CN113577280A - 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用 - Google Patents

选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113577280A
CN113577280A CN202010361458.5A CN202010361458A CN113577280A CN 113577280 A CN113577280 A CN 113577280A CN 202010361458 A CN202010361458 A CN 202010361458A CN 113577280 A CN113577280 A CN 113577280A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acid
colon
dehydroxy
inhibitor
release
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010361458.5A
Other languages
English (en)
Inventor
沈剑萍
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN202010361458.5A priority Critical patent/CN113577280A/zh
Publication of CN113577280A publication Critical patent/CN113577280A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/191—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more hydroxy groups, e.g. gluconic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/194—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more carboxyl groups, e.g. succinic, maleic or phthalic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4891—Coated capsules; Multilayered drug free capsule shells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明提供一种选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用，所述产品含有口服定位释放制剂，所述口服定位释放制剂于结肠定位释放，所述口服定位释放制剂中含有肠道菌7α‑脱羟反应抑制剂。本产品能够在结肠定位缓释释放，为多种疾病的治疗提供了技术支持。

Description

选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用
技术领域
本发明属于药物研发领域，具体涉及一种可以选择性抑制肠道次级胆汁酸的组合物，以及在治疗非酒精性脂肪性肝病、肝癌、糖尿病、代谢综合征、结直肠癌、结直肠息肉、溃疡性结直肠炎等疾病的用途。
背景技术
胆汁酸是在肝内由胆固醇转变生成。胆汁酸是胆汁中的主要成分，约占胆汁固体成分的 85％。胆汁酸是天然的离子化的去垢剂，在脂酸吸收、转运、分泌和调节胆固醇代谢方面起着重要作用。人类胆汁中存在的胆汁酸主要有：胆酸、鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸，并有少量石胆酸。人类在正常情况下肝脏合成胆汁酸的速度不高，成年人每日约合成400～600mg。胆汁酸的肠肝循环是指胆汁酸分泌进入肠腔后，在空肠末端或回肠，通过门静脉系统再回流入肝脏，大约95％的胆汁酸被重吸收回肝脏，仅5％的胆汁酸通过粪便排出。正常人体肝脏内的胆汁酸池大约3～5g，而机体维持脂类物质的消化吸收，需要约12～32g胆汁酸，每天饭后进行的约12次肠肝循环即可弥补肝脏胆汁酸的合成不足，使有限的胆汁酸池能够发挥最大限度的乳化作用。因此，胆汁酸肠肝循环的生理意义在于使有限的胆汁酸重复利用，促进脂类食物的消化与吸收得以正常进行。
肝脏是合成胆汁酸的唯一器官，胆汁酸在肝实质细胞中由胆固醇合成，生成游离状态的初级胆汁酸：鹅去氧胆酸和胆酸，再以酰胺键与牛磺酸/甘氨酸或硫酸盐/葡萄糖醛酸结合形成完全离子化的带负电荷的亲水极性分子——结合型胆汁酸(牛磺/甘氨酸胆酸，T/G-BA；硫酸盐/葡萄糖醛酸胆酸，S/U-BA)。结合型胆汁酸经胆管分泌进入肠道，其在肠道pH环境下可溶性极高，利于发挥生理作用。
在肠道中，结合型胆汁酸在回肠末端和结肠上段肠道细菌的作用下解离成游离型胆汁酸，随之被结肠内的肠道细菌的7α-脱羟反应转化为次级胆汁酸：脱氧胆酸和石胆酸，二者在结肠通过弥散作用重吸收或通过粪便排出体外。
结合型胆汁酸在小肠前端几乎不能被吸收，但占绝大多数的T/G-BA在回肠中能够被顶膜的顶端钠依赖型胆汁酸转运体[ASBT]主动有效地重吸收入肠上皮细胞，重吸收入门静脉随血流运回肝脏，重吸收的胆汁酸在肝细胞中再与新合成的结合型胆汁酸一起由肝细胞毛细胆管膜的胆盐输出泵[BESP(ABCB11)]分泌进入胆道系统。而S/U-BA由小肠上皮细胞顶侧膜的多药耐药相关蛋白2[MRP2(ABCC2)]重吸收入肠上皮细胞，由基底膜的MRP3泵入门静脉系统，再由肝细胞毛细胆管膜的MRP2分泌入毛细胆管。
如图8所示，肠道共生菌将宿主生成的初级胆汁酸经过3个主要步骤转化生成为次级胆汁酸,第一将结合初级胆汁酸进行脱氨生成未结合胆汁酸,第二将未结合胆汁酸转运入有胆汁酸代谢能力的共生菌,第三步将未结合胆汁酸经过7-α脱羟反应,最终生成终末次级胆汁酸(脱氧胆酸和石胆酸)。
胆汁酸既具有重要的生理功能，也有一定的细胞毒性。不同胆汁酸的细胞毒性不同，总体来说，疏水性越强的胆汁酸毒性越大，肠道菌群代谢产生的次级胆汁酸疏水性大于初级胆汁酸，早在1940年，次级胆汁酸中的脱氧胆酸(DCA)就被证明具有致癌性。一些肝病的患者表现为肠道菌群紊乱，其中与胆汁酸代谢相关的菌群如Bacteroides以及Clostridium明显升高，从而产生大量的次级胆汁酸，造成肠细胞和肝细胞的损伤。近年来，有越来越多的研究证明，次级胆汁酸会对宿主细胞造成毒性，对肠道细胞的刺激会引发肠道细胞炎症、增生和肠癌，而通过肝肠循环进入肝脏，会引发肝细胞炎症、纤维化甚至癌变。
非酒精性脂肪性肝病包括一系列疾病，从单纯的脂类在肝内异常沉积(单纯脂肪变)，到脂肪变同时伴有炎症成为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)甚至肝硬化，产生肝癌变，患者没有酗酒史。脂肪肝和非酒精性脂肪性肝炎可以在各年龄段包括儿童发病。在美国，有10-20％的人口患脂肪肝，有3-5％的人患非酒精性脂肪性肝炎。据估计，在中国比较发达的城市，非酒精性脂肪性肝病的发病率近20年翻了2倍。脂肪肝或者单纯脂肪变在人群发病率在10-15％，在肥胖者中高达70-80％。非酒精性脂肪性肝病在普通人群的发病率约3％，在肥胖者可以达到15-20％。非酒精性脂肪性肝炎是代谢综合征的典型表现之一。代谢综合征的特点是中心性肥胖，胰岛素抵抗，高血压，高血糖，高甘油三酯血症和脂肪肝。目前，非酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝炎没有公认的标准治疗方案。治疗非酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝炎的首要条件是改变生活方式，加强锻炼、避免饮酒，减轻体重，平衡营养和膳食。尽管疗效不是非常肯定，仍有机构应用一些解毒药物如保护肝细胞药物等。比较有前景的药物包括抗氧化剂、胰岛素增敏剂(如二甲双胍和噻唑烷二酮类药物等)保肝药和降脂药。然而，这些药物的应用尚存在争议，需要更多的研究去证实其效果和安全性。需要开发新的安全的预防和/或逆转脂肪在肝脏积聚的方法。
结直肠癌是常见的恶性肿瘤，在男性及女性恶性肿瘤中分别列于第3位第2位，约占全世界癌症死亡率的8％。结直肠癌的发病率逐年增长。结直肠的癌的发生发展和临床特征很大程度上取决于所采取的预防措施，最近美国的癌症统计数据表明由于及时。得到内镜检测并切除癌前病变，其发病率有下降的趋势。结直肠息肉是临床上最常见多发的疾病，其中大部分是腺瘤型息肉，而结直肠癌患者有70％是由结直肠腺瘤型息肉进展形成的。结直肠腺瘤为结直肠癌最主要的癌前病变，目前国内外公认的息肉发展模式为腺瘤型息肉、异形增生、腺癌，其癌变的过程历时约10年，因此对结直肠息肉的治疗尤为重要。
近些年来，随着人们饮食习惯西化，结直肠癌的发病率日趋上升。高脂饮食是促进结直肠癌发生的重要因素之一，可增加肠腔内次级胆汁酸的水平。次级胆汁酸与结直肠癌的发生关系密切，尤其是脱氧胆酸，被认为是致癌和促癌因子。
目前有一些药物针对胆汁酸肝肠循环这个通路，用于治疗非酒精性脂肪性肝病(NASH)、糖尿病、肥胖等疾病，比如有国外医药公司在研发的ASBT受体抑制剂，可以抑制肠道内的胆汁酸重新吸收，希望用于治疗NASH，但由于出现了较严重的副作用而被终止；消胆胺可以吸收肠道内的胆汁酸，用于降低血胆固醇，同样因为一些常见的副作用等原因在临床上较少使用。此外，消胆胺对非酒精性脂肪性肝病(NASH)、糖尿病、结肠癌症等也没有疗效。
可见，这种没有靶向性和选择性、抑制所有胆汁酸肝肠循环的治疗方法会严重干扰胆汁酸正常的生理功能，对机体产生损害，并且疗效不佳。正如前文所描述，95％的胆汁酸在进入结肠前被重吸收，只有5％的胆汁酸进入结肠，被肠道菌群代谢最终形成次级胆汁酸(脱氧胆酸和石胆酸等)，与机体疾病密切相关的正是这些次级胆汁酸。
研究表明肠道细菌的7α-脱羟反应对环境pH敏感，最适的酶活性pH为7左右，pH降低到6酶活性只有25％，降低到5以下，酶几乎失活。
目前还没有能够选择性抑制结肠内的次级胆汁酸的药物。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种选择性抑制肠道次级胆汁酸的药物及应用，用填补现有技术的空白。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供7α-脱羟反应抑制剂在制备降低结肠内的次级胆汁酸生成的结肠定位释放产品中的用途，所述结肠定位释放制剂中，7α-脱羟反应抑制剂作为降低结肠中次级胆汁酸生产的有效成分。
亦即，7α-脱羟反应抑制剂为降低结肠内的次级胆汁酸生成的唯一有效成分或有效成分之一。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
进一步地，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
进一步地，结肠定位给药系统常用技术有：a.利用时滞效应包衣；b.pH敏感型肠溶衣； c.可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。其中可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣利用结肠菌群独特的酶系激活包衣，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放，如果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α，β，γ-环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料。本发明的主要创新之处在于整个发明的构思，本领域技术人员可以根据现有技术手段选择合适的包衣使得7α-脱羟反应抑制剂达到结肠定位释放，只要能达到结肠定位释放的包衣都符合本发明的构思，因此本申请对于以上三种具体材料或者类型并不加以限定。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，所述缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
所述缓释功能采用现有技术中的缓释载体实现。更进一步地，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
缓释载体可以使7α-脱羟反应抑制剂在结肠道内缓慢均匀的释放达数小时，从而持久的降低结肠道内的pH。优选地，所述缓释载体具有吸附肠道内的胆汁酸功能。具有此种功能的缓释载体也可以吸附一部分肠道内的胆汁酸。
进一步地，本发明提供一种降低结肠内的次级胆汁酸生成的产品，所述产品含有口服定位释放制剂，所述口服定位释放制剂于结肠定位释放，所述口服定位释放制剂中含有7α-脱羟反应抑制剂。
本产品具有结肠定位释放功能，可定位达到结肠释放。
肠道共生菌将宿主生成的初级胆汁酸经过3个主要步骤转化生成为次级胆汁酸,第一将结合初级胆汁酸进行脱氨生成未结合胆汁酸,第二将未结合胆汁酸转运入有胆汁酸代谢能力的共生菌,第三步将未结合胆汁酸经过7-α脱羟反应,最终生成终末次级胆汁酸(脱氧胆酸和石胆酸)。
本文中的7α-脱羟反应抑制剂是指抑制第三步中的7-α脱羟反应的物质。亦即，7α-脱羟反应抑制剂是指抑制肠道菌7α-脱羟基作用的物质。所述7α-脱羟反应抑制剂可通过增强结肠内环境的酸性，进而抑制肠道菌7α-脱羟基作用，进而抑制未结合胆汁酸经由7-α脱羟反应生成终末次级胆汁酸的反应效率，最终达到抑制次级胆汁酸生成的目的。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
更优选地，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
进一步地，所述口服定位释放制剂为现有技术。口服结肠定位给药系统常用技术有：a. 利用时滞效应包衣；b.pH敏感型肠溶衣；c.可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。其中可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣利用结肠菌群独特的酶系激活包衣，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放，如果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α，β，γ- 环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料。本发明的主要创新之处在于整个发明的构思，本领域技术人员可以根据现有技术手段选择合适的包衣使得7α-脱羟反应抑制剂达到结肠定位释放，只要能达到结肠定位释放的包衣都符合本发明的构思，因此本申请对于以上三种具体材料或者类型并不加以限定。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，所述缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
所述缓释功能采用现有技术中的缓释载体实现。更进一步地，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
缓释载体可以使7α-脱羟反应抑制剂在结肠道内缓慢均匀的释放达数小时，从而持久的降低结肠道内的pH。优选地，所述缓释载体在释放7α-脱羟反应抑制剂之后具有吸附肠道内的胆汁酸功能。具有此种功能的缓释载体也可以吸附一部分肠道内的胆汁酸。
于一实施例中，所述抑制结肠内的次级胆汁酸的产品包括至少3层结构，其核心成分为 7α-脱羟反应抑制剂，所述核心成分位于缓释载体中，最外层包裹结肠定位载体。
采用不同的缓释载体和结肠定位释放制剂则可以负载的7α-脱羟反应抑制剂的量都会不同，结肠定位制剂和缓释载体的质量比例也不同，本申请不对此进行限定。一般地，本领域技术人员可以根据现有技术中的实验方法结合具体采用的材料可以获得具有较高载药量的制剂。
本发明的主要创新之处在于整个发明的构思，本领域技术人员可以根据现有技术手段选择合适的缓释载体使得7α-脱羟反应抑制剂达到缓慢释放，因此只要能使得7α-脱羟反应抑制剂缓慢释放的载体都符合本发明的构思，因此本申请对于以上缓释载体的具体材料或者类型并不加以限定。
本产品一般为口服制剂。
本发明的另一方面提供了7α-脱羟反应抑制剂在制备治疗非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、肥胖、肝癌、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、或溃疡性结直肠炎的结肠定位释放药物中的用途。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
更优选地，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
进一步地，所述口服定位释放制剂为现有技术。口服结肠定位给药系统常用技术有：a. 利用时滞效应包衣；b.pH敏感型肠溶衣；c.可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。其中可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣可利用结肠菌群独特的酶系激活包衣，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放，如果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α，β，γ-环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料。本领域技术人员可以根据现有技术手段选择合适的包衣。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
所述缓释功能采用现有技术中的缓释载体实现。更进一步地，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。本领域技术人员可根据现有技术的实验方法将药物负载与上述载体中，参考方法如“离子交换树脂药物载体在给药系统中的应用”(离子交换与吸附，2010，26(1)：89-96)；医药缓释载体用活性炭研究进展[J].化工新型材料,2014(05):10-12.具体将7α-脱羟反应抑制剂负载于上述缓释载体中，可参见本发明实施例2-4。
缓释载体可以使得7α-脱羟反应抑制剂在结肠道内缓慢均匀的释放达数小时，从而持久的降低结肠道内环境pH。优选地，所述缓释载体具有吸附肠道内的胆汁酸功能，具有此种功能的缓释载体也可以吸附一部分肠道内的胆汁酸。
于一实施例中，所述具有结肠定位功能的7α-脱羟反应抑制剂包括至少3层结构，其核心成分为7α-脱羟反应抑制剂，所述核心位于缓释载体中，最外层包裹结肠定位载体。
本发明的另一方面提供了一种非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、肥胖、肝癌、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、或溃疡性结直肠炎的治疗药物，所述药物的主要作用有效成分为可结肠定位释放的7α-脱羟反应抑制剂。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
更优选地，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
进一步地，所述口服定位释放制剂为现有技术。口服结肠定位给药系统常用技术有：a. 利用时滞效应包衣；b.pH敏感型肠溶衣；c.可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。其中可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣可利用结肠菌群独特的酶系激活包衣，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放。如果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α，β，γ-环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料。
