CN113355260A - 一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，包括解淀粉芽孢菌3％、铜绿假单胞菌2％、洋葱伯克氏菌2％，统糠70％和腐殖酸23％。本发明的优点：菌剂不仅对香蕉枯萎病具有显著的防治作用，而且对植株生长具有促进作用，维持香蕉的稳产、高产。
Description
技术领域
本发明涉及果树病虫防治技术领域，具体是指一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法。
背景技术
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌侵染而引起香蕉维管束坏死的毁灭性土传真菌病害。镰刀菌作为一种重要的植物病原菌,其寄主广泛,能引起多种植物枯萎、根腐和腐烂,致使农作物蒙受严重的产量损失和质量下降。目前，在广西受到广泛关注的植物病原镰刀菌是香蕉枯萎病菌。引起香蕉枯萎病的尖孢镰刀菌是镰刀菌属中最为重要的植物病原菌,可以引起许多作物维管束枯萎病，香蕉一旦感染枯萎病，防治十分困难，几乎是一种毁灭性的病害。我国香蕉枯萎病流行最早、为害最严重的是海南省和广东省香蕉主产区，该病在广西是近几年才大面积发生的，但已对产业造成了严重的伤害，导致部分蕉园丢荒或不得不改种其它作物。
任何生物在生长繁殖过程中均有损害其自身生长环境的特性，生物对生长环境的损害程度随着生物密度的增加而增强，农作物也不例外。高投入、高产量且单一品种种植的集约化种植制度下，作物根系向土壤分泌大量的化感物质，诱导病原微生物大量繁殖，最终侵入作物引起病害。过于追求高产，不注意抗性品种的使用，也是导致病害发生流行的重要因素。香蕉枯萎病的发生流行，在一定程度上是由于近年现代集约化生产规模不断提高引起的。但是，作为地方特色产业，其发展是不可能离开集约化生产的。因此，目前亟待解决的问题是：加大对集约化种植作物的生长规律、养分需求规律、病虫害发生规律等的基础研究，注重研究作物土传病原微生物的生长繁殖与寄主作物和土壤其它微生物的关系及其发生联系通道，明确作物根系微生态区系的影响因子及其调控措施是高效防控作物土传病害的科学基础。
目前已报道的香蕉枯萎病传统的防治方法主要有化学农药防治和栽种抗病品种。化学农药防治不仅效果一般，还会污染环境和影响香蕉品质；抗病品种大多只能抗香蕉枯萎病单个生理小种，在其他生理小种入侵时存在大面积爆发的危险。香蕉枯萎病的生物防治是目前最受关注的方法，目前已有很多研究论文和发明专利报道了防控枯萎病的生防菌和菌剂，包括放线菌、芽孢杆菌、假单胞菌、木霉、绿僵菌、耐寒短杆菌和非致病力尖孢镰刀菌等。由于我国在香蕉枯萎病防控研究方面起步较晚，现有的生防菌资源库有限，且有些菌株在实际应用过程中常发生变异和退化现象，需要不断补充新的高效生防菌。
发明内容
本发明为了解决上述的各种问题，提供了一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法，菌剂不仅对香蕉枯萎病具有显著的防治作用，而且对植株生长具有促进作用，维持香蕉的稳产、高产。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，包括解淀粉芽孢菌3％、铜绿假单胞菌2％、洋葱伯克氏菌2％，统糠70％和腐殖酸23％。
优选的，所述解淀粉芽孢菌、铜绿假单胞菌和洋葱伯克氏菌的菌株名称分别为N15300、N15196和M17-1，其保藏编号分别为CGMCC No.20426、CGMCC No.20424和CGMCCNo.20423。
优选的，所述统糠为米糠和麦皮的混合。
本发明还包括一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将菌株N15300、菌株N15196和菌株M17-1分别独立活化和培养，将活化后的菌株接种于少量牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养16-20h做为第一次种子液；
步骤二：再5％的接种量将第一次种子液接种到LB培养基上进行大量培养24h，得到二级种子液；
步骤三：将N15300、N15196、M17-1菌株的二级种子液按初始菌量比例为3:2:2的进行混合，然后按固液比为6:1接种到带腐植酸的固体培养基质上发酵培养3天；
步骤四：真空常温烘干，使菌剂含水量保持在30％，分装保存备用。
本发明与现有技术相比的优点在于：本发明所述的复合菌剂，以上3株筛选出来的菌株通过筛选证明其分别对香蕉枯病菌具有较强的抑制作用；3个菌株通过合理配比具有相互促进的作用，对香蕉枯萎病的防治效果大大增加。利用本发明所述的复合菌剂进行香蕉枯萎病的防治，可以有效调节土壤中的菌落构成，促进土壤中益生菌和拮抗菌的生长繁殖，恢复并稳定土壤中的菌群平衡，防止香蕉枯萎病的发生和蔓延，有效降低香蕉枯萎病的发生率；所述菌剂不仅对香蕉枯萎病具有显著的防治作用，而且对植株生长具有促进作用，维持香蕉的稳产、高产。
附图说明
图1是本发明一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法的菌株N15300对香蕉枯萎病菌的抑制作用示意图。
图2是本发明一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法的菌株N15196对香蕉枯萎病菌的抑制作用示意图。
图3是本发明一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法的菌株M17-1对香蕉枯萎病菌的抑制作用示意图。
图4是本发明一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂及其制备方法的复合生防菌剂对香蕉促生长以及防治香蕉枯萎病的效果示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的详细说明。
一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，包括解淀粉芽孢菌3％、铜绿假单胞菌2％、洋葱伯克氏菌2％，统糠70％和腐殖酸23％。
所述解淀粉芽孢菌、铜绿假单胞菌和洋葱伯克氏菌的菌株名称分别为N15300、N15196和M17-1，其保藏编号分别为CGMCC No.20426、CGMCC No.20424和CGMCC No.20423。
所述统糠为米糠和麦皮的混合。
本发明以香蕉枯萎病病原菌4号生理小种作为指示菌，经过平板初筛和复筛，筛选到2株来源于甘蔗根际土壤的PGPR菌株菌株N15300、N15196以及1株来源于木薯根际土壤的PGPR菌株M17-1，3个菌株对香蕉枯萎病病原菌有很强的平板抑制效果；将3株来源不同的菌株制成香蕉枯萎病防控菌剂，可以直接在生产上使用，也可以作为香蕉专用生物有机肥的功能菌剂加以使用。
本发明还包括一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂的制备方法，具体为：
将3株菌株分别独立活化和培养，将活化后的菌株接种于少量牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养16-20h做为第一次种子液；然后再5％的接种量将第一次种子液接种到LB培养基上进行大量培养24h，得到二级种子液；将N15300、N15196、M17-1菌株的二级种子液按初始菌量比例为3:2:2的进行混合，然后按一定比例(固:液比为6:1)接种到带腐植酸的固体培养基质(米糠+麦皮)上发酵培养3d左右，最后真空常温烘干使菌剂含水量保持在30左右％，分装保存备用。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的结构并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，其特征在于:包括解淀粉芽孢菌3％、铜绿假单胞菌2％、洋葱伯克氏菌2％，统糠70％和腐殖酸23％。
2.根据权利要求1所述的一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，其特征在于：所述解淀粉芽孢菌、铜绿假单胞菌和洋葱伯克氏菌的菌株名称分别为N15300、N15196和M17-1，其保藏编号分别为CGMCC No.20426、CGMCC No.20424和CGMCC No.20423。
3.根据权利要求1所述的一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂，其特征在于：所述统糠为米糠和麦皮的混合。
4.一种防治香蕉枯萎病的复合菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：将菌株N15300、菌株N15196和菌株M17-1分别独立活化和培养，将活化后的菌株接种于少量牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养16-20h做为第一次种子液；
步骤二：再5％的接种量将第一次种子液接种到LB培养基上进行大量培养24h，得到二级种子液；
步骤三：将N15300、N15196、M17-1菌株的二级种子液按初始菌量比例为3:2:2的进行混合，然后按固液比为6:1接种到带腐植酸的固体培养基质上发酵培养3天；
步骤四：真空常温烘干，使菌剂含水量保持在30％，分装保存备用。
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