CN113116801B

CN113116801B - 一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN113116801B
Application number: CN201911365528.8A
Authority: CN
Inventors: 崔志伟; 刘建建; 张燕; 潘存才; 李琳; 庄心蕊
Original assignee: Bloomage Biotech Co Ltd; Shandong Bloomage Hyinc Biopharm Co Ltd
Current assignee: Bloomage Biotech Co Ltd
Priority date: 2019-12-26
Filing date: 2019-12-26
Publication date: 2023-01-24
Anticipated expiration: 2039-12-26
Also published as: CN113116801A

Abstract

本发明公开了一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物及其制备方法，本发明参考中药名方“四君子汤”、“四物汤”配方，以当归、白术、白芍、白茯苓、川穹、炙甘草、阿胶中药材为主要成分，辅以亚麻油、胶原低聚肽粉、维生素C、山茱萸提取物、透明质酸、葡萄糖等多种益肤营养成分，共奏健脾益气、补血调血之功效。经小鼠试验证明，使用该组合物可有效保持小鼠皮肤中水分含量，增加皮肤弹性，且无任何应激反应，能够起到改善肤色暗黄、粗糙、缺乏弹性等皮肤亚健康状态的作用。此外，该组合物采用特殊的方法制备，充分提取和保留了原料中的有效成分，使各成分更稳定的发挥作用，且易于携带，方便使用。

Description

一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物及其制备方法，具体涉及一种能够改善肤色暗黄、粗糙、缺乏弹性等皮肤亚健康表现的组合物及其制备方法。

背景技术

皮肤亚健康(Sub-health)状态是指皮肤处于正常和病态之间的第三状态，主要症状表现为皮肤越加粗糙，皱纹逐渐增多，肤色不均匀、灰暗发黄等，此状态下的皮肤多无明显异常，但细胞的新陈代谢、微循环等功能已出现明显障碍，主要是由内部失调造成的外象，如果不加保养、调理，使之达到平衡状态，就极可能使肤质进一步恶化，逐渐转变为皮肤内环境紊乱的病态皮肤。根据世界卫生组织1997年的一项调查结果显示：在黄种人中，皮肤处于健康状态的不到10％，处于病态的超过20％，而处于皮肤亚健康状态者则高达70％。因此，保持良好的皮肤状态具有重要的健康价值。

人体是一个统一的整体，这是中医学的基本理论之一，千百年来，该理论影响着大众的养生保健，尤其对美容驻颜方向有着更深刻的指导意义。中医学理论认为，“其病在外，其源在内”，任何脏腑功能的失常都会潜在影响外在美貌，尤以肝脾、气血影响较大。肝具有疏通全身气血、津液，调畅情志的作用，肝功能的正常，则可以保证气血充盛，面部得气血之养则表现红润。脾主运化，依赖脾气得作用，将气血津液运动到全身，营养全身组织器官。因此，调肝理气、健脾益气对美容养颜有着重要得意义。中医理论得以实践，离不开中药得支持，传统中药养颜名方如玉蓉散、莹肌如玉散等，在百年实践应用中得到有效验证。越来越多的传统名方被重新开发，与某些天然物质结合应用，开发功能性新产品。随着传统中医药文化的逐渐普及应用，现代人更易于接受传统中医药所主张的“有诸内者，形于诸外”理论，打造由内而外的美。因此，研发一款真正合理有效的产品，具有重要的应用价值和意义。

众所周知，胶原蛋白具有美容、保健的功效，胶原蛋白可使皮肤表皮(皮肤最外层)变得丰满，同时还可保持皮肤的湿润度，促进皮肤发生水合作用，因此，其在改善皮肤弹性、维持肌肤与组织器官形态、结构方面扮演着重要的作用，人们通过口服胶原蛋白的方式可更好的促进皮肤组织的生长。另外，研究表明，某些维生素类的摄入可在一定程度上助攻胶原蛋白发挥作用。

透明质酸(HA)是一种黏性多糖物质，由于其含有多个羟基和羧基，能够与水分子形成氢键，有强大的保水作用。HA广泛应用于化妆品行业，用于增加皮肤表面HA含量，但其效果是局部性的。口服HA则是全面补充内源性HA的含量，使细胞活化，发挥全身作用，与化妆品局部使用具有明显的不同。因此，补充易吸收HA(低分子量HA)对延缓皮肤衰老具有重要的作用。

目前用于改善皮肤亚健康状态的产品数量较少，大部分产品以纯中药类原料制成，含有复合维生素及其他营养物质的产品鲜有可见。CN 107970293A的专利公开了一种改善皮肤亚健康状态的中药组合物，但该组合物以纯中药为主，并未添加其它有效组分，且该中药提取物用于添加到化妆品中进行外敷，不可内服，效果大打折扣。CN 104489700A的专利中公开了一种具有改善皮肤水分、弹性和除皱功能的组合物，该组合物的主要成分是肽类，辅以透明质酸和中药提取物，但该专利并未详细描述各类剂型的制备工艺，且制剂工艺是否可行及产品能否保持稳定有待考究。另外，这两篇专利中所提及的中药组合物从配伍上搭配是否合理有待商榷。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物，该组合物包括中药提取物以及益肤营养成分，可有效改善肤色暗黄、粗糙、缺乏弹性等皮肤亚健康状态。

本发明的另一目的是提供上述组合物的制备方法，该方法根据各成分的特点，采用不同的方式进行制备，充分提取保留原料有效成分，使各成分更稳定的发挥作用，且易于携带，方便使用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物，该组合物包括以下重量百分含量的有效成分：中药提取物35％-70％，亚麻油0.1％-5％、胶原低聚肽粉1％-10％、维生素C1％-5％、山茱萸提取物1％-5％、透明质酸1％-10％、葡萄糖10％-30％；所述中药提取物由以下重量份的原料制成：当归10-30份、白术10-30份、白茯苓5-20份、白芍5-20份、川穹1-5份、炙甘草1-5份、阿胶1-5份。

本发明中药提取物是参考传统中药名方“四君子汤”、“四物汤”而得，保证了药材配伍的合理性，且药性温和。将中药提取物与胶原低聚肽粉、维生素C、透明质酸、山茱萸提取物等对皮肤有益的营养成分复配，维生素C以及透明质酸同时加入能促进胶原蛋白活性及再生，起到了协同作用，同时减轻了细胞的氧化反应，利于保持皮肤细胞的活性，各成分协同搭配共奏健脾益气、补血调血、改善皮肤细胞活性、提高皮肤抗氧化能力之功效，从内部调理身体状况，消除内因，从而调理皮肤状态，起到改善皮肤暗黄、粗糙、缺乏弹性的作用。

优选的，上述组合物包括以下重量百分含量的有效成分：中药提取物60％，亚麻油5％、胶原低聚肽粉10％、维生素C 4％、山茱萸提取物4％、透明质酸7％、葡萄糖10％；所述中药提取物由以下重量份的原料制成：当归20份、白术20份、白茯苓10份、白芍10份、川穹5份、炙甘草2份、阿胶4份。

进一步的，上述组合物中，所述透明质酸可以是任意分子量的对皮肤有营养作用的食用级透明质酸，优选为具有抗衰老作用的透明质酸。更优选的，所述透明质酸为分子量200-300kDa的透明质酸和分子量400-600kDa的透明质酸的混合物，其中，分子量200-300kDa的透明质酸占透明质酸总质量的60％-80％，分子量400-600kDa的透明质酸占透明质酸总质量的20％-40％。

进一步的，所述胶原低聚肽粉是以深海鱼皮或深海鱼骨为原料制得，其蛋白质含量在98％以上，分子量在1000道尔顿左右。

进一步的，所述山茱萸提取物指从山茱萸的成熟果实中提取的有效成分，其所含有的苹果酸和祛斑素成分，具有显著的抑制氧化脂质和延缓皮肤衰老的作用。

本发明上述组合物可以选择合适的药用辅料制成各种剂型，例如片剂、口服液、颗粒剂、粉剂等剂型。但是片剂因为各原料的物理性质差异大(例如少量亚麻油很难均匀混合于各辅料中、透明质酸质地轻难以混和)，难以成型；口服液为液体制剂不利于储存，且有效成分不稳定，长期储存易分层。因此，优选为颗粒剂或粉剂，这两种剂型携带和使用方便，有效成分可以长期稳定存在。

本发明提供了一种优选的用于改善皮肤亚健康状态的组合物的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)中药提取物的制备：

a.将当归、川穹、白术粉碎后利用水蒸气蒸馏法提取挥发油；

b.将上述药渣、白茯苓、白芍和炙甘草用水煎煮提取三次，合并提取液，将提取液减压浓缩至原体积的0.3-0.4倍，然后加入乙醇或其水溶液至乙醇体积含量为40％-70％，冷藏静置后减压浓缩至当归、川穹、白术、白茯苓、白芍和炙甘草总重量的1.1-1.3倍，得浓缩液；

c.将阿胶用水烊化，将烊化后的阿胶、上述挥发油和浓缩液混合均匀，所得混合物进行喷雾干燥，得中药提取物；

(2)将维生素C与胶原低聚肽粉混合均匀，加入枸橼酸，然后将所得混合物加入浓度为4-6wt％的羟丙基甲基纤维素水溶液中，再加入亚麻油混合均匀，所得混合物进行制粒，得颗粒A；

(3)将山茱萸提取物、透明质酸、步骤(1)的中药提取物、葡萄糖混合均匀，加入体积分数90％-95％的乙醇水溶液进行制粒，得颗粒B；

(4)将颗粒A和颗粒B混合均匀，得用于改善皮肤亚健康状态的组合物。

进一步的，上述步骤a中，水蒸气蒸馏法采用现有技术中报道的常规水蒸气蒸馏法即可。

进一步的，上述步骤b中，每次加水煎煮提取时，水的用量为原料药材质量的8-10倍，第一次和第二次煎煮的时间为2-2.5h，第三次煎煮的时间为1-1.5h。优选的，在煎煮前，先将药材用水浸泡一段时间，一般为30-50min。

进一步的，上述步骤b中，冷藏静置45-50h。

进一步的，上述步骤(2)中，将维生素C、胶原低聚肽粉、亚麻油混合单独制粒，其中胶原低聚肽粉具有提高维生素C稳定性的作用，此外枸橼酸为抗氧化剂，可同胶原低聚钛粉协同作用，保证维生素C的稳定性。将亚麻油加入羟丙基甲基纤维素水溶液中，可借助羟丙基甲基纤维素水溶液均匀的分布于颗粒中，解决其不易分散的难题。

进一步的，步骤(2)中，枸橼酸的量为维生素C与胶原低聚肽粉总质量的0.3％-0.6％。

本发明具有以下有益效果：

(1)相比其它专利文献中提及的药材搭配，本发明所选用的中药材参考自传统中药名方“四君子汤”、“四物汤”，保证了药材配伍的合理性，且药性温和。

(2)本发明将中药提取物与亚麻油、胶原低聚肽粉、维生素C、山茱萸提取物、透明质酸等益肤成分相配合，各成分搭配起到了协同作用，共奏健脾益气、补血调血之功效。其中，维生素C以及透明质酸能促进胶原蛋白活性及再生，同时减轻了细胞的氧化反应，利于保持皮肤细胞的活性。

(3)经小鼠试验证明，本发明组合物可有效保持小鼠皮肤中水分含量，增加皮肤弹性，且无任何应激反应，能够对皮肤暗黄、粗糙、缺乏弹性等亚健康状态起到很好的改善作用。

(4)本发明采用特殊的方法将组合物制成颗粒剂，克服了片剂成型难、口服液有效成分不稳定以及其它剂型制备成本高、耗时长等缺陷，作用成分得到有效保留，且易于携带，方便使用。

(5)本发明将维生素C、胶原低聚肽粉、亚麻油混合单独制粒，其中胶原低聚肽粉具有提高维生素C稳定性的作用，亚麻油可借助羟丙基甲基纤维素水溶液均匀的分布于颗粒中，解决其不易分散的难题。此外，枸橼酸作为抗氧化剂，可同胶原低聚钛粉协同作用，保证维生素C的稳定性。经后期稳定性考察，所得组合物颗粒剂经长期保存后外观形态未发生明显变化，且有效成分均保持稳定。

附图说明

图1小鼠皮肤亮度变化趋势图。

具体实施方式

本发明实施例所用中药材当归、白术、白茯苓、白芍、川穹、炙甘草、阿胶均购自于中国药材集团公司，符合中华人民共和国药典(2015版)标准，所使用的其他原料来源见下表1，本发明所用的仪器名称及厂家见表2。

表1物料原料及相关信息

原料名称	批号	厂家
			亚麻油	181023	郑州百思特食品添加剂有限公司
胶原低聚肽粉	110326004	中食都庆(山东)生物技术有限公司
			维生素C	201901101	上海味庆生物科技有限公司
山茱萸提取物	19020503	陕西鑫之康生物科技有限公司
			食用级透明质酸	1805282	华熙生物科技股份有限公司
羟丙基甲基纤维素(HPMC)	2018020409	北京沃尔德三维国际贸易有限公司
			葡萄糖	2019/03/15	河北科隆多生物科技有限公司

表2仪器设备相关信息

名称	型号	厂家
			恒温水浴锅	DK-S18	上海冉绘实业有限公司
循环水式真空泵	SHB-Ⅲ	郑州长城科工贸有限公司
			喷雾干燥机	YC-015	上海雅程技术有限公司
旋转蒸发仪	RE-3000C	上海亚荣生化仪器厂

实施例1

本发明组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)50％、亚麻油3％、胶原低聚肽粉7％、维生素C 4％、山茱萸提取物3％、透明质酸5％、葡萄糖28％。其中，中药提取物由质量比15:15:8:8:3:3:2的当归、白术、白茯苓、白芍、川穹、炙甘草、阿胶制成。透明质酸为分子量200-300kDa的透明质酸和分子量300-400kDa的透明质酸的混合物，以透明质酸总量100％计，分子量200-300kDa的透明质酸80％，分子量300-400kDa的透明质酸20％。

该组合物制备方法如下：

1)将当归、川穹、白术三味药材进行初步粉碎，然后利用水蒸气蒸馏法提取挥发油。

2)提取挥发油后的药渣和白茯苓、白芍和炙甘草混合，放入水中浸泡30min至透心，然后以水为溶媒进行煎煮提取，每次提取水的用量为药材质量的8倍，共煎煮三次，煎煮时间分别为2h、2h和1h，将三次所得滤液合并。

3)将提取液减压浓缩至约原体积的1/3量，滴加体积分数95％的乙醇进行醇沉，至药液含醇量为45体积％，常温下测定相对密度为1.15。将药液冷藏静止48h，后减压浓缩至约为药材总重量的1.2倍，得浓缩液。

4)将阿胶用水烊化，然后与步骤1)、3)制得的挥发油、浓缩液混合均匀，利用喷雾干燥机进行喷雾制粉，过80目筛，得中药提取物(雾化粉)。

5)将维生素C晶体粉碎，同胶原低聚肽粉混合均匀，过80目筛，加入维生素C和胶原低聚肽粉质量0.5％的枸橼酸，将混合物加入浓度5wt％的HPMC粘合剂水溶液中，再向水溶液中加入亚麻油，混合均匀后进行制粒，烘干得颗粒A。

6)将山茱萸提取物和透明质酸进行粉碎处理，过80目筛，然后同步骤4)的中药提取物、葡萄糖混合均匀，以体积分数95％的乙醇为润湿剂，混合均匀制成湿粒，过14目筛网，50-60℃下烘制4小时，得颗粒B。

7)将颗粒A与颗粒B混合均匀，即得最终的组合物颗粒剂。

实施例2

本发明组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)60％、亚麻油5％、胶原低聚肽粉10％、维生素C 4％、山茱萸提取物4％、透明质酸7％、葡萄糖10％。其中，中药提取物由质量比20:20:10:10:5:2:4的当归、白术、白茯苓、白芍、川穹、炙甘草、阿胶制成。透明质酸为分子量200-300kDa的透明质酸和分子量300-400kDa的透明质酸的混合物，以透明质酸总量100％计，分子量200-300kDa的透明质酸70％，分子量300-400kDa的透明质酸30％。

该组合物制备方法如下：

1)同实施例1。

2)同实施例1。

3)将提取液减压浓缩至约原体积的1/3量，滴加体积分数95％的乙醇进行醇沉，至药液含醇量为55体积％，常温下测定相对密度相对密度为1.3。将药液冷藏静止48h，后减压浓缩至约为药材总重量的1.2倍，得浓缩液。

4)同实施例1。

5)同实施例1。

6)同实施例1。

7)将颗粒A与颗粒B混合均匀，即得最终的组合物颗粒剂。

实施例3

本发明组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)55％、亚麻油2％、胶原低聚肽粉5％、维生素C5％、山茱萸提取物5％、透明质酸9％，葡萄糖19％。其中，中药提取物由质量比25:25:18:18:4:3:5的当归、白术、白茯苓、白芍、川穹、炙甘草、阿胶制成。透明质酸为分子量200-300kDa的透明质酸和分子量300-400kDa的透明质酸的混合物，以透明质酸总量100％计，分子量200-300kDa的透明质酸60％，分子量300-400kDa的透明质酸40％。

该组合物制备方法如下：

1)同实施例1。

2)同实施例1。

3)将提取液减压浓缩至约原体积的1/3量，滴加体积分数95％的乙醇进行醇沉，至药液含醇量为70体积％，常温下测得相对密度为1.43。将药液冷藏静止48h，后减压浓缩至约为药材总重量的1.2倍，得浓缩液。

4)同实施例1。

5)同实施例1。

6)同实施例1。

7)将颗粒A与颗粒B混合均匀，即得最终的组合物颗粒剂。

实施例4

本发明组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)35％、亚麻油5％、胶原低聚肽粉10％、维生素C5％、山茱萸提取物5％、透明质酸10％、葡萄糖30％。其中，中药提取物和透明质酸同实施例2。

该组合物制备方法同实施例2。

实施例5

本发明组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)70％、亚麻油1％、胶原低聚肽粉1％、维生素C1％、山茱萸提取物1％、透明质酸1％、葡萄糖25％。其中，中药提取物和透明质酸同实施例2。

该组合物制备方法同实施例2。

对比例1

组合物配方和制备方法同实施例2，不同的是：所用的透明质酸为分子量为200-300kDa的单一透明质酸。

对比例2

组合物配方如下(wt％)：中药提取物(雾化粉)70％、茶籽油1％、大豆肽粉1％、β-胡萝卜素1％、山茱萸提取物1％、透明质酸1％、葡萄糖25％。其中，中药提取物和透明质酸同实施例5。

该组合物制备方法同实施例5。

对比例3

组合物配方同实施例2。

制备方法如下：

1)中药提取物制备同实施例1。

2)将中药提取物、胶原低聚肽粉、维生素C、山茱萸提取物、透明质酸、葡萄糖混合均匀，粉碎过80目筛，将亚麻油与体积分数95％的乙醇混合作为润湿剂，混合均匀制成湿粒，过14目筛网，50-60℃下烘制4小时，得最终的组合物颗粒剂。

验证例1组合物稳定性验证

参考2014版《保健食品稳定性试验指导原则》，对上述实施例和对比例制得产品进行稳定性考察，各组合物产品均选用复合膜袋进行包装，5g/袋。将样品置于温度37±2℃、相对湿度RH75±5％的条件下进行加速实验，分别于0、1、2、3个月考察样品，考察指标及检测方法如下：

1)中药成分含量检测：选择甘草苷和甘草酸为指标成分，采用HPLC法测定，参考2015版《中国药典》一部中的“四君子颗粒”中的“含量测定”方法，对其检测条件稍加修改(流动相为乙腈：0.1％磷酸溶液，梯度洗脱，流速0.8mL/min，检测波长237nm)，分别于0、1、2、3个月进行取样考察。

2)维生素C含量检测：选用HPLC法进行测定。

色谱条件：色谱柱ODS C₁₈ 250㎜×4.6㎜×5um，流动相：90％甲醇+10％辛烷磺酸钠(三氯乙酸调节pH至4.0-4.3)；检测波长：230nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；进样量：10ul。

样品处理：称取样品1g，于棕色容量瓶中加蒸馏水定容至25mL，溶解混匀，超声5min，离心，取上清液经0.45um滤膜过滤，取续滤液，上机测定。样品需现测现处理。

3)颗粒性状及含水量检测

颗粒性状采用肉眼观察，包括颗粒颜色变化、是否结块；水分含量测定采用常压干燥法，即：清洗称量皿→烘至恒重→称取样品，称重(G1)→放入调好温度的烘箱(105℃)→烘1.5h→于干燥器冷却→称重→再烘0.5h→称至恒重(G2)(两次重量差不超过0.002g即为恒重)

计算：水分＝(G1－G2)/W

G1—烘干前称量皿和样品重量(g)

G2—烘干后称量皿和样品重量(g)

W—烘干前样品重量(g)

中药成分和维生素C含量检测结果如下表3所示：

表3不同组合物稳定性考察对比

由上表数据可以看出，各实施例及对比例下的组合物中药成分均保持相对稳定，未出现大幅度的变化。实施例1-5的组合物中，维生素C含量受长时间高温的影响，呈现出一定的下降趋势，但整体含量保持稳定，而对比例3中的维生素C含量则呈断崖式的下降，表明采用本发明方法将维生素C单独制粒有助于维持维生素C含量的稳定。

颗粒性状及含水量检测如下表4所示：

表4不同组合物颗粒形状及含水量考察

从上表可以看出，除对照组2外，其它组在1-3月内基本保持稳定，部分颜色发生变化以及轻微的结块现象，水分含量同初始值相比并未出现大幅度变化。

验证例2用于改善皮肤亚健康状态的组合物的药效学研究

2.1以实施例2为例，研究本发明组合物对小鼠皮肤状态的改变情况

所用样品：实施例2所制得的组合物颗粒剂，外观为褐色颗粒，易溶于水，人体口服推荐用量为5g/袋，1袋/次/日，将颗粒加适量蒸馏水溶解，配制浓度为20％、50％、80％的低、中、高给药组。

实验动物：实验小鼠购自山东省药科院安全评价中心，选取体重在18-22g之间的KM小鼠，SPF级，生长状况良好，表现活跃。

实验方法：小鼠按照体质量均衡法分为5组，分别为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组6只，雌雄分半。模型组及低、中、高剂量组小鼠分别于每日颈背皮下注射2％D-半乳糖200mg/kg，连续注射10d，正常组则注射同剂量的生理盐水。于第11d开始，低、中、高剂量组按照每日剂量(0.5mL/只)进行灌胃，灌胃实施例2样品溶液浓度分别为20％、50％、80％，每日一次，持续30d，正常组和模型组选用同剂量的注射用生理盐水进行灌胃。期间分别于灌胃第5d、10d、15d、20d、25d、30d检测小鼠皮肤亮度，实验完成后，将小鼠处死，检测小鼠皮肤中的水分、胶原蛋白含量。

为保证实验效果的真实有效性，所有实验小鼠分笼饲养(4只/笼)，雌雄各半，保持室内恒温25℃，饮用水选用注射级用水，饲料选用经过高温灭菌的专用小鼠饲料，实验期内均保证饲料和水源充足。

皮肤亮度检测采用法国Orion公司的GonioLux 4D皮肤光亮度测试仪进行测定，测定点选择背部中央的皮肤，选取3个位置点，每只小鼠测定位置点相同，测定时间选取下午16-17时，保持周围环境光亮度一致。在灌胃结束后，将小鼠处死，每只小鼠取背部皮肤的三个点进行水分含量的检测。胶原蛋白选用胶原蛋白ELISA试剂盒进行测定，每只小鼠皮肤分别选取3个点，严格按照使用说明书进行测定。

实验结果：

小鼠皮肤亮度检测结果如图1所示，从图中可以看出，模型组小鼠的皮肤亮度是显著低于正常组的，表明造模成功。灌胃低、中、高剂量的实验组小鼠的皮肤亮度在20d之前呈显著的上升趋势，20-30d之间略有放缓，当灌胃10-15d时，小鼠的皮肤亮度就已经高于正常组，这表明使用该组合物确实对小鼠的皮肤产生了有益的影响。

人体皮肤中80％都是由胶原蛋白组成，尤其以真皮层中含量最高，是构成结缔组织间质细胞胶原纤维的主要成分，Ⅰ型胶原蛋白占全部胶原蛋白含量的80％-90％左右。胶原蛋白与皮肤的皱纹的生成和衰老息息相关，胶原蛋白含量越高皮肤细胞活力越强，皮肤弹性越好。各组小鼠皮肤含水量和胶原蛋白含量如下表5所示：

表5实施例2产品对小鼠皮肤含水量及胶原蛋白含量的影响

组别	皮肤含水量(％)	胶原蛋白Ⅰ含量(mg/g)
			正常组	67.99±1.22	33.62±1.13
模型组	47.88±0.98*	21.65±1.21*
			低剂量组	53.27±0.77<sup>#</sup>	24.27±1.03<sup>#</sup>
中剂量组	59.11±1.32<sup>#</sup>	27.09±0.99<sup>#</sup>
			高剂量组	64.77±0.91<sup>#</sup>	33.51±1.16<sup>#</sup>

注：与正常组比较，*P<0.05；与模型组比较，^#P<0.05。

通过正常组和模型组的数据对比可以看出建模是成功的，模型组的皮肤含水量和胶原蛋白Ⅰ含量远低于正常组。低、中、高剂量的实验组处理下的小鼠中的皮肤含水量和胶原蛋白Ⅰ含量与模型组相比有明显提高，随着使用剂量的增加这种提高呈上升趋势，差异具有统计学意义(P<0.05)，这说明长期使用本发明组合物确实可以提高皮肤含水量和胶原蛋白含量。另外，在对本组合物进行实验的过程中，未发现小鼠出现活动异常等异常状况，说明本组合物对小鼠无毒、安全。

2.2其他实施例和对比例的组合物对小鼠皮肤状态的改变情况

所用样品：实施例1、3、4、5，对比例1-3的产品。将各实施例和对比例的组合物分别配成浓度为80wt％的水溶液，备用。

实验动物：同上述2.1。

实验方法：鼠按照体质量均衡法分为9组，分别为1个正常组、1个模型组和7个实验组，每组6只，雌雄分半。模型组及实验组分别于每日颈背皮下注射2％D-半乳糖200mg/kg，连续注射10d，正常组注射同剂量的生理盐水。于第11d开始，实验组按照每日剂量(0.5mL/只)进行灌胃，灌胃不同的组合物溶液，每日一次，持续30d，正常组和模型组选用同剂量的注射用生理盐水进行灌胃。检测第30d的小鼠皮肤亮度，并将小鼠处死，检测小鼠皮肤中的水分、胶原蛋白含量。

小鼠饲养条件、各检测指标及检测方法同上述2.1，结果如下表6所示。

表6不同组合物对小鼠皮肤亮度、含水量及胶原蛋白含量的影响

组别	皮肤亮度(cd/m<sup>2</sup>)	皮肤含水量(％)	胶原蛋白Ⅰ含量(mg/g)
				正常组	53.03±1.09	68.53±1.19	34.72±0.94
模型组	44.12±1.33	47.02±1.98	22.05±1.03
				实施例1组	69.24±0.86	57.28±0.98	28.74±0.81
实施例3组	61.35±0.74	53.95±0.77	24.88±0.99
				实施例4组	64.69±1.12	54.22±2.01	26.61±1.23
实施例5组	64.71±1.34	54.40±1.95	25.41±1.17
				对比例1组	72.21±1.55	61.33±1.47	31.03±1.25
对比例2组	59.55±2.09	49.31±1.36	21.52±2.26
				对比例3组	71.89±1.38	60.35±2.05	29.98±1.14

从上表可以看出：在使用其它实施例及对比例的产品满30d后，皮肤亮度、皮肤含水量和胶原蛋白含量均显著高于模型组，表明搭配使用各组分确实有助于改善小鼠皮肤亮度，增加皮肤含水量及胶原蛋白含量，且三项指标之间呈明显的正相关趋势。其中，对比例1、3的产品效果明显低于实施例2，对比例2的产品效果明显低于实施例5，这说明本发明组合物各成分之间起到了协同作用，本发明制备方法对产品性能有明显的提升作用。

从上述实验可以看出，本发明组合物确实具有改善肤色暗黄、粗糙、缺乏弹性等皮肤亚健康表现的功能，且按照特定的方法制备成颗粒剂可以有效保留作用成分，易于携带，方便使用，稳定性好。

Claims

1.一种用于改善皮肤亚健康状态的组合物，其特征是：包括以下重量百分含量的有效成分：中药提取物35%-70%，亚麻油0.1%-5%、胶原低聚肽粉1%-10%、维生素C 1%-5%、山茱萸提取物1%-5%、透明质酸1%-10%、葡萄糖10%-30%；所述中药提取物由以下重量份的原料制成：当归10-30份、白术10-30份、白茯苓5-20份、白芍5-20份、川穹1-5份、炙甘草1-5份、阿胶1-5份；所述透明质酸为分子量200-300 kDa的透明质酸和分子量400-600 kDa的透明质酸的混合物，分子量200-300 kDa的透明质酸占透明质酸总质量的60%-80%；

该组合物的制备方法包括以下步骤：

（1）中药提取物的制备：

b.将提取挥发油后的药渣、白茯苓、白芍和炙甘草用水煎煮提取三次，合并提取液，将提取液减压浓缩至原体积的0.3-0.4倍，然后加入乙醇或其水溶液至乙醇体积含量为40%-70%，冷藏静置后减压浓缩至当归、川穹、白术、白茯苓、白芍和炙甘草总重量的1.1-1.3倍，得浓缩液；

（2）将维生素C与胶原低聚肽粉混合均匀，加入枸橼酸，然后将所得混合物加入浓度为4-6wt%的羟丙基甲基纤维素水溶液中，再加入亚麻油混合均匀，所得混合物进行制粒，得颗粒A；

（3）将山茱萸提取物、透明质酸、步骤（1）的中药提取物、葡萄糖混合均匀，加入体积分数90%-95%的乙醇水溶液进行制粒，得颗粒B；

（4）将颗粒A和颗粒B混合均匀，得用于改善皮肤亚健康状态的组合物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征是：包括以下重量百分含量的有效成分：中药提取物60%，亚麻油5%、胶原低聚肽粉10%、维生素C 4%、山茱萸提取物4%、透明质酸7%、葡萄糖10%；所述中药提取物由以下重量份的原料制成：当归20份、白术20份、白茯苓10份、白芍10份、川穹5份、炙甘草2份、阿胶4份。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征是：胶原低聚肽粉以深海鱼皮或深海鱼骨为原料制得。

4.一种权利要求1-3中任一项所述的用于改善皮肤亚健康状态的组合物的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）中药提取物的制备：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是：步骤b中，每次加水煎煮提取时，水的用量为药材质量的8-10倍，第一次和第二次煎煮的时间为2-2.5h，第三次煎煮的时间为1-1.5h。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是：步骤b中，冷藏静置45-50h。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，枸橼酸的量为维生素C与胶原低聚肽粉总质量的0.3%-0.6%。