进一步地，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
所述缓释功能采用现有技术中的缓释载体实现。更进一步地，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
缓释载体可以使得7α-脱羟反应抑制剂在结肠道内缓慢均匀的释放达数小时，从而持久的降低结肠道内环境pH。优选地，所述缓释载体具有吸附肠道内的胆汁酸功能，具有此种功能的缓释载体也可以吸附一部分肠道内的胆汁酸。
于一实施例中，所述治疗药物包括至少3层结构，其核心成分为7α-脱羟反应抑制剂，所述核心位于缓释载体中，最外层包裹结肠定位载体。
如上所述，本发明的一种选择性降低肠道次级胆汁酸的生成药物及应用，具有以下有益效果：
本申请制备的药物可定位于结肠缓慢释放，选择性的降低了肠道内次级胆汁酸的生成，为多种疾病的治疗提供了一种新的可能性。实验也证实了本申请制备的药物制剂能够有效的降低次级胆汁酸的生成，对多种疾病的治疗具有积极意义。
附图说明
图1显示为本发明实施例1中pH对肠道细菌的7α-脱羟反应的影响
图2显示为本发明实施例3中制备的结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂在小肠和结肠中的消化和吸收
图3显示为本发明实施例4中制备的缓释枸橼酸制剂在小肠和结肠中的消化和吸收
图4显示为本发明实施例7中缓释谷氨酸制剂治疗非酒精脂肪性肝炎和肝癌病理切片 (A、B为12周建立的非酒精脂肪性肝炎-肝纤维化-肝癌模型肝组织病理切片；C为继续12 周的对照组；D、E为继续12周结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂治疗组。)
图5显示为本发明实施例7中各实验组缓释谷氨酸制剂治疗后血清ALT指标
图6显示为本发明实施例8中各实验组缓释谷氨酸制剂治疗后可以显著改善血糖代谢，空腹血糖和胰岛素抵抗
图7显示为本发明实施例9中缓释枸橼酸制剂用于治疗结直肠腺瘤及结直肠癌的病例切片
图8显示为肠道共生菌将宿主生成的初级胆汁酸转化生成为次级胆汁酸的过程示意图
具体实施方式
本发明选择性的抑制肠道内次级胆汁酸的量，而不影响初级胆汁酸，也不影响95％的胆汁酸的肝肠循环。事实上，此前大量的研究和临床用药证明，直接去干扰所有胆汁酸的肝肠循环既会造成比较严重的副作用，比如肝脏损害，严重便秘，影响脂溶性维生素及其他营养成分的吸收，出血倾向，胆结石等，并且疗效也欠佳。而本发明恰恰解决了这些问题。
肠道细菌的7α-脱羟反应是胆汁酸转化成初级胆汁酸的最后一步，通常肠道内的专属厌氧菌和革兰氏阴性菌表达具有7α-脱羟功能的酶。在其他科学研究表明，某些疾病如糖尿病，脂肪性肝炎，肠道息肉等患者肠道内的表达7α-脱羟反应的革兰氏阴性菌显著升高。肠道细菌的 7α-脱羟反应种类较多，因此，开发一个能够广谱抑制这些7α-脱羟反应的分子尤为关键。申请人的研究表明，肠道细菌的7α-脱羟反应有一个共性是都对环境pH敏感，最适的酶活性pH 为7左右，pH降低到6酶活性只有50％，降低到5以下，酶的活性不到25％。
我们筛选了大量能够用于降低肠道pH的分子，比较理想的是一些酸性较强的可食用药用的有机酸，短链脂肪酸，或酸性氨基酸。但是这些分子口服后很快会在上消化道分解和吸收，几乎不能到达结肠。
我们把抑制7α-脱羟反应的分子包裹于包衣中且在结肠定位释放系统，这样口服后可以保护里面的药物分子不被降解或吸收，一直到达结肠才开始释放出来。
目前现有技术中，已经有很多种制剂方法可以将物质递送至结肠进行释放。口服结肠定位释放制剂，该类释放制剂口服后，在胃内和空肠保持完整，进入回肠末端后，能按设计要求释放物质，达到速释和缓释的目的。例如，可采用包肠溶衣的释放制剂。亦即，可根据要求，选用适宜pH范围溶解的聚合物。也可以采用定时释放制剂，通过改变释放制剂时滞的长短控制药物释放的时间和位置。也可以利用结肠菌群独特的酶如结肠β-葡萄苷酶降解包衣，激活里面药物的释放，许多高分子材料在结肠被这些酶所降解，而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解，这就保证药物在胃和小肠不释放。如果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α，β，γ-环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料。
口服回肠末端定位释放制剂的实例包括但不限于在综述文章或专利中披露的方法，例如 Colon Targeted Drug Delivery Systems:A Review on Primary and NovelApproaches Oman Medical Journal 2010,Volume 25,Issue 2；Colon-Targeted OralDrug Delivery Systems:Design Trends and Approaches，AAPS PharmSciTech,Vol.16,No.4,August 2015；以及 CN201680001612.X；US9993435B2；US 5525634,US5866619,US9993435中记载的技术方案。此类剂型可使用不同比例的羟丙甲基纤维素、其它聚合物基质、凝胶、可渗透膜、渗透系统、多层包衣、微粒、脂质体、微球体或其组合来提供所需的释放特性，以提供一种或多种活性成分的在结肠释放。
优选地，我们采用结肠独特的酶系激活系统(或结合pH值敏感型的包衣)将抑制7α- 脱羟反应的分子递送到结肠。所述的结肠独特的酶系激活层，其主要包含果胶等多糖类物质，并包覆于活性成分(制7α-脱羟反应的分子)外面；而pH敏感层，采用现有的包含任何在pH达到或超过7条件下可溶解的高分子材料组合物，并包覆于所述结肠独特的酶系激活层外面。
本发明另外一个重要的设计是把活性成分装载在缓释载体里，其外面再加上结肠定位层。这样的缓释载体可以避免活性成分爆发式释放，使得化合物在结肠道内缓慢均匀的释放数个小时，从而持久的降低结肠道内的pH。
缓释技术是现有技术，目前常用的缓释载体有树脂、活性炭、乙基纤维素、二氧化硅等，这样的缓释载体可以使得化合物在结肠道内缓慢均匀的释放达6个小时，从而持久的降低结肠肠道内的pH，持久抑制7α-脱羟反应的活性，降低次级胆汁酸的浓度。
通过摄取这样的制剂治疗的状况包括但不限于，非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、溃疡性结直肠炎、克罗恩病、代谢综合征。
