CN113176356B - 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法 - Google Patents

一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113176356B
CN113176356B CN202110449764.9A CN202110449764A CN113176356B CN 113176356 B CN113176356 B CN 113176356B CN 202110449764 A CN202110449764 A CN 202110449764A CN 113176356 B CN113176356 B CN 113176356B
Authority
CN
China
Prior art keywords
odor substances
aquaculture
sample
soil odor
water body
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110449764.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113176356A (zh
Inventor
宋超
邹剑敏
陈家长
桂源
孟顺龙
陈曦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Original Assignee
Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences filed Critical Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority to CN202110449764.9A priority Critical patent/CN113176356B/zh
Publication of CN113176356A publication Critical patent/CN113176356A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113176356B publication Critical patent/CN113176356B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/16—Injection
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，属于水产养殖技术领域。步骤如下：对待测水产养殖池塘进行水体的采集并避光保存；取样，加入净化萃取包，净化萃取包的原料如下：丙基乙二胺、十八烷基硅烷、石墨化碳黑；涡旋，混匀，随后离心，取上清液体；加入四氯乙烯，超声波浴，随后离心；用色谱进样针从离心管底部准确吸取，直接进样。本发明所述方法通过优化分散式固相萃取材料使用量的配比，筛选最合适的分散式液相萃取有机溶剂，能够实现水产养殖水体中土臭味物质的净化、提取和浓缩，具有环境友好、节约成本、快速简易和批量化操作等优点。

Description

一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法。
背景技术
水产养殖提供的水产品极大地满足了我国人民对蛋白质的需求，是维护国家粮食安全不可动摇的根基。然而，一些残留在水产品中的异味物质极大地影响了食用口感。这些异味物质主要以土臭味物质为主，主要包括土臭素、2-甲基异莰醇、2-异丁基-甲氧基吡嗪、2-异丙基-甲氧基吡嗪和2，3，6-三氯代茴香醚，其中对水产品土臭味贡献最大的，也是目前相关研究最多的就是土臭素和二甲基异莰醇。
水产品土臭味与养殖水体中的含量关系密切，可以说，水体土臭味物质是水产品残留的最重要来源。土臭素和二甲基异莰醇进入水体后，一部分经鱼鳃进入血液后，进入鱼体，并在身体脂肪含量高的组织沉积；水体的土臭味物质还能直接被鱼体表皮肤吸收，通过渗透作用进入鱼体组织；另外，鱼类吞食的水中含有分泌土臭味物质的细菌及土臭味物质，这部分物质则透过肠上皮细胞进入鱼体。
由上可见，为有效防控土臭味物质从水体向水产品中残留，开发水产养殖水体中残留的土臭味物质（土臭素和2-甲基异莰醇）的检测方法具有重要意义。气相色谱-质谱联用（GC-MS）已成为检测土臭味物质最重要的方法。在采集的水产养殖水体样品进入GC-MS检测前需要进行样品中土臭味物质的提取、净化和浓缩三个前处理步骤，目的是保证仪器检测的适用、纯净，以及合适的灵敏度。固相微萃取（SPME）就是集这三个步骤和三个优点于一体的一种前处理方法，既简单、方便，又有很好的效果。因此，SPME和GC-MS联用的方法也是目前国家相关标准《生活饮用水臭味物质 土臭素和2-甲基异莰醇检验方法》（GB/T 32470-2016）使用的前处理和检测方法。然而，该方法有明显的缺点，导致其推广和使用难度大，那就是耗时和费钱。具体表现为，该方法使用时需要顶空萃取瓶密闭装载水体样品，电炉加热，并磁力搅拌至少30分钟以上。同时，瓶盖处插入固相微萃取的萃取纤维进行蒸发出土臭味物质的吸附。该前处理过程结束后，将萃取纤维插入GC-MS的进样口，手动进样。1个萃取纤维只能约处理30个样品。
发明内容
解决的技术问题：针对现有技术中存在的问题，本发明提出一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，通过优化分散式固相萃取材料使用量的配比，筛选最合适的分散式液相萃取有机溶剂，能够实现水产养殖水体中土臭味物质的净化、提取和浓缩，具有环境友好、节约成本、快速简易和批量化操作等优点。
技术方案：一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，步骤如下：
步骤一.对待测水产养殖池塘进行水体的采集，然后用水相、孔径为0.45 µm滤膜过滤，置于待测样品瓶中4℃ - 7℃避光保存不超过一周；
步骤二.从待测样品瓶中移取待测水体至锥形底的离心管中，随后加入净化萃取包，净化萃取包的原料按质量份配比如下：丙基乙二胺10 -15 份、十八烷基硅烷15 - 20份、石墨化碳黑15 - 20 份；
步骤三. 涡旋，混匀，随后离心，取上清液体，并转移至锥形底的离心管中；
步骤四. 加入四氯乙烯，超声波浴，随后离心；
步骤五. 用色谱进样针从离心管底部准确吸取，直接进样。
作为优选，所述步骤一中待测样品瓶为1L体积的广口玻璃瓶，取样时采用四角和中心均等取样混合的“五点法”取样原则。
作为优选，所述步骤二中待测水体和净化萃取包的比值为（15 - 20 mL）：（45-50g）。
作为优选，所述步骤二中丙基乙二胺的粒径为40-70 µm，十八烷基硅烷的粒径为40-70 µm，石墨化碳黑的粒径为120-150目。
作为优选，所述步骤三中涡旋，混匀2-4分钟，随后在10619 g下离心5-8分钟，取上清液体12-18 mL，并转移至锥形底的离心管中。
作为优选，所述步骤四中加入四氯乙烯，超声波浴3-5分钟，随后10619 g下离心3-5分钟，四氯乙烯与待测水体的比值为(8 -10 µL)：(15 - 20 mL)。
作为优选，所述步骤五中用色谱进样针从离心管底部准确吸取2 µL，直接进样。
有益效果：本发明不再使用固相微萃取的原有前处理思路，而是基于水产养殖水体本身的基质属性，利用分散式固相萃取与分散式液相萃取相结合方法，通过优化分散式固相萃取材料使用量的配比，筛选最合适的分散式液相萃取有机溶剂，实现水产养殖水体中土臭味物质的净化、提取和浓缩。本发明与已有前处理方法相比，优点是节约成本、快速简易和批量化操作。另外，本发明也同样具有环境友好的优点，即仅使用少量有机溶剂。
附图说明
图1 为本发明所述用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法工艺流程图；
图2为实施例1处理后水体提取物的图谱特征图；
图3为对比例1处理后水体提取物的图谱特征图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，参见图1，步骤如下：
（1）利用1L体积的广口玻璃瓶盛放待测水产养殖池塘无锡宜兴淡水中心罗非鱼养殖基地采集的水体，为无偏差和遵守均匀分布取样的原则，采用四角和中心均等取样混合的“五点法”取样原则。用水相、孔径为0.45 µm滤膜过滤，4℃避光保存不超过一周，最好采集样品后立即进行前处理。
（2）从待测样品瓶中准确移取15 mL待测水体至锥形底的50 mL离心管中，随后加入净化萃取包。该净化萃取包的材料和用量配方如下：丙基乙二胺（粒径为40-70 µm）15 g、十八烷基硅烷（粒径为40-70 µm）15 g、石墨化碳黑（粒径为120-150目）15 g。使用净化萃取包的用途是吸附待测样品中溶解性的蛋白、油脂，以及其它碳水化合物类生物大分子等，使样品纯净，保证后续GC-MS谱图无过多杂峰干扰目标物质。
（3）涡旋，混匀2分钟，随后在10619 g下离心5分钟。取上清液体12 mL，并转移至锥形底的15 mL离心管中。
（4）加入8 µL四氯乙烯，超声波浴3分钟。随后10619 g下离心3分钟。可见四氯乙烯沉降至离心管锥形底的底部，形成沉积相。使用四氯乙烯的用途是提取和浓缩水相中的土臭味物质，超声波浴的用途是分散四氯乙烯，保证提取剂与水相有足够大的接触面积，以此保证提取充分。
（5）用色谱进样针从离心管底部准确吸取2 µL，直接进样。
通过上述前处理步骤进行验证检测，土臭素和2-甲基异莰醇的方法定量限分别为2和9 ng/L，其变异系数分别为10.1%和10.4%。
在添加有0.25 µg/L土臭素和2-甲基异莰醇的空白水产养殖水体中，实际检出值分别为0.23±0.03和0.20±0.04 µg/L，回收率分别为92.03±2.11%和80.34±7.21%。 现有技术中土臭素和2-甲基异莰醇的回收率分别是90.03±1.21%和81.42±3.25%，与本方法类似，表明本方法能够给出与现有技术同等的质量水准。
图谱特征参见图2，从图中的质量控制数据可以看出，本方法满足土臭素和2-甲基异莰醇的有效检测。
对比例1
同实施例1，区别在于没有使用萃取净化包。图谱特征参见图3，从图中可以看出图谱显示杂峰多，干扰目标峰定量，提高了方法定量限，影响方法灵敏度。
另外，本实施例中有改变萃取净化包的比例，主要是只使用了丙基乙二胺（粒径为40-70 µm）15 g、十八烷基硅烷（粒径为40-70 µm）15 g，而没有使用石墨化碳黑（粒径为120-150目），造成的结果也是杂峰过多，峰形与没有使用萃取包类似。
对比例2
同实施例1，区别在于，将实施例1中的四氯乙烯提取剂用三溴甲烷代替。结果表明同等条件下2-甲基异莰醇的响应值后者低于前者10倍。
本申请也比较了多种有机溶剂，如正己烷、二氯甲烷、异辛烷、甲醇等，发现四氯乙烯的效果最好。能够满足试验需求。像二氯甲烷、异辛烷、甲醇均不能进行有效的分散式液液微萃取操作。但是当提取剂为三溴甲烷时，能够进行有效的分散式液液微萃取操作，但是缺陷是响应值低，还是无法与四氯乙烯媲美。
实施例2
一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，步骤如下：
步骤一.对待测水产养殖池塘进行水体的采集，然后用水相、孔径为0.45 µm滤膜过滤，置于待测样品瓶中7℃避光保存不超过一周，待测样品瓶为1L体积的广口玻璃瓶，取样时采用四角和中心均等取样混合的“五点法”取样原则；
步骤二.从待测样品瓶中移取待测水体至锥形底的离心管中，随后加入净化萃取包，净化萃取包的原料按质量份配比如下：丙基乙二胺10 份、十八烷基硅烷20 份、石墨化碳黑20 份，待测水体和净化萃取包的比值为20 mL：50g，丙基乙二胺的粒径为40-70 µm，十八烷基硅烷的粒径为40-70 µm，石墨化碳黑的粒径为120-150目；
步骤三. 涡旋，混匀，随后离心，取上清液体，并转移至锥形底的离心管中；
步骤四. 加入四氯乙烯，超声波浴5分钟，随后10619 g下离心5分钟，四氯乙烯与待测水体的比值为10 µL：20 mL；
步骤五. 用色谱进样针从离心管底部准确吸取2 µL，直接进样。

Claims (4)

1.一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，其特征在于，所述土臭味物质为土臭素和2-甲基异莰醇，步骤如下：
步骤一.对待测水产养殖池塘进行水体的采集，然后用水相、孔径为0.45 µm滤膜过滤，置于待测样品瓶中4℃ - 7℃避光保存不超过一周，待测样品瓶为1L体积的广口玻璃瓶，取样时采用四角和中心均等取样混合的“五点法”取样原则；
步骤二.从待测样品瓶中移取待测水体至锥形底的离心管中，随后加入净化萃取包，净化萃取包的原料按质量份配比如下：丙基乙二胺10 -15 份、十八烷基硅烷15 - 20 份、石墨化碳黑15 - 20 份，待测水体和净化萃取包的比值为（15 - 20 mL）：（45-50g），丙基乙二胺的粒径为40-70 µm，十八烷基硅烷的粒径为40-70 µm，石墨化碳黑的粒径为120-150目；
步骤三. 涡旋，混匀，随后离心，取上清液体，并转移至锥形底的离心管中；
步骤四. 加入四氯乙烯，超声波浴，随后离心；
步骤五. 用色谱进样针从离心管底部准确吸取，直接进样。
2.根据权利要求1所述的一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，其特征在于，所述步骤三中涡旋，混匀2-4分钟，随后在10619 g下离心5-8分钟，取上清液体12-18 mL，并转移至锥形底的离心管中。
3.根据权利要求1所述的一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，其特征在于，所述步骤四中加入四氯乙烯，超声波浴3-5分钟，随后10619 g下离心3-5分钟，四氯乙烯与待测水体的比值为(8 -10 µL)：(15 - 20 mL)。
4.根据权利要求1所述的一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法，其特征在于，所述步骤五中用色谱进样针从离心管底部准确吸取2 µL，直接进样。
CN202110449764.9A 2021-04-25 2021-04-25 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法 Active CN113176356B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110449764.9A CN113176356B (zh) 2021-04-25 2021-04-25 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110449764.9A CN113176356B (zh) 2021-04-25 2021-04-25 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113176356A CN113176356A (zh) 2021-07-27
CN113176356B true CN113176356B (zh) 2022-11-04

Family

ID=76925970

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110449764.9A Active CN113176356B (zh) 2021-04-25 2021-04-25 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113176356B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113960236B (zh) * 2021-10-11 2023-07-25 大连海洋大学 一种基于快速前处理技术测定鱼体中土臭素和二甲基异莰醇的方法
CN114518419A (zh) * 2022-01-21 2022-05-20 中国水产科学研究院东海水产研究所 一种淡水鱼中土腥味物质的测定方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107410105B (zh) * 2017-03-27 2020-06-05 上海海洋大学 一种降低罗非鱼异味的养殖方法
CN112014485A (zh) * 2019-05-30 2020-12-01 苏州见远检测技术有限公司 一种沉积物中土臭素和2-甲基异莰醇的测定方法
CN110672774B (zh) * 2019-11-11 2022-07-26 临沂大学 一种便于快速检测水源中嗅味物质土臭素及二甲基异冰片的方法
CN110940766A (zh) * 2019-11-28 2020-03-31 四川威尔检测技术股份有限公司 一种鱼肉中土腥味物质的测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113176356A (zh) 2021-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113176356B (zh) 一种用于水产养殖水体中土臭味物质检测的前处理方法
CN107589203B (zh) 一种利用spe-hplc同时检测汉麻中三种大麻酚类化合物的方法
CN101598708B (zh) 一种水果、蔬菜中农药多残留快速分析方法
CN107219313B (zh) 一种基于分子印迹固相萃取-气/质谱联用技术的检测食用油中24种多环芳烃的方法
CN104807688B (zh) 一种萃取富集大体积环境水样中微量多环芳烃的方法
CN114137140A (zh) 反相hplc-icp-ms法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法
CN113504322A (zh) 一种塑料添加剂多组分高通量分析方法
Pyrzynska et al. On-line sorption-based systems for determination of cadmium with atomic spectrometry detectors
CN106868622B (zh) 可用于检测四环素的纳米纤维及其制备和应用
CN113176355B (zh) 一种用于水产品中土臭味物质检测的前处理方法
CN109265494B (zh) 从滇山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法
CN116148401B (zh) 一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法
CN109884199B (zh) 一种蜂蜜中黄酮类成分的含量测定方法
CN114460207B (zh) 一种麻牛膝掺伪川牛膝药材及饮片的鉴别方法
CN107941979B (zh) 一种水产加工品中胆固醇氧化物含量检测方法
CN103962114B (zh) 导电聚合物涂层硅胶的制备方法及其在固相萃取中的应用
CN109142571B (zh) 一种测定蒽醌类成分含量的方法
CN114403328A (zh) 一种枳椇子和葛根制备的解酒饮料
CN112924569B (zh) 一种胆南星定量指纹图谱质量监测方法
CN108760956B (zh) 一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理装置及含量测定方法
CN111346195A (zh) 一种草果总黄酮的制备方法
CN114414713B (zh) 一种基于响应面法优化的茶叶中主要PAEs提取和检测方法
CN109540896B (zh) 一种对肝损伤有保护功能中药胶囊的质量控制方法
CN112080318A (zh) 一种原油中饱和烃的快速分离及快速检测方法
CN113640401B (zh) 一种土壤中马兜铃酸的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant