CN115025035A - 一种冻干粉、制备方法和面膜 - Google Patents
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Abstract
本申请提出了一种冻干粉、制备方法和面膜,涉及护肤品技术领域。一种冻干粉,由以下重量份的原料制备而成:水、甘露糖醇、寡肽‑1、动物脐带提取物、超氧化物歧化酶、香叶天竺葵提取物、苦参根提取物、金黄洋甘菊、马齿苋提取物、肌肽、库拉索芦荟提取物、薄荷叶提取物和寡肽‑3。此外,该面膜还包括溶解液。该冻干粉中富含高生物活性的间充质干细胞提取物,具有补水保湿、美白淡斑以及抗衰老等功效。该冻干粉的制备方法不仅可以提供高生物活性的间充质干细胞提取物,还利用冻干技术将原料中的有效成分进行融合,以冻干粉的形式储存,确保原料中有效成分的长期保存。
Description
技术领域
本申请涉及护肤品技术领域,具体而言,涉及一种冻干粉、制备方法和面膜。
背景技术
由于人面部表皮干细胞的减少,再生能力降低,表皮细胞的死亡脱落、功能减退等,随着日积月累皮肤出现斑点、皱纹增多等衰老的迹象。随着现在经济的发展,美容行业也是迎来了长足发展,各种抗衰产品受到广大爱美人士的青睐。
面膜是美容保养品的一种载体,面膜敷在脸上时,面膜里的水分和营养成分能把肌肤紧致包融,让水充分渗透入肌肤表皮的角质层,同时营养性或功效性物质会充分渗透进入皮肤的深层,软化皮肤,增强肌肤弹性,促进毛细血管扩张,清除毛孔的灰尘、化学污染物质、细菌和油脂污垢,加速皮肤深层的血液微循环,增强表皮各层细胞的活力,消除肌肤疲劳、衰老,维持年轻态。
目前市场上的面膜产品种类繁多,功效各异,但大多含有防腐剂、人工色素、香精香料等对皮肤有不良影响的化工成分。且随着生物技术领域的发展,含有生物活性因子的化妆品在美容界倍受青睐。细胞因子和活性物质添加到美容化妆品,不仅具有保湿美白功效,还能够修复受损皮肤,消除皮肤皱纹,收缩毛孔,改善面色。目前也有一些对干细胞培养上清进行纯化及干细胞裂解的报道,但都效果不佳,例如上清液中的糖分残留,培养上清中含有胎牛血清,浓缩过程细胞因子活性下降等问题,导致修复效果不佳,使用安全性低等问题。
发明内容
本申请的目的在于提供一种冻干粉,该冻干粉中富含高生物活性的间充质干细胞提取物,具有补水保湿、美白淡斑以及抗衰老等功效。
本申请的另一目的在于提供一种冻干粉的制备方法,该制备方法不仅可以提供高生物活性的间充质干细胞提取物,还利用冻干技术将原料中的有效成分进行融合,以冻干粉的形式储存,确保原料中有效成分的保留。
本申请的另一目的在于提供一种面膜,包括上述冻干粉和溶解液,冻干粉和溶解液相互配合使用,效果更佳,可以最大化发挥该冻干粉的使用效果。
本申请解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
一方面,本申请实施例提供冻干粉,由以下重量份的原料制备而成:水60-80份、甘露糖醇1-5份、寡肽-12-6份、动物脐带提取物2-10份、超氧化物歧化酶1-5份、香叶天竺葵提取物1-4份、苦参根提取物1-4份、金黄洋甘菊1-3份、马齿苋提取物1-3份、肌肽0.5-2份、库拉索芦荟提取物1-3份、薄荷叶提取物1-3份、寡肽-32-5份。
另一方面,本申请实施例提供一种面膜,包括冻干粉和溶解液,所述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水60-90份、丙二醇2-8份、寡肽-12-8份、透明质酸钠3-6份、寡肽-32-8份和香叶天竺葵提取物3-8份。
另一方面,本申请实施例提供一种冻干粉的制备方法,其包括以下步骤:
植块接种:将脐带预处理后得到的华通氏胶剪碎成1-1.5mm3的组织块,将所述组织块于无血清培养基中进行培养;
原代培养:植块接种后1-2天,补充无血清培养基,第4-5天半量更换无血清培养基;
传代培养:原代细胞长至传代标准后,加入胰蛋白酶进行消化,终止消化后离心,保留细胞沉淀,所述细胞沉淀用无血清培养基重悬后,再进行接种培养,得到间充质干细胞;
收集培养上清液:待细胞生长至融合度≥80%时,收集所述间充质干细胞的培养上清液,过滤除菌,得滤液;
冻干粉的制备:将所述滤液与其他原料按照相应比例混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的无菌过滤器过滤除菌,真空冷冻干燥后即得所述冻干粉。
相对于现有技术,本申请的实施例至少具有如下优点或有益效果:
本申请提供的一种冻干粉,该冻干粉中富含高生物活性的脐带间充质干细胞提取物,可修复皮肤细胞,改进皮肤细胞代谢,清除衰老细胞,激活体内干细胞,从而使皮肤细胞得以修复和激活,使机体由内而外变得年轻化,脐带间充质干细胞具有高效修复力,可修复皮肤组织细胞,不仅具有美白抗衰老的功效,还可以改善皮肤和气色,达到真正意义上的抗衰老目的。甘露糖醇不仅具有补水保湿的功效,将其加入冻干粉中,还能够让冻干粉的活性被更好的保留。寡肽-1能够促进皮肤色素和有害残余物的代谢,有效提亮肤色;促进表皮基底细胞分裂,使表皮细胞年轻化,还具有高效的修复能力和淡斑功效,可修复痘印、红血丝等;寡肽-3不仅可以延缓衰老预防皱纹,还可以修复皮肤成纤维细胞和干细胞,寡肽-3与脐带间充质干细胞提取物相互配合,可以使提取物更大程度的发挥作用,让受损的细胞组织得到修复,并且从底层对成纤维细胞进行修复,具有1+1>2的效果。超氧化物歧化酶具有抗氧化和抗衰老的作用,能够清除对机体有害的超氧阴离子自由基(O2-),从而维持机体代谢平衡。香叶天竺葵提取物具有强效抑菌作用,可抑制大部分细菌、真菌在皮肤上的滋生,还可以抗氧化和清除自由基,减少皱纹的生长,使皮肤变得红润而有活力,将香叶天竺葵提取物加入面膜中,对于易过敏的肤质也可以适用。苦参根提取物可促进胶原蛋白产生以及成纤维细胞的增殖,具有抗衰老以及保湿的功效,还具有抗菌消炎的功效。马齿苋提取物和金黄洋甘菊具有十分好的舒敏和修复敏感型肌肤的功能,同时还具有抗炎杀菌和抗氧化的作用,可预防皮肤炎症,将金黄洋甘菊和马齿苋提取物加入进面膜中,还可以提高水分进入肌肤的比例,增强补水保湿的效果。肌肽可以预防皮肤衰老,也能美白肌肤。同时肌肽能防止自由基对皮肤的损伤,使细胞膜处于稳定状态。改善皮肤抵抗力,尽快排出皮肤中的代谢物,促进受损皮肤尽快恢复。此外还可以净化皮肤,保持皮肤处于正常状态。库拉索芦荟提取物具有良好的补水保湿功效,而且其含有然蒽醌甙、芦荟多糖、芦荟多肽以及氨基酸等多种有效成分,具有显著的美白淡斑、抗衰老以及创伤修复等功能。薄荷叶提取物富含薄荷叶黄烷酮,对敏感肌肤可以有效缓解皮肤过敏的症状,具有消炎、镇痛和舒缓的功效。还可以调节肌肤微循环,抑制炎症症状,使肌肤感觉清新柔和。本申请提供的冻干粉原料中,香叶天竺葵提取物、马齿苋提取物、金黄洋甘菊和拉索芦荟提取物都具有抑菌作用,且成分安全,温和,对敏感肌同样适用,适用于多种肤质,受众广。
本申请提供的一种面膜,包括冻干粉和溶解液,冻干粉和溶解液相互配合使用,效果更佳,可以最大化发挥该冻干粉的使用效果。
本申请提供的一种冻干粉的制备方法,该制备方法不仅可以提供高生物活性的间充质干细胞提取物,还利用冻干技术将原料中的有效成分进行融合,以冻干粉的形式储存,确保原料中有效成分的保留。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要说明的是,在不冲突的情况下,本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本申请。
一种冻干粉,由以下重量份的原料制备而成:水60-80份、甘露糖醇1-5份、寡肽-12-6份、动物脐带提取物2-10份、超氧化物歧化酶1-5份、香叶天竺葵提取物1-4份、苦参根提取物1-4份、金黄洋甘菊1-3份、马齿苋提取物1-3份、肌肽0.5-2份、库拉索芦荟提取物1-3份、薄荷叶提取物1-3份、寡肽-32-5份。
