CN113181119B - 载药系统及其制备方法、药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种载药系统及其制备方法、药物组合物。该载药系统包括载体、由细胞膜制成的囊泡和包埋于所述囊泡中的蓝藻，载体包括载药部和与载药部连接的嵌膜部，嵌膜部嵌于囊泡上，载药部位于囊泡外。上述载药系统具有良好的生物相容性、靶向递送性和产氧长效性，能够改善缺氧组织所用的供氧材料产氧时间短而需要不间断给药的问题。

Description

载药系统及其制备方法、药物组合物
技术领域
本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种载药系统及其制备方法、药物组合物。
背景技术
在肿瘤组织内，肿瘤细胞失控性生长和增殖消耗大量的营养和氧气，其内部不能及时、有效的建立新生血管网而使肿瘤内部血流减少，氧气的供应远少于氧气的需求，所以肿瘤细胞处于急性(灌注缺乏)或慢性(弥散障碍)缺氧状态。
有研究表明，肿瘤缺氧微环境与肿瘤的发生发展、预后和转移密切相关，肿瘤组织内部存在的乏氧微环境，是导致众多肿瘤出现免疫抑制和多药耐药的原因。此外，临床上常采用光动力学和声动力学手段进行抗肿瘤治疗，但这两种抗肿瘤治疗手段往往会由于肿瘤组织的乏氧微环境而治疗效果有限。
因此，目前常用以下策略来改善肿瘤缺氧的为环境：(1)向肿瘤组织递送富含氧气的材料(例如全氟化碳和含氧血红蛋白)；(2)基于肿瘤酸性环境和过氧化氢过表达等特性，利用催化剂(例如二氧化锰)或者活性酶(例如过氧化氢酶)等在肿瘤部位发生氧化还原反应生成氧气。虽然这些策略在一定程度上改善了缺氧微环境，但氧气产生量受限于递送到肿瘤组织的材料量，且氧气产生时间较短，需要多次不间断给药才能长期改善肿瘤缺氧微环境。
发明内容
基于此，有必要提供一种载药系统，该载药系统具有良好的生物相容性、靶向递送性和产氧长效性，能够改善目前缺氧组织所用的供氧材料产氧时间短而需要不间断给药的问题。
一种载药系统，包括载体、由细胞膜制成的囊泡和包埋于所述囊泡中的蓝藻，所述载体包括载药部和与所述载药部连接的嵌膜部，所述嵌膜部嵌于所述囊泡上，所述载药部位于所述囊泡外以用于负载药物。
上述载药系统包括载体、由细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，通过细胞膜，使得上述载体具有良好的生物相容性和靶向递送性，并且通过将蓝藻包埋到囊泡中，使上述载药系统不容易产生免疫排斥反应，同时蓝藻在光的作用下进行光合作用能持续不断地产生氧气，与传统的供氧材料相比，供氧的时效性长。
在其中一个实施例中，所述细胞膜为红细胞的细胞膜、免疫细胞的细胞膜或肿瘤细胞的细胞膜。
在其中一个实施例中，所述载药部的材料包括大环化合物，所述大环化合物具有能束缚药物的结构。
在其中一个实施例中，所述载药部的材料选自环糊精、葫芦脲、杯芳烃、柱芳烃和冠醚中的一种。
在其中一个实施例中，所述嵌膜部的材料选自1,2-十四酰基磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺、1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺和胆固醇中的一种。
在其中一个实施例中，所述嵌膜部通过聚乙二醇和聚氧化乙烯中的至少一种连接到所述载药部上。
在其中一个实施例中，所述囊泡的直径为100nm～1000nm。
一种载药系统的制备方法，包括以下步骤：
将细胞膜和载体混合后挤压，制备连接有载体且有开口的囊泡，其中，所述载体包括载药部和与所述载药部连接的嵌膜部，所述嵌膜部嵌于所述囊泡上，所述载药部位于所述囊泡外；及
将蓝藻包埋到所述囊泡中，制备载药系统。
在其中一个实施例中，所述细胞膜、所述载体和所述蓝藻的质量之比为(1～20)：(1～20)：(1～20)。
一种药物组合物，包括上述的载药系统和药物，所述药物与所述载药系统的载体的载药部连接。
附图说明
图1为蓝藻的扫描电镜图；
图2为实施例1的β-CD修饰的巨噬细胞膜包被蓝藻的扫描电镜图；
图3为未处理的蓝藻和各实施例的被包被的蓝藻的生长曲线；
图4为未处理的蓝藻和各实施例的被包被的蓝藻的产氧曲线。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使本发明公开内容更加透彻全面。
需要说明的是，当一个元件被表述“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件、或者其间可以存在一个或多个居中的元件。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。在本文中，大环化合物是指超分子化学领域中的大环；在超分子化学领域中，大环是环形的有机化合物，常见的官能团包括醚和胺，例如：冠醚，环糊精，杯芳烃，杯吡咯，杯咔唑，葫芦脲，柱芳烃等。
本发明一实施方式提供了一种载药系统，该载药系统包括载体、由细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体包括载药部和连接于载药部上的嵌膜部，载药部位于所述囊泡外，嵌膜部嵌于囊泡上。
由细胞膜制成的囊泡用于包埋蓝藻。采用由细胞膜制成的囊泡包埋蓝藻使得上述载药系统具有良好的生物相容性，且源自不同类型细胞的细胞膜具有不同的生理功能，例如免疫细胞的细胞膜具有炎症趋向性，这赋予上述载药系统内在靶向驱动力，使得上述载药系统也具有良好的靶向递送性。
具体地，细胞膜为红细胞的细胞膜、免疫细胞的细胞膜或肿瘤细胞的细胞膜。可以理解的是，细胞膜在提取制备过程中以片状的形式呈现，但由于细胞膜磷脂双分子层的结构组成及结构特点，在一定条件下(例如在PBS缓冲溶液中通过脂质体挤出器)，细胞膜可以重新融合形成腔体结构。可选地，免疫细胞的细胞膜为M1型巨噬细胞的细胞膜、M2型巨噬细胞的细胞膜、T细胞的细胞膜、B细胞的细胞和NK细胞的细胞中的至少一种。可选地，肿瘤细胞膜为黑色素瘤细胞的细胞膜、乳腺癌细胞的细胞膜和脑胶质瘤细胞的细胞膜中的至少一种。可以理解的是，细胞膜的种类不限于上述，还可以根据实际需要靶向的位点进行调整。
在一些实施例中，囊泡的直径为100nm～1000nm。通过将囊泡的直径设为100nm～1000nm，可以使细胞膜较为均一的包被在蓝藻菌表面。在一个可选地具体示例中，囊泡的直径为100nm、200nm、300nm、400nm、500nm、600nm、700nm、800nm、900nm或1000nm。进一步地，囊泡的直径为200nm～500m。需要说明的是，在本文中，囊泡的直径均是指细胞膜形成的空心结构的外径，不包括载体的载药部。
具体地，载体包括载药部和与载药部连接的嵌膜部。载药部用于载药，嵌膜部用于将载药部连接到囊泡上。
在一些实施例中，载体部的材料包括大环化合物，大环化合物具有能束缚药物的结构，例如柱状结构、杯状结构等，通过这些结构将药物以非共价键的形式束缚于其中而实现载药。可选地，载药部的材料选自环糊精、葫芦脲、杯芳烃、柱芳烃和冠醚中的一种。进一步地，载药部的材料为β-环糊精。当然，在其他实施例中，载体部的材料不限于上述，还可以是其他能够运载药物的物质，例如能够与药物以化合键结合的物质。
在一些实施例中，嵌膜部的材料选自1,2-十四酰基磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)、1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺(DSPE)和胆固醇(CHOL)。当然，在其他实施例中，嵌膜部的材料不限于上述，还可以是其他能够嵌入细胞膜的物质。
在一些实施例中，嵌膜部通过聚乙二醇固定到载体部上。可选地，聚乙二醇的分子量为2000Da～10000Da。当然，在其实施例中，连接嵌膜部和载体部的物质不限于聚乙二醇，还可以采用其他物质(例如聚氧化乙烯)将嵌膜部连接到载体部上。
