CN109260454A - 一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；甲组分为口服制剂，甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1‑2份、胶原蛋白肽4‑6份、中药提取物12‑15份、缓释凝胶1‑2份、去离子水10‑12份；乙组分为注射制剂，乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8‑12；甲、乙两个组分的质量之比为10:3‑4。本发明通过口服制剂以达到由内而外的美白、保湿、抗老化等，通过皮下注射，具有生物电位，吸引成纤维细胞进入而产生新的胶原蛋白，二者相辅相成，促进皮肤胶原蛋白生成，可有效用在抗衰老，滋润皮肤，抗皱，抗晦暗，创面愈合等方面。

Description

一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法及应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法及应用。
背景技术
皮肤真皮含有大约90％的胶原蛋白，因此，它具有支撑皮肤结构，提供细胞生存环境以及保湿的功能。众所周知，当皮肤受到某些特定外界影响，如紫外线照射，干燥时，胶原蛋白会丢失。此外也发现，当衰老和处于压力状态下时，皮肤中的胶原蛋白也会丢失。同时发现这些外界影响和/或衰老能引起皮肤成纤维细胞中胶原蛋白生成减少。
近年来，社会大众对身体皮肤保养越来越重视，一些化学药物，如自由基清除剂、细胞分化诱导剂、激素类等，可以调节胶原代谢，从而发挥延缓皮肤衰老的功效；还有一些中药成分，如红景天甙、丹参、枸杞、黄芩提取物等，也具有修复皮肤胶原的作用。这些研究多从增强机体抗氧化能力、改善皮肤微循环、增加成纤维细胞数量等方面进行。细胞外基质金属蛋白酶家族(Matrix Metallo proteinase，MMPs)对细胞外基质，尤其是胶原蛋白的降解是皮肤光老化的最根本原因。MMP-1是降解胶原蛋白的主要酶，紫外线辐射可以通过激活细胞信号转导通路诱导其表达增加。
除了每日护肤保养品的使用不可疏忽之外，通过搭配食用保健食品以达到由内而外的美白、保湿、抗老化等皮肤保养的风潮也渐崛起。许多实验已经证实，保养品与保健食品一起使用会有相辅相成的效果。
然而，目前市面上有许多宣称可增加皮肤胶原蛋白的保健食品，其分子量约为300,000道耳吞(Dalton)，由于胶原蛋白经食用也会如一般蛋白质经过肠胃的化过程，其实际作用于皮肤胶原蛋白的补充难以衡量，效果也难以显现于皮肤光泽上。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法及应用，所述组合物包括甲乙两个组分，甲组分为口服制剂，乙组分为注射制剂，通过口服制剂以达到由内而外的美白、保湿、抗老化等，通过皮下注射钙羟磷灰石颗粒会形成一个骨架，具有生物电位，吸引成纤维细胞进入而产生新的胶原蛋白，二者相辅相成，促进皮肤胶原蛋白生成，可有效用在抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等方面。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；
所述甲组分为口服制剂，所述甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1-2份、胶原蛋白肽4-6份、中药提取物12-15份、缓释凝胶1-2份、去离子水10-12份；
所述甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌15-18min，制得甲组分；
所述乙组分为注射制剂，所述乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8-12；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
所述甲、乙两个组分的质量之比为10:3-4。
进一步地，所述胶原蛋白肽由如下方法制成：
(1)将海参烘干制成海参粉末，将海参粉按料液比1g：7mL加入蒸馏水，置于100℃沸水浴中煎煮3-4h，弃掉残渣，取上清液，浓缩冻干，研磨成粉，得到胶原蛋白冻干粉；
(2)称取胶原蛋白冻干粉加入去离子水中，配制成浓度为3％胶原蛋白水溶液，调节pH至9.0，加入胶原蛋白水溶液质量1.8％的碱性蛋白酶，于60℃条件下酶解3h；
(3)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，调节溶液的pH至8.0，再加入胶原蛋白水溶液质量5％的胃蛋白酶，于45℃条件下酶解3h；
(4)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，10000g离心15min，收集上清液，喷雾干燥得到胶原蛋白肽。
进一步地，所述中药提取物由如下方法制备：
(1)将黄芪：黄精：葡萄籽：白术：透明质酸按50：35：45：18：2的质量比称取原料；
(2)将黄芪、黄精、葡萄籽和白术混合，加入10-12倍量蒸馏水浸泡4-5h，煎煮2次，每次50min，滤出药液，将药液加热浓缩至原体积的三分之一；
(3)再将透明质酸加入浓缩药液中，混合均匀，制得中药提取物。
进一步地，所述缓释凝胶由如下方法制备：
(1)称取4.5g壳聚糖粉末加入0.1mol/L的225mL乙酸溶液中，加热搅拌至完全溶解，随后加入3.72g盐酸盐，180r/min搅拌15min后加入3.15mL巯基乙酸，往体系通入氮气，在氮气保护下反应9h，反应结束后，8KD透析袋无氧水透析三天，每天三次换水，最后取透析液冷冻12h后冻干，得到巯基化壳聚糖；
(2)分别称取巯基化壳聚糖和羧甲基纤维素钠溶于蒸馏水，配制成浓度为10mg/mL的巯基化壳聚糖水溶液，50mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液，将巯基化壳聚糖水溶液和羧甲基纤维素钠溶液按照体积之比为5:2混合，加入虾青素，400r/min快速搅拌10-12min，离心脱泡后迅速转移至模具中静置成凝胶，制得缓释凝胶。
所述的促进皮肤胶原蛋白生成的组合物在改善、调理及/或修补皮肤中的应用。
本发明的有益效果：
(1)本发明的组合物包含胶原蛋白肽，海参胶原蛋白在碱性蛋白酶和胃蛋白酶作用下，被酶解为小分子物质，基本分布在5ku以下，且呈线性结构，具有很高的消化吸收性，被人体吸收后可以促使人皮肤表皮细胞和成纤维细胞增殖；再者，胶原蛋白肽能显著增加SOD和GSH-Px活性(SOD能促进超氧化阴离子转化成过氧化氢，GSH-Px能通过催化谷胱甘肽反应来抑制过氧化氢和脂质过氧化物的产生)，通过增强抗氧化酶活性来缓解皮肤的氧化应激，达到抗氧化作用；
(2)本发明的组合物包含中药提取物，其中，黄芪提取物具有清除自由基抗氧化的作用，可降低NO含量，提高SOD活性(SOD能促进超氧化阴离子转化成过氧化氢)，改善细胞凋亡，从而达到延缓衰老的效果；黄精提取物能升高SOD含量和谷氨酸含量，从而延缓细胞衰老；葡萄籽提取物(花青素)具有较好的抗氧化活性，可清除氧自由基以防止机体衰老；白术提取物能降低体内脂褐素含量；透明质酸能补充人体内透明质酸含量的增加，维持皮肤的水分；中药提取液能有效改善皮肤水分丢失、增加皮肤中胶原蛋白、透明质酸等物质；
(3)本发明的组合物包含缓释凝胶，虾青素具有强抗氧化性和广泛药用价值，能减少紫外线引起的皮肤损伤，改善皮肤胶原蛋白功能，有效延缓皮肤衰老；利用虾青素可跨越双层细胞膜的活性，可在保留或提高胶原蛋白多肽的促皮肤细胞增殖活性的同时，保留虾青素的全部或部分抗皮肤光老化活性，有效改善以不稳定性为代表的虾青素应用缺陷；巯基化壳聚糖的巯基与羧甲基纤维素钠碰撞发生点击反应，凝胶孔径结构呈现出三维网状结构，虾青素被包裹于凝胶孔内，使得虾青素具备良好的缓释性能，缓释凝胶具备优异的生物相容性，在水和附近组织之间可以实现良好的界面接触，允许药物直接传质到局部组织中，缓释凝胶可以作为药物释放载体留在体内，并随着时间的增长不断被基体降解吸收；
(4)本发明的组合物包括甲乙两个组分，甲组分为口服制剂，乙组分为注射制剂，通过口服制剂以达到由内而外的美白、保湿、抗老化等，通过皮下注射其颗粒会形成一个骨架，具有生物电位，吸引成纤维细胞进入而产生新的胶原蛋白，二者相辅相成，促进皮肤胶原蛋白生成，可有效用在抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等方面。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；
甲组分为口服制剂，甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1-2份、胶原蛋白肽4-6份、中药提取物12-15份、缓释凝胶1-2份、去离子水10-12份；
甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌15-18min，制得甲组分；
乙组分为注射制剂，乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8-12；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
甲、乙两个组分的质量之比为10:3-4；
胶原蛋白是由三个胶原蛋白单体结合形成的三股螺旋结构，在胶原蛋白单体的脯氨酸中，至少34.50％必须被羟基化来保证胶原蛋白的热稳定性，而维生素C是脯氨酰羟化酶的辅因子，可催化脯氨酸胜肽链羟基化的转译后修饰，促进胶原蛋白合成；
乙组分中的钙羟磷灰石注射入组织间隙后，其颗粒会形成一个骨架，骨架具有生物电位，吸引成纤维细胞进入而产生新的胶原蛋白，形成稳定的网状结构；
所述胶原蛋白肽由如下方法制成：
(1)将海参烘干制成海参粉末，将海参粉按料液比1g：7mL加入蒸馏水，置于100℃沸水浴中煎煮3-4h，弃掉残渣，取上清液，浓缩冻干，研磨成粉，得到胶原蛋白冻干粉；
(2)称取胶原蛋白冻干粉加入去离子水中，配制成浓度为3％胶原蛋白水溶液，调节pH至9.0，加入胶原蛋白水溶液质量1.8％的碱性蛋白酶，于60℃条件下酶解3h；
(3)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，调节溶液的pH至8.0，再加入胶原蛋白水溶液质量5％的胃蛋白酶，于45℃条件下酶解3h；
(4)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，10000g离心15min，收集上清液，喷雾干燥得到胶原蛋白肽；
海参胶原蛋白在碱性蛋白酶和胃蛋白酶作用下，被酶解为小分子物质，基本分布在5ku以下，且呈线性结构，具有很高的消化吸收性，被人体吸收后可以促使人皮肤表皮细胞和成纤维细胞增殖；再者，胶原蛋白肽能显著增加SOD和GSH-Px活性(SOD能促进超氧化阴离子转化成过氧化氢，GSH-Px能通过催化谷胱甘肽反应来抑制过氧化氢和脂质过氧化物的产生)，通过增强抗氧化酶活性来缓解皮肤的氧化应激，达到抗氧化作用；
所述中药提取物由如下方法制备：
(1)将黄芪：黄精：葡萄籽：白术：透明质酸按50：35：45：18：2的质量比称取原料；
(2)将黄芪、黄精、葡萄籽和白术混合，加入10-12倍量蒸馏水浸泡4-5h，煎煮2次，每次50min，滤出药液，将药液加热浓缩至原体积的三分之一；
(3)再将透明质酸加入浓缩药液中，混合均匀，制得中药提取物；
黄芪提取物具有清除自由基抗氧化的作用，可降低NO含量，提高SOD活性(SOD能促进超氧化阴离子转化成过氧化氢)，改善细胞凋亡，从而达到延缓衰老的效果；黄精提取物能升高SOD含量和谷氨酸含量，从而延缓细胞衰老；葡萄籽提取物(花青素)具有较好的抗氧化活性，可清除氧自由基以防止机体衰老；白术提取物能降低体内脂褐素含量；透明质酸能补充人体内透明质酸含量的增加，维持皮肤的水分；中药提取液能有效改善皮肤水分丢失、增加皮肤中胶原蛋白、透明质酸等物质；
所述缓释凝胶由如下方法制备：
(1)称取4.5g壳聚糖粉末加入0.1mol/L的225mL乙酸溶液中，加热搅拌至完全溶解，随后加入3.72g盐酸盐，180r/min搅拌15min后加入3.15mL巯基乙酸，往体系通入氮气，在氮气保护下反应9h，反应结束后，8KD透析袋无氧水透析三天，每天三次换水，最后取透析液冷冻12h后冻干，得到巯基化壳聚糖；
(2)分别称取巯基化壳聚糖和羧甲基纤维素钠溶于蒸馏水，配制成浓度为10mg/mL的巯基化壳聚糖水溶液，50mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液，将巯基化壳聚糖水溶液和羧甲基纤维素钠溶液按照体积之比为5:2混合，加入虾青素，400r/min快速搅拌10-12min，离心脱泡后迅速转移至模具中静置成凝胶，制得缓释凝胶；
虾青素具有强抗氧化性和广泛药用价值，能减少紫外线引起的皮肤损伤，改善皮肤胶原蛋白功能，有效延缓皮肤衰老；利用虾青素可跨越双层细胞膜的活性，可在保留或提高胶原蛋白多肽的促皮肤细胞增殖活性的同时，保留虾青素的全部或部分抗皮肤光老化活性，有效改善以不稳定性为代表的虾青素应用缺陷；巯基化壳聚糖的巯基与羧甲基纤维素钠碰撞发生点击反应，凝胶孔径结构呈现出三维网状结构，虾青素被包裹于凝胶孔内，使得虾青素具备良好的缓释性能，缓释凝胶具备优异的生物相容性，在水和附近组织之间可以实现良好的界面接触，允许药物直接传质到局部组织中，缓释凝胶可以作为药物释放载体留在体内，并随着时间的增长不断被基体降解吸收。
所述促进皮肤胶原蛋白生成的组合物在改善、调理及/或修补皮肤中的应用。
实施例1
一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；
甲组分为口服制剂，甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1份、胶原蛋白肽4份、中药提取物12份、缓释凝胶1份、去离子水10份；
甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌15min，制得甲组分；
乙组分为注射制剂，乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
甲、乙两个组分的质量之比为10:3。
实施例2
一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；
甲组分为口服制剂，甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1.5份、胶原蛋白肽5份、中药提取物13.5份、缓释凝胶1.5份、去离子水11份；
甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌16min，制得甲组分；
乙组分为注射制剂，乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:10；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
甲、乙两个组分的质量之比为10:3.5。
实施例3
一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，所述组合物包含甲、乙两个组分；
甲组分为口服制剂，甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 2份、胶原蛋白肽6份、中药提取物15份、缓释凝胶2份、去离子水12份；
甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌18min，制得甲组分；
乙组分为注射制剂，乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:12；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
甲、乙两个组分的质量之比为10:4。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

Claims (5)

1.一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，其特征在于，所述组合物包含甲、乙两个组分；
所述甲组分为口服制剂，所述甲组分包含如下重量份的原料：维生素C 1-2份、胶原蛋白肽4-6份、中药提取物12-15份、缓释凝胶1-2份、去离子水10-12份；
所述甲组分由如下方法制备：
按照重量份数将维生素C、胶原蛋白肽、中药提取物和缓释凝胶加入去离子水中，常温200r/min搅拌15-18min，制得甲组分；
所述乙组分为注射制剂，所述乙组分包括钙羟磷灰石和生理盐水，钙羟磷灰石和生理盐水的质量之比为1:8-12；
将钙羟磷灰石和生理盐水按照质量之比混合均匀，制得乙组分；
所述甲、乙两个组分的质量之比为10:3-4。
2.根据权利要求1所述的一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，其特征在于，所述胶原蛋白肽由如下方法制成：
(1)将海参烘干制成海参粉末，将海参粉按料液比1g：7mL加入蒸馏水，置于100℃沸水浴中煎煮3-4h，弃掉残渣，取上清液，浓缩冻干，研磨成粉，得到胶原蛋白冻干粉；
(2)称取胶原蛋白冻干粉加入去离子水中，配制成浓度为3％胶原蛋白水溶液，调节pH至9.0，加入胶原蛋白水溶液质量1.8％的碱性蛋白酶，于60℃条件下酶解3h；
(3)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，调节溶液的pH至8.0，再加入胶原蛋白水溶液质量5％的胃蛋白酶，于45℃条件下酶解3h；
(4)酶解结束后，沸水浴灭酶10min，待酶解液冷却后，10000g离心15min，收集上清液，喷雾干燥得到胶原蛋白肽。
3.根据权利要求1所述的一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，其特征在于，所述中药提取物由如下方法制备：
(1)将黄芪：黄精：葡萄籽：白术：透明质酸按50：35：45：18：2的质量比称取原料；
(2)将黄芪、黄精、葡萄籽和白术混合，加入10-12倍量蒸馏水浸泡4-5h，煎煮2次，每次50min，滤出药液，将药液加热浓缩至原体积的三分之一；
(3)再将透明质酸加入浓缩药液中，混合均匀，制得中药提取物。
4.根据权利要求1所述的一种促进皮肤胶原蛋白生成的组合物的制备方法，其特征在于，所述缓释凝胶由如下方法制备：
(1)称取4.5g壳聚糖粉末加入0.1mol/L的225mL乙酸溶液中，加热搅拌至完全溶解，随后加入3.72g盐酸盐，180r/min搅拌15min后加入3.15mL巯基乙酸，往体系通入氮气，在氮气保护下反应9h，反应结束后，8KD透析袋无氧水透析三天，每天三次换水，最后取透析液冷冻12h后冻干，得到巯基化壳聚糖；
(2)分别称取巯基化壳聚糖和羧甲基纤维素钠溶于蒸馏水，配制成浓度为10mg/mL的巯基化壳聚糖水溶液，50mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液，将巯基化壳聚糖水溶液和羧甲基纤维素钠溶液按照体积之比为5:2混合，加入虾青素，400r/min快速搅拌10-12min，离心脱泡后迅速转移至模具中静置成凝胶，制得缓释凝胶。
5.根据权利要求1所述的促进皮肤胶原蛋白生成的组合物在改善、调理及/或修补皮肤中的应用。
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