CN113292508A - 一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法 - Google Patents

一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，该方法是以Fmoc‑L‑Glu‑OTrt或Fmoc‑L‑Asp‑OTrt为起始原料，以其侧链羧基连接固相载体Rink Amide AM Resin，以Fmoc‑L‑AA(X)‑OH(AA指α‑氨基酸，X为α‑氨基酸的侧链保护基)为连接的第二个氨基酸，完成连接后，用哌啶/DMF脱掉Fmoc保护基，用三氟乙醇/醋酸的DCM溶液脱掉羧基上的Trt保护基，让羧基裸露出来，最后在PyBop、DIEA的DMF溶液中让树脂肽上裸露的氨基和羧基自行环合成环二肽并挂在树脂上，经过切割，使环二肽脱落下来，在乙醚中沉淀生成含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽。本发明合成方法简单、操作安全，易于纯化，适合规模化操作，可批量合成含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽。

Description

一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法
技术领域
本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法。
背景技术
环二肽(cyclic dipeptides)，又名2,5-二酮哌嗪(2,5-diketopiperazines)，是一自然界中最小的环肽，这类化合物在人、脊椎动物、无脊椎动物、植物、真菌和细菌中均有发现。由于环二肽形成了一个稳定的六元环结构，具有一定的构象约束作用。有两个氢键给体和两个氢键受体，氢键是药物与受体相互作用的主要方式之一，因此环二肽在药物化学中是一个重要的药效团。目前发现的一些环二肽具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤等生物活性，因此环二肽及其衍生物常被作为候选物，一直受到合成化学家和生物学家及药物学家的追捧。
L-天冬酰胺作为人体非必需的氨基酸，它广泛分布在植物界，可以从芦笋、甜菜根、豌豆、蚕豆中分离得到。作为一种药物，天冬酰胺也常用于扩张支气管、平喘、抗消化性溃疡及胃功能障碍的治疗，在食品、医药、轻化工和水环保方面具有广泛的用途。L-谷氨酰胺在体内可转变成为糖胺，作为合成粘蛋白的前体，可促进溃疡愈合，主要用作消化道溃疡药。此外，还可用作脑功能改善剂和用于治疗酒精中毒。当前，有很多含有天冬酰胺、谷氨酰胺环二肽的合成及其生物活性报道。
含有天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法有经典液相合成法和固相合成法，其中液相合成法采取最大保护策略，从N端到C端合成，采取活泼酯法或对称酸酐法，合成得到全保护二肽甲酯片段，氨酯交换环合，液相合成周期长，且二肽甲酯片段需要柱层析；固相合成法包括直接缩合法和分子内氨解法，分子内氨解法多选用Oxime树脂，以肟为Linker的载体，形成羧酸肟酯，亲核活性高，但树脂昂贵，应用较少；直接缩合法采取Fmoc/tBu/OAL正交策略或Fmoc/tBu/Dmab正交策略，合成线性二肽，脱除N端和C端保护，在固相载体上直接缩合得到目标环肽。采用Fmoc/tBu/OAL正交策略，须使用高毒试剂3-溴丙烯，安全性低，且脱保护须使用过渡金属催化剂钯，对空气敏感且价格昂贵，脱保护反应的试剂残留影响环合反应的发生；采用Fmoc/tBu/Dmab正交策略，羧基保护基需使用2-{1-[4-(羟甲基)苯氨基]-3-甲基亚丁基}-5,5-二甲基-1,3-环己二酮(Dmab-OH)，价格约2400元/g，价格昂贵，脱保护需使用水合肼，增加了合成步骤，故应用较少。
发明内容
本发明的目的是提供一种合成工艺简单、成功率高、适用性广、可批量化合成的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的方法。
本发明所述含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的结构式为：
Figure BDA0003104314280000021
其中，式Ⅰ为含谷氨酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Asp)，式Ⅱ为含天冬酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Glu)，分子通式中AA代表α-氨基酸，式Ⅰ和式Ⅱ中R为α-氨基酸的侧链，所述合成方法由下述步骤组成：
1、以N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，在1-羟基苯并三唑和N,N-二异丙基碳二亚胺作用下，将Fmoc-L-Glu-OTrt或Fmoc-L-Asp-OTrt连接到脱除Fmoc保护基的Rink AmideAM Resin上，得到Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(Rink Amide AMResin)-OTrt。
2、用哌啶/DMF溶液脱掉Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(RinkAmide AM Resin)-OTrt上的Fmoc保护基，得到H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
3、在氮气保护下，以DMF为溶剂，在1-羟基苯并三唑和N,N-二异丙基碳二亚胺作用下，在H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上连接Fmoc-AA(X)-OH，得到Fmoc-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt；其中，Fmoc-AA(X)-OH中的X为AA的侧链保护基，当侧链没有保护基时X为H原子。
4、用哌啶/DMF溶液脱掉Fmoc-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上的Fmoc保护基，得到H-Glu(Rink Amide AMResin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
5、用三氟乙醇/醋酸的二氯甲烷溶液脱掉H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上的Trt保护基，得到H-AA(X)-Glu(Rink Amide AMResin)-OH或H-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OH。
6、在六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBop)/N,N-二异丙基乙胺(DIEA)的DMF溶液中，使H-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OH或H-AA(X)-Asp(RinkAmide AM Resin)-OH上裸露的氨基和羧基环合，得到Cyclo(AA-Glu(Rink Amide AMResin))/Cyclo(AA-Asp(Rink Amide AM Resin))。
7、用含三氟乙酸的裂解切割液切割Cyclo(AA-Glu(Rink Amide AM Resin))/Cyclo(AA-Asp(Rink Amide AM Resin))上的环二肽，得到Cyclo(AA-Glu)或Cyclo(AA-Asp)，即含天冬酰胺的环二肽或谷氨酰胺的环二肽。
上述步骤1中，将Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺溶解于DMF中，然后加入到脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin中，在氮气保护下常温反应2～3小时，抽滤，依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，得到Fmoc-Glu(Rink AmideAM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
上述步骤1中，优选所述脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin与Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺的摩尔比为1:2～3:3～4:3～4。
上述步骤1中，脱除Rink Amide AM Resin上Fmoc保护基的方法为：将Rink AmideAM Resin用DMF溶胀4～6小时后，加入哌啶体积浓度为25％的哌啶/DMF溶液，在氮气保护下常温反应20～30分钟，脱掉树脂上的Fmoc保护基，然后依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，得到脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin。
上述骤2和4中，所述哌啶/DMF溶液为哌啶与DMF体积比为1:3的混合溶液，脱除Fmoc保护基的反应时间为20～30分钟。
上述骤3中，优选所述Fmoc-AA(X)-OH、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺与步骤1中Rink Amide AM Resin的摩尔比为2～3:3～4:3～4:1。
上述步骤5中，所述三氟乙醇/醋酸的二氯甲烷溶液为三氟乙醇、醋酸、二氯甲烷体积比2:1:7的混合溶液，脱除Trt保护基的反应时间为2～3小时。
上述骤6中，优选所述六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、N,N-二异丙基乙胺与步骤1中Rink Amide AM Resin的摩尔比为2～3:2～4:1，环合反应时间为2～3小时。
上述步骤7中，所述含三氟乙酸的裂解切割液选自三氟乙酸与三异丙基硅烷、苯甲硫醚、水体积比为88:5:4:3的混合液或三氟乙酸与三异丙基硅烷、水体积比为92:5:3的混合液或三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液；切割裂解液主要成分为三氟乙酸，是否加入三异丙基硅烷和苯甲硫醚须根据形成的环二肽二酮哌嗪环上的侧链R基团及其保护基团X而定。如：无侧链保护或保护基是Boc、Tbu时用三氟乙酸和水，保护基是Pbf时加苯甲硫醚和三异丙基硅烷。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明选用Trt保护羧基的Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt为合成原料，选用Rink Amide AM Resin为载体，以原料侧链羧基键合于树脂上，合成Fmoc-Asp(RinkAmideAMResin)-OTrt或Fmoc-Glu(RinkAmideAMResin)-OTrt，脱除N端Fmoc保护，再连接第二个氨基酸Fmoc-AA(X)-OH，最终生成Fmoc-AA(X)-Glu(Rink AmideAMResin)-OTrt或Fmoc-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。其中Fmoc-AA(X)-OH中的X为AA的侧链保护基团，当侧链没有保护基团时X为H原子。
2、本发明首次提出Fmoc/OTrt正交保护策略合成环二肽，以Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt的侧链连接树脂并延伸合成二肽，脱除第二个氨基酸N端Fmoc保护和第一个氨基酸羧基端Trt保护，裸露的羧基和氨基在PyBop/DIEA的缩合作用下形成环二肽，经切割得到Cyclo(AA-Gln)或Cyclo(AA-Asn)。该操作方便快捷，产率高，可以量化，是合成天冬酰胺、谷氨酰胺环二肽量身定做的合成方法，简单实用。
3、本发明选用六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、N,N-二异丙基乙胺作缩合剂，克服了1-羟基苯并三唑及N,N′-二异丙基碳二亚胺作为缩合剂，环合不完全，杂质偏多的弊端。环合在树脂上进行，通过抽滤洗涤即可除去杂质，是一种操作简单的合成方式。
4、本发明避免了高毒试剂3-溴丙烯的使用，操作安全性高；避免了价格昂贵的金属钯催化剂及Dmab-OH的使用，经济合理性高。
5、本发明合成方法简单、操作安全，易于纯化，适合规模化操作，可批量合成含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽，合成的环二肽大多呈白色固体或无色固体，可溶于水，易溶于甲醇，在空气中化学性质稳定。
附图说明
图1是Cyclo(Pro-Gln)的HPLC色谱图。
图2是Cyclo(Pro-Gln)的MS质谱图。
图3是Cyclo(Ala-Gln)的HPLC色谱图。
图4是Cyclo(Ala-Gln)的MS质谱图。
图5是Cyclo(Phe-Asn)的HPLC色谱图。
图6是Cyclo(Phe-Asn)的MS质谱图。
图7是Cyclo(Leu-Asn)的HPLC色谱图。
图8是Cyclo(Leu-Asn)的MS质谱图。
图9是Cyclo(Ser-Asn)的HPLC色谱图。
图10是Cyclo(Ser-Asn)的MS质谱图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明，但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
合成Cyclo(Pro-Gln)
1、称取5.0g Rink Amide AM Resin(SD＝0.96mmol/g)加入合成反应器中，用DMF溶胀5h，在氮气保护下，加入40mL哌啶与DMF体积比1:3的混合溶液，反应20min，脱除树脂上的Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色。将5.9g(9.6mmol)Fmoc-Glu-OTrt、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mL DMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，再加入到反应器里，在氮气保护下反应2h，抽滤，依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-Otrt。
2、向步骤1的反应柱中加40mL哌啶与DMF体积比1:3的混合溶液，脱除Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt的N端Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色，得到H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
3、将3.3g(9.6mmol)Fmoc-Pro-OH、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mLDMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，加入到步骤2的反应柱中，在氮气保护下反应2h，抽滤，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Pro-Glu(Rink Amide AMResin)-OTrt。
4、向步骤3中反应柱加50mL哌啶与DMF体积比1:3的混合溶液，反应20min脱掉Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显黑色，抽滤，得到H-Pro-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
5、向步骤4中反应柱里加入60mL 三氟乙醇与醋酸、二氯甲烷体积比2:1:7的混合溶液，在氮气保护下反应2h，脱去H-Pro-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt的Trt保护基，抽滤，依次用异丙醇和DMF洗涤，再用溶有N,N-二异丙基乙胺(DIEA)的DMF溶液洗涤，并抽干溶剂，得到H-Pro-Glu(Rink Amide AM Resin)-OH。
6、将50mL含7.5g(14.4mmol)PyBop、3.3mL(19.2mmol)DIEA的DMF溶液加入到步骤5中反应柱里，在氮气保护下反应2h，使树脂上裸露的氨基和羧基自行环合成环二肽并挂在树脂上，依次用异丙醇和DMF洗涤，茚三酮检测显无色透明，甲醇洗三次抽干，得到Cyclo(Pro-Glu(Rink Amide AM Resin))。
7、用50mL三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液切割步骤6得到的Cyclo(Pro-Glu(Rink Amide AM Resin))，切割反应2h，使环二肽脱落下来，蒸干三氟乙酸后，在乙醚中析晶沉淀，得到环二肽Cyclo(Pro-Gln)粗品，经色谱纯化得到Cyclo(Pro-Gln)冻干粉0.78g，即脯氨酸-天冬酰胺环二肽，其HPLC纯度大于98％，色谱图见图1，MS m/z：248.19(M+Na+)，质谱图见图2，收率81.7％。
实施例2
合成Cyclo(Ala-Gln)
本实施例步骤1、2与实施例1相同。
3、将3.0g(9.6mmol)Fmoc-Ala-OH、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mLDMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，加入到步骤2中反应柱里，在氮气保护下反应2h，抽滤，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Ala-Glu(Rink Amide AMResin)-OTrt。
本实施例步骤4、5、6均与实施例1步骤4、5、6相同，得到Cyclo(Ala-Glu(RinkAmide AM Resin))。
7、用50mL三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液切割步骤6得到的Cyclo(Ala-Glu(Rink Amide AM Resin))，切割反应2h，使环二肽脱落下来，蒸干三氟乙酸后，在乙醚中析晶沉淀，得到环二肽Cyclo(Ala-Gln)粗品，经色谱纯化得到Cyclo(Ala-Gln)冻干粉0.79g，即丙氨酸-天冬酰胺环二肽，其HPLC纯度大于97％，色谱图见图3，MS m/z：222(M+Na+)，质谱图见图4，收率82.6％。
实施例3
合成Cyclo(Phe-Asn)
1、称取5.0g Rink Amide AM Resin(SD＝0.96mmol/g)加入合成反应器中，用DMF溶胀5h，在氮气保护下，加入40mL哌啶与N,N-二甲基甲酰胺体积比1:3的混合溶液，反应20min，脱除树脂上的Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色。将5.8g(9.6mmol)Fmoc-Asp-OTrt、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mLDMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，再加入到反应柱里，在氮气保护下反应2h，抽滤，依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
2、向步骤1的反应柱中加40mL 40mL哌啶与N,N-二甲基甲酰胺体积比1:3的混合溶液，脱除Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt的N端Fmoc保护基团，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色，得到H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
3、将3.7g(9.6mmol)Fmoc-Phe-OH、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mLDMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，加入到步骤2的反应柱中，在氮气保护下反应2h，抽滤，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Phe-Asp(Rink Amide AMResin)-OTrt。
本实施例步骤4、5、6均与实施例1步骤4、5、6相同，得到Cyclo(Phe-Asp(RinkAmide AM Resin))。
7、用50mL三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液切割步骤6得到的Cyclo(Phe-Asp(Rink Amide AM Resin))，切割反应2h，使环二肽脱落下来，蒸干三氟乙酸后，在乙醚中析晶沉淀，得到环二肽Cyclo(Phe-Asn)粗品，经色谱纯化得到Cyclo(Phe-Asn)冻干粉0.98g，即苯丙氨酸-谷酰胺环二肽，其HPLC纯度大于96％，色谱图见图5，MS m/z：284.27(M+Na+)，质谱图见图6，收率80.3％。
实施例4
合成Cyclo(Leu-Asn)
1、称取5.0g Rink Amide AM Resin(SD＝0.96mmol/g)加入合成反应器中，用DMF溶胀5h，在氮气保护下，加入40mL哌啶与DMF体积比1:3的混合溶液，反应20min，脱除树脂上的Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色。将5.8g(9.6mmol)Fmoc-Asp-OTrt、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mL DMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，再加入到反应柱里，在氮气保护下反应2h，抽滤，依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
2、向步骤1的反应柱中加40mL40mL哌啶与DMF体积比1:3的混合溶液，脱除Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt的N端Fmoc保护基，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，抽滤，树脂茚三酮检测显黑色，得到H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
3、将3.4g(9.6mmol)Fmoc-Leu-OH、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mLDMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，加入到步骤2的反应柱中，在氮气保护下反应2h，抽滤，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Leu-Asp(Rink Amide AMResin)-OTrt。
本实施例步骤4、5、6均与实施例1步骤4、5、6相同，得到Cyclo(Leu-Asp(RinkAmide AM Resin))。
7、用50mL三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液切割步骤6得到的Cyclo(Leu-Asp(Rink Amide AM Resin))，切割反应2h，使环二肽脱落下来，蒸干三氟乙酸后，在乙醚中析晶沉淀，得到环二肽Cyclo(Leu-Asn)粗品，经色谱纯化得到Cyclo(Leu-Asn)冻干粉0.95g，即苯丙氨酸-谷酰胺环二肽，其HPLC纯度大于96％，色谱图见图7，MS m/z：250.10(M+Na+)，质谱图见图8，收率87.2％。
实施例5
合成Cyclo(Ser-Asn)
本实施例步骤1、2与实施例4相同。
3、将3.7g(9.6mmol)Fmoc-Ser(tbu)-OH、1.9g(14.4mmol)1-羟基苯并三唑溶解于50mL DMF中，并加入2.2mL(14.4mmol)N,N-二异丙基碳二亚胺搅匀放置5min，加入到步骤2的反应柱中，在氮气保护下反应2h，抽滤，再依次用异丙醇和DMF洗涤树脂，树脂茚三酮检测显无色且透明，最终生成Fmoc-Ser(tbu)-Asp(Rink Amide AMResin)-OTrt。
本实施例步骤4、5、6均与实施例1步骤4、5、6相同，得到Cyclo(Ser(tbu)-Asp(RinkAmide AM Resin))。
7、用50mL三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液切割步骤6得到的Cyclo(Ser(tbu)-Asp(Rink Amide AM Resin))，切割反应2h，使环二肽脱落下来，蒸干三氟乙酸后，在乙醚中析晶沉淀，得到环二肽Cyclo(Ser-Asn)粗品，经色谱纯化得到Cyclo(Ser-Asn)冻干粉0.85g，即苯丙氨酸-谷酰胺环二肽，其HPLC纯度大于97％，色谱图见图9，MS m/z：224.24(M+Na+)，质谱图见图10，收率88.2％。

Claims (9)

1.一类含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，所述环二肽的结构式为：
Figure FDA0003104314270000011
其中，式Ⅰ为含谷氨酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Asp)，式Ⅱ为含天冬酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Glu)，分子通式中AA代表α-氨基酸，式Ⅰ和式Ⅱ中R为α-氨基酸的侧链，其特征在于所述合成方法由下述步骤组成：
(1)以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，在1-羟基苯并三唑和N,N-二异丙基碳二亚胺作用下，将Fmoc-L-Glu-OTrt或Fmoc-L-Asp-OTrt连接到脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin上，得到Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt；
(2)用哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液脱掉Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上的Fmoc保护基，得到H-Glu(Rink Amide AMResin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt；
(3)在氮气保护下，以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，在1-羟基苯并三唑和N,N-二异丙基碳二亚胺作用下，在H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上连接Fmoc-AA(X)-OH，得到Fmoc-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt；其中，Fmoc-AA(X)-OH中的X为AA的侧链保护基，当侧链没有保护基时X为H原子；
(4)用哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液脱掉Fmoc-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上的Fmoc保护基，得到H-Glu(RinkAmide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt；
(5)用三氟乙醇/醋酸的二氯甲烷溶液脱掉H-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或H-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt上的Trt保护基，得到H-AA(X)-Glu(Rink Amide AMResin)-OH或H-AA(X)-Asp(Rink Amide AM Resin)-OH；
(6)在六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷/N,N-二异丙基乙胺的N,N-二甲基甲酰胺溶液中，使H-AA(X)-Glu(Rink Amide AM Resin)-OH或H-AA(X)-Asp(Rink Amide AMResin)-OH上裸露的氨基和羧基环合，得到Cyclo(AA-Glu(Rink Amide AM Resin))/Cyclo(AA-Asp(Rink Amide AM Resin))；
(7)用含三氟乙酸的裂解切割液切割Cyclo(AA-Glu(Rink Amide AM Resin))/Cyclo(AA-Asp(Rink Amide AM Resin))上的环二肽，得到Cyclo(AA-Glu)或Cyclo(AA-Asp)，即含天冬酰胺的环二肽或谷氨酰胺的环二肽。
2.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(1)中，将Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺溶解于N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入到脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin中，在氮气保护下常温反应2～3小时，抽滤，依次用异丙醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂，得到Fmoc-Glu(Rink Amide AM Resin)-OTrt或Fmoc-Asp(Rink Amide AM Resin)-OTrt。
3.根据权利要求2所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(1)中，所述脱除Fmoc保护基的Rink Amide AM Resin与Fmoc-Glu-OTrt或Fmoc-Asp-OTrt、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺的摩尔比为1:2～3:3～4:3～4。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(1)中，脱除Rink Amide AM Resin上Fmoc保护基的方法为：将Rink AmideAM Resin用N,N-二甲基甲酰胺溶胀4～6小时后，加入哌啶体积浓度为25％的哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液，在氮气保护下常温反应20～30分钟，脱掉树脂上的Fmoc保护基，然后依次用异丙醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂，抽滤，得到脱除Fmoc保护基的Rink Amide AMResin。
5.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(2)和(4)中，所述哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液为哌啶与N,N-二甲基甲酰胺体积比为1:3的混合溶液，脱除Fmoc保护基的反应时间为20～30分钟。
6.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(3)中，所述Fmoc-AA(X)-OH、1-羟基苯并三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺与步骤(1)中RinkAmide AM Resin的摩尔比为2～3:3～4:3～4:1。
7.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(5)中，所述三氟乙醇/醋酸的二氯甲烷溶液为三氟乙醇、醋酸、二氯甲烷体积比2:1:7的混合溶液，脱除Trt保护基的反应时间为2～3小时。
8.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(6)中，所述六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、N,N-二异丙基乙胺与步骤(1)中Rink Amide AM Resin的摩尔比为2～3:2～4:1，环合反应时间为2～3小时。
9.根据权利要求1所述的含天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法，其特征在于：步骤(7)中，所述含三氟乙酸的裂解切割液选自三氟乙酸与三异丙基硅烷、苯甲硫醚、水体积比为88:5:4:3的混合液或三氟乙酸与三异丙基硅烷、水体积比为92:5:3的混合液或三氟乙酸与水的体积比为95:5的混合液；切割时间为90～150分钟。
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