CN113265389A - LuxS蛋白突变体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种LuxS蛋白突变体及其应用，涉及微生物发酵技术领域。本发明公开的LuxS蛋白突变体其由野生型LuxS蛋白突变得到而来。该LuxS蛋白突变体能够明显提高芽孢杆菌的抗生素含量，可用于抗生素生产，提高抗生素的产量；本发明为利用芽孢杆菌生产抗生素提高产量提供了一种新的策略和方法。

Description

LuxS蛋白突变体及其应用
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术领域，具体而言，涉及一种LuxS蛋白突变 体及其应用。
背景技术
芽孢杆菌目前占据微生物肥料市场最多的一类植物有益细菌，由于其 巨大的经济价值而受到广泛研究，瓦雷兹芽孢杆菌FZB42(B.velezensis FZB42)是这类细菌研究的模式菌株之一。FZB42具有突出的抗生素合成 能力，能够通过核糖体或和非核糖体肽合成酶(NRPS)途径，合成包括聚 酮类抗生素和细菌素在内的十几种抑菌物质，对多种病原微生物均具有较 强抑菌作用。在这些抑菌物质中，bacilysin(溶杆菌素)是一种具有高效抗 菌活性的二肽，对真菌和细菌均具有强烈抑菌活性；surfactin(表面活性素) 是一种具有极强的生物表面活性的酯肽类抗生素，具有凝血抑制效果、抗 肿瘤和抗病毒的作用；fengycin(丰原素)是一种由10个氨基酸组成的环 肽抗生素，不仅具有良好的抗肿瘤效果，还能够引起植物病原菌毛果分枝 杆菌的细胞裂解；bacillomycin D也是一种脂肽类化合物，是一种表明活性 剂，同时具有强烈的抑制病原真菌的活性；difficidin(地夫西丁或地非西丁) 是一种具有广谱抗菌活性的聚酮类抗生素，首次发现于枯草芽孢杆菌ATCC 39320的发酵液中，能够抑制病原菌的蛋白合成；bacillaene是一种聚酮类 抗生素，最早在枯草芽孢杆菌中发现，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都具 有抑菌活性，但对酿酒酵母等真菌无明显抑菌活性；macrolactin家族是一 类具有选择性抗菌活性的聚酮类抗生素，包含macrolactin A-F，其中 macrolactin A具有抑制哺乳动物疱疹病毒的能力。与瓦雷兹芽孢杆菌FZB42 近缘的种属，如瓦雷兹芽孢杆菌其他菌株、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、解 淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)等，也大多含有类似抗生素的基因簇， 也能够产生这些抗菌物质。不过，目前这些抗生素大多尚未大规模生产应 用，主要原因包括天然菌株的产量较低；单纯依靠发酵优化手段对产量提 高幅度有限；缺乏高效分离提取工艺等因素。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供LuxS蛋白突变体及其应用，以解决上述技术问 题。
本发明是这样实现的：
一方面，本发明提供一种LuxS蛋白突变体，其由野生型LuxS蛋白通 过如下突变方式突变得到：将所述野生型LuxS蛋白中的一个或多个赖氨酸 丙二酰化修饰位点的氨基酸突变为R或E；
所述野生型LuxS蛋白的种属来源为芽孢杆菌。
细菌的S-核糖-高半胱氨酸裂解酶(LuxS)是一种同型二聚体，能够催 化S-核糖-高半胱氨酸(SRH)的硫醚键断裂，产生高半胱氨酸 (Homocysteine)和4,5-二羟基-2,3-戊二酮(DPD)，后者自发环化为群体 感应的自体诱导剂(AI-2)。SRH是活性甲基循环(AMC)的成员，而群体 感应信号分子AI-2通常被视为介导细菌种内和种间通讯的通用语言。 AI-2/LuxS具有调节细菌多细胞行为的能力，例如调节细胞的运动性和生物 膜，但是其调控的机制仍是未知的。
赖氨酸丙二酰化是一种动态可逆的蛋白质翻译后修饰(PTM)，可通过 调节糖酵解途径、TCA循环途径、脂肪酸代谢途径的代谢影响许多真核生 物的生物学过程。
本发明的发明人意外地发现，对芽孢杆菌的LuxS蛋白的一个或多个赖 氨酸丙二酰化修饰位点进行突变，突变为R或E后，该LuxS蛋白突变体 能够明显提高芽孢杆菌的抗生素含量，可用于抗生素生产等诸多领域，提 高抗生素的产量。本发明为利用芽孢杆菌生产抗生素提高生产量提供了一 种新的策略和方法。
丙二酰化修饰位点是指用质谱确定的蛋白上发生了丙二酰化的氨基酸 位点。基于现有技术，当前发现的蛋白质丙二酰化位点主要发生于赖氨酸 残基上，但并非所有赖氨酸残基上均会发生丙二酰化修饰。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述芽孢杆菌为瓦雷兹芽孢杆 菌或者与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌，例 如Bacillus pumilus、Bacillus subtilis、Bacillus mycoides、Bacillus cereus、 Bacillus licheniformis、Bacillus thuringiensis、Bacillus luti、Bacillus tropicus、 Bacillus toyonensis、Bacillus pseudomycoides、Bacillus gaemokensis和Bacillus bingmayongensis等。