脐带间充质干细胞具有极强的增殖分化能力,可以分化成不同的体细胞以代替衰老死亡的机体细胞;还具有分泌功能,可以产生许多生物活性分子,大量科学研究表明,间充质干细胞至少分泌免疫调节因子(HGF、LIF)、趋化因子(RANTES、SDF-lα、fractalkine、MIP-lα、MCP-1、MCP-2)、支持祖细胞的营养因子(IL-6、FGF-2、PDGF-AA、PDGF-BB、EGF)、血管再生因子(VEGF165、FGF-2、PDGF-AA、PDGF-BB、EGF)、抑制疤痕因子(HGF、FGF-2)、抗凋亡因子(VEGF165、FGF-2、HGF)、伤口愈合相关因子(IL-6、IL-8、TGF-βl、MCP-1、VEGF、GM-CSF)、TIMP-1)、各型胶原蛋白(I、II、III、IV型胶原蛋白)以及各种溶菌酶等。
甘露糖醇是六元醇,属于多元醇类,其由于羟基比较多,可以与水以氢键的形式结合,有一定的锁水保湿功效,往往添加在护肤品中还能起到保湿的作用。甘露糖醇具有极大的安全性,风险系数为1,比较安全,可以放心使用,对于孕妇一般没有影响,甘露糖醇没有致痘性。
寡肽-1(EGF),又名表皮细胞生长因子,能够促进皮肤色素和有害残余物的代谢,有效提亮肤色;促进表皮基底细胞分裂,使表皮细胞年轻化;能够促进皮肤水循环,使肌肤充满弹性与张力;它对受损皮肤、敏感皮肤、创伤皮肤具有显著的修护作用;还可减轻紫外线对皮肤的伤害,消除晒后皮肤的肌因突变,预防光老化;减少黑色素在皮肤当中的沉淀,对于已经形成的黑色素也能够起到淡化作用,对痘印、色斑等都有不错的效果。
寡肽-3的主要作用是修复纤维细胞和干细胞,因为它用在皮肤上会让干细胞分化,让受损的细胞组织得到修复,并且从底层对纤维细胞进行修复。此外它也有抗衰老作用,可起到延缓衰老预防皱纹的效果。
超氧化物歧化酶具有抗氧化和抗衰老的作用,能够清除对机体有害的超氧阴离子自由基(O2-),从而维持机体代谢平衡。
香叶天竺葵提取物在护肤品里主要作用是抗菌剂,抗氧化剂,风险系数为,比较安全,可以放心使用,对于孕妇一般没有影响。天竺葵还可以抵抗几十种细菌、真菌在皮肤上的生长,帮助肌肤免受感染;对一些自由基有一定的消除作用,具有一定的抗氧化性,还可以使皮肤变得红润而有活力。
苦参根提取物可促进胶原蛋白产生以及成纤维细胞的增殖,具有抗衰老以及保湿的功效,还具有抗菌消炎的功效。其在护肤品里主要作用是抗氧化剂,皮肤调理剂,抗炎剂,风险系数为1,比较安全,可以放心使用,对于孕妇一般没有影响,苦参根提取物没有致痘性。
金黄洋甘菊具有十分好的舒敏和修复敏感型肌肤的功能,可缩小红血丝和调整肤色不均。洋甘菊精油燥热舒爽,对于均衡皮肤表面油脂排泄,还可以提高水分进入肌肤的比例,增强补水保湿的效果。
马齿苋提取物具有广谱的抗菌性,又有消炎的作用,可防止皮肤湿疹、过敏性皮炎和接触性皮炎等皮肤病;马齿苋提取物还有良好的氧自由基清楚能力,它有着明显的抗氧化作用;马齿苋有良好的皮肤保湿性;马齿苋有杀菌消炎的效果,因此可以帮助痘痘肌消炎杀菌,可以加快伤口愈合的能力。
肌肽可以预防皮肤衰老,也能美白肌肤。同时肌肽能防止自由基对皮肤的损伤,使细胞膜处于稳定状态。改善皮肤抵抗力,尽快排出皮肤中的代谢物,促进受损皮肤尽快恢复。此外还可以净化皮肤,保持皮肤处于正常状态
库拉索芦荟提取物具有以下功效:
1、补水保湿:芦荟在向皮肤深层渗透的同时能够在皮肤的表层形成一层很薄的透气膜,阻挡皮肤水分的蒸发,渗入皮肤后的多糖成分、氨基酸类物质具有非常明显的补水、滋润和柔化效果,增强角质层的吸附性和结水性,使失去弹性的皮肤和干燥的角质层迅速达到活化、水分充盈的效果,恢复皮肤原有的光滑、柔润和良好的弹性。
2、美白淡斑:芦荟中天然蒽醌甙是天然的美白加防晒成分,能有效阻止紫外线刺激酪氨酸酶的活性,防止黑色素的生成及沉着,因而具有良好的提亮肤色、去除黄气、美白效果。芦荟含有人体无法自身合成的氨基酸和维生素,能有效稳定黑色素活性酶。能分解抑制酶的活性,促使已形成的黑色素快速分解、代谢,阻止黑色素再度形成,达到美白祛斑的效果。
3、抗衰老:以芦荟多糖类为核心的超氧化歧化酶(SOD),具有清除自由基,防止细胞老化,治疗慢性过敏的重要作用。并使细胞加速分裂,赋活,能够迅速渗入人体肌肤的基底层;同时促进皮肤细胞的活化,延缓细胞老化,恢复皮肤的弹性和紧致。
4、创伤修复:芦荟多肽以及氨基酸具有消炎、止痛、修复皮肤创伤的作用,还可以治疗皮肤炎症,对粉刺、雀斑、痤疮以及烫伤、刀伤、蚊虫叮咬等亦有很好的愈合疗效。天然粘多糖具有吸收和隔绝紫外线作用,能够阻隔太阳光线包括红外线、可见光和紫外线。芦荟多糖具有晒后修复的功能,通过芦荟多糖能够促进组织皮层纤维的增长,提供细胞养分,帮助细胞修复,促进细胞新陈代谢,有效修复晒伤的肌肤。
5、消炎愈合、祛痘去粉刺:天然芦荟多肽可增强人体肌肤的抵抗能力,深层清洁皮肤,抑制细菌生长,对皮肤炎症,尤其对青春痘、粉刺有很好的疗效。芦荟提取物能迅速修复受损肌肤细胞,疏通闭塞毛孔,有效祛痘及修复祛痘后残留的疤痕。芦荟酊是抗菌性很强的物质,能杀灭真菌、霉菌、细菌、病毒等病菌,抑制和消灭病原体的发育繁殖。
薄荷叶提取物富含薄荷叶黄烷酮,对敏感肌肤可以有效缓解皮肤过敏的症状,具有消炎、镇痛和舒缓的功效。还可以调节肌肤微循环,抑制炎症症状,使肌肤感觉清新柔和。
在本申请的一些实施例中,上述冻干粉由以下重量份的原料制备而成:水70-80份、甘露糖醇2-4份、寡肽-12-4份、动物脐带提取物5-10份、超氧化物歧化酶3-5份、香叶天竺葵提取物2-4份、苦参根提取物2-4份、金黄洋甘菊1-2份、马齿苋提取物1-2份、肌肽0.5-1份、库拉索芦荟提取物1-2份、薄荷叶提取物1-2份、寡肽-32-4份。
在本申请的一些实施例中,上述冻干粉由以下重量份的原料制备而成:水75份、甘露糖醇2份、寡肽-12份、动物脐带提取物8份、超氧化物歧化酶3份、香叶天竺葵提取物2份、苦参根提取物2份、金黄洋甘菊1份、马齿苋提取物1份、肌肽0.5份、库拉索芦荟提取物1份、薄荷叶提取物1份、寡肽-32份。
在本申请的一些实施例中,上述冻干粉的制备方法包括以下步骤:
动物脐带提取物的制备:上述动物脐带提取物为脐带间充质干细胞,上述脐带间充质干细胞的制备包括以下步骤:
植块接种:将脐带预处理后得到的华通氏胶剪碎成1-1.5mm3的组织块,将上述组织块于无血清培养基中进行培养;
原代培养:植块接种后1-2天,补充无血清培养基,第4-5天半量更换无血清培养基;
传代培养:原代细胞长至传代标准后,加入胰蛋白酶进行消化,终止消化后离心,保留细胞沉淀,上述细胞沉淀用无血清培养基重悬后,再进行接种培养,得到间充质干细胞;
收集培养上清液:待细胞生长至融合度≥80%时,收集上述间充质干细胞的培养上清液,过滤除菌,得滤液。
冻干粉的制备:将上述滤液与其他原料按照相应比例混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的无菌过滤器过滤除菌,真空冷冻干燥后即得上述冻干粉。
经过对比,脐带组织块体积为1-1.5mm3,细胞的生长速度更快,组织块太大,细胞长出速度慢;组织块太小,操作时间长,脐带组织在外暴露时间长,不利于后续细胞生长。第4-5天半量更换无血清培养基,因为这个时候细胞还没有生长出来,全量换液会引起组织块漂浮,不利于细胞长出,而半量更换无血清培养基更有利于细胞的生长。
在本申请的一些实施例中,上述传代培养步骤中,接种的密度为1.2×104-1.5×104cells/cm2。组织块均匀铺满培养皿面积的50%-60%即可,组织块铺的太多,会影响细胞的长出,并影响整根脐带细胞的得率;组织块铺的太少,细胞生长相对缓慢。细胞生长具有聚集作用,细胞接种密度太低,细胞生长速度会减慢,影响细胞生长,同时细胞活力容易下降;细胞密度太大,细胞传代一次细胞得率太低,影响细胞整体数量。因此,在此接种密度范围内为合适。
在本申请的一些实施例中,上述胰蛋白酶的加入量为3-5ml,上述消化的时间为0.5-1.0min。胰蛋白酶具有消化细胞的作用,但使用量一定要控制在合适的量,满足刚好能细胞消化完细胞即可。胰蛋白酶量太少,不够铺满整个培养皿或培养皿,不利于细胞的消化;胰蛋白酶量太大,会导致消化速度太快,细胞可能发生损伤,同时增加胰蛋白酶的成本和终止消化的培养液的成本。经过长期细胞培养发现,细胞消化时间太长,细胞的活性和活率都会相应的下降,在此时间范围内为合适。消化液加到培养皿里铺满瓶底后,轻拍培养皿,细胞很快脱落,如果消化时间太长,细胞自然脱落的话,细胞的整体状态,增殖速度都会下降,传代后死亡率也会增多。
一种面膜,包括溶解液和上述冻干粉,上述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水60-90份、丙二醇2-8份、寡肽-12-8份、透明质酸钠3-6份、寡肽-32-8份和香叶天竺葵提取物3-8份。
在本申请的一些实施例中,上述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水70-75份、丙二醇4-8份、寡肽-12-6份、透明质酸钠1-3份、寡肽-32-6份、香叶天竺葵提取物1-3份。
在本申请的一些实施例中,上述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水70份、丙二醇8份、寡肽-16份、透明质酸钠5份、寡肽-36份和香叶天竺葵提取物5份。
在本申请的一些实施例中,上述溶解液的制备方法为,将所有原料按照相应比例混合,搅拌,均质,静置,过滤除菌后即得上述溶解液。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
1、动物脐带提取物(脐带间充质干细胞)的制备:
脐带预处理:取新生儿脐带,将脐带剪成不超过10cm的小段,挤出残留的血液,将脐带段转入新的培养皿中,加入0.9%的生理盐水清洗;
去血管:取脐带段至弯盘或培养皿中,用止血钳夹住一端横截面端部组织,用另一把止血钳夹住外壁,将其撕脱开来,同时去除暴露的2根动脉和1根静脉,用生理盐水清洗至表面没有血液,如有清理不干净的地方,直接将此部分剪掉,弃用,再将剩余的华通氏胶剪碎,得到体积为1.5mm3的组织块;
植块接种:将上述组织块加入无血清培养基中,得到组织混悬液,将3ml上述组织混悬液加入到60cm2培养皿中,摇匀,于37℃,5%CO2培养箱中培养,每根脐带接种7个60cm2培养皿;
原代培养:植块接种后1天,每瓶补充5ml无血清培养基,第4天将培养皿中一半的无血清培养基进行换新;在培养至第12天左右,可以开始准备取样进行显微镜观察,50%以上的组织块周围爬出细胞且局部融合度在80%以上时,可以考虑收集组织,进行细胞传代及组织再植;若没有达到要求,可根据实际情况间隔1天或者几个小时再次进行取样观察,直至达到上述要求时开始进行细胞收获或者进行再植;培养期间,尽量减少移动培养皿;
再植:取上述原代培养中带有脐带组织块的60cm2培养皿,晃动培养皿,使组织块从瓶底脱落,将其倒入50ml离心管中,离心(400g,5min)弃上清,将组织块重新接种于新的60cm2培养皿中,每个60cm2培养皿加入5ml无血清培养基,于37℃,5%CO2培养箱中培养;
传代培养:去除培养皿中的组织块后,向60cm2培养皿中加入3ml0.25%胰蛋白酶进行消化,消化的时间为1.0min,再加入5ml无血清培养基终止消化,拍打培养皿两侧,使细胞脱落,得到细胞悬液,离心(400g,5min),保留细胞沉淀,细胞沉淀用无血清培养基重悬,平均分装到5个75cm2培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养,其接种的密度为1.3×104cells/cm2。
收集培养上清液:镜下观察,细胞生长至融合度80%或以上时,收集P3-P8代间充质干细胞的培养上清液,采用0.22μm的滤膜过滤除菌,得滤液,真空冷冻干燥,即得动物脐带提取物。
2、冻干粉的制备:取8g动物脐带提取物、75g水、2g甘露糖醇、2g寡肽-1、3g超氧化物歧化酶、2g香叶天竺葵提取物、2g苦参根提取物、1g金黄洋甘菊、1g马齿苋提取物、0.5g肌肽、1g库拉索芦荟提取物、1g薄荷叶提取物和2g寡肽-3混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,真空度1Pa,冷冻温度-80℃,抽真空时间为18h,即得所述冻干粉。
3、溶解液的制备:将70g水、8g丙二醇、6g寡肽-1、5g透明质酸钠、6g寡肽-3和5g香叶天竺葵提取物混合,搅拌,均质,静置30min,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,即得溶解液。
实施例2
本实施例与实施例1基本相同,区别在于:1、接种的密度为1.2×104cells/cm2;2、胰蛋白酶的加入量为5ml,消化的时间为0.5min;3、冻干粉的制备:取5g动物脐带提取物、68g水、3g甘露糖醇、4g寡肽-1、3g超氧化物歧化酶、3g香叶天竺葵提取物、3g苦参根提取物、2g金黄洋甘菊、2g马齿苋提取物、1g肌肽、1g库拉索芦荟提取物、2g薄荷叶提取物和3g寡肽-3混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,真空度1Pa,冷冻温度-80℃,抽真空时间为18h,即得所述冻干粉;4、溶解液的制备:将70g水、8g丙二醇、8g寡肽-1、4g透明质酸钠、8g寡肽-3和1g香叶天竺葵提取物混合,搅拌,均质,静置30min,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,即得溶解液。
实施例3
本实施例与实施例1基本相同,区别在于:1、接种的密度为1.5×104cells/cm2;2、消化的时间为0.8min;3、冻干粉的制备:取10g动物脐带提取物、60g水、5g甘露糖醇、2g寡肽-1、1g超氧化物歧化酶、4g香叶天竺葵提取物、4g苦参根提取物、3g金黄洋甘菊、1g马齿苋提取物、0.5g肌肽、3g库拉索芦荟提取物、1g薄荷叶提取物和5g寡肽-3混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,真空度1Pa,冷冻温度-80℃,抽真空时间为18h,即得所述冻干粉;4、溶解液的制备:将60g水、8g丙二醇、8g寡肽-1、6g透明质酸钠、8g寡肽-3和8g香叶天竺葵提取物混合,搅拌,均质,静置30min,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,即得溶解液。
实施例4
本实施例与实施例1基本相同,区别在于:1、接种的密度为1.4×104cells/cm2;2、胰蛋白酶的加入量为4ml,所述消化的时间为0.7min;3、冻干粉的制备:取2g动物脐带提取物、66g水、2g甘露糖醇、2g寡肽-1、2g超氧化物歧化酶、4g香叶天竺葵提取物、4g苦参根提取物、3g金黄洋甘菊、3g马齿苋提取物、1g肌肽、3g库拉索芦荟提取物、3g薄荷叶提取物和5g寡肽-3混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,真空度1Pa,冷冻温度-80℃,抽真空时间为18h,即得所述冻干粉;4、溶解液的制备:将90g水、2g丙二醇、2g寡肽-1、3g透明质酸钠、2g寡肽-3和3g香叶天竺葵提取物混合,搅拌,均质,静置30min,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,即得溶解液。
实施例5
本实施例与实施例1基本相同,区别在于:1、胰蛋白酶的加入量为3.5ml,所述消化的时间为0.8min;2、溶解液的制备:将78g水、5g丙二醇、5g寡肽-1、5g透明质酸钠、6g寡肽-3和6g香叶天竺葵提取物混合,搅拌,均质,静置30min,然后采用0.22μm的滤膜过滤除菌,即得溶解液。
对比例
本对比例与实施例1基本相同,区别在于面膜中不加入动物脐带提取物组分。
效果例
征集60名志愿者,年龄30-58岁,平均分为6组,每组志愿者每天晚上洁面后分别使用实施例1-实施例5以及对比例中所制备的面膜,坚持使用2个月,使用前以及使用后检测并记录志愿者们的皮肤状态,得到的各项指标如表1所示。
面膜使用方法:50mg冻干粉与3ml溶解液充分混合,于每晚洁面后均匀涂抹于面部,吸收即可。
注意事项:冻干粉调配后,请置于冰箱冷藏室(2-8℃)冷藏储存,并于2日内使用完毕。
表1指标测评结果
如表1中所示,志愿者使用本申请提供的冻干粉后,皮肤水分增加,油份减少;色素积累减少;皮肤弹性增加;胶原蛋白含量增加;皮肤未出现过敏情况;皮肤状态稳定;皮肤有保持一定的光洁度。其中,使用实施例1所制备的面膜使用效果最好,上述指标反馈结果为最优。对比例中未加入动物脐带提取物(脐带间充质干细胞),可以看出,各项指标与实施例中加入脐带间充质干细胞相比较优势降低,可见在本申请提供的面膜配方中,脐带间充质干细胞对于皮肤的修复、改善作用明显。受试者未出现过敏情况,表明该面膜无刺激性组分,成分温和不刺激,使用安全。综上,上述实验数据结果表明,本申请提供的面膜具有显著的美白淡斑、补水保湿效果,还可以给肌肤快速补充胶原蛋白,减少皮肤皱纹的产生,同时保证皮肤具有一定的光洁度。
综上所述,本申请实施例提供的一种冻干粉,该冻干粉中富含高生物活性的脐带间充质干细胞提取物,可修复皮肤细胞,改进皮肤细胞代谢,清除衰老细胞,激活体内干细胞,从而使皮肤细胞得以修复和激活,使机体由内而外变得年轻化,脐带间充质干细胞具有高效修复力,可修复皮肤组织细胞,不仅具有美白抗衰老的功效,还可以改善皮肤和气色,达到真正意义上的抗衰老目的。甘露糖醇不仅具有补水保湿的功效,将其加入冻干粉中,还能够让冻干粉的活性被更好的保留。寡肽-1能够促进皮肤色素和有害残余物的代谢,有效提亮肤色;促进表皮基底细胞分裂,使表皮细胞年轻化,还具有高效的修复能力和淡斑功效,可修复痘印、红血丝等;寡肽-3不仅可以延缓衰老预防皱纹,还可以修复皮肤成纤维细胞和干细胞,寡肽-3与脐带间充质干细胞提取物相互配合,可以使提取物更大程度的发挥作用,让受损的细胞组织得到修复,并且从底层对成纤维细胞进行修复,具有1+1>2的效果。超氧化物歧化酶具有抗氧化和抗衰老的作用,能够清除对机体有害的超氧阴离子自由基(O2-),从而维持机体代谢平衡。香叶天竺葵提取物具有强效抑菌作用,可抑制大部分细菌、真菌在皮肤上的滋生,还可以抗氧化和清除自由基,减少皱纹的生长,使皮肤变得红润而有活力,将香叶天竺葵提取物加入面膜中,对于易过敏的肤质也可以适用。苦参根提取物可促进胶原蛋白产生以及成纤维细胞的增殖,具有抗衰老以及保湿的功效,还具有抗菌消炎的功效。马齿苋提取物和金黄洋甘菊具有十分好的舒敏和修复敏感型肌肤的功能,同时还具有抗炎杀菌和抗氧化的作用,可预防皮肤炎症,将金黄洋甘菊和马齿苋提取物加入进面膜中,还可以提高水分进入肌肤的比例,增强补水保湿的效果。肌肽可以预防皮肤衰老,也能美白肌肤。同时肌肽能防止自由基对皮肤的损伤,使细胞膜处于稳定状态。改善皮肤抵抗力,尽快排出皮肤中的代谢物,促进受损皮肤尽快恢复。此外还可以净化皮肤,保持皮肤处于正常状态。库拉索芦荟提取物具有良好的补水保湿功效,而且其含有然蒽醌甙、芦荟多糖、芦荟多肽以及氨基酸等多种有效成分,具有显著的美白淡斑、抗衰老以及创伤修复等功能。薄荷叶提取物富含薄荷叶黄烷酮,对敏感肌肤可以有效缓解皮肤过敏的症状,具有消炎、镇痛和舒缓的功效。还可以调节肌肤微循环,抑制炎症症状,使肌肤感觉清新柔和。本申请提供的冻干粉原料中,香叶天竺葵提取物、马齿苋提取物、金黄洋甘菊和拉索芦荟提取物都具有抑菌作用,且成分安全,温和,对敏感肌同样适用,适用于多种肤质,受众广。
本申请提供的一种面膜,包括冻干粉和溶解液,冻干粉和溶解液相互配合使用,效果更佳,可以最大化发挥该冻干粉的使用效果。
本申请提供的一种冻干粉的制备方法,该制备方法不仅可以提供高生物活性的间充质干细胞,还利用冻干技术将原料中的有效成分进行融合,以冻干粉的形式储存,确保原料中有效成分的保留。
以上所描述的实施例是本申请一部分实施例,而不是全部的实施例。本申请的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本申请的范围,而是仅仅表示本申请的选定实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。
Claims (10)
1.一种冻干粉,其特征在于,由以下重量份的原料制备而成:水60-80份、甘露糖醇1-5份、寡肽-12-6份、动物脐带提取物2-10份、超氧化物歧化酶1-5份、香叶天竺葵提取物1-4份、苦参根提取物1-4份、金黄洋甘菊1-3份、马齿苋提取物1-3份、肌肽0.5-2份、库拉索芦荟提取物1-3份、薄荷叶提取物1-3份和寡肽-32-5份。
2.根据权利要求1所述的一种冻干粉,其特征在于,由以下重量份的原料制备而成:水70-80份、甘露糖醇2-4份、寡肽-12-4份、动物脐带提取物5-10份、超氧化物歧化酶3-5份、香叶天竺葵提取物2-4份、苦参根提取物2-4份、金黄洋甘菊1-2份、马齿苋提取物1-2份、肌肽0.5-1份、库拉索芦荟提取物1-2份、薄荷叶提取物1-2份和寡肽-32-4份。
3.根据权利要求2所述的一种冻干粉,其特征在于,由以下重量份的原料制备而成:水75份、甘露糖醇2份、寡肽-12份、动物脐带提取物8份、超氧化物歧化酶3份、香叶天竺葵提取物2份、苦参根提取物2份、金黄洋甘菊1份、马齿苋提取物1份、肌肽0.5份、库拉索芦荟提取物1份、薄荷叶提取物1份和寡肽-32份。
4.一种如权利要求1-3任一项所述的冻干粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
植块接种:将脐带预处理后得到的华通氏胶剪碎成1-1.5mm3的组织块,将所述组织块于无血清培养基中进行培养;
原代培养:植块接种后1-2天,补充无血清培养基,第4-5天半量更换无血清培养基;
传代培养:原代细胞长至传代标准后,加入胰蛋白酶进行消化,终止消化后离心,保留细胞沉淀,所述细胞沉淀用无血清培养基重悬后,再进行接种培养,得到间充质干细胞;
收集培养上清液:待细胞生长至融合度≥80%时,收集所述间充质干细胞的培养上清液,过滤除菌,得滤液,再将所述滤液进行真空冷冻干燥,即得动物脐带提取物;
冻干粉的制备:将所述动物脐带提取物与其他原料按照相应比例混合,搅拌,均质,静置,然后采用0.22μm的无菌过滤器过滤除菌,真空冷冻干燥后即得所述冻干粉。
5.根据权利要求4所述的一种冻干粉的制备方法,其特征在于,所述传代培养步骤中,接种的密度为1.2×104-1.5×104cells/cm2。
6.根据权利要求4所述的一种冻干粉的制备方法,其特征在于,所述胰蛋白酶的加入量为3-5ml,所述消化的时间为0.5-1.0min。
7.一种面膜,其特征在于,包括溶解液和如权利要求1-3任一项所述的冻干粉,所述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水60-90份、丙二醇2-8份、寡肽-12-8份、透明质酸钠3-6份、寡肽-32-8份和香叶天竺葵提取物3-8份。
8.根据权利要求7所述的一种面膜,其特征在于,所述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水70-75份、丙二醇4-8份、寡肽-12-6份、透明质酸钠3-5份、寡肽-32-6份和香叶天竺葵提取物3-5份。
9.根据权利要求8所述的一种面膜,其特征在于,所述溶解液由以下重量份的原料制备而成:水70份、丙二醇8份、寡肽-16份、透明质酸钠5份、寡肽-36份和香叶天竺葵提取物5份。
10.根据权利要求7-9任一项所述的一种面膜,其特征在于,所述溶解液的制备方法为,将所有原料按照相应比例混合,搅拌,均质,静置,过滤除菌后即得所述溶解液。
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