CN113219077A - 一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 - Google Patents
一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113219077A CN113219077A CN202110318471.7A CN202110318471A CN113219077A CN 113219077 A CN113219077 A CN 113219077A CN 202110318471 A CN202110318471 A CN 202110318471A CN 113219077 A CN113219077 A CN 113219077A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- methanol
- animal
- phase
- chlorophenol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 37
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 title claims abstract description 36
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 239000002957 persistent organic pollutant Substances 0.000 title claims abstract description 29
- ISPYQTSUDJAMAB-UHFFFAOYSA-N 2-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1Cl ISPYQTSUDJAMAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 28
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 163
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 134
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 73
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 41
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 claims abstract description 40
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 31
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 31
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims abstract description 18
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 138
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 75
- RULKYXXCCZZKDZ-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5-tetrachlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl RULKYXXCCZZKDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- KEWNKZNZRIAIAK-UHFFFAOYSA-N 2,3,5,6-tetrachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=CC(Cl)=C1Cl KEWNKZNZRIAIAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 42
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 39
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 36
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 24
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 24
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 18
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 18
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 17
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 17
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 15
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 15
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 claims description 14
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 13
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 claims description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003925 fat Substances 0.000 claims description 12
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 claims description 11
- WSGYTJNNHPZFKR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropanenitrile Chemical compound OCCC#N WSGYTJNNHPZFKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 10
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 10
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 6
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 6
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 claims description 5
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 5
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 4
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 4
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004519 grease Substances 0.000 claims description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000010813 internal standard method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 3
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 claims description 2
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 30
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 19
- 238000002366 time-of-flight method Methods 0.000 abstract description 16
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 abstract description 8
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 abstract description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 7
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 6
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 abstract description 4
- VGVRPFIJEJYOFN-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6-tetrachlorophenol Chemical class OC1=C(Cl)C=C(Cl)C(Cl)=C1Cl VGVRPFIJEJYOFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 19
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 19
- -1 chlorophenol compound Chemical class 0.000 description 13
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 10
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 10
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 9
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 9
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 8
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 8
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 8
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 8
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 6
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 5
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 5
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 5
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- UMPSXRYVXUPCOS-UHFFFAOYSA-N 2,3-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC=CC(Cl)=C1Cl UMPSXRYVXUPCOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 4
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 4
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 3
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 3
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- HCJLVWUMMKIQIM-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3,4,5,6-pentachlorophenolate Chemical compound [Na+].[O-]C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl HCJLVWUMMKIQIM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 2,4,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HFZWRUODUSTPEG-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1Cl HFZWRUODUSTPEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RANCECPPZPIPNO-UHFFFAOYSA-N 2,5-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=CC=C1Cl RANCECPPZPIPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DUKKNDLIWRYBCT-UHFFFAOYSA-N 3-bromo-2-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=CC(Br)=C1Cl DUKKNDLIWRYBCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WXNZTHHGJRFXKQ-UHFFFAOYSA-N 4-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1 WXNZTHHGJRFXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- SLKWROUNLHVIIQ-UHFFFAOYSA-N hexachlorocyclohexa-2,5-dien-1-one Chemical compound ClC1=C(Cl)C(Cl)(Cl)C(Cl)=C(Cl)C1=O SLKWROUNLHVIIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000003808 methanol extraction Methods 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000010773 plant oil Substances 0.000 description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 2
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 2
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MCUFTOFSZFEQMB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl.OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl MCUFTOFSZFEQMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSQFVBWFPBKHEB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1Cl HSQFVBWFPBKHEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWGQHTJIFOQAOC-UHFFFAOYSA-N 2,3,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1Cl WWGQHTJIFOQAOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGCHAIDDPMFRLJ-UHFFFAOYSA-N 2,3,6-trichlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C=CC(Cl)=C1Cl XGCHAIDDPMFRLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LINPIYWFGCPVIE-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trichlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C=C(Cl)C=C1Cl LINPIYWFGCPVIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOLHYSJJBXSLMV-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C=CC=C1Cl HOLHYSJJBXSLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOVMHWSVVCQD-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-3-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=CC(Cl)=C1CC1=CC=CC=C1 ZAMOVMHWSVVCQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNVAJGCMEDTLIE-UHFFFAOYSA-N 2-oxopropyl formate Chemical compound CC(=O)COC=O WNVAJGCMEDTLIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GBNHEBQXJVDXSW-UHFFFAOYSA-N 3,4,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1 GBNHEBQXJVDXSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDNBURPWRNALGP-UHFFFAOYSA-N 3,4-Dichlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 WDNBURPWRNALGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNXXUVYCPNDIRS-UHFFFAOYSA-N 3,5-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1.OC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1 UNXXUVYCPNDIRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HORNXRXVQWOLPJ-UHFFFAOYSA-N 3-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=CC(Cl)=C1 HORNXRXVQWOLPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920001131 Pulp (paper) Polymers 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004939 coking Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hexane Chemical compound ClCCl.CCCCCC SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N formic acid;hydrate Chemical compound O.OC=O HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000010842 industrial wastewater Substances 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 1
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 1
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 description 1
- 239000002352 surface water Substances 0.000 description 1
- 239000003760 tallow Substances 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
- G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,该方法以动物油脂和植物油脂为研究对象,采用碱性甲醇溶液提取,正己烷脱脂,混合型阴离子交换固相萃取柱净化,经氮吹浓缩、酸化甲醇‑水溶液复溶后用UPLC/MS‑IT‑TOF法检测,13C6‑五氯苯酚内标法定量,该方法简单快速、回收率高、定性鉴别准确,弥补液相色谱‑串联质谱法对多氯苯酚类物质定性鉴别不准确的缺点。
Description
技术领域
本发明属于食品安全检测技术领域,具体涉及一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法。
背景技术
2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚是芳香族化合物中毒性大、污染较为严重的一类化合物,化学性质稳定,能够在环境中持久地存在,并可通过食物链在动植物体内累积,增加了其污染的危害程度。这些物质用作杀虫剂、有机溶剂和药物,普遍存在于炼油、炼焦、石化、塑胶、煤气和纸浆等工业废水和生活污水中,通过环境迁移可能会污染动植物。氯苯酚类有机物对生物组织具有较强的变性作用,对鱼类、贝类等水生生物的毒性较大。氯苯酚类有机物还可能与血液中的细胞,功能蛋白等发生作用,导致肺、肝,肾脏以及神经系统损伤。五氯苯酚和四氯苯酚还可能致白血病、淋巴瘤,因此,氯苯酚类有机污染物成为较受关注的一类优先控制的污染物。
一般而言,氯苯酚类有机物的毒性随着氯代程度的增加而增加。氯代程度越高,氯苯酚类有机物的亲脂性(亲油性)越大,被生物体摄取的可能性越大,毒性也越大。2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚溶于非极性溶剂,溶于油脂中,通过环境迁移污染动植物进而可能污染动植物油脂,因此开展动植物油脂中这些物质的残留量检测对于食品安全具有重要意义。
CN201910087895.X一种水产品中五氯苯酚及其钠盐残留量的检测方法,其技术特点是样品用50%的硫酸溶液酸化后用正己烷萃取,无水硫酸镁除水,衍生化后气相色谱仪检测。
CN201510227648.7气相色谱-质谱法测定水生动物中19种氯代酚及其钠盐的方法,样品用50%的硫酸溶液在40℃恒温水浴摇床中摇荡,冷却后用二氯甲烷萃取,将有机相吸入离心管,离心管中加入质量百分浓度4%NaOH,摇荡后静置分层,弃去有机相,然后用磷酸溶液调节pH至6.2,再加入二氯甲烷-正己烷溶液摇荡后静置分层,弃去水相;有机相用饱和无水硫酸钠脱水后弃去水相,氮吹仪60℃下,将有机相浓缩,硅烷化衍生,气相色谱-质谱联用仪测定2-氯酚(2-MCP)、3-氯酚(3-MCP)、4-氯酚(4-MCP)、2,3-二氯酚(2,3-DCP)、2,4-二氯酚(2,4-DCP)、质量比1:1的2,5-二氯酚(2,5-DCP)+3,5-二氯酚(3,5-DCP)、2,6-二氯酚(2,6-DCP)、3,4-二氯酚(3,5-DCP)、2,4,6-三氯酚(2,4,6-TCP)、2,4,5-三氯酚(2,4,5-TCP)、2,3,4-三氯酚(2,3,4-TCP)、2,3,5-三氯酚(2,3,5-TCP)、2,3,6-三氯酚(2,3,6-TCP)、3,4,5-三氯酚(3,4,5-TCP)、2,3,5,6-四氯酚(2,3,5,6-TeCP)、2,3,4,6-四氯酚(2,3,4,6-TeCP)、2,3,4,5-四氯酚(2,3,4,5-TeCP)和五氯酚(PCP)。
GB 23200.92-2016《食品安全国家标准动物源性食品中五氯酚残留量的测定液相色谱-质谱法》,适用于猪肝、猪肾、猪肉、牛奶、鱼肉、虾、蟹等动物源食品中五氯酚残留的测定。其技术特点为试样中五氯酚残留用碱性乙腈水溶液提取,经MAX固相萃取柱净化,浓缩、定容后,用液相色谱-质谱仪检测和确证,外标法定量。
GB 29708-2013《食品安全国家标准动物性食品中五氯酚钠残留量的测定气相色谱-质谱法》,适用于猪的肌肉、肝脏和肾脏及鸡的肌肉和肝脏组织中五氯酚钠残留量的检测,其技术特点为样品用三氯乙酸沉淀蛋白,环己烷-乙酸乙酯溶液萃取五氯酚钠,乙酸酐-吡啶溶液衍生,气相色谱-质谱法测定,外标法定量。
SC/T 3030-2006《水产品中五氯苯酚及其钠盐残留量的测定气相色谱法》,适用于水产品中五氯苯酚及其钠盐残留量的测定,其技术特点为在酸性条件下样品中的五氯酚钠转化为五氯苯酚,用正己烷萃取,碳酸钾溶液反萃取,乙酸酐衍生化后用气相色谱法检测,外标法定量。
文献报道的研究对象主要集中在食品接触纸包装材料(纸制品、塑料制品、木制品)、地表水、生活饮用水、环境中土壤和沉积物等方面,食品中氯苯酚类检测方法报道较少。
发明专利、检测标准、文献报道的以食品中氯苯酚类化合物作为研究对象的检测方法存在以下不足:
(1)以气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法为主,其中气相色谱法、气相色谱-质谱联用法均需要对氯苯酚类化合物进行衍生化,然后再进行检测,虽然灵敏度较高,但存在步骤繁琐、衍生效率难控制、单样检测耗时长、回收率低等缺点;
(2)液相色谱法、液相色谱-串联质谱法直接测定氯苯酚类化合物,无需衍生,简单快速,但液相色谱二极管阵列检测法灵敏度低,不适用于痕量的氯苯酚化合物检测,容易导致假阴性;液相色谱-串联质谱法定性和定量能力较强,但对于不能碎裂形成子离子的多氯苯酚定性鉴别能力较差,容易受到基质中杂质的离子峰干扰,导致难以准确鉴别目标化合物。
(3)以食品中氯苯酚类化合物作为研究对象的检测方法较少,多以五氯苯酚(五氯酚)作为检测对象,检测项目单一,尚未有同时检测动植物油脂食品中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚等多种氯苯酚类持久性有机污染物的方法报道。
(4)超高效液相色谱(UPLC)–离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法由于具有多级碎裂能力,再结合精确分子量,可对食品中氯苯酚类同分异构体进行精确鉴别。利用不同物质精确分子量不同的特点,可以精确的从复杂基质中鉴别多氯苯酚,尤其适用于不能碎裂形成子离子的多氯苯酚的检测,克服了液相色谱-串联质谱存在的定性鉴别不足。目前尚未有应用于动植物油脂食品中多氯苯酚类持久性有机污染物检测的发明专利、标准、文献报道。
飞行时间质谱法作为一种高灵敏度、高通量的检测方法,欧阳培毓等建立了超高效液相色谱(UPLC)-四极杆飞行时间质谱(Q-TOF)测定沉积物中4种氯酚类物质苄氯酚(CP)、二氯酚(DCP)、六氯酚(HCP)、溴氯芬(BCP)的分析方法。样品用1%甲酸丙酮超声提取,强阴离子交换固相萃取柱净化富集,以Waters HSS C18柱(2.1mm×100mm,1.8μm)为分离色谱柱,采用0.004%甲酸水(V∶V)-甲醇作为流动相进行梯度洗脱,采用四极杆飞行时间质谱检测。该方法与本发明的检测物、检测项目、前处理过程、净化方法、色谱条件、质谱方法、定量方法等均不相同。
现有技术中没有采用(UPLC)–离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)建立的动植物油脂食品中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚等多氯苯酚类持久性有机污染物的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,该方法以动物油脂和植物油脂为研究对象,采用碱性甲醇溶液提取,正己烷脱脂,混合型阴离子交换固相萃取柱净化,经氮吹浓缩、酸化甲醇-水溶液复溶后用UPLC/MS-IT-TOF法检测,13C6-五氯苯酚内标法定量,简单快速、回收率高、定性鉴别准确,弥补液相色谱-串联质谱法对多氯苯酚类物质定性鉴别不准确的缺点。
本发明提供的新型的精确鉴别动植物油脂等复杂基质中多氯苯酚类持久性有机污染物的检测方法,具有气相色谱法、气相色谱质谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法等无法比拟的鉴别能力。
本发明的上述目的可以通过以下技术方案来实现:一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,包括以下步骤:
(1)制备样品提取液:选取动物油脂或植物油脂置于离心管A中,加入内标标准溶液,加入碱化甲醇溶液,水浴振荡,取出,加入正己烷,涡旋,离心,将正己烷层转移至离心管B中,向离心管B中加入碱化甲醇溶液重复提取一次,弃去正己烷层,将下层液体合并于离心管A中,制得样品提取液;
(2)样品提取液的净化:将步骤(1)制得的样品提取液用水稀释后,调节pH值,用混合型阴离子交换固相萃取柱净化,弃去流出液,用酸化的甲醇-乙腈混合溶液洗脱,收集洗脱液,将洗脱液浓缩至干,用酸性甲醇-水溶液复溶,过滤膜,制得待测液;
(3)标准品制备:配制2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚和五氯苯酚的标准溶液,各溶液浓度范围均为5ng/mL~500ng/mL,以13C6-五氯苯酚为内标,制作标准工作曲线;
(4)含量测定:将步骤(3)中的标准品,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法测定,制作标准曲线,选取步骤(2)制得的待测液,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法测定,根据标准曲线,获得食品中氯苯酚类持久性有机污染物的残留量。
在上述动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法中:
本发明方法针对动物油脂和植物油脂,采用碱性甲醇溶液提取,正己烷脱脂,混合型阴离子交换固相萃取柱净化,经氮吹浓缩、酸化甲醇-水溶液复溶,过滤膜后用UPLC/MS-IT-TOF法检测,13C6-五氯苯酚内标法定量。
优选的,所述步骤(1)中所述动物油脂是指可食用的动物的脂肪,固体脂肪需用组织搅碎机搅碎;植物油脂是指来源于植物的可食用的油脂,如花生油、菜籽油、玉米油、芝麻油等植物油以及植物油之间混合制得的调和油。
进一步的,步骤(1)中制备样品提取液时:所述动物油脂是指可食用的动物的脂肪,固体脂肪需用组织搅碎机搅碎;植物油脂是指来源于植物的可食用的油脂,所述来源于植物的可食用的油脂包括花生油、大豆油、菜籽油、玉米油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、棕榈油、亚麻籽油、棉籽油和椰子油中的一种或几种的混合所得的调和油。
优选的,步骤(1)中制备样品提取液时:所述的内标标准溶液为13C6-五氯苯酚标准溶液,内标标准溶液的加入量为经步骤(1)和步骤(2)处理后在步骤(2)的待测液中的最终浓度为20~50ng/mL;所述动物油脂或植物油脂与所述碱化甲醇溶液的用量关系为2~4g:5~10mL;所述的碱化甲醇溶液是指用浓度为2~5mol/L氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液调节甲醇的pH为11~12。
在pH为11~12的碱性甲醇溶液条件下可使2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚转化为相应的钠盐或钾盐,形成离子态,在离子态条件下溶于甲醇,不溶于正己烷,利用该特点可使用正己烷去除油脂。
优选的,步骤(1)中制备样品提取液时:水浴振荡时的温度为40~45℃,振荡频率为130~180转/分钟,振荡时间为0.5~1小时;所述正己烷与所述动物油脂或植物油脂之间的用量关系为1.5~3.5mL:2~4g,旋涡时以1800~2000转/分钟涡旋混合3~5分钟,离心时,6000~8000r/min离心2~5min,然后将正己烷层转移至离心管B中。
通过水浴加热振荡可加快2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚转化为钠盐或钾盐,形成离子态,在离子态条件下溶于甲醇,不溶于正己烷。在此条件下可用正己烷脱脂,同时兼顾甲醇萃取和正己烷脱脂净化。1800~2000转/分钟涡旋混合可使碱化甲醇溶液与样品充分混合、充分接触,有利于提高目标化合物的萃取率。
优选的,步骤(1)中制备样品提取液时:对离心管B中的正己烷层进行重复萃取,向离心管B中加入的碱化甲醇溶液与正己烷层之间的用量关系为5~10mL:1.5~3.5mL,然后以1800~2000转/分钟涡旋混合3~5分钟,6000~8000r/min离心2~5min,弃去正己烷层,将下层碱化甲醇溶液合并于离心管A中,制得样品提取液。
对正己烷层进行重复萃取可使残留在正己烷中的目标化合物被碱化甲醇充分萃取,提高萃取回收率。
优选的,步骤(2)中样品提取液的净化时:将步骤(1)制得的样品提取液用超纯水稀释,所述样品提取液与所述超纯水之间的用量关系为10~20mL:20~40mL,调节pH值时,用浓度为2~5mol/L氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液调节用超纯水稀释后样品提取液的pH为11~12。
对样品提取液用超纯水进行稀释的目的是降低甲醇的比例,提高水的比例,有利于提高固相萃取净化回收率。稀释后的提取液调节pH为11~12可确保目标化合物处于离子态,在离子交换固相萃取净化时更容易保留在固相萃取柱上,提高回收率。
优选的,步骤(2)中样品提取液的净化时:混合型阴离子交换固相萃取柱填料是指商品化的基质为N-乙烯吡咯烷酮与二乙烯基苯按特定比例聚合再键合上季胺基团,优选采用Waters Oasis MAX混合型阴离子交换固相萃取柱,其是具有阴离子交换和反相两种吸附模式的固相萃取柱;混合型阴离子交换固相萃取柱规格为150mg/6mL~500mg/6mL(填料质量/柱体积)之间;固相萃取柱使用前需依次用6~12mL甲醇和6~12mL超纯水活化;将稀释后的样品提取液转移至固相萃取柱中,控制提取液体穿柱速度为0.5~1mL/min,弃去穿柱液,待样品提取液全部过柱后,向固相萃取柱中加入6~12mL超纯水,弃去穿柱液,负压抽干柱体中残留液体。
固相萃取柱填料质量直接影响目标化合物的萃取回收率。由于样品提取液中不可避免的存在可与固相萃取柱发生离子交换的杂质,这些杂质与目标化合物竞争吸附到固相萃取柱的填料中,当填料质量不能满足吸附杂质和目标化合物含量时,可能会出现目标化合物未能保留在填料中,导致回收率偏低,当混合型阴离子交换固相萃取柱规格为150mg/6mL~500mg/6mL(填料质量/柱体积)可获得满意回收率。
提取液中目标化合物离子与固相萃取柱填料之间的离子交换过程较慢,流速过快会导致回收率偏低,因此需控制提取液体穿柱速度为0.5~1mL/min。向固相萃取柱中加入6~12mL超纯水洗涤去除极性杂质和将填料由碱性洗涤至中性,去除残留的氢氧根离子。
优选的,步骤(2)中样品提取液的净化时:所述的酸化的甲醇-乙腈混合溶液是指先将色谱纯的甲醇与色谱纯的乙腈按照1:1~2:1体积混合,再用冰乙酸酸化,所述冰乙酸与所述甲醇-乙腈混合溶液的体积比为5~10:95~90,洗脱时所用的酸化甲醇-乙腈混合溶液体积为15~25mL,收集的洗脱液在48~55℃水浴条件下用氮气吹扫浓缩至干。
优选的,步骤(2)中样品提取液的净化时:所述的酸性甲醇-水溶液是先将色谱纯的甲醇和超纯水按照1:1~2:1混合,再加入冰乙酸酸化,冰乙酸与甲醇-水溶液之间的体积比为0.1~0.5:99.9~99.5。残留物用1~2mL酸化甲醇-水溶液复溶。用材质为聚四氟乙烯(PTFE),孔径为0.22μm或0.45μm的针式滤器过滤,制得待测液。
优选的,步骤(3)标准品制备时:所述标准品用甲醇溶解配制标准储备溶液,再用步骤(2)所述的酸性甲醇-水溶液稀释配制2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚和五氯苯酚浓度均为5ng/mL~500ng/mL,13C6-五氯苯酚浓度为20~50ng/mL,制作标准工作曲线。
优选的,步骤(4)含量测定方法为超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法,其液相色谱条件包括:色谱柱:waters ACQUITY UPLC BEH C18柱,100mm×2.1mm,1.7μm;流速:0.2~0.3mL/min;柱温:30~40℃;进样量:5~20μL;流动相A为:甲醇;流动相B为:10mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸,体积百分含量);梯度洗脱程序为:0.00min:A相,45%,B相,55%,2.00min:A相,45%,B相,55%,2.10min:A相,50%,B相,50%,12.00min:A相,50%,B相,50%,15.00min:A相,75%,B相,25%,18.00min:A相,75%,B相,25%,20.00min:A相,45%,B相,55%,22.00min:A相,45%,B相,55%,均为体积百分含量。
步骤(3)中质谱条件包括:离子源:ESI,负离子模式检测;采用自动扫描采集,加热模块温度:200~250℃;CDL温度:200~250℃;雾化器流速:1.3~1.5L/min;干燥气压力:100~120kPa;离子源电压:4.5kV;检测器电压:1.6~1.7kV;校准方法:自动调谐优化电压;外标法校准质量数;MS1采集范围为m/z 200~500,重复扫描3~5次,离子累积时间:20~50msec;MS2采集范围:m/z 50~500,重复扫描3~5次,离子累积时间:20~50msec,CID能量:10~30%,以MS1(一级质谱)色谱峰的峰面积进行13C6-五氯苯酚内标法定量。
与现有技术相比,本发明具有如下优点:
(1)弥补动植物油脂中多氯苯酚类持久性有机污染物检测方法缺失,本发明应用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法建立了动植物油脂食品中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚等多氯苯酚类持久性有机污染物残留量同时检测方法,弥补超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法检测氯苯酚类化合物的技术方法空白,完善检测方法体系;
(2)复杂基质中精准定性鉴别目标化合物,本发明利用飞行时间质谱技术,根据不同物质具有不同精确分子量的特点,精准的在复杂基质中鉴别不能碎裂形成子离子的多氯苯酚类物质,完全克服了液相色谱-串联质谱法对不能碎裂形成子离子的物质的定性鉴别不准确的缺点,目前尚未有应用于动植物油脂食品中多氯苯酚类持久性有机污染物检测的发明专利、标准、文献报道;
(3)利用物质形态转换,兼顾萃取和净化的前处理方法,解决动植物油脂中多氯苯酚有效萃取问题,根据动植物油脂食品特点,在水浴振荡条件下,采用了氢氧化钾或氢氧化钠溶液碱化甲醇使目标化合物形成易溶于水的钾盐或钠盐,形成离子态游离出来,在离子态条件下溶于甲醇,不溶于正己烷,在此条件下可用正己烷脱脂,该方法同时兼顾甲醇萃取和正己烷脱脂净化;
(4)13C6-五氯苯酚内标法定量,不受样品基质影响,定量更准确,本发明采用了13C6-五氯苯酚为内标物质对2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚进行定量检测,不受样品基质影响,提高了超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法定量准确度;
(6)酸化有机溶剂复溶,聚四氟乙烯(PTFE)材质滤器过滤,解决了滤器吸附问题,本发明采用酸化甲醇-水溶液作为复溶溶剂,再结合聚四氟乙烯(PTFE)材质,孔径为0.22μm或0.45μm的针式滤器过滤复溶液,避免了采用尼龙材质有机相滤膜对目标化合物的吸附作用导致的检测结果回收率低或无回收率。
附图说明
图1为实施例1中2,3,5,6-四氯苯酚(峰1)、2,3,4,6-四氯苯酚(峰2)、五氯苯酚(峰3)、2,3,4,5-四氯苯酚(峰4)、13C6-五氯苯酚(峰5)标准溶液定性和定量离子色谱图;
图2为实施例1中2,3,5,6-四氯苯酚标准溶液曲线图;
图3为实施例1中2,3,4,6-四氯苯酚标准溶液曲线图;
图4为实施例1中五氯苯酚标准溶液曲线图;
图5为实施例1中2,3,4,5-四氯苯酚标准溶液曲线图;
图6为实施例1中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚特征离子质谱图;
图7为实施例1中五氯苯酚特征离子质谱图;
图8为实施例1中花生油空白样品中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、五氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚定量离子色谱图;
图9为实施例1中花生油基质添加标准品(100μg/kg)定量离子色谱图;
图10为实施例1中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、五氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚准品定量离子色谱图;
图11为实施例2中猪油空白样品中2,3,4,5-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,5,6-四氯苯酚、五氯苯酚定量离子色谱图;
图12为实施例2中猪油空白样品添加标准品(100μg/kg)定量离子色谱图。
具体实施方式
以下列举具体实施例对本发明进行说明。需要指出的是,实施例只用于对本发明作进一步说明,不代表本发明的保护范围,其他人根据本发明做出的非本质的修改和调整,仍属于本发明的保护范围。
实施例1
本实施例提供植物油脂(花生油)食品中氯苯酚类持久性有机污染物残留量检测方法,具体包括如下:
1试剂和耗材
试剂:甲醇、乙腈、乙酸铵、正己烷均为色谱纯;冰乙酸为分析纯;使用的水为超纯水。
耗材:50mL聚乙烯塑料离心管;孔径为0.22μm的聚四氟乙烯(PTFE)针式滤器过滤;1mL一次性针式注射器;混合型阴离子交换固相萃取柱,规格150mg/6mL;一次性塑料吸管。
2仪器设备
超高效液相色谱(UPLC)–离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)仪,带电喷雾离子源;自动涡旋混合器;水浴振荡器;高速离心机;氮吹仪;电子天平:精度0.01g和0.00001g
3标准品
3.1标准品:2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚纯度要求≥94.0%;13C6-五氯苯酚标准品,纯度要求≥99.0%。
3.2储备液配制:精密称取上述标准品10mg分别置于100mL容量瓶中,加入甲醇溶解,分别配得浓度为100μg/mL,-18℃条件下保存。
3.3混合标准品中间液:分别吸取2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚标准储备液200μL置于10mL容量瓶中,用甲醇稀释定容,配得2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚浓度均为2μg/mL的混合标准中间溶液,4℃条件下保存。
3.4 13C6-五氯苯酚内标中间液:吸取13C6-五氯苯酚标准储备液200μL置于10mL容量瓶中,用甲醇稀释定容,配得浓度为2μg/mL的13C6-五氯苯酚内标中间液,4℃条件下保存。
3.513C6-五氯苯酚内标使用液:吸取内标中间液2.0mL置于10mL容量瓶中,用含冰乙酸0.1%的甲醇-水溶液(1:1)稀释定容,配得浓度为0.4μg/mL的13C6-五氯苯酚内标使用液,4℃条件下保存。
3.6混合标准品工作曲线:用含冰乙酸0.1%的甲醇-水溶液(1:1)稀释配制2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚浓度范围均为5ng/mL~500ng/mL标准工作曲线,标准工作曲线每个浓度点中13C6-五氯苯酚内标浓度均为20ng/mL。
4样品前处理
(1)样品提取液:称取混匀的花生油2g(精确至0.01g)置于50mL聚乙烯塑料离心管A中,加入50μL13C6-五氯苯酚内标使用液,加入5mL用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12的碱化甲醇溶液,涡旋混合均匀,40℃水浴振荡,振荡频率为130转/分钟,振荡时间为0.5小时。取出冷却至室温,加入1.5mL正己烷,1800转/分钟涡旋混合3分钟,6000r/min离心5min,将正己烷层转移至50mL聚乙烯塑料离心管B中,向离心管B中加入5mL用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12的碱化甲醇溶液,重复提取一次,以1800转/分钟涡旋混合3分钟,6000r/min离心5min,弃去正己烷层,将下层碱化甲醇溶液合并于离心管A中,制得样品提取液约为10mL。
(2)样品提取液的净化:向离心管A的样品提取液中加入20mL超纯水稀释,用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12,分多次转移至经过活化处理(以填料质量/柱体积计算,固相萃取柱使用前需依次用6~12mL甲醇和6~12mL超纯水活化)的混合型阴离子交换固相萃取柱(规格150mg/6mL,Waters Oasis MAX混合型阴离子交换固相萃取柱)中,控制提取液体穿柱速度为0.5mL/min,弃去穿柱液,待样品提取液全部过柱后,向固相萃取柱中加入6mL超纯水,弃去穿柱液,负压抽干柱体中残留液体。用15mL含有5%冰乙酸的甲醇-乙腈混合溶液(1:1)洗脱保留在固相萃取柱上的目标化合物,控制洗脱液流出速度为0.5mL/min,用玻璃试管收集洗脱液,在48℃水浴条件下氮气吹扫浓缩至干,加入1.0mL含有0.1%冰乙酸的甲醇-水溶液(1:1)复溶残留物,用孔径为0.22μm的聚四氟乙烯(PTFE)针式滤器过滤,制得待测液,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)检测。
5仪器条件
5.1液相色谱条件
色谱柱:waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(100mm×2.1mm,1.7μm);
流速:0.2mL/min;
柱温:30℃;
进样量:20μL;
流动相A为:甲醇;流动相B为:10mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸);
梯度洗脱程序见表1。
表1梯度洗脱程序
5.2质谱条件
离子源:ESI,负离子模式检测;采用自动扫描采集,加热模块温度:200℃;CDL温度:200℃;雾化器流速:1.5L/min;干燥气压力:100kPa;离子源电压:4.5kV;检测器电压:1.7kV;校准方法:自动调谐优化电压;外标法校准质量数;MS1采集范围为m/z 200~500,重复扫描3次,离子累积时间:30msec;MS2采集范围:m/z 50~500,重复扫描3次,离子累积时间:30msec,CID能量:10%。以MS1(一级质谱)进行13C6-五氯苯酚内标法定量。主要质谱参数见表2。
表2多氯苯酚化合物质谱参数
注:带“*”的为定量离子。
6线性范围和方法检出限
向空白花生油样品中添加2,3,4,5-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,5,6-四氯苯酚浓度均为10μg/kg,五氯苯酚添加浓度为5μg/kg,按照具体实施方式操作,获得色谱图,对定量离子的色谱峰计算信噪比,信噪比(S/N)均大于10,因此,花生油中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚的检出限均为10μg/kg,五氯苯酚的检出限为5μg/kg。
2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚的标准曲线线性范围为5ng/mL~500ng/mL。2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、五氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、13C6-五氯苯酚标准溶液定性和定量离子色谱图如图1所示,标准曲线图见图2、图3、图4、图5,特征离子质谱图见图6、图7。
表3线性方程、相关系数
序号 | 化合物名称 | 线性回归方程 | 相关系数R |
1 | 2,3,5,6-四氯苯酚 | y=14733.98x+52621.30 | 0.999 |
2 | 2,3,4,6-四氯苯酚 | y=14358.53x-26528.98 | 0.999 |
3 | 五氯苯酚 | y=35574.85x+492328.3 | 0.999 |
4 | 2,3,4,5-四氯苯酚 | y=32558.31x+120535.2 | 0.999 |
7加标回收率及精密度
以花生油为例考察加标回收率及精密度。向阴性样品中添加三水平浓度,每水平平行测定6次。2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚的添加水平为25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg,五氯苯酚的添加水平为5μg/kg、10μg/kg、50μg/kg。回收率范围在71.2%~88.3%之间,相对标准偏差范围在3.9%~6.1%之间,具体回收率、精密度见表4。
图8为花生油空白样品中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、五氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚定量离子色谱图,图9为花生油基质添加标准品(100μg/kg)定量离子色谱图。图10为2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、五氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚准品定量离子色谱图。
表4花生油添加标准物质的回收率与精密度
8定性鉴别
以标准物质的精确分子量、保留时间、分子式作为定性标准。当样品中精确分子量、保留时间、分子式预测符合以下条件时,即可判定样品中含有多氯苯酚。
与标准物质的精确分子量比较:误差容量≤20ppm;
与标准物质的保留时间比较:≤5%;
与标准物质的MS1、MS2质谱图比较:离子碎片、离子丰度比一致;
与标准物质分子式比较:通过软件自带的分子式预测获得的分子式与标准物质分子式一致。
9定量计算
计算公式为:
X=C×V×F/m
其中:
X:样品中多氯苯酚的含量(μg/kg)
C:从标准工作曲线得到被测组分的浓度(ng/mL)
m:取样质量(g)
V:定容体积(mL)
F:稀释因子
结果扣除空白值后保留至小数点后1位。
10实际样品检测
应用本实施例方法对花生油、菜籽油、玉米油、大豆油、调和油等共20批样品进行检测,20批次样品未检出2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚。
对比例1
本对比例检测方法大体与实施例1相同,不同之处在于样品前处理步骤中将40℃水浴振荡换成室温水浴振荡提取,水浴振荡时间一致,检测结果表明在相同的加标浓度下40℃水浴振荡回收率比室温水浴振荡的回收率高约30%。原因可能是室温水浴振荡条件下,氯苯酚类化合物转化为钠盐或钾盐的速度慢,导致回收率低。40℃水浴振荡可加速转化为钠盐或钾盐,因此回收率高。
对比例2
本对比例检测方法大体与实施例1相同,不同之处在于样品前处理步骤中将提取液碱化甲醇溶液换成甲醇,检测结果表明在相同的加标浓度下,碱化甲醇溶液提取回收率比甲醇的高60%。原因可能是甲醇提取时,以分子态形式存在的氯苯酚化合物溶解于油和正己烷中,不能被甲醇充分萃取,导致回收率低。碱化甲醇溶液提取则可使样品中氯苯酚类化合物转化为离子态,在离子态条件下,氯苯酚类化合物不溶于油和正己烷,因此被碱化甲醇充分萃取,回收率高。
实施例2
动物油脂(猪油)食品中氯苯酚类持久性有机污染物残留量检测方法。
1试剂和耗材
同实施例1。
2仪器设备
同实施例1。
3标准品
同实施例1。
4样品前处理
固体状猪油需用组织捣碎机搅碎均匀,再称样。其余步骤同实施例1。
5仪器条件
同实施例1。
6线性范围和方法检出限
向空白猪油样品中添加2,3,4,5-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,5,6-四氯苯酚浓度均为10μg/kg,五氯苯酚添加浓度为5μg/kg,按照具体实施方式操作,获得色谱图,对定量离子的色谱峰计算信噪比,信噪比(S/N)均大于10,因此,花生油中2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚的检出限均为10μg/kg,五氯苯酚的检出限为5μg/kg。
2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚的标准曲线线性范围为5ng/mL~500ng/mL。
表5线性方程、相关系数
7加标回收率及精密度
以猪油为例考察加标回收率及精密度。向阴性样品中添加三水平浓度,每水平平行测定6次。2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚的添加水平为25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg,五氯苯酚的添加水平为5μg/kg、10μg/kg、50μg/kg。回收率范围在73.2%~86.5%之间,相对标准偏差范围在4.5%~6.2%之间,具体回收率、精密度见表6。
图11为猪油空白样品中2,3,4,5-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,5,6-四氯苯酚、五氯苯酚定量离子色谱图。图12为猪油空白样品添加标准品(100μg/kg)定量离子色谱图。
表6猪肉样品添加标准物质的回收率与精密度
8定性鉴别
同实施例1。
9定量计算
同实施例1。
10实际样品检测
应用本实施例方法对猪油、牛油、鸡油等共15批样品进行检测,均未检出2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚。
实施例3
以实施例1所述的花生油为研究对象,比较实施例1和实施例3的碱化甲醇提取液的体积、水浴振荡温度、固相萃取柱规格、洗脱液用量等关键前处理条件对食品中氯苯酚类持久性有机污染物残留量检测结果的影响。
1试剂和耗材
同实施例1。
2仪器设备
同实施例1。
3标准品
同实施例1。
4样品前处理
(1)样品提取液:称取混匀的花生油2g(精确至0.01g)置于50mL聚乙烯塑料离心管A中,加入50μL13C6-五氯苯酚内标使用液,加入10mL用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12的碱化甲醇溶液,涡旋混合均匀,45℃水浴振荡,振荡频率为130转/分钟,振荡时间为0.5小时。取出冷却至室温,加入1.5mL正己烷,1800转/分钟涡旋混合3分钟,6000r/min离心5min,将正己烷层转移至50mL聚乙烯塑料离心管B中,向离心管B中加入10mL用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12的碱化甲醇溶液,重复提取一次,以1800转/分钟涡旋混合3分钟,6000r/min离心5min,弃去正己烷层,将下层碱化甲醇溶液合并于离心管A中,制得样品提取液约为20mL。
(2)样品提取液的净化:向离心管A的样品提取液中加入40mL超纯水稀释,用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11~12,分多次转移至经过活化处理的混合型阴离子交换固相萃取柱(规格500mg/6mL)中,控制提取液体穿柱速度为0.5mL/min,弃去穿柱液,待样品提取液全部过柱后,向固相萃取柱中加入6mL超纯水,弃去穿柱液,负压抽干柱体中残留液体。用25mL含有5%冰乙酸的甲醇-乙腈混合溶液(1:1)洗脱保留在固相萃取柱上的目标化合物,控制洗脱液流出速度为0.5mL/min,用玻璃试管收集洗脱液,在48℃水浴条件下氮气吹扫浓缩至干,加入1.0mL含有0.1%冰乙酸的甲醇-水溶液(1:1)复溶残留物,用孔径为0.22μm的聚四氟乙烯(PTFE)针式滤器过滤,制得待测液,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)检测。
5仪器条件
同实施例1。
6关键前处理条件检测结果比较
向空白花生油样品中添加2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚标准品,添加水平均为50μg/kg,五氯苯酚的添加水平为10μg/kg,分别按照实施例1和实施例3的前处理方法处理样品,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)检测,关键前处理条件检测结果比较以回收率表示,见表7,由表7数据可知,在实施例3的前处理条件下2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚、五氯苯酚回收率均有所提高,提高值不超过5%,但固相萃取柱填料质量越大柱容量就越大,净化复杂基质样品时目标化合物回收率会更稳定。
表7关键前处理条件检测结果比较
序号 | 化合物名称 | 实施例1 | 实施例3 |
1 | 2,3,5,6-四氯苯酚 | 79.6% | 83.7% |
2 | 2,3,4,6-四氯苯酚 | 82.3% | 86.5% |
3 | 2,3,4,5-四氯苯酚 | 83.4% | 86.2% |
4 | 五氯苯酚 | 87.7% | 88.9% |
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是包括以下步骤:
(1)制备样品提取液:选取动物油脂或植物油脂置于离心管A中,加入内标标准溶液,加入碱化甲醇溶液,水浴振荡,取出,加入正己烷,涡旋,离心,将正己烷层转移至离心管B中,向离心管B中加入碱化甲醇溶液重复提取一次,弃去正己烷层,将下层液体合并于离心管A中,制得样品提取液;
(2)样品提取液的净化:将步骤(1)制得的样品提取液用水稀释后,调节pH值,用混合型阴离子交换固相萃取柱净化,弃去流出液,用酸化的甲醇-乙腈混合溶液洗脱,收集洗脱液,将洗脱液浓缩至干,用酸性甲醇-水溶液复溶,过滤膜,制得待测液;
(3)标准品制备:配制2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚和五氯苯酚的标准溶液,各溶液浓度范围均为5ng/mL~500ng/mL,以13C6-五氯苯酚为内标,制作标准工作曲线;
(4)含量测定:将步骤(3)中的标准品,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法测定,制作标准曲线,选取步骤(2)中的待测液,用超高效液相色谱(UPLC)-离子阱(IT)-飞行时间质谱(TOF)法测定,根据标准曲线,获得食品中氯苯酚类持久性有机污染物的残留量。
2.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(1)中制备样品提取液时:所述的内标标准溶液为13C6-五氯苯酚标准溶液,内标标准溶液的加入量为经步骤(1)和步骤(2)处理后在步骤(2)的待测液中的最终浓度为20~50ng/mL;所述动物油脂或植物油脂与所述碱化甲醇溶液的用量关系为2~4g:5~10mL;所述的碱化甲醇溶液是指用浓度为2~5mol/L氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液调节甲醇的pH为11~12。
3.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(1)中制备样品提取液时:水浴振荡时的温度为40~45℃,振荡频率为130~180转/分钟,振荡时间为0.5~1小时;所述正己烷与所述动物油脂或植物油脂之间的用量关系为1.5~3.5mL:2~4g,旋涡时以1800~2000转/分钟涡旋混合3~5分钟,离心时,6000~8000r/min离心2~5min。
4.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(1)中制备样品提取液时:对离心管B中的正己烷层进行重复萃取,向离心管B中加入的碱化甲醇溶液与正己烷层之间的用量关系为5~10mL:1.5~3.5mL,然后以1800~2000转/分钟涡旋混合3~5分钟,6000~8000r/min离心2~5min,弃去正己烷层,将下层碱化甲醇溶液合并于离心管A中,制得样品提取液。
5.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(2)中样品提取液的净化时:将步骤(1)制得的样品提取液用超纯水稀释,所述样品提取液与所述超纯水之间的用量关系为10~20mL:20~40mL,调节pH值时,用浓度为2~5mol/L氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液调节用超纯水稀释后样品提取液的pH为11~12。
6.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(2)中样品提取液的净化时:所述混合型阴离子交换固相萃取柱的填料是指商品化的基质为N-乙烯吡咯烷酮与二乙烯基苯按比例聚合再键合上季胺基团,具有阴离子交换和反相两种吸附模式的固相萃取柱,所述混合型阴离子交换固相萃取柱规格为150mg/6mL~500mg/6mL,以填料质量/柱体积计算,固相萃取柱使用前需依次用6~12mL甲醇和6~12mL超纯水活化,将稀释后的样品提取液转移至固相萃取柱中,控制液体穿柱速度为0.5~1mL/min,弃去穿柱液,待样品提取液全部过柱后,向固相萃取柱中加入6~12mL超纯水,弃去穿柱液,负压抽干柱体中残留液体。
7.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(2)中样品提取液的净化时:所述的酸化的甲醇-乙腈混合溶液是指先将色谱纯的甲醇与色谱纯的乙腈按照1:1~2:1体积混合,再用冰乙酸酸化,所述冰乙酸与所述甲醇-乙腈混合溶液的体积比为5~10:95~90,洗脱时所用的酸化甲醇-乙腈混合溶液体积为15~25mL,收集的洗脱液在48~55℃水浴条件下用氮气吹扫浓缩至干。
8.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(2)中样品提取液的净化时:所述的酸性甲醇-水溶液是先将色谱纯的甲醇和超纯水按照1:1~2:1混合,再加入冰乙酸酸化,冰乙酸与甲醇-水溶液之间的体积比为0.1~0.5:99.9~99.5,残留物用1~2mL酸化甲醇-水溶液复溶,用材质为聚四氟乙烯(PTFE)、孔径为0.22μm或0.45μm的针式滤器过滤,制得待测液。
9.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(4)含量测定方法为超高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱法,其液相色谱条件包括:色谱柱:waters ACQUITY UPLC BEH C18柱,100mm×2.1mm,1.7μm;流速:0.2~0.3mL/min;柱温:30~40℃;进样量:5~20μL;流动相A为:甲醇;流动相B为:10mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸,体积百分含量);梯度洗脱程序为:0.00min:A相,45%,B相,55%,2.00min:A相,45%,B相,55%,2.10min:A相,50%,B相,50%,12.00min:A相,50%,B相,50%,15.00min:A相,75%,B相,25%,18.00min:A相,75%,B相,25%,20.00min:A相,45%,B相,55%,22.00min:A相,45%,B相,55%,均为体积百分含量。
10.根据权利要求1所述的动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法,其特征是:步骤(4)中质谱条件包括:离子源:ESI,负离子模式检测;采用自动扫描采集,加热模块温度:200~250℃;CDL温度:200~250℃;雾化器流速:1.3~1.5L/min;干燥气压力:100~120kPa;离子源电压:4.5kV;检测器电压:1.6~1.7kV;校准方法:自动调谐优化电压;外标法校准质量数;MS1采集范围为m/z 200~500,重复扫描3~5次,离子累积时间:20~50msec;MS2采集范围:m/z 50~500,重复扫描3~5次,离子累积时间:20~50msec,CID能量:10~30%,以MS1(一级质谱)进行13C6-五氯苯酚内标法定量,所述氯苯酚类持久性有机污染物包括2,3,5,6-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,4,5-四氯苯酚和五氯苯酚。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110318471.7A CN113219077A (zh) | 2021-03-25 | 2021-03-25 | 一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110318471.7A CN113219077A (zh) | 2021-03-25 | 2021-03-25 | 一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113219077A true CN113219077A (zh) | 2021-08-06 |
Family
ID=77084092
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110318471.7A Pending CN113219077A (zh) | 2021-03-25 | 2021-03-25 | 一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113219077A (zh) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114002362A (zh) * | 2021-11-10 | 2022-02-01 | 广东宇华智环科技有限公司 | 一种应用于食品多氯苯酚检测的前处理装置及其处理方法 |
CN114019058A (zh) * | 2021-11-10 | 2022-02-08 | 广东产品质量监督检验研究院(国家质量技术监督局广州电气安全检验所、广东省试验认证研究院、华安实验室) | 一种食品中氯苯酚类有机污染物的联合检测方法 |
CN114264760A (zh) * | 2021-12-21 | 2022-04-01 | 河南华测检测技术有限公司 | 一种苯酚类化合物检测方法 |
CN115508470A (zh) * | 2022-09-21 | 2022-12-23 | 广东产品质量监督检验研究院(国家质量技术监督局广州电气安全检验所、广东省试验认证研究院、华安实验室) | 一种乳粉中五氯苯酚含量的检测方法 |
CN117310031A (zh) * | 2023-09-26 | 2023-12-29 | 东莞理工学院 | 一种动物性食品中卤代有机污染物的检测方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105021754A (zh) * | 2015-07-03 | 2015-11-04 | 中华人民共和国台州出入境检验检疫局 | 液质联用法测定18种酚类及其衍生物特定迁移量方法 |
CN111257454A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-06-09 | 山东省食品药品检验研究院 | 通过式spe/uplc-ms/ms快速测定植物油中的9种酚类抗氧化剂的方法 |
-
2021
- 2021-03-25 CN CN202110318471.7A patent/CN113219077A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105021754A (zh) * | 2015-07-03 | 2015-11-04 | 中华人民共和国台州出入境检验检疫局 | 液质联用法测定18种酚类及其衍生物特定迁移量方法 |
CN111257454A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-06-09 | 山东省食品药品检验研究院 | 通过式spe/uplc-ms/ms快速测定植物油中的9种酚类抗氧化剂的方法 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会等发布: "《食品安全国家标准 GB 23200.92—2016 》", 18 December 2016 * |
广州开发区检验检测联盟: "广州开发区检验检测联盟关于发送《餐具洗涤剂及餐具清洗后氯酸盐、高氯酸盐含量测定 液相色谱-串联质谱法》等3项团体标准征求意见稿的函", 《HTTP://WWW.TTBZ.ORG.CN/HOME/SHOW/22402/》 * |
杨秋红等: "固相萃取-高效液相色谱串联质谱法同时检测地表水中的2,4-二氯酚、2,4,6-三氯酚和五氯酚", 《分析化学》 * |
潘胜东等: "生活饮用水中7种酚类化合物残留的快速确证分析", 《中国卫生检验杂志》 * |
莫迎等: "超高效液相色谱-串联质谱法测定食用猪油中氯酚类物质", 《中国食品卫生杂志》 * |
陈晓红等: "固相萃取-超快速液相色谱串联质谱测定食品中五氯酚", 《卫生研究》 * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114002362A (zh) * | 2021-11-10 | 2022-02-01 | 广东宇华智环科技有限公司 | 一种应用于食品多氯苯酚检测的前处理装置及其处理方法 |
CN114019058A (zh) * | 2021-11-10 | 2022-02-08 | 广东产品质量监督检验研究院(国家质量技术监督局广州电气安全检验所、广东省试验认证研究院、华安实验室) | 一种食品中氯苯酚类有机污染物的联合检测方法 |
CN114002362B (zh) * | 2021-11-10 | 2023-07-18 | 广东宇华智环科技有限公司 | 一种应用于食品多氯苯酚检测的前处理装置及其处理方法 |
CN114264760A (zh) * | 2021-12-21 | 2022-04-01 | 河南华测检测技术有限公司 | 一种苯酚类化合物检测方法 |
CN115508470A (zh) * | 2022-09-21 | 2022-12-23 | 广东产品质量监督检验研究院(国家质量技术监督局广州电气安全检验所、广东省试验认证研究院、华安实验室) | 一种乳粉中五氯苯酚含量的检测方法 |
CN115508470B (zh) * | 2022-09-21 | 2023-05-30 | 广东产品质量监督检验研究院(国家质量技术监督局广州电气安全检验所、广东省试验认证研究院、华安实验室) | 一种乳粉中五氯苯酚含量的检测方法 |
CN117310031A (zh) * | 2023-09-26 | 2023-12-29 | 东莞理工学院 | 一种动物性食品中卤代有机污染物的检测方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN113219077A (zh) | 一种动植物油脂中氯苯酚类持久性有机污染物残留量的检测方法 | |
Wille et al. | Coupled chromatographic and mass-spectrometric techniques for the analysis of emerging pollutants in the aquatic environment | |
CN114019058A (zh) | 一种食品中氯苯酚类有机污染物的联合检测方法 | |
Solfrizzo et al. | Liquid chromatographic determination of Alternaria toxins in carrots | |
Morales et al. | Determination of alkylphenol ethoxylates and their degradation products in liquid and solid samples | |
Trehy et al. | Environmental monitoring for linear alkylbenzene sulfonates, dialkyltetralin sulfonates and their biodegradation intermediates | |
CN109884207B (zh) | 一种快速准确分析菜籽油中多酚含量的方法 | |
CN109805393B (zh) | 一种酒糟提取物及其制备方法和应用 | |
CN113049728A (zh) | 同时测定鱼肉中十六种全氟烷基化合物的方法 | |
Gao et al. | Simultaneous determination of bisphenol A and tetrabromobisphenol A in tea using a modified QuEChERS sample preparation method coupled with liquid chromatography-tandem mass spectrometry | |
CN113702558A (zh) | 一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法 | |
CN111855873B (zh) | 一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法 | |
CN113219078B (zh) | 一种生活用纸制品中17种有机抗菌剂快速筛查方法 | |
CN109900843B (zh) | 微波萃取-固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中7种结合态雌激素的方法 | |
Kraleva et al. | Determination of PAH in the black sea water by GC/MS following preconcentration with solid-phase extraction | |
CN111494986A (zh) | 一种移液枪头式固相萃取小柱及其制备方法、萃取装置和检测磺胺类药物的方法 | |
CN109633004B (zh) | 一种检测皮革中三氯苯酚含量的方法 | |
Carvalho et al. | Methodologies for the analysis of pesticides and pharmaceuticals in sediments and plant tissue | |
CN108760956B (zh) | 一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理装置及含量测定方法 | |
Ozelcaglayan et al. | The analysis of per-and polyfluoroalkyl substances in wastewater sludges and biosolids: which adsorbents should be used for the cleanup of extracts? | |
Alfred Makudali. Msagati et al. | The use of Liquid Membranes in the Multi‐Resdue Extraction of Stilbenes in a Variety of Biological Matrices and Their Detection with LC‐ES‐MS | |
Rawn et al. | Improved method for the determination of anatoxin-a and two of its metabolites in blue-green algae using liquid chromatography with fluorescence detection | |
Xu et al. | Determination of diethylstilbestrol in aquatic products by high performance liquid chromatography with fluorescence detection | |
CN115508469B (zh) | 一种乳粉中四溴双酚a的高分辨率检测方法 | |
CN114062551B (zh) | 蔬果上氟茚唑菌胺及其代谢物含量的检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210806 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |