CN113476485B - 一种海茸提取液的制备方法和应用 - Google Patents
一种海茸提取液的制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物提取技术领域，公开了一种海茸提取液的制备方法和应用。该制备方法，包括以下步骤：向海茸粉末中加入低共熔溶剂，采用超声波处理，然后离心，得上清液，即为海茸提取液。本发明通过采用天然低共熔溶剂和超声波提取相结合的方式制备海茸提取液，利用天然低共熔溶剂与细胞之间的氢键或静电相互作用，协同超声波作用，使细胞内的有效物质实现快速溶出，能够显著提高海茸提取液的抗氧化性能，主要表现为对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力。本发明提供的制备方法，其过程简单，用时短，且不会对海茸中活性成分造成破坏。
Description
技术领域
本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种海茸提取液的制备方法和应用。
背景技术
海茸作为一种大型褐藻，暴露在光和氧气环境中，因此具有强大的抗氧化系统，通过产生自由基和氧化剂来保护自己免受氧化损伤。其富含大量的膳食纤维、脂肪酸、氨基酸、维生素、黄酮、多酚等化合物，具有抗氧化、抗凝血、抗病毒、抗肿瘤、降胆固醇、降血脂等诸多活性功能。这些性质使得海茸提取物成为营养保健品、功能性食品和药品成分的理想来源。其中，海茸提取液的抗氧化性能是最受关注的性质之一。
但是目前对海茸提取液的制备方法较少，大部分是使用常规提取方法，如浸泡、硝化、索氏提取等，这些通常需要使用大量的溶剂，配合加热过程，其耗时长，溶剂挥发性强，易燃易爆，存在安全问题。另外通过有机溶剂提取还可能导致提取物中某些化合物的降解，破坏活性成分，以上传统方法会对海茸提取液的抗氧化性能造成较大影响。
因此，亟需提供一种海茸提取液的制备方法，其提取简单，用时短，且能够提高海茸提取液的抗氧化性。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种海茸提取液的制备方法，其提取简单，用时短，且能够提高海茸提取液的抗氧化性。
本发明第一方面提供了一种海茸提取液的制备方法。
具体的，一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
向海茸中加入低共熔溶剂，采用超声波处理，然后离心，得上清液即为所述海茸提取液。
优选的，所述低共熔溶剂包括氢键受体和氢键供体，所述氢键受体为生物碱，所述氢键供体为二元酸或/和多元酸。
优选的，所述氢键受体选自左旋肉碱、甜菜碱或苦参碱中的一种；进一步优选的，所述氢键受体为左旋肉碱。
优选的，所述氢键供体选自顺丁烯二酸、草酸、丙二酸、丙酸、柠檬酸、脯氨酸、苹果酸、丁二酸或酒石酸中的至少一种；进一步优选的，所述氢键供体选自顺丁烯二酸、草酸、丙二酸、柠檬酸、脯氨酸、苹果酸或丁二酸中的至少一种；更优选的，所述氢键供体选自丙二酸和/或脯氨酸。当氢键供体为脯氨酸时，还能利用脯氨酸的含氮基团，增强低共熔溶剂与细胞壁之间的相互作用，有利于细胞内抗氧化物质(维生素、黄酮和多酚等)的溶出。
优选的，所述氢键受体与所述氢键供体的物质的量的比为1∶(1-3)。
优选的，所述低共熔溶剂中还包括水，所述低共熔溶剂的含水量为20％-80％。
优选的，所述海茸粉末与所述低共熔溶剂的质量比为1：(5-60)；进一步优选的，所述海茸粉末与所述低共熔溶剂的质量比为1：(10-30)。
优选的，所述海茸为海茸粉碎物，包括海茸粉末或新鲜海茸经粉碎制得的粉碎物。
优选的，所述超声波处理的时间为10-120min；优选的，所述超声波处理的时间为20-60min。
优选的，所述超声波的频率为20-60KHz；所述超声波的功率为20-60W。
优选的，在所述离心的步骤后，还包括洗涤滤渣，并将洗涤液与所述上清液混合的过程。
本发明第二方面提供了上述制备方法制得的海茸提取液的应用。
具体的，所述海茸提取液在食品或药品制备中的应用。如制备具有抗氧化、抗凝血、抗病毒、抗肿瘤、降胆固醇或降血脂的保健食品或药品。
相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
(1)本发明通过采用天然低共熔溶剂和超声波提取相结合的方式制备海茸提取液，利用天然低共熔溶剂与细胞之间的氢键或静电相互作用，协同超声波作用，使细胞内的有效物质实现快速溶出，能够显著提高海茸提取液的抗氧化性能，主要表现为对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力。
(2)本发明选用天然生物碱作为氢键受体，与氢键供体制备成无毒无害、低挥发性的天然低共熔溶剂，其提取过程简单，用时短，且不会对海茸中活性成分造成破坏。
附图说明
图1为实施例1-9和对比例1-2制备的海茸提取液对DPPH自由基清除率图；
图2为实施例1-9和对比例1-2制备的海茸提取液对ABTS自由基清除率图。
具体实施方式
为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。
以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
实施例1
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为脯氨酸，将左旋肉碱与脯氨酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例2
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为丙二酸，将左旋肉碱与丙二酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例3
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为顺丁烯二酸，将左旋肉碱与顺丁烯二酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例4
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为苹果酸，将左旋肉碱与苹果酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例5
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为草酸，将左旋肉碱与草酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例6
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为柠檬酸，将左旋肉碱与柠檬酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例7
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为丁二酸，将左旋肉碱与丁二酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例8
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为丙酸，将左旋肉碱与丙酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例9
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为酒石酸，将左旋肉碱与酒石酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例10
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为苦参碱，低共熔溶剂的氢键供体为丙二酸，将苦参碱与丙二酸按照物质的量比为1:1混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为50％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理30min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例11
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为脯氨酸，将左旋肉碱与脯氨酸按照物质的量比为1:5混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为40％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
实施例12
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备天然低共熔溶剂，低共熔溶剂的氢键受体为左旋肉碱，低共熔溶剂的氢键供体为脯氨酸，将左旋肉碱与脯氨酸按照物质的量比为1:2混合，加入水，混合，使得低共熔溶剂的含水量为90％，得到低共熔溶剂。
(2)吸取低共熔溶剂至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与低共熔溶剂的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例1
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
吸取乙醇至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与乙醇的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL乙醇清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用乙醇定容至100mL，得海茸提取液。
对比例2
一种海茸提取液的制备方法，包括以下步骤：
吸取去离子水至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与去离子水的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例3
取脯氨酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的脯氨酸溶液，吸取脯氨酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与脯氨酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例4
取丙二酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的丙二酸溶液，吸取丙二酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与丙二酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例5
取顺丁烯二酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的顺丁烯二酸溶液，吸顺丁烯二酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与顺丁烯二酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例6
取苹果酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的苹果酸溶液，吸苹果酸溶液至50mL离心管中，使海茸粉末与苹果酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例7
取草酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的草酸溶液，吸草酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与草酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例8
取柠檬酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的柠檬酸溶液，吸柠檬酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与柠檬酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例9
取丁二酸，加去离子水溶解，制备浓度为20％的丁二酸溶液，吸丁二酸溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与丁二酸溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
对比例10
取左旋肉碱，加去离子水溶解，制备浓度为20％的左旋肉碱溶液，吸取左旋肉碱溶液至50mL离心管中，加入海茸粉末，使海茸粉末与左旋肉碱溶液的质量比为1∶20；然后采用超声波(40KHz，30W)处理60min。再将混合溶液离心(1000rpm)10min，取上清液；另在离心管中加入20mL去离子水清洗滤渣，离心后，将上清液混合，重复3次；用去离子水定容至100mL，得海茸提取液。
产品效果测试
(1)抗氧化能力测定(DPPH自由基清除实验)
DPPH自由基具有孤电子对使其在517nm处具有很强的吸收峰，其乙醇溶液呈现紫色，当有抗氧化剂存在时，会发生氢转移，DPPH自由基孤电子对被清除，溶液颜色变浅，且颜色的变化与氧化程度具有线性关系，因此采用DPPH自由基清除实验可表征待测物的抗氧化能力。
首先配制DPPH乙醇溶液，浓度为0.2mmol/L；实施例1-12和对比例1-9制备的海茸提取液与DPPH乙醇溶液(T)、实施例1-12和对比例1-9制备的海茸提取液与乙醇(T0)、DPPH乙醇溶液与乙醇(C0)均按照体积比1∶1混合后，避光0.5h，在517nm处测吸光度，10μg/mL维生素C作为阳性对照。
按以下公式计算DPPH清除率：
DPPH自由基清除率(％)＝[C0-(T-T0)]/C0×100％。
(2)抗氧化能力测定(ABTS自由基清除实验)
ABTS自由基是带有正电荷的自由基，在734nm处有强吸收，溶液呈现绿色，其颜色深浅与自由基浓度呈正相关。当抗氧化剂存在时，ABTS自由基会从抗氧化剂中得到电子，发生电子转移使其变成稳定状态，因此在734nm处的吸收降低。因此采用ABTS自由基清除实验表征待测物的抗氧化能力。
ABTS溶液(7.0mmol/L)和过硫酸钾溶液(2.45mmol/L)按体积比1∶1混合，避光反应12h后得到母液，用PBS缓冲液(10mmol/L，pH 7.4)稀释，使得在734nm处的吸光度为0.7±0.02，即得到ABTS自由基工作液。实施例1-12和对比例1-9制备的海茸提取液与ABTS工作液(Ai)、实施例1-12和对比例1-9制备的海茸提取液与PBS缓冲液(A0)、PBS缓冲液与ABTS工作液(Aj)均以体积比1∶4混匀，避光反应6min，测734nm处吸光度，10μg/mL维生素C作为阳性对照。
按以下公式计算ABTS清除率：
ABTS自由基清除率(％)＝[Aj-(Ai-A0)]/Aj×100％。
DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率的测试结果见表1。
表1 DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率
由表1可知，阳性对照10μg/mL的Vc对DPPH自由基清除率为58.45％，采用乙醇提取的海茸提取液对DPPH自由基并未显示出明显的清除效果。而以9种酸和左旋肉碱作为提取剂的海茸提取物均具有DPPH自由基清除能力。以左旋肉碱作为氢键受体，顺丁烯二酸、草酸、丙二酸、丙酸、柠檬酸、脯氨酸、苹果酸、丁二酸、酒石酸9种酸作为氢键供体的低共熔溶剂，制备的海茸提取液的DPPH清除率分别为49.97％、40.73％、65.85％、31.90％、42.00％、77.00％、45.38％、36.69％、24.91％。图1为实施例1-9和对比例1-2制备的海茸提取液对DPPH自由基清除率图(图1中横坐标为各样品，纵坐标为DPPH自由基清除率)，更好地呈现各种酸与左旋肉碱形成的低共熔溶剂对DPPH自由基的清除效果。其中丙二酸和脯氨酸表现出高于阳性对照Vc的清除率效果。而由对比例可知，采用去离子水以及各种酸或左旋肉碱单独提取时，制备的海茸提取液均表现出较差的DPPH自由基清除效果。
由表1也可知，阳性对照10μg/mL的Vc对ABTS自由基清除率为40.70％，乙醇提取液对ABTS自由基只有很低的清除效果，清除率仅为3.44％。而实施例1-12制备的海茸提取液对ABTS自由基的清除能力均高于阳性对照以及乙醇提取液。以左旋肉碱作为氢键受体，以顺丁烯二酸、草酸、丙二酸、丙酸、柠檬酸、脯氨酸、苹果酸、丁二酸、酒石酸9种酸作为氢键供体的低共熔溶剂，其制备的海茸提取物的ABTS清除率分别为66.05％、92.38％、90.82％、84.93％、65.53％、99.83％、70.61％、81.87％、44.46％。图2为实施例1-9和对比例1-2制备的海茸提取液对ABTS自由基清除率(图2中横坐标为各样品，纵坐标为ABTS自由基清除率)，更好地呈现各种酸与左旋肉碱形成的低共熔溶剂对ABTS自由基的清除效果。而由对比例可知，采用各种酸或左旋肉碱单独提取时，制备的海茸提取液均表现出较差的ABTS自由基清除效果。
海茸提取液的抗氧化能力与黄酮类、酚类化合物以及糖类的含量有关，因为这些化合物可以清除氧化反应中产生的自由基。综合实验结果可以看出，相比于采用传统的乙醇、水进行提取，本发明提供的制备方法制备的海茸提取液具有更强的抗氧化能力。这是由于低共熔溶剂与海茸细胞壁之间通过氢键或者静电相互作用，使细胞内的抗氧化物质得以溶出；另外，低共熔溶剂与多酚、黄酮类化合物之间也可以发生氢键或者静电相互作用，因此低共熔溶剂可以有效提取抗氧化成分。其中抗氧化能力最强的左旋肉碱-脯氨酸，其作为提取剂的海茸提取液对DPPH自由基以及ABTS自由基均具有很好的清除效果，这与脯氨酸具有的含氮基团有关，使之与细胞壁有较强的相互作用，更有利于细胞内物质的溶出，且能不会造成活性成分的失活，能够有效提高海茸提取液的抗氧化能力。
Claims (4)
1.一种海茸提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
向海茸中加入低共熔溶剂，采用超声波处理，然后离心，得上清液，即为所述海茸提取液；
所述低共熔溶剂由左旋肉碱、脯氨酸和水组成；
所述左旋肉碱与所述脯氨酸的物质的量的比为1∶（1-3）。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述低共熔溶剂的含水量为20%-80%。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述海茸与所述低共熔溶剂的质量比为1：（5-60）。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声波处理的时间为10-120min；所述超声波的频率为20-60 KHz；所述超声波的功率为20 -60W。
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