本发明的药物组合物的治疗有效量将依赖许多因素。例如，受试者的人种/物种、年龄和体重、需要治疗的确切状况及其严重程度、制剂的性质。治疗有效量最终应当由医生进行判断。无论如何，用于治疗患有非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、溃疡性结直肠炎等疾病以及相关状况的患者的药物有效量通常应当是0.1至5000mg/kg接受者(哺乳动物)的体重/天。更通常，有效量应当是1至200mg/kg体重/天。因此，对于50kg体重的成年哺乳动物，每天的实际量通常是从50mg至10g。该数量可能以每天单剂量给予或以每天若干(如2、3、4、5或更多)分剂量给予，使得总日剂量是相同的。
在治疗疾病过程中，本发明的制剂可以和一种或多种其他药物活性剂联合。
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。须知，下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置。此外应理解，本发明中提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还可以存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤，除非另有说明；还应理解，本发明中提到的一个或多个设备/装置之间的组合连接关系并不排斥在所述组合设备/装置前后还可以存在其他设备/装置或在这些明确提到的两个设备/装置之间还可以插入其他设备/装置，除非另有说明。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更技术内容的情况下，当亦视为本发明可实施的范畴。
在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围；在本发明说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
实施例1 pH对肠道细菌7α-脱羟反应的活性的影响
柔嫩梭菌(Clostridium leptum)体外厌氧培养(80％氮气-10％二氧化碳-10％氢气)研究其7α-脱羟反应在不同的pH环境把胆酸转换成为次级胆汁酸脱氧胆酸的活性。柔嫩梭菌悬浮液+2uM胆酸+50mM磷酸二氢钾缓冲液，加入一定量的枸橼酸或谷氨酸调节pH至6或5。 37摄氏度60分钟。反应结束时向试管内加入1.0ml 0.5N盐酸终止酶的反应。
7α-脱羟反应的活性如图1所示，证实肠道细菌的7α-脱羟反应最适的酶活性pH为6.5-7， pH降低到6酶活性只有50％，降低到5以下，酶的活性不到20％。
实施例2 谷氨酸-717树脂的缓释制剂
本实施例中选用谷氨酸作为抑制肠道细菌7α-脱羟反应的活性分子和阴离子交换树脂717 强碱性阴离子交换树脂(Amberlite 717，简称717树脂)作为缓释载体。
i.717树脂的预处理
苯乙烯-二乙烯基苯组成的717树脂共聚物被用来封装谷氨酸。它具有季铵阳离子基团和活性氯离子。通过取代与季铵基团相连的氯离子，药物离子可以负载在树脂中。具体来说，将一定量的717树脂浸入50℃的去离子水中洗涤，以除去水溶性杂质，然后在搅拌下将其转移到95％乙醇中，以除去有机杂质。用去离子水洗涤直至没有残留的乙醇存在后，在50℃的真空下干燥。将预干燥的717树脂在恒定搅拌下浸入0.1mol/l盐酸溶液中24h，然后用去离子水洗涤至中性并干燥，得到阴离子(Cl-)交换树脂。
ii.准备谷氨酸-717树脂的缓释制剂
离子交换树脂主要通过离子交换反应来封装药物。在本实施例中，我们采用谷氨酸。将纯化的谷氨酸(0.50g)在40℃的磁力搅拌下溶解于去离子水50mL，将1g树脂加入，继续搅拌12h。将上清液倒出，用水洗涤数次，自然晾干，得到负载谷氨酸的树脂。
将一定量的负载谷氨酸的树脂转移至小烧杯中，加入50ml溶液(甲酸：水75：25，v/v)，在每个预定时间内部从TBSS水溶液中收集样品，并通过高效液相色谱(HPLC)测定并计算谷氨酸的负载量。树脂谷氨酸的载药量(Q)根据以下公式计算：
Qt＝V/WR.(C0-Ct)
其中Qt是在时间t树脂的载药量。C0是初始药物浓度，Ct是时间t的药物浓度。V是药液的体积，WR是树脂的质量。
实施例3 制备结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂
结肠独特的酶系激活层，其主要包含果胶等多糖类物质，并包覆于活性成分外面；而pH 敏感层，采用现有中包含任何在pH达到或超过7条件下可溶解的高分子材料组合物，并包覆于结肠独特的酶系激活层外面。活性成分是抑制7α-脱羟反应的分子。
20％尤特奇S100，15％柠檬酸三乙酯以及5％的滑石粉，三组份加入到乙醇中搅拌混匀。采用包衣机温度控制在45℃左右均匀喷涂在明胶胶囊壳上，即形成pH敏感层膜，其只在pH7 时溶解。
取2gβ-环糊精聚合物或果胶钙、羟丙甲基纤维素溶解在10毫升二甲基亚砜DMSO中。吸取10ul该溶液添加到上述胶囊内，在55℃的干燥10h。在冷却到室温后，即得到对结肠菌群酶系激活层。
将实施案例2中的谷氨酸-717树脂装入上述制备好的胶囊，即制备成了结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂。
将上述谷氨酸制剂置于小鼠胃液、小肠液和结肠液中，如图2所示，表明这样的胶囊可以耐受胃及小肠中上端的酸性环境，并且只能被结肠部位特有的菌群的酶触发而溶解，可效增强对结肠部位的选择性。
实施例4 制备结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂
本实施例中选用717强碱性阴离子交换树脂作为缓释载体。
i.717树脂的预处理
苯乙烯-二乙烯基苯组成的717树脂共聚物被用来封装谷氨酸。它具有季铵阳离子基团和活性氯离子。通过取代与季铵基团相连的氯离子，药物离子可以负载在树脂中。具体来说，将一定量的717树脂浸入50℃的去离子水中洗涤，以除去水溶性杂质，然后在搅拌下将其转移到95％乙醇中，以除去有机杂质。用去离子水洗涤直至没有残留的乙醇存在后，在50℃的真空下干燥。将预干燥的717树脂在恒定搅拌下浸入0.1mol/l盐酸溶液中24h，然后用去离子水洗涤至中性并干燥，得到阴离子(Cl-)交换树脂。
ii.准备枸橼酸-717树脂的缓释制剂
将纯化的枸橼酸(2.0g)在室温下溶解于去离子水50mL中，加入3g阴离子交换树脂，室温下搅拌12h。将上清液倒出，用水洗涤数次，自然晾干，得到负载枸橼酸的树脂。测得1.0g 树脂负载1.2g至1.5g枸橼酸。
把枸橼酸-树脂加入按照实施例3方法制备的或其他可商业购买的结肠定位释放胶囊，则获得结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂。
如图3所示，为将枸橼酸-树脂加入按照实施例3方法制备的结肠定位释放胶囊释放结果图，表明这样的胶囊可以耐受胃及小肠中上端的酸性环境，并且只能被结肠部位特有的菌群的酶触发而溶解，可有效增强对结肠部位的选择性。
以下实验中记载采用本实施例制备的缓释枸橼酸制剂均指为将枸橼酸-树脂加入按照实施例3方法制备的结肠定位释放胶囊获得制剂。
实施例5 结肠定位释放7α-脱羟反应抑制剂的动物实验
8只大鼠(SPF级，体重220g-260g)，室温25摄氏度，自由进食和饮水。在摄取药物前一天取粪便样本。结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂(实施例4制备)(采用小动物专用尺寸明胶胶囊制备)1g/Kg体重口服灌胃，连续4周，取粪便样本，检测其治疗前后初胆汁酸和次级胆汁酸含量，结果如表1：
表1
Figure RE-GDA0002541939380000131
可见，经治疗后粪便内的次级胆汁酸绝对量和比值均显著下降，总胆汁酸也显著下降。
上述实验组大鼠完成实验后，取5只空白对照组大鼠(SPF级，体重220g-260g，室温25 摄氏度，自由进食和饮水)麻醉后取相应消化道组织立刻检测pH，结果如表2：
表2
分组/pH 胃 空肠 回肠 结肠
空白对照组 2.42±1.38 5.79±0.34 6.95±0.22 7.02±0.33
结肠缓释枸橼酸组 2.19±1.10 5.21±0.86 6.08±0.55 4.89±0.61
可见，治疗后结肠pH显著下降(P<0.01)。
实施例6 结肠定位释放的缓释7α-脱羟反应抑制剂
分别测试了结肠定位释放的缓释天冬氨酸(Asp)、苹果酸、乙酸、丁酸等物质对结肠pH 影响及检测其治疗前后粪便样本初胆汁酸和次级胆汁酸含量，制备方法同实施例4，试验方法如实施例5，结果如下：
天冬氨酸(Asp)：
表3
ng/mg粪便 治疗前绝对值 治疗后绝对值 P值
初级胆汁酸
胆酸 689±171 301±186 <0.001
鹅脱氧胆酸 630±119 184±177 <0.001
次级胆汁酸
脱氧胆酸 1599±142 198±81 <0.001
熊脱氧胆酸 1206±294 174±130 <0.001
石胆酸 1572±502 138±106 <0.001
苹果酸：
表4
ng/mg粪便 治疗前绝对值 治疗后绝对值 P值
初级胆汁酸
胆酸 792±455 289±208 <0.001
鹅脱氧胆酸 511±205 360±165 <0.001
次级胆汁酸
脱氧胆酸 1175±386 101±55 <0.001
熊脱氧胆酸 1062±521 199±136 <0.001
石胆酸 1381±310 125±111 <0.001
乙酸：
表5
ng/mg粪便 治疗前绝对值 治疗后绝对值 P值
初级胆汁酸
胆酸 674±224 362±324 <0.001
鹅脱氧胆酸 435±410 383±251 <0.05
次级胆汁酸
脱氧胆酸 1944±805 282±140 <0.001
熊脱氧胆酸 1581±403 104±89 <0.001
石胆酸 1547±555 188±151 <0.001
丁酸：
表6
ng/mg粪便 治疗前绝对值 治疗后绝对值 P值
初级胆汁酸
胆酸 401±377 265±65 <0.001
鹅脱氧胆酸 979±645 438±354 <0.001
次级胆汁酸
脱氧胆酸 1730±659 452±215 <0.001
熊脱氧胆酸 1484±230 424±280 <0.001
石胆酸 1262±374 299±265 <0.001
可见，采用上述酸类，可以达到类似的实验结果。
实施例7 结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂治疗非酒精脂肪性肝炎和肝癌
SPF级C57BL/6J小鼠，出生一个月后开始喂养高脂饲料(D12492,含60kcal％脂肪)12周，饮食和饮水不受限。在小鼠出生第2天腹腔注射200ugSTZ一次(STZ配制于pH4.5的0.1M柠檬酸盐酸缓冲溶液)。第12周取4只小鼠麻醉后取肝脏组织病理检测，试验完成后小鼠颈椎脱臼处死。造模成功的非酒精脂肪性肝病和肝癌小鼠继续分成两组试验，一组恢复正常饲料，一组正常饲料外灌喂3％结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂(实施例3制备)，饮食和饮水均不受限。继续12周治疗时间。治疗第6，12周分别取6只小鼠麻醉后取肝脏组织病理检测，试验完成后小鼠颈椎脱臼处死。在整个实验过程中，小鼠尾尖血，体重等指标每周采集一次。
结果，结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂治疗组小鼠非酒精脂肪性肝炎得和肝癌得到完全缓解。如图4所示：A B为12周建立的非酒精脂肪性肝炎-肝纤维化-肝癌模型肝组织病理切片 C为继续12周的对照组；D、E为继续12周结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂治疗组。ALT指标也恢复的正常范围，如图5所示。
实施例8 糖尿病模型小鼠的研究
上述实施例6建立的小鼠模型同样适用于糖尿病模型的研究。SPF级C57BL/6J小鼠，出生一个月后开始喂养高脂饲料(D12492,含60kcal％脂肪)12周，饮食和饮水不受限。在小鼠出生第2天腹腔注射200ug STZ一次(STZ配制于pH4.5的0.1M柠檬酸盐酸缓冲溶液)，小鼠出现二型糖尿病。一组6只恢复正常饲料，一组6只正常饲料外灌喂3％结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂(实施例3制备)，饮食和饮水均不受限。继续12周治疗时间。在整个实验过程中，小鼠尾尖血，体重等指标每周采集一次。
结果如图6，显示结肠定位释放的缓释谷氨酸制剂可以显著改善血糖代谢，空腹血糖和胰岛素抵抗指数治疗后恢复到正常水平，与对照组相比有显著差异。
实施例9 结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂对结直肠腺瘤及结直肠癌的防治作用
6周龄SPF级C57BL/6J小鼠室温约25摄氏度，自由进食和饮水。腹腔注射氧化偶氮甲烷 (AOM，10mg/kg),每周两次，连续6周。分成两组，在腹腔注射AOM开始时，同时启动药物干预。空白对照组；治疗组灌喂结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂(实施例4制备) 500mg/Kg/day。试验第15周，第30周分别取小鼠麻醉颈椎脱臼处死，取结肠组织分析。腺瘤数量如表7：
表7
组别 腺瘤数量/只 腺瘤大小(mm)
对照组(15只小鼠) 7.6±2.5 3.8±1.5
枸橼酸治疗组(15只小鼠) 1.2±0.8 1.1±0.5
可见，与对照组相比结肠定位释放的缓释枸橼酸制剂治疗组显著减少了腺瘤的形成， P<0.001。
图7示为空白对照组的小鼠，30％出现了高级别上皮内瘤变(high gradeintraepithelial neoplasia,HGIN)甚至原位癌，而治疗组腺瘤数量很少，没有出现高级别上皮内瘤变或原位癌。
本领域技术人员能够确认和知晓的是：上述实例仅仅是目前已知的一个较优方案，并不限于实施例中所列举的具体制剂形式，只要是能够将抑制肠道菌群7α-脱羟反应和次级胆汁酸形成的分子通过结肠定位释放系统均可。
以上的实施例是为了说明本发明公开的实施方案，并不能理解为对本发明的限制。此外，本文所列出的各种修改以及发明中方法、组合物的变化，在不脱离本发明的范围和精神的前提下对本领域内的技术人员来说是显而易见的。虽然已结合本发明的多种具体优选实施例对本发明进行了具体的描述，但应当理解，本发明不应仅限于这些具体实施例。事实上，各种如上所述的对本领域内的技术人员来说显而易见的修改来获取发明都应包括在本发明的范围内。

Claims (21)

1.7α-脱羟反应抑制剂在制备降低结肠内的次级胆汁酸生成的结肠定位释放产品中的用途，所述结肠定位释放制剂中，7α-脱羟反应抑制剂作为降低结肠中次级胆汁酸生产的有效成分。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
4.一种降低结肠内的次级胆汁酸生成的产品，所述产品含有口服定位释放制剂，所述口服定位释放制剂于结肠定位释放，所述口服定位释放制剂中含有7α-脱羟反应抑制剂。
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
7.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述口服定位释放制剂为时滞效应包衣、pH敏感型肠溶衣或者可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。
8.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，所述缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
10.7α-脱羟反应抑制剂在制备治疗非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、肥胖、肝癌、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、或溃疡性结直肠炎的结肠定位释放药物中的用途。
11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
13.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述口服定位释放制剂为时滞效应包衣、pH敏感型肠溶衣或者可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。
14.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，所述缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
15.根据权利要求14所述的用途，其特征在于，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
16.一种非酒精性脂肪性肝病、糖尿病、肥胖、肝癌、糖尿病、结直肠癌、结直肠息肉、或溃疡性结直肠炎的治疗药物，其特征在于，所述药物的主要作用有效成分为可结肠定位释放的7α-脱羟反应抑制剂。
17.根据权利要求16所述的药物，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂的主要有效成分为可降低结肠内环境pH值的酸类。
18.根据权利要求17所述的药物，其特征在于，所述酸选自谷氨酸、天冬氨酸、枸橼酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、氨基水杨酸、抗坏血酸、乙酸、丙酸、丁酸、脂肪酸、或其可药用的盐的任一种或多种的组合。
19.根据权利要求16所述的药物，其特征在于，所述口服定位释放制剂为时滞效应包衣、pH敏感型肠溶衣或者可被结肠菌群酶系激活的高分子材料包衣。
20.根据权利要求16所述的药物，其特征在于，所述7α-脱羟反应抑制剂负载于缓释载体中，所述缓释载体和7α-脱羟反应抑制剂包裹于口服定位释放制剂中。
21.根据权利要求20所述的药物，其特征在于，所述缓释载体选自：树脂、活性炭、乙基纤维素、或二氧化硅中的任意一种。
CN202010361458.5A 2020-04-30 2020-04-30 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用 Pending CN113577280A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010361458.5A CN113577280A (zh) 2020-04-30 2020-04-30 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010361458.5A CN113577280A (zh) 2020-04-30 2020-04-30 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113577280A true CN113577280A (zh) 2021-11-02

Family

ID=78236985

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010361458.5A Pending CN113577280A (zh) 2020-04-30 2020-04-30 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113577280A (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004244365A (ja) * 2003-02-13 2004-09-02 Hokkaido Technology Licence Office Co Ltd 二次胆汁酸の生成抑制剤
US20050244426A1 (en) * 1999-07-21 2005-11-03 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Cholesterol-lowering agents, secondary bile acid production inhibitors and foods and drinks
JP2006056839A (ja) * 2004-08-23 2006-03-02 Kozo Asano ２次胆汁酸産生抑制微生物及び飲食品、動物飼料
JP2006219430A (ja) * 2005-02-10 2006-08-24 Asahi Breweries Ltd ７α−脱水酸化反応抑制剤、並びにその使用方法及び製造方法
JP2011184311A (ja) * 2010-03-04 2011-09-22 Hokkaido Univ 新規二次胆汁酸低減剤
CN107510697A (zh) * 2017-09-12 2017-12-26 上海市内分泌代谢病研究所 一种降糖药在阻断肠道共生菌次级胆汁酸生成的应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050244426A1 (en) * 1999-07-21 2005-11-03 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Cholesterol-lowering agents, secondary bile acid production inhibitors and foods and drinks
JP2004244365A (ja) * 2003-02-13 2004-09-02 Hokkaido Technology Licence Office Co Ltd 二次胆汁酸の生成抑制剤
JP2006056839A (ja) * 2004-08-23 2006-03-02 Kozo Asano ２次胆汁酸産生抑制微生物及び飲食品、動物飼料
JP2006219430A (ja) * 2005-02-10 2006-08-24 Asahi Breweries Ltd ７α−脱水酸化反応抑制剤、並びにその使用方法及び製造方法
JP2011184311A (ja) * 2010-03-04 2011-09-22 Hokkaido Univ 新規二次胆汁酸低減剤
CN107510697A (zh) * 2017-09-12 2017-12-26 上海市内分泌代谢病研究所 一种降糖药在阻断肠道共生菌次级胆汁酸生成的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
F. M. NAGENGAST等: "Inhibition of secondary bile acid formation in the large intestine by lactulose in healthy subjects of two different age groups", 《EUROPEAN JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION》 *
孟胜男: "《药剂学 在线学习版》", 31 January 2016, 中国医药科技出版社 *
谭盛男: "《药物缓释载体及超微粉药物的应用研究》", 31 December 2017, 辽宁科学技术出版社 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3923943B1 (en) Genotype and dose-dependent response to an asbti in patients with bile salt export pump deficiency
US20070072828A1 (en) Bile preparations for colorectal disorders
KR100848344B1 (ko) 담즙산 함유 청정 수용액 제형의 제조
KR101937069B1 (ko) 비만 및 관련 대사 장애의 치료를 위한 오를리스타트 및 아카르보스의 변형 방출형 조성물
JP2002521346A (ja) 多糖類を利用した大腸選択性薬物伝達組成物および医薬製剤
KR20110120866A (ko) 당뇨병 치료 조성물 및 치료방법
JP2009511577A (ja) 胃腸疾患用胆汁製剤
JP7083835B2 (ja) 亜鉛－γ－ＰＧＡ組成物およびがんを処置するための方法
JP2019142925A (ja) 糖尿病の治療用組成物および方法
CN114007599A (zh) 用于局部治疗炎症性肠病的5-氨基乙酰丙酸
CN102091084B (zh) 一种复方胶囊及其制备方法
US11779564B2 (en) Methods and compositions for treating bile acid diarrhea, diarrhea associated with small intestine resection or gallbladder removal, and short bowel syndrome
CN108175849B (zh) 聚普瑞锌口服制剂及在制备溃疡性结肠炎药物中的应用
WO2008033142A1 (en) Bile preparations for colorectal disorders
CN113577280A (zh) 选择性降低肠道次级胆汁酸生成的产品及应用
JP3455633B2 (ja) 潰瘍性大腸炎の予防又は治療剤
CN106361718B (zh) 单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的结肠靶向生物粘附片
Ryde Low-molecular-weight azo compounds
US9198879B2 (en) Pharmacologically optimized multimodal drug delivery system for nordihydroguiaretic acid (NDGA)
Garg et al. Review on natural polymers: A carrier for colon-targeted drug delivery approach
CN110237061A (zh) 丁酸类化合物在抑制长链非编码rna-h19中的应用
KR20090059151A (ko) 대장 질환용 담즙 제제
Brijesh et al. PRODRUG DESIGN TO OPTIMIZE DRUG DELIVERY TO COLON: A REVIEW
CA3232314A1 (en) Methods of dosing of apical sodium-dependent bile acid transporter inhibitors (asbtis)
WO2022162649A1 (en) Delayed release composition comprising enteric coated drug loaded in psyllium husk matrix

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20211102