CN113481118B - 一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌及其在餐厨垃圾资源化中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌及其在餐厨垃圾资源化中的应用，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2021538，该菌株具有耐盐、耐酸、耐热、降解蛋白质、纤维素和油脂以及生长迅速等特点。该菌株与载体和助剂一起制备成的可湿性粉剂在常温下货架期可达三个月，用于餐厨垃圾的高温发酵处理后，餐厨垃圾减量明显，有机质含量显著降低，氮磷钾含量显著增加，无杂菌产生，有效实现餐厨垃圾就地化、减量化、资源化、无害化处理，比垃圾高温焚烧或沼气发酵处理方法更安全和环保，显著降低碳排放。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌在餐厨垃圾资源化中的应用，尤其涉及一株耐酸、耐盐、耐热、降解蛋白质、纤维素和油脂的枯草芽孢杆菌及可湿性粉剂和在餐厨垃圾资源化中的应用。
背景技术
随着中国城市化进程的加快发展，垃圾处理已经成为困扰各级城市政府管理者的难题。传统的垃圾填埋方式具有占地面积大、污染水体、散发臭气等诸多弊端。垃圾分类回收和综合利用是解决城市垃圾的根本出路。如何规范、科学、合理地处理厨余垃圾一直是生活垃圾资源化利用和无害化处理亟需解决难题之一。
目前比较成熟的厨垃圾资源化利用和无害化处理处理方法主要包括高温焚烧和
厌氧发酵（包括堆肥发酵和沼气发酵）。两种处理方式都会产生大量碳排放，对气候环境有
影响，后者还需要专门场所和专业沼气处理装置，处理时间长，难以满足日益增长的城市垃
圾处理需求。近年来，餐厨垃圾高温有氧发酵处理受到业者高度重视，该处理方法利用耐高
温好氧微生物在
的集装箱式可移动搅拌器中迅速分解餐厨垃圾中的有机物，剩余
少量富有营养的残渣，经加工可以制成有机肥，用于农作物有机种植，从而真正实现餐厨垃
圾处理就地化、减量化、资源化、无害化。
餐厨垃圾高温好氧发酵处理过程中的一个重要因子是耐高温菌种。目前，用于餐
厨垃圾处理的菌种已有报道。例如，专利文献CN106929449A中记载了一种高效降解油脂的
枯草芽孢杆菌，但该菌株不耐高温，不耐盐和酸，该菌株单独使用处理餐厨垃圾效果不佳，
需要与凝结芽孢杆菌和酿酒酵母联合使用才能降解餐厨垃圾。专利文CN106047762A中记载
了一种枯草芽孢杆菌及其在餐厨垃圾中的应用，但该菌耐受最高的温度是
，耐盐浓度
也只有8%，且降解纤维素能力差，导致餐厨垃圾中纤维类垃圾不能被降解。总之这些菌种在
以下三方面存在缺陷，不能完全实现餐厨垃圾高效的有氧高温发酵：（1）耐盐、耐酸和嗜热
能力。餐厨垃圾中通常含盐量比较高，多为酸性。（2）全能的有机物降解活性。餐厨垃圾发酵
过程中需要微生物能同时有效将蛋白质、碳水化合物、纤维素和油脂类转化为小分子化合
物。多数菌只能高效降解其中的一到两种。（3）菌种在常温存储条件下存活能力和货架期。
目前针对用于餐厨垃圾处理的芽孢杆菌只有一些简单的载体，没有维持芽孢杆菌活力的专
业剂型报道。
发明内容
针对现有技术的不足， 本发明的目的是提供一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌及其在餐厨垃圾资源化中的应用，本发明还研发了常温下可以长时间保持该芽孢杆菌活力的剂型，并应用于餐厨垃圾资源化处理。
本发明分离到一株兼具耐10% NaCl、耐多种有机酸和低pH、耐
高温、能利用两
种食用油、多种碳水化合物、蛋白质和纤维素的枯草芽孢杆菌天性变种；优化了配制剂型所
需载体和其它助剂的成分与含量，成功研制了一种可湿性粉剂，协助该菌株在室温存储条
件下保持活力三个月；该菌株在
高温条件下有效分解和转化餐厨垃圾,所得残余
物营养丰富，可加工成有机肥。本发明克服了现有餐厨垃圾高温发酵处理过程中菌种不耐
盐和酸、降解活性单一、油脂降解效率不高以及菌剂储存货架期短等技术瓶颈，解决了餐厨
垃圾就地化、减量化、资源化、无害化处理过程中的关键技术难题。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明提供了一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌命名为枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种（Bacillus subtilis subsp. Subtilis var.Tian-Xing），保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO: M 2021538。
