CN113142595A - 具有改善的乳液稳定性的组合物和营养产品 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有改善的乳液稳定性的组合物和营养产品，并提供了制备蛋白质组合物的方法，所述方法包括使用磷脂酶对乳卵磷脂进行酶改性。然后将所述蛋白质组合物包含到营养产品中，以提高最终营养产品的乳液品质和热稳定性。

Description

具有改善的乳液稳定性的组合物和营养产品
本申请为2014年6月27日提交的申请号为PCT/EP2014/063781、发明名称为“具有改善的乳液稳定性的组合物和营养产品”的国际申请的分案申请，该国际申请于2015年12月23日进入中国国家阶段，申请号为 201480035756.8。
技术领域
本发明涉及营养组合物领域，具体地讲，涉及含有水解蛋白质的蛋白质组合物及其制备方法。
在实施方案中，本发明涉及制备蛋白质组合物的方法，所述方法包括使用磷脂酶对乳卵磷脂进行酶改性。然后将该蛋白质组合物包含到营养产品中，以提高最终营养产品的乳液品质和热稳定性。本发明还涉及通过该方法能够获得的蛋白质组合物、该蛋白质组合物在制备营养产品中的用途、含有该蛋白质组合物的营养产品的制备方法，以及能够通过本发明的方法获得的营养产品。
背景技术
由于多种原因，含有水解蛋白质的营养产品是人们所期望的。蛋白质的水解可降低免疫原性，并用于例如低变应原性的营养产品中。低变应原性的(H.A.)意味着产品引发过敏反应的风险降低。近日，美国食品药品管理局(FDA)得出结论，认为目前的科学证据适于考虑有关100％基于乳清的水解配方喂养可降低特应性皮炎风险的健康达标声明(qualified health claim)。
另外，水解蛋白质更易于吸收，因而适合在针对吸收不良患者的营养物质中使用。这些含有水解蛋白质的组合物在为蛋白质需求升高的吸收不良患者提供营养方面尤其有用。这些组合物的例子在US5549905 (“Enternal composition for pediatric patients(针对儿童患者的肠内组合物)”)或US5661123(“Enteral composition for malabsorbingpatients(针对吸收不良患者的肠内组合物)”)中有所描述。
面临代谢应激和代谢损伤问题的患者对营养物质和能量的需求明显更高。严重损伤、创伤和某些疾病状态与人体营养物质储存的损失密切相关。非必需营养物质和人体通常在供应充足时可以合成的物质可能受到限制。另外，即使没有直接伤害到肠胃系统，肠道对营养物质的吸收也可能受损。
遭受营养物质损失的患者需要充足的营养支持。缺乏足够的营养支持可导致营养不良相关的并发症，例如长期负氮平衡以及体蛋白质和内脏蛋白质水平耗尽。因此，营养支持的目标是维持体重、提供足够量的氮和能量以帮助康复、满足以应激水平为特征的代谢需求以及支持免疫功能。
营养支持的传统形式是将全蛋白液施用于患者，以弥补蛋白质缺乏。然而，一些需要营养支持的患者吸收能力受损，因而无法耐受全蛋白液喂养。许多疾病或其后果由于消化或吸收受损，可导致吸收不良。比如，患有各种类型炎性肠病的患者通常不能耐受全蛋白喂养。因此，人们开发了半要素(semi-elemental)蛋白膳和要素蛋白膳来治疗这类吸收受损患者。
然而，除传统的炎性肠病患者外，半要素蛋白膳和要素蛋白膳目前正用于其他患者的治疗。应用这些膳食的具体条件包括，例如，接受早期过渡喂养的全肠胃外营养治疗型患者、氮需求增加但仍需要要素膳的急性分解代谢性疾病患者，以及不能耐受全蛋白液管饲的危重患者。
除此之外，许多正在接受要素膳治疗的患者也需要更高的蛋白质水平。例如，正经受与蛋白流失性肠病相关的蛋白质大量流失的克罗恩氏病患者需要更多的蛋白质。同样，正遭受低蛋白血症造成的腹泻、伴随压力性溃疡的慢性腹泻以及HIV/AIDS相关的吸收不良和腹泻的患者需要增加的蛋白质，以确保足够的营养支持。
这些蛋白质需求增加的吸收不良患者需要氮水平提高的要素膳，以增强营养物质吸收、补充蛋白质储存、实现氮平衡以及促进合成代谢。虽然目前用于尝试治疗这些患者和/或为这些患者提供营养的要素膳和半要素膳有很多种，但是本发明的发明人认为这些患者的需求并未得到充分满足。
另一应用可为如WO 2007/080149中描述的应激患者的治疗。
然而，将包含脂肪和水解蛋白质两者的组合物提供为水性组合物是有问题的。完整蛋白质是良好的乳化剂，然而蛋白质即使只是在部分水解后，其乳化特性也会大大降低，从而难以得到相对稳定的乳液，特别是针对液体配方而言。因此，产品的稳定乳化，特别是那些存在的蛋白质的全部或部分呈水解蛋白质形式的产品的稳定乳化是有问题的。
向营养产品中添加人造乳化剂在本领域中是已知的。这类乳化剂的例子包括单/双乙酰酒石酸单/双甘油酯、柠檬酸单甘油酯、失水山梨醇脂肪酸酯、聚乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、脂肪酸蔗糖酯、乳酸单甘油酯、乙酸单甘油酯、脂肪酸聚甘油酯、脂肪酸丙二醇酯以及硬脂酰乳酸钠或硬脂酰乳酸钙。
然而，消费者对于人造乳化剂的使用感知是负面的，因此尤其期望在用于婴儿和/或健康支持的组合物中避免使用它们。此外，人造乳化剂的应用受到国家监管机构的大力限制。
向含有水解蛋白质的产品中添加天然乳化剂也是已知的。这类乳化剂的例子包括蛋黄和来自大豆的乳化剂。然而，这类乳化剂会将变应原添加到产品中，还会添加到制造系统中，从而需要另外的清洗步骤。因此要排除食物产品中的过敏原，特别是在用于婴儿和/或健康支持的营养产品中。
因此，需要一种具有改善的乳液品质和稳定性，并且能够使用快速可靠的方法来制造的营养产品。
发明内容
本发明至少解决了上面提出的问题。
因此，本发明涉及制备含有水解蛋白质的蛋白质组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供配料混合物，所述配料混合物包含至少一种蛋白质和乳卵磷脂；
