CN113438950A

CN113438950A - 用于处理玫瑰痤疮和皮肤发红的局部皮肤用组合物

Info

Publication number: CN113438950A
Application number: CN202080014899.6A
Authority: CN
Inventors: 蒂凡尼·卡尔; 大卫·甘; 吉赛·卡拉哈斯蒂
Original assignee: Kay Mary Inc
Current assignee: Kay Mary Inc
Priority date: 2019-02-18
Filing date: 2020-02-17
Publication date: 2021-09-24
Also published as: US20230321176A1; EP3927349A1; US11931395B2; DE202020005611U1; US11590194B2; US20210338764A1; WO2020172101A1; US20200261531A1; US11090352B2

Abstract

本发明一般涉及用于处理皮肤的使用方法和组合物。组合物包含海枣(Phoenix dactylifera)提取物、茶树精油、密罗木(Myrothamnus flabellifolia)提取物和糖类同分异构体的组合。该组合可用于制造局部皮肤用组合物，所述局部用组合物减少玫瑰痤疮、红斑和/或炎症，并抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶‑2(COX‑2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素‑6(IL‑6)和白细胞介素‑8(IL‑8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF‑α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和增加皮肤保湿。该组合还可以用于减少暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或缔结组织的增生。

Description

用于处理玫瑰痤疮和皮肤发红的局部皮肤用组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年2月18日提交的美国临时专利申请序列第62/07141号的优先权权益，通过引用其整体并入本文。

发明背景

A.技术领域

本发明一般涉及可以减少玫瑰痤疮、红斑和/或皮肤炎症并抑制一氧化氮合酶的局部护肤组合物。组合的成分可以包含海枣(Phoenix dactylifera)提取物、茶树精油、密罗木(Myrothamnus flabellifolia)提取物和糖类同分异构体。

B.背景技术

玫瑰痤疮是常见的皮肤状况，其影响了数百万人并且对他们的生活质量产生了负面影响。仅在美国，估计就有约1400万人患有玫瑰痤疮。具有白皙的皮肤、特别是晒伤的皮肤的年龄超过30岁的女性更有可能出现玫瑰痤疮。其他风险因素包括吸烟、玫瑰痤疮家族史和凯尔特或斯堪的纳维亚血统。虽然女性更有可能出现玫瑰痤疮，但是男性更有可能出现更严重的病症情况。

玫瑰痤疮在人的面部引起发红和血管可见，通常影响人面部中央的三分之一，特别是鼻子，并具有随时间变化的不同强度的发红。玫瑰痤疮的四个子类型之一是红斑血管扩张型玫瑰痤疮，其特征在于发红、潮红和血管可见。与此类型相关的典型的面部发红可以长期存在于人的面部，伴随着鼻子和脸颊上的小血管肿胀，并且在发病时变得更明显。第二种子类型是丘疹脓疱型玫瑰痤疮，其特征在于发红、肿胀和痤疮样爆发。在一些情况下，肿胀的红肿块和丘疹还可以含有脓，并且在触摸时感觉到疼痛或者发热。第三种子类型是鼻赘型玫瑰痤疮，其特征在于皮肤增厚和皮肤纹理不平整，在更严重的情况下会引起鼻赘，即鼻子上的皮肤增厚，从而导致鼻子呈现球根状。眼型玫瑰痤疮是第四种子类型，并且是最严重的玫瑰痤疮类型，影响人的眼睛并引起干燥、刺激、眼睑肿胀和发红，以及看起来像麦粒肿的肿块外观。

虽然玫瑰痤疮的潜在病因尚不清楚，但是基本过程涉及面部的小血管扩张。玫瑰痤疮患者抑制面部炎症的能力通常因遗传因素而降低，所述面部炎症可由环境因素例如晒伤、毛囊虫症(毛囊中的毛囊蠕形螨(Demodex folliculorum))、潮红和特定药物引起。玫瑰痤疮易于影响面部的“脸红”区域，在容易潮红的人之中更常见。另外，已知多种因素会加重玫瑰痤疮症状。这些因素包括情绪因素(例如压力、恐惧、焦虑、尴尬、情绪低落等)以及环境因素(例如强风、湿度变化、日照和皮肤晒伤)。运动、饮酒、吸烟和辛辣食物都是通过增加皮肤表面的血液流动而加重玫瑰痤疮的常见诱因。

其他人已经尝试制造使减少玫瑰痤疮、皮肤炎症和红斑的组合物和方法。一些人已经尝试通过在单一组合物中使用多种活性成分来同时解决涉及皮肤炎症的多种途径。例如，美国专利第8535738号和美国专利第9687517号教导了可能与炎症有关的几种途径并提供可以解决这些途径中的一部分的成分清单。然而，实际上仅测试了少数活性成分的组合的相容性和有效性。不清楚其中其他成分的组合是否有效，是否可能造成不期望的副作用，或是否可能加剧与皮肤炎症有关的问题。

玫瑰痤疮的治疗还包括使用抗生素，例如四环素、克林霉素、红霉素和伊佛霉素(例如

霜1％)。参见例如美国专利第5972993号和美国专利公开第2015/0011489号。或者，已经将

(甲硝唑0.75％凝胶)用作局部组合物，其在处理与玫瑰痤疮有关的丘疹和脓疱上的治疗效果有限，但是在减少皮肤发红、毛细血管扩张或潮红方面无效。参见例如美国专利第5972993号。最近，壬二酸(例如

15％凝胶、

20％霜)的使用显示出通过减少活性氧的抗炎作用来治疗轻度至中度的丘疹和脓疱方面的前景。参见Cole,Gary W.,Rosacea,MedicineNet(2019年1月4日)，https://www.medicinenet.com/rosacea/article.htm#rosacea_facts和Gollnick H.和Layton,A.(2008),Azelaic acid 15％gel in the treatment of rosacea,ExpertOpinion on Pharmacotherapy,9(15),2699-2706。DOI:10.1517/14656566.9.15.2699。此外，据报道伊佛霉素的抗寄生虫和抗炎性质可有效治疗肿块，但是伊佛霉素作用的确切机制及其长期影响仍是未知的。Galderma,Soolantra(2019年1月4日),https://www.soolantra.com/about-rosacea-treatment。

还使用了净痘精华，但是这些在审美上不具有吸引力，因为它们可含有约2％至5％的硫，这会留下不愉快的气味。美国专利第5972993号教导了用于处理玫瑰痤疮的局部组合物，其包含选自含硫化合物的抗氧化剂。虽然咪唑药物(例如酮康唑)已经显示在处理玫瑰痤疮方面有用，但是持续长期使用强效抗微生物剂、抗真菌剂和抗菌剂的安全性是未知的并且可能造成抗性。在更严重的玫瑰痤疮的情况下，使用了皮质类固醇药物和类视黄醇(例如异维A酸)，但是这些药物比抗生素带有产生不良副作用的更大风险，因此限制它们的长期使用。

毛囊虫症，或蠕形螨(毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨(Demodex brevis))不受控的感染，一种常见的寄生于皮肤的毛囊皮脂腺的体表寄生虫，作为丘疹脓疱性皮肤病变和毛囊周和炎性浸润的起因，与多种皮肤病包括玫瑰痤疮有关。一旦毛囊虫症影响面部，它就容易在眼睑扩散和发展，因为眶周区域的皮肤由于周围突出的身体部分例如鼻子、眉毛和脸颊区域而不易进行日常清洁。蠕形螨的患病率随年龄增加，在60岁至70岁的人群中，有84％至100％的人感染蠕形螨。茶树精油(1％4-萜烯醇)已经显示对蠕形螨有杀螨效果。Tighe等人(2013),Terpinen-4-ol is the most active ingredient of tea tree oil to killDemodex mites,Translational Vision Science&Technology,2(7),1-8。DOI:10.1167/tvst.2.7.2.

在这些处理玫瑰痤疮的尝试中，许多都是无效的，仅解决了玫瑰痤疮、炎症和红斑中的一种或几种不希望的结果，或者引起了本身不可接受的副作用，例如皮肤刺激或过敏反应。此外，并非每种有效组合物都适合每种皮肤类型。因此，需要有效地减少玫瑰痤疮、红斑和皮肤炎症的新产品。

发明内容

本发明人已经发现了与玫瑰痤疮、红斑和/或肤炎症相关的至少一些问题的解决方法。该解决方法基于成分的组合，所述成分可以包含海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体。该组合可以用于制造有效减少玫瑰痤疮、红斑和/或皮肤炎症并降低一氧化氮合酶活性的局部用组合物。在一些情况下，海枣提取物被证明增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物的或皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激和赖氨酰氧化酶表达，并抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)的活性。在一些情况下，糖类同分异构体被证明减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白和丝聚蛋白的产生并增强皮肤保湿。在一些特定情况下，密罗木提取物被证明减少TNF-α的产生并抑制一氧化氮合酶。在一些情况下，提取物是水提取物。在一些情况下，可以使用其他溶剂例如醇类、二醇类、水醇类和/或水二醇类提取物。

在一些方面，公开了局部用组合物。在一些方面，局部用组合物包含海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体中的任意一种、任意组合或全部。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以减少玫瑰痤疮、红斑和/或炎症。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以减少暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹、脓疱、皮肤暂时性潮红、皮肤持续性潮红和/或结缔组织的增生。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制MMP1的活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的海枣提取物以增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达和/或抑制MMP1的活性。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的茶树精油以杀死毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的糖类同分异构体以减少TNF-α的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的密罗木提取物以减少TNF-α的产生和/或抑制一氧化氮合酶。

在一些情况下，局部用组合物包含水。在一些情况下，糖类同分异构体和/或密罗木提取物是水提取物。水提取物表示可以使用水溶液作为提取剂或溶剂以获得提取物。除了水，在一些情况下，水溶液可以包括醇类、二醇类或其组合。水提取物可以是液体形式或粉末形式的。糖类同分异构体可以含有属于海洋浮游生物家族的溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)的胞外多糖。密罗木提取物可以是密罗木叶和茎的提取物。海枣提取物可以是来自海枣籽的水溶性提取物。茶树精油可以是来自茶树互生叶白千层(Melaleucaalternifolia)的叶的精油。

本文公开的局部用组合物还可以包含本文所述的一种或多于一种成分。例如，组合物可以包含一种或多于一种附加成分，其选自一种或多于一种调理剂、保湿剂、pH调节剂、结构化剂、无机盐和防腐剂。在一些情况下，局部用组合物还包含水。所述组合物内成分的量可以改变(例如，该量可以低至0.000001重量％到高如98重量％，或是其间的任意范围)。在一些情况下，局部用组合物是乳液、精华素、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华素。

还公开了本文公开的组合物的使用方法。在一些方面，公开了改善皮肤状况或外观的方法，其包括将本文公开的任何一种组合物施用于有需要的皮肤。在一个方面，将本文公开的任何一种组合物施用于皮肤，并将该组合物留在皮肤上，或在一段时间后从皮肤上除去。在一些方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少玫瑰痤疮。在一些方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少红斑。在一些方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少炎症。在另一方面，本文公开的组合物用于抑制或减少一氧化氮合酶活性。在一些方面，本文公开的组合物用于增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制MMP1活性、杀死毛囊蠕形螨和/或皮脂蠕形螨、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。在一些情况下，本文公开的局部用组合物包含有效量的海枣提取物并用于增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达和/或抑制MMP1活性。在一些情况下，本文公开的组合物包含有效量的茶树精油并用于杀死毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨。在一些情况下，本文公开的组合物包含有效量的糖类同分异构体并用于减少TNF-α的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。在一些情况下，本文公开的组合物包含有效量的密罗木提取物并用于减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生和/或抑制一氧化氮合酶。在一些方面，该方法包括将本文所述的任何一种局部用组合物施用于皮肤。在一些方面，该方法包括将所述组合物施用于面部皮肤。在一些情况下，该方法包括所述组合物施用于发红皮肤、玫瑰痤疮皮肤、红斑皮肤和/或发炎皮肤。

在一些方面，将本发明的组合物配制为局部皮肤用组合物。组合物可以具有用于化合物和提取物的皮肤病学可接受的载剂或载体。组合物可以进一步包含保湿剂或湿润剂、表面活性剂、含硅酮的化合物、UV剂、油和/或本说明书所确定的其他成分或本领域中已知的成分。组合物可以是面膜、润肤露、霜、凝胶、精华素、乳液(例如，水包油、油包水、水包硅酮、硅酮包水、水包油包水、油包水包油、硅酮包水包油等)、溶液(例如水溶液或水醇溶液)、无水基底(例如口红或粉)、软膏、乳、糊状物、气雾剂、固体形式、眼部凝露、凝胶精华素、凝胶乳液等。组合物可以配制为用于局部皮肤施用，在使用期间每天施用至少1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次或多于7次。在本发明的其它方面，组合物可以是储存稳定或颜色稳定的，或两者都是。还预期可以选择组合物的黏度以达到希望的结果，例如根据所需的组合物类型，这种组合物的黏度可以为约1cp至远超过1百万cp，或其中可衍生的任意范围或整数(例如，在25℃下在布氏黏度计上用TC转子以2.5rpm的转速测得的2cp、3cp、4cp、5cp、6cp、7cp、8cp、9cp、10cp、20cp、30cp、40cp、50cp、60cp、70cp、80cp、90cp、100cp、200cp、300cp、400cp、500cp、600cp、700cp、800cp、900cp、1000cp、2000cp、3000cp、4000cp、5000cp、6000cp、7000cp、8000cp、9000cp、10000cp、20000cp、30000cp、40000cp、50000cp、60000cp、70000cp、80000cp、90000cp、100000cp、200000cp、300000cp、400000cp、500000cp、600000cp、700000cp、800000cp、900000cp、1000000cp、2000000cp、3000000cp、4000000cp、5000000cp、10000000cp等)。

在非限制性方面，组合物的pH值可以为约6至约9。在其它方面，pH可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14。组合物可以包含甘油三酯。非限制性实例包含短链、中链和长链甘油三酯。在某些方面，甘油三酯是中链甘油三酯(例如辛酸癸酸甘油三酯)。组合物还可以包含防腐剂。防腐剂的非限制性实例包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的混合物。在一些实施方案中，组合物不含对羟基苯甲酸酯。

本发明的组合物可以具有UVA和UVB吸收性质。该组合物可以具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60或大于60，或是其中任意整数或衍生的防晒指数(SPF)。组合物可以是防晒露、防晒喷雾或防晒霜。

本发明的组合物还可以包含以下附加成分的任何一种、任意组合或全部：水、螯合剂、保湿剂、防腐剂、增稠剂、含硅酮的化合物、精油、结构化剂、维生素、药物成分或抗氧化剂，或这些成分的任意组合或这些成分的混合物。在某些方面，组合物可以包含在前述内容中确定的这些附加成分中的至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种、至少十种或全部。这些附加成分的非限制性实例在本说明书全文确定，并通过引用并入本章节。这类成分的量的范围以组合物的重量或体积计可以为0.0001％至99.9％，或者是在如本说明书其它章节中所公开的任何整数或之间的范围，其通过引用并入本段。

也考虑了包含本发明的组合物的试剂盒。在某些实施方案中，组合物被包含在容器中。容器可以是瓶子、分配器或包装盒/袋。容器可以分配预定量的组合物。在特定的方面，该组合物以喷雾、薄雾、团块或液体的形式被分配。容器可以在其表面上包含标记。所述标记可以是词、缩写、图片或符号。

还考虑了在本说明书全文中所公开的所述组合物可以用作驻留类或淋洗类组合物。举例来说，驻留类组合物可以对皮肤局部施用，并在皮肤上保持一段时间(例如，至少5分钟、至少6分钟、至少7分钟、至少8分钟、至少9分钟、至少10分钟、至少20分钟或至少30分钟，或至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时、至少8小时、至少9小时、至少10小时、至少11小时、至少12小时、至少13小时、至少14小时、至少15小时、至少16小时、至少17小时、至少18小时、至少19小时、至少20小时、至少21小时、至少22小时、至少23小时或至少24小时，或者整夜或整个白天)。或者，淋洗类组合物可以是将要施用于皮肤然后在一段时间内，例如小于5分钟、小于4分钟、小于3分钟、小于2分钟或小于1分钟，(例如用水)从皮肤去除或洗去的产品。淋洗类组合物的实例可以是皮肤清洁剂、洗发水、护发素或肥皂。驻留类组合物的实例可以是润肤霜、防晒剂、面膜、晚霜或日霜。

预期对于本发明的任何方法或组合物，可以实施本说明书中所讨论的任何实施方案，反之亦然。此外，本发明的组合物可以用于实现本发明的方法。

在一个实施方案中，本发明的组合物可以是可药用的或可化妆用的，或可以具有舒适的触觉性质。“可药用的”、“可化妆用的”和/或“舒适的触觉性质”描述了具有令皮肤感觉舒适的特定的触觉性质的组合物(例如，不太稀薄或不太油的组合物、具有丝滑质地的组合物、非黏性或黏性的组合物等)。可药用的或可化妆用的还可以涉及组合物的乳脂状或润滑性能，或组合物的保湿性能。

还预期了包含本发明的组合物的产品。在非限制性方面，该产品可以是化妆品。化妆品可以是本说明书其他部分所述的化妆品，或是本领域技术人员已知的化妆品。产品的非限制性实例包括润肤膏、霜、润肤露、柔肤水、凝胶、洗剂、粉底、晚霜、口红、清洁剂、爽肤水、防晒剂、面膜、抗老化产品、除臭剂、止汗剂、香水、古龙水等。

还公开了本发明的以下实施方案1至38。实施方案1是一种处理皮肤的方法，该方法包括将有效量的局部用组合物局部施用到皮肤上，所述局部用组合物包含海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体，其中对皮肤进行了处理。实施方案2是实施方案1的方法，其中对皮肤进行处理以减少玫瑰痤疮、红斑和/或炎症，并且其中玫瑰痤疮、红斑和/或炎症得以减少。实施方案3是实施方案1至2的方法，其中对皮肤进行处理以减少暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或缔结组织的增生。实施方案4是实施的方案1至3中任一项的方法，其中对皮肤进行处理以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加皮肤的抗氧化能力、减少环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)的活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生、增加皮肤保湿，并且其中一氧化氮合酶得以抑制、α2A肾上腺素能受体激动剂活性得以增加、氧化得以减少、皮肤抗氧化能力得以增加、COX-2的产生得以抑制、VEGF的产生得以抑制、IL-6的产生得以抑制、IL-8的产生得以抑制、TNF-α的产生得以抑制、胶原蛋白刺激得以增加、赖氨酰氧化酶的表达得以增加、MMP1活性得以抑制、闭合蛋白的产生得以增加、丝聚蛋白的产生得以增加和/或皮肤保湿得以增加。实施方案5是实施方案1至4中任一项的方法，其中局部用组合物还包含水。实施方案6是实施方案1至5中任一项的方法，其中糖类同分异构体和/或密罗木提取物是水提取物。实施方案7是实施方案6的方法，其中水提取物是液体形式的。实施方案8是实施方案6的方法，其中水提取物是粉末形式的。实施方案9是实施方案1至8中任一项的方法，其中糖类同分异构体包括属于海洋浮游生物家族的溶藻弧菌的胞外多糖。实施方案10实施方案1至9中任一项的方法，其中密罗木提取物是密罗木叶和茎的提取物。实施方案11是实施方案1至10中任一项的方法，其中海枣提取物是来自海枣籽的水溶性提取物。实施方案12是实施方案1至11中任一项的方法，其中茶树精油是来自茶树互生叶白千层的叶的精油。实施方案13是实施方案1至12中任一项的方法，其中局部用组合物是乳液、精华素、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华素。实施方案14是实施方案1至13中任一项所述的方法，其中局部用组合物是水包油乳液或油包水乳液。实施方案15是实施方案1至14中任一项的方法，其中将组合物施用于面部皮肤。实施方案16是实施方案1至15中任一项的方法，其中组合物包含有效量的海枣提取物以增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达和/或抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)活性。实施方案17是实施方案1至16中任一项的方法，其中组合物包含有效量的茶树精油以杀死毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨。实施方案18是实施方案1至15中任一项的方法，其中组合物包含有效量的糖类同分异构体以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。实施方案19是实施方案1至15中任一项的方法，其中组合物包含有效量的密罗木提取物以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生和/或抑制一氧化氮合酶。实施方案20是局部皮肤用组合物,其包括海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体。实施方案21是实施方案20的组合物，其中局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以减少玫瑰痤疮、红斑和/或炎症。实施方案22是实施方案20至21中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以减少暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或结缔组织的增生。实施方案23是实施方案20至22中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。实施方案24是实施方案20至23中任一项的组合物，其中糖类同分异构体和/或密罗木提取物是水提取物。实施方案25是实施方案24的局部用组合物，其中水提取物是液体形式的。实施方案26是实施方案24的局部用组合物，其中水提取物是粉末形式的。实施方案27是实施方案20至26中任一项的组合物，其中糖类同分异构体包括属于海洋浮游生物家族的溶藻弧菌的胞外多糖。实施方案28实施方案20至27中任一项的组合物，其中密罗木提取物是密罗木的叶和茎的提取物。实施方案29是实施方案20至28中任一项的组合物，其中海枣提取物是来自海枣籽的水溶性提取物。实施方案30是实施方案20至29中任一项的组合物，其中茶树精油是来自茶树互生叶白千层的叶的精油。实施方案31是实施方案20至30中任一项的组合物，其中局部用组合物还包含水。实施方案32是实施方案20至31中任一项的组合物，其中局部用组合物是乳液、精华素、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华素。实施方案33是实施方案20至32中任一项的组合物，其中局部用组合物是水包油乳液或油包水乳液。实施方案34是实施方案20至33中任一项的组合物，其中将局部用组合物配制为施用于面部皮肤。实施方案35是实施方案20至34中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的海枣提取物以增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达和/或抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)活性。实施方案36是实施方案20至35中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的茶树精油以杀死毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨。实施方案37是实施方案20至36中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的糖类同分异构体以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。实施方案38是实施方案20至37中任一项的组合物，其中局部用组合物包含有效量的密罗木提取物以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生和/或抑制一氧化氮合酶。

“局部施用”是指将组合物施用或涂敷到嘴唇或角质组织的表面上。“局部皮肤用组合物”包括适合在皮肤和/或角质组织局部施用的组合物。这类组合物一般为皮肤病学上可接受的，这是因为当施用到皮肤和/或角质组织时，其不具有异常毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等。本发明的局部护肤组合物可以具有选定的黏度以避免施用到皮肤和/或角质组织后明显的滴落或淤积。

“玫瑰痤疮”包括但不限于红斑血管扩张型玫瑰痤疮、丘疹脓疱型玫瑰痤疮、鼻赘型玫瑰痤疮和眼型玫瑰痤疮。可以通过本发明进行处理的玫瑰痤疮症状包括但不限于以下症状中的任意一种、组合或全部：发红、暂时性或持续性皮肤潮红、外观血管可见(特别是在面部的鼻子或脸颊区域)、肿胀、肿胀的红色肿块和可以含有脓的丘疹、暂时性或持续性红斑、炎症、皮肤增厚、皮肤纹理不平整、皮肤干燥、皮肤刺激、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、和/或缔结组织的增生。

“角质组织”包含作为哺乳动物最外层保护性覆盖物的含有角质的层，包括但不限于嘴唇、皮肤、毛发和指甲。

术语“大约”或“近似”被定义为本领域普通技术人员所理解的接近于。在非限制性实施方案中，该术语定义为10％以内，优选5％以内，更优选1％以内，最优选0.5％以内。

术语“基本上”及其变体是指10％以内、5％以内、1％以内或0.5％以内的范围。

术语“抑制”或“减少”或这些术语的任何变体包括为了达到预期结果的任何可测量的减少或完全的抑制。术语“促进”或“增加”或这些术语的任何变体包括为了达到预期结果的蛋白质或分子(例如，基质蛋白如纤连蛋白、层粘连蛋白、胶原蛋白或弹性蛋白，或者分子如透明质酸)的任何可测量的增加或产生。

作为本说明书和/或权利要求所使用的术语，术语“有效的”表示适于实现希望的、期望的或预期的结果。

当在权利要求和/或说明书中与术语“包含”、“包括”、“具有”或“含有”或这些术语的任何变体的一起使用时，要素前面使用数量词可以表示“一个”，但是其也符合“一个或更多个”、“至少一个”和“一个或多于一个”的意思。

如本说明书和权利要求所使用的，单词“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包括性的或开放式的，并且不排除附加的、未列举的要素或方法步骤。

使用的组合物和方法可以“包含”本说明书通篇所公开的任意成分或步骤、“基本上其组成”或“由其组成”。关于短语“基本上由……组成”，本发明组合物和方法的基本和新的性质是组合物含有海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体。组合物和方法的另一种新的性质是使用组合物以完全或部分处理、减少和/或预防玫瑰痤疮、皮肤红斑和/或炎症、或其症状或起因。

本发明的其它目的、特征和优点通过下面的详细描述会变得明显。然而，应理解详细的描述和实施方案在表明本发明的具体实施方案时仅以举例说明给出。另外，预期通过该详细描述，本发明的精神和范围内的变化和修改对于本领域技术人员是显而易见的。

具体实施方式

如上所述，本发明提供了与玫瑰痤疮、皮肤红斑和/或皮肤炎症相关的问题的解决方案。该解决方案基于使用海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体的组合以减少玫瑰痤疮、皮肤红斑和/或皮肤炎症。如在实施例中以非限制性方式说明的，该组合已被证明可以减少玫瑰痤疮、皮肤红斑和炎症、以及抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制MMP1活性、减少闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。

在以下章节中描述本发明的这些和其他非限制性方面。

A.活性成分

本发明的前提是确定一种有效成分的组合-海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体-可以用于减少玫瑰痤疮、皮肤红斑和/或皮肤炎症、以及抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制MMP1的活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。

该成分的组合可被用于不同的产品用以处理多种皮肤状况。通过非限制性实例，成分的组合可以配制成乳液(例如水包油、油包水)、凝胶、精华素、凝胶乳液、凝胶精华素、润肤露、面膜或身体乳。

糖类同分异构体是由属于海洋浮游生物家族的称为溶藻弧菌的微生物合成的胞外多糖。在一些情况下，糖类同分异构体可商购获得。在一些情况下，糖类同分异构体可以商品名Benoiderm由Barnet Products提供。在一些情况下，糖类同分异构体可以使用含水提取溶剂或醇提取溶剂从溶藻弧菌中提取来提供。在其他情况下，提取溶剂可以是含水的。在一些情况下，提取物可以是液体形式的。在一些情况下，提取物可以是粉末形式的。

密罗木提取物是密罗木的提取物，密罗木也称为复苏植物，是原产自南非的开花植物。在一些情况下，密罗木提取物可商购获得。在一些情况下，密罗木提取物可以商品名

由Rahn提供。在一些情况下，提取物可以为水提取物或醇提取物。在一些情况下，提取物可以是水提取物。在一些情况下，提取物是整个植物或植物的一个或多于一个部分的提取物。在一些情况下，提取物是植物的叶或茎的提取物。在一些情况下，提取物可以是液体形式的。在一些情况下，提取物可以是粉末形式的。

茶树精油，也称为白千层精油或茶树油，是来自茶树互生叶白千层的叶的精油。在一些情况下，茶树精油可商购获得。在一些情况下，茶树精油可以商品名MELAFRESH^TM T96由Southern Cross Botanicals提供。

海枣提取物是海枣的提取物，海枣也称为枣椰子，是棕榈科，即Arecaceae的开花植物品种。在一些情况下，海枣可商购获得。在一些情况下，海枣提取物可以商品名

由IBR Ltd.提供。在一些情况下，提取物可以是来自海枣籽的水溶性提取物。在一些情况下，提取物可以是水提取物或醇提取物。在一些情况下，提取物可以是水提取物。在一些情况下，提取物是整个植物或植物的一个或多于一个部分的提取物。在一些情况下，提取物是整个植物的提取物。在一些情况下，提取物是籽和/或果的提取物。

本文描述的提取物可以是通过本领域已知的提取方法及其组合而制备的提取物。提取方法的非限制性实例包括使用液-液萃取、固相萃取、水萃取、乙酸乙酯萃取、醇萃取、丙酮萃取、油萃取、超临界二氧化碳萃取、加热萃取、压力萃取、压降萃取、超声萃取等。提取物可以是液体，固体，干燥液体，再悬浮固体等。在特定情况下，提取物是水提取物。

B.成分的量

预期本发明的组合物可以包含任意量的本说明书所讨论的成分。该组合物还可以包含任意数目的在本说明书全文中所描述的附加成分的组合(例如，颜料或附加的化妆品成分或药物成分)。组合物中成分的浓度可以改变。例如，在非限制性实施方案中，该组合物在其最终形式中可以包含、基本上由以下组分组成或由以下组分组成：例如至少约0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.0010％、0.0011％、0.0012％、0.0013％、0.0014％、0.0015％、0.0016％、0.0017％、0.0018％、0.0019％、0.0020％、0.0021％、0.0022％、0.0023％、0.0024％、0.0025％、0.0026％、0.0027％、0.0028％、0.0029％、0.0030％、0.0031％、0.0032％、0.0033％、0.0034％、0.0035％、0.0036％、0.0037％、0.0038％、0.0039％、0.0040％、0.0041％、0.0042％、0.0043％、0.0044％、0.0045％、0.0046％、0.0047％、0.0048％、0.0049％、0.0050％、0.0051％、0.0052％、0.0053％、0.0054％、0.0055％、0.0056％、0.0057％、0.0058％、0.0059％、0.0060％、0.0061％、0.0062％、0.0063％、0.0064％、0.0065％、0.0066％、0.0067％、0.0068％、0.0069％、0.0070％、0.0071％、0.0072％、0.0073％、0.0074％、0.0075％、0.0076％、0.0077％、0.0078％、0.0079％、0.0080％、0.0081％、0.0082％、0.0083％、0.0084％、0.0085％、0.0086％、0.0087％、0.0088％、0.0089％、0.0090％、0.0091％、0.0092％、0.0093％、0.0094％、0.0095％、0.0096％、0.0097％、0.0098％、0.0099％、0.0100％、0.0200％、0.0250％、0.0275％、0.0300％、0.0325％、0.0350％、0.0375％、0.0400％、0.0425％、0.0450％、0.0475％、0.0500％、0.0525％、0.0550％、0.0575％、0.0600％、0.0625％、0.0650％、0.0675％、0.0700％、0.0725％、0.0750％、0.0775％、0.0800％、0.0825％、0.0850％、0.0875％、0.0900％、0.0925％、0.0950％、0.0975％、0.1000％、0.1250％、0.1500％、0.1750％、0.2000％、0.2250％、0.2500％、0.2750％、0.3000％、0.3250％、0.3500％、0.3750％、0.4000％、0.4250％、0.4500％、0.4750％、0.5000％、0.5250％、0.0550％、0.5750％、0.6000％、0.6250％、0.6500％、0.6750％、0.7000％、0.7250％、0.7500％、0.7750％、0.8000％、0.8250％、0.8500％、0.8750％、0.9000％、0.9250％、0.9500％、0.9750％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％或其中可衍生的任何范围的在本说明书的全文和权利要求中提及的至少一种成分。在非限制性方面，百分比可以按整个组合物的重量或体积进行计算。本领域普通技术人员会理解，给定组合物中的浓度可以根据成分的添加、替换和/或减少而改变。

C.载体

本发明的组合物可以包含或被并入到所有类型的载体和载剂中。载体或载剂可以是药学上或皮肤病学上可接受的载体和载剂。载体和载剂的非限制性实例包括水、甘油、醇、油、含硅化合物、硅酮化合物和蜡。变体和其它合适的载体对于熟练技术人员是显而易见的，并且适用于本发明。在某些方面，可以选择化合物、成分和试剂的浓度和组合，使得组合物是化学相容的并且不会形成从成品中沉淀出来的复合物。

D.结构

本发明的组合物可以被构造或配制成各种不同的形式。非限制性实例包括乳液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅酮、硅酮包水、油包水包油、硅酮包水包油的乳液)、霜、润肤露、溶液(水溶液或者水醇溶液)、无水基质(例如口红和散粉)、凝胶、面膜、去角质膏和软膏。变体和其它结构对于熟练技术人员是显而易见的，并且适用于本发明。

E.附加成分

除了发明人所公开成分的组合之外，组合物还可以包含附加成分，例如化妆品成分和药物活性成分。这些附加成分的非限制性实例在以下子章节中进行描述。

1.化妆品成分

CTFA国际化妆品成分词典和手册(2004和2008)描述了多种可以在本发明的上下文中使用的非限制性化妆品成分。这些成分种类的实例包括：芳香剂(人造的和天然的；例如葡糖酸、苯氧乙醇和三乙醇胺)、染料和着色成分(例如蓝色1号、湖蓝1号、红色40号、二氧化钛、D&C蓝色4号、D&C绿色5号、D&C橙色4号、D&C红色17号、D&C红色33号、D&C紫罗兰2号、D&C黄色10号和D&C黄色11号)、调味剂/香味剂(例如，甜叶菊(Stevia rebaudiana)提取物和薄荷醇)、吸附剂、润滑剂、溶剂、保湿剂(包括例如润肤剂、湿润剂、成膜剂、闭塞剂和影响皮肤天然保湿机制的试剂)、防水剂、紫外吸收剂(物理和化学吸收剂，例如对氨基苯甲酸(“PABA”)和相应的PABA衍生物、二氧化钛、氧化锌等)、精油、维生素(例如A、B、C、D、E和K)、微量金属(例如锌、钙和硒)、抗刺激物(例如类固醇和非固醇类抗炎药)、植物提取物(例如芦荟(Aloe vera)、甘菊、黄瓜提取物、银杏(Ginkgo biloba)、人参和迷迭香)、抗微生物剂、抗氧化剂(例如BHT和生育酚)、螯合剂(例如EDTA二钠和EDTA四钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、pH调节剂(例如氢氧化钠和柠檬酸)、吸附剂(例如淀粉辛烯琥珀酸铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精、滑石和沸石)、皮肤漂白和提亮剂(例如氢醌和烟酰胺乳酸盐/酯)、润湿剂(例如山梨醇、脲、甲基葡糖醇聚醚-20、异构糖和甘露醇)、角质剥脱剂、阻水剂(例如氢氧化钠镁/铝硬脂酸盐)、皮肤调节剂(例如芦荟提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸、生物糖胶-1、乙基己基甘油、戊二醇、氢化聚癸烯、辛基十二烷基油酸酯和甘草酸二钾)。这些成分中的一些的非限制性实例在以下子章节中提供。

a.紫外吸收和/或反射剂

可以与本发明的组合物组合使用的紫外吸收和/或反射剂包括化学和物理防晒物质。可以使用的化学防晒物质的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、对二甲基氨基苯甲酸戊酯和对二甲基氨基苯甲酸辛酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、二羟基丙醇PABA乙酯、二苯甲酮类(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1至二苯甲酮-12)、肉桂酸盐/酯(甲氧基肉桂酸辛酯(Octinoxate))、对-甲氧基肉桂酸异戊酯、甲氧基肉桂酸辛酯、西诺沙酯、二异丙基肉桂酸甲酯、甲氧基肉桂酸DEA盐、二异丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水杨酸酯(胡莫柳酯、水杨酸苄酯、水杨酸乙二醇酯、水杨酸异丙基苄醇酯等)、邻氨基苯甲酸盐/酯、尿刊酸乙酯、原膜散酯、水杨酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、含二羟基丙酮的指甲花醌、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸酯聚硅氧烷、对苯二亚甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠、二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并恶唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基苯酚和双乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亚甲基莰酮和4-甲氧基肉桂酸异戊酯。物理防晒物质的非限制性实例包括高岭土、滑石、矿脂和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。

b.保湿剂

可以与本发明的组合物一起使用的保湿剂的非限制性实例包括氨基酸、硫酸软骨素、双甘油、赤藓糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、乙二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、氢化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露醇、天然保湿因子、PEG-15丁二醇、聚甘油山梨醇、糖类同分异构体、吡咯烷酮羧酸的盐、PCA钾、丙二醇、异构糖、葡糖醛酸钠、PCA钠、山梨醇、蔗糖、海藻糖、脲和木糖醇。

其它实例包括乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、丙氨酸、藻类提取物、库拉索芦荟(Aloe barbadensis)、库拉索芦荟提取物、库拉索芦荟凝胶、药蜀葵提取物(Altheaofficinalis)、杏(Prunus armeniaca)仁油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸盐/酯、山金车(Arnica montana)提取物、天冬氨酸、鳄梨(酪梨，Persea gratissima)油、屏障鞘脂(barrier sphingolipid)、丁醇、蜂蜡、山萮醇、β-谷甾醇、白桦(垂枝桦，Betula alba)树皮提取物、琉璃苣(Borago officinalis)提取物、假叶树(Ruscus aculeatus)提取物、丁二醇、金盏花(Calendula officinalis)提取物、金盏花油、小烛树(Euphorbia cerifera)蜡、菜籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、小豆蔻(Elettaria cardamomum)油、巴西棕榈(Coperniciaerifera)蜡、胡萝卜(Daucus carota sativa)油、蓖麻(Ricinus communis)油、神经酰胺、地蜡、鲸蜡硬脂醇聚醚-5、鲸蜡硬脂醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇辛酸酯、鲸蜡醇聚醚-20、鲸蜡醇聚醚-24、鲸蜡醇乙酸酯、鲸蜡醇辛酸酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、洋甘菊(白花春黄菊，Anthemis nobilis)油、胆固醇、胆固醇酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、柠檬酸、鼠尾草(欧丹参，Salvia sclarea)油、可可(Theobroma cacao)脂、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、椰子(Cocos nucifera)油、胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、玉米(Zea mays)油、脂肪酸、油酸癸酯、聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛酯、琥珀酸二辛酯、二聚季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯、DNA、赤藓糖醇、乙氧基二甘醇、亚油酸乙酯、蓝桉(Eucalyptusglobulus)油、夜来香(月见草，Oenothera biennis)油、脂肪酸、斑点老鹳草(Geraniummaculatum)油、葡萄糖胺、葡糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚醚-26、甘油、丙三醇、二硬脂酸甘油酯、羟基硬脂酸甘油酯、月桂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯SE、甘氨酸、乙二醇硬酯酸酯、乙二醇硬酯酸酯SE、葡糖氨基葡聚糖、葡萄(Vitis vinifera)籽油、榛子(美洲榛，Corylus americana)坚果油、榛子(欧洲榛，Corylus avellana)坚果油、己二醇、透明质酸、红花(Carthamus tinctorius)油、氢化蓖麻油、氢化椰油甘油酯、氢化椰子油、氢化羊毛脂、氢化卵磷脂、氢化棕榈油甘油酯、氢化棕榈仁油、氢化大豆油、氢化牛脂酸甘油酯、氢化植物油、水解胶原蛋白、水解弹性蛋白、水解葡糖氨基葡聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羟基化羊毛脂、羟基脯氨酸、异鲸蜡醇硬脂酸酯、异鲸蜡醇硬脂酰氧基硬脂酸酯、油酸异癸酯、异硬脂酸异丙酯、羊毛脂酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、异硬脂酰胺DEA、异硬脂酸、异硬脂醇乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、茉莉(素方花，Jasminum officinale)油、霍霍巴(Buxus chinensis)油、巨藻、石栗(Aleurites moluccana)坚果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚醚-16、羊毛脂醇聚醚-10乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蜡、薰衣草(Lavandulaangustifolia)油、卵磷脂、柠檬(Citrus medica limonum)油、亚油酸、亚麻酸、澳洲坚果(Macadamia ternifolia)油、麦芽糖醇、母菊(Chamomilla recutita)油、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基硅烷醇PCA酯、矿物油、貂油、黄褐色被孢霉油、肉豆蔻醇乳酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、肉豆蔻醇丙酸酯、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛基十二醇、肉豆蔻酸辛基十二醇酯、硬脂酰氧基硬脂酸辛基十二醇酯、羟基硬脂酸辛酯、棕榈酸辛酯、水杨酸辛酯、硬脂酸辛酯、油酸、橄榄(Olea europaea)油、橙(Citrus aurantium dulcis)油、棕榈(Elaeisguineensis)油、棕榈酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蜡、PCA、桃(Prunus persica)仁油、花生(Arachis hypogaea)油、PEG-8C12-18酸酯、PEG-15椰油胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60甘油异硬脂酸酯、PEG-5甘油硬脂酸酯、PEG-30甘油硬脂酸酯、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-40失水山梨醇全油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五内酯、胡椒薄荷(辣薄荷，Mentha piperita)油、矿脂、磷脂、浮游生物提取物、多氨基酸多糖缩合物、聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚季铵盐-24、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85、肉豆蔻酸钾、棕榈酸钾、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆素二棕榈酸酯、视黄醇、视黄醇棕榈酸酯、米(稻，Oryza sativa)糠油、RNA、迷迭香(Rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、红花(Carthamus tinctorius)油、鼠尾草(Salvia officinalis)油、檀香(Santalum album)油、丝氨酸、血清蛋白、芝麻(Sesamum indicum)油、牛油果树(Butyrospermum parkii)脂、蚕丝粉、软骨素硫酸钠、透明质酸钠、乳酸钠、棕榈酸钠、PCA钠、聚谷氨酸钠、可溶性胶原、山梨坦月桂酸酯、山梨坦油酸酯、山梨坦棕榈酸酯、山梨坦倍半油酸酯、失水山梨醇硬脂酸酯、山梨醇、大豆(Glycinesoja)油、鞘脂、角鲨烷、角鲨烯、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯、硬脂酸、硬脂氧基聚二甲硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷、硬脂醇、硬脂醇甘草亭酸酯、硬脂醇庚酸酯、硬脂醇硬脂酸酯、向日葵(Helianthus annuus)籽油、甜扁桃(Prunus amygdalus dulcis)油、合成蜂蜡、生育酚、生育酚乙酸酯、生育酚亚油酸酯、三山嵛精、十三烷醇新戊酸酯、十三烷醇硬脂酸酯、三乙醇胺、三硬脂精、脲、植物油、水、蜡、小麦(Triticum vulgare)胚芽油和依兰(Canangaodorata)油。

c.抗氧化剂

可以与本发明的组合物一起使用的抗氧化剂的非限制性实例包括乙酰半胱氨酸、抗坏血酸多肽、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸甲基硅烷醇果胶酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、BHA、BHT、叔丁基氢醌、半胱氨酸、半胱氨酸HCI、二戊基氢醌、二叔丁基氢醌、二鲸蜡醇硫代二丙酸酯、二油基生育酚甲基硅烷醇、抗坏血酸硫酸酯二钠、二硬脂醇硫代二丙酸酯、双十三烷醇硫代二丙酸酯、十二醇棓酸酯、异抗坏血酸、抗坏血酸酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、没食子酸酯、氢醌、巯基乙酸异辛酯、曲酸、抗坏血酸镁、抗坏血酸磷酸酯镁、甲基硅烷醇抗坏血酸酯、天然植物抗氧化剂例如绿茶或葡萄籽提取物、去甲二氢愈创木酸、没食子酸辛酯、苯巯基乙酸、磷酸抗坏血酸酯生育酚酯钾、亚硫酸钾、没食子酸丙酯、醌、迷迭香酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、异抗坏血酸钠、焦亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、超氧化物歧化酶、巯基乙酸钠、山梨醇缩糠醛、硫二甘醇、亚硫基二乙酰胺、硫二乙酸、巯基乙酸、硫代乳酸、硫代水杨酸、生育酚聚醚-5、生育酚聚醚-10、生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18、生育酚聚醚-50、生育酚、托可索伦、生育酚乙酸酯、亚油酸生育酚酯、烟酸生育酚酯、琥珀酸生育酚酯和亚磷酸三(壬基苯酚)酯。

d.结构化剂

在其它非限制性方面，本发明的组合物可以包含结构化剂。在某些方面，结构化剂帮助向组合物提供流变特征以促进组合物的稳定性。在其它方面，结构化剂还可以起乳化剂或表面活性剂的作用。结构化剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸、硬脂醇、鲸蜡醇、山嵛醇、硬脂酸、棕榈酸、具有平均约1个到约21个亚乙基氧单元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均约1个到约5个亚乙基氧单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚，及其混合物。

e.乳化剂

在本发明的某些方面，组合物不包含乳化剂。然而，在其它方面，组合物可以包含一种或多于一种乳化剂。乳化剂可以降低相间界面张力并改善乳液的配制和稳定性。乳化剂可以是非离子的、阳离子的、阴离子的和两性离子的乳化剂(参见McCutcheon's(1986)；美国专利5011681号；4421769号；3755560号)。非限制性实例包括甘油酯、丙二醇酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨醇的酯、失水山梨醇酐酯、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚、乙氧基化的酯、乙氧基化的醇、磷酸烷基酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯、脂肪酸酰胺、酰基乳酸酯、脂肪酸盐、TEA硬脂酸酯、油醇聚醚-3磷酸酯DEA盐、聚乙二醇20失水山梨醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯20)、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-21、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、C12-13烷醇聚醚-3、PPG-2甲基葡萄糖醚二硬脂酸酯、PPG 5鲸蜡硬脂醇聚醚-20、双-PEG/PPG-20/20二甲硅酮、鲸蜡醇聚醚-10、聚山梨醇酯80、鲸蜡醇磷酸酯、鲸蜡醇磷酸酯钾、二乙醇胺鲸蜡醇磷酸酯、聚山梨醇酯60、甘油硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、花生醇、花生醇葡糖苷及其混合物。

f.含硅酮的化合物

在非限制性方面，含硅酮的化合物包括分子主链由交替的硅和氧原子组成、侧基与硅原子相连的聚合物产品家族中的任意成员。通过改变-Si-O-链的长度、侧基和交联，硅酮可以合成为各种各样的材料。它们的稠度可以从液体到凝胶到固体改变。

可以在本发明的环境下使用的含硅酮的化合物包含本说明书中所描述的或本领域普通技术人员已知的那些。非限制性实例包括硅油(例如挥发性和非挥发性油)、凝胶和固体。在一些方面，含硅化合物包括硅油，例如聚有机硅氧烷。聚有机硅氧烷的非限制性实例包括聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚硅酮-11、苯基聚三甲基硅氧烷、三甲基甲硅烷基氨基聚二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷或它们的混合物和其它任何给定比例的有机硅氧烷材料，以根据预期的应用(例如，应用到特定区域例如皮肤、毛发或眼睛)达到期望的稠度和应用特征。“挥发性硅油”包括具有低汽化热的硅油，即通常低于约50卡每克硅油。挥发性硅油的非限制性实例包含：环聚二甲基硅氧烷，例如Dow Corning 344Fluid、DowCorning 345Fluid、Dow Corning 244Fluid和Dow Corning 245Fluid、Volatile Silicon7207(康涅狄格州丹伯里的Union Carbide Corp.)；低黏度聚二甲基硅氧烷，即黏度为约50cst或低于约50cst的聚二甲基硅氧烷(例如聚二甲基硅氧烷，例如Dow Corning 200-0.5cst Fluid)。Dow Corning Fluid可以从密歇根州米德兰的Dow Corning Corporation购得。在CTFA化妆品成分词典第三版中(通过引用并入)，环聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷分别被描述为环状二甲基聚硅氧烷化合物和用三甲基硅氧基单元封端的完全甲基化的线性硅氧烷聚合物的混合物。可以在本发明的环境下使用的其它非限制性挥发性硅油包含从纽约州沃特福德的General Electric Co.，Silicone Products Div.和密歇根州艾德里安的Stauffer Chemical Co.的SWS Silicones Div.购得的那些。

g.角质剥脱剂

角质剥脱剂包含去除皮肤外表面上的死皮肤细胞的成分。这些试剂可以通过机械、化学和/或其他方式起作用。机械角质剥脱剂的非限制性实例包括磨料，例如浮石、二氧化硅、织物、纸、贝壳、珠、固体晶体、固体聚合物等。化学角质剥脱剂的非限制性实例包括酸和酶角质剥脱剂。可用作角质剥脱剂的酸包括但不限于乙醇酸、乳酸、柠檬酸、α羟基酸、β羟基酸等。本领域技术人员已知的其他角质剥脱剂也也预期可用于在本发明的上下文中。

h.精油

精油包括来自药草、花、树和其它植物的油。这类油一般以植物细胞间微小的液滴存在，并可以用本领域技术人员已知的若干方法(例如，蒸气蒸馏、脂吸法(即通过使用脂肪萃取)、浸渍、溶剂萃取或机械压榨)进行提取。当这些类型的油暴露于空气时，其趋于挥发(即是挥发性油)。因此，虽然许多精油是无色的，但是随着时间其被氧化并且颜色变得更深。精油不溶于水，但溶于醇、醚、非挥发油(植物油)和其他有机溶剂。精油的一般物理特征包括沸点为约160℃到240℃和密度为约0.759到约1.096。

精油一般通过发现精油的植物来命名。例如，玫瑰油或薄荷油分别来自玫瑰或薄荷植物。可以在本发明的上下文中使用的精油的非限制性实例包括芝麻油、澳洲坚果油、茶树油、月见草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、多香果油、玫瑰油、茴香油、香脂花油、香柠檬油、玫瑰木油、香柏油、甘菊油、鼠尾草油、香紫苏油、丁香油、柏木油、桉油、茴香油、海茴香油、乳香油、香叶油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、柠檬草油、梨莓油、橘子油、甘牛至油、没药油、苦橙花油、橙油、广藿香油、胡椒油、黑胡椒油、苦橙叶油、松油、奥图玫瑰油、迷迭香油、檀香油、绿薄荷油、甘松油、香根草油、冬青油、依兰油。还预期本领域技术人员已知的其它精油在本发明的环境下有用。

i.增稠剂

包括稠化剂或凝胶剂在内的增稠剂，包括可以增加组合物黏度的物质。增稠剂包括可以增加组合物粘度而基本上不改变组合物内活性成分功效的试剂。增稠剂还可以增加本发明的组合物的稳定性。在本发明的一些方面，增稠剂包括氢化聚异丁烯、三羟基硬脂精、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物或它们的混合物。

可以在本发明的环境下使用的另外的增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和胶。羧酸聚合物的实例包括含有衍生自丙烯酸、经取代的丙烯酸、以及这些丙烯酸和经取代的丙烯酸的盐和酯的一种或多于一种单体的交联化合物，其中交联剂含有两个或多于两个碳-碳双键，并衍生自多元醇(参见美国专利第5087445号；第4509949号；第2798053号；CTFA国际化妆品成分词典，第四版，1991，第12和80页)。市售羧酸聚合物的实例包括卡波姆，其为丙烯酸与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的均聚物(例如，购自B.F.Goodrich的CARBOPOL^TM900系列)。

交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子型和非离子型聚合物。实例描述于美国专利第5100660号、第4849484号、第4835206号、第4628078号、第4599379号)。

聚丙烯酰胺聚合物(包括非离子的聚丙烯酰胺聚合物，其包含经取代的支化或未支化的聚合物)的非限制性实例包括聚丙烯酰胺、异构烷烃和月桂醇聚氧醚-7、丙烯酰胺和经取代的丙烯酰胺与丙烯酸和经取代的丙烯酸的多嵌段共聚物。

多糖的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、乙酸丙酸羧酸纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶纤维素、纤维素硫酸钠及其混合物。其他实例为烷基取代的纤维素，其中纤维素聚合物的羟基被羟烷基化(优选地羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素，其随后用C₁₀-C₃₀直链或支链烷基基团通过醚键进行进行进一步改性。一般这些聚合物为C₁₀-C₃₀直链或带支链的醇与羟烷基纤维素的醚。其它可用的多糖包括硬葡聚糖类，其包含(1-3)连接的葡萄糖单元的直链，且每三个单元具有一个(1-6)连接的葡萄糖。

本发明可以使用的胶的非限制性实例包括阿拉伯树胶、琼脂、藻胶、藻酸、藻酸铵、支链淀粉、藻酸钙、角叉菜胶钙、肉毒碱、角叉菜胶、糊精、明胶、结冷胶、瓜尔豆胶、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、锂蒙脱石、透明质酸、水合硅石、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、卡拉亚胶、巨藻、刺槐角豆胶、纳豆胶、藻酸钾、角叉菜胶钾、藻酸丙二醇酯、小核菌胶、羧甲基葡聚糖钠、角叉菜胶钠、黄蓍胶、黄原胶及其混合物。

j.防腐剂

可以在本发明的环境下使用的防腐剂的非限制性实例包含季铵盐防腐剂(例如聚季铵盐-1和苄烷铵卤化物(例如苯扎氯铵(“BAC”)和苯扎溴铵))、对羟基苯甲酸酯(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、苯氧基乙醇、苄醇、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒或其组合。

2.药物成分

还预期在本发明的组合物中可使用药物活性剂。药物活性剂的非限制性实例包括抗粉刺剂、用于处理玫瑰痤疮的试剂、止痛剂、麻醉剂、肛门直肠药、抗组胺药、包括非甾族消炎药在内的消炎剂、抗生素、抗真菌剂、抗病毒素、抗微生物剂、抗癌活性剂、抗疥螨剂、灭虱剂、抗肿瘤药、止汗剂、止痒剂、抗牛皮癣药、抗脂溢剂、生物活性蛋白质和多肽、烧伤处理剂、烧灼剂、脱色剂、脱毛剂、尿布疹处理剂、酶、毛发生长刺激剂、包括DFMO及其盐和类似物在内的毛发生长抑制剂、止血剂、角质分离剂、口疮处理剂、唇疱疹处理剂、牙科和牙周处理剂、光敏感活性物、皮肤保护剂/屏障剂、包括激素和皮质类固醇的类固醇、晒伤处理剂、防晒剂、经皮活性剂、鼻活性剂、阴道活性剂、疣处理剂、创伤处理剂、创伤愈合剂等。

F.试剂盒

还预期试剂盒用于本发明的特定方面。例如，本发明的组合物可以包含在试剂盒内。试剂盒可以包括容器。容器可以包括瓶子、金属管、层压管、塑料管、分配器、高压容器、阻透性容器、袋、分室、口红容器、粉饼容器、能够保存化妆品组合物的化妆品盘或其它类型的容器如注射或吹塑成型的塑料容器，其中保存分散体或组合物或所需的瓶子、分配器或包装盒/袋。试剂盒和/或容器在其表面上可包含标记。例如，标记可以是字词、短语、缩写、图片或符号。

所述容器可以分配预定量的组合物。在其他实施方案中，可以挤压容器(例如金属、层压或塑料管)以分配期望量的组合物。组合物可以作为喷雾、气雾剂、液体、流体或半固体的形式来分配。容器可以具有喷雾机构、泵机构或挤压机构。试剂盒还可以包含使用试剂盒组件以及使用任何包含于容器内的组合物的说明书。说明书可以包括如何施用、使用和保存组合物的说明。

实施例

列出了以下实施例以说明本发明的优选实施方案。本领域技术人员应理解，以下实施例中所公开的技术代表本发明人发现的在本发明的实践中发挥良好作用的技术，并因此可以被认为为其实践建立的优选的模式。然而，根据本公开，本领域技术人员应理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，在所公开的具体实施方案中可以做许多改变，并仍获得类似或相似的结果。

本文所公开和要求保护的所有组合物和方法根据本公开可以不需要过多实验即而做出和实现。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，在不脱离本发明的构思、精神和范围的情况下，可以对所述组合物和方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中进行改变。更具体地，明显地，化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和概念内。

实施例1

(使用的材料)

使用表1中的活性成分获得下面提到的体外数据。

表1

实施例2

(体外研究)

已确定海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体的组合可以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制COX-2的产生、抑制VEGF的产生、抑制IL-6的产生、抑制IL-8的产生、减少TNF-α的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制MMP1的活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。结果的总结如表2所示，并在下文中提供用于确定成分性能的方法。

表2

α2A肾上腺素能受体激动剂测定：海枣提取物显示增加了α2A肾上腺素能受体激动剂活性。肾上腺素能受体是代谢型(即影响代谢)G蛋白偶联受体(GPCR)。许多种类的细胞具有这种受体，并且激动剂(激活剂)的结合通常会引起交感反应，这取决于受到影响的受体(例如心率修正、血管收缩/扩张、脂肪代谢变化等)。对平滑肌细胞的α2A肾上腺素能受体的激动作用可以导致血管收缩的效果-即，这些细胞和受体所在的血管将收缩，并限制血液和淋巴在该区域的汇集，这可能导致在该区域皮肤的改善和均匀外观以及减少黑眼圈和玫瑰痤疮症状。

细胞介电谱(CDS)是测量由细胞培养中靶细胞受体激活引起的阻抗变化的技术。CDS用于测定表达人α2A受体的重组的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中α2A肾上腺素能受体的活性。将用实施方案进行的处理所引起的变化与阳性对照参考激活剂(100nM肾上腺素)的效果比较，并以阳性对照参考效果的百分比表示((测量的特定反应/对照特定激动剂反应)x100)。显示海枣提取物增强了α2A肾上腺素能受体激动剂的活性，潜在地影响了毛细血管收缩以及减轻黑眼圈和玫瑰痤疮。具体地，0.5％的海枣提取物增加了24％的阳性对照反应的α2A肾上腺素能受体活性，1.5％的海枣提取物增加了65％的阳性对照反应的α2A肾上腺素能受体活性，4.5％的海枣提取物增加了102％的阳性对照反应的α2A肾上腺素能受体活性。参见表2。

一氧化氮合酶活性测定：糖类同分异构体和密罗木提取物显示减少了一氧化氮合酶活性。一氧化氮(NO)是活性自由基，其在许多关键生理机能中起重要作用。NO涉及宿主防御和发育、调节蛋白的激活和与功能性生物分子的直接共价相互作用。一氧化氮合酶(NOS)是血管中血管舒张的重要介质。NOS是催化由L-精氨酸产生一氧化氮(NO)的酶家族。NOS试验(Abnova,KA1634)包括两个步骤：NOS反应步骤，在此期间产生NO，然后是NO检测步骤。因为由NOS产生的NO会快速氧化为亚硝酸根和硝酸根，使用改进的Griess方法将硝酸根还原为亚硝酸根后，测量NO的产生。采用生物测定法分析糖类同分异构体和密罗木提取物对NOS产生NO的影响。据显示糖类同分异构体和密罗木提取物对NOS活性的减少作用大于1μMSIN-1活性对照。具体地，糖类同分异构体使NOS的活性减少了大约45％，密罗木提取物使NOS的活性减少了大约36％，而阳性对照仅使NOS的活性减少了大约29％(未示出)。参见表2。

肿瘤坏死因子α(TNF-α)测定：海枣提取物、糖类同分异构体和密罗木提取物显示出抑制TNF-α的产生。TNF超家族的原型配体，TNF-α，是在炎症中起主要作用的多效细胞因子。其表达的增加与促炎活性上调有关。该生物测定用于分析海枣提取物、糖类同分异构体和密罗木提取物对人表皮角质形成细胞产生TNF-α的效果。该分析的终点是反映TNF-α的存在和细胞活力的分光光度测量。该测定采用定量的三明治酶免疫分析技术，将TNF-α特异性单克隆抗体预先涂覆在微孔板上。标准品和样品移液到孔中，并且存在的所有TNF-α都被固定化抗体结合。冲走所有未结合的物质后，将TNF-α特异性酶联多克隆抗体添加到到孔中。冲洗以去除任何未结合的抗体-酶试剂之后，向孔中加入底物溶液，并按照最初步骤中TNF-α结合量的比例显色。停止显色，并测量显色强度。用酶标仪在450nm处检测。

在37℃下5％的CO₂中在

标准生长培养基(Cascade Biologics)中培养的亚融合的正常人类成年角质形成细胞(Cascade Biologics)用佛波醇-12-十四酸酯-13-乙酸酯(PMA，10ng/ml，Sigma Chemical，#P1585-1MG)在测试提取物或对照物存在或不存在的情况下处理6小时。PMA导致TNF-α分泌明显的增加，在处理6小时后达到峰值。孵育之后，收集细胞培养基，并使用上述来自R&D Systems(#DTA00C)的三明治酶联免疫吸附分析(ELISA)定量TNF-α的分泌量。结果表明海枣提取物、糖类同分异构体和密罗木提取物减少了TNF-α的产生。具体地，海枣提取物使TNF-α的产生减少了大约84.6％，糖类同分异构体使TNF-α的产生减少了大约88％，密罗木提取物使TNF-α的产生减少了大约80％。参见表2。

闭合蛋白-1的产生：糖类同分异构体显示增加了角质形成细胞中闭合蛋白-1的产生。闭合蛋白-1是对于紧密连结的形成和皮肤水分屏障功能重要的蛋白质。使用生物测定法分析角质形成细胞裂解物中闭合蛋白-1浓度，来测定经处理和未经处理的角质形成细胞中闭合蛋白-1的产生。使用

SIMON^TM蛋白质免疫印迹法进行该生物测定。对于样品，在37℃和5％的CO₂下将来自Life Technologies(C-005-5C)的成年人表皮角质形成细胞(HEKa)，在含有来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙、并补充有来自Life Technologies(S-101-5)的角质细胞生长补充剂(HKGS)的

生长培养基中生长24小时。然后使HEKa在含有测试化合物、不含化合物的阴性对照或具有1mM CaCl₂的阳性对照的生长培养基中孵育24小时至48小时。然后，洗涤NEKa细胞，收集并储存在冰或更冷的环境中，直到使用裂解缓冲液和超声处理在冰上裂解。测定样品的蛋白质浓度并用于使样品归一化。将细胞裂解物存储在-80℃直至用于生物测定。

SIMON^TM蛋白质免疫印迹法生物分析使用定量的蛋白质免疫印迹法分析技术，该技术使用了闭合蛋白特异性抗体来定量检测样品中的闭合蛋白。如上所述，将细胞样品裂解并对蛋白质浓度进行归一化。加载归一化的样品和分子量标准物，并使用毛细管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。然后固定凝胶中的蛋白质并使用闭合蛋白特异性的第一抗体进行免疫检测。然后，用结合第一抗体的酶联检测抗体对固定的蛋白质进行免疫检测。然后，将化学发光底物溶液加入到固定的蛋白质中，以允许与在固定化中结合的闭合蛋白的量成比例的化学发光显影。在特定的时间停止化学发光显影，测量化学发光信号的强度，并与阳性和阴性对照进行比较。结果表明糖类同分异构体使闭合蛋白-1的产生增加了100％。参见表2。

丝聚蛋白的产生：糖类同分异构体显示增加了丝聚蛋白的产生。丝聚蛋白是皮肤中天然保湿因子(NMF)的前体。增加NMF会提高皮肤中的水分含量。使用生物测定法分析角质形成细胞裂解物中的丝聚蛋白浓度，测定在经处理和未经处理的角质形成细胞中的丝聚蛋白的产生。使用

Simon^TM蛋白质免疫印迹法来定量丝聚蛋白的产生。对于每个样品，使正常的人表皮角质形成细胞(NHEK)在来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的含有钙的EPI-200–Mattek

生长培养基中生长。在处理之前，在37℃下5％的CO₂中，使NHEK细胞在生长培养基中孵育过夜。然后将NHEK细胞在含有1％测试化合物/提取物的生长培养基或不含化合物/提取物的生长培养基(阴性对照)中孵育24小时至36小时。然后，洗涤NHEK细胞，收集并储存在冰或更冷的环境中，直到使用裂解缓冲液核超声处理在冰上裂解。测定样品的蛋白质浓度并用于使样品归一化。裂解物可在-80℃下存储直至在定量分析中使用。

Simon^TM蛋白质免疫印迹法生物分析使用定量的免疫印迹免疫分析技术，该技术使用了丝聚合蛋白特异性抗体来定量检测样品中的丝聚合蛋白。将细胞样品裂解并对蛋白质浓度进行归一化。加载归一化的样品和分子量标准物，并使用毛细管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。将凝胶中的蛋白质固定化并使用丝聚蛋白特异性的第一抗体进行免疫学检测。然后，用结合第一抗体的酶联检测抗体对固定的蛋白质进行免疫检测。然后，将化学发光底物溶液加入到固定的蛋白质中，以允许与在固定化中结合的丝聚蛋白的量成比例的化学发光显影。在特定的时间停止化学发光显影，测量化学发光信号的强度，并与阳性和阴性对照进行比较。结果显示糖类同分异构体使丝聚蛋白的产生增加了27％。参见表2。

水分/水合测定：使用皮肤水分/水合测定，糖类同分异构体显示增加了皮肤水分的测量值。该测定使用Nova Dermal Phase Meter进行阻抗测量。用阻抗计测量了组织工程的三维的培养的人工皮肤等同物(MatTek Corporation)的水分含量变化。皮肤外层具有不同的电性质。当皮肤干燥时，其导电性很差。当其变得较为滋润时，导电性增加。因此，阻抗(与导电性有关)的变化用于评价人工皮肤等同物的水合的变化。

对于该测定，使用了经处理的和未处理的人造皮肤等同物。根据仪器说明在每个测试日校准Nova Dermal Phase Meter。出于比较的目的，对温度和相对湿度进行标记。如下进行阻抗评估：测量前，将样品在具有确定湿度(例如30％至50％)和确定温度(例如68℃至72℃)的室内进行平衡。对每个样品取阻抗读数，记录并取平均值。阻抗计使用T5设定，其在施用到样品后每五秒对阻抗值进行平均。报告的变化具有统计学差异和显著性。经测定，糖类同分异构体使电导增加了80％，表明水分/水合作用提高。参见表2。

抗氧化(AO)测定：海枣提取物被证明可以减少至少一种指示总抗氧化能力的生物标记的氧化。活生物体的抗氧化系统包括酶，例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶；大分子，例如白蛋白、血浆铜蓝蛋白和铁蛋白；和一系列小分子，包括抗坏血酸、α-生育酚、β-胡萝卜素、还原型谷胱甘肽、尿酸和胆红素。内源的和源自食物的抗氧化剂的总量表示细胞外液的总抗氧化能力。所有不同抗氧化剂的协作提供比任何单独的单个化合物更强的对抗活性氧或氮自由基侵袭的保护。因此，与测量单独组分获得的抗氧化能力相比，总的抗氧化能力可以给出更相关的生物信息，因为其考虑了血浆和体液中存在的所有抗氧化剂的累积效应。来自Cayman Chemical(密歇根州安阿伯，USA)的抗氧化能力试剂盒#709001用于测量海枣提取物的总抗氧化能力的体外生物测定。所述测定依赖样品中的抗氧化剂抑制

(2,2'-联氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸盐])被正铁肌红蛋白氧化成

+的能力。测试样品中抗氧化剂预防

氧化的能力与水溶性生育酚类似物Trolox进行比较，并以Trolox的摩尔当量进行定量。方案可以根据制造商的建议进行。据测定海枣提取物的氧化能力与Trolox相比为99.25％。参见表2。

环氧合酶(COX)测定：海枣提取物显示抑制了COX-2的产生。COX(ovine)比色抑制剂筛选测定法(#760111,Cayman Chemical)用于测定环氧合酶-1和环氧合酶-2(COX-1，COX-2)的抑制。COX是具有环氧合酶活性和过氧化物酶活性的双功能酶。环氧合酶活性将花生四烯酸转化为过氧化氢内过氧化物(前列腺素G2；PGG2)，过氧化物酶组分将内过氧化物(前列腺素H2；PGH2)还原为相应的醇、前列腺素的前体、血栓素和前列环素。该COX抑制剂筛选测定法测量了环氧合酶的过氧化物酶组分。过氧化物酶活性通过比色法监测氧化的N,N,N',N'-四甲基-对苯二胺(TMPD)的出现进行测定。该抑制剂筛选测定法包含COX-1和COX-2酶两者，以筛选同工酶特异性抑制剂。根据制造商的说明，纯化的酶、血红素和试验提取物在含量检测缓冲液中混合，并在室温下摇动孵育15分钟。孵育之后，加入花生四烯酸和比色底物开始反应。颜色变化通过比色板在590nm的读数进行评估。计算COX-1或COX-2活性的抑制百分比并与未经处理的对照组比较，以确定海枣提取物抑制纯净酶活性的能力。据测定海枣提取物对COX-2过氧化物酶的活性抑制了85.02％。参见表2。

细胞因子阵列(包括VEGF、IL-6和IL-8)：海枣提取物显示抑制了IL-6、IL-8和VEGF的产生。IL-6和IL-8是涉及炎性反应和抗炎反应的细胞因子。IL-6是作为促炎细胞因子和抗炎细胞因子而起作用的白细胞介素。IL-8是作为与炎症相关的关键介质而起作用的趋化细胞因子和炎性细胞因子。VEGF是刺激血管生成和血管再生的细胞因子，可能促成炎症、发红和玫瑰痤疮。利用蛋白检测含量测定，使用多种细胞因子的生物素化抗体以进行抗体检测，来确定对VEGF、IL-6和IL-8产生的抑制。据测定海枣提取物使VEGF的产生抑制了86.4％，使IL-6的表达抑制了73.4％，使IL-8的产生抑制了97.15％。参见表2。

简言之，人类表皮角质细胞被培养至70％至80％融合。平板中的培养基被吸出，并添加0.025％胰蛋白酶/EDTA。当细胞变圆时，轻拍培养皿以释放细胞。包含胰蛋白酶/EDTA的细胞被从培养皿移出，并被平衡。细胞以180×g离心5分钟。细胞形成团块，上清液被吸出。得到的团块在

培养基(Cascade Biologics)中重悬。在大约10％至20％融合时将细胞接种至6孔板。在细胞变得约80％融合后，将培养基吸出，并将1.0ml

以及佛波醇13-十四酸12-乙酸盐(“PMA”)(一种已知的炎症诱导物)和海枣提取物稀释物加入到两个复孔中。将测试组合物稀释至最终体积为1ml(

生长培养基)。培养基被轻柔地打旋以保证充分的混合。另外，添加1.0ml

至含有或不含有另外的PMA的对照孔。配制后，然后平板在37±1℃和5.0±1％CO₂下孵育大约5小时。5小时的孵育后，将全部培养基收集到锥形管中，并在-70℃冷冻，冷冻的培养基随后装载到干冰上。

在分析的当天，将16-pad杂交腔室连接到16-pad FAST载玻片上，该载玻片一式三份，具有16种抗细胞因子抗体(包括VEGF、IL-6和IL-8)和实验对照(WhatmanBioSciences)，并将载玻片置于FAST^TMFrame(每框架4个载玻片)中进行处理。在室温下用70ml S&S蛋白分析封闭缓冲液(Whatman Schleicher and Scheull)将阵列封闭15分钟。去除封闭缓冲液并添加70ml每种上清样品至每个阵列。将阵列在室温下伴随轻柔的搅动孵育3小时。用TBS-T洗涤阵列3次。用70ml抗体混合物处理阵列，所述混合物包含对应于每个阵列的捕获抗体的生物素化抗体。将阵列在室温下伴随轻柔的搅动孵育1小时。使用三羟甲基氨基甲烷缓冲液(TBS-T)将阵列清洗3次。用70ml包含链霉亲和素-Cy5缀合物的溶液在室温下伴随轻柔的搅动孵育阵列1小时。用TBS-T洗涤阵列3次，快速在去离子水中冲洗，并干燥。

载玻片在Perkin-Elmer

4000共聚焦荧光成像系统中成像。保存阵列图像，并用Imaging Research ArrayVision软件分析。简言之，通过减去背景信号来确定点强度。对来自每个样品条件的重复斑点进行平均，然后和适当的对照比对。

胶原蛋白刺激测定：海枣提取物显示增加了胶原蛋白刺激。胶原蛋白是对皮肤结构关键的细胞外基质蛋白。增加的胶原蛋白合成帮助改善皮肤紧致度和弹性。该生物测定方法用于检验海枣提取物对人表皮成纤维细胞产生前胶原肽(一种胶原蛋白前体)的效果。该测定的终点是反映前胶原肽的存在和细胞活力的分光光度测量。该测定采用定量的三明治酶联免疫分析技术，将前胶原肽特异性单克隆抗体预先涂覆在微孔板上。将标准品和样品移液到孔中，存在的任何前胶原肽被固定化抗体结合。洗去所有未结合的物质后，向孔中添加前胶原肽特异性酶联多克隆抗体。冲洗以去除所有未结合的抗体-酶试剂之后，将底物溶液添加到孔中，以使颜色显现与最初步骤中结合的前胶原肽的量成比例。终止颜色显现，使用酶标仪测量在450nm处颜色的强度。

为了产生样品和对照，在含10％胎牛血清(Mediatech)的标准DMEM生长培养基中，于37℃、10％CO₂的条件下培养亚融合的正常成人表皮成纤维细胞(Cascade Biologics)。用海枣提取物和对照物处理细胞3天。孵育之后，收集细胞培养基，并如上所述，使用来自Takara(#MK101)的三明治酶联免疫吸附分析(ELISA)定量前胶原肽的分泌量。据测定海枣提取物使胶原蛋白刺激增加了25.3％。参见表2。

赖氨酰氧化酶含量测定：海枣提取物显示增加了赖氨酰氧化酶的表达。赖氨酰氧化酶测定在皮肤细胞(例如表皮角质形成细胞，成纤维细胞和/或真皮内皮细胞)上实施，以确定海枣提取物对刺激皮肤中赖氨酰氧化酶的表达的能力。赖氨酰氧化酶可以催化弹性蛋白和胶原蛋白的交联，从而为皮肤提供在结构上更坚固的基质。通过增加赖氨酰氧化酶的表达，会发生弹性蛋白和胶原蛋白的交联的增加，这可以有益于减少细纹、皱纹、皮肤松弛和/或无弹性皮肤的出现。据测定海枣提取物使赖氨酰氧化酶的表达增加了38.37％。参见表2。

基质金属蛋白酶1活性(MMP1)测定：海枣提取物显示抑制了MMP1活性。MMP是胞外蛋白酶，由于其广泛的底物特异性在许多正常状态和疾病状态中起作用。MMP1底物包括胶原蛋白IV。

将来自Invitrogen的Invitrogen^TMMolecular Probes^TMEnzChek^TM白明胶酶/胶原酶含量测定试剂盒(#E12055)设计为体外含量测定以测量MMP1酶活性。该试剂盒利用荧光明胶底物检测MMP1蛋白酶活性。该含量测定依赖于纯化的MMP1酶降解荧光明胶底物的能力。一旦底物被MMP1特异性裂解，则显示亮绿色荧光，并使用荧光酶标仪来监测荧光。在纯化的酶和底物存在或不存在的条件下培育海枣提取物以确定其蛋白酶抑制能力。据测定海枣提取物使MMP1活性抑制了70.34％。参见表2。

实施例3

(通用制剂)

活性成分的组合可以包括在用于皮肤和/或毛发的多种局部用产品制剂中。表3和表4描述了其中可以掺入活性成分的通用制剂或皮肤测试制剂。这些制剂还可用于确定活性成分对皮肤益处的类型。这些制剂的制备方式应确保将对皮肤局部施用所述制剂所产生的所有皮肤益处都可以直接归因于所测试的活性成分。在本发明的方面的上下文中，可以测试的活性成分可以是海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体或其任何组合，或所有这些活性成分，或至少1种、至少2种至少、3种、至少4种和/或至少4种所述活性成分。应认识到，也可以使用其他标准试验载剂以确定活性成分的皮肤益处特性，以下制剂是非限制性试验载剂。

表3＊

成分	％浓度(以重量计)
		相A
水	84.80
		黄原胶	0.1
M-对羟基苯甲酸酯	0.15
		P-对羟基苯甲酸酯	0.1
柠檬酸	0.1
		相B
鲸蜡醇	4.0
		硬脂酸甘油酯+PEG 100	4.0
棕榈酸辛酯	4.0
		聚二甲基硅氧烷	1.0
生育酚乙酸酯	0.2
		相C
活性成分**	2.0
		总计	100

*制备组合物的过程：将黄原胶撒入水中并混合10分钟。然后，添加相A中的所有成分并加热到70℃至75℃。添加相B中的所有物质到单独的烧杯中并加热到70℃至75℃。在70℃至75℃下混合相A和B。继续搅拌并使组合物冷却到30℃。然后，边搅拌边添加相C的成分。

**在整个说明书中确定的活性成分可以作为活性成分掺入组合物中。活性成分可以单独使用或组合在该组合物中。根据预期或需要可以通过增加或减少水的量改变活性成分(或活性成分的组合)的浓度范围。

表4＊

*将相A中的成分添加到烧杯中并边搅拌边加热到70℃至75℃。然后，将相B的成分与相A添加到一起并随着搅拌冷却到30℃。然后，边搅拌边添加相C的成分。

实施例4

(示例性制剂)

表5至表10中所示的制剂是可以在本发明的情况下制备的制剂类型的非限制性实施例。可以使用任何标准方法来制备这类制剂。例如，可以使用在烧杯中简单地混合成分。应混合这些成分并在必要时加热以获得均匀的组合物。可以用于制剂中的活性成分可以包括海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体或其任何组合，或所有这些活性成分，或至少1种、至少2种、至少3种、至少4种和/或至少4种所述活性成分。

表5包括本发明的组合物的非限制性实例。组合物可以配制为乳液(例如o/w、w/o、o/w/o、w/o/w等)，本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表5的组合物中(例如通过调节组合物的水含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表5中的成分的浓度范围。

表5

成分	％浓度(以重量计)
		水	适量
活性成分*	0.1％至10％
		甘油	3％至40％
丁二醇	0.0001％至10％
		丙二醇	0.0001％至10％
苯氧乙醇	0.0001％至10％
		EDTA二钠	0.0001％至10％
硬脂醇聚醚-20	0.0001％至10％
		氯己定二葡糖酸盐	0.0001％至10％
山梨酸钾	0.0001％至10％
		防腐剂**	0.0001％至2％
总计	100

*在整个说明书中确定的活性成分可以作为活性成分掺入组合物中。活性成分可以单独使用或组合在该组合物中。根据预期或需要可以通过增加或减少水的量改变活性成分(或活性成分的组合)的浓度范围。

**可以使用本说明书中所确定的或本领域已知的所有防腐剂。

表6包括本发明的组合物的非限制性实例。组合物可以配制为乳液(例如o/w、w/o、o/w/o、w/o/w等)，本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表6的组合物中(例如通过调节组合物的水含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表6中所确定的成分的浓度范围。

表6

表7包括本发明的组合物的非限制性实例。组合物可以配制为乳液(例如o/w、w/o、o/w/o、w/o/w等)，本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表7的组合物中(例如通过调节组合物的水含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表7中所确定的成分的浓度范围。在具体的实施方案中，表7的组合物可以是保湿剂。

表7

表8包括本发明的组合物的非限制性实例。组合物可以配制为乳液(例如o/w、w/o、o/w/o、w/o/w等)，本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表8的组合物中(例如通过调节组合物的水含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表8中所确定的成分的浓度范围。在具体的实施方案中，表8的组合物可以是保湿剂。

表8

成分	％浓度(以重量计)
		水	适量
活性成分*	0.1％至10％
		甘油	0.0001％至10％
戊二醇	0.0001％至10％
		辛二醇	0.0001％至10％
EDTA二钠	0.0001％至10％
		凡士林	0.0001％至10％
角鲨烷	0.0001％至10％
		鲸蜡醇	0.0001％至10％
ARLACEL<sup>TM</sup>165	0.0001％至10％
		聚二甲基硅氧烷	0.0001％至10％
SIMULGEL<sup>TM</sup>600	0.0001％至10％
		总计	100

表9包括本发明的组合物的非限制性实例。组合物可以配制为乳液(例如o/w、w/o、o/w/o、w/o/w等)，本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表9的组合物中(例如通过调节组合物的水含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表9中所确定的成分的浓度范围。在具体的实施方案中，表9的组合物可以是防晒露。

表9

**防晒成分可以是本说明书中所确定的任何防晒成分或这些成分的组合(例如UV吸收剂和/或反射剂)或本领域普通技术人员已知的防晒成分。在一个实施方案中，防晒成分是氧化锌和二氧化钛的组合。

表10包括本发明的组合物的非限制性实例。本说明书全文所确定的附加成分可以包含到表10的组合物中(例如通过调节组合物的水分含量)。此外，可以根据希望的制剂(例如霜、润肤露、保湿剂、清洁剂等)改变表10中所确定的成分的浓度范围。在具体的实施方案中，表10的组合物可以是清洁剂。

表10

成分	％浓度(以重量计)
		水	适量
活性成分*	0.1％至10％
		EDTA二钠	0.0001％至10％
柠檬酸	0.0001％至10％
		戊二醇	0.0001％至10％
辛二醇	0.0001％至10％
		甲基椰油酰基牛磺酸钠	10％至30％
椰油酰两性二乙酸钠	1％至10％
		总计	100

实施例5

(附加测定)

可以通过本领域普通技术人员已知的方法，确定可以用于确定在本说明书全文和权利要求书中所公开的任意一种成分、或成分的任意组合、或具有所述成分的组合的组合物的功效的测定。以下是可以在本发明的上下文中使用的非限制性的测定。应认识到，可以使用其它测试过程，包括例如客观的和主观的过程。

B16色素沉着测定：黑素生成是生黑素细胞产生黑色素的过程，黑色素是一种天然产生的给予皮肤、毛发和眼睛颜色的色素。抑制黑色素生成对防止皮肤变黑和减轻与衰老相关的黑斑是有益的。该生物分析采用B16-F1黑素细胞(ATCC)，一种永生的小鼠黑色素瘤细胞系，来分析化合物对黑素生成的效果。该测定的终点是黑色素产生和细胞活性的分光光度测量。可以在37℃下10％的CO₂中利用含10％胎牛血清(Mediatech)的标准DMEM生长培养基中孵育B16-F1生黑素细胞，然后用本说明书中所公开任一种活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物处理6天。孵育之后，通过在405nm处的吸收测定黑色素分泌，并定量细胞活性。

弹性蛋白刺激测定：弹性蛋白是结缔组织蛋白，其帮助皮肤在伸展或收缩后恢复形状。弹性蛋白也是在需要储存机械能的位置使用的重要承重蛋白。弹性蛋白是通过在赖氨酰氧化酶催化的反应中连接许多可溶性原弹性蛋白蛋白分子而制得的。通过使用针对弹性蛋白的免疫荧光抗体对培养的人成纤维细胞进行染色，以在培养的人成纤维细胞中监测弹性蛋白分泌和弹性蛋白纤维。

层粘连蛋白和纤连蛋白刺激测定：层黏连蛋白和纤连蛋白是真皮-表皮连接(DEJ)(也称为基底膜带)中主要的蛋白质。DEJ位于真皮和表皮之间，其连结形成叫做网脊的指状突出。表皮细胞从真皮的血管中吸收其养分。网脊增加了表皮接触到这些血管和所需营养的表面积。DEJ提供两个组织间的黏连，并控制皮肤的结构完整性。层粘连蛋白和纤连蛋白是位于DEJ中的两种结构糖蛋白。层粘连蛋白和纤连蛋白被认为是将细胞保持在一起的黏合剂，由真皮成纤维细胞分泌，有助于促进表皮细胞与DEJ的细胞内和细胞间黏附。层粘连蛋白和纤连蛋白的分泌可以通过定量在培养的人成纤维细胞的细胞上清液中的层粘连蛋白和纤连蛋白来监测，培养的人成纤维细胞用含有或不含有1.0％最终浓度的测试成分的培养基处理3天。培养之后，在酶联免疫吸附测试(ELISA)中，可以使用针对每种蛋白质的免疫荧光抗体来测量层粘连蛋白和纤连蛋白含量。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)的生物转化，来对细胞代谢活性的测量进行标准化。

ORAC测定：还可以通过测量成分或组合物的抗氧化活性来分析本说明书公开的活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中任意一种的氧化自由基吸收(或吸收率)能力(ORAC)。抗氧化活性说明减少氧化试剂(氧化剂)的能力。该测定定量了抑制例如已知对细胞(例如皮肤细胞)造成损害的氧化剂如氧自由基的作用的程度及所需时长。本说明书公开的活性成分、活性成分的组合或含有所述组合的组合物的任一种的ORAC值可以通过本领域普通技术人员已知的方法进行确定(参见U.S.公开号2004/0109905和2005/0163880；和商业上可获得的试剂盒如Zen-Bio ORAC抗氧化分析试剂盒(#AOX-2))。Zen-Bio ORAC抗氧化分析试剂盒测定了由于AAPH(2,2'-偶氮双-2-甲基丙脒二盐酸盐)分解获得的过氧自由基的形成导致的荧光素荧光随时间的损失。一种水溶性维生素E类似物Trolox以剂量依赖的方式作为抑制荧光素衰减的阳性对照。

蘑菇酪氨酸酶活性测定：在哺乳动物细胞中，酪氨酸酶催化由酪氨酸(和多巴色素的聚合)多步生物合成黑色素中的两个步骤。酪氨酸酶位于生黑素细胞中，并产生给予皮肤、毛发和眼睛颜色的黑色素(芳香醌化合物)。在存在或不存在本说明书公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物的每一种的情况下，纯化的蘑菇酪氨酸酶(Sigma)可以与其底物L-Dopa(Fisher)一起孵育。可以在490nm处通过比色板读数来评估色素形成。计算蘑菇酪氨酸酶活性的抑制百分比并将其与未处理的对照物进行比较，以确定测试成分或其组合抑制纯化酶活性的能力。测试提取物的抑制与曲酸(Sigma)的进行比较。

基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白9酶活性(MMP3；MMP9)测定：公开了体外基质金属蛋白酶(MMP)抑制测定。MMP是胞外蛋白酶，由于其广泛的底物特异性在许多正常状态的和疾病状态起作用。MMP3底物包括胶原蛋白、纤连蛋白和层粘连蛋白；而MMP9底物包括胶原蛋白VII、纤连蛋白和层粘连蛋白。使用BioMol International用于MMP3(AK-400)和MMP-9(AK-410)的比色药物发现试剂盒，本测定旨在测量使用硫肽作为发色底物(Ac-PLG-[2-巯基-4-甲基戊酰基]-LG-OC2H5)5,6的MMP蛋白酶活性。MMP裂解位点的肽键由硫肽中的硫酯键取代。MMP对该键的水解产生了巯基，该巯基与DTNB[5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)，埃尔曼试剂]反应形成2-硝基-5-硫代苯甲酸，这可通过其在412nm(ε＝13600M^-1cm^-1在pH＝6.0及pH高于7)处的吸光度进行检测。可以测定说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合、或具有所述组合的组合物。

脂氧合酶(LO)测定：公开了体外脂肪氧合酶(LO)抑制测定。LO是非血红素的含铁加双氧酶，其催化到脂肪酸中分子氧的加成。亚油酸酯和花生四烯酸酯是植物和动物中LO的主要底物。然后可以将花生四烯酸转化为羟基二十碳三烯酸(HETE)酸衍生物，随后将其转化为有效的炎症介质白三烯。通过测定脂氧合酶(5-LO、12-LO或15-LO)与花生四烯酸孵育产生的氢过氧化物，该测定方法提供了一种准确、方便的筛选脂氧合酶抑制剂的方法。可以使用比色LO抑制剂筛选试剂盒(#760700，Cayman Chemical)来确定本说明书中所公开的活性成分、每一种成分的组合、或具有所述组合的组合物的任一种的抑制酶活性的能力。可以将经纯化的15-脂肪氧合酶和测试成分在测试缓冲液中混合，并在室温下摇动孵育10分钟。孵育之后，可以加入花生四烯酸开始反应，混合物可以在室温下再孵育另外10分钟。可以加入比色底物终止催化，并通过在490nm处读取荧光板评估颜色变化。脂肪氧合酶活性的抑制百分比可以通过与未处理的对照物对比来计算，以确定说明书中所公开的每种活性成分、任意一种成分的组合、或具有所述组合的组合物抑制纯化酶活性的能力。

弹性蛋白酶测定：来自Molecular Probes(俄勒冈州尤金，美国)的

弹性蛋白酶测定(试剂盒#E-12056)可以用作体外酶抑制分析以测量本说明书中所公开的活性成分、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物中每一种的对弹性蛋白酶活性的抑制。

试剂盒包含可用染料标记的可溶性牛颈韧带弹性蛋白，从而使结合物的荧光猝灭。非荧光的底物可以被弹性蛋白酶或其他蛋白酶消化以产生高度荧光的片段。产生的荧光增强可以用荧光酶标仪进行监测。来自弹性蛋白底物的消化产物在约505nm处具有最大吸收，在约515nm处具有最大荧光发射。当使用

弹性蛋白酶测定试剂盒以筛选弹性蛋白酶抑制剂时，可以将肽N-甲氧基琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Val-氯甲基酮用作弹性蛋白酶的选择性集体抑制剂。

控油测定：用于测量皮脂腺中皮脂分泌的减少和/或皮脂腺中皮脂产生的减少的分析可以通过使用本领域普通技术人员已知的标准技术进行分析。在一种情况中，可以使用前额。可以将本说明书中所公开的活性成分、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物中的每一种，每天一次或两次施用到前额的一部分以设定的天数(例如1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天或多于14天)，而前额的其他部分不用所述组合物处理。在设定天数期满后，皮脂分泌可以通过将细吸油纸施用到处理过的和未处理的前额皮肤上进行分析。此分析是首先用湿的和干的布从处理过的和未处理的区域去除所有皮脂。然后可以将吸油纸施用到处理过的和未处理的前额区域，并且可以围绕前额放置橡皮筋以轻轻地将吸油纸压到皮肤上。2小时后，可以移去吸油纸，使其干燥，然后进行透照。颜色越深的吸油纸对应于越多的皮脂分泌，而颜色较浅的吸油纸对应于减少的皮脂分泌。

红斑测定：测量皮肤发红减少的分析可以使用Minolta色度计进行评估。皮肤红斑可以通过在对象的前臂施用0.2％的十二烷基硫酸钠溶液来诱发。该区域用封闭的贴片保护24小时。24小时后，除去贴片，可以使用Minolta色度计的a^*值对刺激诱发的发红进行评估。a^*值测量肤色在红色区域的变化。读数后立即用本说明书公开的活性成分、活性成分组合中的任一种或含有所述组合的组合物处理区域。可以定期进行重复测量以确定制剂减少发红和刺激的能力。

皮肤清透度和雀斑与老年斑减少的测定：使用Minolta色度计评估皮肤清透度和雀斑与老年斑的减少。可以使用Minolta色度计的a*值评估肤色变化，以确定由于产品处理引起刺激的可能性。a^*值测量肤色在红色区域的变化。这用于确定本说明书中公开的每一种活性成分、任意一种成分组合或含有所述组合的组合物中的每一种是否诱导刺激。测量可以在脸的每一侧进行并取平均值，作为左边脸和右边脸的值。皮肤清透度也可以使用Minolta色度计进行测量。测量是Minolta色度计的a*、b和L值的组合，并与皮肤的亮度有关，而且与皮肤的光滑度和水合密切相关。皮肤测定如上进行。在一个非限制性方面，皮肤清透度可以描述为L/C，其中C是色度并定义为(a²+b²)^1/2。

皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和肤色测定：皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和肤色可以用临床评分技术进行评估。例如，皮肤干燥的临床评分可以通过五点标准KligmanScale进行确定：(0)皮肤是柔软和湿润的；(1)皮肤呈现正常而没有可见的干燥；(2)皮肤触摸感觉轻微干燥而没有可见的剥落；(3)皮肤感觉干燥、粗糙并且具有有些鳞屑的发白的外观；以及(4)皮肤感觉非常干燥、粗糙并且具有有鳞屑的发白的外观。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

肤色临床评分测定：肤色的临床评分可以通过十点模拟数值刻度实施：(10)平滑均匀的皮肤、粉红棕的颜色。手持放大镜检查时没有暗的、发红的或有脱皮的斑块。皮肤的细微纹理摸上去非常均匀；(7)不用放大镜观察均匀的肤色。没有脱皮区域，但是有由于色素淀积或红斑引起的轻微变色。没有直径大于1cm的变色；(4)轻易地注意到皮肤变色和不均匀的纹理。少量脱皮。皮肤的某些区域摸上去粗糙；和(1)不均匀的皮肤着色和纹理。多个区域的脱皮和变色，色素减退型、发红的或黑色的斑点。大面积的直径超过1cm的不均匀着色。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

皮肤光滑度的临床评分测定：皮肤光滑度的临床评分可以通过一个十点模拟数值刻度进行分析：(10)光滑的，皮肤是湿润的和光亮的，手指划过表面时没有阻力；(7)一定程度光滑的，微小的阻力；(4)粗糙的，可见地改变的，摩擦时有摩擦力；以及(1)粗糙的、片状的、不均匀的表面。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

用Packman等人(1978)公开的方法进行的皮肤光滑度和皱纹减少的测定：皮肤光滑度和皱纹的减少也可以通过使用Packman等人(1978)公开的方法进行可视化评估。例如，每一对象就诊时，对每一对象的表面面线(SFL)的深度、浅度和总数量都可以进行认真的评分和记录。通过将数量因子乘以深度/宽度/长度因子得到数值分数。获得眼睛区域和嘴巴区域(左侧和右侧)的分数，加到一起作为总的皱纹分数。

用Hargens Ballistometer进行的皮肤紧致度测定：皮肤紧致度可以用HargensBallistometer测量，其是通过使小物体落在皮肤上并记录前两个反弹峰来评估皮肤弹性和紧致度的装置。Ballistometry使用具有相对钝的尖端(4平方毫米-接触面积)的小的轻量探针。探针轻轻地穿透进入皮肤，获得取决于皮肤外层性质的测量值，所述皮肤外层包括角质层和外表皮以及部分真皮层。

用Gas Bearing Electrodynamometer进行的皮肤柔软度/柔韧性测定：皮肤柔软度/柔韧性可以使用Gas Bearing Electrodynamometer进行评估，其为测量皮肤应力/应变性质的仪器。皮肤的黏弹性与皮肤保湿有关。可以通过用双面胶将探针黏附在皮肤表面实现对脸颊区域预设位点的测量。大约3.5克力(gf)的力可以平行施加于皮肤表面，并精确地测量皮肤的位移。然后可以计算皮肤的柔韧性，并以DSR(动态弹簧刚度，单位gm/mm)表示。

用复制品进行的纹路和皱纹的显现测定：皮肤上纹路和皱纹的显现可以使用复制品进行评估，所述复制品是皮肤表面的印模。可以使用如硅橡胶的材料。复制品可以通过图像分析进行分析。纹路和皱纹可见性的变化可以通过从对象的脸上取下硅复制品并用计算机图像分析系统分析复制品图像进行客观地量化。复制品可以从眼睛区域和颈部区域获得，并用数码相机以低照明入射角进行拍摄。数字图像可以用图像处理程序进行分析，并且可以确定皱纹或细纹。

用轮廓曲线仪/触针式方法进行的皮肤表面轮廓测定：皮肤表面轮廓可以通过使用轮廓曲线仪/触针式方法进行测量。这包括在复制品表面闪光或拖动触针。触针的垂直位移可以通过距离传感器录入计算机，在扫描复制品的一定距离后，可以皮肤轮廓的横断面分析生成为二维曲面。该扫描可以沿着固定的轴重复任意次数以产生模拟的皮肤3D图像。使用触针技术可以获得十个随机的复制品截面，并组合产生平均值。感兴趣的值包括Ra，其为通过将轮廓高度相对于平均轮廓高度积分计算得到的所有粗糙度(高度)值的算术平均数；Rt，其为最高峰和最低谷之间的最大垂直距离；以及Rz，其为平均峰振幅减去平均峰高度。数值以用mm为单位标定的数值给出。设备应在每次使用前通过扫描已知数值的金属标准品进行归一化。Ra值可以通过下式计算：R_a＝归一化粗糙度；l_m＝横向(扫描)长度；以及y＝轮廓位置相对于平均轮廓高度(x轴)的绝对值。

MELANODERM^TM测定：在其它非限制性方面，可以通过使用皮肤模拟物例如MELANODERM^TM来评价说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物中每一种的功效。生黑素细胞是皮肤模拟物中细胞的一种，当暴露于黑色素的前体L-二羟苯基丙氨酸(L-DOPA)时被明显地着色。皮肤类似物MELANODERM^TM可以用包含每一种说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物中的每一种的各种基质来处理，或仅用基质来处理作为对照。或者，未处理的皮肤类似物样品可以用作对照物。

角质形成细胞单层通透性：可测定由于本说明书中所公开的每种活性成分、任意一种成分的组合或具有该组合的组合物中而导致的角质形成细胞单层的通透性变化。角质形成细胞单层的通透性是皮肤屏障的完整性的量度。作为非限制性实例，可以使用Millipore(ECM642)的体外血管通透性分析测定在经处理和未经处理的角质形成细胞中的角质形成细胞单层渗透性。该测定分析了内皮细胞吸附、输送和通透性。简略来说，来自Life Technologies(C-005-5C)的成人表皮角质形成细胞可被接种到在收集孔内的多孔胶原蛋白涂覆的膜上。在37℃下和5％的CO₂中，角质形成细胞在来自Life Technologies的

生长培养基(M-EP-500-CA)中培养24小时，其中

生长培养基含有钙，并补充以来自Life Technologies的角质细胞生长因子(HKGS)(S-101-5)。该孵育时间使得细胞形成单层并封闭膜孔。然后将培养基替换成含有(测试样品)或不含有(未处理对照)测试化合物/提取物的新鲜培养基，并在37℃下和5％的CO₂中将角质形成细胞孵育另外48小时。在含有/不含有测试化合物/提取物的孵育之后，为了确定角质形成细胞单层的渗透性，培养基被替换成含有高分子量异硫氰酸荧光素(FITC)-右旋糖酐的新鲜的培养基，并在37℃和5％的CO₂下将角质形成细胞孵育另外4小时。在4小时的孵育期间，FITC可以以与单层膜的渗透性成比例的速率穿过该角质形成细胞单层和多孔膜进入收集孔。在4小时的孵育后，可测定细胞活力和收集孔中FITC的含量。对于FITC含量，收集孔中的培养基被收集，并且在520nm的激发下在480nm(Em)处测定培养基的荧光。渗透率百分比和与未经处理的对照相比的变化百分比可以通过以下等式确定：渗透率百分比＝((测试样品的Ex/Em平均值)/未经处理的对照的Ex/Em平均值)×100；变化百分比＝测试样品的渗透率百分比-未经处理的对照的渗透率百分比。

透明质酸的产生：可测量由于本说明书中所公开的任一种活性成分、任意一种的成分组合或具有所述组合的组合物中每一种而导致的人真皮成纤维细胞中透明质酸产生的变化。HA是涉及基质结构的稳定性的多糖，其还涉及向组织和细胞提供膨压。作为一个非限制性实例，可以使用来自R&D Systems的Hyaluronan DuoSet ELISA试剂盒(DY3614)测定在经处理和未经处理的成人真皮成纤维(HDFa)细胞中的HA的产生。在该分析中，对于样品的产生，在处理之前，在37℃和10％CO₂下在饥饿培养基中(在Dulbecco氏改良Eagle培养基中的0.15％的牛胎儿血清和1％的青霉素链霉素溶液)培育由Cascade Biologics获得的亚融合的HDFa细胞(C-13-5C)72小时。然后用含有测试化合物、阳性对照(来自Sigma-Aldrich的佛波醇12-十四酸13-乙酸酯(P1585)和衍生自来自Sigma-Aldrich的生长因子的血小板(P3201))或无添加对照的新鲜饥饿培养基培养该细胞24小时。然后收集培养基并在-80℃下冷冻直至在ELISA测试中使用。

简而言之，该ELISA分析采用定量三明治酶联免疫测定技术，因此对HA特异性的捕获抗体可以预先涂覆在微孔板上。将标准品、来自经处理和未经处理的细胞的培养基移液至微孔板中，以使存在的所有HA被固定化抗体结合。洗去所有未结合的物质后，向孔中添加对HA特异的酶联检测抗体。冲洗以去除所有未结合的抗体-酶试剂之后，向孔中添加底物溶液，使得颜色能够与最初步骤中结合的HA的量成比例地显现。在特定的时间终止颜色显现，可以使用酶标仪在450nm处测量颜色的强度。

透明质酸酶活性的抑制：可测定由于本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有该组合的组合物的每一种而导致的透明质酸酶活性的变化。透明质酸酶是分解HA的酶。HA是涉及基质结构的稳定性的多糖，其与向组织和细胞提供膨压有关。作为非限制性实例，可以使用由Sigma-Aldrich方案#EC 3.2.1.35改良的体外方案测定透明质酸活性。简略来说，向含有测试化合物或对照的微孔板反应孔中添加来自Sigma-Aldrich的1-S型透明质酸酶(H3506)。可使用鞣酸作为阳性对照抑制剂，对照的酶不添加测试化合物，含有测试化合物或阳性对照但不含透明质酸酶的孔可以用作背景阴性对照。在添加底物(HA)之前，孔在37℃下孵育10分钟。添加底物，反应在37℃下孵育45分钟。然后，将每个反应溶液的一部分转移在乙酸钠和乙酸的pH为3.75的溶液中并轻轻混合，以终止该部分反应(终止孔)。在将一部分反应溶液加入到终止孔中之后，终止孔和反应孔应该都含有相同体积的溶液。反应孔和终止孔均在室温下孵育10分钟。然后测量反应孔和终止孔在600nm处的吸光度。抑制率可以使用以下公式来计算：抑制剂(或对照)活性＝(在600nm处的抑制剂停止孔的吸光度-在600nm处的抑制剂反应孔的吸光度)；初始活性＝在600nm处的对照酶吸光度；抑制率＝[(初始活性/抑制剂活性)×100]-100。

过氧化物酶体增殖剂-激活受体γ(PPAR-γ)的活性：可测定由于本说明书中所公开的活性成分、任一种成分的组合或具有该组合的组合物的每一种而导致的PPAR-γ活性变化。PPAR-γ是皮脂产生的重要受体。作为非限制性实例，使用分析测试化合物或组合物抑制配体结合的能力的生物测试来测定PPAR-γ的活性。简略来说，使用购自LifeTechnologies的荧光小分子Pan-PPAR配体FLUORMONE^TM Pan-PPAR Green(PV4894)来确定测试的化合物或组合物是否能够抑制配体结合至PPAR-γ。样品孔包含PPAR-γ和荧光配体，以及：测试化合物或组合物(测试)；参考抑制剂罗格列酮(阳性对照)；或者无测试化合物(阴性对照)。孔被孵育设定的一段时间以使得配体有机会与PPAR-γ结合。然后可测量每个样品孔的荧光偏振，并与阴性对照孔比对以确定测试化合物或组合物的抑制率。

内皮细胞管形成：内皮细胞管的形成和血管生成及毛细血管形成有关。毛细血管形成和血管形成可以导致皮肤发红和玫瑰痤疮。在存在或不存在测试提取物和化合物的情况下，内皮细胞形成管的能力可以在细胞培养系统中使用具有预成型的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的毛细管破坏测试确定。

简略来说，将HUVEC在细胞外基质进行体外培养，其刺激内皮细胞的附着和管状形态生成，形成毛细管状的内腔结构。这些体外形成的毛细血管在许多方面与人血管毛细血管相似。毛细管测试是基于该现象的，并用于评价潜在的脉管系统靶向试剂。

在5％CO₂、37℃下，HUVEC培养物在细胞培养器中生长。用于HUVEC的完整生长基为内皮管细胞基础培养基(EBM)，其补充有2％的牛胎儿血清(FBS)、12μg/ml的牛脑提取物、1μg/ml的皮质醇和1μg/ml的GA-1000(庆大霉素-两性霉素)。在第3代至第8代之间的HUVEC培养物可以用于所有的分析测试。

用荧光试剂Calcein AM预标记HUVEC，并将其接种于含有完全生长培养基的细胞外基质涂覆的96孔培养板中。在形态发生过程后约四小时，形成内皮毛细管。然后，作为处理条件，对形成的毛细管培养物施用50μl体积的设定剂量的测试试剂。可以向未处理对照组加入载剂或测试试剂。索坦(Sutent)是FDA认证的抗血管生成药物，可以包括其一个浓度作为测定性能的对照。在处理后约六小时，通过显微镜检查每个孔中的内皮小管形态、使其成像，可以定量分析处理条件下的毛细管破坏活性。每个测试条件可以在复孔中进行，包括对照。

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本文所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以根据本公开可以不需要过度实验即可做出和实施。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选的实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员显而易见的是，可以对所述组合物和/或方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序进行改变，而不脱离本发明的构思、精神和范围。更具体地，明显地，化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和概念内。

参考文献

以下参考文献在一定程度上提供示例性程序或对本文所陈述细节的其他补充细节，它们通过引用明确地并入本文。

化妆品成分词典，第三版，CTFA，1982。

国际化妆品成分词典，第四版，CTFA，1991

国际化妆品成分词典和手册，第十版，CTFA，2004

国际化妆品成分词典和手册，第十二版，CTFA，2008

美国专利第5972993号

美国公开第2015/0011489号

Tighe等人(2013),Terpinen-4-ol is the most active ingredient of teatree oil to kill Demodex mites,Translational Vision Science&Technology,2(7),1-8。DOI:10.1167/tvst.2.7.2

Claims

1.一种处理皮肤的方法，该方法包括将有效量的局部用组合物局部施用到皮肤上，所述局部用组合物包含海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体，其中对皮肤进行了处理。

2.根据权利要求1所述的方法，其中对皮肤进行处理以减少玫瑰痤疮、红斑和/或炎症，并且其中玫瑰痤疮、红斑和/或炎症得以减少。

3.根据权利要求1所述的方法，其中对皮肤进行处理以减少暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或结缔组织的增生，并且其中暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或结缔组织的增生得以减少。

4.根据权利要求1所述的方法，其中对皮肤进行处理以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)的活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生、增加皮肤保湿，并且其中一氧化氮合酶得以抑制、α2A肾上腺素能受体激动剂活性得以增加、氧化得以减少、皮肤抗氧化能力得以增加、COX-2的产生得以抑制、VEGF的产生得以抑制、IL-6的产生得以抑制、IL-8的产生得以抑制、TNF-α的产生得以抑制、胶原蛋白刺激得以增加、赖氨酰氧化酶的表达得以增加、MMP1活性得以抑制、闭合蛋白的产生得以增加、丝聚蛋白的产生得以增加和/或皮肤保湿得以增加。

5.根据权利要求1所述的方法，其中糖类同分异构体和/或密罗木提取物是水提取物。

6.根据权利要求1所述的方法，其中糖类同分异构体包括属于海洋浮游生物家族的溶藻弧菌的胞外多糖。

7.根据权利要求1所述的方法，其中密罗木提取物是密罗木的叶和茎的提取物。

8.根据权利要求1所述的方法，其中海枣提取物是来自海枣籽的水溶性提取物。

9.根据权利要求1所述的方法，其中茶树精油是来自茶树互生叶白千层的叶的精油。

10.根据权利要求1所述的方法，其中局部用组合物是乳液、精华素、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华素。

11.根据权利要求1所述的方法，其中组合物包含有效量的海枣提取物以增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达和/或抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)的活性；

有效量的茶树精油以杀死毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨；

有效量的糖类同分异构体以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、抑制一氧化氮合酶、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿；和

有效量的密罗木提取物以减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生和/或抑制一氧化氮合酶。

12.一种根据权利要求1所述的方法施用的局部皮肤用组合物，其中所述组合物包含海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体。

13.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中所述局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以减少玫瑰痤疮、红斑、炎症、暂时性或持续性红斑、毛细管扩张、炎性丘疹和/或脓疱、暂时性或持续性皮肤潮红和/或结缔组织的增生。

14.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中所述局部用组合物包含有效量的海枣提取物、茶树精油、密罗木提取物和糖类同分异构体以抑制一氧化氮合酶、增加α2A肾上腺素能受体激动剂活性、减少氧化、增加组合物或皮肤的抗氧化能力、抑制环氧合酶-2(COX-2)的产生、抑制血管内皮生长因子(VEGF)的产生、抑制白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的产生、减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生、增加胶原蛋白刺激、增加赖氨酰氧化酶的表达、抑制基质金属蛋白酶1(MMP1)活性、增加闭合蛋白的产生、增加丝聚蛋白的产生和/或增加皮肤保湿。

15.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中糖类同分异构体和/或密罗木提取物是水提取物。

16.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中糖类同分异构体包括属于海洋浮游生物家族的溶藻弧菌的胞外多糖。

17.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中密罗木提取物是密罗木的叶和茎的提取物。

18.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中海枣提取物是来自海枣籽的水溶性提取物。

19.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中茶树精油是来自茶树互生叶白千层的叶的精油。

20.根据权利要求12所述的局部用组合物，其中局部用组合物是乳液、精华素、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华素。