CN113274304A - 一种高纯度甘草黄酮微乳组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及化妆品技术领域,特别涉及一种高纯度甘草黄酮微乳组合物及其制备方法。本发明的高纯度甘草黄酮微乳包括高纯度甘草黄酮0.5%~2.2%、油相1.2%~2.2%、乳化剂5.0%~10.0%、助乳化剂1.3%~3.2%、去离子水82.4%~92.0%。本发明的高纯度甘草黄酮微乳组合物通过对高纯度甘草黄酮原料、油相、乳化剂、助乳化剂、去离子水的合理组方以及通过一定工艺制备而成,能够有效提高甘草黄酮的溶解度和透皮吸收速率,增加药物稳定性,还具有溶解度大、稳定性好等优点,可制备为微乳化妆水、微乳凝胶、微乳软膏等剂型投入工业化生产,应用于实际生活中。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,特别涉及一种高纯度甘草黄酮微乳组合物及其制备方法。
背景技术
甘草黄酮是中药甘草中重要的活性成分之一,目前从甘草中已分离鉴定出300余种黄酮类化合物,可大致分为黄酮类、黄烷类、异黄酮类、黄酮醇类、查尔酮类以及二氢黄酮等十几类,其中光甘草定就属于异黄酮类成分。研究表明:光甘草定能有效抑制黑色素生成过程中多种酶的活性,同时还有防止皮肤粗糙、抗氧化的功效,是一种安全温和、有效的美白活性成分。由于黄酮类成分的溶解度低,耐碱性和抗光解能力差,化学性质不稳定,在其透皮速率及美白疗效的发挥上有负面影响,限制了其在美白产品中的应用。
现有技术中有研究者将纯的光甘草定与其他辅料做成纳米组合物以促进光甘草定的皮肤透过性、滞留量、载药量及稳定性等性能。但现有技术中所做成的纳米组合物的粒径仍旧在 30~100nm,这说明油水界面积,药物透过量与稳定性都不及微乳组合物,且使用的辅料成分过多,制备过程中需要高温、高速剪切等操作,制备工艺繁杂且存在一定的危险性。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明旨在提供一种高纯度甘草黄酮微乳组合物及其制备方法,该微乳组合物配方简洁,溶解度大,性质稳定,具有更高的透皮率,且本发明高纯度甘草黄酮微乳组合物的活性更高,制备方法也更加简单易操作。
为了实现上述目的,本发明具体采用如下技术方案:
一种高纯度甘草黄酮微乳组合物,包括如下重量含量的组分:
优选的,所述高纯度甘草黄酮微乳组合物包括如下重量含量的组分:
优选的,所述高纯度甘草黄酮微乳组合物包括如下重量组分:
优选的,所述高纯度甘草黄酮包括如下重量组分:
优选的,所述油相选自肉豆蔻异丙酯、橄榄油中的一种或两种;所述乳化剂选自月桂醇聚醚-9、氢化蓖麻油中的一种或两种;所述助乳化剂选自1,3-丁二醇、丙二醇中的一种或两种。
前述所述的高纯度甘草黄酮微乳组合物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取处方量的乳化剂与助乳化剂在37℃、300~400r/min磁力搅拌加热锅内搅拌15min,得到混合乳化剂;
(2)取处方量的油相加入步骤(1)中保温的混合乳化剂中,在37℃、300~400r/min磁力搅拌加热锅内继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(3)取处方量的高纯度甘草黄酮,分3~5次逐渐加入到所述步骤(2)中保温的溶液中,在37℃、200~300r/min磁力搅拌加热锅内边加入边搅拌,直至高纯度甘草黄酮全部溶解,后在37℃水温超声2h,确保完全溶解;
(5)继续于37℃、200~300r/min磁力搅拌下逐滴滴加处方量的去离子水,持续搅拌直至形成稳定的淡黄色澄清溶液,冷却至室温,即得成品。
有益效果
