CN113567568A - 一种电磁hplc在线糖肽或糖蛋白富集装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，它包括磁场发生模块、样品富集模块和HPLC在线分离检测模块，磁场发生模块包括电磁发生电路和多极磁场发生电极，电磁发生电路通过导线与多极磁场发生电极相接，样品富集模块包括样品富集管和自动操作单元，自动操作单元与样品富集管通过管道相连，样品富集管放置于多极磁场发生电极的中心处，自动操作单元通过管道连接有待富集样品容器、富集溶剂容器、洗脱溶剂容器、脱附液容器以及废液容器，脱附液容器通过管道与HPLC在线分离检测模块相连。本发明通过提高磁性多孔富集材料的富集利用，并在自动化操作单元的控制下，实现了对糖肽/糖蛋白大批量充分富集，提高检测效率。
Description
技术领域
本发明涉及糖肽/糖蛋白富集分析检测领域，具体涉及一种电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置。
背景技术
在生物体中，蛋白质翻译后修饰是蛋白质生物合成过程中重要的化学修饰步骤。通常刚翻译得到的前提蛋白不具备生物活性，需要进行一系列的化学修饰，才能使其具备特定生物功能。在众多的修饰手段中，糖基化修饰是最重要、最常见的修饰之一，可参与细胞识别、粘着及迁移等生物学过程并在细胞识别、生物体生长的过程中也起到重要作用。
得益于蛋白组学的发展，糖基化蛋白组学也被越来越多地研究。但由于糖基化修饰后的糖肽/糖蛋白丰度低、检测响应信号差以及检测过程复杂且效率低下，急需发展有效的样品处理检测系统来解决这些问题。目前主要的解决手段为发展新型富集材料，以谋求富集到更多的糖肽/糖蛋白，然而其发展的富集材料通常其材料富集利用率并不高，且整个过程废时废力，未能从根本上解决检测效率低下的问题。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术的不足，提供一种电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其通过自动操作单元自动控制磁性多孔富集材料对糖肽/糖蛋白大批量自动重复富集，极大地缩短检测分析时间，提高检测分析效率。
本发明采用的技术方案如下：
一种电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，它包括磁场发生模块、样品富集模块和HPLC在线分离检测模块，磁场发生模块包括产生多路时变交流电压的电磁发生电路和多极磁场发生电极，电磁发生电路通过导线与多极磁场发生电极相接，多极磁场发生电极由偶数对柱状电极组成，样品富集模块包括装有磁性多孔富集材料的样品富集管和自动操作单元，自动操作单元与样品富集管通过管道相连，样品富集管放置于多极磁场发生电极的中心处，自动操作单元通过管道连接有待富集样品容器、富集溶剂容器、洗脱溶剂容器、脱附液容器以及废液容器，HPLC在线分离检测模块包括HPLC分离模块和检测模块，脱附液容器通过管道与HPLC分离模块相连，HPLC分离模块通过管道与检测模块相连。
本装置的电磁发生电路产生偶数路时变交流电压，且其两两幅值相等、相位相反。
本装置的柱状电极成圆周阵列排放。
本装置的柱状电极之间相邻的电极施加反相交流电压，相对的电极施加同相交流电压。
本装置的样品富集管通过支架放置于多极磁场发生电极的中心处。
本装置的样品富集管内放置的磁性多孔富集材料的粒径为100nm~50um。
本装置的检测模块为紫外荧光检测器或质谱检测器。
本发明的有益效果有：本发明通过同一批磁性多孔富集材料对糖肽/糖蛋白进行重复富集，这样显著提高了磁性多孔富集材料的利用率，同时也能够实现对目标物进行大批量充分富集，提高检测丰度、减少检测时间；此外利用自动操作单元对样品进行自动上样操作，简化检测过程，提高检测效率。
附图说明
图1为本发明的结构示意图；
图中1、磁场发生模块；2、样品富集模块；3、HPLC在线分离检测模块；4、电磁发生电路；5、多极磁场发生电极；6、柱状电极；7、样品富集管；8、自动操作单元；9、待富集样品容器；10、富集溶剂容器；11、洗脱溶剂容器；12、脱附液容器；13、HPLC分离模块；14、检测模块；15、时变交流电压；16、废液容器。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步地说明：
如图1所示，本发明它包括磁场发生模块1、样品富集模块2和HPLC在线分离检测模块3，该磁场发生模块1包括产生多路时变交流电压15的电磁发生电路4和多极磁场发生电极5，其中电磁发生电路4产生偶数路时变交流电压15，且其两两幅值相等、相位相反；电磁发生电路4通过导线与多极磁场发生电极5相接，多极磁场发生电极5由偶数对柱状电极6组成，柱状电极6成圆周阵列排放，且通过导线将时变交流电压15施加到柱状电极6上以产生时变电磁场。
本装置的样品富集模块2包括装有磁性多孔富集材料的样品富集管7和自动操作单元8，自动操作单元8与样品富集管7通过管道相连，样品富集管7通过支架放置于多极磁场发生电极5的中心处，也就是时变电磁场中；自动操作单元8通过管道连接有待富集样品容器9、富集溶剂容器10、洗脱溶剂容器11、脱附液容器12以及废液容器16。
本装置的自动操作单元8将待富集样品容器9和富集溶剂容器10内的待富集样品和富集溶剂依次加入到样品富集管7中，并整体置于随时间不断变化的电磁场中，其中样品富集管7内放置的磁性多孔富集材料的粒径为100nm~50um，其表面极具糖肽/糖蛋白富集孔，并可在多极磁场发生电极5所形成的时变电磁场下呈圆周运动，从而充分富集待富集样品中的糖肽/糖蛋白，待富集结束，关闭电磁发生电路4以关闭电磁场，自动操作单元8将样品富集管7中的废液移出至废液容器16内，此时含有样品的磁性多孔富集材料仍保留在样品富集管7中，然后继续打开电磁发生电路4，再次进行富集；待多次富集结束后，自动操作单元8自动将洗脱溶剂容器11内的洗脱溶剂加入到样品富集管7中，对磁性多孔富集材料所富集到的糖肽/糖蛋白进行洗脱，洗脱后通过自动操作单元8将脱附液移出至脱附液容器12中，以用于后续HPLC在线分离检测模块3进行分离和检测。
本装置的HPLC在线分离检测模块3包括HPLC分离模块13和检测模块14，其中检测模块14为紫外荧光检测器或质谱检测器，而脱附液容器12通过管道与HPLC分离模块13相连，HPLC分离模块13通过管道与检测模块14相连。
本装置的柱状电极6之间相邻的电极施加反相交流电压，相对的电极施加同相交流电压，相对的电极通过导线连接在一起施加幅值相等、相位相同的交流电压，而相邻的电极施加幅值相等、相位相反的交流电压，通过变化的电场产生磁场的原理，再由柱状电极6构成的空间中可形成电磁场，当电磁发生电路4打开时，电磁场产生，当电磁发生电路4关闭时，电磁场消失。
本发明的使用过程如下：
使用时，先将偶数对柱状电极6成圆周阵列排放，且通过导线与电磁发生电路4相接，而偶数对柱状电极6相对的两个电极再通过导线连接在一起，当电磁发生电路4打开时，将电磁发生电路4产生的偶数路时变交流电压15施加到柱状电极6上，在柱状电极6构成的空间中形成时变电磁场，接着将装有磁性多孔富集材料的样品富集管7通过支架放置于柱状电极6构成的空间中心处，接着启动自动操作单元8，由自动操作单元8将待富集样品容器9和富集溶剂容器10内的待富集样品和富集溶剂依次加入到样品富集管7中，此时磁性多孔富集材料在多极磁场发生电极5所形成的时变电磁场下呈圆周运动，从而充分富集待富集样品中糖肽/糖蛋白；待富集结束，关闭电磁发生电路4，电磁场消失，自动操作单元8将废液从样品富集管7中移出至废液容器16内，此时含有样品的磁性多孔富集材料仍保留在样品富集管7中，然后继续打开电磁发生电路4，再次进行富集，直至整批待富集样品全部富集结束；待多次富集结束后，自动操作单元8自动将洗脱溶剂容器11内的洗脱溶剂加入到样品富集管7中，对磁性多孔富集材料所富集到的糖肽/糖蛋白进行洗脱，洗脱后通过自动操作单元8将脱附液移出至脱附液容器12中，以用于后续HPLC在线分离检测模块3进行分离和检测。
本发明涉及的其它未说明部分与现有技术相同。
Claims (7)
1.一种电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是它包括磁场发生模块（1）、样品富集模块（2）和HPLC在线分离检测模块（3），所述磁场发生模块（1）包括产生多路时变交流电压（15）的电磁发生电路（4）和多极磁场发生电极（5），所述电磁发生电路（4）通过导线与多极磁场发生电极（5）相接，所述多极磁场发生电极（5）由偶数对柱状电极（6）组成，所述样品富集模块（2）包括装有磁性多孔富集材料的样品富集管（7）和自动操作单元（8），所述自动操作单元（8）与样品富集管（7）通过管道相连，所述样品富集管（7）放置于多极磁场发生电极（5）的中心处，所述自动操作单元（8）通过管道连接有待富集样品容器（9）、富集溶剂容器（10）、洗脱溶剂容器（11）、脱附液容器（12）以及废液容器（16），所述HPLC在线分离检测模块（3）包括HPLC分离模块（13）和检测模块（14），所述脱附液容器（12）通过管道与HPLC分离模块（13）相连，所述HPLC分离模块（13）通过管道与检测模块（14）相连。
2.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述电磁发生电路（4）产生偶数路时变交流电压（15），且其两两幅值相等、相位相反。
3.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述柱状电极（6）成圆周阵列排放。
4.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述柱状电极（6）之间相邻的电极施加反相交流电压，相对的电极施加同相交流电压。
5.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述样品富集管（7）通过支架放置于多极磁场发生电极（5）的中心处。
6.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述样品富集管（7）内放置的磁性多孔富集材料的粒径为100nm~50um。
7.根据权利要求1所述的电磁HPLC在线糖肽或糖蛋白富集装置，其特征是所述检测模块（14）为紫外荧光检测器或质谱检测器。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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