b)添加至少一种磷脂酶并且进行乳卵磷脂的转化；
c)进行所述蛋白质的水解。
在另一方面，本发明涉及含有水解蛋白质的蛋白质组合物，所述蛋白质组合物能够根据本发明的上述方法获得，或者根据本发明的上述方法获得。
在另一方面，本发明涉及制备营养产品的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供根据本发明所述的含有水解蛋白质的蛋白质组合物，以及
-添加一种或多种营养物质。
在另一方面，本发明涉及能够通过本发明的方法获得或者通过本发明的方法获得的营养产品。
在另一方面，本发明涉及根据本发明所述的蛋白质组合物在制备营养产品中的用途。
定义
在进一步详细讨论本发明之前，首先定义下列术语和惯例。
在本发明中提及的百分比为重量/重量百分比，除非另行指出。
在“X和/或Y”语境中使用的术语“和/或”应解释为“X”或“Y”，或者“X 和Y”。
本文所用的数值范围旨在包括该范围内包含的每个数值和数值子集，无论是否具体公开。另外，这些数值范围应理解为对涉及该范围内任何数值或数值子集的权利要求提供支持。例如，从1到10的公开应理解为支持从1到8、从3到7、从4到9、从3.6到4.6、从3.5到9.9等的范围。
本发明提及的所有单数特征或限定应该包括对应的复数特征或限定，反之亦然，除非提及这些内容的语境中另外指明或明确暗示与此相反。
除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语的含义与本领域的技术人员通常所理解的含义相同。
术语“脂肪”是指一种或多种三甘油酯，与其熔化温度无关。术语“脂肪”既包括25℃下液态形式的三甘油酯，也包括25℃下固态或半固态形式的三甘油酯。
术语“乳液”在本文中定义为两种或多种液体的混合物，其中一种以显微尺寸或超显微尺寸的液滴形式存在，分布于整个其他组分中。乳液形成的前提条件是混合的液体不具有(或具有非常有限的)互溶性。
“水包油乳液”是指其中油或脂肪的液滴分布于整个水或含水液体中的乳液。
术语“乳液分层(creaming)”或“乳液向上分层(creaming up)”是指以下现象：其中存在较大的脂肪颗粒或脂肪颗粒聚集体并且导致脂肪乳液相浓集于液体产品的顶部。
术语“稳定乳液”是指其中脂肪乳化相的分离受到强力抑制的乳液。这一质量标准涉及避免看得见的脂肪分离，以及提供具有完整营养品质和可消化性的均匀配方。
术语“水解度”意为游离α-氨基氮形式的氮与总氮相比的百分数。这是蛋白质被水解的程度的一种量度。(J Agric Food Chem 1979 27(6),pp 1256-1262(《农业与食品化学杂志》，1979年，第27卷，第6期，第1256-1262 页))
术语“均化程度”是通过比较离心分离(1600×g 15min，取样品中间部分)前后组合物中的脂肪浓度来测量，以百分比表示。该方法用于预测产品储存过程中脂肪乳化相的分离(称为“乳液向上分层”)。
术语“低变应原性的”(H.A.)是指具有引发过敏反应风险较低的产品。
术语“磷脂酶”是指将磷脂水解为脂肪酸和其他亲脂性物质的酶。术语“磷脂酶(lecitase)”和“卵磷脂酶(lecitinase)”是同义词，并且可与“磷脂酶 (phospholipase)”互换使用。
具体实施方式
本发明涉及制备蛋白质组合物的方法，所述方法包括使用至少一种磷脂酶对乳卵磷脂进行酶转化。然后将该蛋白质组合物包含到营养产品中，以提高最终营养产品的乳液品质和热稳定性。
发明人意外发现，使用磷脂酶处理乳卵磷脂得到改善的乳液，即使在含有水解蛋白质的组合物中也是如此。虽无意于受理论束缚，但据信磷脂酶处理使得乳卵磷脂转化为例如游离脂肪酸和/或溶血卵磷脂等的化合物，从而起到稳定乳液的作用。
令人意外的是，浓度非常低的已转化乳卵磷脂和使用的磷脂酶导致了乳液品质和稳定性得到显著改善。
因此，在一个方面，本发明涉及制备含有水解蛋白质的蛋白质组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供配料混合物，所述配料混合物包含至少一种蛋白质和乳卵磷脂；
b)添加至少一种磷脂酶并且进行乳卵磷脂的转化；以及
c)进行所述蛋白质的水解。
在另一方面，本发明涉及能够根据该方法获得或根据该方法获得的蛋白质组合物。
蛋白质水解
蛋白质水解可在乳卵磷脂转化之前进行、与乳卵磷脂转化同时进行或者在乳卵磷脂转化之后进行。在一个实施方案中，蛋白质水解可在选自以下阶段的至少一个阶段进行：加入至少一种磷脂酶之前、加入至少一种磷脂酶的同时，或者加入至少一种磷脂酶之后。在一些实施方案中，进行不止一个蛋白质水解步骤。在本发明的方法的一个优选实施方案中，磷脂酶步骤与蛋白质水解步骤同时进行。
优选地，蛋白质水解通过酶法来进行。可施加任何蛋白水解酶或酶混合物，例如来源于动物、植物或微生物的蛋白酶。在一个特别优选的实施方案中，使用胰蛋白酶、胰蛋白酶样内肽酶或含胰蛋白酶的级分来水解蛋白质。胰蛋白酶、胰蛋白酶样内肽酶或含胰蛋白酶的制剂可来源于植物、动物胰腺或来自微生物发酵。使用的微生物可(例如)是基因改造的微生物。胰蛋白酶制剂通常包含不同比例的酶混合物，例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白、羧肽酶、淀粉酶、脂肪酶和磷脂酶。使用基因改造的微生物的蛋白水解制剂的应用例子在WO2012/042013中有所描述。
胰蛋白酶或胰蛋白酶样内肽酶可与一种或多种其他蛋白酶结合提供。
因此，蛋白水解制剂可包含例如由任何微生物制得的胰蛋白酶样内肽酶和/或胰凝乳蛋白酶样内肽酶。
在一个实施方案中，胰蛋白酶样内肽酶来自微生物，所述微生物选自镰刀菌(Fusarium)，优选地尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，和/或选自库茨涅尔氏菌属(Kutzneria)，优选地白色库茨涅尔氏菌(Kutzneria albida)；胰凝乳蛋白酶样内肽酶来自拟诺卡氏菌(Nocardiopsis)，优选地Nocardiopsis Sp.EMBL CDS CAI94179，或来自绿僵菌(Metarhizium)，优选地金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)，和/或来自Brachysporiella，优选地 Brachysporiella gayana。
在另外的实施方案中，根据本发明所述的方法中的蛋白质水解使用胰蛋白酶样内肽酶和胰凝乳蛋白酶样内肽酶的混合物来进行，其中所述胰蛋白酶样内肽酶来自尖孢镰刀菌或白色库茨涅尔氏菌，所述胰凝乳蛋白酶样内肽酶来自Nocardiopsis Sp.或金龟子绿僵菌。
乳卵磷脂的转化与蛋白质水解同时进行使流程合理化。
制备含有水解蛋白质的蛋白质组合物的方法的其他实施方案包括如下方法：其中蛋白质水解在添加至少一种磷脂酶之前进行，和/或其中蛋白质水解在添加至少一种磷脂酶之后进行。
蛋白质水解产物在要用于制备(例如)低变应原性的营养产品例如低变应原性的婴儿配方产品的蛋白质组合物中是有用的。另外，由于水解蛋白质更易于消化和吸收，因此期望在设计用于支持具有吸收障碍的个体健康的营养产品中包含蛋白质水解产物，所述吸收障碍是由于与如胰腺或其他蛋白酶产生腺体之功能不足相关的肠道病症导致的。又例如，面临代谢应激和代谢损伤问题的患者对营养物质和能量增加有显著需求。
然而，本发明还涉及方法、组合物和营养产品，其中所有或大部分蛋白质是完整蛋白质。据设想，所述磷脂酶处理和乳卵磷脂转化将支持和/ 或改善这些最终营养产品的乳液稳定性。因此，在该实施方案中，所述方法包括提供含乳卵磷脂的配料和提供至少一种磷脂酶的步骤。这样形成的组合物可用于制备具有改善的乳液稳定性的营养产品。
蛋白质可来自任何来源或来源的组合。例子包括植物蛋白，例如大豆、豌豆、稻中的一种或多种，和/或动物蛋白，例如来自乳品，如乳清和/或奶。在一个优选的实施方案中，所述蛋白质为例如选自酪蛋白和乳清蛋白(例如β-乳球蛋白和α-乳清蛋白)的一种或多种乳蛋白。在一个特别优选的实施方案中，所述蛋白质以乳清的形式提供，所述乳清可以是例如乳清蛋白浓缩物(WPC)或乳清蛋白级分(WPF)。WPC可定义为通常使用膜过滤法制备的乳清蛋白富集产品，而乳清蛋白级分更多地涉及色谱分离富集产品或沉淀富集蛋白质。乳清还可以液态乳清或干燥形式提供。
本发明的一个实施方案涉及一种方法，所述方法包括以下步骤：将乳卵磷脂添加到含有蛋白质水解产物的营养组合物中或添加到蛋白质水解产物中；添加至少一种磷脂酶，使得乳卵磷脂被转化，并且例如脂肪酸和溶血卵磷脂从乳卵磷脂中释放出来，从而有助于最终营养产品的乳液稳定性。
卵磷脂
卵磷脂是一个用于统指磷脂的术语。可存在于卵磷脂中的磷脂的例子包括磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰-L-丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)和鞘磷脂(SP)。术语卵磷脂和磷脂在本文中可互换使用。
卵磷脂存在于植物和动物中，并且卵磷脂的组成各不相同。在下表1 中，对来自大豆、鸡蛋黄和牛乳的卵磷脂进行了比较。很明显，卵磷脂中存在哪些磷脂，以及这些磷脂的相对存在量都有区别。
与其他卵磷脂相比，乳卵磷脂在组成方面有所不同，因为其包含大量浓度类似的PE、PC、PS和SP。相比之下，蛋卵磷脂主要包含PC，而来自大豆的卵磷脂缺乏SP并且包含浓度较高的PI和PA。
因此，乳卵磷脂的结构组成与蛋卵磷脂和大豆卵磷脂的结构组成不同。由于这个原因，来自不同来源的卵磷脂有不同的应用。
继而，磷脂酶作用于乳卵磷脂和作用于来自例如大豆或蛋的卵磷脂而生成的游离脂肪酸和溶血卵磷脂不同。
因此，不同来源的卵磷脂或其级分可提供不同功能。最佳浓度范围根据卵磷脂类型和应用的不同而不同。
令人意外地，与添加了相对较多量的(如)大豆卵磷脂相比，少量磷脂酶处理的内源乳卵磷脂实现了更好的乳液稳定性。
表1
Figure RE-GDA0003089288890000091
PI＝磷脂酰肌醇；PA＝磷脂酸；；PS＝磷脂酰-L-丝氨酸PE＝磷脂酰乙醇胺； PC＝磷脂酰胆碱；LPE＝溶血磷脂酰乙醇胺；LPC＝溶血磷脂酰胆碱；SP＝鞘磷脂。其他＝神经酰胺(GluCer、LacCer)
表1中的百分比是基于在最终液体配方产品中测得的水平。液体配方产品中应用的大豆卵磷脂的浓度可最多至0.5w/w％。这表示每100g配方中含约210mg磷脂。每100g基于WPC的配方通常仅含有约34mg磷脂。
在本发明的一个实施方案中，每100g配料混合物中存在的乳卵磷脂的量可在5mg至500mg的范围内，例如每100g中含10至100mg，优选地每100g配料混合物中含20至100mg乳卵磷脂。一般来讲，蛋白质水解的程度越高，所需乳卵磷脂的量越高。
表2
Figure RE-GDA0003089288890000101
LPC＝溶血磷脂酰胆碱；LPE＝溶血磷脂酰乙醇胺。
表2描述未添加大豆卵磷脂或添加大豆卵磷脂的情况下，根据本发明所述的营养产品中获得的均化程度。令人意外的是，据发现，大豆卵磷脂的添加未能改善乳液品质。
因此，本发明的一个实施方案涉及根据本发明的不含大豆卵磷脂的营养产品。在本发明另外的实施方案中，唯一存在的乳化剂是转化的乳卵磷脂。
在本申请的情况下，术语“转化的乳卵磷脂”是指磷脂酶作用于乳卵磷脂的产物，包括游离脂肪酸、溶血磷脂、甘油二酯、磷脂酰化合物、磷酸甘油酯和剩余部分(例如胆碱)。
在该方法的一个优选实施方案中，在根据本发明的方法中提供的乳卵磷脂是内源乳卵磷脂。术语内源乳卵磷脂意指该乳卵磷脂天然存在于配料混合物的配料中，例如乳清蛋白浓缩物和/或例如奶、乳清、黄油、奶酪、奶油和酪乳等乳制品或它们的组合中。
使用内源乳卵磷脂不再需要添加外源乳卵磷脂或者来自其他来源的真正外源卵磷脂(例如大豆乳卵磷脂等)。这再一次避免了将潜在过敏原引入蛋白质水解产物和最终的营养产品中。此外，该实施方案可使用与之前所用相同的基本生产线来实施，仅需少量改变。
乳清蛋白浓缩物是可提供内源乳卵磷脂的一种配料。
这种WPC的一个例子是来自丹麦阿拉食品公司(Arla Foods(DK))的
Figure RE-GDA0003089288890000111
DI-87。类似产品还可得自例如Armor(法国)、Davisco(美国)、DMV(荷兰)、Glanbia(爱尔兰)、Kerry(爱尔兰)、Hilmar (美国)、Fonterra(新西兰)。通常卵磷脂浓度范围为每100g约0.3g 至2g，蛋白质浓度范围为25％至90％。
有利地是，乳清蛋白浓缩物中天然存在的乳卵磷脂可保持稳定 (valorized)，无须添加非乳物质。
因此，一个实施方案涉及根据本发明的方法，其中乳卵磷脂包含在乳清蛋白浓缩物中，就是说，提供例如蛋白质等配料(例如提供乳清(如以 WPC的形式提供)还提供乳卵磷脂。
磷脂酶
本发明的发明人意外发现，向含有乳卵磷脂的组合物中添加磷脂酶将导致乳卵磷脂的转化以及游离脂肪酸和/或溶血磷脂等转化产物的释放，并且这会改善包含它们的最终营养产品的乳液品质。
至少一种磷脂酶作用于乳卵磷脂会生成游离脂肪酸和/或溶血卵磷脂。根据本发明所述的磷脂酶可为选自磷脂酶A2(PLA2)、磷脂酶A1(PLA1)、磷脂酶B(PLB)、磷脂酶C(PLC)和/或磷脂酶D(PLD)的一种或多种。
磷脂酶PLA1和PLA2会从磷脂中释放一个脂肪酸分子，PLA1在甘油的SN1位置处，而PLA2在SN2位置处。磷脂酶B同时表现出PLA1 和PLA2活性并且使SN-1和SN-2酰基链裂解。另外还有其他两种磷脂酶类型，具体地讲是磷脂酶C(PLC)和磷脂酶D(PLD)。磷脂酶C将卵磷脂转化为甘油二酯和磷脂酰化合物。磷脂酶D将卵磷脂转化为磷酸甘油酯(phosphoglycerolipids)和剩余部分(如胆碱)。PLA1、PLA2、PLB、 PLC、PLD中任意一种或它们的组合作用于乳卵磷脂的产物可根据本发明用作乳化剂。因此，在另一方面，本发明涉及将PLA1、PLA2、PLB、PLC、 PLD中任意一种或它们的组合作用于乳卵磷脂的产物用作乳化剂。
在一个实施方案中，在根据本发明的方法中添加的所述至少一种磷脂酶为磷脂酶A1和/或磷脂酶A2。
在一个优选的实施方案中，本发明的组合物包含磷脂酶PLA2。PLA2 通常是优选的，因为在SN2位置处释放脂肪酸在SN1位置生成更明显的极性头部基团和端部疏水部分，从而产生更有效的乳化剂。
表3
Figure RE-GDA0003089288890000121
PI＝磷脂酰肌醇；PA＝磷脂酸；PS＝磷脂酰-L-丝氨酸；PE＝磷脂酰乙醇胺； PC＝磷脂酰胆碱；LPE＝溶血磷脂酰乙醇胺；LPC＝溶血磷脂酰胆碱；SP＝鞘磷脂。其他＝神经酰胺(GluCer、LacCer)。表3中的百分比是基于水解产物中测量水平的％w/w。
磷脂酶A1和磷脂酶A2的使用允许生成多种卵磷脂，例如卵磷脂、sn-1 位置上有脂肪酸的溶血卵磷脂、sn-2位置上有脂肪酸的溶血卵磷脂以及非水解乳鞘磷脂，从而提供良好的乳液稳定性。
PLA1可以商标名PhospholipaseTMUltra得自诺维信公司(Novozymes)。PLA2可商购获得，例如以商标名
Figure RE-GDA0003089288890000131
A2得自荷兰皇家帝斯曼食品配料公司(DSM FoodSpecialties B.V.,Netherlands)。
磷脂酶在每100g含有水解蛋白质的蛋白质组合物中的存在量可在1μg 至10mg的范围内，例如10μg至1mg，例如10μg至5mg，例如20μg至 1mg，例如500μg至1mg；优选地每100g蛋白质组合物含0.01mg至0.1mg 磷脂酶。
所述蛋白质组合物可含1％至20％范围内的蛋白质，其水解度在8％至45％范围内。每100g蛋白质组合物的卵磷脂通常在5mg至200mg范围内。
本发明的蛋白质组合物中，针对每10mg至100mg卵磷脂，可含有例如10μg至10mg磷脂酶；或者例如，针对蛋白质组合物中存在的每约10mg 至100mg卵磷脂，含有0.1个至100个单位的磷脂酶。
通常，磷脂酶处理可在30℃至80℃的温度下进行，例如在35℃至75℃、 40℃至65℃、40℃至60℃的温度下进行，优选地在40℃至60℃的温度下进行。
磷脂酶处理可在5至9.5的pH值下进行，例如在5至9、5.5至8.5、 5.5至8，或6至8的pH值下进行。
磷脂酶处理可从数分钟至若干小时，例如3分钟至10小时，通常在 30分钟至6小时之间。
如上所述，乳液的稳定性取决于蛋白质的存在量和蛋白质的水解度两者。因此，减少蛋白质的量和/或增加蛋白质水解水平将需要增加磷脂转化水平，以确保最终营养产品中的乳液稳定性。磷脂转化水平可通过选择卵磷脂的量、磷脂酶的量和/或反应时间以及其他参数而进行调节。这种选择在本领域的技术范围内。
磷脂与脂肪的比是乳液稳定性的一个重要因素。
通常卵磷脂和脂肪的量在每100g 10mg至200mg卵磷脂对应每100g 0.03g至6g脂肪的范围内。这对应于卵磷脂与脂质的比为0.2:99.8至67:33。
可通过使磷脂酶失活来终止磷脂酶处理。可通过例如磷脂酶的蛋白水解、热失活、添加抑制剂或pH失活来实现失活。热失活的例子包括UHT 处理等。
根据磷脂酶的类型和使用的条件，可通过蛋白水解活性(proteolytic activity)对磷脂酶失活。在优选这种条件的情况下，磷脂酶处理需要在蛋白水解处理之前或蛋白酶失活之后进行。
由此，本发明的发明人意外发现，向含有乳卵磷脂的组合物中添加少量磷脂酶将得到改善的组合物的乳化，而无需添加其他乳化剂。
因此，本发明的方法的一个优选实施方案包括以下步骤：
-提供蛋白质和乳卵磷脂，例如通过提供含有乳卵磷脂的乳清蛋白浓缩物来提供蛋白质和乳卵磷脂
-添加至少一种磷脂酶，例如磷脂酶A2，以及
-进行所述蛋白质的水解并且同时进行磷脂酶处理
例如，WPC重组至5w/w％至30w/w％的干物质浓度，pH调节至7 至7.5的范围，温度40℃至55℃，并使用蛋白水解酶结合磷脂酶处理1至 6小时。
制备蛋白质组合物的方法
因此，在一些实施方案中，通过提供乳清(例如液态乳清)来提供蛋白质和乳卵磷脂。例如液态乳清原则上可由任何距离足够近以允许运输液态乳清的WPC制造商提供，因为液态乳清为微生物敏感原料。或者，还可使用乳清粉，例如乳清蛋白浓缩物或乳清蛋白级份。在这种情况下，乳清粉溶于水中。例如，可将乳清粉溶于加热至例如范围从40℃至80℃的温度的水中，如从50℃至70℃、从55℃至60℃、约60℃的水中。
可将溶液的pH调节至合适的pH。可根据蛋白质水解中将要使用的一种或多种酶的pH需求来调节pH。例如可通过添加碱溶液来调节pH。
优选地，使用胰蛋白酶进行蛋白质的水解。胰蛋白酶可为例如商用胰蛋白酶制剂，或者例如可存在于商用微生物酶制剂中。胰蛋白酶可作为蛋白水解酶混合物中的一种酶存在。
使用胰蛋白酶时，pH范围可为从7.0至8.0，例如从7.4至7.8，例如为7.4、7.6、7.7或7.8。
用于进行蛋白质水解的酶的量可根据蛋白质底物的量来选择。
基于实验数据来选择胰蛋白酶的用量。蛋白酶的量通常取决于工艺条件，例如温度、pH、酶活性、蛋白质的三维结构(去折叠)以及期望的蛋白水解度。实现蛋白水解所需的胰蛋白酶或酶制剂的量的选择在本领域的技术范围内。
水解可通过使蛋白质失活来终止，例如热处理。在一个例子中，将混合物加热到至少80℃，例如至少90℃，例如93℃、94℃、95℃、96℃或 97℃。然后可将混合物冷却。水解处理可进行例如至少30分钟，如在30 分钟至8小时的范围内，如约3、4、5、6、7或8小时。
蛋白质水解可分两个阶段进行，例如包括第一步水解和第二步水解。
本发明的方法还涉及添加一种或多种磷脂酶并将乳卵磷脂转化为游离脂肪酸和溶血卵磷脂。
乳卵磷脂的转化需要磷脂酶。一种或多种磷脂酶可存在于胰蛋白酶制剂中，例如固有的胰磷脂酶A2。作为另外一种选择，它可单独添加，或者是这些磷脂酶的组合。
可在方法中任何合适的时刻添加磷脂酶，例如在第一水解步骤或第二水解步骤中添加。任选地，可在该方法中后面的步骤添加磷脂酶；但是应该在使酶失活的最后步骤之前添加。
需要对应于磷脂酶和蛋白酶的最佳范围对工艺条件进行限定。
在一些实施方案中，磷脂酶添加量的范围为从0.1mg至30mg/kg WPC，例如从1至20mg/kg，例如1至18、1至16、1至14、1至13、1 至12、1至10mg/kg WPC；或者例如5至25、5至24、5至22、5至20、 5至15、5至12或5至10mg/kg WPC。
在其他实施方案中，磷脂酶添加量可对应于从10000至1000000U/kg WPC，例如从50000至500000；例如从50000至250000，例如从50000 至225000、50000至200000、50000至175000；或者例如75000至500000、 75000至300000、75000至250000、80000至175000、90000至175000、 90000至150000、90000至130000、100000至130000、110000至125000U/kg WPC、120000至125000U/kg WPC，或者例如约120000U/kg WPC。
能够通过上述方法获得的蛋白质组合物
如上所述，在另一方面，本发明涉及能够根据本发明的上述方法获得的包含水解蛋白质的蛋白质组合物。
由此获得的蛋白质组合物可至少包含源自乳清的肽、氨基酸；乳卵磷脂的磷脂酶转化产物，例如溶血卵磷脂、游离脂肪酸；以及源自乳卵磷脂的任何剩余天然磷脂。
可将该蛋白质组合物视为制备营养产品的方法的原料。
该蛋白质组合物可为液态形式。作为另外一种选择，该蛋白质组合物可为干燥形式，因此可能需要重组。
在一个实施方案中，将一种或多种油和/或脂添加至能够通过该方法获得的蛋白质组合物中，并干燥该组合物。如果干燥前添加了油，则含有蛋白水解物的蛋白质组合物的干燥和随后的重组是有利的。本发明的含油蛋白质组合物将导致改善的喷雾干燥特性、更好的粉末重组性并减少重组过程中的泡沫形成。
添加的油优选地为抗脂质氧化的相对稳定的油，例如中链甘油三酯油 (MCT)或高油酸向日葵油。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及根据本发明的方法，该方法包括干燥步骤，以及干燥前添加一种或多种油和/或脂质的步骤。
例如，在一个实施方案中，本发明涉及本发明的方法，该方法还包括以下步骤：
d)添加一种或多种油和/或脂质，例如中链甘油三酯油(MCT)或高油酸向日葵油，以及
e)干燥。
本发明的蛋白质组合物的用途
在另一方面，本发明涉及能够根据本发明的方法获得或者根据本发明的方法获得的蛋白质组合物在营养产品制备中的用途。
本发明还涉及能够根据本发明的方法获得或者根据本发明的方法获得的蛋白质组合物用作乳化剂和/或用于稳定乳液(例如婴幼儿配方或保健营养产品等营养产品)的用途。
制备营养产品的方法
在另一方面，本发明涉及制备营养产品的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供上述根据本发明的蛋白质组合物，
b)添加一种或多种营养物质。
所述一种或多种营养物质可选自例如以下的一种或多种：脂肪、碳水化合物、矿物质、痕量元素、微生素、益生元和益生菌。
水可单独添加，或者与一种或多种营养物质以一种或多种营养物质的水溶液或悬浮液形式一起添加。
在一个实施方案中，制备营养产品的方法还包括干燥步骤。该方法还可包括将干燥的营养产品在液体中重组，并混合以形成乳液的步骤。
制备营养产品的方法还可包括营养产品的均化和/或灭菌步骤。
均化可在添加营养物质前或后进行，或者作为另外一种选择，在添加前和添加后均进行。均化温度可例如在40-80℃之间。
还可对营养产品进行灭菌。在一个例子中，营养产品可通过超高温处理(UHT)，例如通过直接蒸汽喷射(direct steam injection)或间接加热进行灭菌。
在一个实施方案中，营养产品可被灌装并随后灭菌。灭菌可进行例如 4至12分钟。灭菌温度可为例如从118℃至124℃。
在一个实施方案中，制备营养产品的方法还可包括干燥步骤。
干燥步骤可例如通过喷雾干燥进行。根据本发明的干燥营养产品在使用前可进行重组。因此，在一个实施方案中，根据本发明的制备营养产品的方法包括将干燥的营养产品在液体中重组，并混合以形成乳液的步骤。
在另一个实施方案中，可将一种或多种油和/或脂质添加至根据本发明的营养产品中，并干燥该营养产品。如果干燥前添加了油，则本发明的营养产品的干燥和随后的重组可能是有利的。含油营养产品将导致改善的喷雾干燥特性、更好的粉末重组性并减少根据本发明的干燥的营养产品在重组过程中的泡沫形成。
添加的油可优选地为抗脂质氧化的相对稳定的油，例如中链甘油三酯油(MCT)或高油酸向日葵油。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及根据本发明的营养产品的制作方法，其中所述方法包括干燥步骤，以及干燥前添加一种或多种油和/或脂质的步骤。
例如，在一个实施方案中，本发明涉及本发明的方法，该方法还包括以下步骤：
d)添加一种或多种油和/或脂质，例如中链甘油三酯油(MCT)或高油酸向日葵油，以及
e)干燥。
能够通过该方法获得或通过该方法获得的营养产品
本发明另外的方面涉及一种营养产品，该营养产品能够根据所发明的用于制备营养产品的方法获得。
因此，在一个实施方案中，根据本发明的营养产品是干燥的组合物，例如粉末、团聚的粉末产品或片剂，其可适于在液体中重组。
在另一个实施方案中，本发明的营养产品是液体，例如乳液。乳液优选地为水包油乳液。液体可为即饮型配方，或者为在饮用之前进行稀释的浓缩物。
根据本发明的营养产品的特征还可在于其在液体状态下会形成稳定乳液。
视觉观察是表征乳液最相关的方法，另外还有显微镜法以及通过激光衍射测定粒度分布(PSD)的方法(例如Malvern或Horiba仪器)。由PSD 数据计算得到的体积加权平均D[3,2]的值可用于表征乳液稳定性。
在一个实施方案中，本发明涉及本发明的营养产品，其特征在于最终营养产品中存在的仅有的乳化剂来源于乳卵磷脂。
在一个实施方案中，本发明最终营养产品中存在的仅有的乳化剂为来源于内源乳卵磷脂经磷脂酶处理生成的脂肪酸、溶血卵磷脂、单双甘油酯和磷酸甘油酯。
在另外的实施方案中，本发明的营养产品的均化程度为至少75％，例如大于75％，例如至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％，或例如约90％。
在另一个实施方案中，本发明涉及根据本发明的营养产品，其中脂肪/ 聚集体具有的平均粒度(体积加权平均[4,3])为不大于2μm，例如不大于 1μm，例如不大0.6μm，例如低于0.6μm，例如约0.5μm，或者例如从约 0.1至0.5μm，例如从0.2至0.5μm、0.2至0.5μm、0.3至0.5μm、0.3至 0.4μm。
在另一个实施方案中，根据本发明的营养产品的卵磷脂转化率为至少 20％，例如至少24％、至少30％、至少35％、至少40％、至少50％、至少60％，至少70％、至少80％。
在优选的实施方案中，营养产品的卵磷脂转化率为至少50％，例如至少60％、至少70％或至少80％。
因此在一个实施方案中，本发明涉及营养产品，该营养产品的均化程度为至少75％，且卵磷脂转化率为至少20％。
在另外的实施方案中，根据本发明的营养产品的均化程度为至少 75％，平均粒度不超过0.6μm，卵磷脂转化率为至少20％。
本发明的营养产品中所含水解蛋白的量可在约1-8g/100g液态最终营养产品的范围内，例如在约1-5g/100g、1-4g/100g或者例如约2-4g/100g 液态最终营养产品的范围内。
本发明的营养产品可含有一定量的磷脂酶转化产物，例如至少 5mg/100g产品，例如至少8、至少10、至少12、至少16、至少18、至少 20mg/100g产品，所述产物如溶血卵磷脂。
根据本发明的营养产品可为选自婴幼儿配方、保健营养配方和营养补充配方的配方。
婴幼儿配方可以不同的方式配制，具体取决于婴幼儿所处阶段或情况的营养需求。因此，本发明的婴幼儿配方(IF)可选自早产婴儿配方、足月婴儿配方、小于胎龄儿配方、大于胎龄儿配方、出院后婴儿配方、第一阶段婴儿配方、后续配方、成长配方、学步期儿童配方和母乳强化剂配方。
本发明的含有水解蛋白质的营养产品可适合用作例如低变应原性的营养产品，如低变应原性的婴幼儿配方和/或低变应原性的保健营养配方。它们还适用于为营养吸收受损的个体提供营养支持，例如那些患有各种类型炎性肠疾病、克罗恩氏病、遭受由低蛋白血症造成的腹泻、伴随压力性溃疡的慢性腹泻以及HIV/AIDS相关的吸收不良和腹泻需要更多蛋白质的的个体，以确保足够的营养支持。
保健营养配方是指针对吸收不良患者的临床/肠道营养配方。这种配方可以是例如为肠胃受损患者膳食管理设计的全要素膳。
营养补充配方是指为了补充营养另外提供的除其他食物外的配方。
根据本发明所述的营养产品可以例如为肠道组合物或口服组合物。在一个实施方案中，该组合物可被配制为通过喂养管或类似物施用的肠道营养产品，例如口管饲喂配方。
根据本发明所述的营养产品可以例如为低过敏性婴幼儿配方或低过敏性保健营养配方。
因此，在各种实施方案中，根据本发明的营养产品可选自婴幼儿配方、学步期儿童配方、后续配方、成长配方、肠道营养产品、保健营养配方、口管饲喂配方、早产婴儿配方、母乳强化剂。
术语“液态最终营养产品”是指制备成液态形式的本发明的营养组合物，或者制备成干燥状态时，是指其重组形式。
本发明的营养产品中的水解蛋白质的水解度范围为约5-20％，例如8 -15％，例如8-10％。
在一个实施方案中，本发明的营养产品包括卵磷脂转化产物，例如来源于乳卵磷脂的溶血卵磷脂和游离脂肪酸以及未水解的鞘磷脂。
优选地，该营养产品为乳液，更优选地为水包油乳液。
因此，在一个实施方案中，本发明的营养产品至少包含水解蛋白质、脂肪和来自于乳卵磷脂的溶血卵磷脂和游离脂肪酸。
在另一实施方案中，本发明涉及根据本发明的营养产品用于预防或治疗特应性皮炎的用途。在这一方面，本发明的营养产品可被认为是医疗食品。
公开内容的结合
应当指出的是，在本发明的多个方面中的一个中描述的实施方案和特征也适用于本发明的其他方面。
本文中以不同的参数，如配料等，描述了制备根据本发明的蛋白质组合物和营养产品的方法，以及蛋白质组合物和营养产品本身。应当指出的是，除非另有明确说明，否则在根据本发明的组合物中所述的实施方案和特征，还可与在本发明的营养产品中描述的实施方案和特征相结合。
本申请所引用的所有专利和非专利参考文献均据此全文以引用方式并入。
现在将通过以下非限制性实施例对本发明进行进一步详细说明。
实施例
实施例1-通过分批水解制造的营养组合物
材料
1250USP U/mg的胰蛋白酶和10000IU/mg的磷脂酶来自诺维信公司 (Novozymes)。
液态乳清，定义为干物质为约30-35％的部分脱矿质的液态乳清蛋白浓缩物或乳清蛋白浓缩物粉末，来自美国威斯康星州巴拉布(Baraboo,WI, US)的Foremost农场。一水乳糖粉末来自Meggle公司(德国(Germany))。
方法
将16kg乳清蛋白浓缩物粉末和11kg一水乳糖粉末溶于54kg软化水(demineralized water)中，并通过添加30％w/w的KOH将pH调节至 7.4。
通过将总氮浓度乘以因子6.25计算得到蛋白质含量。基于这一计算结果，需要65g胰蛋白酶。
添加胰蛋白酶至最终浓度为0.8g/kg蛋白质水解产物。
将重组的蛋白质混合物调节至55℃，加入13g胰蛋白酶并通过添加 30％w/w的KOH保持pH为7.4至少30分钟。然后将预水解混合物在94℃加热处理5分钟并冷却至约55℃。加入针对变体B的195mg磷脂酶的一部分52g胰蛋白酶以开始第二次水解。pH保持在7.4约3小时，然后通过热失活酶来终止反应。最后，加入9kg麦芽糖糊精、13kg脂肪混合物及 1.4kg矿物质和维生素并均化。对最终混合物进行进一步的UHT处理、均化、无菌灌装或灭菌，以生产在环境温度下储存稳定的该组合物无菌液态形式，或者喷雾干燥以生产该组合物的粉末。
实施例2-测试变体的比较
使用实施例1中所述的方法生产了四个不同变体。
A.通过实施例1所述的方法生产的参考变体，使用内源磷脂酶活性相对较低的胰蛋白酶制剂。
B.通过采用每克胰蛋白酶加入3μg磷脂酶10L(胰磷脂酶A2，来自诺维信公司(Novozymes)，10000IU/ml)，相当于每克胰蛋白酶约 3mg或11单位，加至第二水解步骤来生产变体。
C.按照与A相同的方式生产的变体，但是加入1.2％高淀粉酶淀粉和 0.03％k-角叉菜胶(kappa-carrageenan)作为稳定剂。
D.按照与A相同的方式生产的变体，但是使用内源磷脂酶活性相对较高的胰蛋白酶制剂。
变体B：每克胰蛋白酶3μg的磷脂酶10L(胰磷脂酶A2，来自诺维信公司(Novozymes)，10000IU/ml)，相当于每克胰蛋白酶约3mg或30单位，被加至第二水解步骤。这对应于存在于含有约1.5g蛋白质等同物的100g 最终配方中的每40mg磷脂27μg或270毫单位。蛋白质等同物意指蛋白质类、肽类和氨基酸类。液态乳清意指部分脱矿质的液态乳清蛋白浓缩物，含有约30-35％的干物质。
相比于已知方法发现根据本发明实施方案的方法通常会导致通过 HPLC检测的溶血卵磷脂的大量增加。
通过HPLC检测的卵磷脂转化率从24％(变体A)增加到81％(变体B)。所得的均化程度从75％(变体A)增加到92％(变体B)。
分析了变体A-D的均化程度、沉降值和脂肪粒度体积加权平均[4,3]，结果示于下表4中。
均化程度通过比较离心(1600×g 15min，取样品中间部分)前后配方中的脂肪浓度来测量，以百分比表示。该值越高，产品的乳液品质/稳定性越好。该方法用于预测产品储存过程中脂肪乳液的分离(称为“乳液分层”)。
沉降值表示测定均化程度后，位于离心管底部的样品的干燥固体份数。一般来讲，理想的是该值应较低。
粒度体积加权平均[4,3]基于通过激光衍射的粒度测定。基于体积的粒度等于与给定颗粒体积相同的球体的直径。其等于2*(3*体积(颗粒)/4/pi)^(1/3)。在该产品基质中，假设主要涉及脂肪颗粒/聚集体。
一般来讲，粒度值越低，乳液稳定性越好。
表4
Figure RE-GDA0003089288890000241
卵磷脂转化率示于表5中，以未水解的卵磷脂相对于溶血卵磷脂来展示。溶血卵磷脂是指使用磷脂酶A2裂解卵磷脂的产物之一。为了得到好的乳液稳定性，内源性卵磷脂的转化应该较高。因此，未水解的卵磷脂浓度应该低，而磷脂酶转化卵磷脂的产物如溶血卵磷脂的浓度应该高。
卵磷脂转化率通过Lyso-L(溶血卵磷脂LPE&LPC)除以内源性-L (未水解的卵磷脂，除SPH以外，PI、PE、PC的总和)与Lyso-L之和的百分比来计算。
表5
mg/100g配方 A B D
LYSO-L 8 20 12
未水解的卵磷脂 25.8 4.8 18.3
总L 33.8 24.8 30.3
卵磷脂转化率 24％ 81％ 40％
未对C进行分析，因为该变体的磷脂组成预计与A的磷脂组成类似。
对变体A-D进行进一步分析。
对于可接受的乳液储存稳定性值，优选地为至少75％。
实施例3-肠道产品—通过分批水解制造的营养组合物—产品具有适度的蛋白质 水解度
针对由于疾病而无法进食任何食物或足够食物的患者，或可能食欲下降、难以吞咽，或进行了某些类型干扰饮食的手术的患者，按照本发明的方法生产了用于肠道营养或管饲的营养组合物。
使用液态乳清或者将乳清粉末溶于60℃水中以形成溶液。通过添加碱溶液将pH调节至7.4，进行水解反应。将混合物的温度调节至约55℃，并加入0.6％商用胰蛋白酶制剂(基于蛋白质底物蛋白酶量)以催化混合物中蛋白质的水解。通过添加碱溶液将pH调节至7.4进行水解反应，并维持该 pH值至少30分钟。约4小时后，水解反应结束，并对酶进行热失活。加入脂肪、均化，再加入另外的成分如矿物质、痕量元素、碳水化合物和维生素以形成最终的水解组合物。将最终混合物进行进一步的UHT处理、均化、无菌灌装和灭菌以生产该组合物的液态形式，或者喷雾干燥以生产该组合物的粉末形式。
所述磷脂酶的量可以是胰蛋白酶制剂的一部分，作为内源性胰磷脂酶 A2，或者在加入蛋白酶之前添加。任选地，可在方法中后面的步骤添加磷脂酶；但要在使酶失活的最后一步之前添加。
在该实施例中，磷脂酶是胰蛋白酶制剂的一部分，作为内源性胰磷脂酶A2。
表6-肠道营养配方的均化程度
肠道营养配方 均化程度
无磷脂酶的常规产品 49％
具有磷脂酶的试验产品 95％
表6示出了根据实施例3的肠道营养配方的均化程度。
实施例4-通过连续水解制造的营养组合物—产品具有中等至低的蛋白质水解度
按照本发明的方法生产了易于消化的营养组合物。
使用液态乳清或者将乳清粉末溶于60℃水中以形成溶液。通过添加碱溶液将pH调节至7.8，进行水解反应。将混合物的温度调节至约55℃，向产物流中连续加入约1％的商用微生物酶制剂(基于蛋白质底物的蛋白酶量)并在约50℃至约65℃保持约10分钟，同时流过保温管以水解混合物中的蛋白质。微生物酶制剂基于枯草芽孢杆菌，例如来自诺维信公司(Novozymes)的Alcalase。与胰蛋白酶的6.0AU/g相比，该酶制剂的蛋白水解活性为约2.4AU/g。
通过加热处理对酶进行热失活，终止该酶反应。加入脂肪、均化，再加入另外的成分如矿物质、痕量元素、碳水化合物和维生素以形成最终的水解组合物。将最终混合物进行进一步的UHT处理、均化、无菌灌装和灭菌以生产组合物的液态形式，或者喷雾干燥以生产组合物的粉末形式。
所述磷脂酶的量可以是酶制剂的一部分，或者在加入蛋白酶之后添加。任选地，可在方法中后面的步骤添加磷脂酶；但要在使酶失活的最后一步之前添加。
实施例5
如实施例1所述制备营养组合物，不同的是蛋白质水解使用微生物蛋白酶进行。
实施例6
如实施例3所述制备营养组合物，不同的是蛋白质水解使用胰蛋白酶样内肽酶和胰凝乳蛋白酶样内肽酶的混合物来进行，其中所述胰蛋白酶样内肽酶来自尖孢镰刀菌或白色库茨涅尔氏菌，所述胰凝乳蛋白酶样内肽酶来自Nocardiopsis sp.或金龟子绿僵菌。
实施例7
如实施例4所述制备营养组合物，不同的是蛋白质水解使用胰蛋白酶样内肽酶和胰凝乳蛋白酶样内肽酶的混合物来进行，其中所述胰蛋白酶样内肽酶来自尖孢镰刀菌或白色库茨涅尔氏菌，所述胰凝乳蛋白酶样内肽酶来自Nocardiopsis sp.或金龟子绿僵菌。

Claims (15)

1.一种制备含有水解蛋白质的蛋白质组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供配料混合物，所述配料混合物包含至少一种蛋白质和乳卵磷脂；
b)添加至少一种磷脂酶并且进行乳卵磷脂的转化；
c)进行所述蛋白质的水解。
2.根据权利要求1所述的方法，其中蛋白质水解与乳卵磷脂的转化同时进行。
3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述蛋白质是乳清蛋白浓缩物或乳清蛋白级份。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述乳卵磷脂是内源乳卵磷脂。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述至少一种磷脂酶是磷脂酶A1和/或磷脂酶A2。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括以下步骤：
d)添加油；
e)干燥。
7.一种蛋白质组合物，所述蛋白质组合物含有能够根据权利要求1至6中任一项所述的方法获得的水解蛋白质。
8.一种制备营养产品的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供根据权利要求7所述的蛋白质组合物；
b)添加一种或多种营养物质。
9.一种能够根据权利要求8所述的方法获得的营养产品。
10.根据权利要求9所述的营养产品，其特征在于存在于所述营养产品中的仅有的乳化剂源自乳卵磷脂。
11.根据权利要求9至10中任一项所述的营养产品，其中所述组合物为乳液，优选地为水包油乳液。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的营养产品，其中所述组合物为肠道组合物或口服组合物。
13.根据权利要求9至12中任一项所述的营养产品，其中所述组合物为低变应原性的营养产品，如低变应原性的婴幼儿配方或低变应原性的保健营养配方。
14.根据权利要求9至13中任一项所述的营养产品，其中卵磷脂的转化率为至少20％。
15.根据权利要求7所述的蛋白质组合物在制备营养产品中的用途。
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