CN113350251A - 一种具有美白功效的发酵微乳及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有美白功效的发酵微乳及其制备方法和应用。本发明的发酵微乳由复配表面活性剂(天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米复配)、中药发酵滤液和天然复合油脂复配而成，上述成分为纯天然植物成分或植物发酵原料，安全性好，透皮吸收率高，贮存稳定性好，相比于市面上常见的微乳，具有更高的渗透性、安全性好的特点，还具有美白、抗衰老等护肤功效，可用于制备具有美白、抗衰老功效的化妆品。

Description

一种具有美白功效的发酵微乳及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种具有美白功效的发酵微乳及其制备方法和应用，属于护肤品技术领域。

背景技术

所处区域不同，海拔、紫外线、日照时间长短等因素造成了不同肤色的人种，主要有白种人、黄种人、黑种人。黄种人。黄种人大多崇尚“以白为美”，特别是中国女性。众所周知，中国人自古有面若桃花，肤如凝脂的肤色追求，古代女性在脸上涂铅粉来获得靓丽白皙的皮肤。传统的美白剂如铅粉、重金属汞、氢醌等虽然都有极强的美白效果，但因具有毒性，伤害皮肤而被禁用。2013年，日本“杜鹃醇致白斑”的事件后，人们对美白剂的安全性担忧情绪日益加重。如前几年盛行的熊果苷，因分子中含有氢醌相似的结构，具有很好的酪氨酸酶抑制作用，起到美白作用。但后续研究表明α-熊果苷>2％时会破坏细胞膜，具有一定的细胞毒性。其同分异构体β-熊果苷多为人工合成，底料之一为氢醌，不可避免残留氢醌，会带来更大的安全性问题。

随着人们对天然植物油的护肤活性功能的研究与拓展，发现植物活性成分安全无毒的特性日益突显。近年来，微生物发酵作为一种新技术在市场上尤为活跃。例如，微生物发酵中药在中医药应用中得到了很大的体现。如片仔癀的主要成分是三七的微生物发酵物；神曲由面粉、赤小豆、苦杏仁、鲜青蒿、鲜苍耳、鲜辣蓼按一定比例混匀后经发酵而成的曲剂。众多的研究已经表明，发酵中药是现代生物技术和中药研究的完美结合。利用微生物发酵中药，能提高发酵中药制剂活性成分等含量，增强疗效，改变原有性能。中药发酵在化妆品行业同样具有广阔的前景。但无论是植物提取还是发酵得到的产物大部分都是水溶的，水溶性的物质在人体肌肤上比较难吸收。作为肤用化妆品，产品和成分的吸收，指的是活性物穿过死亡的角质层，慢慢进入表皮层甚至真皮层的过程。但发酵产物中的水溶性成分很难进入到皮肤当中，真正被肌肤吸收的效率并不高。相比于水溶性成分，脂溶性成分更容易被皮肤吸收。

微乳作为一种新的透皮技术逐渐在化妆品行业中应用起来。微乳是由水、油、表面活性剂和助表面活性剂按适当比例混合，自发形成的各向同性、透明、热力学稳定的分散体系，主要有油包水型和水包油型两种结构。水包油型微乳多作为亲脂性、难溶性药物的透皮促渗载体，而油包水型微乳，特别是阴离子型，因为具有增加亲水性、难渗透药物与角质层的相容性、改变脂质双分子层结构、减小粒径及易透过皮肤毛囊孔等性质，成为可能解决亲水性药物经皮渗透问题的一个新的途径。目前，在市面上最常见的复配乳化剂是Span80和Tween80，对人体皮肤有一定的刺激性。

因此，更应该考虑如何开发出一款更加天然、安全、高效的美白产品，从而提高水溶性美白物质的功效以及安全性。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种具有美白功效的发酵微乳制备方法及其应用，该微乳由发酵原料及纯天然原料制备而成，相比于市面上常见的微乳，具有更高的渗透性、安全性好的特点，还具有美白、抗衰老等护肤功效，可用于制备具有美白、抗衰老功效的化妆品。

本发明的技术方案是：一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，以其总重量为基准，各组分及重量百分比为：复配表面活性剂15-38％、中药发酵滤液5-45％，余量为天然复合油脂。其中，所述复配表面活性剂由天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米复配而成，二者重量比1.78～2.23：1，更优选为2.03：1。

优选的，所述的复配表面活性剂重量百分比为20-30％；更优选为25％。

优选的，所述中药发酵滤液重量百分比为30-45％；更优选为38％。

作为本发明的一个优选的实施方案，一种具有美白功效的发酵微乳，各组分及重量百分比为：复配表面活性剂29％，中药发酵滤液38％，余量为天然复合油脂。

各原料如下：

天然复合油脂：由向日葵籽油、牡丹籽油、葡萄籽油、紫苏籽油，按照重量比1-8：1-5：1-6：1-8的比例复配而成。

中药发酵滤液：是将酵母活化的灵芝菌与铁皮石斛、黄精、晚香玉、白芨、甘草共同发酵培养制得，发酵结束后精滤，再加入甘油、己二醇和戊二醇得到中药发酵滤液，多糖含量2.0-8.0mg/ml。所述发酵培养基中，按重量比计，铁皮石斛粉1-10％，黄精0.01-1％，晚香玉0.01-1％，甘草0.1-2％，白芨2-6％。其具体的制备方法如下：

①活化灵芝菌：

培养基：淀粉0.5-5％，酵母粉0.1-5％，氯化钠0.1-2％，碳酸钙0.01-0.1％，水补足100％；挑取灵芝菌菌丝体，接种至培养基中，25-35℃培养50-80h，得到灵芝种子液；

②中药双向发酵培养基制备：淀粉0.5-5％，酵母粉0.1-5％，氯化钠0.1-2％，碳酸钙0.01-0.1％，铁皮石斛粉1-10％，黄精0.01-1％，晚香玉0.01-1％，甘草0.1-2％，白芨2-6％，水补足100％，初始pH3.5-7.5；

③按照体积比1-15％接种量，接种灵芝种子液至中药双向发酵培养基中，25-35℃培养1-7d；

④发酵液后处理：发酵结束，发酵液灭菌，精滤，加入10-50％甘油，0.1-5％己二醇，0.1-5％戊二醇，再次灭菌后即得中药发酵滤液。

天然液晶乳化剂：由聚甘油-6、脂肪酸、芝麻籽油、乳酸复配制成。优选的，其组分重量比如下：脂肪酸(橄榄油)40-60％、聚甘油-6 10-40％、乳酸10-30％和芝麻籽油30-50％。

植物乳酸菌发酵米：是由天然植物精白米在水中由乳酸菌发酵得到的，其主要组成为：乳酸杆菌/大米发酵产物、精氨酸、麦芽糖醇。优选的，其组分重量比如下：天然精白米30-50％、乳酸菌5-20％、麦芽糖醇5-15％、精氨酸0.1-3％和水40-60％，将天然精白米加入水中，再加入乳酸菌发酵，将发酵好的发酵米用水洗净，干燥得到粉末的发酵米，然后再加入麦芽糖醇和精氨酸，即得植物乳酸菌发酵米。

本发明的另一个目的在于提供上述具有美白功效的发酵微乳的制备方法，具体包括：

①将天然复合油脂与天然液晶乳化剂混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为油相；

②将植物乳酸菌发酵米与中药发酵滤液混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为水相；

③将水相开启磁力搅拌，将油相加入到水相当中，至液体澄清透明，即得具有美白功效的发酵微乳。

另外，本发明还提供上述发酵微乳作为有效成分在制备美白功效的化妆品中的应用。

本发明的有益效果是：本发明的发酵微乳由复配表面活性剂、中药发酵滤液和天然复合油脂复配而成，上述成分为纯天然植物成分或植物发酵原料，安全性好，中药发酵滤液具有较好的美白、淡化色斑的功效。本发明以天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米为复配表面活性剂，中药发酵滤液为水相，以天然复合油脂为油相制备的油包水仿三元体系，透皮吸收率高，贮存稳定性好，相比于市面上常见的微乳，具有更高的渗透性、安全性好的特点，还具有美白、抗衰老等护肤功效，可用于制备具有美白、抗衰老功效的化妆品。

附图说明

图1为采用不同乳化剂比例(天然液晶乳化剂/天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米)下的中药发酵滤液的增药量图；

图2为以天然复合油脂为油相、中药发酵滤液作为水相，采用复配表面活性剂下的仿三元相图；

图3为发酵微乳贮存三个月内微乳粒径的大小变化图；

图4为发酵微乳在不同温度下的粒径变化图；

图5为实施例6和对比实施例1在不同时间下的中药发酵滤液的累计透皮率图；

图6为使用应用实施例3和对比应用实施例1-3的膏霜的志愿者在不同时间的皮肤黑红色素的总减少率图；

图7为使用应用实施例3具有美白功效微乳膏霜的受试者的面部色斑变化图。

具体实施方式

实施例1：天然液晶乳化剂的制备

原料配比：脂肪酸(橄榄油)40g、聚甘油-6 30g、乳酸10g和芝麻籽油30g。

制备方法：将脂肪酸(橄榄油)与聚甘油-6混合，然后加入乳酸，最后加入芝麻籽油，开启磁力搅拌600r/min，反应40min，即得天然液晶乳化剂。所制备的天然液晶乳化剂的HLB值为6。

实施例2：植物乳酸菌发酵米的制备

原料配比：天然精白米40g、水40g、麦芽糖醇8g、精氨酸2g和乳酸菌10g。

制备方法：将天然精白米加入水中，再加入乳酸菌发酵处理28-30h。将发酵好的发酵米用水洗净，干燥得到粉末的发酵米，然后再加入麦芽糖醇和精氨酸，即得植物乳酸菌发酵米。

实施例3：天然复配油脂的制备

制备方法：将50g向日葵籽油、20g牡丹籽油、20g葡萄籽油、10g紫苏籽油混合均匀，即得天然复合油脂。

实施例4：中药发酵滤液的制备

原料预处理：铁皮石斛粉碎过80目筛，取筛下部分备用。黄精、晚香玉、甘草、白芨粉碎过10目筛，取筛下部分备用。

①活化灵芝菌

培养基(重量比)：淀粉1％，酵母粉1％，氯化钠1％，碳酸钙0.1％，水96.9％，分装于250mL三角瓶中，每瓶装液量为800mL，120℃灭菌40min，冷却至常温。

挑取灵芝菌菌丝体，接种至培养基中，30℃，200rpm，培养60h；

②中药双向发酵培养基制备(重量比)：淀粉2％，酵母粉2％；氯化钠1％，碳酸钙0.1％，铁皮石斛粉5％，黄精1％，晚香玉1％，甘草1％，白芨3％，水83.9％，初始pH5.5，分装于500mL三角瓶中，每瓶装液量为100mL，120℃灭菌40min，冷却至常温。

③按照体积比10％接种量，接种灵芝种子液至中药双向发酵培养基中，30℃，200rpm，培养5d；

④发酵液后处理：发酵结束，发酵液120℃灭菌40min，冷却至常温，精滤，加入40％甘油，3％己二醇，4％戊二醇，80℃灭菌40min，冷却后即得中药发酵滤液，其多糖含量4.0-5.0mg/ml。

上述实施例1-4的原料用于制备实施例5-7及对比实施例1的发酵微乳。

实施例5：发酵微乳制备

原料配方(单位g)：天然液晶乳化剂19.42g、植物乳酸菌发酵米9.58g、中药发酵滤液38g、天然复合油脂33g。

制备方法：

①将天然复合油脂与天然液晶乳化剂混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为油相；

②将植物乳酸菌发酵米与中药发酵滤液混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为水相；

③将水相开启磁力搅拌，将油相加入到水相当中，至液体澄清透明，即得一种具有美白功效的发酵微乳。

实施例6：发酵微乳制备

原料配方(单位g)：天然液晶乳化剂16.75g、植物乳酸菌发酵米8.25g、中药发酵滤液30g、天然复合油脂45g。

制备方法：同实施例5。

实施例7：发酵微乳制备

原料配方(单位g)：天然液晶乳化剂12.73g、植物乳酸菌发酵米6.27g、中药发酵滤液13g、天然复合油脂68g。

制备方法：同实施例5。

对比实施例1：一种具有美白功效的发酵微乳(常见表活)

原料配方(单位：g)：Span80 15.9g、Tween80 14.1g、乙醇7g、天然复合油脂33g和中药发酵滤液30g。

制备方法：先将乙醇与中药发酵滤液混合，得到水相溶液；在磁力搅拌不间断搅拌的情况下，转速为600rpm，往反应釜中加入Span80和Tween80，最后加入天然复合油脂，至混合体系透明澄清，即得具有美白功效的发酵微乳(常见表活)。

应用实施例1：全油体系的按摩精油

原料配比(重量份)：GTCC(辛癸酸甘油酯)30份、山茶籽油29份、生育酚1份、实施例5具有美白功效的发酵微乳30份、白油10份。

制备方法为：将GTCC、山茶籽油、生育酚、实施例5具有美白功效的发酵微乳、白油混合后，在63℃水浴条件下加热直至混合均匀，静止冷却得到产品。

应用实施例2：O/W型膏霜

A相(重量份)：A165(乳化剂)2.5份、单甘脂1.5份、GTCC 3份、白油3份、十六十八醇2.5份、山嵛醇1.5份、硅油5份、实施例5具有美白功效的发酵微乳4份；

B相(重量份)：甘油4份、丁二醇4份、EMT-10(乳化剂)0.8份、汉生胶1.5份、馨鲜酮0.4份、己二醇0.4份、去离子水65.9份。

上述膏霜制备步骤如下：

1)将EMT-10、汉生胶先分散到甘油与丁二醇当中，然后加入馨鲜酮、己二醇和去离子水，在83℃水浴中加热并搅拌使其充分溶解，得到B相；

2)将A165、单甘脂、GTCC、白油、十六十八醇、山嵛醇、硅油、实施例5具有美白功效的发酵微乳在83℃的水浴中加热熔融，得到A相；

3)将A相与B相同时置于83℃的水浴中加热，待两相温度相同时，在500r/min搅拌B相的前提下，将A相缓慢加入到B相中；

4)B相与A相混合完毕，将膏霜在83℃水浴中恒温430r/min搅拌25min；

5)将膏霜取出，在常温下60r/min搅拌，至温度降至35℃，静止冷却得到产品。

应用实施例3：制备W/O型膏霜

A相(重量份)：ABIL EM90(乳化剂)1.5份、GTCC 4份、硅油8份、白油7份、实施例5具有美白功效的发酵微乳10份；

B相(重量份)：汉生胶0.2份、氯化钠0.7份、甘油7份、EG-1(聚甘油醚-26)9份、馨鲜酮0.5份、己二醇0.5份、去离子水51.1份。

制备步骤如下：

1)将汉生胶先分散到甘油当中，然后加入氯化钠、馨鲜酮、己二醇和去离子水，在80-85℃水浴中加热并搅拌使其充分溶解，得到B相；

2)将ABIL EM90、GTCC、白油、硅油和实施例5具有美白功效的发酵微乳在80-85℃的水浴中加热熔融，得到A相；

3)将A相与B相同时置于83℃的水浴中加热，待两相温度相同时，在500r/min搅拌B相的前提下，将A相缓慢加入到B相中；

4)待A相全部加入B相后，将EG-1分批多次加入到膏霜中；

5)待EG-1全部加入完毕后，将膏霜在83℃水浴中恒温430r/min搅拌25min；

6)将膏霜取出，在常温下60r/min搅拌，至温度降至35℃，静止冷却得到产品。

对比应用实施例1：W/O型膏霜(仅使用天然复合油脂)

A相(重量份)：ABIL EM90 1.5份、GTCC 4份、硅油8份、白油7份、实施例3天然复合油脂3.3g；

B相(重量份)：汉生胶0.2份、氯化钠0.7份、甘油7份、EG-1 9份、馨鲜酮0.5份、己二醇0.5份、去离子水58.3份。

制备方法：A相中采用天然复合油脂代替发酵微乳，其余具体步骤同应用实施例3。对比应用实施例2：W/O型膏霜(仅适用中药发酵滤液)

A相(重量份)：ABIL EM90 1.5份、GTCC 4份、硅油8份、白油7份；

B相(重量份)：汉生胶0.2份、氯化钠0.7份、甘油7份、EG-1 9份、馨鲜酮0.5份、己二醇0.5份、实施例4中药发酵滤液3.8份、去离子水57.8份。

制备方法：A相去掉发酵微乳，B相中加入中草药发酵滤液(与去离子水一起加入)，其余具体步骤同应用实施例3。

对比应用实施例3：W/O型膏霜(使用对比实施例1微乳)

A相(重量份)：ABIL EM90 1.5份、GTCC 4份、硅油8份、白油7份、对比实施例1微乳10份；

B相(重量份)：汉生胶0.2份、氯化钠0.7份、甘油7份、EG-1 9份、馨鲜酮0.5份、己二醇0.5份、去离子水52.6份

制备方法：A相中采用对比实施例1微乳代替实施例5发酵微乳，其余具体步骤同应用实施例3。

实验例1：配方筛选

表面活性剂、水相、油相及表面活性剂之间的比值(Km)都会影响微乳的形成能力。以高载水量，低表面活性剂含量以及良好粒径均一性为原则，以微乳相区面积为指标。筛选本发明所述具有美白功效的微乳的最佳配方。

1.油相的选择

选择性质稳定、肤感较好、溶解性好且来源较为天然的油脂作为油相，最终选择天然复合油脂作为油相。

2.水相的选择

水相选择以酵母为发酵菌种的灵芝、铁皮石斛、黄精、晚玉香、白芨、甘草发酵液，该发酵液纯天然发酵来源，且具有一定的美白功效。

3.表面活性剂的选择

本发明所述具有美白功效的微乳，作为原料应用到化妆品中，因此要求表面活性剂无毒，本发明进一步的要求表面活性剂要更天然更安全；而且表面活性剂要具有合适的亲水亲油平衡值(HLB)。

最终，选择天然液晶乳化剂与植物乳酸菌作为复配的表面活性剂。天然液晶乳化剂的HLB值为6，由100％植物原料制备，其主要成分为：聚甘油-6五油酸酯、芝麻籽油、乳酸，由聚甘油-6、脂肪酸、芝麻籽油、乳酸复配制成。植物乳酸菌发酵米是由天然植物精白米在水中由乳酸菌发酵得到的，其主要组成为：乳酸杆菌/大米发酵产物、精氨酸、麦芽糖醇。因此，这两种乳化剂更符合天然安全和适合的HLB值得要求。

在相同的试验条件下，考察了天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米不同重量配比组成的1g的复配表面活性剂的最大增药量。最大增药量通过如下的方法测定：

取天然液晶乳化剂/植物乳酸菌发酵米不同配比的表面活性剂1g，加入天然复合油脂4g，磁力搅拌器搅拌下往其中滴加中药发酵滤液，测量各时刻电导率并记录电导率突变时的中药发酵滤液加入量，此刻得到的就是具有美白功效的发酵微乳的最大的增药量。以天然液晶乳化剂/植物乳酸菌发酵米(重量比)和最大增药量做图来确定最佳配比，结果见图1。

从图1可以得出结论：当天然液晶乳化剂：植物乳酸菌发酵米＝1.78～2.23：1时，复配表面活性剂的最大增药量≥0.8g；天然液晶乳化剂：植物乳酸菌发酵米＝2.03：1时，最大增药量达到峰值(0.9g)。

因此，复配表面活性剂中，天然液晶乳化剂与植物乳酸菌发酵米的重量比优选为天然液晶乳化剂：植物乳酸菌发酵米＝1.78～2.23：1，更优选为天然液晶乳化剂：植物乳酸菌发酵米＝2.03：1。

选择天然液晶乳化剂与植物乳酸菌发酵米为复合表面活性剂，且其重量比：天然液晶乳化剂：植物乳酸菌发酵米(Km)＝2.03：1；天然复合油脂为油相、中草药发酵液作为水相，绘制仿三元相图，结果见下图2。

通过上述研究，优选出本发明所述具有美白功效微乳的组成是：以天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米为复配表面活性剂，中草药发酵滤液为水相，以天然复合油脂为油相。

实验例2：具有美白功效的发酵微乳稳定性测试

①离心测试对实施例5的具有美白功效的发酵微乳进行离心测试，以3000r/min离心30min，离心后乳液依然保持澄清透明不分层，这说明微乳的稳定性良好。

②贮存三个月微乳粒径的大小变化如图3所示。从图3中可知，微乳在三个月时间内微乳粒径基本无变化，这说明微乳的稳定性良好。

③对实施例5的具有美白功效的发酵微乳进行高温试验，取制备好的微乳液密封于安瓿瓶中，分别保存在25、40、60、80℃的烘箱中。静置24h后取出，利用Zeta sizer nanoZS纳米粒度分析仪测定粒径大小。从图4中可得在20～70℃时微乳液粒径大小变化不明显，当温度达到80℃后，粒径明显增大。表明该微乳液常温保藏稳定，不适合高温贮藏。

实验例3：透皮吸收测试

取体重为18～22g雄性小鼠，断颈处死，剃净腹部体毛，取无损伤皮肤，除去皮下脂肪，用生理盐水冲洗皮肤内表面。将皮肤固定在扩散池的上、下两室之间，角质层朝上，接受液为0.9％的生理盐水溶液(接受池体积为17.2mL，透过面积为2.83cm²)，释放液为实施例6微乳和对比实施例1。将装置置于(32±0.5)℃恒温水浴中，开动搅拌(300r·min^-1)，分别于1、2、4、6、8h取样2mL，同时补加相同温度等体积新鲜接受液。样品用0.22μm微孔滤膜过滤，取样品续滤液1mL用紫外分光光度计进行分析(以中药发酵滤液中的主要成分总糖为指标进行测定)，并计量发酵微乳的累计透过量，结果如图5所示。由图5可知，实施例6具有美白功效的发酵微乳相比于对比实施例1(常见的表面活性剂)微乳的透皮率更好，累计透过量更高。

上述紫外分光光度计进行分析采用DNS法测定总糖法(目前使用较多的一种方法)，具体步骤为：将接受池中的滤液加蒸馏水定容至10ml放在锥形瓶中，加入6mol/LHCL10ml，在沸水中加热0.5h，取出1-2滴置于白瓷版上，加1滴I-KI溶液检查水解是否完全。如已水解完全，则不呈现蓝色。水解完毕，冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，以6mol/LNaOH溶液中和至溶液呈为红色，并定容到50ml。然后用紫外分光光度计测定在540nm处的吸收峰，分别测量初始滤液的紫外分光光度计产生的峰值A0、以及第x小时接收池中紫外风光光度计产生的峰值Ax，此时，发酵微乳的累计透皮率＝(Ax/A0)*100％，X＝1、2、4、6、8。

应用实验例1：红黑色素实验

人体皮肤的颜色与皮肤中的色素种类和数量有关，其中黑红色素对皮肤颜色的影响最大。皮肤中含有的黑红色素越多则肤色越深，反之，皮肤中含有的黑色素红越少则肤色越浅。因此，可以通过测量皮肤中黑红色素的含量变化评价样品的美白效果。

选取健康、皮肤正常且无化妆品过敏史的女性志愿者60名，年龄为25～40岁，分为4组，每组15人，分为对比应用实施例1、2、3组和应用实施例3组。测试前，先对志愿者的脸部进行空白测试，然后志愿者分别使用不同的样品，每天早晚各使用一次，并在使用后第2、4、6和8周使用皮肤黑色素和血红素测试仪(MX18)进行皮肤黑红色素含量测试，计算各组志愿者皮肤黑红色素的平均变化率，结果如图6所示。

由图6可知，将实施例5所制备的具有美白功效的发酵微乳应用到配方中具有明显的美白效果，且美白效果要优于单独的中药发酵滤液、单独的天然复合油脂和常见的复配表活所制备的微乳，这说明将中草药发酵滤液与天然液晶乳化剂/植物乳酸菌发酵米搭配使用，具有协同美白的效果。

应用实验例2：斑贴实验

选取健康、皮肤正常且无化妆品过敏史的男/女性志愿者32名，年龄为18-60岁，选用合格的斑试器，将0.020-0.0025ml应用实施例3/对比应用实施例3对比放入斑试器小室内。将加有应用实施例3/对比应用实施例3的斑试器贴敷在受试者背部，持续24h。24小时候去除受试物斑器，分别于0.5h、24h、48h观察皮肤反应，按《化妆品安全技术规范》(2015版)中皮肤反应分级标准。对比发现涂有涂抹含有应用实施例3具有美白功效微乳膏霜对受试者的刺激更小，结果如表1所示。

表1斑贴实验设计及实验结果

应用实验例3：Visia-CR面部色斑分析

选择年龄范围在30～40周岁的中国健康女性受试者。在受试者使用应用实施例3前(D0)及连续使用产品28天(D28)，用Visia-CR拍摄受试者面部照片。28天后涂抹含有应用实施例3具有美白功效微乳膏霜的受试者的面部色斑有明显的淡化和减少，结果如图7所示。

Claims (9)

1.一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，以其总重量为基准，各组分及重量百分比为：复配表面活性剂15-38％、中药发酵滤液5-45％，余量为天然复合油脂；

所述复配表面活性剂由天然液晶乳化剂和植物乳酸菌发酵米复配而成，二者重量比1.78～2.23：1。

2.如权利要求1所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，所述天然复合油脂是由向日葵籽油、牡丹籽油、葡萄籽油、紫苏籽油，按照重量比1-8：1-5：1-6：1-8的比例复配而成。

3.如权利要求1所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，所述中药发酵滤液是将酵母活化的灵芝菌与铁皮石斛、黄精、晚香玉、白芨、甘草共同发酵培养制得，发酵结束后精滤，再加入甘油、己二醇和戊二醇得到中药发酵滤液；所述发酵培养基中，按重量比计，铁皮石斛粉1-10％，黄精0.01-1％，晚香玉0.01-1％，甘草0.1-2％，白芨2-6％。

4.如权利要求3所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，所述中药发酵滤液的制备方法为：

①活化灵芝菌：

培养基的组分及质量比：淀粉0.5-5％，酵母粉0.1-5％，氯化钠0.1-2％，碳酸钙0.01-0.1％，水补足100％；

挑取灵芝菌菌丝体，接种至培养基中，25-35℃培养50-80h，得到灵芝种子液；

②中药双向发酵培养基制备：按质量比，淀粉0.5-5％，酵母粉0.1-5％，氯化钠0.1-2％，碳酸钙0.01-0.1％，铁皮石斛粉1-10％，黄精0.01-1％，晚香玉0.01-1％，甘草0.1-2％，白芨2-6％，水补足100％，初始pH3.5-7.5；

③按照体积比1-15％接种量，接种灵芝种子液至中药双向发酵培养基中，25-35℃培养1-7d；

④发酵液后处理：发酵结束，发酵液灭菌，精滤，加入10-50％甘油，0.1-5％己二醇，0.1-5％戊二醇，再次灭菌后即得中药发酵滤液。

5.如权利要求1-4中任一项所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，所述的复配表面活性剂重量百分比为20-30％。

6.如权利要求1-4中任一项所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，所述中药发酵滤液重量百分比为30-45％。

7.如权利要求1-4中任一项所述的一种具有美白功效的发酵微乳，其特征是，各组分及重量百分比为：复配表面活性剂29％，中药发酵滤液38％，余量为天然复合油脂。

8.如权利要求1-4中任一项所述的发酵微乳的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

①将天然复合油脂与天然液晶乳化剂混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为油相；

②将植物乳酸菌发酵米与中药发酵滤液混合，微加热搅拌至其完全溶解，放置到室温，作为水相；

③将水相开启磁力搅拌，将油相加入到水相当中，至液体澄清透明，即得具有美白功效的发酵微乳。

9.权利要求1-4中任一项所述的发酵微乳作为有效成分在制备美白功效的化妆品中的应用。

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