CN113080061A - 一种斑兰栽培方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种斑兰栽培方法，通过组织培养获得大量组培苗，再将组培苗接种到炼苗培养基中炼苗，提高组培苗的适应能力，减少移栽后的死亡率，并通过处理移栽区、调配栽培基质和带培养基移栽，为组培苗提供一个良好的生长环境，减少生长环境变化对组培苗刺激，并在移栽后通过喷洒营养液，为其提供充足的养分，提高组培苗移栽成活率；采用本发明的方法能够提高斑兰组培苗在应用到实际农业生产中的成活率，还可获得大量的优质斑兰，整个方法操作简单，易于推广，对斑兰的规模化生产具有重大意义。

Description

一种斑兰栽培方法
技术领域
本发明涉及植物栽培领域，特别涉及一种斑兰栽培方法。
背景技术
斑兰，学名香露兜(Pandanus amaryllifolius)，又名班兰、斑斓叶、香兰叶、斑兰叶、板兰叶、碧血树，为多年生草本植物，是露兜树科(Pandanaceae)唯一叶片具有香气的植物。斑兰叶味道尚佳，其汁液具有较强的抗氧化成分，因此具有消暑，清凉去火、安神、镇定及舒筋活络的功效，具有非常高的经济开发价值。斑兰的叶片中富含角鲨烯、亚油酸、草蒿脑和甾醇等活性成分，天然散发一种“粽子香味”，主要香气成分为2-乙酰-1-吡咯啉，与泰国香米的主要成分一致，具有增强细胞活力、加快新陈代谢、提高人体免疫力、抑制癌细胞生长等作用，主要用于食品饮料行业，比如制作蛋糕、饼干、清补凉、冰淇淋、糖果等，被誉为“东方人的香草”。斑兰叶片中的角鲨烯、亚油酸、草蒿脑和甾醇等活性成分越高，斑兰的品质越好，但现有技术中对如何提高斑兰中的叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉含量的研究较少。
斑兰粗生易种，耐阴蔽和高温，喜湿等特性，强光照射易造成植株萎蔫，影响植株健康生长，传统种植方法主要分为茎蔓扦插繁殖和根蘖苗繁殖，其中，茎蔓扦插繁殖的种苗批量生产困难，个体参差不齐，定植1～2年后株型散乱、产量降低，根蘖苗繁殖具有简单易行、性状稳定、可批量操作与繁殖速度快等优点。而组织快繁技术能够由一根母体组织发展出许多个体，极大地提高了斑兰的产量。
专利号CN111226792A的一种斑兰叶种苗的高通量繁育方法，公开了一种采用组培快繁技术培育出斑兰叶种苗的方法，实现斑兰叶的离体再生。但在实际生产中，组培苗的移栽成活率低，成活后的组培苗长势差，不利于规模化生产，推广难度大。因此提供一种斑兰苗移栽易成活，可以大面积推广，且能够获得优质斑兰的栽培方法是很有必要的。
发明内容
针对上述问题，本发明提出一种斑兰栽培方法。
本发明所述一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；将愈伤组织接种到分化培养基上诱导愈伤组织分化成丛生芽，待丛生芽长至2～3cm时，再将丛生芽接种到生根培养基上进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，密封培养5～10d，再让组培苗与空气接触，继续培养2～3d；
S4.移栽前处理：在移栽前10～15d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，在移栽前5～8d，灌溉移栽区的土壤，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠的混合物；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，每天浇水1～5次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，每天喷洒营养液直至斑兰成活，斑兰成活后进行常规管理。
进一步的，每升所述营养液包括以下成分：440～580mg硝酸钾、350～500mg磷酸铵、420～560mg硫酸镁、30～50mgNAA(萘乙酸)、360～550mg甘草酸二钾、600～650mg谷胱甘肽、300～480mg半胱氨酸、450～550mg赖氨酸、330～450mg苏氨酸、400～450mg酪氨酸。
进一步的，步骤S2中，愈伤组织诱导培养基为含有0.1～0.5mg/L2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的MS培养基；愈伤组织诱导培养条件为温度20～23℃，相对湿度50～75％的黑暗条件。
进一步的，步骤S2中，分化培养基为含有1.0～1.5mg/L KT(激动素)、0.5～1.0mg/LNAA的MS培养基；分化的培养条件为散射光照强度800～1000lux，光照时间5～8h，温度25～27℃，相对湿度60～80％。
进一步的，步骤S2中，生根培养基为含有1.0～1.5mg/L IBA(吲哚丁酸)、0.1～0.5mg/L NAA的MS培养基；生根培养条件为散射光照强度1000～1200lux，光照时间5～8h，温度25～30℃，相对湿度60～75％。
进一步的，步骤S3中，炼苗培养基为含有的2～5g/L活性炭、40～80mg/L氯化钠、4～5g/L蔗糖的1/2MS培养基；培养条件为散射光照强度1400～1800lux，光照时间6～10h，温度25～30℃，相对湿度60～75％；在MS培养基中添加活性炭、氯化钠和蔗糖，在炼苗期间可以强化组培苗的根系，再通过根系运输为叶片提供养分，结合适当的光照，促进合成活性成分。
进一步的，所述活性炭为采用营养液浸泡4～8h所得。
进一步的，步骤S4中，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为30～40cm×30～40cm。
进一步的，步骤S4中，灌溉为灌溉至土壤含水量60～80％。
进一步的，步骤S4中，沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠的重量比为(3～4.2):(0.3～0.5):1:(1.8～2):(0.2～0.5)；通过科学配比沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠，使栽培基质具有良好的透气性和保水性，为移栽后的组培苗提供养分和良好的生长环境。
进一步的，步骤S6中，移栽后5d内，浇水次数为3～5次，营养液的喷洒量为11～14L/亩/天，移栽6d后，浇水次数为1～2次，营养液的喷洒量为6～10L/亩/天。
进一步的，步骤S6中，移栽后的培养条件为遮阴度40～50％，温度25～30℃，相对湿度60～75％。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明一种斑兰栽培方法，通过组织培养获得大量组培苗，再将组培苗接种到炼苗培养基中炼苗，提高组培苗的适应能力，减少移栽后的死亡率，并通过处理移栽区、调配栽培基质和带培养基移栽，为组培苗提供一个良好的生长环境，减少生长环境变化对组培苗刺激，并在移栽后通过喷洒营养液，为其提供充足的养分，提高组培苗移栽成活率；采用本发明的方法能够提高斑兰组培苗在应用到实际农业生产中的成活率，还可获得大量的优质斑兰，整个方法操作简单，易于推广，对斑兰的规模化生产具有重大意义。
本发明根据斑兰叶的营养需求，科学配比硝酸钾、磷酸铵、硫酸镁、NAA、甘草酸二钾、谷胱甘肽、半胱氨酸、赖氨酸、苏氨酸和酪氨酸，使营养液在为斑兰适应新环境提供养分，改善斑兰生长状况的同时，提高组培苗的免疫力和适应能力，减少因生长环境变化引起的死亡，进一步提高组培苗移栽成活率。
本发明通过将沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠调配成栽培基质与炼苗培养基配合使用，为组培苗适应新环境提供一个适宜生长的缓冲环境，提高组培苗的移栽成活率，再结合营养液为组培苗提供充足的养分，促进斑兰合成活性成分，提高斑兰中的叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉含量，从而提高斑兰的经济价值。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的3g/L活性炭、50mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1500lux，光照时间8h，温度28℃，相对湿度70％的条件下密封培养8d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
实施例2
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.5mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度20℃，相对湿度50％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.0mg/L KT、0.5mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度1000lux，光照时间5h，温度25℃，相对湿度80％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.5mg/LIBA、0.5mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1200lux，光照时间8h，温度25℃，相对湿度75％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的2g/L活性炭、40mg/L氯化钠、5g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1800lux，光照时间6h，温度30℃，相对湿度75％的条件下密封培养10d，再让组培苗与空气接触，继续培养2d；所述活性炭为采用营养液浸泡8h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前15d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为40cm×40cm，在移栽前8d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量60％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3:0.5:1:2:0.2混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为50％，温度为25～30℃，相对湿度为60％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水3次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为11L/亩/天，移栽6d后，每天浇水1次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为6L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：580mg硝酸钾、500mg磷酸铵、560mg硫酸镁、50mgNAA、550mg甘草酸二钾、650mg谷胱甘肽、480mg半胱氨酸、550mg赖氨酸、450mg苏氨酸、450mg酪氨酸。
实施例3
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.1mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度23℃，相对湿度75％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.5mg/L KT、1.0mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度800lux，光照时间8h，温度27℃，相对湿度60％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.0mg/LIBA、0.5mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1000lux，光照时间5h，温度30℃，相对湿度60％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的5g/L活性炭、80mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1400lux，光照时间10h，温度25℃，相对湿度60％的条件下密封培养5d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡4h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前10d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为30cm×30cm，在移栽前5d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量60～80％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.5混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为40％，温度为25～30℃，相对湿度为75％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水5次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为14L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为10L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：440mg硝酸钾、350mg磷酸铵、420mg硫酸镁、30mgNAA、360mg甘草酸二钾、600mg谷胱甘肽、300mg半胱氨酸、450mg赖氨酸、330mg苏氨酸、400mg酪氨酸。
实施例4
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤：
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的3g/L活性炭、50mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度2000lux，光照时间10h，温度23℃，相对湿度60％的条件下密封培养12d，再让组培苗与空气接触，继续培养2d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
实施例5
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的2～5g/L活性炭、4～5g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1500lux，光照时间8h，温度28℃，相对湿度70％的条件下密封培养8d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
实施例6
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的3g/L活性炭、50mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1500lux，光照时间8h，温度28℃，相对湿度70％的条件下密封培养8d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为16L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
实施例7
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的3g/L活性炭、50mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1500lux，光照时间8h，温度28℃，相对湿度70％的条件下密封培养8d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg磷酸氢二钾、620mg谷胱甘肽、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
对比例1
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：待组培苗的高度为5～8cm时，将组培苗接种到炼苗培养基上，炼苗培养基为含有的3g/L活性炭、50mg/L氯化钠、4g/L蔗糖的1/2MS培养基，在散射光照强度1500lux，光照时间8h，温度28℃，相对湿度70％的条件下密封培养8d，再让组培苗与空气接触，继续培养3d；所述活性炭为采用营养液浸泡6h所得；
S4.移栽前处理：在移栽前14d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，在移栽前7d，灌溉移栽区的土壤，灌溉至土壤含水量70％，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、泥炭土和珍珠岩按重量比3.8:0.4:1:1.9混合所得；
S5.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S6.种植管理：移栽后，控制遮阴度为45％，温度为26～30℃，相对湿度为70％，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
对比例2
一种斑兰栽培方法，包括以下步骤:
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为含有0.2mg/L 2,4-D的MS培养基，在温度22℃，相对湿度60％的黑暗条件下进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；
再将愈伤组织接种到分化培养基上，分化培养基为含有1.3mg/L KT、0.8mg/LNAA的MS培养基，在散射光照强度900lux，光照时间6h，温度26℃，相对湿度65％的条件下诱导愈伤组织分化成丛生芽；
丛生芽长至2～3cm时，将丛生芽接种到生根培养基上，生根培养基为含有1.2mg/LIBA、0.3mg/L NAA的MS培养基，在散射光照强度1100lux，光照时间7h，温度28℃，相对湿度65％的条件下进行生根培养，得到组培苗；
S3.移栽前处理：在移栽前对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，种植穴的深度为6～8cm，半径为2～3cm，种植穴之间的间距为35cm×35cm，灌溉移栽区的土壤，以保持培养基质湿润而不积水为宜，在种植穴里放置栽培基质，栽培基质高度为低于地面2～3cm；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠按重量比3.8:0.4:1:1.9:0.3混合所得；
S4.移栽：选择生长状况良好的组培苗进行移栽，清洗组培苗的根部后将其移栽到种植穴中，组培苗的种植深度为1～2cm，在表面覆盖栽培基质，并轻轻按压压实；
S5.种植管理：移栽后，每天喷洒营养液直至斑兰成活，移栽后5d内，每天浇水4次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为12L/亩/天，移栽6d后，每天浇水2次，单次浇水量以保持培养基质湿润而不积水为宜，营养液的喷洒量为8L/亩/天，待斑兰成活后进行常规管理；
每升所述营养液包括以下成分：520mg硝酸钾、450mg磷酸铵、480mg硫酸镁、45mgNAA、430mg甘草酸二钾、620mg谷胱甘肽、350mg半胱氨酸、500mg赖氨酸、380mg苏氨酸、410mg酪氨酸。
试验例1成分含量检测
随机选取3株斑兰，采集植株无病虫害和无机械损伤的叶片，每株斑兰采集叶片的部位均为顶端至基部的第3叶位，将叶片混匀粉碎后，进行水蒸气蒸馏，收集馏分，测定馏分中叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉含量；
表1成分含量检测结果
Figure BDA0003011092080000151
Figure BDA0003011092080000161
由实验数据可知，本发明斑兰栽培方法种植的斑兰，其叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉含量较对比例种植的斑兰高，说明本发明栽培方法能够提高叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉的含量，从而获得优质斑兰。
与实施例1相比，对比例1未采用本发明栽培基质，其叶绿醇、亚油酸、角鲨烯和2-乙酰-1-吡咯啉含量低；对比例2未进行炼苗且移栽方法与本发明不同，其挥发性物质中各主要成分含量略有下降。
试验例2移栽效果测定
观察并记录实施例与对比例的斑兰组培苗移栽后的成活率及其长势，记录斑兰的产量，结果见表2；
长势分级标准
良好：生长状况正常植株数量百分比>95％，无烂苗，病害发生率≤3％；
一般：60％<生长状况正常植株数量百分比<95％，无烂苗，3％<病害发生率≤5％；
差：30％<生长缓慢植株数量百分比，有烂苗，5％<病害发生率；
表2移栽效果测定结果
组别 移栽成活率(％) 产量(kg/亩) 长势
实施例1 94.25 4680 良好
实施例2 93.14 4587 良好
实施例3 94.28 4573 良好
实施例4 89.49 4153 一般
实施例5 90.56 4256 一般
实施例6 87.45 3969 一般
实施例7 85.93 3821 一般
对比例1 82.23 3685 差
对比例2 82.59 3753 一般
由上表可知，采用本发明的栽培方法可以提高斑兰的移栽成活率，而且移栽后的斑兰免疫力好，病害发生率低，长势良好，产量高。
与实施例1相比，实施例4的炼苗条件与本发明不同，移栽后组培苗对环境的适应能力较差，长势一般，导致移栽成活率和产量较低；实施例5未采用本发明的炼苗培养基，移栽后组培苗对环境的长势一般，移栽成活率和产量略低；实施例6未营养液的喷洒量过多，斑兰的长势较差，在移栽后容易死亡，移栽成活率低；实施例7未采用本发明的营养液，在移栽后组培苗未能补足养分，长势一般，成活率和产量较低；对比例1未采用本发明栽培基质，该斑兰组培苗移栽后的生长基质未能提高充足的养分，导致组培苗的免疫力低，长势差，成活率和产量低；对比例2未进行炼苗且移栽方法与本发明不同，其种植的斑兰质量较差，移栽后的成活率低，产量低。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种斑兰栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.外植体的选择：取母株靠近根端、未木质化的茎段侧芽作为外植体，清洗、消毒灭菌；
S2.组培苗培养：将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；将愈伤组织接种到分化培养基上诱导愈伤组织分化成丛生芽，再将丛生芽接种到生根培养基上进行生根培养，得到组培苗；
S3.炼苗：将组培苗接种到炼苗培养基上，密封培养5～10d，再让组培苗与空气接触，继续培养2～3d；
S4.移栽前处理：在移栽前10～15d对移栽区进行消毒处理，挖种植穴，在移栽前5～8d，灌溉移栽区的土壤，在种植穴里放置栽培基质；所述栽培基质为沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠的混合物；
S5.移栽：将组培苗连同培养基移栽至种植穴中，在表面覆盖栽培基质；
S6.种植管理：移栽后，每天喷洒营养液直至斑兰成活，斑兰成活后进行常规管理。
2.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，每升所述营养液包括以下成分：440～580mg硝酸钾、350～500mg磷酸铵、420～560mg硫酸镁、30～50mgNAA、360～550mg甘草酸二钾、600～650mg谷胱甘肽、300～480mg半胱氨酸、450～550mg赖氨酸、330～450mg苏氨酸、400～450mg酪氨酸。
3.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S2中，愈伤组织诱导培养基为含有0.1～0.5mg/L 2,4-D的MS培养基；愈伤组织诱导培养条件为温度20～23℃，相对湿度50～75％的黑暗条件。
4.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S2中，分化培养基为含有1.0～1.5mg/L KT、0.5～1.0mg/L NAA的MS培养基；分化的培养条件为散射光照强度800～1000lux，光照时间5～8h，温度25～27℃，相对湿度60～80％。
5.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S2中，生根培养基为含有1.0～1.5mg/L IBA、0.1～0.5mg/L NAA的MS培养基；生根培养条件为散射光照强度1000～1200lux，光照时间5～8h，温度25～30℃，相对湿度60～75％。
6.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S3中，炼苗培养基为含有的2～5g/L活性炭、40～80mg/L氯化钠、4～5g/L蔗糖的1/2MS培养基；培养条件为散射光照强度1400～1800lux，光照时间6～10h，温度25～30℃，相对湿度60～75％。
7.如权利要求6所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，所述活性炭为采用营养液浸泡4～8h所得。
8.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S4中，沙砾土、水镁石粉、活性炭、珍珠岩和氯化钠的重量比为(3～4.2):(0.3～0.5):1:(1.8～2):(0.2～0.5)。
9.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S6中，移栽后5d内，浇水次数为3～5次，营养液的喷洒量为11～14L/亩/天，移栽6d后，浇水次数为1～2次，营养液的喷洒量为6～10L/亩/天。
10.如权利要求1所述的一种斑兰栽培方法，其特征在于，步骤S6中，移栽后的培养条件为遮阴度40～50％，温度25～30℃，相对湿度60～75％。
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