CN113249264A

CN113249264A - 一株青春双歧杆菌及其在代谢综合征中的应用

Info

Publication number: CN113249264A
Application number: CN202110617294.2A
Authority: CN
Inventors: 徐文艺; 赵柏闻; 李转羽; 齐桂红; 张虹璇
Original assignee: Beijing Quantihealth Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Quantihealth Technology Co ltd
Priority date: 2021-06-03
Filing date: 2021-06-03
Publication date: 2021-08-13
Anticipated expiration: 2041-06-03
Also published as: CN113249264B

Abstract

本发明提供一株青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）及其在代谢综合征中的应用，涉及微生物领域，其保藏编号为CGMCC No.22147于2021年4月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，本发明提供的青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）能够促进HepG2肝癌细胞葡萄糖消耗，抑制α‑淀粉酶活性，并且可以显著降低高脂饮食小鼠的体重和血脂含量，改善葡萄糖耐量及胰岛素抵抗，并缓解肝脏脂肪变性，对于预防或治疗糖尿病和肥胖等代谢性疾病的发生具有重要的应用意义。

Description

一株青春双歧杆菌及其在代谢综合征中的应用

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其涉及一种青春双歧杆菌及其在代谢综合征中的应用。

背景技术

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖是一种空腹血糖异常的病理状态，也是通常所说的“三高”中的一高。短时间、一次性的高血糖对人体无严重损害，持续的高血糖水平会引起心脏、肾脏和神经等全身脏器的损伤病变和功能障碍。临床发现糖尿病是失明、肾衰竭、心脏病发作、中风和下肢截肢的主要病因。根据世界卫生组织的数据，仅2016年一年，大约160万人死于糖尿病。目前，我国的糖尿病患病率已居世界首位，发病率高达10%以上，因此，为了提高国民的身体健康水平和减轻社会的医疗负担，控制高血糖从而遏制糖尿病势在必行。

目前治疗指南大多建议多因素干预，主要包括限制高糖饮食，适当运动以及药物干预。临床上广泛使用的控糖药物主要是二甲双胍和阿卡波糖。尽管药物使用能够发挥有效的降糖功效，但是伴随的胃肠道副作用和药物耐受性限制了不少高血糖人群的使用。除了家族史，久坐不动的生活方式和饮食之外，越来越多的证据表明，肠道菌群在2型糖尿病的发展中发挥重要作用。2020年1月发表在Ebiomedicine杂志上的一篇综述系统性地展示了一些肠道菌属与2型糖尿病的存在密切关联，如：拟杆菌属、罗斯氏菌属、粪杆菌属、AKK菌属和双歧杆菌属。值得注意的是，肠道菌群还会影响治疗糖尿病的药物活性，二甲双胍和西格列汀与益生元或益生菌（动物双歧杆菌（Bifidobacterium.animalis））联用能更有效降低高血糖水平。最新的一项研究表明，一种新型特医益生菌食品，包含艾克曼菌（Akkermansia muciniphila），婴儿双歧杆菌（Bifidobacterium infantis）及三株丁酸产生菌株，能有效地控制2型糖尿病患者的高血糖水平。因此，基于肠道菌群的肠道微生态治疗和健康干预已成为当前的一个研究热点。据报道，乳酸杆菌和双歧杆菌等益生菌可有效改善肠道菌群，缓解糖尿病、肥胖症等代谢性疾病。由于肠道菌群，尤其是益生菌，安全性较高，分离纯化成本低，那么开发益生菌作为下一代调血糖产品的市场前景将十分广阔。但是，目前已知的益生菌数量仍然有限，因此，肠道微生态资源及相关功能仍有待于挖掘和研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有降高血糖功效的青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）及其应用；该双歧杆菌能够促进HepG2肝癌细胞葡萄糖消耗，抑制α-淀粉酶活性，并且可以显著降低高脂饮食小鼠的体重、血脂和血糖含量，改善葡萄糖耐量及胰岛素抵抗，并缓解肝脏脂肪变性。