所述枯草芽孢杆菌简称STX2017菌株。
优选地，所述枯草芽孢杆菌的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了一种可湿性粉剂，包括以下浓度的各组分：
权利要求1所述的枯草芽孢杆菌、
黄原胶、
羧甲基纤维素钠、
米糠和
秸秆粉。
优选地，所述可湿性粉剂的制备方法包括以下步骤：
将枯草芽孢杆菌种子液(OD600=1.0)接种到LB液体培养基中，发酵一定时间后，离心收集菌株，所得菌悬液中加入部分秸秆粉，干燥后按比例依次加入黄原胶、羧甲基纤维素钠和米糠，搅拌均匀后补加其余的秸秆粉，再搅拌均匀后粉碎，即得。
优选地，所述枯草芽孢杆菌种子液接种的起始浓度为2%~5%。
优选地，所述发酵的时间为8 h~12h。
本发明还提供了一种根据前述的可湿性粉剂在餐厨垃圾资源化中的应用。
本发明还提供了一种基于前述的可湿性粉剂用于餐厨垃圾处理方法，包括以下步
骤：将可湿性粉剂添加到待处理的餐厨垃圾中，
发酵24~48小时，再收集发酵
残留物，即可。
优选地，所述可湿性粉剂的添加量为10 kg~20 kg/吨餐厨垃圾。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
（1）本发明从上海交通大学第一餐厅垃圾箱内表沉积物中分离鉴定了一株枯草芽
孢杆菌枯草亚种天性变种，简称STX2017，该菌株在
、10% NaCl和pH=5.0酸性条件下能
同时利用蛋白质、碳水化合物、纤维素和油酯类物质迅速生长，兼具耐盐、耐酸、耐热和生长
迅速等特点，解决了传统餐厨垃圾发酵菌种不耐高温、酸和盐、降解活性单一等关键科学问
题。
(2)本发明还研制了一个适合STX2017菌株的可湿性粉剂，常温下该粉剂的货架期
可达三个月。将含有STX2017的可湿性粉剂加到餐厨垃圾中，在
温度下有氧发酵处
理48小时后，垃圾总量减少62%，残留物有机质含量降低57.4%，全氮量升高63.6%，全磷量升
高45.8%，全钾量升高50%。
(3）枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种STX2017属于生物安全的菌种，高温有氧发酵处理后餐厨垃圾减量明显，有机质含量显著降低，氮磷钾含量显著增加，无杂菌产生，有效实现餐厨垃圾就地化、减量化、资源化、无害化处理，比垃圾高温焚烧或沼气发酵处理方法更安全和环保，显著降低碳排放。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
图1为本发明实施例分离得到的枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种STX2017的菌落形态和电镜图；其中图1A为菌落形态图；图1B为电镜下枯草芽孢杆菌STX2017的杆状细胞图；
图2为本发明实施例分离得到的枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种STX2017在含不同盐浓度的LB平板上生长48小时后的菌落直径；
图3为本发明实施例分离得到的枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种STX2017在不同温度条件下在LB固体培养基上生长48小时后的菌落直径；
图4为本发明实施例分离得到的枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种STX2017在不同温度下在液体LB培养基中的生长曲线；
图5为本发明实施例制备的可湿性粉剂的外观（立体镜下
放大）。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
实施例1
(1）菌株STX2017分离
从上海交通大学第一餐厅中餐馆厨房后门的垃圾箱内表面刮取10克沉积物，溶于
5 ml 
缓冲液中，通过医用纱布过滤后的过滤液存于
冰箱备用。分别配置LB（胰
蛋白胨10 g、酵母提取物5g、NaCl 10 g，蒸馏水定容至1000 mL，pH7.0）、NA(蛋白胨10.0 g、
牛肉粉3.0 g、氯化钠 5.0 g、琼脂15.0 g, 蒸馏水定容至1000 mL ,pH7.3)和PSA(马铃薯
200 g、蔗糖20 g、琼脂20 g,蒸馏水定容至1000 mL)三种琼脂培养平板，取
上述过
滤液，均匀涂布到上述琼脂平板上，吹干后用封口膜封好，倒置于
的恒温培养箱中，培
养48 h，观察菌落形成。
(2）菌种鉴定
鉴定方法：分别记录所有长出菌落的菌落特征，通过革兰氏染色，确定属于革兰氏阳性还是阴性。菌种鉴定工作参照《植物病理研究方法》（方中达，1998）和《微生物学实验》（赵斌和何绍江，2006）中的实验方法，结合细胞形态和理化实验结果，初步确定大致属于哪一类菌。进一步利用通用引物（正向引物FOR：5′AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG3′,SEQ IDNO.2; 反向引物REV: 5′ACG GTT ACC TTG TTA CGA CTT3′,SEQ ID NO.3）通过PCR技术扩增16S rRNA 基因DNA片段，送交上海生工测序，测序结果提交到NCBI数据库中比对，确定所得菌株的分类地位。
鉴定结果：所得菌株革兰氏染色呈阳性，菌落特征与已报道的枯草芽孢杆菌类似，但菌落结构更致密，生长更快（图1）；生理生化特征分析显示该菌株比一般枯草芽孢杆菌代谢能力更强；所得菌株的16S rDNA扩增片段长度为1454 bp，序列如SEQ ID NO.1所示。在NCBI网站（http://www.ncbi.nlm.nih.gov）进行BLAST分析，可知该菌株与枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株的相应序列的同源性为99%,因此，该分离菌株既与已知枯草芽孢杆菌有相似之处，也有独特的表型，命名为枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种（Bacillus subtilis subsp. Subtilis var. Tian-Xing），简称STX2017。该菌株已于2021年5月17日送交中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心（英文简称CCTCC）保藏，保藏号为CCTCC NO:M 2021538，STX2017 Bacillus subtilis subsp. subtilis var. Tian-Xing 枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种。
(3）菌株STX2017降解有机物及其酶活性分析
胞外蛋白酶分析采用含有2%脱脂奶粉的LB琼脂平板；胞外纤维素酶活性分析采用
0.5%可溶性羧甲基纤维素钠的LB琼脂平板，刚果红染色30 min后，用1%NaCl脱色处理；胞外
淀粉酶活性分析采用含有1%直链淀粉的LB琼脂平板，10% KI染色后用1%NaCl脱色处理；脂
肪酶分析采用含有1%花生油或动物油脂的LB琼脂平板。用牙签挑起STX2017菌落，接种到上
述测试平板上，置于
恒温培养箱中培养48h,观察和记录菌落周围透明圈大小，确定菌
株降解酶相对活性。详细原理与操作步骤请参考: He et al., Molecular Microbiology,
59(2):610-622.
以大肠杆菌和国际标准枯草芽孢杆菌ATCC6633为对照，我们采用含有相应底物的
LB琼脂平板分析法分析了STX2017的常见有机物水解酶活性。结果表明：STX2017菌株在
条件下能够产生高水平的蛋白酶、淀粉酶酶、纤维素酶和脂肪酶，酶活性比大肠杆菌
和ATCC6633菌株高很多，能够分解LB琼脂平板中的蛋白质、淀粉，纤维类物质和油脂类物质
（表1）。
表1.STX2017菌株水解酶活性分析
+：酶活性对应指示圈直径<1 cm; ++：酶活性对应指示圈直径1-2 cm; +++：酶活性对应指示圈直径2-3 cm; ++++：酶活性对应指示圈直径>4 cm。
(4）菌株STX2017代谢碳水化合物、氨基酸、酯类和醇类等化合物分析
采用美国BIOLOG公司的BIOLOG GEN III微生物Eco板分析菌株在不同条件下的生
长情况。Eco板上包含国际土壤微生物学家精选的用于微生物群落分析最常用的31种碳源,
包括糖类、氨基酸类、酯类、醇类、胺类和酸类。将STX2017菌株菌悬液调整到OD600=0.1后，按
每个样品
的量加到Eco板上相应空洞中孵育多至5天时间，每隔一定时间用酶标仪在
590 nm和750 nm下测定吸光值，吸光值的大小反应微生物利用某一碳源底物的能力。根据
Biolog GEN III ECO平板生长实验分析结果，STX2017菌株能代谢和利用D-纤维二糖、D-葡
萄糖、D-甘露糖、D-果糖、玉米淀粉、D-棉子糖、果胶和L-鼠李糖，但不能利用D-半乳糖（表
2）。STX2017菌株可以利用L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-组氨酸，但不能利用D-天冬
氨酸和L-丝氨酸。STX2017菌株可以利用D-山梨醇、D-甘露醇、肌醇、甘油和明胶（表2）。
本实施例中还采集市场上售卖的金龙鱼牌“花生油”和上海交通大学第一餐厅中
餐馆自己炼制的“猪油”作为油脂类化合物代表，研究STX2017代谢油脂类化合物的能力。首
先向LB培养基中加入“花生油”或“猪油”,使其最终浓度(ml/L)分别为2%、4%、6%、8%、10%，分
别配成固体和液体培养基。用牙签挑取菌株接种在固体平板上，置于
恒温培养箱中培
养48 h后，监测在固体平板上菌落大小。
在含有2%-10%花生油的LB琼脂平板上，STX2017菌株生长迅速，其菌落直径随着花生油浓度升高而迅速增大（表3），菌落直径增加源于细菌生长迅速。同样，在含有2%-10%猪油的LB琼脂平板上，STX2017菌株生长迅速，其菌落直径随着猪油浓度升高而迅速增大（表3）。当油脂浓度达到8%，生长速度趋于饱和。因此，STX2017能够有效利用“花生油”和“猪油”，对两者没有显著的偏好性。
(5）耐盐特性分析
利用食盐NaCl作为盐类化合物代表，采用Biolog GEN III ECO平板分析STX2017耐盐能力。同时向LB琼脂培养基中加入NaCl,使其最终浓度分别为2%、4%、6%、8%、10%、12%，配成固体培养基。按上述方法接种STX2017到含有NaCl的固体或液体平板上，置于50恒温培养箱中分别监测菌株生长情况，确定NaCl最低抑制浓度。
在Biolog GEN III ECO平板上STX2017菌株在含有2%-10%NaCl的条件下仍然能够生长（表4）；在含有2%-10% NaCl的LB平板上，STX2017菌落直径与无盐条件下差别不大(图2)，在含有12% NaCl的LB平板上，菌落直径比无盐条件低。这些结果表明STX2017可以耐受10% NaCl,具有较强的耐盐能力。
(6）耐酸特性分析
采用BIOLOG GEN III Eco板分析菌株在不同有机酸和无机酸条件下生长实验。采用采用BIOLOG GEN III Eco板分析菌株在pH为4.0、5.0、5.5和6.0条件下菌株生长情况，确定最低抑制pH。
在Biolog GEN III ECO平板上STX2017菌株在pH=5.0-6.0的酸性条件下能生长（表4）。在含有L-乳酸、柠檬酸或L-苹果酸的ECO板上也能生长（表4），说明STX2017菌株能够利用这些酸类化合物作为碳源。
(7）耐高温特性分析
将菌株分别接种到LB琼脂平板上，分别在25
、37
、45
、 50
、55
、60
和65
恒温培养箱中培养，记录菌落直径大小作为菌株生长情况的指标，确定最适生长温度。将菌
株种子液（OD600=1.0）按2%
5%起始浓度接种到LB液体培养基中，分别在25
、37
、45
、
50
、55
、60
和
的摇床中培养，摇床转速为250rpm/min,每天监测培养体系的
OD600。
将STX2017菌株接种在固体LB琼脂平板上，在
恒温培养箱中均能生
长，超过
，菌落开始变小，在
条件下生长缓慢；每一种温度条件下的菌落直径见
图3。在液体LB培养基中，每种温度条件下STX2017菌株的生长曲线见图4。在
恒
温条件下，代表菌种生长的OD600值差别不大；在
条件下，OD600明显比低温条件
下小（图4），说明生长变慢。
实施例2
本实施例提供了一种可湿性粉剂的制备方法，具体步骤如下：
将实施例1获得的STX2017菌株接种到LB液体培养基得到OD600=1.0左右的种子液。
种子液按2%
5%比例接种到LB液体培养基中，在5升发酵罐中发酵培养8 h 
12 h后，所
得发酵菌液中枯草芽孢杆菌STX2017的细胞密度达到108CFU/ml。取发酵菌液4 L，在5000
rpm常温条件下离心30 min后去掉部分上清液，保留2000 ml上清液，迅速重新悬浮菌体得
到菌悬液，加入100 g秸秆粉，低温快速干燥，然后按比例依次加入
g黄原胶（中
轩生化）、
30 g羧甲基纤维素钠（上海生工）和
米糠（上海生工），
充分搅拌混合均匀，再加入
秸秆粉补充至1 公斤（kg），搅拌均匀后转移至
粉碎机中充分粉碎，即得可湿性粉剂（图5）。
可湿性粉剂中菌株CFU分析和货架期测试：
取可湿性粉剂（具体加入15g黄原胶、20g羧甲基纤维素钠、80g米糠，充分搅拌混合
均匀，再加入
秸秆粉补充至1 公斤所制得）1克溶于
缓冲液
中，分别稀释
倍，取
稀释液涂板于LB琼脂平板上，置于
恒温培养箱中
培养3天，记录每板的菌落数目，换算成可湿性粉剂中的CFU/ml。可湿性粉剂在室温（
）
