CN113116970A

CN113116970A - 一种含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及制备方法

Info

Publication number: CN113116970A
Application number: CN201911413219.3A
Authority: CN
Inventors: 向双林; 刘湘粤; 李志伟; 胡翔; 黄招琴; 何漪
Original assignee: Hunan Nanhua Institute Of Biomedicine
Current assignee: Hunan Nanhua Institute Of Biomedicine
Priority date: 2019-12-31
Filing date: 2019-12-31
Publication date: 2021-07-16

Abstract

本发明提供一种用于皮肤修复的含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及其制备方法，包括以下质量百分含量的组分：黄栀子提取物0.01‑0.5%，脐带间充质干细胞活性成份提取液10‑30%，1%白蛋白，1.5%维生素E。本发明技术方案所提供的含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液，对皮肤损伤有很好的修复和缓解效果，能促进肌肤细胞再生，无过敏现象。

Description

一种含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及制备方法

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及其制备方法。

背景技术

中药黄栀子系茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis) 的干燥成熟果实，含有环烯醚萜类( 栀子苷类)、黄酮类( 栀子素灯)、有机酸酯类( 绿原酸、西红花酸类)等化学成分，是天然的植物抗生素。栀子中主要含有环烯醚萜苷类、有机酸类、栀子黄色素类等。

脐带间充质干细胞（UC-MSCs）是从脐带华通氏胶分离提取获得，具有多向分化潜能、造血支持、免疫调控和自我复制等特征。在我国脐带属于医疗废弃物，没有医学伦理的困扰、采集方便、免疫原性低、自我更新快、倍增速度稳定和增殖能力强。与脂肪、骨髓等来源相比，从脐带制备间充质干细胞用于细胞治疗和再生医学是首选。脐带间充质干细胞可能通过向损伤组织迁移，促进损伤组织修复，调节免疫反应等，其上清液也可促进损伤器官修复。

发明内容

本发明克服现有技术中的缺点，提供了一种具有抗衰老功效，能够恢复皮肤弹性的含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及其制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的。

本发明为实现上述目的，采用如下技术方案：一种用于皮肤修复后含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及其制备方法，包括以下质量百分含量的组分：黄栀子提取物0.01-0.5%，脐带干细胞活性成份提取液10-30%，0.5%-1%白蛋白，0.8%-1.5%维生素E。黄栀子具有抗菌消炎作用，可用于防治病原微生物感染，还具有调节人体免疫系统的作用。同时利用脐带间充质干细胞向多种类型细胞分化时产生的大量生长因子中多种蛋白作用于人体表皮，对防止老化和皮肤再生具有重要的功效。两者联用起着非常好的协同增效作用。

安全性试验显示，本发明所述含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液对正常皮肤、破损皮肤均未见有刺激性反应，也未见皮肤过敏性反应，表明本发明所述皮肤修复液安全无副作用。

具体实施方案

本发明所述黄栀子提取物由湖南师范大学生命科学学院提供，采用乙醇溶液提取后经大孔树脂柱层析分离所得。

为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1含脐带间充质干细胞活性成份上清液提取。

含脐带间充质干细胞活性成份上清液提取步骤如下：（1）使用医用镊子将脐带从脐带采集瓶中取出，并放入75%乙醇浸泡清洗数秒，洗去脐带表面血渍。使用手术刀切除双侧手术线结扎及淤血部分。用含1%双抗PBS对剩余组织进行充分清洗，用医用镊子轻压脐带表面，将血管中残余的血排出。（3）将清洗干净的脐带置于盛有D/F12培养基的培养皿中，小心剥离脐带上的动脉和静脉。（4）将脐带均分为长5cm段块，对每一段块沿纵向进行分离，使脐带组织管状变为片状。将片状脐带组织进行进一步的分离，抽离出华尔通胶，并将华尔通胶剪碎成1-2 mm3组织块。（5）将组织块逐一种植入含有3mL的含10％胎牛血清的D/F12培养基的培养皿中，密度30块/皿为宜，正向置于37℃，5％CO2环境中培养，每48小时补加1mL培养基，72小时后全量换液，每周换液两次，待细胞融合度达到80％进行传代。（6）用PBS冲洗培养瓶，吸弃组织块，每瓶加入胰蛋白酶，消化3-5分钟后，用血清终止消化。（7）收集终止后的消化液，1000rpm，5min离心，吸弃上清液，收获脐带间充质干细胞；（8）脐带间充质干细胞传至P3代时吸弃原培养基，PBS冲洗瓶底，加入不含酚红的无血清 DMEM/F12培养基，培养7天后，1200rpm离心5分钟得到上清液，将上清液进行2500rpm离心处理15分钟，上清液用0.1微米的滤膜过滤除菌，即得到干细胞培养上清液。上清液中含有VEGF、PDGF、HGF、bFGF等多种细胞生长因子。

实施例2

含有黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液的制备原料组成：黄栀子提取物0.5%，脐带干细胞活性成份提取液10%，1%白蛋白，1.5%维生素E。将上述混合物加入适量无菌水，加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

实施例3

含有黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液的制备原料组成：黄栀子提取物0.01%，脐带干细胞活性成份提取液30%，1%白蛋白，1.5%维生素E。将上述混合物加入适量无菌水，加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

实施例4

含有黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液的制备原料组成：黄栀子提取物0.25%，脐带干细胞活性成份提取液20%，1%白蛋白，1.5%维生素E。将上述混合物加入适量无菌水，加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

实施例5

通过实验来评价上述实施例所制含有黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液的皮肤修复效果，选取30名有皮肤创口的人，10名一组，把她们的伤口等分成对照组与使用组，对照部分不抹修复液，使用组每组分别使用实施例2、3、4配方抹修复液涂伤口，每天两次，发现皮肤愈合效果非常明显。

结果表明，含有本发明的黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液可有效缓解皮肤炎症，促进皮肤细胞修复再生，没有过敏现象和副作用。

Claims

1.一种用于修复皮肤创伤的皮肤修复剂，其特征在于，按体积比包括：黄栀子提取物0.01-0.5%，脐带干细胞活性成份提取液10-30%，0.5%-1%白蛋白，0.8%-1.5%维生素E。

2.根据权利要求1所述一种用于修复皮肤创伤的皮肤修复剂，其特征在于，所述的脐带干细胞活性成份由培养脐带间充质干细胞制备获得。