本发明第一方面提供保藏编号为CGMCC No. 22147的青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）或其培养上清液或其死菌体。

其中，所述青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）命名为BUAD，已于2021年4月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo. 22147，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

本发明第二方面提供了上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防代谢综合征的药物中的应用。

本发明第三方面提供了上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防高血糖的药物中的应用。

本发明第四方面提供了上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防脂肪肝的药物中的应用。

本发明第五方面提供了上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体作为食品或食品成分的应用。

本发明第六方面提供了药物组合物，其包括上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体。

本发明第七方面提供了食品，其包括上述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体。

本发明第八方面提供了治疗患者的代谢综合征的方法，包括向所述患者给药第一方面所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体或第六方面所述的药物组合物。

需要说明的是，本发明所称的代谢综合征为包括但不限于肥胖、高血糖、高血压、血脂异常、高血黏、高尿酸、高脂肪肝发生率、胰岛素抵抗、高胰岛素血症。

需要说明的是，本发明所称的改善包括但不限于降低血糖含量，降低体重，降低血脂含量，抑制α-淀粉酶活性，减少胰岛素抵抗，提高葡萄糖耐量，缓解肝脏脂肪变性。

需要说明的是，本发明所称的药物组合物还包括剂型上或药学可接受的载体。例如冻干粉、片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆和乳剂或药剂领域普通技术人员熟知的剂型。

其中，当剂型或药学上可接受的载体为固态药物组合物时(如胶囊、片剂和粉剂)，可以包含合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂、致流动剂和熔化剂等，其中，合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成树胶，如阿拉伯胶、黄耆胶或藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中所用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括(但不限于)淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

其中，胶囊（例如明胶胶囊）可包含活性成分和粉状载体，如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。类似的稀释剂可用来制备压制片。片剂和胶囊均可制成即时释放产品或缓释产品。压制片可以包糖衣或包膜以遮蔽任何令人不快的味道及保护片剂不受大气影响，或包肠衣使其在胃肠道中选择性崩解。

其中，当剂型或药学上可接受的载体为液态药物组合物时，包含在水、药学上可接受的脂肪和油、醇包括酯或其它有机溶剂中的溶液或悬浮液、乳剂、糖浆或酏剂、悬浮液、溶液和/或从非泡腾颗粒重建的悬浮液及从泡腾颗粒重建的泡腾制剂等液体药物组合物。这样的液体剂型可包括例如合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、甜味剂、增稠剂和熔化剂。

其中，口服给药用的液态药物组合物可包含着色剂和调味剂以提高患者的接受度。一般来说，水、合适的油、盐水、含水右旋糖(葡萄糖)和相应的糖溶液和乙二醇(如丙二醇或聚乙二醇)是非经胃肠道溶液的合适载体。例如，在口服用片剂或胶囊剂型中，活性成分可与口服无毒的药学上可接受的惰性载体(如乳糖、明胶、琼脂、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露醇、山梨醇等)混合。

有益效果：

本发明提供的青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）BUAD能够促进HepG2肝癌细胞葡萄糖消耗，抑制α-淀粉酶活性，并且可以显著降低高脂饮食小鼠的体重和血脂含量，改善葡萄糖耐量及胰岛素抵抗，并缓解肝脏脂肪变性，对于预防或治疗糖尿病和肥胖等代谢性疾病的发生具有重要的应用意义。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解和说明，与具体实施方式一起用于解释本发明，但并不限制本发明。

图1显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD的质谱鉴定图；

图2显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD对人工胃液、肠液及胆盐的耐受性；其中，A图为青春双歧杆菌BUAD在模拟胃液中处理1h，2h和3h后的存活率统计，B图为青春双歧杆菌BUAD在模拟肠液中处理1h，2h和3h后的存活率统计，C青春双歧杆菌BUAD在胆盐浓度为0，0.3%，0.5%和1%条件下的存活率统计；

图3显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD活菌及发酵上清液对α-淀粉酶（A）和α-葡萄糖苷酶（B）活性的抑制。阿卡波糖作为阳性对照。*，p<0.05; **，p<0.01; ***，p<0.001；

图4显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD发酵上清液对HepG2肝癌细胞葡萄糖消耗的影响，胰岛素作为阳性对照，上清液的添加量设置两个浓度，分别为15%（v/v细胞培养基体积）和30%。 *，p<0.05; **，p<0.01; ***，p<0.001；

图5显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD改善高脂喂养小鼠的葡萄糖和胰岛素耐受。（A）小鼠OGTT口服葡萄糖耐量实验，（B）小鼠ITT胰岛素耐量实验；

图6显示本发明中的青春双歧杆菌BUAD降低高脂喂养小鼠血糖水平和血脂含量。（A）血清葡萄糖含量统计，（B）血清总甘油三酯TG含量统计，（C）血清总胆固醇TC含量统计，（D）血清低密度脂蛋白胆固醇LDL-c含量统计。*，p<0.05; **，p<0.01; ***，p<0.001。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性而非限制性，不应以此限制本发明的保护范围。

除非另外定义，本发明中使用的所有术语(包括技术术语和科学术语)均具有如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。在现有技术与本发明冲突的情况下，应当以本发明为准。

实施例1 青春双歧杆菌BUAD的筛选和鉴定

本发明提供的青春双歧杆菌BUAD的筛选过程如下：

1、样品的采集

采集健康成年人的粪便作为筛选样品，采集前人群未服用过抗生素类药物，无益生菌服用史，无胃肠病史。

2、菌种的分离

将采集的粪便样品稀释后涂布于MRS培养基，37℃厌氧培养24-48h，挑取单菌落在新的MRS培养基平板上划线培养，获得纯化的菌落，然后将单菌落涂布在质谱板上，分别加入裂解液和基质干燥后在MALDI-TOF MS 1000质谱仪（Autobio，郑州安图生物科技有限公司）上进行上机鉴定，鉴定结果如图1所示，根据图1的质谱菌种鉴定结果可以判断，本实施例中分离的菌株隶属于青春双歧杆菌种。

需要说明的是，粪便样品的稀释为本领域常规方法，本发明不做限制，在本发明的一个实施例中，使用清水对粪便样品进行稀释。

实施例2 青春双歧杆菌BUAD活菌液，代谢产物及灭活菌体的制备

1、菌种的培养

取-80℃冻存菌液涂布于MRS固体平板，在37℃条件下倒置培养24-48h后，取单菌落接种于液体MRS培养基中，37℃培养18-24h，得到一代菌液；取一代菌液10%接种至新鲜MRS液体培养基，37℃培养18-24h得到二代菌液；取二代菌液10%接种于新鲜的MRS液体培养基中，37℃培养18-24h得到工作菌液。

2、活菌液的获得

活菌液还可以通过本技术领域中的其他方式获得，只要能从培养液中富集菌体即可。例如可以通过离心和/或过滤的方法实现。

在本发明的一个实施例中，是将步骤1获得的工作菌液置于13000 rpm，4℃的条件下离心15 min后，弃去上清，收集沉淀，用生理盐水重悬，获得具有活菌体的活菌液。

3、代谢产物的获得

菌体代谢产物一般存在菌体的培养液中，因此，可以通过将菌体的培养液进行固液分离，获得上清液的方式来获得代谢产物。当然，细菌培养物上清液的制备也可在厌氧环境下进行。在本发明的一个实施例中，具体是将工作菌液于13000 rpm，4℃离心15 min后留取上清液转移至无菌离心管后即可获得细菌培养物上清液，4℃存放备用，获得代谢产物。

4、死菌液的获得

死菌体可以通过本领域常规的手段进行制备，例如，加热，辐射等。在本发明的一个实施例中，通过将活菌体在温度为65-85℃条件下，加热0.5-1.5h致死获得死菌体的死菌液。