环境下储存，每隔一个星期，从同一样品中取1克样品，按上述方法测试CFU，评价可湿性粉
剂中菌种有效存活时间（货架期）。结果表明：所得可湿性粉剂中活菌含量为1012CFU/kg；可
湿性粉剂在常温条件下存放三个月，菌株CFU没有显著下降。
实施例3
本实施例提供了一种采用实施例2制备的可湿性粉剂进行高温有氧发酵处理餐厨垃圾的方法，具体如下：
收集1吨上海交通大学第一餐厅中餐厅餐厨垃圾，先取3份样本各100 g,送交上海
交通大学分析测试中心分别检测水分含量（%）、有机质含量（%）、全氮（%）、全磷（%）、全钾
（%）。餐厨垃圾高温有氧发酵处理采用上海睿烨环保科技发展有限公司集装箱式可移动处
理器，每吨垃圾添加
实施例2制备的可湿性粉剂，箱内温度从
梯度增
加至
，均匀搅拌（6转/min），有氧发酵48 h。发酵完成后，称重，计算垃圾减量。分别取3
份发酵好的样本各100 g，送交上海交通大学分析测试中心，分别检测水分含量（%）、有机质
含量（%）、全氮（%）、全磷（%）、全钾（%）。
检测结果如表5所示（该结果为每吨垃圾添加15 kg实施例2制备的可湿性粉剂的处理结果），餐厨垃圾经STX2017处理48 h 后，湿重减少62%，水分含量提高79.8%，总有机质含量降低57.4 %，全氮、全磷和全钾含量分别提高63.6%、45.8%和50%。
综上可见，本发明分离得到的枯草芽孢杆菌天性亚种在餐厨垃圾资源化应用中的原理如下：
首先，餐厨垃圾都含有高水平盐分，通常呈现酸性。STX2017能利用多种有机酸，在pH>4.5条件下能够生长，在10%盐浓度条件下也能够生长，因此，能够适应餐厨垃圾环境；
其次，高温处理既能促进餐厨垃圾分解，又能够杀死餐厨垃圾中的有害杂菌。高温
好氧发酵时间短，还可以节约成本。STX2017属于好氧菌，能够在
条件下生长，因
此，适合餐厨垃圾高温有氧发酵处理；
再次，STX2017菌株能够利用和代谢多种碳水化合物，也能产生蛋白酶快速分解蛋白质，还产生纤维素酶降解纤维。最重要的是STX2017在高温条件下能有效降解和利用油脂，因此，适合油脂含量高的餐厨垃圾处理；
最后，STX2017属于生物安全菌株，对人体和动物无害，对环境友好，还能作为生物防治制剂促进作物生长和抗病。STX2017处理过的垃圾残留物含有多种营养成分，加工后制成生物有机肥，可用于农作物有机种植，生产高附加值产品，可以充分实现餐厨垃圾资源化。
本发明具体应用途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出，以上实施例仅用于说明本发明，而并不用于限制本发明的保护范围。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 上海交通大学
<120> 一株耐酸、耐盐、耐热、高效降解有机物的枯草芽孢杆菌及其 在餐厨垃圾资源化中的应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1454
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
acgacttcac cccaatcatc tgtcccacct tcggcggctg gctcctaaaa ggttacctca 60
ccgacttcgg gtgttacaaa ctctcgtggt gtgacgggcg gtgtgtacaa ggcccgggaa 120
cgtattcacc gcggcatgct gatccgcgat tactagcgat tccagcttca cgcagtcgag 180
ttgcagactg cgatccgaac tgagaacaga tttgtgggat tggcttaacc tcgcggtttc 240
gctgcccttt gttctgtcca ttgtagcacg tgtgtagccc aggtcataag gggcatgatg 300
atttgacgtc atccccacct tcctccggtt tgtcaccggc agtcacctta gagtgcccaa 360
ctgaatgctg gcaactaaga tcaagggttg cgctcgttgc gggacttaac ccaacatctc 420
acgacacgag ctgacgacaa ccatgcacca cctgtcactc tgcccccgaa ggggacgtcc 480
tatctctagg attgtcagag gatgtcaaga cctggtaagg ttcttcgcgt tgcttcgaat 540
taaaccacat gctccaccgc ttgtgcgggc ccccgtcaat tcctttgagt ttcagtcttg 600
cgaccgtact ccccaggcgg agtgcttaat gcgttagctg cagcactaag gggcggaaac 660
cccctaacac ttagcactca tcgtttacgg cgtggactac cagggtatct aatcctgttc 720
gctccccacg ctttcgctcc tcagcgtcag ttacagacca gagagtcgcc ttcgccactg 780
gtgttcctcc acatctctac gcatttcacc gctacacgtg gaattccact ctcctcttct 840
gcactcaagt tccccagttt ccaatgaccc tccccggttg agccgggggc tttcacatca 900
gacttaagaa accgcctgcg agccctttac gcccaataat tccggacaac gcttgccacc 960
tacgtattac cgcggctgct ggcacgtagt tagccgtggc tttctggtta ggtaccgtca 1020
aggtaccgcc ctattcgaac ggtacttgtt cttccctaac aacagagctt tacgatccga 1080
aaaccttcat cactcacgcg gcgttgctcc gtcagacttt cgtccattgc ggaagattcc 1140
ctactgctgc ctcccgtagg agtctgggcc gtgtctcagt cccagtgtgg ccgatcaccc 1200
tctcaggtcg gctacgcatc gttgccttgg tgagccgtta cctcaccaac tagctaatgc 1260
gccgcgggtc catctgtaag tggtagccga agccaccttt tatgtttgaa ccatgcggtt 1320
caaacaacca tccggtatta gccccggttt cccggagtta tcccagtctt acaggcaggt 1380
tacccacgtg ttactcaccc gtccgccgct aacatcaggg agcaagctcc catctgtccg 1440
ctcgacttgc atgt 1454
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
acggttacct tgttacgact t 21
Claims (9)
1.一株耐酸、耐盐、耐热、降解有机物的枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种天性变种（Bacillus subtilis subsp. subtilis var. Tian-Xing），保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2021538。
2.一种可湿性粉剂，其特征在于，包括以下含量的各组分：
权
利要求1所述的枯草芽孢杆菌、
黄原胶、
羧甲基纤维素钠、
米糠和
秸秆粉。
3.根据权利要求2所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述可湿性粉剂的制备方法包括以下步骤：
将枯草芽孢杆菌种子液接种到LB液体培养基中，发酵一定时间后，离心收集菌株，所得菌悬液中加入部分秸秆粉，干燥后按比例依次加入黄原胶、羧甲基纤维素钠和米糠，搅拌均匀后补加其余的秸秆粉，再搅拌均匀后粉碎，即得。
4.根据权利要求3所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌种子液接种的起
始浓度为
。
5.根据权利要求3所述的可湿性粉剂，其特征在于，所述发酵的时间为
。
6.一种根据权利要求2所述的可湿性粉剂在餐厨垃圾资源化中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，具体为可湿性粉剂在餐厨垃圾处理中的应用。
8.一种基于权利要求2所述的可湿性粉剂的餐厨垃圾处理方法，其特征在于，包括以下
步骤：将可湿性粉剂添加到待处理的餐厨垃圾中，
发酵
，再收集发
酵残留物，即可。
9.根据权利要求8所述的可湿性粉剂的餐厨垃圾处理方法，其特征在于，所述可湿性粉
剂的添加量为
kg/吨餐厨垃圾。
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