CN113332182B - 一种高稳定性的植物油脂质体及其制备和检测方法 - Google Patents

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Abstract

本申请公开了一种高稳定性的植物油脂质体，所述植物油脂质体包括植物油和氢化卵磷脂，所述植物油和所述氢化卵磷脂的质量比为(20‑40)：(1‑5)。本申请提供的植物油脂质体，将具有高不饱和脂肪酸含量的植物油以特定的质量比例包裹在脂质体中，使得植物油与空气隔离，提高了植物油的储存稳定性，并且本申请获得的植物油脂质体在高温、低温、冷热交替等各种环境下仍具有长期的储存稳定性，储存一个月后仍能够保证内部的植物油不被氧化。

Description

一种高稳定性的植物油脂质体及其制备和检测方法
技术领域
本申请属于化妆品技术领域，具体涉及一种高稳定性的植物油脂质体及其制备和检测方法。
背景技术
植物油脂广泛分布于自然界中，并能够从植物的果实、种子、胚芽中获得。其中植物油的主要成分是直链高级脂肪酸和甘油生成的酯以及脂肪酸，其中脂肪酸除软脂酸、硬脂酸和油酸外，还含有多种不饱和脂肪酸。
一些植物油脂中含有大量的单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、甾醇、角鲨烯等多种易被氧化的成分，接触氧气、高温、光照等条件下易被氧化。例如牡丹籽油，其不饱和脂肪酸的含量可高达90％以上，其中α-亚麻酸占38％以上，含有丰富的维生素E、维生素A、植物甾醇、角鲨烯、芍药苷、牡丹皮苷、丹皮酚、钾钙镁铁锌等多种营养成分，对皮肤有非常好的调理作用，具有保湿、舒缓、抑菌、美白、祛斑、抗衰、防晒等功效。然而，牡丹籽油含有的大量易被氧化的成分，使其在长期储存中稳定性较差。
目前牡丹籽油等植物油的原料储存方法为将其溶于稳定的油脂中储存。现有技术中还提出了采用脂质体包裹的形式提高其包裹内芯的稳定性，例如专利CN105662896A提供了一种包埋海棠果油的卵磷脂脂质体。然而，常见的脂质体载体，如卵磷脂等在高温、低温、冷热循环等恶劣条件下的稳定能力也有限，使得脂质体本身的稳定性也难以进一步提高。
此外，现行的评测包裹稳定性的方法一般是针对包裹载体的稳定性的表征，而其内部包裹油脂的稳定性，一般通过在高温、低温、光照等不同的存放条件下，观察包裹原料外观、味道是否改变，来确定包裹对油脂稳定性是否有增益效果。过氧化值可以作为油脂被氧化程度的一种表征指标，国家标准《GB 5009.227-2016食品安全国家标准食品中过氧化值的测定》给出了食品中植物油脂过氧化值测定的方法。然而，现有技术中还未能够提供一种测定脂质体中包裹油脂的过氧化值的检测方法。
发明内容
为了解决上述问题，本申请旨在提供一种含有具有高含量不饱和脂肪酸的植物油的植物油脂质体，以提高该植物油的储存稳定性，并且该植物油脂质体在各种环境下也能够保持长时间的稳定性，显著降低包裹的植物油被氧化的概率。
一方面，本申请提供了一种高稳定性的植物油脂质体，所述植物油脂质体包括植物油和氢化卵磷脂，所述植物油和所述氢化卵磷脂的质量比为(20-40)：(1-5)。
优选的，所述植物油脂质体在25℃下的平均粒径为15-25nm，更优选18-19nm。
进一步地，所述植物油至少包括牡丹籽油。
进一步地，所述植物油还包括燕麦仁油、米糠油、青刺果油、沙棘籽油、山茶籽油、甜扁桃籽油、西班牙鼠尾草油、西洋接骨木油、橄榄油、亚麻籽油、米糠油、月见草油、乳木果油中的一种或多种。
优选的，所述植物油至少包括牡丹籽油，还包括米糠油、山茶籽油、燕麦仁油、亚麻籽油、月见草油中的一种或多种。
进一步地，按质量份数计，所述植物油脂质体包括：植物油20-40份，氢化卵磷脂1-5份，水50-70份，对羟基苯乙酮0.1-0.5份，己二醇0.1-0.5份。
进一步地，按质量份数计，所述植物油包括牡丹籽油1-40份，米糠油0-10份，山茶籽油0-10份，燕麦仁油0-10份，亚麻籽油0-10份，月见草油0-10份。
另一方面，本申请提供了上述植物油脂质体的制备方法，包括：
步骤一：将植物油和氢化卵磷脂混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将所述混合物A在加热温度60-80℃、搅拌转速为500-600rpm的条件下缓慢的加入至所述混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将所述混合物C在转速7000-10000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将所述微米级分散体，在压力600-800bar、温度60-80℃的条件下进行高压均质处理，反复剪切均质循环4-6次，即得所述植物油脂质体。
进一步地，所述高压均质的处理条件为：压力600-800bar，温度60-80℃。
另一方面，本申请提供了上述植物油脂质体在制备修复皮肤屏障化妆品中的应用。
优选的，所述化妆品的剂型包括但不限于水剂、乳剂、霜剂、凝胶、精华液等。
另一方面，本申请还提供了一种上述植物油脂质体的稳定性检测方法，包括：
采用水不溶性有机溶剂对所述植物油脂质体进行萃取，并超声振荡10-20min，过滤后静置直至完全分层，取有机溶剂相，脱出溶剂后检测过氧化值。
进一步地，所述水不溶性有机溶剂为氯仿。
进一步地，采用滴定法检测过氧化值。
本申请能产生的有益效果包括但不限于：
1、本申请提供的植物油脂质体，将具有高不饱和脂肪酸含量的植物油以特定的质量比例包裹在氢化卵磷脂的壳体中，使得植物油与空气隔离，提高了植物油的储存稳定性；并且，该植物油脂质体在高温、低温、冷热交替等各种环境下仍具有长期的储存稳定性，储存一个月后仍能够保证内部的植物油不被氧化；
2、本申请提供的植物油脂质体的制备方法，操作简单，乳化效果好，制得的植物油脂质体稳定性更高；
3、本申请提供的植物油脂质体的检测方法，能够实现脂质体中油脂过氧化值的准确测定，量化脂质体对植物油的包裹稳定性，解决了国标方法仅能测定食品油脂过氧化值而不适用于包埋类油脂制品的问题，并且本申请提供的植物油脂质体，在该检测方法中对其过氧化值的测定无影响。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
图1为实施例2的鸡胚尿囊膜实验测试的结果示意图；
图2为实施例2的促渗透能力测试的实验数据柱状图。
具体实施方式
为了更清楚的阐释本申请的整体构思，下面以实施例的方式进行详细说明。本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
如无特殊说明，下述实施例中提供的各植物油组分、涉及的实验试剂以及实验仪器均可通过商业途径获得。其中，选用不饱和脂肪酸含量不低于90％的牡丹籽油。
实施例1
本实施例提供了一种植物油脂质体，按质量份数计，其组分及含量包括：牡丹籽油10份，米糠油1份，山茶籽油5份，燕麦仁油5份，月见草油1份，水60份，对羟基苯乙酮0.5份，己二醇0.5份，氢化卵磷脂1份。
上述植物油脂质体采用以下制备方法制备获得：
步骤一：将牡丹籽油、米糠油、山茶籽油、燕麦仁油、月见草油和氢化卵磷脂按照上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇按上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将步骤一获得的混合物A在加热温度60℃、搅拌转速为600rpm的条件下缓慢的加入至步骤二获得的混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将混合物C在转速7000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将微米级分散体，在压力700bar、温度60℃下进行高压均质处理，反复剪切均质循环5次，即得高稳定性的植物油脂质体。
采用上述方法制备获得的植物油脂质体为核壳结构，其中核由上述植物油组成，壳由氢化卵磷脂组成，在室温(25℃)下的平均粒径为19.2nm，分散指数PDI为0.169。
实施例2
本实施例提供了一种植物油脂质体，按质量份数计，其组分及含量包括：牡丹籽油20份，米糠油10份，燕麦仁油5份，水60份，对羟基苯乙酮0.5份，己二醇0.5份，氢化卵磷脂5份。
上述植物油脂质体采用以下制备方法制备获得：
步骤一：将牡丹籽油、米糠油、燕麦仁油和氢化卵磷脂按照上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇按上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将步骤一获得的混合物A在加热温度60℃、搅拌转速为600rpm的条件下缓慢的加入至步骤二获得的混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将混合物C在转速9000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将微米级分散体，在压力700bar、温度60℃下进行高压均质处理，反复剪切均质循环5次，即得高稳定性的植物油脂质体。
采用上述方法制备获得的植物油脂质体为核壳结构，其中核由上述植物油组成，壳由氢化卵磷脂组成，在室温(25℃)下的平均粒径为19.0nm，分散指数PDI为0.132。
实施例3
本实施例提供了一种植物油脂质体，按质量份数计，其组分及含量包括：牡丹籽油30份，山茶籽油1份，亚麻籽油5份，水50份，对羟基苯乙酮0.5份，己二醇0.5份，氢化卵磷脂4份。
上述植物油脂质体采用以下制备方法制备获得：
步骤一：将牡丹籽油、山茶籽油、亚麻籽油和氢化卵磷脂按照上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇按上述质量份配比混合后加热至70℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将步骤一获得的混合物A在加热温度60℃、搅拌转速为600rpm的条件下缓慢的加入至步骤二获得的混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将混合物C在转速10000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将微米级分散体，在压力700bar、温度60℃下进行高压均质处理，反复剪切均质循环5次，即得高稳定性的植物油脂质体。
采用上述方法制备获得的植物油脂质体为核壳结构，其中核由上述植物油组成，壳由氢化卵磷脂组成，在室温(25℃)下的平均粒径为20.7nm，分散指数PDI为0.128。
实施例4
实施例4与实施例2提供的植物油脂质体以及制备方法大致相同，区别仅在于，采用卵磷脂代替氢化卵磷脂作为脂质体的壳层。
对比例1
该对比例提供了一种植物油，按质量份数计，包括：牡丹籽油20份，米糠油10份、燕麦仁油5份，将上述植物油混合后溶于65份辛酸/癸酸甘油三酯中，即采用传统的将不稳定的植物油溶于稳定的油脂中储存。
对比例2
该对比例与实施例2提供的脂质体以及制备方法大致相同，区别仅在于，采用35质量份的辛酸/癸酸甘油三酯代替实施例2的植物油脂质体中35份的植物油。
对比例3
该对比例与对比例2提供的脂质体以及制备方法大致相同，区别仅在于，采用卵磷脂代替氢化卵磷脂作为脂质体的壳层。
稳定性评价：
本申请还提供了一种植物油脂质体中植物油的过氧化值的测定方法，其包括如下步骤：
步骤(1)：油脂提取
将对比例2与上述实施例分别取10g样品于50mL塑料离心管中，加入15mL非水溶性有机溶剂对样品进行萃取，超声波振荡粉碎10min后过滤，并将上层液全部取出置于250ml碘量瓶中。其中萃取液分别选择氯仿、正己烷和石油醚，以筛选获得针对上述实施例的脂质体萃取效果更好的萃取液，所得结果见表1。
表1
萃取剩余量/g 对比例2 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4
氯仿 1.0 1.2 1.3 1.4 1.1
正己烷 1.3 0.9 1.1 1.0 0.5
石油醚 1.2 1.0 1.2 0.5 0.2
由表1的结果可知，当萃取液选择氯仿时，各实施例的植物油脂质体的萃取剩余量均大于稳定油脂质体的萃取剩余量，而当萃取液选择正己烷或石油醚时，各实施例的萃取剩余量均小于稳定油脂质体的萃取剩余量，因此选择氯仿作为优选的萃取液。
步骤(2)：滴定法测试过氧化值
配制饱和KI溶液：称取14g KI，加10mL水，必要时微热使其溶解，冷却后贮于棕色瓶；
配制三氯甲烷-冰乙酸混合液：量取40mL三氯甲烷，加60mL乙酸，混匀，硫代硫酸钠标准液：c＝0.002mol/L；
配制淀粉指示剂(10g/L)：称取淀粉0.5g，加少许水调成糊状，倒入50mL沸水中调匀，煮沸，使用时现配；
精确称取0.71g提取的油脂(质量m)，置于250ml碘量瓶中，加30mL三氯甲烷-冰乙酸混合液使样品溶解(此时只加18mL乙酸)；
加入1.00ml饱和碘化钾溶液,塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，在暗处放置3min，取出加100ml纯化水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液(浓度C)滴定至淡黄色时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点，消耗硫代硫酸钠V。
按同一方法，做试剂空白试验；消耗硫代硫酸钠V0
过氧化值计算方法：过氧化值＝(V-V0)×C×1000/2m
将稳定性测试进行30天的各实施例以及对比例按照上述方法进行测试，结果如表2所示。
表2
POV 对比例1 对比例2 对比例3 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4
室温 6.2 0.1 1.0 0.8 0.6 0.7 3.4
光照 5.9 0.2 1.4 1.0 1.0 1.2 4.2
45℃ 6.5 0.3 1.9 1.5 1.2 1.3 3.7
-15℃ 3.2 0.1 0.4 0.7 0.4 0.5 2.8
5℃ 3.6 0.1 0.6 0.6 0.5 0.4 2.0
冷热循环 4.7 0.2 1.0 0.9 0.8 0.8 5.2
根据表2中的数据可知，与对比例1相比，包裹植物油的过氧化值相较于植物油芯材过氧化值有明显抑制过氧化值上升的趋势，对植物油芯材有一定的抗氧化的保护作用，特别是实施例2对植物油氧化的抑制能力最强。相较于采用卵磷脂的对比例3，对比例2在各个环境下的过氧化值在正常波动范围内(0-0.3)，因此选择对比例2作为空白对照样品，说明采用氢化卵磷脂对其测定结果几乎没有影响。此外，采用氢化卵磷脂包裹的实施例1-3，其在不同环境下的过氧化值波动也相对较小，例如实施例2，其在各个环境下与对比例2的过氧化值差值不超过1.0，而其在各个环境下的过氧化值之间最大差值仅为0.8。上述稳定性测试方案可以为包裹原料的稳定性测试提供灵敏的表征指标。
粒径稳定性
其中，以实施例2为例，其在各种环境下30天前后的粒径变化如表3所示，在正常波动范围内，纳米脂质体包裹体系稳定。
表3
4℃ 50℃ 光照 室温 -20℃
初始粒径 19.7 21.3 20.5 19.0 20.4
初始PDI 0.112 0.184 0.124 0.132 0.149
30天后粒径 19.2 19.4 21.4 18.9 19.3
30天后PDI 0.157 0.201 0.136 0.154 0.171
刺激性实验测试：
以实施例2为例，用鸡胚尿囊膜实验测试脂质体包裹的稳定性，所得结果如图1所示。由图1所示结果可知，鸡胚尿囊膜经各浓度实施例2提供的植物油脂质体的处理下均没有出现溶血现象，说明实施例2中的样品无刺激性。
促渗透能力测试：
以实施例2为例，以离体乳猪背部皮肤为测试工具，采用Franz扩散池装置进行植物油脂透皮能力检测，实验方法如下：
采用酶标仪检测吸光度来测定不同时间段皮肤接收液中油脂的累积渗透量，从而判定其透皮能力的大小。首先，向接受池中加入接受液。将皮肤固定于Franz扩散池的供给室和接收池之间，皮肤角质层面向供给室，真皮层一侧朝向接受池；将Franz扩散池固定于恒温水浴箱中，开启电磁搅拌器以300rpm/min的速度搅拌，保持36.5℃恒温水浴，并确保水浴夹层无气泡。待水浴温度恒定后，向供给室中皮肤表面加入样品，使用正压移液器准确吸取固定体积为300μL的实施例2样品，并将其均匀涂布于供给室中的皮肤表面，且不同样品相应的扩散池小室交叉分布。每个样品每个时间点采用独立的3块乳猪皮作为3重复；在24h时取下猪皮，将接收池中的油脂样品用正己烷萃取，然后超声波震荡、离心后静置分层，取上层溶液，不同的油脂在特定的波长下测定吸光度。测试结果如图2所示。
由图2所示结果可知，采用纳米包裹脂质体的累计渗透量明显高于游离植物油脂的渗透量，说明包裹对渗透有促进作用。
皮肤屏障修复效果测试：
以实施例2为例，并采用空白对照进行皮肤屏障修复效果的临床测试，实验方法如下：
按照自愿原则，选择年龄为20～55周岁，一共60人平行对照分成二组，每组30人进行测试，分别为对照组、实施例组。受试者每天洁面后，根据日常护肤步骤，早晚各使用一次相应的测试产品(其中，对照组不使用化妆品、实施例组使用实施例2提供的植物油脂质体)。
测试时间：使用产品前标记为D0，使用产品14天标记为D14，使用产品28天标记为D28。每次测试时，受试者用清水清洗受试部位后、分别在受试皮肤处涂抹相应的测试产品，然后恒温恒湿环境中(温度22℃±2℃；相对湿度50％±10％RH)静坐40min。测试完后，测试人员在脸颊部位使用皮肤表面水分分布图测试仪(CM825，CK)对受试者皮肤水分含量(MMV)值进行采集；使用水份流失测试仪(TM300，CK)对受试者表皮失水保湿(TEWL)值进行采集。受试者使用样品第14天和第28天后，测试人员对受试者面部皮肤数据进行复测。所得结果见表4。
表4
Figure BDA0003087984960000101
Figure BDA0003087984960000111
由表4中的数据可知，实施例2与空白对照组对比，在MMV值上有很大提升，而且在TEWL值上有明显降低，说明实施例2的产品对皮肤屏障修复有非常好的效果。
与此同时，本申请提供的植物油脂质体，经卫生检疫部门检疫后，微生物指标如下：
菌落总数，参照《化妆品安全技术规范》2015版测定，为未检出；
大肠菌群，参照《化妆品安全技术规范》2015版测定，为未检出；
致病菌，参照《化妆品安全技术规范》2015版测定，为未检出；
上述结果充分证明了本发明的安全性。
以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请。对于本领域技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的权利要求范围之内。

Claims (3)

1.一种高稳定性的植物油脂质体，其特征在于，按质量份数计，所述植物油脂质体由以下组分组成：植物油20-40份，氢化卵磷脂1-5份，水50-70份，对羟基苯乙酮0.1-0.5份，己二醇0.1-0.5份；
按质量份数计，所述植物油由以下组分组成：牡丹籽油1-40份，米糠油0-10份，山茶籽油0-10份，燕麦仁油0-10份，亚麻籽油0-10份，月见草油0-10份；
所述植物油脂质体采用如下方法制备：
步骤一：将植物油和氢化卵磷脂混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将所述混合物A在加热温度60-80℃、搅拌转速为500-600rpm的条件下缓慢的加入至所述混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将所述混合物C在转速7000-10000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将所述微米级分散体，在压力600-800bar、温度60-80℃的条件下进行高压均质处理，反复剪切均质循环4-6次，即得所述植物油脂质体。
2.如权利要求1所述的植物油脂质体的制备方法，其特征在于，包括：
步骤一：将植物油和氢化卵磷脂混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物A；
步骤二：将对水、羟基苯乙酮和己二醇混合后加热至60-80℃，混合均匀得到混合物B；
步骤三：将所述混合物A在加热温度60-80℃、搅拌转速为500-600rpm的条件下缓慢的加入至所述混合物B中，搅拌均匀得到混合物C，将所述混合物C在转速7000-10000rpm下进行高速剪切乳化3min，制成微米级分散体，并将所述微米级分散体，在压力600-800bar、温度60-80℃的条件下进行高压均质处理，反复剪切均质循环4-6次，即得所述植物油脂质体。
3.如权利要求1所述的植物油脂质体在制备修复皮肤屏障化妆品中的应用。
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Denomination of invention: A highly stable plant oil plastid and its preparation and detection method

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