实施例3 青春双歧杆菌BUAD的胃肠道耐受力实验

1、青春双歧杆菌BUAD对人工胃液耐受性测定

1.1 人工胃液的制备

准确量取20 ml的1 mol/l盐酸溶液，加蒸馏水将盐酸溶液调节pH值为2.5，然后将胃蛋白酶（1 g/100 ml）加入到调节后的盐酸溶液中，经充分溶解后，使用0.22 µm滤膜对溶解后的胃蛋白酶过滤除菌后，制得人工胃液。

1.2 菌株的耐受性测试

收集培养后的活菌体于13000 rpm，4℃离心15 min后，弃去液体，留取菌体沉淀，用生理盐水重悬，按照活菌数10⁹CFU/ml接入到pH2.5的模拟胃液中，于37℃温度分别培养0,1h,2h,3h后取样进行活菌数检测，以0 h的活菌数为对照，计算其存活率，存活率（%）=（1h/2h/3 h的活菌数/ 0 h的活菌数）*100%，实验结果如图2A所示。

根据图2A的结果可知，本发明的青春双歧杆菌BUAD菌株对人工胃液表现出较好的耐酸性，在pH 2.5环境中1h后，本发明的青春双歧杆菌BUAD的存活率高达88.2%，3 h后的存活率仍大于71.4%，表明青春双歧杆菌BUAD在强酸环境中能保持较高的存活率，作为益生菌可以经受胃部强酸性环境的考验，有利于充分发挥益生作用。

2、青春双歧杆菌BUAD对人工肠液的耐受性测定

2.1 人工肠液的制备

称取磷酸二氢钾6.8 g，胰酶10 g，加水其充分使溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，稀释到1000 ml，即可作为人工肠液。

2.2 菌株的耐受性测试

将重悬活菌液按10⁹CFU/ml接种于人工肠液中，在37℃条件下分别培养0，1，2，3 h后取样进行活菌数检测，以0 h活菌数为对照，计算菌株存活率，存活率（%）=（1h/2h/3 h的活菌数/ 0 h的活菌数）*100%,实验结果如图2B所示。

根据图2B所示的结果可以看出，本发明的青春双歧杆菌BUAD菌株具有较好的肠液耐受性，在pH 6.8的环境中1h后，本发明的青春双歧杆菌BUAD的存活率高达86.2%，3h后的存活率仍大于70.6%，表明青春双歧杆菌BUAD在强酸环境中能保持较高的存活率，作为益生菌可以在肠道中发挥益生作用。

3、青春双歧杆菌BUAD胆盐耐受性测定

将收集培养后的菌体于13000 rpm，4℃条件下离心15 min后，弃去液体，留取菌体沉淀，用生理盐水重悬，按照活菌数10⁹CFU/ml分别接入到胆盐浓度为0，0.3%，0.5%和1%的溶液中，37℃培养3 h后，进行活菌数检测，并计算其存活率，以0 h的活菌数为对照，存活率（%）=（3 h后0.3%/ 0.5%/ 1%胆盐溶液中的活菌数/ 0 h的活菌数）*100%，检测结果如图2C所示。

根据图2C所示的结果可以看出，本发明的青春双歧杆菌BUAD菌株具有较好的胆盐耐受性，与无胆盐添加组相比，胆盐添加0.3 %时，本发明的青春双歧杆菌BUAD的存活率可达81.2%，当胆盐含量达1%时，该菌株的存活率高达46.2%，因此，上述结果表明本发明的青春双歧杆菌BUAD能够很好地耐受胆盐，满足益生菌在人体胃肠消化道的存活要求。

实施例4 青春双歧杆菌BUAD在降糖方面的应用（体外试验）

1、青春双歧杆菌BUAD抑制淀粉酶抑制测定

取质量浓度为2 mg/ml的α-淀粉酶溶液2 ml（用50 mM，pH7.0的PBS缓冲液配制），分别加2 ml样液（BUAD活菌悬液和发酵上清液），37℃下反应30 min后加入2 ml 1%可溶性淀粉，37℃反应15 min，加碘液显色，用酶标仪测定660 nm处的吸光值OD660。其中，MRS培养基作为阴性对照，阿卡波糖用作阳性对照，实验结果如图3A所示。

根据图3A的结果可以看出：BUAD活菌悬液和发酵上清液的淀粉酶抑制率平均值约为22.5%和20.1%，表明菌株及其代谢产物具有较高的淀粉酶抑制活性，可见，本发明提供的菌株能有效抑制唾液淀粉酶的胰液淀粉酶活性，降低机体血糖和血脂水平。

2、青春双歧杆菌BUAD对α-葡萄糖苷酶的影响

取30 µl青春双歧杆菌BUAD样品（包括活菌悬液和发酵上清液）于30 µl α-葡萄糖苷酶酶液（0.1U/ml）混合，在37℃下孵育10 min，之后加入60 µl底物pNPG（0.5mM），在37℃下反应20 min，加入100 µl 2M的碳酸钠溶液终止反应。然后用酶标仪测定405nm处的吸光值OD405。其中，MRS培养基作为阴性对照，阿卡波糖用作阳性对照，实验结果如图3B所示。

根据图3B所示的结果可以看出：BUAD活菌悬液和发酵上清液的α-葡萄糖苷酶抑制率接近，分别为23.2%和23.4%，阿卡波糖的抑制率能达到32.1%。表明菌株及其分泌至胞外的代谢物质具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性，由于具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的物质能有效防治餐后高血糖和缓解高胰岛素血症，因此，本申请提供的菌株能够有效防治餐后高血糖和缓解高胰岛素血症。

实施例5 青春双歧杆菌BUAD发酵上清液促进肝细胞葡萄糖消耗的分析

1、人源肝癌HepG2细胞的培养

本发明所用的人源肝癌HepG2细胞购自于国家生物医学实验细胞资源库。细胞培养采用本领域公知的培养方式，本发明不作限制。

在本发明的一个实施例中，将人源肝癌HepG2细胞培养在37℃和5% CO₂条件下用含10%胎牛血清（FBS）的高糖DMEM培养基中，并且培养基中按1:100的比例添加双抗（100ug/ml青霉素和100ug/ml链霉素），每1-2d更换一次新鲜的培养液。

观察并将生长状态良好的对数生长期的人源肝癌HepG2细胞，以适宜浓度接种于96孔板中，每孔加入细胞悬液100 µl，并留出一排不加细胞作为空白组，培养24 h至细胞完全贴壁。实验时弃去原培养基，并轻轻拍打96孔板，保证培养基倾倒干净。每8个孔为一组，换上高糖无酚红的不完全培养基，然后进行对应的处理，其中样品组每孔加入含15%/30%体积如上制备的工作菌株发酵上清液，对照组加入同等体积的培养菌株所用培养基MRS，阳性药组则加入用不完全培养基配制的胰岛素溶液（终浓度10 µmol/L）。将细胞放入培养箱中孵育培养24 h后测定培养基上清中葡萄糖含量。每孔取2 µl培养基上清于新的96孔板中，按南京建成葡萄糖氧化酶试剂盒操作说明加入250 µl反应液，放入37℃烘箱中反应10min。待反应液显色完全后，用酶标仪测定505nm处吸光度，然后按试剂盒说明书计算每组的葡萄糖消耗量，实验结果如图4所示。

根据图4的实验结果可以看出，原始细胞培养基中的葡萄糖含量为22.5mmol/L，添加本发明青春双歧杆菌BUAD发酵上清液（15%和30%）后细胞培养基中的葡萄糖含量降低之平均值约为16.8 mmol/L和15.3 mmol/L，阳性对照组胰岛素处理细胞后培养基中葡萄糖含量降至平均值约为14.2 mmol/L，可见，本发明提供的青春双歧杆菌BUAD菌株发酵上清液能够显著促进HepG2肝癌细胞消耗葡萄糖。

实施例6 青春双歧杆菌BUAD在调节血糖方面的应用（动物试验）

本实施例用以说明本发明的青春双歧杆菌BUAD降血糖和改善葡萄糖及胰岛素耐受的功效。

1、OGTT实验

动物实验所用小鼠购买自北京维通利华实验动物，选取8周龄雄性C57BL/6小鼠32只，随机分4组（正常组Chow，模型组HFD，青春双歧杆菌BUAD活菌液组，BUAD死菌体组），随机分配每组8只动物。正常组给予标准小鼠饲料，其余各组给予60%脂肪功能的高脂饲料喂养8周。之后进行灌胃实验，其中BUAD活菌组每天给予1x10⁹CFU的青春双歧杆菌BUAD活菌；BUAD死菌体组每天给予灭活菌体重悬液，模型组则给予等体积的生理盐水。连续给菌4周，每周称量小鼠体重后记录体重数据，解剖前小鼠体重减去灌胃前小鼠体重记为体重增加。进行OGTT实验前一天过夜禁食，配置20%的葡萄糖溶液，按1g/kg的常用剂量进行葡萄糖灌胃，然后计时，用罗氏血糖仪检测葡萄糖灌胃0,30,60,90,120 min时间点的血糖值。

结果如图5A所示，高脂饮食喂养后，小鼠口服葡萄糖耐量OGTT实验显示BUAD活菌和死菌都能有效改善高脂饮食导致的葡萄糖耐受，增强机体对葡萄糖的敏感性。

2、ITT实验

动物实验所用小鼠购买自北京维通利华，选取8周龄雄性C57BL/6小鼠32只，随机分4组（正常组Chow，模型组HFD，青春双歧杆菌BUAD活菌液组，BUAD死菌体组），随机分配每组8只动物。正常组给予标准小鼠饲料，其余各组给予60%脂肪功能的高脂饲料喂养8周。之后进行灌胃实验，其中BUAD活菌组每天给予1x10⁹CFU相应的青春双歧杆菌BUAD活菌；BUAD死菌体组每天给药灭活菌体重悬液，模型组则给予等体积的生理盐水。进行ITT实验前饥饿2-5h，准备实验所用胰岛素，按0.75U/kg的常用剂量进行腹腔注射，然后计时，用罗氏血糖仪检测胰岛素注射后0,30,60,90,120 min时间点的血糖值。

胰岛素耐量ITT如图5B所示，高脂饮食喂养后，小鼠体重明显增加，导致机体对胰岛素的敏感性降低，而分别灌胃青春双歧杆菌活菌和死菌后，胰岛素抵抗得到很好改善，促进了机体维持平衡的血糖状态。

3、生化指标检测

在整个动物实验结束后进行眼眶取血，4℃离心取上清作为血清样品，用于测量血糖和血清甘油三酯TG，总胆固醇TC和低密度脂蛋白胆固醇LDL-c的含量，并收集肝脏组织，检测肝脏中甘油三脂和胆固醇的含量，评估本发明中青春双歧杆菌BUAD菌株对高脂饮食小鼠的脂肪肝变性的改善情况。

结果如图6所示：高脂饮食能够除了导致小鼠体重显著增加，也提高了禁食状态下血糖（A）、甘油三酯（B）、总胆固醇（C）和低密度脂蛋白胆固醇（D）的水平，呈现明显的高血糖和高脂血症表型，提示小鼠的糖脂代谢功能异常。本发明的青春双歧杆菌BUAD活菌和灭活菌体，能显著降低动物的血糖和血脂（TG、TC和LDL-c）水平，显示出良好的降血糖和降血脂活性。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，再不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims

1.保藏编号为CGMCC No. 22147的青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）或其培养上清液或其死菌体。

2.权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防代谢综合征的药物中的应用。

3.权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防高血糖的药物中的应用。

4.权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体在制备用于改善和/或预防脂肪肝的药物中的应用。

5.权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体作为食品或食品成分的应用。

6.药物组合物，其包括权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体。

7.食品，其包括权利要求1所述的青春双歧杆菌或其培养上清液或其死菌体。