需要说明的是，上述的野生型LuxS蛋白可以是来源于任何具有LuxS 基因的细菌，并不限于芽孢杆菌。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述野生型LuxS蛋白的氨基酸 序列为SEQID NO.1，所述野生型LuxS蛋白的赖氨酸丙二酰化修饰位点为 第124位和第130位。
SEQ ID NO.1的野生型LuxS蛋白来源于瓦雷兹芽孢杆菌FZB42，其第 124位和第130位为赖氨酸丙二酰化修饰位点，在此基础上突变得到的LuxS 蛋白突变体能够大幅度提高抗生素的产量。其他与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS 蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌的野生型LuxS蛋白与SEQ ID NO.1 的相似性和同一性如下：
Figure BDA0002999922620000031
Figure BDA0002999922620000041
另一方面，本发明提供一种分离的核酸分子，其编码如上任一项所述 的LuxS蛋白突变体。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述核酸序列选自SEQ ID NO.3-6中的任意一种。
需要说明的是，本领域技术人员根据密码子的简并性容易获得编码上 述LuxS蛋白突变体的核酸序列，无论何种核酸序列，只要其编码上述的 LuxS蛋白突变体，即属于本发明的保护范围。
另一方面，本发明提供一种重组载体，其含有如上所述的核酸分子。
另一方面，本发明提供一种重组细胞，其含有如上所述的核酸分子， 或者含有如上所述的重组载体。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述重组细胞为芽孢杆菌。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述芽孢杆菌为瓦雷兹芽孢杆 菌或者与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述重组细胞的保藏编号为 CCTCC NO:M2021253或CCTCC NO:M 2021255。
另一方面，本发明提供如上所述的LuxS蛋白突变体、如上所述的核酸 分子、如上所述的重组载体、或如上所述的重组细胞在生产抗生素中的应 用。
采用上述LuxS蛋白突变体、核酸分子、重组载体或重组细胞生产抗生 素的具体方法，是本领域技术人员根据本领域的常规技术能够知晓的，例 如基因工程技术等；因此，无论采用何种方法，只要是使用了本发明上述 提供的LuxS蛋白突变体、核酸分子、重组载体或重组细胞即属于本发明的 保护范围。
可选地，在本发明的一些实施方案中，上述抗生素为difficidin(地夫 西丁)和bacilysin(溶杆菌素)。
感觉另一方面，本发明提供一种芽孢杆菌代谢产物的制备方法，其包 括：培养目标芽孢杆菌；
所述目标芽孢杆菌含有LuxS基因，该基因编码的LuxS蛋白中的一个 或多个赖氨酸丙二酰化修饰位点的氨基酸为R或E。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述芽孢杆菌为瓦雷兹芽孢杆 菌或者与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述LuxS蛋白的第124位为R 或E，或/和第130位为R或E。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述芽孢杆菌的保藏编号为 CCTCC NO:M2021253或CCTCC NO:M 2021255。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述代谢产物为培养上清液。
可选地，在本发明的一些实施方案中，所述代谢产物为difficidin和/或bacilysin。
另一方面，本发明提供一种抑菌制剂，其含有由如上所述的制备方法 制得的代谢产物。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需 要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些 实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲， 在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为野生型瓦雷兹芽孢杆菌及其突变菌株的无细胞上清液对巨大芽 孢杆菌的抑菌圈直径。
图2为野生型瓦雷兹芽孢杆菌及其突变菌株的无细胞上清液对金黄色 葡萄球菌的抑菌圈直径。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发 明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件 者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产 厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
构建LuxS点突变(K124E、K124R、K130E和K130R)和双突变 (K124E&K130E，和K124R&K130R)，具体如下：
以野生型瓦雷兹芽孢杆菌FZB42为出发菌株(该菌株从德国菌种保藏 中心(DSMZ23117T)购得)，用引物FBO-445、FBO-453和Pfu DNA聚合 酶扩增其野生型luxS基因(命名为FZB42luxS，核酸序列如SEQ ID NO.2 所示)及其侧翼区域，野生型瓦雷兹芽孢杆菌FZB42中的LuxS蛋白的氨 基酸序列如SEQ ID NO.1所示；将得到的PCR产物用Taq聚合酶添加A尾，然后插入至商品化pMD-19载体(Takara)，得到质粒pMD-19-luxs。用引物 FBO-449和FBO-450反扩增pMD-19-luxS，与speR基因(壮观霉素抗性基 因)连接得到pFB106(pMD-19-luxS-speR)。将质粒pFB106转化到FZB42 中，测序确认，得到luxS基因敲除菌株FBS119(△LuxS)。
pFB01(用于插入外源基因到amyE位点的整合型质粒)在使用前用 AvaI和ClaI进行双消化，用引物FBO-465、FBO-495和Pfu DNA聚合酶扩 增FZB42luxS，得到的PCR产物经双酶切后，luxS扩增片段与酶切后的 pFB01连接，得到pFB108，并转化为FBS119，得到回补菌株FBS121(△ LuxS/+LuxS)。
以pFB108为模板，利用引物FBO-518和FBO-517构建pFB145，获得 LuxS(K130E)突变序列；
利用引物FBO-518和FBO-516构建pFB144，获得LuxS(K130R)突变 序列；
利用引物FBO-545和FBO-547构建pFB109，获得LuxS(K124R)突变 序列；
利用引物FBO-546和FBO-547构建pFB110，获得LuxS(K124E)突变 序列。以pFB109为模板，利用引物FBO-516和FBO-518构建pFB146， 获得LuxS双突变序列(K124R,K130R)；
以pFB145为模板，利用引物FBO-546和FBO-547构建pFB147，获 得LuxS双突变序列(K124E,K130E)；
将载体pFB109、pFB110、pFB144、pFB145、pFB146和pFB147分别 转入敲除株FBS119(△LuxS)，最后测序确认，得到相应的单点突变株 FBS122(K124R)、FBS123(K124E)、FBS124(K130R)、FBS125(K130E)以 及双突变株FBS126(K124R&K130R)和FBS127(K124E&K130E)。
其中，点突变株FBS122(K124R)于2021年3月19日保藏于中国典型 培养物保藏中心，地址：武汉大学，保藏号为：CCTCC NO:M 2021253， 分类命名为：Bacillus velezensisFBS122。
其中，突变株FBS124(K130R)于2021年3月19日保藏于中国典型培 养物保藏中心，地址：武汉大学，保藏号为：CCTCC NO:M 2021255，分 类命名为：Bacillus velezensisFBS124。
构建过程中，采用的引物序列如表1所示：
表1
引物 序列(5’-3’)
FBO-445 ATACCAAACATCTAAATTCCCGG
FBO-449 CGATCACTTCGACATCATAGATA
FBO-450 GCAGAAGCGAATGTCAAACTTAT
FBO-453 TTGTTCTGCGCTCTCATTGC
FBO-465 ATA<u>ATCGAT</u>CTTCCGCCACAATTCTTA(ClaI)
FBO-495 ATA<u>CTCGAG</u>AGCATACCGCACATACCT(AvaI)
FBO-516 ATCATGAAGTCTCGCCTGGCC
FBO-517 ATCATGAAGTTCCGCCTGGCC
FBO-518 TTAGAAGGCGCGAAACGTCTGAT
FBO-545 GCGGCCAACGAAAGACAGTGC
FBO-546 GCGGCCAACGAAGAACAGTGC
FBO-547 CGGAATCTCCGTAATATCGAT
单点突变K124E的LuxS基因核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，单点 突变K124R的LuxS基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，单点突变K130E 的LuxS基因核苷酸序列如SEQID NO.5所示，单点突变K130R的LuxS 基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
实施例2
使用对Difficidin敏感的巨大芽孢杆菌FBS015和对Bacilysin敏感的金 黄色葡萄球菌ATCC9144来评估LuxS氨基酸点突变对这两种抗生素产生的 影响。具体方案如下：
(1)将巨大芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌在LB液体培养基中摇培至 OD600＝1.0，再将培养液与尚未凝固的固体LB培养基(每升含有10g蛋 白胨，5g酵母提取物，5g氯化钠，15g琼脂)(50℃)按照1：300的比 例混合，倒平板晾干并打孔备用；
(2)将在LB培养基中过夜预培养的FZB42野生型和单点突变株 (FBS122(K124R)、FBS123(K124E)、FBS124(K130R)、FBS125(K130E)) 和双突变株，按1％接种量分别转接到新鲜的液体LB培养基中，37℃， 200rpm条件下培养，取培养3小时，5小时和7小时的无细胞上清液；
(3)添加100μl无细胞上清液到步骤(1)制得的巨大芽孢杆菌和金 黄色葡萄球菌指示平板的孔中，晾干后再37℃下孵育12h。
结果见图1-图2，图1为瓦雷兹芽孢杆菌FZB42野生型及点突变株 K124E、K124R、K130E和K130R和双突变株的无细胞上清液对巨大芽孢 杆菌的抑菌圈厚度，图2为瓦雷兹芽孢杆菌FZB42野生型及点突变株 K124E、K124R、K130E和K130R以及双突变株的无细胞上清液对金黄色 葡萄球菌ATCC 9144(B)的抑菌圈厚度，由图1-2可以看出，与野生型相 比，所有单点突变株(K124E、K124R、K130E和K130R)和双突变株的 无细胞上清液对巨大芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果明显增强， LuxS敲除株并无此效果。
上述实施例利用LuxS蛋白的定点突变提高了瓦雷兹芽孢杆菌FZB42 的抗生素产量，并通过氨基酸定点突变的方法获得了LuxS点突变株菌株， 该点突变株菌株具有外源性抗生素抗性基因，且能合成多种抗生素，可以 抑制发酵液中其他微生物生长。在瓦雷兹芽孢杆菌FZB42野生型菌株中， 抗生素等次生代谢产物在稳定期开始合成，与野生型菌株相比，点突变株 在生长前期(3小时)即可合成抗生素，在较短的时间内即可获得大量具有 抑菌活性的抗生素，提高了抗生素产量和合成效率。
以上结果充分表明在芽孢杆菌(例如瓦雷兹芽孢杆菌)的LuxS蛋白的 任意一个或多个赖氨酸丙二酰化修饰位点进行突变(突变为R或E)均能 够增加抗生素(例如Difficidin和Bacilysin)的产量。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于 本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精 神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明 的保护范围之内。
序列表
<110> 南京林业大学
<120> LuxS蛋白突变体及其应用
<160> 6
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 157
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Met Pro Ser Val Glu Ser Phe Glu Leu Asp His Asn Ala Val Val Ala
1 5 10 15
Pro Tyr Val Arg His Cys Gly Val His Lys Val Gly Thr Asp Gly Val
20 25 30
Val Asn Lys Phe Asp Ile Arg Phe Cys Gln Pro Asn Lys Gln Ala Met
35 40 45
Lys Pro Asp Thr Ile His Thr Leu Glu His Leu Leu Ala Phe Thr Ile
50 55 60
Arg Thr His Ser Glu Lys Tyr Asp His Phe Asp Ile Ile Asp Ile Ser
65 70 75 80
Pro Met Gly Cys Gln Thr Gly Tyr Tyr Leu Val Val Ser Gly Glu Pro
85 90 95
Thr Ala Glu Glu Ile Val Asp Leu Leu Asp Ala Thr Leu Lys Glu Ala
100 105 110
Ile Asp Ile Thr Glu Ile Pro Ala Ala Asn Glu Lys Gln Cys Gly Gln
115 120 125
Ala Lys Leu His Asp Leu Glu Gly Ala Lys Arg Leu Met Arg Phe Trp
130 135 140
Leu Ser Gln Asp Lys Glu Asp Leu Leu Lys Val Phe Gly
145 150 155
<210> 2
<211> 474
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
atgccttcag tagaaagttt tgagcttgac cataatgcgg ttgtggctcc gtatgtaaga 60
cattgcggag tgcataaagt cggaacagac ggcgtcgtga ataagtttga cattcgcttc 120
tgccagccga acaaacaggc gatgaagccg gataccattc atacgcttga gcacttgctt 180
gcgtttacga ttcgcacaca ttctgagaaa tacgatcact tcgacatcat agatatctca 240
ccgatgggct gccagacagg ctattatctt gttgtcagcg gggagccgac agcggaagaa 300
attgtagacc tgcttgacgc tacgctgaaa gaagccatcg atattacgga gattccggcg 360
gccaacgaaa aacagtgcgg ccaggcgaaa cttcatgatt tagaaggcgc gaaacgtctg 420
atgcgtttct ggctgtcaca ggataaagaa gatttgctga aagtgttcgg ataa 474
<210> 3
<211> 474
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
atgccttcag tagaaagttt tgagcttgac cataatgcgg ttgtggctcc gtatgtaaga 60
cattgcggag tgcataaagt cggaacagac ggcgtcgtga ataagtttga cattcgcttc 120
tgccagccga acaaacaggc gatgaagccg gataccattc atacgcttga gcacttgctt 180
gcgtttacga ttcgcacaca ttctgagaaa tacgatcact tcgacatcat agatatctca 240
ccgatgggct gccagacagg ctattatctt gttgtcagcg gggagccgac agcggaagaa 300
attgtagacc tgcttgacgc tacgctgaaa gaagccatcg atattacgga gattccggcg 360
gccaacgaag aacagtgcgg ccaggcgaaa cttcatgatt tagaaggcgc gaaacgtctg 420
atgcgtttct ggctgtcaca ggataaagaa gatttgctga aagtgttcgg ataa 474
<210> 4
<211> 474
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
atgccttcag tagaaagttt tgagcttgac cataatgcgg ttgtggctcc gtatgtaaga 60
cattgcggag tgcataaagt cggaacagac ggcgtcgtga ataagtttga cattcgcttc 120
tgccagccga acaaacaggc gatgaagccg gataccattc atacgcttga gcacttgctt 180
gcgtttacga ttcgcacaca ttctgagaaa tacgatcact tcgacatcat agatatctca 240
ccgatgggct gccagacagg ctattatctt gttgtcagcg gggagccgac agcggaagaa 300
attgtagacc tgcttgacgc tacgctgaaa gaagccatcg atattacgga gattccggcg 360
gccaacgaaa gacagtgcgg ccaggcgaaa cttcatgatt tagaaggcgc gaaacgtctg 420
atgcgtttct ggctgtcaca ggataaagaa gatttgctga aagtgttcgg ataa 474
<210> 5
<211> 474
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
atgccttcag tagaaagttt tgagcttgac cataatgcgg ttgtggctcc gtatgtaaga 60
cattgcggag tgcataaagt cggaacagac ggcgtcgtga ataagtttga cattcgcttc 120
tgccagccga acaaacaggc gatgaagccg gataccattc atacgcttga gcacttgctt 180
gcgtttacga ttcgcacaca ttctgagaaa tacgatcact tcgacatcat agatatctca 240
ccgatgggct gccagacagg ctattatctt gttgtcagcg gggagccgac agcggaagaa 300
attgtagacc tgcttgacgc tacgctgaaa gaagccatcg atattacgga gattccggcg 360
gccaacgaaa aacagtgcgg ccaggcggaa cttcatgatt tagaaggcgc gaaacgtctg 420
atgcgtttct ggctgtcaca ggataaagaa gatttgctga aagtgttcgg ataa 474
<210> 6
<211> 474
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
atgccttcag tagaaagttt tgagcttgac cataatgcgg ttgtggctcc gtatgtaaga 60
cattgcggag tgcataaagt cggaacagac ggcgtcgtga ataagtttga cattcgcttc 120
tgccagccga acaaacaggc gatgaagccg gataccattc atacgcttga gcacttgctt 180
gcgtttacga ttcgcacaca ttctgagaaa tacgatcact tcgacatcat agatatctca 240
ccgatgggct gccagacagg ctattatctt gttgtcagcg gggagccgac agcggaagaa 300
attgtagacc tgcttgacgc tacgctgaaa gaagccatcg atattacgga gattccggcg 360
gccaacgaaa aacagtgcgg ccaggcgaga cttcatgatt tagaaggcgc gaaacgtctg 420
atgcgtttct ggctgtcaca ggataaagaa gatttgctga aagtgttcgg ataa 474

Claims (10)

1.一种LuxS蛋白突变体，其特征在于，其由野生型LuxS蛋白通过如下突变方式突变得到：将所述野生型LuxS蛋白中的一个或多个赖氨酸丙二酰化修饰位点的氨基酸突变为R或E；
所述野生型LuxS蛋白的种属来源为芽孢杆菌。
2.根据权利要求1所述的LuxS蛋白突变体，其特征在于，所述芽孢杆菌为瓦雷兹芽孢杆菌或者与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌。
3.根据权利要求1或2所述的LuxS蛋白突变体，其特征在于，所述野生型LuxS蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，所述野生型LuxS蛋白的赖氨酸丙二酰化修饰位点为第124位和第130位。
4.一种分离的核酸分子，其特征在于，其编码如权利要求1-3任一项所述的LuxS蛋白突变体；
优选地，所述核酸序列选自SEQ ID NO.3-6中的任意一种。
5.一种重组载体，其特征在于，其含有权利要求4所述的核酸分子。
6.一种重组细胞，其特征在于，其含有权利要求4所述的核酸分子，或者含有权利要求5所述的重组载体。
7.根据权利要求6所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞的保藏编号为CCTCCNO:M 2021253或CCTCC NO:M 2021255。
8.权利要求1-3任一项所述的LuxS蛋白突变体、权利要求3或4所述的核酸分子、权利要求4所述的重组载体、或权利要求6或7所述的重组细胞在生产抗生素中的应用。
9.一种利用芽孢杆菌生产代谢产物的方法，其特征在于，其包括：培养目标芽孢杆菌；
所述目标芽孢杆菌含有LuxS基因，该基因编码的LuxS蛋白中的一个或多个赖氨酸丙二酰化修饰位点的氨基酸为R或E；
优选地，所述芽孢杆菌为瓦雷兹芽孢杆菌或者与瓦雷兹芽孢杆菌的LuxS蛋白同源性超过50％的近缘芽孢杆菌；
优选地，所述LuxS蛋白的第124位为R或E，或/和第130位为R或E；
优选地，所述芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO:M 2021253或CCTCC NO:M 2021255；
优选地，所述代谢产物为培养上清液；
优选地，所述代谢产物为difficidin和/或bacilysin。
10.一种抑菌制剂，其特征在于，其含有由权利要求9所述的方法制得的代谢产物。
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