CN113337430B - 一株副干酪乳杆菌nsl0201及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株副干酪乳杆菌NSL0201及其应用。所述副干酪乳杆菌NSL0201的分类命名为副干酪乳杆菌Lacticaseibacillus paracasei,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2021626,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,菌落为乳白色,圆形或类圆形,直径在1.0 mm以上;表面隆起光滑,边缘整齐;菌体为短杆状,两端钝圆,呈短链状排列。所述副干酪乳杆菌NSL0201对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有很好的抑制性,并经过实验验证,该菌能够通过抑制肝脏指数或血脂水平的升高、炎症因子的分泌,降低内毒素含量等达到缓解或治疗慢性酒精性肝肠类疾病的作用。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一株副干酪乳杆菌NSL0201及其应用。
背景技术
酒精性肝病是由于长期大量饮酒导致的肝脏疾病,其主要临床特征是恶心、呕吐、黄疸、可有肝脏肿大和压痛。酒精性肝病是我国常见的肝脏疾病之一,严重危害人民健康。近年来,酒精性肝病占同期肝病住院患者的比例在不断上升。酒精性肝病主要是乙醇及其衍生物的代谢过程中直接或间接诱导的炎症反应,氧化应激、肠源性内毒素、炎性介质和营养失衡(尤其是蛋白质一热量营养不良)等多种因素相互作用的结果。尤其是肠道屏障功能受损引起的肠源性内毒素血症及内毒素激活枯否细胞在ALD的发生和发展中有重要作用。目前治疗酒精性肝病的药物有糖皮质激素、美他多辛、S-腺甘基蛋氨酸等,但这些药物可能会为患者带来不少的副作用,比如少量出现外展神经病症、体内代谢紊乱、机体免疫力下降、血糖升高和骨质疏松等。即使S-腺甘基蛋氨酸无任何副作用,但需要注射用药,也使得患者用药不方便。
益生菌是可以通过定殖在人体内,改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物,其能够产生有利于机体健康的作用。目前发现,益生菌在增强免疫功能、抗肿瘤等方面均具有重要的作用,且益生菌在许多胃肠道疾病的治疗中也能发挥有益的作用。因此,通过益生菌来达到缓解或治疗酒精性肝病,非常有利于患者的身心健康。
发明内容
本发明的目的在于提供一株副干酪乳杆菌NSL0201及其应用,该菌来源安全,具有产酸性和抑制致病性细菌的作用,还能够有效缓解或治疗肝肠类疾病。
为实现上述发明目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
本发明提供了一株副干酪乳杆菌NSL0201,所述副干酪乳杆菌NSL0201的分类命名为副干酪乳杆菌Lacticaseibacillus paracasei,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2021626。
进一步的,所述副干酪乳杆菌NSL0201的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
进一步的,所述副干酪乳杆菌NSL0201的菌落为乳白色,圆形或类圆形,直径在1.0mm以上;表面隆起光滑,边缘整齐;菌体为短杆状,两端钝圆,呈短链状排列,表面较光滑,无芽孢。
本发明还提供了所述的副干酪乳杆菌NSL0201在用于制备致病性细菌抑制剂中的应用。
进一步的,所述致病性细菌包括金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
本发明还提供了所述的副干酪乳杆菌NSL0201在制备缓解或治疗慢性酒精性肝肠类疾病的保健品或药物中的应用。
进一步的,所述慢性酒精性肝肠类疾病包括慢性酒精导致的肝氧化性损伤、肝炎、脂肪肝、肝功能性损伤和肠源性内毒素血症。
进一步的,所述副干酪乳杆菌NSL0201通过抑制肝脏指数或血脂水平的升高,恢复血清中功能性指标ALT、AST和γ-GT以及氧化损伤指标SOD和GSH的水平,抑制肝脏中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌,降低血清中内毒素的含量,从而达到缓解或治疗肝肠类疾病的作用。