蓝藻(Cyanobacteria)又名蓝绿藻(blue green algae)，是一类进化历史悠久、革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a，但不含叶绿体(区别于真核生物的藻类)、能进行产氧性光合作用的大型单细胞原核生物。蓝藻包括蓝球藻(Chroococcus)、颤藻(Oscillatoria)、念珠藻(Nostoc)。在上述载药系统中，通过将蓝藻包埋在囊泡中，有效降低机体对蓝藻的免疫排斥反应，使其能够到达目的区域(例如肿瘤组织)。在达到目的区域之后，为蓝藻提供光，则蓝藻利用光、二氧化碳(由组织中的细胞代谢产生)和水进行光合作用，进而不断地产生氧气，从而改善目的区域的缺氧环境，进而使得上述载药系统运载的药物能够发挥更好的治疗效果。在本实施方式中，蓝藻为小球藻(GY-H60Chlorella)。
在一些实施例中，在上述载药系统的囊泡中还包括利于蓝藻的存活保存剂。
上述载药系统包括由细胞膜制成的囊泡、包埋囊泡中的蓝藻、和一部分嵌于囊泡上而另一部分位于囊泡外的载体，通过囊泡、蓝藻和载体的相互配合，使得上述载药系统具有良好的生物相容性、靶向递送性及产氧长效性。
此外，本发明一实施方式还提供了一种上述载药系统的制备方法，该制备方法包括步骤a～步骤b，具体地：
步骤a：将细胞膜和载体混合后挤压，制备连接有载体的细胞膜囊泡。
具体地，细胞膜和载体挤压混合，制备连接有载体的细胞膜囊泡。载体包括载药部和与载药部连接的嵌膜部，经过挤压混合，载体的嵌膜部嵌到细胞膜上，而载药部位于由细胞膜制成的囊泡外以用于载药。载药部、嵌膜部和载药部与嵌膜部之间的连接方式如上述，囊泡的大小也如上述，此处不再赘述。
可选地，通过脂质体挤出器挤压细胞膜而形成连接有载体的细胞膜囊泡。因为细胞膜的主要成分为磷脂双分子层，和制备脂质体的成分类似，通过脂质体挤出器可以同样的制备出囊泡结构。在囊泡结构与蓝藻混合并挤压之后，囊泡受到挤压力而使其结构发生重新组装，封闭蓝藻进入的开口；并且由于蓝藻的存在，在挤压过程中蓝藻可作为模板，囊泡会重新组装在蓝藻菌的表面。
在一些实施例中，细胞膜与载体的质量之比为(1～20)：(1～20)。进一步地，在，细胞膜与载体的质量之比为(1～10)：(1～10)。通过将细胞膜与载体的质量之比设置为(1～10)：(1～10)，可以使得载体以合适的密度较为均一分散在细胞膜囊泡表面。在一个具体的示例中，细胞膜与载体的质量之比为1：1、1：2、1：10或5：1。
需要说明的是，细胞膜可以从市场上购得，也可以通过从相应的细胞上分离而等。
步骤b：将蓝藻包埋到囊泡中，制备载药系统。
具体地，将蓝藻和步骤a制得的囊泡在水中混合后超声，以使蓝藻包埋到囊泡中，制备载药系统。通过超声的作用，蓝藻通过囊泡上的开口进入到囊泡中。
可选地，在蓝藻、囊泡和水的混合物中，蓝藻的浓度为104个/mL～109个/mL。
可选地，超声的功率为50W～500W；超声的时间为10min～30min。超声的功率和时间按照上述设置，可以使细胞膜较为完整的封装在蓝藻表面。进一步地，超声的功率为100W～200W；超声的时间为10min～20min。
可选地，细胞膜、载体和蓝藻的质量之比为(1～20)：(1～20)：(1～20)。进一步地，细胞膜、载体和蓝藻的质量之比为(1～10)：(1～10)：(1～10)。通过将细胞膜、载体和蓝藻的质量之比设置为(1～10)：(1～10)：(1～10)，可以使得细胞膜较为完整的封装在蓝藻表面，且载体以合适的密度较为均一分散在细胞膜囊泡表面。在一个具体的示例中，细胞膜、载体和蓝藻的质量之比为1：1：1、1：2：5、1：1：5或1：10：10。
当然，在超声结束之后，还包括离心纯化载药系统的步骤。可选地，在离心速度为200g～2500g的条件下，将超声后的混合物离心时间为1min～30min。
可以理解的是，在其他一些实施例中，还可以用除超声外的其他方式(例如直接搅拌)将蓝藻包埋到囊泡中。
上述载药系统的制备方法简捷、快速、条件温和，不依赖于贵重仪器，易于产业化生产，并且按照上述载药系统的制备方法制得的载药系统具有良好的生物相容性、靶向性和产氧长效性。并且传统的载药系统为瞬时产氧，需要多次给药，而上述载药系统可以持续维持一段时间(例如一周)不断地产氧，可以避免多次给药。
可以理解的是，上述载药系统的制备方法不限于上述，还可以是先将蓝藻包埋到由细胞膜制成的囊泡中之后，将载体连接到包埋有蓝藻的囊泡上。
因为上述载药系统具有良好的生物相容性、靶向递送性及产氧长效性，所以，可将上述载药系统应用于药物的制备过程中。例如，应用于利用光动力学或声动力学进行肿瘤治疗的抗肿瘤药物的制备过程中。
本发明一实施方式还提供了上述载药系统在制备有氧条件下能更好发挥治疗效果的药物中的应用。具体地，上述载药系统在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明一实施方式还提供了一种药物组合物，包括上述载药系统和药物，药物与上述载药系统的载体的载药部分结合。
在一些实施例中，药物为抗肿瘤药物。可选地，抗肿瘤药物用于治疗如下肿瘤中的至少一种：急性白血病、淋巴细胞性白血病、粒细胞性白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌、支气管肺癌、未分化小细胞性支气管肺癌、非小细胞性支气管肺癌、卵巢癌、软组织肉瘤、成骨肉瘤、横纹肌肉瘤、尤文肉瘤、母细胞瘤、神经母细胞瘤、膀胱癌、甲状腺癌、前列腺癌、头颈部鳞癌、睾丸癌、胃癌和肝癌。当然，在其他实施例中，药物不限于上述的抗肿瘤药物，还可以是其他需要在氧气较充裕的环境下能有更好治疗效果的药物。
上述药物组合物包括上述载药系统，具有良好的生物相容性、靶向递送性及产氧长效性，能够实现精准治疗且治疗效果好。
本发明一实施方式还提供了上述药物组合物的使用方法，该使用方法包括以下步骤：将上述药物组合物通过静脉注射注入体内；在上述组合物到达目的区域后，向目的区域提供光照以使得蓝藻能够接收光照，而利用所接收的光照、水和来自细胞代谢的二氧化碳进行光合作用，产生氧气，从而提高目的区域的氧气的浓度，改善目的区域缺氧的微环境。
可以理解的是，在一些实施方式中，上述药物组合物也可以通过原位注射的方式注入体内。
具体实施例
以下结合具体实施例进行详细说明。以下实施例如未特殊说明，则不包括除不可避免的杂质外的其他组分。实施例中采用试剂和仪器如非特别说明，均为本领域常规选择。实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件，例如文献、书本中所述的条件或者生产厂家推荐的方法实现。
在下文的原料中，如未特殊说明，蓝藻均是小球藻(GY-H60Chlorella)，其扫描电镜图像如图1所示。
DSPE-PEG-β-CD是指1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-β环糊精，其中，1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺通过聚乙二醇修饰到β环糊精上，该聚乙二醇的分子量为2000，DSPE-PEG-β-CD购自西安瑞禧生物科技有限公司；
DSPE-PEG-CB[7]是指1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-葫芦脲[7]，1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺通过聚乙二醇修饰到葫芦脲[7]上，该聚乙二醇的分子量为2000，DSPE-PEG-CB[7]采用DSPE-PEG-SH和双键化CB[7]反应制得；
DMPE-PEG-P5是指1,2-十四酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-柱[5]芳烃，1,2-十四酰基磷脂酰乙醇胺通过聚乙二醇修饰到柱[5]芳烃上，该聚乙二醇的分子量为2000，DMPE-PEG-P5采用DMPE-PEG-NHS和氨基化P5反应制得；
DPPE-PEG-β-CD是指二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-β环糊精，其中，二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺通过聚乙二醇修饰到β环糊精上，该聚乙二醇的分子量为2000，DPPE-PEG-β-CD采用DPPE-PEG-NHS和氨基化β-CD反应制得。
实施例1
本实施例的载药系统包括载体、由巨噬细胞的细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体为DSPE-PEG-β-CD，DSPE嵌在细胞膜上，β-CD位于囊泡外。
本实施例的载药系统的制备原料及制备方法中的部分参数如表1所示，制备方法包括但不限于如下步骤：
(1)从巨噬细胞分离出细胞膜，并与DSPE-PEG-β-CD按照质量比为1：1经脂质体挤出器挤压形成直径约为200nm的囊泡。
(2)将步骤(1)的囊泡与蓝藻按照质量比为2：1在水中混合，并用水将蓝藻稀释至终浓度为107个/mL，充分搅拌，制得混合物；接着将混合物超声(100Hz)处理20分钟后，在1000g条件下离心5分钟，收集沉淀，制备本实施例的载药系统(即β-CD修饰的巨噬细胞膜包被蓝藻)。
实施例2
本实施例的载药系统包括载体、由黑色素瘤细胞的细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体为DSPE-PEG-CB[7]，DSPE嵌在细胞膜上，CB[7]位于囊泡外。
本实施例的载药系统的制备原料及制备方法中的部分参数如表1所示，制备方法包括但不限于如下步骤：
(1)从黑色素瘤细胞分离出细胞膜，并与DSPE-PEG-CB[7]按照质量比为1：2经挤出器挤压形成直径约100nm囊泡。
(2)将步骤(1)的囊泡与蓝藻按照质量比为3：5在水中混合，并用水将蓝藻稀释至终浓度为105个/mL，充分搅拌，制得混合物；接着将混合物超声(200Hz)处理10分钟，在2000g条件下离心20分钟，收集沉淀，制备本实施例的载药系统(即CB[7]修饰的黑色素瘤细胞膜包被蓝藻)。
实施例3
本实施例的载药系统包括载体、由乳腺癌瘤细胞的细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体为DMPE-PEG-P5，DMPE嵌在细胞膜上，P5位于囊泡外。
本实施例的载药系统的制备原料及制备方法中的部分参数如表1所示，制备方法包括但不限于如下步骤：
(1)从乳腺癌瘤细胞分离出细胞膜，并与DMPE-PEG-P5按照质量比为1：1经挤出器挤压形成直径约为500nm囊泡。
(2)将步骤(1)的囊泡与蓝藻按照质量比为2：5在水中混合，并用水将蓝藻稀释至终浓度为109个/mL，充分搅拌，制得混合物；接着将混合物超声(500Hz)处理15分钟，在500g条件下离心10分钟，收集沉淀，制备本实施例的载药系统(即P5修饰的乳腺癌细胞膜包被蓝藻)。
实施例4
本实施例的载药系统包括载体、由红细胞的细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体为DPPE-PEG-β-CD，DPPE嵌在细胞膜上，β-CD位于囊泡外。
本实施例的载药系统的制备原料及制备方法中的部分参数如表1所示，制备方法包括但不限于如下步骤：
(1)从红细胞分离出细胞膜，并与DPPE-PEG-β-CD按照质量比为5：1经挤出器挤压形成直径约为500nm的囊泡。
(2)将步骤(1)的囊泡与蓝藻按照质量比为6：2在水中混合，并用水将蓝藻稀释至终浓度为107个/mL，充分搅拌，制得混合物；接着将混合物超声(50Hz)处理5分钟后，在1000g条件下离心5分钟，收集沉淀，制备本实施例的载药系统(即β-CD修饰的红细胞膜包被蓝藻)。
实施例5
本实施例的载药系统包括载体、由中心粒细胞的细胞膜制成的囊泡和包埋于囊泡中的蓝藻，载体为DSPE-PEG-β-CD，DSPE嵌在细胞膜上，β-CD位于囊泡外。
本实施例的载药系统的制备原料及制备方法中的部分参数如表1所示，制备方法包括但不限于如下步骤：
(1)从中心粒细胞分离出细胞膜，并与DSPE-PEG-β-CD(同实施例1)按照质量比为1：10经挤出器挤压形成直径约为250nm的囊泡。
(2)将步骤(1)的囊泡与蓝藻按照质量比为11：10在水溶液中混合，并用水将蓝藻稀释至终浓度为108个/mL，充分搅拌，制得混合物；接着将混合物超声(300Hz)处理20分钟后，在1000g条件下离心3分钟，收集沉淀，制备本实施例的载药系统(β-CD修饰的中心粒细胞膜包被的蓝藻)。
表1
观察及测试：
(1)将各实施例的载药系统在扫描电镜下观察，其中，实施例1的载药系统的图像如图2所示。
(2)将未经处理的蓝藻(作为对照)和各实施例的载药系统在F/2+Si培养基中孵育，在不同的时间点记录培养基中蓝藻的个数，绘制未经处理的蓝藻和各实施例的载药系统中蓝藻的生长曲线。未经处理的蓝藻、实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的载药系统中的蓝藻的生长曲线如图3所示。
(3)将未经处理的蓝藻(作为对照)和各实施例的载药系统分别置于日光灯下，并在F/2+Si培养基中测定溶解氧量，绘制未经处理的蓝藻和各实施例的载药系统中蓝藻的产氧曲线。其中，未经处理的蓝藻、实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的载药系统中的蓝藻的在第5天的产氧曲线如图4所示。
由图3和图4可知，经过β-CD修饰的巨噬细胞膜包被蓝藻、CB[7]修饰的黑色素瘤细胞膜包被蓝藻、P5修饰的乳腺癌细胞膜包被蓝藻、β-CD修饰的红细胞膜包被蓝藻和β-CD修饰的中心粒细胞膜包被蓝藻，与未处理的蓝藻相比，长势几乎相同。由此说明β-CD修饰的巨噬细胞膜、CB[7]修饰的黑色素瘤细胞膜、P5修饰的乳腺癌细胞膜、β-CD修饰的红细胞膜和β-CD修饰的中心粒细胞膜对蓝藻的包被并不影响蓝藻的生长，并且这些细胞膜的包被对蓝藻的产氧的影响也不显著，被这些细胞膜包被的蓝藻能够持续不断地产氧。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。应当理解的是，在本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书及附图可以用于解释权利要求的内容。

Claims (1)

1.一种用于治疗肿瘤的且具有产氧长效性的载药系统的制备方法，其特征在于，步骤如下：
所述载药系统，包括载体、由细胞膜制成的囊泡和包埋于所述囊泡中的蓝藻，所述载体包括载药部和与所述载药部连接的嵌膜部，所述嵌膜部嵌于所述囊泡上，所述载药部位于所述囊泡外以用于负载药物；
将细胞膜和载体混合后挤压，制备连接有载体且有开口的囊泡；及
将蓝藻包埋到所述囊泡中，制备载药系统；
将蓝藻包埋到所述囊泡中时，还包括将蓝藻和囊泡在水中混合后超声的步骤；
超声的功率为200HZ，超声的时间为10min；
超声结束之后，还包括离心纯化载药系统的步骤；
离心速度为2000g，离心时间为20min；
所述蓝藻为小球藻GY-H60Chlorella；
所述细胞膜为黑色素瘤细胞膜；
所述黑色素瘤细胞膜、所述载体和所述蓝藻的质量之比为2：1：5；
所述载药部的材料为大环化合物，所述大环化合物具有能束缚药物的结构；
所述载药部的材料为葫芦脲；
所述嵌膜部的材料为1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺；
所述嵌膜部通过聚乙二醇连接到所述载药部上；
所述囊泡的直径为100nm；
在蓝藻、囊泡和水的混合物中，所述蓝藻的浓度为105个/mL；
所述囊泡中还包括利于蓝藻的存活保存剂。
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