CN113354621B

CN113354621B - 1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其制备方法和应用

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Publication number: CN113354621B
Application number: CN202110624431.5A
Authority: CN
Inventors: 胡春; 侯世澄; 黄二芳; 闫冰玉; 马晓茜; 佟蕊; 郑希媛; 冯欣; 刘那; 王金鹏
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Priority date: 2021-06-04
Filing date: 2021-06-04
Publication date: 2022-05-17
Anticipated expiration: 2041-06-04
Also published as: CN113354621A

Abstract

含有吡啶基团的1‑取代苄基‑3‑芳基脲类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域，具体涉及1‑[3‑甲氧基‑4‑(吡啶‑2‑基)甲氧基]苄基‑3‑芳基脲类化合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。所述的1‑[3‑甲氧基‑4‑(吡啶‑2‑基)甲氧基]苄基‑3‑芳基脲类化合物结构通式如式(I)所示：n为0或1；R₁为甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、二甲氨基、氟、氯或3‑氯‑4‑氟；R₂为氢或1‑甲基哌啶‑4‑基；R₃为甲基和/或2,2,2‑三氟乙氧基。本发明化合物的合成方法简便，适于工业化生产，生物活性测试显示此类化合物具有抗肿瘤活性，可应用于抗肿瘤药物中。

Description

1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及1-[3-甲氧基-4-(吡啶-2-基)甲氧基]苄基-3-芳基脲类化合物及其制备方法，及其作为多靶点抑制剂在抗肿瘤方面的应用。

背景技术

癌症是由于人体自身原癌基因被错误表达，导致不受控制的细胞增殖。这一异常的细胞增殖行为与一些异常激活了的信号传导机制和细胞调节机制有着较为密切的关系，而这些细胞的信号传导与调节机制往往又与人体正常的细胞增殖行为息息相关(Yang L,Shi P,Zhao G, et al.Signal Transduction and Targeted Therapy,2020,5(1):8-43)。

随着分子生物学技术的发展，癌症的发病机制逐渐被阐明，一些列不同的作用靶点逐渐被发现。在靶向药物治疗中，相对于单靶点药物或多种单靶点药物联用，多靶点抑制剂具有更大优势：可避免产生药物相互作用，减少不良反应，治疗作用全面等(Guo T,Ma S.ChemMedChem,2020,16(4):600-620)。目前已上市的多靶点抑制剂主要有：

索拉非尼(sorafenib)一种双芳基脲结构的多靶点抑制剂，对VEGFR-1、VEGFR-2、B-RAF、 c-RAF等靶点均展现出了良好的抑制活性。可同时阻断肿瘤细胞内部的信号传导和切断外源营养供应。此外对部分突变型的VEGFR和RAF也具有良好的抑制活性。在临床试验中，能够显著延长患者的生存期(

C,Serve H,

A,et al.The LancetOncology,2015, 16(16):1691-1699)。

帕唑帕尼(pazopanib)是一款同时可以一直VEGFR-1,、VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-α、 PDGFR-β、FGFR-1、FGFR-3的多靶点抑制剂。临床试验中效果良好且具有较好的耐受性，无严重不良反应(Sternberg C N,Davis I D,Mardiak J,et al.Journal ClinicalOncology,2010, 28(6):1061-1068.；Motzer R J,Hutson T E,Cella D,et al.The NewEngland Journal of Medicine, 2013,369(8):722-731)。

卡博替尼(cabozantinib)是一款对MET、VEGFR-2，KIT、RET、AXL、TIE2和FLT3均具有抑制活性的多靶点抑制剂，尤其对MET和VEGFR的IC₅₀低至1.3和0.035nM，临床试验中对多种癌症均具有较好的疗效(Abou-Alfa G K,Meyer T,Cheng A L,et al.The New EnglandJournal of Medicine,2018,379(1):54-63)。

舒尼替尼(sunitinib)是目前已知的作用靶点最多的小分子激酶抑制剂。对VEGFR-1、 VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-α、PDGFR-β、KIT、FLT3、CSF-1R、RET等多种靶点均具有活性。具有广谱抗肿瘤活性(Mejean A,Ravaud A,Thezenas S,et al.The New EnglandJournal of Medicine,2018,379(5):417-427)。

恩曲替尼(entrectinib)是一款具有中枢神经活性的TRK、ROS1、ALK多靶点抑制剂。对 TRKA、TRKB、TRKC、ROS1和ALK的IC₅₀分别低至1.7、0.1、0.1、0.2和1.6nM。对非小细胞肺癌、胃肠道肿瘤、头颈部肿瘤、乳腺癌、前列腺癌等多种癌症具有良好的治疗作用(Doebele R C,Drilon A,Paz-Ares L,et al.The Lancet Oncology,2020,21(2):271-282)。

发明内容

本发明的目的是提供一种如式I所示的化合物、其前体药物和药物活性代谢物以及其药学上可接受的盐，并提供其制备方法和其在制备治疗或/和预防与BRaf激酶，VEGFR-2， PDGFR-β，表皮生长因子受体和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activatedextracellular signal-regulated kinase，MEK)相关的肿瘤疾病方面的应用。

其中n＝0，1或2；

X为碳或氮；

R₁，R₃各自独立的为氢、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、卤素、硝基、氨基或C1-C4烷氨基；

R₂为C1-C6烷基、卤素取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氨基或取代苯基；取代基是C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、卤素、硝基、氨基或C1-C4烷氨基；

R₁、R₂、R₃可以为一个或多个。

进一步地，本发明所述的如式I所示化合物、其前体药物和药物活性代谢物以及其药学上可接受的盐：

n＝0或1；

R₁为甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、二甲氨基、氟、氯或3-氯-4-氟；

R₂为氢或1-甲基哌啶-4-基；

R₃为甲基或/和2,2,2-三氟乙氧基。

进一步的，本发明优选如下化合物：

HD01：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-三氟甲氧基苯基)脲；

HD02：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-乙氧基苄基)脲；

HD03：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-氯-4- 氟苯基)脲；

HD04：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-三氟甲基苯基)脲；

HD05：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-二甲氨基苄基)脲；

HD06：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-甲氧基苯基)脲；

HD07：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-硝基苯基)脲；

HD08：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-甲氧基苄基)脲；

HD09：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-三氟甲基苯基)脲；

HD10：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-乙氧基苄基)脲；

HD11：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)脲；

HD12：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-三氟甲基苯基)脲；

HD13：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-甲氧基苯基)脲；

HD14：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-三氟甲基苯基)脲；

HD15：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-氯-4-氟苯基)脲；

HD16：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-硝基苯基)脲。

一种药物组合物，包括作为活性成分的本发明所述的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及其在药学上可接受的盐中任何一个的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。

“药学上可接受的盐”指保留了式I化合物的生物效力和性质，并与合适的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、高氯酸盐、硫氰酸盐、硫酸氢盐、过硫酸盐、硼酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、戊酸盐、新戊酸盐、己酸盐、庚酸盐、辛酸盐、异辛酸盐、十一烷酸盐、月桂酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、环丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、己二酸盐、壬二酸盐、丙烯酸盐、草莓盐、巴豆酸盐、惕格酸盐、衣康酸盐、山梨酸盐、肉桂酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、亚酒石酸盐、扁桃酸盐、二苯乙醇酸盐、托品酸盐、抗坏血酸盐、葡萄糖酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖二酸盐、甘露糖酸盐、乳糖酸盐、苯甲酸盐、酞酸盐、对酞酸盐、糠酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、水杨酸盐、乙酰水杨酸盐、酪酸盐、没食子酸盐、咖啡酸盐、阿魏酸盐、苦味酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、丙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、对氨基苯磺酸盐、氨基磺酸盐、牛磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、甘氨酸盐、丙氨酸盐、缬氨酸盐、亮氨酸盐、异亮氨酸盐、苯丙氨酸盐、色氨酸盐、酪氨酸盐、天冬氨酸盐、天冬酰胺盐、谷氨酸盐、赖氨酸盐、谷氨酰胺盐、甲硫氨酸盐、丝氨酸盐、苏氨酸盐、半胱氨酸盐、脯氨酸盐、组氨酸盐、精氨酸盐、依地酸盐、丙酮酸盐、α-酮戊二酸盐、藻酸盐、环戊烷丙酸盐、 3-苯基丙酸盐、3-环己基丙酸、2-萘甲酸盐、2-萘磺酸盐、双羟萘酸盐、月桂基硫酸盐、甘油磷酸盐、月桂基硫酸盐、果胶脂酸盐等。碱盐包括铵盐，碱金属盐，例如钠和钾盐，碱土金属盐，例如钙和镁盐，有机碱的盐，例如二环己胺盐，N-甲基-D-葡糖胺盐等，而且，碱性含氮基团可以用这样的试剂季铵化，例如低级烷基卤化物，如甲基，乙基，丙基和丁基的氯、溴和碘化物；硫酸二烷基酯，如硫酸二甲酯，二乙酯，二丁酯和二戊酯；长链卤化物，如癸基，月桂基，肉豆蔻基和硬脂酰基的氯、溴和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基的溴化物等。优选用于生成酸加成盐的酸包括盐酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、顺丁烯二酸、苹果酸、苦味酸、柠檬酸、对氨基苯磺酸。

本发明也涉及抑制酪氨酸激酶和丝苏氨酸激酶的药用组合物，该组合物含有式I化合物或衍生物或其药学上适用的酸加成盐以及药学上可接受的载体。

“药学上可接受的”如药学上可接受的载体、赋形剂、前体药物等，指药理学上可接受的、并对给药具体化合物的患者基本上无毒性。

“药学活性代谢物”指药学上可接受并有效的式I化合物的代谢产物。

本发明中应用的术语“卤素”包括氟、氯、溴或碘。

本发明化合物可以通过不同的方法给患者服用，例如以胶囊剂或片剂口服，以无菌溶液剂或混悬剂给药，并且在某些情况下，可以以溶液剂形式静脉注射。可以将本发明的游离碱化合物以其药学上适用的酸加成盐形式进行配制和服用。

本发明所述化合物作为全新结构类型的B-Raf激酶，血管内皮生长因子受体(Vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)，血小板衍生生长因子受体(Platelet-derived growth factor receptors，PDGFR)，表皮生长因子受体(epidermalgrowth factor receptor，EGFR)和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK)，具有结构类型新颖，且能够作用于多个靶点等特点，可用于治疗或预防与B-Raf激酶，血管内皮生长因子受体-2(Vascular endothelial growth factor receptor-2，VEGFR-2)血小板衍生生长因子受体-β(Platelet-derived growth factor receptors-β，PDGFR-β)表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK)相关的肿瘤疾病如小细胞肺癌，鳞癌，腺癌，大细胞癌，结肠直肠癌、乳腺癌，卵巢癌，肾细胞癌，具有良好的应用价值和开发应用前景。

本发明化合物的制备路线：

本发明所述化合物HD01-HD16及药学上可接受的盐、以及其前体药物，具有能够与RAF、 VEGFR等多种靶点相结合，从而阻断相关下游信号通路，达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。

本发明有益效果：

本发明提供了一类全新抗肿瘤化合物的结构，具有潜在的成药价值。本发明的化合物制备路线简便，易于合成且成本低廉。与已上市药物相比，具有更加的抗肿瘤细胞增殖活性。

具体实施方式

以下述实例详细叙述本发明。但是，应当明白，本发明不限于具体叙述的下述实例。

实施例1：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-三氟甲氧基苯基)脲(HD01)的制备

步骤I：称取香草醛15.21g(100mmol)、2-氯甲基-3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶盐酸盐27.61g(100mmol)、K₂CO₃ 69.10g(500mmol)置于250ml烧瓶中，加入DMF100mL，80℃下反应24h，冷却反应液至室温，倒入800mL水中，搅拌3h，抽滤，并依次用2mol/LNaOH 溶液、水洗涤滤饼，干燥后得到白色固体3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基] 甲氧基}苯甲醛35.5g，收率99.91％。

步骤II：称取盐酸羟胺(3.06g，44mmol)，碳酸氢钠(3.69g，44mmol)置于50ml茄型瓶中，加入30mL水，室温下搅拌反应半小时，放出大量气体。称取3-甲氧基-4-[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基苯甲醛14.21g(40mmol)，置于500ml烧瓶中，加入乙醇搅拌溶解，搅拌下将羟胺溶液加入瓶中，室温反应3h，减压蒸出乙醇，抽滤得到白色固体3-甲氧基-4-{[3- 甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苯甲醛肟14.6g，收率98.56％。

步骤III：称取3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苯甲醛肟7.41g (20mmol)置于250ml烧瓶中，加入EtOH40mL、5mol/LNaOH溶液40mL搅拌溶解，冰浴下称取镍铝合金8g分批次加入瓶中，有大量气体放出，加完后反应过夜。抽滤滤除镍铝合金，减压蒸出EtOH，析出白色固体，抽滤并依次用2mol/LNaOH溶液、水洗涤滤饼，干燥后得到白色固体3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺6.76g，收率94.85％。

步骤IV：称取固体光气(碳酸双三氯甲酯)(0.20g，0.67mmol)置于100mL茄型瓶中，加入 10mL DCM室温搅拌溶解，称取4-三氟甲氧基苯胺(0.35g，2mmol)，溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，逐渐析出固体。称取三乙胺(0.40g，4mmol)溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，固体逐渐溶解，得到澄清溶液。称取3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺(0.71g，2mmol)溶于12mLDCM中，室温搅拌下滴加进烧瓶中，加完后室温下搅拌半小时。停止反应，水洗反应液，饱和食盐水洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤蒸干溶剂得到油状液体，柱色谱分离得到HD-01白色固体0.99g，收率88.5％；m.p.：158.8-159.3℃；MS:560.4[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.54–7.47(m,2H),7.23(d,J＝8.6Hz,2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.05(d,J＝8.2Hz, 1H),6.94(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),6.59(t,J＝5.9Hz,1H),5.14(s,2H), 4.92(q,J＝8.8Hz,2H),4.23(d,J＝5.7Hz,2H),3.74(s,3H),2.22(s,3H)；IR(cm^-1)：3399,3053, 3008,2971,2829,1706,1556,1507,1454,1416,1256,1220,1194,1154,1015,911,847,796,672, 645,544。

实施例2：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-乙氧基苄基)脲(HD02)：

采用实施例1的方法制得化合物3-甲氧基-4-[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基苄胺

步骤V：称取固体光气(碳酸双三氯甲酯)(0.20g，0.67mmol)置于100mL茄型瓶中，加入 10mL DCM室温搅拌溶解，称取4-乙氧基苄胺(0.30g，2mmol)，溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，逐渐析出固体。称取三乙胺(0.40g，4mmol)溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，固体逐渐溶解，得到澄清溶液。称取3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺(0.71g，2mmol)溶于12mL DCM中，室温搅拌下滴加进烧瓶中，加完后室温下搅拌半小时。停止反应，水洗反应液，饱和食盐水洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤蒸干溶剂得到油状液体，柱色谱分离得到HD-02白色固体0.57g，收率53.4％；m.p.： 148.9-149.9℃；MS:534.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.20 –7.11(m,3H),7.02(d,J＝8.2Hz,1H),6.90–6.81(m,3H),6.75(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),6.30 (td,J＝6.1,2.3Hz,2H),5.13(s,2H),4.92(q,J＝8.8Hz,2H),4.15(d,J＝5.8Hz,4H),3.99(q,J＝ 7.0Hz,2H),3.71(s,3H),2.22(s,3H),1.31(t,J＝7.0Hz,3H)；IR(cm^-1)：3331,2978,2927,2883, 1609,1579,1556,1516,1471,1423,1390,1275,1249,1148,1025,974,861,815,753,728,639, 574,548。

实施例3：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-氯-4- 氟苯基)脲(HD03)：

参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.86g，收率81.5％；m.p.：167.8-169.1℃； MS:528.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.72(s,1H),8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.77(dd, J＝6.8,2.4Hz,1H),7.32–7.18(m,2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.2Hz,1H),6.93(d, J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),6.63(t,J＝5.8Hz,1H),5.13(s,2H),4.91(q,J＝8.7 Hz,2H),4.22(d,J＝5.7Hz,2H),3.74(s,3H),2.22(s,3H)；IR(cm^-1)：3313,2944,2883,1641, 1564,1500,1477,1420,1390,1308,1258,1209,1164,1131,1008,970,911,862,800,757,647, 576,445。

实施例4：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-三氟甲基苯基)脲(HD04)：

参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.78g，收率71.8％；m.p：169.9-171.0℃；MS:544.5[M+H]⁺,566.1[M+Na]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.95(s,1H),8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.59(q,J＝8.8Hz,4H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.05(d,J＝8.2Hz,1H),6.95(d,J＝2.0 Hz,1H),6.82(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),6.69(t,J＝5.8Hz,1H),5.14(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz, 2H),4.24(d,J＝5.7Hz,2H),3.74(s,3H),2.22(s,3H)；IR(cm^-1)：3414,3376,2940,2886,1703, 1686,1581,1534,1512,1477,1408,1321,1256,1220,1180,1155,1135,1102,1063,1008,979, 862,842,812,595,554。

实施例5：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-二甲氨基苄基)脲(HD05)：

参照实施例2的制备方法，得到白色固体0.73g，收率68.5％；m.p.：159.4-168.2℃；MS:533.9[M+H]⁺,555.4[M+Na]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.34(d,J＝5.6Hz,1H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.11–7.06(m,2H),7.02(d,J＝8.2Hz,1H),6.87(d,J＝2.0Hz,1H),6.74(dd, J＝8.2,1.9Hz,1H),6.69–6.65(m,2H),6.22(dt,J＝21.9,5.9Hz,2H),5.12(s,2H),4.92(q,J＝ 8.7Hz,2H),4.15(d,J＝5.9Hz,2H),4.10(d,J＝5.8Hz,2H),3.71(s,3H),2.85(s,6H),2.22(s, 3H).IR(cm^-1)：3336,2940,2918,2879,1613,1570,1517,1468,1421,1308,1256,1233,1175, 1137,1039,1011,969,922,854,810,736,650,564。

实施例6：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-甲氧基苯基)脲(HD06)：

参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.59g，收率58.4％；m.p.：179.5-180.3℃； MS:566.2[M+H]⁺,504.0[M-H]^-；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.28(s,1H),7.29(d,J＝8.9Hz, 2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),6.93(d,J＝1.9Hz,1H),6.81(dd,J＝9.0,7.1Hz,3H),6.40(t,J＝5.9 Hz,1H),5.13(s,2H),4.92(q,J＝8.8Hz,2H),4.20(d,J＝5.8Hz,2H),3.70(s,3H),2.22(s,3H)； IR(cm^-1)：3312,2940,2839,1631,1571,1508,1467,1417,1376,1363,1308,1271,1241,1160, 1136,1030,973,862,827,669,578,524,423。

实施例7：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-硝基苯基)脲)(HD07)：

参照实施例1的制备方法，得到黄色固体0.31g，收率29.8％；m.p.：168.9-170.5℃； MS:521.2[M+H]⁺,519.0[M-H]^-；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.08(s,1H),8.52(t,J＝2.2Hz, 1H),8.33(d,J＝5.8Hz,1H),7.75(d,J＝8.3Hz,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(dd,J＝9.1, 7.3Hz,1H),7.13(d,J＝5.9Hz,1H),7.04(d,J＝8.2Hz,1H),6.96–6.92(m,1H),6.85–6.71(m, 2H),5.13(s,2H),4.91(q,J＝8.8Hz,2H),4.24(d,J＝5.9Hz,2H),3.74(s,3H),2.21(s,3H)； IR(cm^-1)：3410,3010,2943,2882,2832,1701,1584,1527,1503,1480,1383,1347,1318,1264, 1207,1161,1138,1122,1033,1000,980,868,814,794,735,671,612,585,557,445。

实施例8：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(4-甲氧基苄基)脲(HD08)：

参照实施例2的制备方法，得到白色固体0.39g，收率37.6％；m.p.：153.0-154.2℃；MS:520.2 [M+H]⁺,517.9[M-H]^-；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.08(s,1H),8.52(t,J＝2.2Hz,1H),8.33 (d,J＝5.8Hz,1H),7.75(d,J＝8.3Hz,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(dd,J＝9.1,7.3Hz,1H), 7.13(d,J＝5.9Hz,1H),7.04(d,J＝8.2Hz,1H),6.96–6.92(m,1H),6.85–6.71(m,2H),5.13(s, 2H),4.91(q,J＝8.8Hz,2H),4.24(d,J＝5.9Hz,2H),3.74(s,3H),2.21(s,3H)；IR(cm^-1)：3349, 3301,2949,2925,2884,2832,1605,1579,1561,1515,1468,1424,1363,1363,1363,1275,1251, 1169,1156,1133,1103,1038,975,863,816,728,637,561。

实施例9：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲(HD09)：

参照实施例1的制备方法，得到白色固体0.83g，收率76.4％；m.p.：153.2-154.2℃； MS:544.2[M+H]⁺,542.0[M-H]^-；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.90(s,1H),8.34(d,J＝5.7Hz, 1H),7.98(s,1H),7.52(d,J＝8.3Hz,1H),7.45(t,J＝7.9Hz,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(d, J＝5.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.2Hz,1H),6.94(d,J＝1.9Hz,1H),6.81(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H), 6.68(t,J＝5.9Hz,1H),5.13(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.23(d,J＝5.8Hz,2H),3.74(s,3H), 2.22(s,3H)；IR(cm^-1)：3412,3374,2940,2876,1702,1582,1551,1514,1477,1442,1380,1341, 1312,1255,1221,1182,1158,1111,1067,1028,1007,979,891,864,813,796,702,664,597,552。

实施例10：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(1-甲基哌啶-4-基)-3-(4-乙氧基苄基)脲(HD10)的制备：

采用实施例1的方法制得化合物3-甲氧基-4-[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基苄胺；

步骤V：称取3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺7.13g (20mmol)、1-甲基哌啶-4-酮2.26(20mmol)置于100ml烧瓶中，加入40mLMeOH搅拌溶解，加入AcOH 0.3g(5mmol)，室温下搅拌反应1h，称取氰基硼氢化钠分批次加入瓶中，放出大量气体。TLC确认反应完全后，减压蒸出甲醇，得到糊状物，加入2mol/LEtOH搅拌溶解，DCM 萃取，收集有机相，水洗，饱和食盐水洗涤，减压蒸出溶剂，得到黄色油状液体N-(1-甲基哌啶-4-基)-3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺7.52g，收率 82.91％。

步骤VI：称取固体光气(0.20g，0.67mmol)置于100mL茄型瓶中，加入10mL DCM室温搅拌溶解，称取4-乙氧基苄胺(0.30g，2mmol)，溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，逐渐析出固体。称取三乙胺(0.40g，4mmol)溶于12mL DCM中，室温搅拌下加入烧瓶中，固体逐渐溶解，得到澄清溶液。称取N-(1-甲基哌啶-4-基)-3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄胺(0.91g，2mmol)溶于12mLDCM中，室温搅拌下滴加进烧瓶中，加完后室温下搅拌半小时。停止反应，水洗反应液，饱和食盐水洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤蒸干溶剂得到油状液体，柱色谱分离得到白色固体HD-10 0.41g，收率32.5％；m.p.：119.0-121.2℃；MS:631.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.13(dd,J＝15.2,7.1Hz,3H),7.01(d,J＝8.3Hz,1H),6.84–6.75(m,4H),6.72(dd,J＝8.3,2.0Hz, 1H),5.11(s,2H),4.92(q,J＝8.7Hz,2H),4.36(s,2H),4.18(d,J＝5.6Hz,2H),3.98(q,J＝6.9Hz, 3H),3.63(s,3H),2.79(d,J＝11.0Hz,2H),2.21(s,3H),2.17(s,3H),2.00(t,J＝11.8Hz,2H), 1.61(qd,J＝12.2,3.8Hz,2H),1.48(d,J＝9.9Hz,2H),1.32(d,J＝7.0Hz,3H)；IR(cm^-1)：3348, 2937,2881,2837,2793,1612,1584,1509,1477,1447,1395,1374,1292,1253,1162,1131,1033, 1003,971,916,804,772,577。

实施例11：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-三氟甲基苯基)脲(HD11)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.79g，收率60.2％；m.p.：127.3-129.4℃； MS:657.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.52(s,1H),8.33(d,J＝5.6Hz,1H),7.58–7.51(m,2H),7.23(d,J＝8.6Hz,2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.03(d,J＝8.3Hz,1H),6.90(d,J ＝2.0Hz,1H),6.75(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),5.11(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.52(s,2H), 4.10(tt,J＝12.0,4.0Hz,1H),3.70(s,3H),2.83(d,J＝11.6Hz,2H),2.20(d,J＝5.4Hz,6H),2.06 (d,J＝10.0Hz,2H),1.70(tt,J＝12.4,6.7Hz,2H),1.55(d,J＝14.4Hz,2H)；IR(cm^-1)：3397,2950, 2848,2799,1648,1584,1513,1470,1416,1377,1293,1256,1227,1204,1159,1132,1031,982, 921,847,825,800,754,536。

实施例12：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-三氟甲基苯基)脲(HD12)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.73g，收率57.0％；m.p.：138.4-140.5℃； MS:641.1[M+H]⁺,321.5[M+2H]²⁺,639.5[M-H]^-；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.33(d,J＝5.6Hz,1H),7.67(d,J＝8.6Hz,2H),7.58(d,J＝8.7Hz,2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H), 7.03(d,J＝8.3Hz,1H),6.89(d,J＝2.0Hz,1H),6.75(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),5.10(s,2H),4.91 (q,J＝8.7Hz,2H),4.54(s,2H),4.16–4.07(m,1H),3.70(s,3H),2.84(d,J＝10.9Hz,2H),2.19 (s,6H),2.06(t,J＝10.0Hz,2H),1.72(q,J＝12.6,11.8Hz,2H),1.57(d,J＝11.4Hz,2H)； IR(cm^-1)：3387,2943,2846,2802,1650,1584,1513,1468,1416,1378,1313,1250,1224,1162, 1131,1063,1030,1016,981,862,843,811,753,577。

实施例13：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(4-甲氧基苯基)脲(HD13)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.71g，收率：58.9％；m.p.：179.1-180.8； MS:603.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.33(d,J＝5.7Hz,1H),8.12(s,1H),7.33– 7.26(m,2H),7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.90(d,J＝2.0Hz,1H),6.84– 6.74(m,3H),5.11(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.49(s,2H),4.08(tt,J＝11.3,3.9Hz,1H), 3.71(d,J＝1.9Hz,6H),2.80(d,J＝11.0Hz,2H),2.21(s,3H),2.17(s,3H),2.06–1.95(m,2H), 1.67(qd,J＝12.1,3.9Hz,2H),1.54(d,J＝12.0Hz,2H)；IR(cm^-1)：3403,2943,2836,2788,2759, 1642,1583,1511,1467,1446,1416,1373,1295,1250,1220,1159,1128,1034,1011,962,860, 824,737,666,576,542,441。

实施例14：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-三氟甲基苯基)脲(HD14)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.75g，收率58.5％；m.p.：160.4-162.2℃； MS:641.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.69(s,1H),8.33(d,J＝5.7Hz,1H),7.91(d, J＝2.0Hz,1H),7.74(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),7.46(t,J＝8.0Hz,1H),7.27(d,J＝7.8Hz,1H), 7.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.90(d,J＝2.0Hz,1H),6.76(dd,J＝8.3,2.0Hz, 1H),5.11(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.54(s,2H),4.11(tt,J＝12.1,3.9Hz,1H),3.70(s,3H), 2.84(d,J＝11.2Hz,2H),2.20(s,6H),2.05(d,J＝13.2Hz,2H),1.72(tt,J＝12.4,6.8Hz,2H), 1.57(d,J＝11.8Hz,2H)；IR(cm^-1)：3385,2940,2839,2791,2771,2735,1645,1583,1513,1493, 1468,1444,1376,1326,1247,1222,1152,1122,1030,1000,972,909,835,788,749,701,667, 540,458。

实施例15：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-氯-4-氟苯基)脲(HD15)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.69g，收率55.2％；m.p.：176.2-177.7℃； MS:625.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.54(s,1H),8.33(d,J＝5.6Hz,1H),7.74(dd, J＝6.9,2.6Hz,1H),7.41(ddd,J＝9.2,4.4,2.6Hz,1H),7.27(t,J＝9.1Hz,1H),7.14(d,J＝5.7 Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.89(d,J＝2.0Hz,1H),6.75(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),5.11(s, 2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.51(s,2H),4.08(tt,J＝12.1,3.9Hz,1H),3.71(s,3H),2.83(d,J＝ 11.2Hz,2H),2.20(d,J＝2.9Hz,6H),2.05(d,J＝11.7Hz,2H),1.71(qd,J＝12.3,3.7Hz,2H), 1.59–1.51(m,2H)；IR(cm^-1)：3403,3365,2940,2881,2822,1702,1598,1515,1448,1407,1370, 1319,1260,1217,1151,1107,1063,965,906,842,785,713,593,509,455。

实施例16：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-硝基苯基)脲(HD16)：

参照实施例10的制备方法，得到白色固体0.79g，收率64.0％；m.p.：157.5-159.1℃； MS:618.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.86(s,1H),8.47(t,J＝2.3Hz,1H),8.33(d, J＝5.7Hz,1H),7.92(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),7.79(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),7.51(t,J＝8.2Hz, 1H),7.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.91(d,J＝2.0Hz,1H),6.76(dd,J＝8.3, 2.0Hz,1H),5.10(s,2H),4.91(q,J＝8.7Hz,2H),4.55(s,2H),4.10(tt,J＝11.9,4.0Hz,1H),3.71 (s,3H),2.80(d,J＝11.0Hz,2H),2.20(s,3H),2.16(s,3H),2.00(t,J＝11.3Hz,2H),1.71(qd,J＝ 12.1,3.8Hz,2H),1.61–1.52(m,2H)；IR(cm^-1)：3366,2940,2842,2781,1657,1585,1512,1467, 1426,1376,1343,1248,1222,1161,1131,1032,1011,967,861,824,737,667,584,454。

药理实施例

实施例17：受试化合物对A549、MCF7、HCT-116、PC3细胞增殖的抑制活性

(1)实验材料

细胞系：A549、MCF7、HCT-116、PC3细胞分别以1500、2200、800、2000个/孔的密度铺于96孔板，每孔100ul，24h后使用。

编号HD01-HD16目标化合物：以DMSO溶解，用培养液稀释配制为50μM、20μM、10μM、5μM、2.5μM五个不同浓度保存于-20℃待用，DMSO在培养液中的终浓度低于0.1％。

阳性对照药：索拉非尼(sorafenib)。

MTT：以PBS溶解为2mg/mL，保存于-20℃。

(2)实验方法

利用MTT方法，选取A549、MCF7、HCT116、PC3细胞来评价供试样品的抗肿瘤增值活性。A549、HCT116、PC3细胞株在RPMI 1640培养基上进行培养，该培养基包含10％小牛血清(FBS)，MCF-7细胞株在DMEM培养基上进行培养，该培养基包含10％小牛血清(FBS)。当细胞增殖至80-90％时使其合并随后进行不超过20代的传代培养，然后在下一步处置前使它们适应环境达到24h。将这些细胞置于96孔板上，然后在含有5％CO₂的湿润环境中培养过夜并控温在37℃。24h过后加入不同浓度的发明代表性化合物。再经过24h的培养，向其中加入MTT(2mg/mL)并继续培养4h。移除培养基质，将晶体溶解于DMSO中，利用酶标仪(TECANSPECTRA,WetDar,德国)在570nm波长下测量吸光度。根据公式：细胞生长抑制率＝(1-药物组OD值/对照组OD值)×100％，计算相应浓度下的细胞生长抑制率，以受试化合物的不同浓度及对细胞的抑制率作对数曲线，计算受试化合物相对应的IC₅₀值。按照上述方法测定本发明代表性化合物。

在上述制得的16个化合物中，大多数对A549和HCT116细胞株都呈现出了较好的肿瘤细胞增殖抑制活性，其中HD12、HD14对四种癌细胞株的IC₅₀均低于5μM。HD14对A549 与HCT116细胞株的IC₅₀分别低至3.17±0.22μM和2.56±0.26μM，HD10、HD12也对HCT116 细胞株展现出了较强的增殖抑制作用，IC₅₀低至2.932±0.264和2.89±0.15μM。对于MCF7细胞株而言HD10-HD16均表现出了很好的增殖抑制作用，其中HD11、HD12、HD14、HD15 的IC₅₀都达到了3μM以下的水平。此外HD11、HD12、HD14、HD15四个化合物还对PC3 细胞株具有很好的增殖抑制活性。

总体来说，上述化合物结构R₂取代的1-甲基哌啶-4-基对于肿瘤细胞增殖抑制活性的影响具有较强的影响，HD10-HD16这7个R₂为1-甲基哌啶-4-基的化合物对四种肿瘤细胞的增殖抑制活性均具有较好的表现，大多数化合物的IC₅₀均可低至10μM以下。而在HD01-HD09 这9个化合物中R₂为氢，对肿瘤细胞的抗增值活性更具有选择性，对于A549和HCT116细胞株具有更强的抑制活性，而对MCF7和PC3细胞株则大多没有抑制活性。在R₁取代基中，含有氟原子或吸电子基取代时大多数化合物具有较好的肿瘤细胞增殖抑制活性，如具有三氟甲基苯基取代的化合物HD12、HD14。

制剂实施例

下列制剂实施例仅举例说明本发明的保护范围，但不以任何方式构成限定。以下实施例中所述的活性化合物即指上述实施例中制得的化合物HD-01～HD16。

实施例18：片剂配方

活性化合物25-1000mg，淀粉45mg，微晶纤维素35mg，聚乙烯吡咯烷酮(为10％水溶液)4mL，羧甲基纤维素钠4.5mg，硬脂酸镁0.5mg，滑石1mg。

实施例19：悬浮剂配方

活性化合物0.1-1000mg，羧甲基纤维素钠50mg，糖浆1.25mg，苯甲酸钠0.1mg，矫味剂25mg，着色剂5mg，加纯水至5mL。

实施例20：气溶胶配方

活性化合物0.25mg，乙醇25-75mL，抛射剂22(氯二氟甲烷)70mg。

实施例21：栓剂配方

活性化合物250mg，饱和脂肪酸甘油酯类2000mL。

实施例22：可注射制剂配方

活性化合物50mg，等渗盐溶液1000mL。

实施例23：软膏配方

微粉化活性化合物0.025g，液体石蜡10g，加软白蜡至100g。

实施例24：软膏配方

活性化合物0.025g，丙二醇5g，脱水山梨醇倍半油酸酯5g，液体石蜡10g，加软白蜡至 100g。

实施例25：水包油霜剂配方

活性化合物0.025g，十六醇5g，单硬脂酸甘油酯5g，液体石蜡10g，鲸蜡醇聚氧乙烯醚2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，丙二醇35g，加水至100g。

实施例26：水包油霜剂配方

微粉化活性化合物0.025g，软白蜡15g，液体石蜡5g，十六醇5g，Sorbimacrogolstearate (特定药用辅料级的吐温65)2g，脱水山梨醇单硬脂酸酯0.5g，山梨酸0.2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，加水至100g。

实施例27：油包水霜剂配方

活性化合物0.025g，软白蜡35g，液体石蜡5g，脱水山梨醉倍半油酸酯5g，山梨酸0.2g，柠檬酸0.1g，柠檬酸钠0.2g，加水至100g。

实施例28：洗剂配方

活性化合物0.25g，异丙醇0.5mL，羧基乙烯基聚合物3mg，NaOH 2mg，加水至1g。

实施例29：注射用悬浮液配方

活性化合物10mg，羧甲基纤维素钠7mg，NaCl 7mg，聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯 0.5mg，苯甲醇8mg，加无菌水至1mL。

实施例30：用于口腔和鼻吸入的气雾剂配方

活性化合物0.1％w/w，脱水山梨醇三油酸酯0.7％w/w，三氯氟甲烷24.8％w/w，二氯四氟乙烷24.8％w/w，二氯二氟甲烷49.6％w/w。

实施例31：雾化溶液配方

活性化合物7mg，丙二醇5mg，加水至10g。

实施例32：用于吸入的粉剂配方

用下述成份的混合物填充明质胶囊，微粉化活性化合物0.1mg，乳糖20mg，借助于吸入装置吸入该粉末。

实施例33：用于吸入的粉剂配方

球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化活性化合物0.1mg。

实施例34：用于吸入的粉剂配方

将球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化活性化合物0.1mg，微粉化乳糖1mg。

实施例35：胶囊剂配方

活性化合物1.0mg，小糖球321mg，Aquacoat ECD 30 6.6mg，乙酰柠檬酸三丁酯0.5mg，吐温-80 0.1mg，Eudragit L 100-55 17.5mg，柠檬酸三乙酯1.8mg，滑石粉8.8mg，消泡剂MMS 0.lmg。

实施例36：胶囊剂苗体配方

活性化合物2.0mg，小糖球305mg，Aquocoat ECD 30 5.0mg，乙酰柠檬三丁酯0.4mg，吐温-80 0.14mg，Eudragit NE30 D 12.6mg，Eudragit S 100 12.6mg，滑石粉0.l6mg。

实施例37：灌肠剂配方

活性化合物2mg，羧甲基纤维素钠25mg，乙二胺四乙酸二钠0.5mg，对羟基苯甲酸甲酯0.8mg，对羟基苯甲酸丙酯0.2mg，氯化钠7mg，柠檬酸1.8mg，吐温-80 0.01mg，加纯水至1mL。

实施例38：含有脂质体的配方

A.滴注配方的制备

将二棕榈酰基卵磷脂(45mg)，二肉豆蔻酰基卵磷脂(7mg)，二棕榈酰基磷脂酰甘油(1mg) 和活性化合物(5mg)放入玻璃管中，将所有组份溶解在氯仿中，用N₂蒸发掉大部分溶剂，然后减压，由此，在玻璃管表面形成脂质薄膜.在该脂质中加入水溶液(0.9％NaCl)，在高于脂质的转相温度下形成脂质体，所得悬液含有大小范围为极小囊泡至2μm的脂质体。

B.吸入用配方的制备

按实施例A制备脂质体，其中的水溶液含有10％乳糖，乳糖与脂质之比为7:3。将该脂质体悬液用干冰冷冻，并且进行冷冻干燥，将干燥产物微粉化，所得颗粒的质均空气动力学直径(MMAD)约为2μm。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims

1.一种如式I所示的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述式I结构为：

其中，

X为碳或氮；

n＝0或1；

R₁为甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、二甲氨基、氟或氯；

R₂为氢或1-甲基哌啶-4-基；

R₃为甲基或/和2,2,2-三氟乙氧基；

R₁、R₂、R₃可以为一个或多个。

2.根据权利要求1所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物为如下化合物中任一个：

HD03：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-3-(3-氯-4-氟苯基)脲；

HD16：1-{3-甲氧基-4-{[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲氧基}苄基}-1-(4-甲基哌啶-4-基)-3-(3-硝基苯基)脲；

3.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括作为活性成分的权利要求1或2所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其药学上可接受的盐中任何一个的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。

4.根据权利要求3所述的一种药物组合物，其特征在于，其为一种抑制酪氨酸激酶和丝苏氨酸激酶的药物组合物。

5.一种权利要求2所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物及其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物的制备路线如下：

其中，R₁和n如权利要求2对应结构所示。

6.一种权利要求1或2所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物或其药学上可接受的盐或权利要求3或4所述的药物组合物的应用，其特征在于，应用于制备BRaf激酶，表皮生长因子受体，血管内皮生长因子受体，血小板衍生生长因子受体或丝裂原活化的细胞外信号调节激酶抑制剂中。

7.一种权利要求1或2所述的1-取代苄基-3-芳基脲类化合物或其药学上可接受的盐或权利要求3或4所述的药物组合物的应用，其特征在于，应用于制备治疗肿瘤药物中。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤选自肺癌、肝癌、黑色素瘤、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌及肾癌。