本发明的高纯度甘草黄酮微乳组合物溶解度更大、稳定性更好,粒径更是意想不到的小,从而保证了极佳的透皮率,可制备为微乳化妆水、微乳凝胶、微乳软膏等剂型投入工业化生产,应用于实际生活中。本发明还公开了一种上述微乳组合物的制备方法,通过对高纯度甘草黄酮原料、油相、乳化剂、助乳化剂、去离子水的合理组方以及通过一定工艺保证上述微乳的制备。
本发明的微乳组合物在极端条件下依然能具有良好的稳定性,没有药物析出和分层现象发生,粒径几乎无变化,溶液的淡黄色稍有加深,但仍然保持澄清透明,说明本发明方法所得到的高纯度甘草黄酮微乳组合物对环境适应性更好,这是意想不到的好效果。
附图说明
图1实施例1产品粒径测量结果图。
图2实施例2产品粒径测量结果图。
图3实施例2所得产品图。
图4实施例3产品粒径测量结果图。
图5实施例4产品粒径测量结果图。
图6本发明实施例所用高纯度甘草黄酮样品中成分的含量图。
图7本发明实施例中高纯度甘草黄酮、纯光甘草定对酪氨酸酶活性抑制对比图。
图8实施例1所得产品图。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的,决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
下面结合实施例对本发明进行详细说明,以方便本领域技术人员理解本发明。
本发明所用高纯度甘草黄酮购自西安熙隆生物科技有限公司;批号:20191127-1。
本发明高纯度甘草黄酮样品主要成分分析
准确称取0.1g本发明实施例所用高纯度甘草黄酮样品,加入30mL甲醇,超声溶解30min,过滤,滤液加乙醇定容至50mL,配置高纯度甘草黄酮样品溶液。进样前过0.45μm微孔滤膜,进样测定。准确称取光甘草定、甘草苷、甘草素和甘草香豆素对照品适量,精密称定,用流动相配制成不同浓度的对照品溶液。以0.1%甲酸水溶液,乙腈为流动相,使用色谱柱为 KromasilC18(250×4.6mm,5um)对样品进行检测。通过对照品比对,测定了高纯度甘草黄酮样品中4种成分的含量,结果如图6所示显示:光甘草定是主要成分,其次是甘草苷、甘草素和甘草香豆素,上述成分的含量各不相同。通过与对照品中各成分浓度和峰面积进行比较,高纯度甘草黄酮中各主要成分含量占比如下:
表1本发明实施例所用的高纯度甘草黄酮样品主要成分分析结果
色谱峰号 | 成分名称 | 含量百分比 |
1 | 甘草苷 | 1.8% |
2 | 甘草素 | 2.9% |
3 | 光甘草定 | 86.2% |
4 | 甘草香豆素 | 2.5% |
使用上述高纯度甘草黄酮进行本发明的下述实验。
实施案例1
制备方法:
(1)按处方量称取各原料备用
(2)将6.72g月桂醇聚醚-9与1.80g丙二醇在37℃、380r/min磁力搅拌加热锅内搅拌 15min,直至混合均匀后保温备用;
(3)将1.48g的肉豆蔻酸异丙酯加入步骤(2)中已混匀并保温的混合乳化剂中,在37℃、 380r/min磁力搅拌加热锅内搅拌继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(4)取高纯度甘草黄酮1.50g,分5次逐渐加入到所述步骤(3)中已混匀并保温的溶液中,在37℃、250r/min磁力搅拌加热锅内边加边搅拌,直至甘草黄酮全部溶解,在37℃水温超声2h助溶,确保完全溶解;
(5)继续于37℃、250r/min磁力搅拌下逐滴滴加60.00g的去离子水,持续搅拌直至形成稳定的淡黄色澄清溶液,冷却至室温,即得成品。成品如图8所示。
实施案例2
制备方法:
(1)按处方量称取各原料备用
(2)将6.72g月桂醇聚醚-9与1.80g丙二醇在37℃、380r/min磁力搅拌加热锅内搅拌 15min,直至混合均匀后保温备用;
(3)将1.48g的肉豆蔻酸异丙酯加入步骤(2)中已混匀并保温的混合乳化剂中,在37℃、 380r/min磁力搅拌加热锅内搅拌继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(4)取非高纯度甘草黄酮1.50g(购于西安瑞盈生物科技有限公司;批号RY200815;经紫外分光光度法检测甘草黄酮含量为45.9%),分5次逐渐加入到所述步骤(3)中已混匀并保温的溶液中,在37℃、250r/min磁力搅拌加热锅内边加边搅拌,直至甘草黄酮全部溶解,在37℃水温超声2h助溶,确保完全溶解;
(5)继续于37℃、250r/min磁力搅拌下逐滴滴加60.00g的去离子水,持续搅拌直至形成淡黄色澄清溶液,冷却至室温,即得成品。成品如图3所示。
如图3所示,本实施例中采用非高纯度甘草黄酮组合物制备出的微乳液存在大量黑褐色不溶性杂质,静止24小时后仍有絮状物析出,取本发明微乳液适量,用激光粒度仪测定粒径大小,测得平均粒径为81.84nm,但其中82.1%的粒径皆不符合微乳标准。相比于高纯度甘草黄酮组合物制备出的微乳液,非高纯度甘草黄酮组合物制备出的微乳液稳定性不强,形态外观较差,微乳液质量不佳。
实施案例3
制备方法:
(1)按处方量称取各原料备用
(2)将6.13g月桂醇聚醚-9与1.64g1,3-丁二醇在37℃、320r/min磁力搅拌加热锅内搅拌15min,直至混合均匀后保温备用;
(3)将2.23g的肉豆蔻酸异丙酯加入步骤(2)中已混匀并保温的混合乳化剂中,在37℃、 320r/min磁力搅拌加热锅内搅拌继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(4)取高纯度甘草黄酮0.90g,分3次逐渐加入到所述步骤(3)中已混匀并保温的溶液中,在37℃、220r/min磁力搅拌加热锅内边加边搅拌,直至甘草黄酮全部溶解,在37℃水温超声2h助溶,确保完全溶解;
(5)继续于37℃、220r/min磁力搅拌下逐滴滴加100.00g的去离子水,持续搅拌直至形成稳定的淡黄色澄清溶液,冷却至室温,即得成品。
实施案例4
制备方法:
(1)按处方量称取各原料备用
(2)将6.06g氢化蓖麻油与2.68g丙二醇在37℃、350r/min磁力搅拌加热锅内搅拌15min,直至混合均匀后保温备用;
(3)将1.26g的肉豆蔻酸异丙酯加入步骤(2)中已混匀并保温的混合乳化剂中,在37℃、 350r/min磁力搅拌加热锅内搅拌继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(4)取高纯度甘草黄酮0.50g,分4次逐渐加入到所述步骤(3)中已混匀并保温的溶液中,在37℃、280r/min磁力搅拌加热锅内边加边搅拌,直至甘草黄酮全部溶解,在37℃水温超声2h助溶,确保完全溶解;
(5)继续于37℃、280r/min磁力搅拌下逐滴滴加80.00g的去离子水,持续搅拌直至形成稳定的无色透明澄清溶液,冷却至室温,即得成品。
本发明采用激光粒度仪测定了上述四个实施例所得到的甘草黄酮微乳组合物乳滴粒径大小。实施例1-4粒径测量结果分别如图1-2、4-5所示,结果如下:
表2本发明实施例1-4所得微乳组合物乳滴粒径测定结果
实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 |
粒径(nm) | 12.80±0.12 | 81.84±0.48 | 17.63±0.27 | 19.01±0.56 |
采用本专利实施案例的配方所制备的微乳液的粒径范围,与现有文献报道相比较,粒径更小,说明本发明所述的高纯度甘草黄酮微乳组合物的油水界面积更大,有利于药物的透皮吸收,且具有更高的稳定性。
将实施例1-4的微乳液分别放置在25℃、4℃的避光条件下存放60天,观察样品的性状以及测定样品的粒径结果如下:
表3本发明实施例1-4所得微乳稳定性测定结果
经观察,本发明实施例1、实施例3和实施例4所述高纯度甘草黄酮微乳组合物在60天内没有药物析出和分层现象发生,粒径几乎无变化,溶液的淡黄色稍有加深,但仍然保持澄清透明。表明本发明所述高纯度甘草黄酮微乳组合物在60天内稳定性良好。
实施案例5
本发明高纯度甘草黄酮对B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶活性的影响
材料、试剂与仪器
小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16);胎牛血清(PBS),DMEM高糖培养基,0.25%胰蛋白酶(0.02%EDTA),PBS缓冲液(pH7.4),SpectraMax190全波长酶标仪,二氧化碳培养箱,倒置显微镜(GX51)
细胞内酪氨酸酶活性的测定
在96孔板中加入细胞浓度为7×104个/mL的细胞悬液100μL,待贴壁24h后,添加10μL不同浓度的高纯度甘草黄酮和光甘草定样品,每一浓度设5个复孔。对照组以DMEM高糖培养基代替样品溶液。37℃,5%CO2条件下孵育3d后,弃去上清液。用pH7.4的PBS 洗涤2次,每孔加10mL/L的TritonX-100溶液90μL,振荡5min溶解细胞,经37℃预温5min 后,每孔加入质量分数为1%的L-DOPA溶液10μL,37℃孵育30min,在酶标仪490nm处测定吸光度,以空白孔调零,测各孔吸光度值。酪氨酸酶活性抑制率=(1-各浓度平均吸光度值÷对照组平均吸光度值)×100%。
结果如图7所示,图中实线代表高纯度甘草黄酮实验结果,虚线表示光甘草定实验结果。结果显示高纯度甘草黄酮、光甘草定对酪氨酸酶活性呈浓度依赖性抑制,高纯度甘草黄酮对酪氨酸酶活性的抑制最强。高纯度甘草黄酮对B16细胞酪氨酸酶抑制率在10、20、40、60、 80和100μg/mL时高于光甘草定。其中,浓度为10-40μg/mL范围内,两者对酪氨酸酶活性抑制率相近;当浓度高于40μg/mL时,高纯度甘草黄酮对酪氨酸酶活性的抑制率显著高于光甘草定。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。
Claims (6)
5.根据权利要求1所述的高纯度甘草黄酮微乳组合物,其特征在于,
所述油相选自肉豆蔻异丙酯、橄榄油中的一种或两种;
所述乳化剂选自月桂醇聚醚-9、氢化蓖麻油中的一种或两种;
所述助乳化剂选自1,3-丁二醇、丙二醇中的一种或两种。
6.权利要求1~5任一项所述的高纯度甘草黄酮微乳组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取处方量的乳化剂与助乳化剂在37℃、300~400r/min磁力搅拌加热锅内搅拌15min,得到混合乳化剂;
(2)取处方量的油相加入步骤(1)中保温的混合乳化剂中,在37℃、300~400r/min磁力搅拌加热锅内继续搅拌15min,直至混匀后保温备用;
(3)取处方量的高纯度甘草黄酮,分3~5次逐渐加入到所述步骤(2)中保温的溶液中,在37℃、200~300r/min磁力搅拌加热锅内边加入边搅拌,直至高纯度甘草黄酮全部溶解,后在37℃水温超声2h;
(5)继续于37℃、200~300r/min磁力搅拌下逐滴滴加处方量的去离子水,持续搅拌直至形成稳定的淡黄色澄清溶液,冷却至室温,即得成品。
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GR01 | Patent grant | ||
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