞悬液，在37℃、5％二氧化碳浓度的二氧化碳培养箱中培养6小时后，吸出培养液，用37℃预温的DMEM培养液冲洗1次。
实验处理：
实验组：在上述细胞材料中分别加入含有有效浓度分别为5、10和20μg/mL的稀有人参皂苷compound K的DMEM培养液。
对照组：在上述细胞材料中添加培养基。
处理方法：
上述实验组和对照组均每组处理3个复孔，继续培养12h后，每孔加入5mg/mL MTT20μL，继续培养4h后吸弃上清，每孔加入200μL DMSO，在微孔板振荡器上振荡10min直至晶体完全溶解。
将96孔培养板置于酶标仪上，在490nm下测定各孔光密度值，根据各孔光密度值计算细胞活性。
细胞活性的计算公式为：细胞活性％＝实验组样品的光密度值/对照组光密度值×100％。
实验结果：
根据酶标仪下测定的各孔光密度值计算细胞活性如表1所示，可知人参皂苷compound K对细胞活力有提高作用。
表1不同浓度人参皂苷compound K对细胞活力的影响
(二)稀有人参皂苷Compound K对Aβ42淀粉样蛋白形成的抑制作用
实验处理：
实验组：取对数生长期的细胞，分别加入含有有效浓度分别为5、10和20μg/mL的稀有人参皂苷Compound K的DMEM培养液。
阴性对照组：向对数生长期细胞中加入DMEM培养液。
阳性对照组：向对数生长期细胞中加入含有有效浓度为20μg/mL的β分泌酶抑制剂Verubecestat的DMEM培养液；Verubecestat是一种有效的、选择性的β分泌酶的抑制剂。
处理方法：
上述组别中每个处理三次重复，所有处理在37℃、5％二氧化碳浓度的二氧化碳培养箱中培养12小时后，收集上清液，用于Aβ42含量的测定。
按照“人β淀粉样多肽42(Aβ42)Elisa试剂盒”的操作要求，进行标准品和供试样品的Aβ42含量测定，制作标准品的标准曲线，根据标准曲线计算出供试样品的Aβ42的含量(pg/ml)，供试样品对Aβ42产生的抑制率计算公式为：
抑制率％＝(阴性对照Aβ42的含量-实验组或阳性对照组Aβ42的含量)/阴性对照Aβ42的含量x 100％。
实验结果：
表2试剂盒测定的标准品Aβ42淀粉样蛋白的不同浓度的OD值。
根据表2绘制标准品Aβ42淀粉样蛋白的不同浓度下OD值标准曲线，如图1所示。
根据图1中标准曲线得到标准计算公式：
Y＝0.0032x+0.1312,
R2＝0.9866；
将“人β淀粉样多肽42(Aβ42)Elisa试剂盒”测出的实验组和阳性对照组的OD值代入到公式中，得到相应的Aβ42淀粉样蛋白浓度。
再通过对Aβ42淀粉样蛋白产生的抑制率计算公式，计算实验组和阳性对照组样品对Aβ42淀粉样蛋白产生的抑制率，如表3所示：
表3阳性对照组与实验组对Aβ42淀粉样蛋白产生的抑制率。
结论：根据上述实验结果表明，稀有人参皂苷Compound K对Aβ42淀粉样蛋白的形成具有明显的抑制作用，且抑制效果优于β分泌酶抑制剂(Verubecestat)，因此在益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等方面具有有益效果，可应用于益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病等的功能食品、保健品和生物医药制品或其组合物等。
上述实施方式并非是对本发明的限制，本发明也并不仅限于上述举例，本技术领域的技术人员在本发明的技术方案范围内所做出的变化、改型、添加或替换，也均属于本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，其特征在于：所述稀有人参皂苷Compound K在益智、预防智力衰退、防治神经退行疾病中的应用。
2.如权利要求1所述的抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，其特征在于：所述稀有人参皂苷Compound K在抑制Aβ42淀粉样蛋白产生中的应用。
3.如权利要求1所述的抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，其特征在于：所述稀有人参皂苷Compound K用于制备β分泌酶或γ分泌酶抑制剂及组合物。
4.如权利要求1-3任一项所述的抑制淀粉样蛋白产生的稀有人参皂苷的应用，其特征在于：所述稀有人参皂苷Compound K单独用于功能食品、保健品和生物医药制品或人参皂苷Compound K作为成分存在于组合物中。
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