进一步的,所述保健品或药物中包含菌含量不少于5×1010CFU/mL的副干酪乳杆菌NSL0201菌悬液或者菌含量不少于5×1010CFU/g的副干酪乳杆菌NSL0201菌粉
进一步的,在使用所述保健品或药物时,保证患者每天摄入不少于1×109CFU/g的副干酪乳杆菌NSL0201。
与现有技术相比,本发明具有以下优点和技术效果:
本发明从酸奶中分离到一株副干酪乳杆菌NSL0201,来源安全,其具有产酸性能,能耐受低浓度的胆盐但不耐强酸。副干酪乳杆菌NSL0201对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著的抑制作用。本发明还将副干酪乳杆菌NSL0201制备成菌粉后稀释成菌悬液,用于慢性酒精暴露的动物实验中,经验证副干酪乳杆菌NSL0201能够有效抑制慢性酒精暴露引起的肝指数升高、脂水平升高、肝脏和血清中炎性因子以及内毒素水平增高,进而起到降脂护肝、缓解或治疗慢性酒精性肝损伤、肝脏氧化损伤、肝脏炎症等多种肝脏疾病的作用,且副干酪乳杆菌NSL0201的作用效果好,不会产生副作用以及耐药性,安全可靠,具有很好的应用价值。
附图说明
图1为副干酪乳杆菌NSL0201的平板培养照片。
图2为副干酪乳杆菌NSL0201的菌体镜检照片。
图3为副干酪乳杆菌NSL0201的发酵液照片。
图4为副干酪乳杆菌NSL0201的抑菌试验结果图,其中左侧为金黄色葡萄球菌的抑菌圈,右侧为大肠杆菌的抑菌圈。
具体实施方式
结合以下具体实例对本发明的技术方案作进一步详细的说明。下述实施例中,如无特殊说明,所使用的实验方法均为常规方法,所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。
实施例1:副干酪乳杆菌NSL0201的分离鉴定
1、菌株的分离筛选
以来源于西藏自治区那曲市色尼区色尼雄村的传统发酵酸奶为样品,混匀样品,吸取1mL样品加到含9mL 0.9%生理盐水的无菌试管中,取200μL的样品液涂于改良MRS固体培养基上,于37℃培养48h,挑取菌株的典型单菌落再次接种至改良MRS固体培养基上划线纯化培养,再挑取单菌落转接至改良MRS液体培养基中扩增培养,37℃培养后,采用划线法将培养的菌液重复划线于改良MRS固体平板上,进行纯化,重复纯化3次。纯化三代后,得到的单菌落编号为NSL0201。将菌株于-80℃冻存,进行后续的实验。
如图1和图2所示,所述菌株NSL0201是兼性厌氧性细菌,呈革兰氏阳性,菌落为乳白色,圆形或类圆形,直径在1.0mm以上;表面隆起光滑,边缘整齐;菌体为短杆状,两端钝圆,呈短链状排列,表面较光滑,无芽孢。
2、菌株的16S rRNA鉴定
提取菌株NSL0201的DNA作为模板,利用细菌16S rRNA通用引物27F(5’-GAG AGTTTG ATC CTG GCT CAG-3’)和1492R(5’-ACG GAT ACC TTG TTA CGA CTT-3’)进行扩增,扩增片段送至生物公司进行序列测定,测序结果如SEQ ID No.1所示。BLAST比对结果表明,菌株NSL0201与Lacticaseibacillus paracasei的序列相似性为99.50%,因此判断菌株NSL0501为副干酪乳杆菌。
将筛选到的菌株NSL0201进行菌种保藏,所述副干酪乳杆菌NSL0201的保藏单位:中国典型培养物保藏中心(CCTCC);地址:湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山;保藏日期:2021年5月31日;副干酪乳杆菌Lacticaseibacillus paracasei的保藏编号为CCTCC M2021626。
实施例2:副干酪乳杆菌NSL0201的生理生化性质
1、生长曲线和产酸特性
将副干酪乳杆菌NSL0201划线于改良MRS固体培养基上,37℃条件下培养16h,以3%的接种量接种到MRS液体培养基中,置于37℃厌氧培养,得到发酵液(图3)。每隔1h取样,以MRS液体培养基作为空白对照,于波长600nm处测定不同培养时间菌株发酵液OD值和pH值。
结果如表1所示,副干酪乳杆菌NSL0201在培养的前2h为生长迟缓期,随后进入对数生长期,待培养至3-5h时进入对数生长末期,6-12h为生长稳定期,接着进入衰亡期,从而完成整个生长周期。且随着NSL0201的生长,菌液的pH逐渐下降,在生长6小时后,pH趋向于稳定,说明NSL0501具有产酸特性。
表1:副干酪乳杆菌NSL0201的产酸特性和生长曲线OD值
培养时间 | pH | OD |
0h | 5.77 | 0.315 |
1h | 5.65 | 0.359 |
2h | 5.13 | 0.907 |
3h | 4.70 | 2.74 |
4h | 4.48 | 5.728 |
5h | 4.17 | 7.456 |
6h | 4.00 | 7.26 |
7h | 3.98 | 7.15 |
8h | 3.95 | 7.41 |
9h | 3.94 | 7.05 |
10h | 3.95 | 7.18 |
11h | 3.97 | 7.00 |
12h | 3.94 | 7.41 |
2、耐酸和耐胆盐特性
将充分活化的菌株按3%的比例分别接种到pH为3的人工胃液和胆盐浓度为0.2%的人工肠液中,控制接种后培养基中活菌数浓度在1×l06cfu/mL,37℃恒温培养,在1、2、3、4、5、6h分别测定发酵液的活菌数。以改良MRS培养基为对照,平板计数活菌数,存活率=实验条件下活菌数/对照组活菌数×100%。
结果如表2所示,随着培养,副干酪乳杆菌NSL0201对0.2%的胆盐具有一定的耐受作用,在胃液中能够短时间存活,却不能长时间耐受胃液的强酸。
表2:副干酪乳杆菌NSL0201的耐胆盐和耐酸检测结果
时间 | 胆盐存活率(%) | 胃液存活率(%) |
1 | 85 | 35 |
2 | 79 | 15 |
3 | 67 | 7 |
4 | 60 | 2 |
5 | 55 | 0 |
6 | 51 | 0 |
3、抑菌试验
将致病性的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别均匀划线接种于营养琼脂培养基中,将牛津杯放置在培养基上,再加入200μL的副干酪乳杆菌NSL0201发酵液,置于37℃培养24h,观察抑菌圈大小。
结果如图4所示,副干酪乳杆菌NSL0201对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有明显的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为18mm,对大肠杆菌的抑菌圈直径为27mm。
实施例3:副干酪乳杆菌NSL0201菌粉的制备
取冻存保藏的菌株在改良MRS固体平板上划线,37℃培养48h,然后挑取单菌落接种于改良MRS液体培养基中,37℃培养16h,再以3%的接种量接种至2L的改良MRS液体培养基中,37℃培养16h,培养至对数期;菌悬液在4℃下,12000r/min,离心10min,弃去上清液,收集菌体;菌体用超纯水洗涤,再次离心,重复清洗两次,离心后得到菌泥;用12%的脱脂乳溶液重悬菌泥,经真空冷冻干燥冻干后,于-20℃保存。
所述副干酪乳杆菌NSL0201菌粉在使用前用0.9%生理盐水梯度稀释成菌含量不少于5×1010CFU/mL的菌悬液,并利用倾注法对活菌数进行计数。
实施例4:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精性肝损伤的缓解或治疗作用
1、小鼠实验设计
SPF级健康C57BL/6雄性小鼠50只,8周龄,适应性喂养一周后,随机分成5组,每组10只。将酒精建模组小鼠增加含酒精的Lieber DeCarli酒精液体饲料,酒精适应性喂养一周后,采用含20%热量酒精的Lieber DeCarli酒精液体饲料连续喂养6周。药物干预组和益生菌组小鼠在最后4周饲料中添加药物干预。益生菌组每只小鼠平均每天获得不少于1×109CFU/mL的益生菌,菌悬液按照0.2mL/只/天的剂量灌胃。小鼠具体分组如表3所示,其中药物选择葵花牌护肝片,并以人体用量换算为小鼠用量,为2mg/kg/d/鼠。
表3:小鼠分组情况
2、小鼠样本收集及处理
小鼠喂养10周后,收取小鼠新鲜粪便样品。禁食12h后,麻醉后迅速摘眼球取血,辅以颈椎脱臼法处死。收集血液样本,于4℃静置1h,12000r/min,离心15min,小心收集上层血清。将解剖后的小鼠肝脏在4℃的生理盐水中漂洗拭干,称重,并取左叶完整切片用;另取0.1g肝组织匀浆用,加入0.9mL预冷的生理盐水充分研磨,使肝组织匀浆化,4℃下,12000r/min,离心15min,小心收集上清即为肝匀浆液。将解剖后的小鼠回肠组织在4℃的生理盐水中漂洗拭干,称重,取0.1g组织提取RNA用。所有样品均于-80℃冰箱超低温保存。
3、指标检测
(1)小鼠体重、肝重及肝脏指数的测定
在实验过程中,每周测定小鼠的体重1次。处死前测定小鼠的空腹体重,记为V1;小鼠解剖后取完整的肝脏在4℃的生理盐水中漂洗拭干,称重,记为V2;肝脏指数为肝脏重量与体重的质量比,记为V2/V1。
(2)小鼠血清生化指标的测定
小鼠血清中谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanineaminotransferase,ALT)和谷氨酰基转移酶(Gamma glutamyl transpeptidase,γ-GT)的活性,以及血清中甘油三酯(Triglycerides,TG)和总胆固醇(Totalcholesterol,TC)的含量,均利用全自动血清生化分析仪进行测定。
(3)小鼠肝脏氧化指标的测定
小鼠肝匀浆中SOD活性、GSH和MDA含量的测定,均按照相应的试剂盒的具体说明进行操作。
(4)小鼠血清内毒素含量的测定
小鼠血清中内毒素LPS的含量采用酶联免疫分析法(ELISA),按照相应的ELISA试剂盒的相关操作说明进行测定。
(5)小鼠肝脏炎症因子水平的测定
小鼠肝脏中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平均采用酶联免疫分析法,按照R&D公司相应的ELISA试剂盒的相关操作说明进行检测。
4、实验结果
(1)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠体重、肝重和肝指数的影响
肝指数是肝脏重量与体重的质量比,在一定程度上反映了肝脏的健康状况。如表4所示,各组小鼠体重间无显著性差异。然而,与对照组相比,慢性酒精饲喂后小鼠肝重增加,肝指数显著升高(p<0.05)。副干酪乳杆菌NSL0201和药物干预后,小鼠肝重减轻,且肝指数显著降低(p<0.05),但干酪乳杆菌干预组小鼠仅肝重减轻,而肝指数则没有显著降低。该结果表明副干酪乳杆菌NSL0201能够有效抑制慢性酒精暴露导致的小鼠肝指数升高,且效果与药物相似,而干酪乳杆菌则无明显效果。
表4:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠体重、肝重和肝指数的影响
注:*表示与酒精建模组相比有显著性差异(p<0.05)。
(2)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清肝功能指标的影响
血清转氨酶ALT、AST是评价肝功能最常用的生化指标。ALT和AST主要存在于包括肝脏在内的多种组织中,当肝脏受损时,转氨酶便会进入血液,导致血清中ALT和AST水平升高。γ-GT是一种胆汁淤积肝酶,当胆管阻塞肝内胆汁淤积时,γ-GT便会积聚并漏出进入血液,导致血清中γ-GT水平升高。
对小鼠血清中ALT、AST和γ-GT水平进行分析,结果如表5所示,与空白对照组相比,酒精建模组小鼠血清中ALT、AST和γ-GT水平均显著升高(p<0.05),表明慢性酒精暴露导致了小鼠肝脏损伤。副干酪乳杆菌NSL0201干预后,这些肝功能指标水平均显著下降(p<0.05),恢复至正常水平,效果优于药物的使用。干酪乳杆菌干预组小鼠血清中,这三种酶的水平都没有明显降低,仍与模型组比较接近。并且,在对小鼠血清转氨酶ALT和AST水平的恢复作用上,副干酪乳杆菌NSL0201与干酪乳杆菌之间具有显著差异(p<0.05)。该结果表明副干酪乳杆菌NSL0201能够有效抑制慢性酒精暴露导致的小鼠肝损伤,而干酪乳杆菌则没有显著效果。
表5:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清肝功能指标的影响
组别 | ALT(U/L) | AST(U/L) | γ-GT(U/L) |
空白对照组 | 27.43±1.48<sup>a</sup> | 60.56±4.46<sup>a</sup> | 4.21±1.57<sup>a</sup> |
酒精建模组 | 52.65±2.53<sup>b</sup> | 109.24±3.04<sup>b</sup> | 6.07±1.69<sup>b</sup> |
药物干扰组 | 30.46±1.89<sup>a</sup> | 68.98±4.01<sup>a</sup> | 4.43±1.41<sup>a</sup> |
目标菌组 | 24.04±1.96<sup>a</sup> | 58.95±3.87<sup>a</sup> | 4.18±1.01<sup>a</sup> |
干扰菌组 | 41.58±2.67<sup>b</sup> | 99.97±2.85<sup>b</sup> | 4.80±0.56<sup>a</sup> |
注:表中不同字母a、b表示两者对应组之间具有显著差异(p<0.05)。
(3)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清中脂肪含量的影响
结果如表6所示,与空白对照组相比,酒精建模组小鼠血清中TG和TC水平明显升高(p<0.05),表明慢性酒精暴露导致了小鼠体内脂肪堆积,副干酪乳杆菌NSL0201、护肝药物干预后,小鼠血脂水平均显著下降(p<0.05),恢复至正常水平。该结果表明副干酪乳杆菌NSL0201可以有效抑制慢性酒精导致的小鼠血脂水平升高,起到降脂护肝的作用,而干酪乳杆菌则没有显著效果。
表6:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清中脂肪含量的影响
组别 | TG(mmol/L) | TC(mmol/L) |
空白对照组 | 0.75±0.23<sup>a</sup> | 2.43±0.58<sup>a</sup> |
酒精建模组 | 1.34±0.31<sup>b</sup> | 3.47±0.67<sup>b</sup> |
药物干扰组 | 0.72±0.26<sup>a</sup> | 2.48±0.62<sup>a</sup> |
目标菌组 | 0.81±0.19<sup>a</sup> | 2.41±0.53<sup>a</sup> |
干扰菌组 | 1.14±0.34<sup>b</sup> | 3.01±0.74<sup>b</sup> |
注:表中不同字母a、b表示两者对应组之间具有显著差异(p<0.05)。
(4)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠肝脏氧化应激水平的影响
表7显示了各组小鼠肝脏中氧化指标SOD、GSH和MDA水平的结果和比较。与空白对照组相比,酒精建模组小鼠肝脏中SOD活性和GSH含量明显降低,MDA含量明显上升,说明慢性酒精暴露导致了小鼠肝脏氧化损伤。副干酪乳杆菌NSL0201、护肝药物的干预均能显著恢复慢性酒精暴露小鼠肝脏中SOD和GSH的水平(p<0.05),同时降低MDA的浓度(p<0.05)。在干酪乳杆菌干预组小鼠肝脏中这些氧化指标没有明显恢复。并且,副干酪乳杆菌NSL0201与干酪乳杆菌干扰组在对小鼠肝脏中MDA水平的降低作用上具有显著差异(p<0.05),表明副干酪乳杆菌NSL0201能够有效抑制或治疗慢性酒精暴露导致的小鼠肝脏氧化损伤。
表7:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠肝脏氧化应激水平的影响
组别 | SOD(μ/ng蛋白) | GSH(μmol/g蛋白) | MDA(nmol/ng蛋白) |
空白对照组 | 127.56±20.23a | 7.43±0.78a | 3.81±0.54a |
酒精建模组 | 81.34±17.31b | 3.97±0.37b | 6.97±1.74b |
药物干扰组 | 117.79±23.54a | 7.08±1.12a | 3.96±0.97a |
目标菌组 | 120.91±25.09a | 7.51±1.23a | 4.04±0.88a |
干扰菌组 | 104.64±20.44ab | 5.51±0.94ab | 5.02±1.12b |
注:表中不同字母a、b表示两者对应组之间具有显著差异(p<0.05)。
(5)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠肝脏炎症因子水平的影响
结果如表8所示,与空白对照组相比,慢性酒精喂养后的酒精建模组小鼠肝脏中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的水平显著升高(p<0.05),表明慢性酒精暴露导致了小鼠肝脏发生了炎症反应。而酒精模型组小鼠肝脏中高水平的TNF-α、IL-1β和IL-6通过副干酪乳杆菌NSL020、护肝药物干预后均显著降低(p<0.05),恢复至正常水平。然而,干酪乳杆菌干预组小鼠肝脏中炎症因子水平仍较高,没有显著降低。表明副干酪乳杆菌NSL020能够有效抑制或治疗慢性酒精暴露导致的小鼠肝脏炎症反应。
表8:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠肝脏炎症因子水平的影响
组别 | TNF-α(pg/mg蛋白) | IL-1β(pg/mg蛋白) | IL-6(pg/mg蛋白) |
空白对照组 | 389.15±45.53a | 240.56±43.68a | 143.39±23.54a |
酒精建模组 | 618.71±61.27b | 411.18±70.15b | 249.01±40.84b |
药物干扰组 | 405.23±71.26a | 279.49±51.24a | 139.00±24.68a |
目标菌组 | 385.56±64.52a | 271.65±46.23a | 142.42±29.88a |
干扰菌组 | 504.54±44.70ab | 326.14±40.94ab | 207.84±43.12b |
注:表中不同字母a、b表示两者对应组之间具有显著差异(p<0.05)。
(6)副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清中内毒素含量的影响
结果如表9所示,与空白对照组相比,慢性酒精暴露后,酒精建模组小鼠血清中内毒素含量明显升高(p<0.05),说明慢性酒精暴露导致了小鼠肠源性内毒素增加。副干酪乳杆菌NSL0201、护肝药物的干预均显著降低了小鼠血清中内毒素的水平(p<0.05)。结果表明副干酪乳杆菌NSL0201能够有效缓解慢性酒精暴露导致的小鼠肠源性内毒素的增加,进而缓解和治疗小鼠肠源性内毒素血症。
表9:副干酪乳杆菌NSL0201对慢性酒精暴露小鼠血清中内毒素含量的影响
组别 | 内毒素含量(mg/L) |
空白对照组 | 1.67±0.21a |
酒精建模组 | 2.59±0.27b |
药物干扰组 | 1.99±0.26a |
目标菌组 | 1.78±0.29a |
干扰菌组 | 2.41±0.38b |
注:表中不同字母a、b表示两者对应组之间具有显著差异(p<0.05)。
以上实施例仅用于说明本发明的技术方案,而非对其进行限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的普通技术人员来说,依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
序列表
<110> 青岛诺森生物技术有限责任公司
<120> 一株新型的副干酪乳杆菌NSL0201及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1455
<212> DNA
<213> 副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)
<400> 1
gatcctgtct tcttagtttg atctggctcc tcttgcttgc acccacatga tcatgtgaac 60
gagtggcgga cgggtgagta acacgtgggt aacctgccct taagtggggg ataacatttg 120
gaaacagatg ctaataccgc atagatccaa gaaccgcatg gttcttggct gaaagatggc 180
gtaagctatc gcttttggat ggacccgcgg cgtattagct agttggtgag gtaatggctc 240
accaaggcga tgatacgtag ccgaactgag aggttgatcg gccacattgg gactgagaca 300
cggcccaaac tcctacggga ggcagcagta gggaatcttc cacaatggac gcaagtctga 360
tggagcaacg ccgcgtgagt gaagaaggct ttcgggtcgt aaaactctgt tgttggagaa 420
gaatggtcgg cagagtaact gttgtcggcg tgacggtatc caaccagaaa gccacggcta 480
actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta ggtggcaagc gttatccgga tttattgggc 540
gtaaagcgag cgcaggcggt tttttaagtc tgatgtgaaa gccctcggct taaccgagga 600
agcgcatcgg aaactgggaa acttgagtgc agaagaggac agtggaactc catgtgtagc 660
ggtgaaatgc gtagatatat ggaagaacac cagtggcgaa ggcggctgtc tggtctgtaa 720
ctgacgctga ggctcgaaag catgggtagc gaacaggatt agataccctg gtagtccatg 780
ccgtaaacga tgaatgctag gtgttggagg gtttccgccc ttcagtgccg cagctaacgc 840
attaagcatt ccgcctgggg agtacgaccg caaggttgaa actcaaagga attgacgggg 900
gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca acgcgaagaa ccttaccagg 960
tcttgacatc ttttgatcac ctgagagatc aggtttcccc ttcgggggca aaatgacagg 1020
tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg 1080
caacccttat gactagttgc cagcatttag ttgggcactc tagtaagact gccggtgaca 1140
aaccggagga aggtggggat gacgtcaaat catcatgccc cttatgacct gggctacaca 1200
cgtgctacaa tggatggtac aacgagttgc gagaccgcga ggtcaagcta atctcttaaa 1260
gccattctca gttcggactg taggctgcaa ctcgcctaca cgaagtcgga atcgctagta 1320
atcgcggatc agcacgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac 1380
accatgagag tttgtaacac ccgaagccgg tggcgtaccc cttttaggga ccccccccta 1440
taaggtggcc acctg 1455
Claims (7)
1.一株副干酪乳杆菌NSL0201,其特征在于,所述副干酪乳杆菌NSL0201的分类命名为副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei),保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2021626。
2.权利要求1所述的副干酪乳杆菌NSL0201在用于制备致病性细菌抑制剂中的应用,其特征在于,所述致病性细菌为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
3.权利要求1所述的副干酪乳杆菌NSL0201在制备用于治疗慢性酒精性肝肠类疾病的药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述慢性酒精性肝肠类疾病包括慢性酒精导致的肝氧化性损伤、肝炎、脂肪肝、肝功能性损伤和肠源性内毒素血症。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述副干酪乳杆菌NSL0201通过抑制肝脏指数或血脂水平的升高,恢复血清中功能性指标以及氧化损伤指标的水平,抑制肝脏中炎症因子的分泌,降低血清中内毒素的含量,从而达到治疗肝肠类疾病的作用。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述药物中包含菌含量不少于5×1010CFU/mL的副干酪乳杆菌NSL0201菌悬液或者菌含量不少于5×1010 CFU/g的副干酪乳杆菌NSL0201菌粉。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在使用所述药物时,保证患者每天摄入不少于1×109 CFU/g的副干酪乳杆菌NSL0201。
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