CN113198047A - 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法 - Google Patents

一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113198047A
CN113198047A CN202110525877.2A CN202110525877A CN113198047A CN 113198047 A CN113198047 A CN 113198047A CN 202110525877 A CN202110525877 A CN 202110525877A CN 113198047 A CN113198047 A CN 113198047A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cartilage
scaffold material
steps
orthopedic
skeleton
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110525877.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113198047B (zh
Inventor
田斌
康鑫
张亮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xian Honghui Hospital
Original Assignee
Xian Honghui Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xian Honghui Hospital filed Critical Xian Honghui Hospital
Priority to CN202110525877.2A priority Critical patent/CN113198047B/zh
Publication of CN113198047A publication Critical patent/CN113198047A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113198047B publication Critical patent/CN113198047B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3604Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
    • A61L27/3612Cartilage, synovial fluid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14Macromolecular materials
    • A61L27/22Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/227Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3687Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by the use of chemical agents in the treatment, e.g. specific enzymes, detergents, capping agents, crosslinkers, anticalcification agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3691Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by physical conditions of the treatment, e.g. applying a compressive force to the composition, pressure cycles, ultrasonic/sonication or microwave treatment, lyophilisation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/40Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material
    • A61L27/44Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material having a macromolecular matrix
    • A61L27/446Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material having a macromolecular matrix with other specific inorganic fillers other than those covered by A61L27/443 or A61L27/46
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/52Hydrogels or hydrocolloids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/10Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing inorganic materials
    • A61L2300/102Metals or metal compounds, e.g. salts such as bicarbonates, carbonates, oxides, zeolites, silicates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A61L2300/414Growth factors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/62Encapsulated active agents, e.g. emulsified droplets
    • A61L2300/624Nanocapsules
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/16Materials with shape-memory or superelastic properties
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/06Materials or treatment for tissue regeneration for cartilage reconstruction, e.g. meniscus

Abstract

本发明公开了一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,属于软骨再生领域,一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,通过在超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率,另外配合骨架空球的作用,有效诱导软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力。

Description

一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法
技术领域
本发明涉及软骨再生领域,更具体地说,涉及一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法。
背景技术
目前的软骨组织工程和再生医学技术材料按照手术方式和设计理念可分为三代,第一代技术以骨膜或其他细胞载体复合软骨细胞修复软骨缺损,手术方式为清除软骨,但不破坏软骨下骨,这种技术的细胞主要来源于后期复合或滑膜迁徙而来,组织工程化软骨(修复材料)营养供应主要靠滑膜液供给。第二代技术的支架材料或载体材料具有一定活性或诱导功能,这种支架可以复合骨髓基质干细胞,并且可以使复合的骨髓基质干细胞向软骨细胞分化,同时这种支架材料还可以诱导其他来源细胞形成软骨;这种组织工程软骨较第一代组织工程软骨成软骨能力更强,但是手术依然采用了不破坏软骨下骨的植入方式。第三代技术为无细胞支架材料技术,该类支架材料在具有适当的结构和降解性能的同时具有很好的诱导功能,同时第三类技术材料关键是改变手术植入方式,在清除软骨病变的同时,以钻孔和磨消的方式打破软骨下骨,让支架材料与软骨下骨的细胞相接触,这种设计理念主要在于支架材料不但可以收纳来源于滑膜的干细胞,同时可以吸附大量的来源于软骨下骨存在的各类细胞,充分利用人体自体的再生能力,免去体外培养细胞的复杂工序以及由其带来的高昂成本及相应的风险。
目前上市的软骨再生复合材料机械强度均不高,且降解周期偏快,不能起到支架材料的效果,导致患者软骨修复后,影响患者的正常行动,甚至会导致二次损上的情况发生。
发明内容
1.要解决的技术问题
针对现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,它通过在超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率,另外配合骨架空球的作用,有效诱导软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力。
2.技术方案
为解决上述问题,本发明采用如下的技术方案。
一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒;
S3、将纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶进行均匀混合,得到再生胶体;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
进一步的,所述S3中均匀混合的操作在恒温超声振荡器内进行,且维持恒温振荡器的温度在30-40℃,使软骨粉粒不易因高温而失去活性,有效保证其在制成形成的再生支架材料中维持良好的活性,从而有效保证本再生支架材料的再生效果,使其对运动创伤的软骨的再生修复效果更好。
进一步的,所述软骨生长溶液包括硫酸软骨素、透明质酸钠和软骨细胞生长因子溶液中的一种或多种,有效诱导打印形成的软骨再生支架材料的生长,有效保证该材料的活性,使其在进行软骨修复时效果更好。
进一步的,所述纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶三者的体积比为3-5:0.5-1:6-8,超顺磁性氧化铁纳米颗粒可以有效提高形成的再生支架材料在进行软骨修复时的分裂再生能力,有效诱导软骨的再生,使修复效果更好,同时,有效提高再生支架材料的支撑力,从而有效保证修复后的软骨的承载性更强,有效提高患者损伤修复后的软骨能够支撑其正常行动。
进一步的,所述超顺磁性氧化铁纳米颗粒在进行S3之前进行预处理,所述预处理的具体步骤为:
将超顺磁性氧化铁纳米颗粒表面喷洒雾化状态的水溶性材料,后搅拌晾干,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,通过自消成孔水溶层的设置,使本支架材料在成型后,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率。
进一步的,所述软骨粉粒在制备再生胶体之前进行预处理,所述预处理的具体处理步骤为:首先将骨架空球进行加热处理,然后将骨架空球放置到盛放软骨粉粒的容器内,使软骨粉粒淹没骨架空球,然后进行降温处理,使骨架空球收缩,粘附软骨粉粒进入到骨架空球内,使软骨粉体以骨架空球作为载体,通过骨架空球的设置,在进行修复患者受损的软骨时,在骨架空球内的软骨细胞生长因子溶液的诱导下,使骨架空球内的软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,在骨架空球的作用下,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力,进而有效保证患者修复后的软骨组织能够有效承载患者的正常行动,使稳定性更好。
进一步的,将承载有软骨粉体的骨架空球先与超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行均匀混合,后再与海藻酸钠复合水凝胶混合,使骨架空球表面粘附超顺磁性氧化铁纳米颗粒,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒在诱导软骨细胞生长时,诱导其朝向骨架空球处生长,使修复后软骨与再生支架材料的连接稳定性更好,使修复后软骨的强度更好。
进一步的,所述加热处理的温度不高于45℃,温度过高易影响其软骨粉粒的活性,所述降温处理的温度不低于5℃。
进一步的,所述骨架空球包括、位于中心处的以及多个均匀固定连接在外的,所述端部延伸至外侧。
进一步的,所述和均为钛合金制成,为具有双程记忆效应的温度记忆合金制成,所述内部填充有软骨细胞生长因子溶液,在毛细现象的作用下,内的软骨细胞生长因子溶液会沿着多个向外蔓延,使其对软骨朝向骨架空球的诱导生长的效果更好,在加热时,收缩变为弯曲状,使端部能够缩进内,在降温时,其恢复原状再次延伸至外,多次重复可以实现将软骨粉粒朝向内的运输,当植入人体后,由于人体的恒温,使可以维持植入时的形状,保持一定的稳定性,不易对人体行动造成影响。
3.有益效果
相比于现有技术,本发明的优点在于:
(1)本方案通过在超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率,另外配合骨架空球的作用,有效诱导软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力。
(2)S3中均匀混合的操作在恒温超声振荡器内进行,且维持恒温振荡器的温度在30-40℃,使软骨粉粒不易因高温而失去活性,有效保证其在制成形成的再生支架材料中维持良好的活性,从而有效保证本再生支架材料的再生效果,使其对运动创伤的软骨的再生修复效果更好。
(3)软骨生长溶液包括硫酸软骨素、透明质酸钠和软骨细胞生长因子溶液中的一种或多种,有效诱导打印形成的软骨再生支架材料的生长,有效保证该材料的活性,使其在进行软骨修复时效果更好。
(4)纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶三者的体积比为3-5:0.5-1:6-8,超顺磁性氧化铁纳米颗粒可以有效提高形成的再生支架材料在进行软骨修复时的分裂再生能力,有效诱导软骨的再生,使修复效果更好,同时,有效提高再生支架材料的支撑力,从而有效保证修复后的软骨的承载性更强,有效提高患者损伤修复后的软骨能够支撑其正常行动。
(5)超顺磁性氧化铁纳米颗粒在进行S3之前进行预处理,预处理的具体步骤为:将超顺磁性氧化铁纳米颗粒表面喷洒雾化状态的水溶性材料,后搅拌晾干,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,通过自消成孔水溶层的设置,使本支架材料在成型后,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率。
(6)软骨粉粒在制备再生胶体之前进行预处理,预处理的具体处理步骤为:首先将骨架空球进行加热处理,然后将骨架空球放置到盛放软骨粉粒的容器内,使软骨粉粒淹没骨架空球,然后进行降温处理,使骨架空球收缩,粘附软骨粉粒进入到骨架空球内,使软骨粉体以骨架空球作为载体,通过骨架空球的设置,在进行修复患者受损的软骨时,在骨架空球内的软骨细胞生长因子溶液的诱导下,使骨架空球内的软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,在骨架空球的作用下,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力,进而有效保证患者修复后的软骨组织能够有效承载患者的正常行动,使稳定性更好。
(7)将承载有软骨粉体的骨架空球先与超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行均匀混合,后再与海藻酸钠复合水凝胶混合,使骨架空球表面粘附超顺磁性氧化铁纳米颗粒,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒在诱导软骨细胞生长时,诱导其朝向骨架空球处生长,使修复后软骨与再生支架材料的连接稳定性更好,使修复后软骨的强度更好。
(8)加热处理的温度不高于45℃,温度过高易影响其软骨粉粒的活性,降温处理的温度不低于5℃。
(9)骨架空球包括、位于中心处的以及多个均匀固定连接在外的,端部延伸至外侧,和均为钛合金制成,为具有双程记忆效应的温度记忆合金制成,内部填充有软骨细胞生长因子溶液,在毛细现象的作用下,内的软骨细胞生长因子溶液会沿着多个向外蔓延,使其对软骨朝向骨架空球的诱导生长的效果更好,在加热时,收缩变为弯曲状,使端部能够缩进内,在降温时,其恢复原状再次延伸至外,多次重复可以实现将软骨粉粒朝向内的运输,当植入人体后,由于人体的恒温,使可以维持植入时的形状,保持一定的稳定性,不易对人体行动造成影响。
附图说明
图1为本发明的主要的流程框图;
图2为本发明的骨架空球正面的结构示意图;
图3为本发明的骨架空球上空隙处部分的结构示意图;
图4为本发明的骨架空球截面的结构示意图。
图中标号说明:
1多孔外壳、2径向外引丝、3内多孔储液芯
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图;对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述;显然;所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例;而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例;本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例;都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,需要说明的是,术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性。
在本发明的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等,应做广义理解,例如“连接”,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
实施例1:
请参阅图1,一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒;
S3、将纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶进行均匀混合,得到再生胶体;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
所述S3中均匀混合的操作在恒温超声振荡器内进行,且维持恒温振荡器的温度在30-40℃,使软骨粉粒不易因高温而失去活性,有效保证其在制成形成的再生支架材料中维持良好的活性,从而有效保证本再生支架材料的再生效果,使其对运动创伤的软骨的再生修复效果更好,所述软骨生长溶液包括硫酸软骨素、透明质酸钠和软骨细胞生长因子溶液中的一种或多种,有效诱导打印形成的软骨再生支架材料的生长,有效保证该材料的活性,使其在进行软骨修复时效果更好。
所述纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶三者的体积比为3-5:0.5-1:6-8,超顺磁性氧化铁纳米颗粒可以有效提高形成的再生支架材料在进行软骨修复时的分裂再生能力,有效诱导软骨的再生,使修复效果更好,同时,有效提高再生支架材料的支撑力,从而有效保证修复后的软骨的承载性更强,有效提高患者损伤修复后的软骨能够支撑其正常行动。
实施例2:
一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒;
S3、对超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行预处理,所述预处理的具体步骤为:将超顺磁性氧化铁纳米颗粒表面喷洒雾化状态的水溶性材料,后搅拌晾干,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层;
然后将纳米软骨粉粒、经预处理后的超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶进行均匀混合,得到再生胶体,通过自消成孔水溶层的设置,使本支架材料在成型后,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
实施例3:
一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒,对所述软骨粉粒进行预处理,所述预处理的具体处理步骤为:
首先将骨架空球进行加热处理,然后将骨架空球放置到盛放软骨粉粒的容器内,使软骨粉粒淹没骨架空球,然后进行降温处理,使骨架空球收缩,粘附软骨粉粒进入到骨架空球内,使软骨粉体以骨架空球作为载体,通过骨架空球的设置,在进行修复患者受损的软骨时,在骨架空球内的软骨细胞生长因子溶液的诱导下,使骨架空球内的软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,在骨架空球的作用下,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力,进而有效保证患者修复后的软骨组织能够有效承载患者的正常行动,使稳定性更好,所述加热处理的温度不高于45℃,温度过高易影响其软骨粉粒的活性,所述降温处理的温度不低于5℃;
S3、将承载有软骨粉体的骨架空球先与超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行均匀混合,后再与海藻酸钠复合水凝胶混合,得到再生胶体,使骨架空球表面粘附超顺磁性氧化铁纳米颗粒,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒在诱导软骨细胞生长时,诱导其朝向骨架空球处生长,使修复后软骨与再生支架材料的连接稳定性更好,使修复后软骨的强度更好;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
所述骨架空球包括1、位于1中心处的3以及多个均匀固定连接在3外的2,所述2端部延伸至1外侧,所述1和3均为钛合金制成,2为具有双程记忆效应的温度记忆合金制成,所述3内部填充有软骨细胞生长因子溶液,在毛细现象的作用下,3内的软骨细胞生长因子溶液会沿着多个2向1外蔓延,使其对软骨朝向骨架空球的诱导生长的效果更好,在加热时,2收缩变为弯曲状,使2端部能够缩进1内,在降温时,其恢复原状再次延伸至1外,多次重复可以实现将软骨粉粒朝向1内的运输,当植入人体后,由于人体的恒温,使2可以维持植入时的形状,保持一定的稳定性,不易对人体行动造成影响。
实施例4:
一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒;
对所述软骨粉粒进行预处理,所述预处理的具体处理步骤为:
首先将骨架空球进行加热处理,然后将骨架空球放置到盛放软骨粉粒的容器内,使软骨粉粒淹没骨架空球,然后进行降温处理,使骨架空球收缩,粘附软骨粉粒进入到骨架空球内,使软骨粉体以骨架空球作为载体,通过骨架空球的设置,在进行修复患者受损的软骨时,在骨架空球内的软骨细胞生长因子溶液的诱导下,使骨架空球内的软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,在骨架空球的作用下,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力,进而有效保证患者修复后的软骨组织能够有效承载患者的正常行动,使稳定性更好,所述加热处理的温度不高于45℃,温度过高易影响其软骨粉粒的活性,所述降温处理的温度不低于5℃;
S3、对超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行预处理,所述预处理的具体步骤为:将超顺磁性氧化铁纳米颗粒表面喷洒雾化状态的水溶性材料,后搅拌晾干,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层;
然后将纳米软骨粉粒、经预处理后的超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶进行均匀混合,得到再生胶体,通过自消成孔水溶层的设置,使本支架材料在成型后,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
通过在超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层,进行受损软骨修复时,在细胞件组织液的作用下,自消成孔水溶层水解,使再生支架材料表面呈现多孔隙的形态,有效诱导自身的软骨细胞朝向再生支架材料内生长,从而使再生支架材料与患者自身软骨之间的连接性更好,有效降低修复后的软骨部分二次受损的概率,另外配合骨架空球的作用,有效诱导软骨粉粒与患者自身的软骨组织共同朝向骨架空球生长增殖,使修复后的软骨与骨架空球形成一体,相较于现有技术,显著提高再生支架材料修复后软骨的机械承载力。
以上所述;仅为本发明较佳的具体实施方式;但本发明的保护范围并不局限于此;任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内;根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变;都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、首先选取刚死亡的动物软骨,进行超低温、纯化、灭活以及清洗处理,得到软骨粒;
S2、将软骨粒进行激光切割,得到纳米软骨粉粒;
S3、将纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶进行均匀混合,得到再生胶体;
S4、将再生胶体通过三维打印技术根据需要打印目标支架材料,后将支架材料在软骨生长溶液内浸泡1-1.5小时,完成支架材料的修饰。
2.根据权利要求1所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述S3中均匀混合的操作在恒温超声振荡器内进行,且维持恒温振荡器的温度在30-40℃。
3.根据权利要求2所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述软骨生长溶液包括硫酸软骨素、透明质酸钠和软骨细胞生长因子溶液中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述纳米软骨粉粒、超顺磁性氧化铁纳米颗粒以及海藻酸钠复合水凝胶三者的体积比为3-5:0.5-1:6-8。
5.根据权利要求1所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述超顺磁性氧化铁纳米颗粒在进行S3之前进行预处理,所述预处理的具体步骤为:
将超顺磁性氧化铁纳米颗粒表面喷洒雾化状态的水溶性材料,后搅拌晾干,使超顺磁性氧化铁纳米颗粒外包裹一层自消成孔水溶层。
6.根据权利要求1所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述软骨粉粒在制备再生胶体之前进行预处理,所述预处理的具体处理步骤为:首先将骨架空球进行加热处理,然后将骨架空球放置到盛放软骨粉粒的容器内,使软骨粉粒淹没骨架空球,然后进行降温处理,使骨架空球收缩,粘附软骨粉粒进入到骨架空球内,使软骨粉体以骨架空球作为载体。
7.根据权利要求6所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:将承载有软骨粉体的骨架空球先与超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行均匀混合,后再与海藻酸钠复合水凝胶混合。
8.根据权利要求6所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述加热处理的温度不高于45℃,所述降温处理的温度不低于5℃。
9.根据权利要求7所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述骨架空球包括(1)、位于(1)中心处的(3)以及多个均匀固定连接在(3)外的(2),所述(2)端部延伸至(1)外侧。
10.根据权利要求9所述的一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法,其特征在于:所述(1)和(3)均为钛合金制成,(2)为具有双程记忆效应的温度记忆合金制成,所述(3)内部填充有软骨细胞生长因子溶液。
CN202110525877.2A 2021-05-14 2021-05-14 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法 Active CN113198047B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110525877.2A CN113198047B (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110525877.2A CN113198047B (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113198047A true CN113198047A (zh) 2021-08-03
CN113198047B CN113198047B (zh) 2022-06-28

Family

ID=77031190

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110525877.2A Active CN113198047B (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113198047B (zh)

Citations (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0788174A (ja) * 1993-09-28 1995-04-04 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd 骨形成用移植体
WO1999008728A1 (en) * 1997-08-14 1999-02-25 Sulzer Innotec Ag Composition and device for in vivo cartilage repair
CN1281685A (zh) * 2000-08-18 2001-01-31 周星 新型腔管栓塞
US20050165480A1 (en) * 2004-01-23 2005-07-28 Maybelle Jordan Endovascular treatment devices and methods
EP1764116A1 (en) * 2005-09-16 2007-03-21 Debiotech S.A. Porous coating process using colloidal particles
EP1891988A1 (en) * 2006-08-07 2008-02-27 Debiotech S.A. Anisotropic nanoporous coatings for medical implants
CN101199873A (zh) * 2006-12-14 2008-06-18 北京乐普医疗器械有限公司 药物洗脱器械用纳米级孔洞药物释放结构及其制备方法
US20090012629A1 (en) * 2007-04-12 2009-01-08 Isto Technologies, Inc. Compositions and methods for tissue repair
CN103480044A (zh) * 2013-09-18 2014-01-01 深圳市第二人民医院 磁性纳米多孔复合骨组织工程支架材料及其制备方法
CA2969806A1 (en) * 2014-12-18 2016-06-23 Universite de Bordeaux Polymer particles and biomaterials comprising the same
CN107875443A (zh) * 2017-08-04 2018-04-06 深圳市第二人民医院 双相磁性纳米复合支架材料及其制备方法
CN108686265A (zh) * 2018-05-25 2018-10-23 广州创赛生物医用材料有限公司 一种3d打印的磁共振显影水凝胶及其制备方法和应用
CN208096804U (zh) * 2017-08-10 2018-11-16 西安市红会医院 一种软骨损伤微骨折修复器械
CN109731140A (zh) * 2018-12-27 2019-05-10 上海北陆医药科技有限公司 一种长效基因表达细胞支架及其制备方法
CN110538006A (zh) * 2019-08-13 2019-12-06 上海亚朋生物技术有限公司 纤维增强的三维打印软骨脱细胞基质支架的制作方法
CN112295015A (zh) * 2020-02-10 2021-02-02 中国人民解放军第二军医大学 一种修复软骨缺损的生物3d打印复合墨水的制备方法
CN112353752A (zh) * 2020-09-29 2021-02-12 丽水学院 一种将用于视神经恢复的光驱动型载药系统及其制备方法和应用

Patent Citations (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0788174A (ja) * 1993-09-28 1995-04-04 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd 骨形成用移植体
WO1999008728A1 (en) * 1997-08-14 1999-02-25 Sulzer Innotec Ag Composition and device for in vivo cartilage repair
CN1281685A (zh) * 2000-08-18 2001-01-31 周星 新型腔管栓塞
US20050165480A1 (en) * 2004-01-23 2005-07-28 Maybelle Jordan Endovascular treatment devices and methods
EP1764116A1 (en) * 2005-09-16 2007-03-21 Debiotech S.A. Porous coating process using colloidal particles
EP1891988A1 (en) * 2006-08-07 2008-02-27 Debiotech S.A. Anisotropic nanoporous coatings for medical implants
CN101199873A (zh) * 2006-12-14 2008-06-18 北京乐普医疗器械有限公司 药物洗脱器械用纳米级孔洞药物释放结构及其制备方法
US20090012629A1 (en) * 2007-04-12 2009-01-08 Isto Technologies, Inc. Compositions and methods for tissue repair
CN103480044A (zh) * 2013-09-18 2014-01-01 深圳市第二人民医院 磁性纳米多孔复合骨组织工程支架材料及其制备方法
CA2969806A1 (en) * 2014-12-18 2016-06-23 Universite de Bordeaux Polymer particles and biomaterials comprising the same
CN107875443A (zh) * 2017-08-04 2018-04-06 深圳市第二人民医院 双相磁性纳米复合支架材料及其制备方法
CN208096804U (zh) * 2017-08-10 2018-11-16 西安市红会医院 一种软骨损伤微骨折修复器械
CN108686265A (zh) * 2018-05-25 2018-10-23 广州创赛生物医用材料有限公司 一种3d打印的磁共振显影水凝胶及其制备方法和应用
CN109731140A (zh) * 2018-12-27 2019-05-10 上海北陆医药科技有限公司 一种长效基因表达细胞支架及其制备方法
CN110538006A (zh) * 2019-08-13 2019-12-06 上海亚朋生物技术有限公司 纤维增强的三维打印软骨脱细胞基质支架的制作方法
CN112295015A (zh) * 2020-02-10 2021-02-02 中国人民解放军第二军医大学 一种修复软骨缺损的生物3d打印复合墨水的制备方法
CN112353752A (zh) * 2020-09-29 2021-02-12 丽水学院 一种将用于视神经恢复的光驱动型载药系统及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LEVASHOV, EA等: "Nanostructured titanium alloys and multicomponent bioactive films: Mechanical behavior at indentation", 《MATERIALS SCIENCE AND ENGINEERING A-STRUCTURAL MATERIALS PROPERTIES MICROSTRUCTURE AND PROCESSING》, vol. 570, 15 May 2013 (2013-05-15) *
李庆涛: "模块法制造多级骨组织和新型水凝胶凝胶缺损的研究", 《中国博士学位论文全文数据库 (医药卫生科技辑)》 *
李庆涛: "模块法制造多级骨组织和新型水凝胶凝胶缺损的研究", 《中国博士学位论文全文数据库 (医药卫生科技辑)》, 15 March 2016 (2016-03-15) *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113198047B (zh) 2022-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109124821B (zh) 一种三维多尺度血管化支架的构建系统和方法
US6911202B2 (en) Cosmetic repair using cartilage producing cells and medical implants coated therewith
CN110327495B (zh) 组织工程耳廓形态复合支架及其制备方法
CN104353124B (zh) 一种复合磁性纳米材料的3d打印多孔金属支架及其制备方法
CN110935059A (zh) 具有光热功能的MXene复合骨修复材料及其制备方法
CN108404214B (zh) 一种仿生骨软骨复合体及其制备方法
Shi et al. Development and potential of a biomimetic chitosan/type II collagen scaffold for cartilage tissue engineering
CN112076009A (zh) 一种基于曲面3d打印的多层仿生关节及其制备方法
CN104368040B (zh) 一种复合脱钙骨基质的3d打印多孔金属支架及其制备方法
CN101979105A (zh) 一种用于软骨缺损修复的组织工程支架材料及其制备方法
Pan et al. Application of nanomaterials in stem cell regenerative medicine of orthopedic surgery
CN113198047B (zh) 一种骨科运动创伤软骨再生支架材料的制备方法
Wu et al. Engineering cartilage substitute with a specific size and shape using porous high-density polyethylene (HDPE) as internal support
CN108578780B (zh) 一种载银离子具有力学梯度的人工骨支架的制备方法
CN113577393B (zh) 一种骨修复材料及其制备方法和应用
CN114259604B (zh) 一种3d打印促有序血管化的载药骨修复支架的制备方法及其产品和应用
CN111921011B (zh) 一种包覆涂层的人工骨及制备方法
CN114855024A (zh) 多孔钽医用植入材料及其制备方法和应用
CN104784756B (zh) 一种粘附血小板的三维微支架复合多孔金属支架
CN112675362A (zh) 一种用于骨修复的个性化镁合金支架的制备方法及其产品
CN212522088U (zh) 一种基于曲面3d打印的多层仿生关节
CN114854675A (zh) 一种凝胶软骨接种于框架结构实现软骨再生的方法
CN101927033B (zh) Phbv纳米纤维支架材料及其制备方法和应用
CN114432500B (zh) 一种CeO2修饰TiO2可变纳米管阵列的仿生多孔钛支架及其制备方法
CN113577379B (zh) 一种定向诱导骨组织分化的骨修复支架

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant