CN113248525B - 狗牙花属植物提取物及其提取分离方法和用途 - Google Patents

狗牙花属植物提取物及其提取分离方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了狗牙花属植物提取物及其提取分离方法和用途，所述的狗牙花属植物提取物含有双吲哚生物碱E‑1～E‑16中的一种以上。本发明提取分离得到的狗牙花属植物提取物含有双吲哚生物碱类化合物，其可选择性地舒张肺动脉，抑制肺动脉内皮细胞和血管平滑肌细胞增殖，降低肺动脉高压小鼠的右心室舒张压和抑制右心室肥厚。此外，该系列双吲哚类生物碱化合物具有与现有肺动脉高压治疗靶向药物不同的化学结构类型，狗牙花属植物提取物有望发展成为一类新型的肺动脉高压治疗靶向药物。

Description

狗牙花属植物提取物及其提取分离方法和用途
技术领域
本发明属于植物天然产物领域，具体涉及狗牙花属植物提取物及其提取分离方法和用途。
背景技术
肺动脉高压(Pulmonary hypertension)是由各种原因导致肺动脉压力升高的一种常见的恶性进展性肺血管疾病，其病理学特征表现为肺小动脉过度收缩和血管重构。内皮细胞功能紊乱表现为血管舒张物质如一氧化氮(nitric oxide)和前列环素等减少，内皮素等血管收缩物质水平上升，从而导致肺动脉过度收缩。血管重构表现为内膜新生、中膜增厚和外膜纤维化等，内皮细胞和平滑肌细胞激活和过度增殖是血管重构的主要原因。因此，舒张肺小动脉和抑制肺小动脉血管重构是治疗肺动脉高压的理想选择，为肺动脉高压治疗药物开发提供了靶点。目前，临床上的治疗药物仅能在短期内改善患者症状，患者长期预后并不理想。因此，迫切需要开发新型的肺动脉高压治疗靶向药物。
药物(毒品)成瘾包括躯体依赖和心理依赖，一旦形成常会伴随终身，表现为强迫性的用药行为、强烈的药物渴求和复吸。药物成瘾是全球性的公害，也是世界性的医学难题；临床上主要用具有成瘾性的药物替代疗法进行戒毒，阿片类如美沙酮、纳曲酮等，均不能同时戒除躯体依赖和心理依赖，而且使用不当又会出现新的依赖；非阿片类在临床上仅能起到辅助治疗作用且多具副作用；因此，急需寻找和开发高效低毒的新型抗成瘾药物。
ZL 200610031038.0、CN 1915993A、CN 1554656A公开了来源于狗牙花属植物的生物碱及其用途。
ZL 200610031038.0具体涉及扇形狗牙花用95％乙醇提取然后转溶于酸水，酸水用碱调pH值9-10并产生沉淀，过滤沉淀得总生物碱；总生物碱含有14个单萜吲哚类生物碱单倍体；该总生物碱具有镇痛和戒毒作用。
CN 1915993A具体涉及海南狗牙花用95％乙醇提取然后转溶于酸水，酸水用碱调pH值8-10并产生沉淀，有机溶剂萃取得总生物碱；总生物碱含有9个单萜吲哚类生物碱单倍体；该总生物碱具有镇痛和戒毒作用。
CN 1554656A具体涉及云南狗牙花用乙醇水提取然后转溶于酸水，或用酸水提取，两种酸水均用碱调pH值8-10并产生沉淀，接着用有机溶剂萃取并合并沉淀得总生物碱；该总生物碱含有8个单萜吲哚类生物碱单倍体、2个单萜吲哚类生物碱双倍体、及苦参碱共11个化合物，具有镇痛和戒毒作用。
以上文献均未进一步富集分离有生物活性的生物碱，其药用功能也比较单一。
发明内容
本发明在现有技术的基础上，进一步明确了狗牙花属植物提取物的有效成分为双吲哚生物碱；同时明确和扩展了狗牙花属植物提取物的生理用途，发现其有治疗肺动脉高压和抗药物成瘾的活性，具有良好的成药前景。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
狗牙花属植物提取物，含有双吲哚生物碱；
所述的双吲哚生物碱为以下化合物中的一种以上：
3'R-hydroxytaberdivarine C(E-1)、3'-oxotaberdivarine C(E-2)、taberdivarine C(E-3)、tabernaelegantine B(E-4)、tabernaelegantine D(E-5)、19,20-dihydroervahanine A(E-6)、3'-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-7)、ervadivaricatine B(E-8)、6’-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-9)、19,20-dihydroervahanine A(E-10)、tabernaelegantine A(E-11)、3'R-hydroxytabernaelegantine C(E-12)、3'-oxotabernaelegantine A(E-13)、conoduramine(E-14)、ervahanine A(E-15)和ervahanine B(E-16)；
化合物E-1～E-16的化学结构如下所示：
Figure BDA0003028168310000031
所述狗牙花属植物提取物的提取分离方法，包括以下步骤：
将植物原料用提取溶剂做浸提，提取液适当浓缩后调节pH值为酸性，经有机溶剂萃取后，调节酸水层pH值为碱性，有机溶剂萃取，适当浓缩；最后用Sephadex LH-20层析柱层析，CH2Cl2-CH3OH(1:1)洗脱；收集最先洗脱部分，为含有双吲哚生物碱的狗牙花属提取物；
所述的提取分离方法也可以包括以下步骤：
将植物原料用提取溶剂做浸提，提取液适当浓缩后上样于阳离子交换树脂柱后，依次用水、氨水洗脱，收集氨水洗脱液，有机溶剂萃取，适当浓缩；最后用Sephadex LH-20层析柱层析，CH2Cl2-CH3OH(1:1)洗脱，收集最先洗脱部分，为含有双吲哚生物碱的狗牙花属提取物；
所述的提取溶剂可以是水、酸性水、无水乙醇，或任意浓度的乙醇水溶液；
所述的酸性水优选浓度5-10％盐酸水溶液；
所述的浸提优选渗漉提取；
所述的酸性优选pH值为2-3，所述的碱性优选pH值为9-10；
所述的有机溶剂优选氯仿或二氯甲烷；
所述的阳离子交换树脂优选732(H+型)树脂；
所述的氨水优选0.5mol/L氨水。
本发明所述的狗牙花植物是指夹竹桃科(Apocynaceae)狗牙花属(Ervatamia)植物，优选狗牙花[Ervatamia divaricata(L.)Burk.cv.Gouyahua]、药用狗牙花(Ervatamiaofficinalis Tsiang)或海南狗牙花(Ervatamia hainanensis Tsiang)。
本发明的狗牙花属植物提取物可以用于制备治疗肺动脉高压的药物和抗成瘾药物；
所述的药物，包含本发明的双吲哚生物碱化合物、和/或其药学上可接受的盐、和/或其立体异构体、和/或其前药分子；
“前药”表示在体内转变为本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药。
所述的药物，包含一种或多种药学上可接受的载体和/或稀释剂。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
1、本发明提取分离得到的狗牙花属植物提取物含有双吲哚生物碱类化合物，其可选择性地舒张肺动脉，抑制肺动脉内皮细胞和血管平滑肌细胞增殖，降低肺动脉高压小鼠的右心室舒张压和抑制右心室肥厚。此外，该系列双吲哚类生物碱化合物具有与现有肺动脉高压治疗靶向药物不同的化学结构类型，狗牙花属植物提取物有望发展成为一类新型的肺动脉高压治疗靶向药物。
2、本发明实验结果结果显示，狗牙花属植物提取物含有的双吲哚生物碱类化合物可剂量依赖性的抵抗药物成瘾，且具有与现有抗成瘾药物不同的化学结构类型，有望发展成为一类新型的抗成瘾药物。
附图说明
图1是化合物E-13对苯肾上腺素诱导小鼠主动脉和肺动脉收缩的舒张效果；A-对主动脉收缩的舒张效果；B-对肺动脉收缩的舒张效果。
图2是狗牙花属提取物1、2和3及化合物E-11干预前后斑马鱼游动轨迹记录图。
图3是狗牙花属提取物1、2和3及化合物E-11干预前后斑马鱼在非偏爱箱中活动时间差值和运动总路程差值；其中，a-活动时间差值，b-运动总路程差值。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：狗牙花属提取物的提取分离方法
取狗牙花(E.divaricata)干燥根10Kg，粉碎，用10％盐酸水渗漉提取，合并提取液，调其pH值到2-3，再用氯仿反复萃取，分别得到氯仿层和酸水层。在酸水层中加入氨水，调pH值到9-10，再用氯仿萃取得到总生物碱。总生物碱用Sephadex LH-20层析柱，CH2Cl2-CH3OH(1:1)洗脱；收集最先洗脱部分，TLC检测合并，得狗牙花属提取物1。
实施例2：狗牙花属提取物的提取分离方法
取药用狗牙花(E.officinalis)干燥叶子5Kg，粉碎，用95％的乙醇渗漉提取，合并提取液后减压浓缩得到总浸膏。然后加水混悬，再加入10％盐酸，调其pH值到2-3，用氯仿反复萃取，分别得到氯仿层和酸水层。在酸水层中加入氨水，调pH值到9-10，再用氯仿萃取得到总生物碱。总生物碱用Sephadex LH-20层析柱，CH2Cl2-CH3OH(1:1)洗脱；收集最先洗脱部分，TLC检测合并，得狗牙花属提取物2。
实施例3：狗牙花属提取物的提取分离方法
取海南狗牙花(E.hainanensis)干燥整株10Kg，粉碎，用5％盐酸水渗漉提取，合并提取液，过滤，上清液上样于732(H+型)阳离子交换树脂柱后，依次用水、0.5mol/L氨水洗脱，收集氨水洗脱液，CH2Cl2萃取，减压蒸干，得到总生物碱。总生物碱用Sephadex LH-20层析柱，CH2Cl2-CH3OH(1:1)洗脱；收集最先洗脱部分，TLC检测合并，得狗牙花属提取物3。
实施例4：狗牙花属提取物中双吲哚生物碱的分离
实施例1所得的狗牙花属提取物1通过200-300目的硅胶进行柱层析，氯仿-甲醇为流动相进行梯度洗脱得到A-D共4个流分。经过TLC及HPLC分析，通过反复的Sephadex LH-20柱层析，ODS及高效液相色谱等方法得到以下化合物及其在分析HPLC的保留时间：从流分A分离得到化合物E-1(乙腈:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝23.3min)，E-2(乙腈:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝13.3min)，E-3(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝20.0min)，E-4(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝26.7min)，E-5(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝23.0min)，E-14(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝18.2min)。从流分C分离得到化合物E-6(乙腈:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝20.0min)，E-7(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝26.0min)，E-8(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝17.3min)，E-11(甲醇:水:二乙胺，90:10:0.2‰,tR＝10.5min)，E-12(甲醇:水:二乙胺，80:20:0.2‰,tR＝24.6min)，E-13(甲醇:水:二乙胺，80:20:0.2‰,tR＝12.0min)。
实施例2所得的狗牙花属提取物2通过200-300目的硅胶进行柱层析，氯仿-甲醇为流动相进行梯度洗脱得到A-D共4个流分。经过TLC及HPLC分析，通过反复的Sephadex LH-20柱层析，ODS及高效液相色谱等方法得到以下化合物及其在分析HPLC的保留时间：从流分A分离得到化合物E-3(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝20.1min)，E-4(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝26.9min)，E-5(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝23.2min)，E-14(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝18.3min)。从流分C分离得到化合物E-9(甲醇:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝16.6min)，E-10(甲醇:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝18.8min)，E-6(乙腈:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝20.1min)，E-11(甲醇:水:二乙胺，90:10:0.2‰,tR＝10.5min)，E-13(甲醇:水:二乙胺，80:20:0.2‰,tR＝12.1min)。
实施例3所得的狗牙花属提取物3通过200-300目的硅胶进行柱层析，氯仿-甲醇为流动相进行梯度洗脱得到A-D共4个流分。经过TLC及HPLC分析，通过反复的Sephadex LH-20柱层析，ODS及高效液相色谱等方法得到以下化合物及其在分析HPLC的保留时间：从流分A分离得到化合物E-3(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝20.2min)，E-4(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝26.9min)，E-14(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝18.1min)，E-15(甲醇:水:二乙胺，70:30:0.2‰,tR＝16.6min)，E-16(甲醇:水:二乙胺，70:30:0.2‰,tR＝13.7min)。从流分C分离得到化合物E-6(乙腈:水:二乙胺，60:40:0.2‰,tR＝19.9min)，E-8(甲醇:水:二乙胺，85:15:0.2‰,tR＝17.3min)，E-11(甲醇:水:二乙胺，90:10:0.2‰,tR＝10.4min)，E-12(甲醇:水:二乙胺，80:20:0.2‰,tR＝24.6min)，E-13(甲醇:水:二乙胺，80:20:0.2‰,tR＝11.9min)。
实施例5：狗牙花属提取物中双吲哚生物碱的结构鉴定
通过理化数据和波谱方法，实施例4中分离到的化合物鉴定为16个双吲哚生物碱，分别为：3'R-hydroxytaberdivarine C(E-1)、3'-oxotaberdivarine C(E-2)、taberdivarine C(E-3)、tabernaelegantine B(E-4)、tabernaelegantine D(E-5)、19,20-dihydroervahanine A(E-6)、3'-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-7)、ervadivaricatine B(E-8)、6’-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-9)、19,20-dihydrotabernamine A(E-10)、tabernaelegantine A(E-11)、3'R-hydroxytabernaelegantine C(E-12)、3'-oxotabernaelegantine A(E-13)、conoduramine(E-14)、ervahanine A(E-15)和ervahanine B(E-16)。
Figure BDA0003028168310000081
化合物E-1
黄色粉末(甲醇)；
Figure BDA0003028168310000082
-16.6(c 1.01,CH3OH)；改良碘化铋钾反应为阳性；UV(CH3OH)λmax(logε)224(3.38),285(3.92)；IR(KBr)νmax 3416,2953,2872,1722,1651,1459,1242,747cm-1；HR-ESI-MS:m/z:693.4018[M+H]+(calcd for C42H53N4O5,693.4010)；ECD(CH3OH)λmax 300(-12.0),240(+19.8),225(-30.7)；1H NMR(500MHz,CD3OD)和13C NMR(125MHz,CD3OD)见表1。
化合物E-2
黄色粉末(甲醇)；
Figure BDA0003028168310000083
-15.2(c 1.03,CH3OH)；改良碘化铋钾反应为阳性；UV(CH3OH)λmax(logε)225(3.54),286(3.10)；IR(KBr)νmax 3416,2955,2875,1726,1656,1460,1238,746cm-1；HR-ESI-MS:m/z:691.3850[M+H]+(calcd for C42H51N4O5,691.3854)；ECD(CH3OH)λmax 300(-16.0),239(+26.1),225(-28.9)；1H NMR(500MHz,CD3OD)和13C NMR(125MHz,CD3OD)见表2。
化合物E-7
黄色粉末(甲醇)；
Figure BDA0003028168310000091
-45.1(c 1.43,CH3OH)；改良碘化铋钾反应为阳性；UV(CH3OH)λmax(logε)225(3.54),286(3.10)；IR(KBr)νmax 3416,2955,2875,1726,1656,1460,1238,746cm-1；HR-ESI-MS:m/z:691.3850[M+H]+(calcd for C42H51N4O5,691.3854)；ECD(CH3OH)λmax 301(-4.3),239(+17.1),224(-21.1)；1H NMR(500MHz,CD3OD)和13C NMR(125MHz,CD3OD)见表3。
化合物E-9
黄色胶状；
Figure BDA0003028168310000092
+12.5(c 0.82,CH3OH)；碘化铋钾反应呈阳性；UV(CH3OH)λmax(logε)223(4.51),275(4.30),293(4.26)nm；IR(KBr)vmax 3278,2930,2869,1715,1661,1611,1455,1336,1231,1142,1012cm-1；HR-ESI-MS m/z:631.3643[M+H]+,calcd for C40H47N4O3,631.3643；ECD(CH3OH)λmax(Δε)218(-13.8),249(+17.6),294(+8.5),313(+5.8),348(-3.8)nm；1H NMR(600MHz,CDCl3)和13CNMR(150MHz,CDCl3)数据见表4.
表1.NMR data of E-1(CD3OD,δin ppm,J in Hz)
Figure BDA0003028168310000101
aOverlapped
表2.NMR data of E-2(CD3OD,δin ppm,J in Hz)a
Figure BDA0003028168310000111
aOverlapped
表3.NMR data of E-7(CD3OD,δin ppm,J in Hz)a
Figure BDA0003028168310000121
aOverlapped
表4NMR data of E-9(CDCl3,δin ppm,J in Hz)a
Figure BDA0003028168310000131
aSpectra recorded at 600MHz for 1H NMR and 150MHz for 13CNMR.Overlapped signals were reported without designating multiplicity.
实施例6：实施例4所得双吲哚生物碱对苯肾上腺素诱导小鼠主动脉和肺动脉收缩的舒张作用
实验方法：取正常C57/BL6小鼠，戊巴比妥钠麻醉，取肺组织或主动脉，置于4℃氧饱和的Krebs溶液中，快速分离肺动脉或主动脉，剪成1.8～2mm的血管环。将血管环用直径为40μm的金属丝固定在多通道血管张力测试仪上，设置初始张力为1mN(肺动脉)或3mN(主动脉)，平衡60分钟。平衡期间，使用含60mM钾离子的Krebs溶液收缩血管，收缩曲线稳定后用正常Krebs溶液清洗，保持基础张力不变(F0)。加入含60mM钾离子的Krebs溶液或者1μM的苯肾上腺素收缩血管，待收缩平衡后(F1)，浓度递增地加入实施例4所得双吲哚生物碱，记录加药后血管张力的变化(F2)。
血管舒张率按如下公式计算：舒张率(％)＝(F1-F2)/(F1-F0)×100
实验结果如表5和图1所示，化合物E-1～E-16均可浓度依赖性地舒张苯肾上腺素诱导的小鼠肺动脉收缩，而对小鼠主动脉无明显舒张作用，表明该类化合物对肺动脉具有选择性舒张作用。
表5：化合物E-1～E-16对苯肾上腺素诱导小鼠肺动脉收缩的舒张作用(n＝5～6)
Figure BDA0003028168310000141
实施例7：实施例4所得双吲哚生物碱对人肺动脉内皮细胞(hPAECs)和平滑肌细胞(hPASMCs)的增殖抑制作用
实验方法：hPAECs和hPASMCs分别接种到100mm培养皿中，待细胞融合到80％时，胰酶消化，重悬细胞。调整细胞密度，于96孔板中分别接种6000个hPAECs或hPASMCs，待细胞贴壁后，加入不同浓度的化合物E-1～E-16，培养24小时。每孔加入10μL MTT(5mg/mL)溶液，孵育4小时。弃培养液，加入DMSO，于570nm处检测吸光度值。
实验结果如表6所示，化合物E-1～E-16均能抑制hPAECs和hPASMCs增殖，其中代表化合物E-13的半数抑制浓度IC50分别为13.80±0.53μM和27.44±0.28μM。
表6：化合物E-1～E-16对人肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞的增殖抑制作用(n＝3)
Figure BDA0003028168310000151
实施例8：化合物E-13对低氧+SU5416诱导的肺动脉高压小鼠的右心室收缩压和右心室肥厚指数的影响
化合物E-13对低氧+SU5416诱导的肺动脉高压小鼠的右心室收缩压和右心室肥厚指数的影响
实验方法：C57/BL6小鼠40只，随机分为常氧组10只和低氧+SU5416 30只。将低氧组小鼠置于常压低氧箱内(氧气浓度为10％，v/v)，每天持续低氧，共28天，分别于第0,7,14,21天皮下注射SU5416(20mg/kg)。常氧组小鼠饲养在常氧常压的环境中。第28天检测右心室收缩压，成模小鼠随机分为3组，分别为低氧+SU5416、低氧+SU5416+化合物E-13低剂量(10mg/kg)和低氧+SU5416+化合物E-13高剂量(50mg/kg)组，常氧常压饲养，灌胃给药14天，1天/次。给药结束后，通过右心导管法检测而小鼠右心室收缩压。
取小鼠心脏，分离并称量右心室(RV)和左心室+室间隔(LV+S)重量，按如下公式计算右心室肥厚指数：右心室肥厚指数(％)＝RV/(LV+S)×100。
实验结果如表7所示，化合物E-13能有效地降低由低氧+SU5416诱导的肺动脉高压小鼠的右心室收缩压和抑制右心室肥厚。
表7.化合物E-13对低氧+SU5416诱导肺动脉高压小鼠右心室收缩压和右心室肥厚指数的影响
Figure BDA0003028168310000161
注：***p<0.001vs常氧组，#p<0.05和###p<0.001vs低氧+SU5416
实施例9：化合物E-13的小鼠口服半数致死率
实验方法：昆明种小鼠80只，20±2g，雌雄各半。分为8组，每组10只，化合物E-13按150mg/kg,176mg/kg,206mg/kg,242mg/kg,281mg/kg,329mg/kg,384mg/kg,450mg/kg，单次灌胃给药。观察14天内实验动物体重变化、饮食、外观、行为、排泄和死亡情况。半数致死率按如下公式计算：LD50＝lg-1[Xm-i×(ΣP-0.5)]，其中i＝0.068，Xm＝2.65，P为动物死亡率，ΣP为各组动物死亡率总和。LD50的95％可信限＝lg-1[lg(LD50)±1.96×SLD50]；SLD50＝i×(Σ(p×q)/n)0.5，其中p为死亡率，q为存活率，n＝为每组动物数量。
实验结果如表8所示，化合物E-13在150mg/kg,176mg/kg,206mg/kg,242mg/kg,281mg/kg,329mg/kg,384mg/kg,450mg/kg时小鼠死亡率分别为0，10％，30％，30％，50％，60％，80％和100％(表4)，经计算得到化合物E-13的LD50＝274.92mg/kg，其95％可信限为242.17mg/kg～304.99mg/kg。
表8.化合物E-13的小鼠口服半数致死率(LD50)
Figure BDA0003028168310000162
实施例10：狗牙花属提取物1、2、3和化合物E-11对药物依赖斑马鱼条件性位置偏爱实验(CPP)的影响
实验方法：条件性位置偏爱实验(CPP，是目前评价药物精神依赖性的经典实验模型)。通过苯丙胺依赖成年斑马鱼CPP模型(腹腔注射给药)，对化合物E-11的抗成瘾活性进行评价，采用腹腔注射给药(i.p.)，比较空白组、模型组(苯丙胺组，MDMA)、(模型组+狗牙花属提取物1或2或3)和(模型组+E-11)组在药物干预前后在非偏爱箱(给药箱)中的活动时间、运动总路程(5min)的差值(n＝10)。
实验结果如图2和图3所示，狗牙花属提取物1、2和3及化合物E-11在20μg/g(i.p.)能够改变苯丙胺诱导的斑马鱼CPP行为，具有一定的抗成瘾活性。
上述实验结果揭示了本发明的狗牙花属植物提取物可应用于肺动脉高压和药物成瘾的治疗。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.双吲哚生物碱，其特征在于是以下具体化合物：
3'R-hydroxytaberdivarine C(E-1)、3'-oxotaberdivarine C(E-2)、3'-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-7)、6’-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-9)、tabernaelegantine A(E-11)、3'R-hydroxytabernaelegantine C(E-12)、3'-oxotabernaelegantine A(E-13)、ervahanine A(E-15)和ervahanine B(E-16)；
所述化合物的化学结构如下所示：
Figure FDA0003787955280000011
2.双吲哚生物碱在制备治疗肺动脉高压的药物和抗成瘾药物中的应用，其特征在于：所述的双吲哚生物碱是以下化合物中的一种以上：
3'R-hydroxytaberdivarine C(E-1)、3'-oxotaberdivarine C(E-2)、taberdivarineC(E-3)、tabernaelegantine B(E-4)、tabernaelegantine D(E-5)、19,20-dihydroervahanine A(E-6)、3'-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-7)、ervadivaricatine B(E-8)、6’-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-9)、19,20-dihydroervahanine A(E-10)、tabernaelegantine A(E-11)、3'R-hydroxytabernaelegantine C(E-12)、3'-oxotabernaelegantine A(E-13)、conoduramine(E-14)、ervahanine A(E-15)和ervahanine B(E-16)；
化合物E-1～E-16的化学结构如下所示：
Figure FDA0003787955280000021
3.狗牙花属植物提取物在制备治疗肺动脉高压的药物和抗成瘾药物中的应用，其特征在于：所述的狗牙花属植物提取物含有以下双吲哚生物碱中的一种以上：
3'R-hydroxytaberdivarine C(E-1)、3'-oxotaberdivarine C(E-2)、taberdivarineC(E-3)、tabernaelegantine B(E-4)、tabernaelegantine D(E-5)、19,20-dihydroervahanine A(E-6)、3'-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-7)、ervadivaricatine B(E-8)、6’-oxo-19,20-dihydroervahanine A(E-9)、19,20-dihydroervahanine A(E-10)、tabernaelegantine A(E-11)、3'R-hydroxytabernaelegantine C(E-12)、3'-oxotabernaelegantine A(E-13)、conoduramine(E-14)、ervahanine A(E-15)和ervahanine B(E-16)；
化合物E-1～E-16的化学结构如下所示：
Figure FDA0003787955280000031
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的狗牙花属植物为狗牙花[Ervatamiadivaricata(L.)Burk.cv.Gouyahua]、药用狗牙花(Ervatamia officinalis Tsiang)和海南狗牙花(Ervatamia hainanensis Tsiang)中的一种以上。
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